Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения



Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения
Пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения и способы применения

Владельцы патента RU 2638552:

Ф. ХОФФМАНН-ЛЯ РОШ АГ (CH)

Изобретение относится к пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидным соединениям Формулы I, включая их стереоизомеры, таутомеры и фармацевтически приемлемые соли, где X представляет собой тиазолильную, пиразинильную, пиридинильную или пиримидинильную группу, R1 и R2 имеют значения, указанные в формуле изобретения. Соединения формулы I полезны для ингибирования Pim киназы и для лечения расстройств, таких как рак, опосредованных Pim киназой. Раскрыты способы применения соединений Формулы I для in vitro, in situ и in vivo диагностики, предотвращения или лечения таких заболеваний в клетках млекопитающих или ассоциированных патологических состояний. 4 н. и 22 з.п. ф-лы, 4 табл., 528 пр.

 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

В целом, изобретение относится к пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидным соединениям для лечения расстройств, опосредованных ингибиторами киназ Pim (Pim-1, Pim-2 и/или Pim-3), таким образом, полезным в качестве терапевтических средств против рака. Изобретение также относится к композициям, более конкретно фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения, и способам их применения, по отдельности или в комбинации, для лечения различных форм рака и гиперпролиферативных заболеваний, а также способам применения соединений для in vitro, in situ и in vivo диагностики или лечения клеток млекопитающих, или связанных с ними патологических состояний.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Семейство Pim киназ состоит из трех родственных сериновых и треониновых протеинкиназ, кодируемых генами Pim-1, Pim-2 и Pim-3. Имена генов были получены из фразы провирусная инсерция, Молони (Proviral Insertion, Moloney), частые сайты интеграции для вируса мышиной лейкемии Молони при котором инсерции приводят к избыточной экспрессии Pim-киназ и либо de novo Т-клеточным лимфомам, или резкому усилению опухолей у трансгенных Мус-обусловленных моделей лимфомы (Cuypers et al. (1984) Cell, vol. 37 (1) pp. 141-50; Selten et al. (1985) EMBO J. vol. 4 (7) pp. 1793-8; van der Lugt et al. (1995) EMBO J. vol. 14 (11) pp. 2536-44; Mikkers et al. (2002) Nature Genetics, vol. 32 (1) pp. 153-9; van Lohuizen et al. (1991) Cell, vol. 65 (5) pp. 737-52). Эти эксперименты показывают синергизм с онкогеном с-Мус, и предполагают, что ингибирование киназы Pim может иметь терапевтический эффект.

Генетика мыши позволяет предположить, что антагонизм Pim киназы может обладать приемлемым профилем безопасности; Pim 1 -/-; Pim-2 -/-, Pim-3 -/- нокаутированные мыши остаются жизнеспособными, хотя немного меньше, чем дикого типа (Mikkers et al. (2004) Mol Cell Biol vol. 24 (13) pp. 6104-154). Три гена дают шесть изоформ белка, включая домен протеинкиназы, и, видимо, без распознаваемых регуляторных доменов. Все шесть изоформ являются конститутивно активными протеинкиназами, которым не требуются для активности посттрансляционные модификации, таким образом, Pim киназы регулируются в первую очередь на транскрипционном уровне (Qian et al. (2005) J Biol Chem, vol. 280 (7) pp. 6130-7). Экспрессия Pim киназ сильно индуцируется цитокинами и рецепторами факторов роста, также Pim киназы являются прямыми транскрипционными мишенями белков Stat, в том числе Stat3 и Stat5. Pim-1, например, необходима для gp130-опосредованного сигнала пролиферации Stat3 (Aksoy et al. (2007) Stem Cells, vol. 25 (12) pp. 2996-3004; Hirano et al. (2000) Oncogene vol. 19 (21) pp. 2548-56; Shirogane et al. (1999) Immunity vol. 11 (6) pp. 709-19).

Pim киназы функционируют в сигнальных путях клеточной пролиферации и выживания параллельно сигнальной оси PI3k/Akt/mTOR (Hammerman et al. (2005) Blood vol. 105 (11) pp. 4477-83). В самом деле, некоторые из целей фосфорилирования оси PI3K включая Bad и elF4E - ВР1 являются регуляторами клеточного роста и апоптоза, а также целями фосфорилирования киназ Pim (Fox et al. (2003) Genes Dev vol. 17 (15) pp. 1841-54; Macdonald et al. (2006) Cell Biol vol. 7 pp. 1; Aho et al. (2004) FEBS Letters vol. 571 (1-3) pp. 43-9; Tamburini et al. (2009) Blood vol. 114 (8) pp. 1618-27). Pim киназы могут влиять на выживаемость клеток, поскольку фосфорилирование Bad увеличивает Bcl-2 активность и, следовательно, способствует выживанию клеток. Кроме того, фосфорилирование elF4E-ВР1 посредством mTOR или Pim киназ вызывает супрессию elF4E, вызывая трансляцию мРНК и клеточный рост.Кроме того, было установлено, что Pim-1 способствует прогрессии клеточного цикла посредством фосфорилирования CDC25A, р21, и Cdc25C (Mochizuki et al. (1999) J Biol Chemvol. 274 (26) pp. 18659-66; Bachmann et al. (2006) Int J Biochem Cell Biol vol. 38 (3) pp. 430-43; Wang et al. (2002) Biochim Biophys Acta vol. 1593 (1) pp. 45-55).

Пим киназы показывают синергию в трансгенных мышиных моделях с с-Мус- обусловленными и Акт - обусловленными опухолями (Verbeek et al. (1991) Mol Cell Biol vol. 11 (2) pp. 1176-9; Allen et al. Oncogene (1997) vol. 15 (10) pp. 1133-41; Hammerman et al. (2005) Blood vol. 105 (11) pp. 4477-83). Pim киназы участвуют в трансформирующей активности онкогенов, определенных при остром миелоидном лейкозе (ОМЛ), включая Flt3-ITD, BCR-abl, и Tel-Jak2. Экспрессия этих онкогенов в BaF3 клетках приводит к повышению активности Pim-1 и Pim-2 экспрессии, в результате чего происходит ИЛ-3 независимый рост, и последующее ингибирование Pim приводит к апоптозу и остановке клеточного роста (Adam et al. (2006) Cancer Research 66(7): 3828-35). Сверхэкспрессия и нарушение регуляции Pim также было отмечено в качестве частого события при многих гематопоэтических опухолях, в том числе лейкемии и лимфоме (Amson et al. (1989) Proc Natl Acad Sci USA 86 (22):8857-61); Cohen et al. (2004) Leuk Lymphoma 45(5): 951-5; Hüttmann et al. (2006) Leukemia 20 (10): 1774-82), а также множественной миеломе (Claudio et al. (2002) Blood 100(6): 2175-86). Было показано, что Pim 1 сверхэкспрессируется и коррелирует с прогрессированием рака простаты (Cibull et al. (2006) J Clin Pathol 59(3): 285-8; Dhanasekaran et al. (2001) Nature vol. 412 (6849): 822-6) Экспресси Pim 1 увеличивается в мышиных моделях с прогрессированием заболевания (Kim et al. (2002) Proc Natl Acad Sci USA 99(5): 2884-9). Сообщалось, что Pim-1- наиболее высоко сверхэкспрессированная мРНК в подгруппе образцов простаты опухоли человека, которая обладает с-Мус-обусловленной генной меткой (Ellwood-Yen et al. (2003) Cancer Cell 4(3): 223-38). Также было показано, что Pim-3 сверхэкспрессируется и обладает функциональной ролью при раке поджелудочной железы и гепатоцеллюлярной карциноме (Li et al. (2006) Cancer Research 66(13): 6741-7; Fujii et al. (2005) Int J Cancer 114(2): 209-18).

Помимо онкологических лечебного и диагностического применения, Pim киназы могут играть важную роль в нормальном функционировании иммунной системы и ингибирование Pim может иметь терапевтическое значение для целого ряда различных иммунологических патологий, включая канцерогенез (Nawijn et al (2011) Nature Rev. 11: 23-34), воспаление, аутоиммунные состояния, аллергии, и подавление иммунитета при трансплантации органов (Aho et al. (2005) Immunology 116(1): 82-8).

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидным соединениям для лечения нарушений, опосредованных ингибиторами Pim киназы (Pim-1, Pim-2, и/или Pim-3) соединениям Формулы I.

Соединения Формулы I обладают следующей структурой:

где R2 выбран из структур:

где волнистая линия обозначает место присоединения и прерывистая линия обозначает возможную двойную связь;

Х выбран из структур:

и его стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры и фармацевтически приемлемые соли. Различные заместители, включая R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, и Х являются такими, как здесь определено.

Одним из аспектов настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая соединение Формулы I и фармацевтически приемлемый носитель, глидант, разбавитель или эксципиент. Фармацевтическая композиция может дополнительно содержать химиотерапевтическое средство.

Изобретение включает способ лечения заболевания или расстройства, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения Формулы I пациенту с заболеванием или расстройством, выбранным из рака, иммунных расстройств, сердечно-сосудистых заболеваний, вирусной инфекции, воспаления, нарушений метаболизма/эндокринной функции и неврологических расстройств, и опосредованных Pim киназой. Способ также включает введение дополнительного терапевтического средства, выбранного из химиотерапевтического средства, противовоспалительного средства, иммуномодулирующего средства, нейротропного фактора, средства для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, средства для лечения заболеваний печени, противовирусного средства, средства для лечения заболеваний крови, средства для лечения сахарного диабета, а также средства для лечения иммунодефицитных нарушений.

Настоящее изобретение включает применение соединения Формулы I при производстве лекарственного средства для лечения рака, иммунных расстройств, сердечно-сосудистых заболеваний, вирусной инфекции, воспаления, нарушений метаболизма/эндокринной функции и неврологических расстройств, где лекарственное средство опосредует Pim киназу.

Настоящее изобретение включает набор для лечения состояний, опосредованных Pim киназой, включающий: а) первую фармацевтическую композицию, содержащую соединение Формулы I; и b) инструкцию по применению.

Настоящее изобретение включает соединение Формулы I для применения в качестве лекарственного средства, и для применения при лечении заболевания или расстройства, выбранного из рака, иммунных расстройств, сердечнососудистых заболеваний, вирусной инфекции, воспаления, нарушений метаболизма/эндокринной функции и неврологических расстройств, и опосредованных Pim киназой.

Настоящее изобретение включает способы получения соединений Формулы I.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На Фиг. 1 показан иллюстративный синтез 4-аминопиразолового соединения 5 из нитро-1Н-пиразола 1.

На Фиг. 2 показан иллюстративный синтез 4-карбокси-тиазолов 11 из гидроксамидных соединений 6.

На Фиг. 3 показан иллюстративный синтез 2-замещенных, 4-карбокси-5-аминотиазолов 11 посредством С-2 бромирования 12 с последующим взаимодействием по Сузуки 13.

На Фиг. 4 показан иллюстративный синтез 5-азепанил-N-(пиразол-4-ил)тиазол-карбоксамидных соединений 17 полученных связыванием 4-амино,5-азепанил пиразоловых соединений 14 и 2-бром, 4-карбокси-5-аминотиазолов 11.

На Фиг. 5 показан иллюстративный синтез 6-амино-N-(пиразол-4-ил)пиридил-карбоксамидных соединений 21, полученных связыванием 4-амино,5-азепанил пиразоловых соединений 14 и 2-бром, 3-Вос-амино,6-карбокси-пиридиловых соединений 18.

На Фиг. 6 показан иллюстративный синтез 6-амино-N-(пиразол-4-ил)пиразин-карбоксамидных соединений 26 посредством связывания 4-амино,5-диазепанил пиразоловых соединений 22 и 2-бром,3-замещенных, 6-карбокси-5-аминопиразиниловых соединений 23.

На Фиг. 7 показан иллюстративный синтез 5-азидо-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепана 32 из 2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепина 27.

На Фиг. 8 показан иллюстративный синтез 5-Вос-амино-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепана 39 из 6,7-дигидро-1Н-азепин-3(2Н)-она 33.

На Фиг. 9 показан иллюстративный синтез 5-(4-азидо-1-фторциклогептил)-4-нитро-1Н-пиразола 45 из 4-нитро-1Н-пиразола 2.

На Фиг. 10 показан иллюстративный синтез 3-фтор-1-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-амина 52 из 5-хлор-4-нитро-1Н-пиразола 3.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ВОПЛОЩЕНИЙ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Далее будут раскрыты в деталях определенные воплощения изобретения, примеры которого проиллюстрированы в сопутствующих структурах и формулах. Несмотря на то, что изобретение будет описано в отношении перечисленных воплощений, подразумевается, что они не предназначены для ограничения изобретения этими воплощениями. Напротив, изобретение предназначено для того, чтобы охватить все альтернативы, модификации и эквиваленты, которые могут быть включены в объем настоящего изобретения как определено формулой изобретения. Квалифицированный в уровне техники специалист осознает множество способов и материалов, подобных или эквивалентных описанным в настоящем изобретении, которые могут использоваться в практике настоящего изобретения. Настоящее изобретение никоим образом не ограничено описанными способами и материалами. В случае, когда один или более из использованных литературных источников информации, патентов и подобных им материалов отличаются от или противоречат настоящему описанию, включая, но не ограничиваясь, раскрытыми терминами, использованием терминов, описанными методиками и т.п., толкование согласно настоящему изобретению является основным. Если не определено иначе, все технические и научные термины, используемые здесь, имеют то же значение, обычно понимаемое специалистом в области техники, к которой относится данное изобретение. Несмотря на то, что способы и материалы, подобные или эквивалентные описанным здесь, можно использовать на практике или при тестировании изобретения подходящие способы и материалы описаны ниже. Все публикации, патентные заявки, патенты и другие ссылки, упомянутые здесь, включены в качестве ссылки во всей их полноте. Номенклатура, используемая в данной заявке основана на систематической номенклатуре ИЮПАК, если не указано иное.

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

При указании числа заместителей, термин ʺодин или болееʺ обозначает диапазон от одного заместителя, до максимально возможного числа замещения, т.е. замену одного атома водорода до замены всех атомов водорода на заместители. Термин ʺзаместительʺ обозначает атом или группу атомов заменяющих атом водорода на родительской молекуле. Термин ʺзамещенныйʺ означает, что указанная группа несет один или несколько заместителей. Если какая-либо группа может нести несколько заместителей и предложены разные возможные заместители, заместители выбраны независимо и не должны быть одинаковыми. Термин ʺнезамещенныйʺ означает, что указанная группа не несет заместителей. Термин ʺвозможно замещенныйʺ означает, что указанная группа является незамещенной или замещена одним или более заместителями, независимо выбранными из группы возможных заместителей. При указании числа заместителей, термин ʺодин или болееʺ означает от одного заместителя до максимально возможного числа замещения, т.е. от замены одного атома водорода до замены всех атомов водорода на заместители.

Термин ʺалкилʺ, как здесь используется, относится к насыщенному линейному или разветвленному моновалентному углеводородному радикалу из одного-двенадцати атомов углерода (С112), где алкильный радикал может быть возможно замещенным одним или более заместителей, описанных ниже. В другом воплощении, алкильный радикал состоит из одного - восьми атомов углерода (С18), или одного-шести атомов углерода (C16). Примеры алкильных групп включают, но не ограничены до, метил (Me, -СН3), этил (Et, -СН2СН3), 1-пропил (n-Pr, n-пропил, -СН2СН2СН3), 2-пропил (i-Pr, изопропил, -СН(СН3)2), 1-бутил (n-Bu, н-бутил, -СН2СН2СН2СН3), 2-метил-1-пропил (i-Bu, изобутил, -СН2СН(СН3)2), 2-бутил (s-Bu, втор-бутил, -СН(СН3)СН2СН3), 2-метил-2-пропил (t-Bu, трет-бутил, -С(СН3)3), 1-пентил (н-пентил, -СН2СН2СН2СН2СН3), 2-пентил (-СН(СН3)СН2СН2СН3), 3-пентил (-СН(СН2СН3)2), 2-метил-2-бутил (-С(СН3)2СН2СН3), 3-метил-2-бутил (-СН(СН3)СН(СН3)2), 3-метил-1-бутил (-СН2СН2СН(СН3)2), 2-метил-1-бутил (-СН2СН(СН3)СН2СН3), 1-гексил (-СН2СН2СН2СН2СН2СН3), 2-гексил (-СН(СН3)СН2СН2СН2СН3), 3-гексил (-СН(СН2СН3)(СН2СН2СН3)), 2-метил-2-пентил (-С(СН3)2СН2СН2СН3), 3-метил-2-пентил (-СН(СН3)СН(СН3)СН2СН3), 4-метил-2-пентил (-СН(СН3)СН2СН(СН3)2), 3-метил-3-пентил (-С(СН3)(СН2СН3)2), 2-метил-3-пентил (-СН(СН2СН3)СН(СН3)2), 2,3-диметил-2-бутил (-С(СН3)2СН(СН3)2), 3,3-диметил-2-бутил (-СН(СН3)С(СН3)3, 1-гептил, 1-октил, и т.п.

Термин ʺалкиленʺ, как здесь используется, относится к насыщенному линейному или разветвленному двухвалентному углеводородному радикалу из одного-двенадцати атомов углерода (С112), где алкиленовый радикал может быть возможно замещенным одним или более заместителей, описанных ниже. В другом воплощении, алкиленовый радикал состоит из одного-восьми атомов углерода (С18), или одного-шести атомов углерода (С16). Примеры алкиленовых групп включают, но не ограничены до, метилен (-СН2-), этилен (-СН2СН2-), пропилен (-СН2СН2СН2-), и т.п..

Термин ʺалкенилʺ относится к линейному или разветвленному моновалентному углеводородному радикалу из двух - восьми атомов углерода (С28) с по меньшей мере одним участком ненасыщенности, т.е. , углерод-углерод sp2 двойной связью, где алкениловый радикал может быть возможно замещенным одним или более заместителей описанных здесь, и включает радикалы, обладающие ʺцисʺ и ʺтрансʺ ориентацией, или альтерантивно, ʺЕʺ и ʺZʺ ориентациями. Примеры включают, но не ограничены до, этиленил или винил (-СН=СН2), аллил (-СН2СН=СН2), и т.п.

Термин ʺалкениленʺ относится к линейному или разветвленному дивалентному углеводородному радикалу из двух-восьми атомов углерода (С28) с по меньшей мере одним участком ненасыщенности, т.е. , углерод-углерод sp2 двойной связью, где алкениловый радикал может быть возможно замещенным одним или более заместителей описанных здесь, и включает радикалы, обладающие ʺцисʺ и ʺтрансʺ ориентацией, или альтерантивно, ʺЕʺ и ʺZʺ ориентациями. Примеры включают, но не ограничены до, этиленилен или винилен (-СН=СН-), аллил (-СН2СН=СН-), и т.п.

Термин ʺалкинилʺ относится к линейному или разветвленному моновалентному углеводородному радикалу из двух-восьми атомов углерода (С28) с по меньшей мере одним участком ненасыщенности, т.е. , углерод-углерод, sp тройной связью, где алкениленовый радикал может быть возможно замещенным одним или более заместителей, описанных здесь. Примеры включают, но не ограничены до, этинил (-С≡СН), пропинил (пропаргил, -СН2С≡СН), и т.п.

Термин ʺалкиниленʺ относится к линейному или разветвленному дивалентному углеводородному радикалу из двух-восьми атомов углерода (С28) с по меньшей мере одним участком ненасыщенности, т.е. , углерод-углерод, sp тройной связью, где алкениленовый радикал может быть возможно замещенным одним или более заместителей, описанных здесь. Примеры включают, но не ограничены до, этинилен (-С≡С-), пропинилен (пропаргилен, -СН2С≡С-), и т.п..

Термины ʺкарбоциклʺ, ʺкарбоциклилʺ, ʺкарбоциклическое кольцоʺ и ʺциклоалкилʺ относятся к моновалентному неароматическому, насыщенному или частично насыщенному кольцу, обладающему от 3 до 12 атомов углерода (С312) в виде моноциклического кольца или от 7 до 12 атомов углерода в виде бициклического кольца. Бициклические карбоциклы, обладающие от 7 до 12 атомами могут быть организованы в виде, например, бицикло[4,5], [5,5], [5,6] или [6,6] систем, и бициклические карбоциклы, обладающие 9-10 кольцевыми атомами могут быть организованы в виде бицикло[5,6] или [6,6] систем, или в виде мостиковых систем, таких как бицикло[2.2.1]гептан, бицикло[2.2.2]октан и бицикло[3.2.2]нонан. Спиро остатки также входят в понятие данного термина. Примеры моноциклических карбоциклов включают, но не ограничены до, циклопропил, циклобутил, циклопентил, 1-циклопент-1-енил, 1-циклопент-2-енил, 1-циклопент-3-енил, циклогексил, 1-циклогекс-1-енил, 1-циклогекс-2-енил, 1-циклогекс-3-енил, циклогексадиенил, циклогептил, циклооктил, циклононил, циклодецил, циклоундецил, циклододецил и т.п. Карбоциклические группы возможно независимо замещены одним или более заместителями, описанными здесь.

ʺАрилʺ означает моновалентный ароматический углеводородный радикал из 6-20 атомов углерода (С620) образованный удалением одного атома водорода от одиночного атома углерода из исходной ароматической кольцевой системы. Некоторые арильные группы показаны в формулах примеров как ʺArʺ. Арил включает бициклические радикалы, содержащие ароматическое кольцо, конденсированное с насыщенным, частично ненасыщенным кольцом или ароматическим карбоциклическим кольцом. Типичные арильные группы включают, но не ограничены до, радикалы, образованные из бензола (фенил), замещенные бензолы, нафтален, антрацен, бифенил, инденил, инданил, 1,2-дигидронафтален, 1,2,3,4-тетрагидронафтил, и т.п. Арильные группы возможно независимо замещены одним или более заместителями, описанными здесь.

ʺАриленʺ означает двухвалентный ароматический углеводородный радикал из 6-20 атомов углерода, (С620), полученный удалением двух атомов водорода от двух кольцевых атомов углерода исходной ароматической системы. Некоторые ариленовые группы представлены в структурах примеров как ʺArʺ. Арилен включает бициклические радикалы, содержащие ароматическое кольцо, конденсированное с насыщенным, частично ненасыщенным или ароматическим карбоциклическим кольцом. Типичные ариленовые группы включают, без ограничения, радикалы, полученные из бензола (фенилен), замещенных бензолов, нафталина, антрацена, бифенилена, инденилена, инданилена, 1,2-дигидронафталина, 1,2,3,4-тетрагидронафтила и другие. Ариленовые группы являются возможно замещенными одним или более заместителями, описанными здесь.

Термин ʺгетероциклʺ, ʺгетероциклилʺ и ʺгетероциклическое кольцоʺ используются здесь взаимозаменяемо и относятся к насыщенному или частично ненасыщенному (т.е. имеющему одну или несколько двойных и/или тройных связей в кольце) карбоциклическому радикалу, содержащему от 3 до 20 атомов в кольце, в котором по меньшей мере один кольцевой атом представляет собой гетероатом, выбранный из азота, кислорода, фосфора и серы, а остальные кольцевые атомы представляют собой С, где один или несколько кольцевых атомов возможно замещены независимо одним или более заместителями, описанными ниже. Гетероцикл может быть моноциклом, содержащим от 3 до 7 кольцевых атомов (от 2 до 6 атомов углерода и от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из Ν, О, Ρ и S) или бициклом, содержащим от 7 до 10 кольцевых атомов (от 4 до 9 атомов углерода и от 1 до 6 гетероатомов, выбранных из Ν, О, Ρ и S), например: бицикло[4,5], [5,5], [5,6] или [6,6] системы. Гетероциклы описаны у Paquette, Leo Α.; ʺPrinciples of Modern Heterocyclic Chemistryʺ (W.A. Benjamin, New York, 1968), в частности, в главах 1, 3, 4, 6, 7 и 9; ʺThe Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs((John Wiley & Sons, New York, 1950 по настоящее время), в частности выпуски 13, 14, 16, 19 и 28, а также в J. Am. Chem. Soc. (1960). ʺГетероциклилʺ включает радикалы, где гетероциклические радикалы конденсированы с насыщенным, частично ненасыщенным или ароматическим карбоциклическим или гетероциклическим кольцом. Примеры гетероциклических колец включают, без ограничения, морфолин-4-ил, пиперидин-1-ил, пиперазинил, пиперазин-4-ил-2-он, пиперазин-4-ил-3-он, пирролидин-1-ил, тиоморфолин-4-ил, S-диоксотиоморфолин-4-ил, азокан-1-ил, азетидин-1-ил, октагидропиридо[1,2-а]пиразин-2-ил, [1,4]диазепан-1-ил, пирролидинил, тетрагидрофуранил, дигидрофуранил, тетрагидротиенил, тетрагидропиранил, дигидропиранил, тетрагидротиопиранил, пиперидино, пиперидонил, морфолино, тиоморфолино, тиоксанил, пиперазинил, гомопиперазинил, азетидинил, оксетанил, тиетанил, гомопиперидинил, оксепанил, тиепанил, оксазепинил, диазепинил, тиазипинил, 2-пирролинил, 3-пирролинил, индолинил, 2Н-пиранил, 4Н-пиранил, диоксанил, 1,3-диоксоланил, пиразолинил, дитианил, дитиоланил, дигидропиранил, дигидротиенил, дигидрофуранил, 3-азабицикло[3.1.0]гексанил, 3-азабицикло[4.1.0]гептанил, азабицикло[2.2.2]гексанил, 3H-индолил хинолизинил и N-пиридил мочевину. Спиро остатки также входят в объем этого определения. Примеры гетероциклических групп, в которых два кольцевых атома замещены оксо (=О) остатками представляют собой пиримидинонил и 1,1-диоксотиоморфолинил. Гетероциклические группы в данном описании, возможно замещены независимо одним или более заместителями, описанными здесь.

Термин ʺгетероарилʺ обозначает одновалентный ароматический радикал 5-, 6- или 7-членных колец и включает конденсированные кольцевые системы (по меньшей мере одно из которых является ароматическим) из 5-20 атомов, содержащих один или более гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода и серы. Примерами гетероарильных групп являются пиридинил (включая, например, 2-гидроксипиридинил), имидазолил, имидазопиридинил, пиримидинил (включая, например, 4-гидроксипиримидинил), пиразолил, триазолил, пиразинил, тетразолил, фурил, тиенил, изоксазолил, тиазолил, оксадиазолил, оксазолил, изотиазолил, пирролил, хинолинил, изохинолинил, тетрагидроизохинолинил, индолил, бензимидазолил, бензофуранил, циннолинил, индазолил, индолизинил, фталазинил, пиридазинил, триазинил, изоиндолил, птеридинил, пуринил, оксадиазолил, триазолил, тиадиазолил, тиадиазолил, фуразанил, бензофуразанил, бензотиофенил, бензотиазолил, бензоксазолил, хиназолинил, хиноксалинил, нафтиридинил и фуропиридинил. Гетероарильные группы возможно независимо замещены одним или более заместителями, описанными здесь.

Гетероциклические или гетероарильные группы могут быть присоединены по углероду (углерод-связанные) или по азоту (азот- связанный), где такое возможно. В качестве примера, без ограничения, углерод-связанные гетероциклы или гетероарилы присоединены по положениям 2, 3, 4, 5 или 6 пиридина, положениям 3, 4, 5 или 6 пиридазина, по положениям 2, 4, 5 или 6 пиримидина, по положениям 2, 3, 5 или 6 пиразина, по положениям 2, 3, 4 или 5 фурана, тетрагидрофурана, тиофурана, тиофена, пиррола или тетрагидропиррола, по положениям 2, 4 или 5 оксазола, имидазола или тиазола, по положениям 3, 4 или 5 изоксазола, пиразола или изотиазола, по положениям 2 или 3 азиридина, по положениям 2, 3 или 4 азетидина, по положениям 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 хинолина или положениям 1, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 изохинолина.

В качестве примера, а не ограничения, азот-связанные гетероциклы или гетероарилы присоединены в положении 1 азиридина, азетидина, пиррола, пирролидина, 2-пирролин-3-пирролина, имидазола, имидазолидина, 2-имидазолина, 3-имидазолина, пиразола, пиразолина, 2-пиразолина, 3-пиразолина, пиперидина, пиперазина, индола, индолина, 1Н-индазола, в положении 2 изоиндола или изоиндолина, положении 4 морфолина и положении 9 карбазола или β-карболина.

Термины ʺлечитьʺ и ʺлечениеʺ относятся как к терапевтическому лечению, так и профилактическим или превентивным мерам, при которых у объекта предотвращают или замедляют (уменьшают) нежелательные физиологические изменения или нарушения, такие как развитие или распространение рака. Для целей настоящего изобретения благоприятные или желаемые клинические результаты включают в себя, без ограничения, облегчение симптомов, уменьшение степени заболевания, стабилизирование (т.е. не ухудшение) состояния болезни, задержка или замедление прогрессирования заболевания, улучшение или временное облегчение состояния заболевания и ремиссию (частичную или полную), как обнаруживаемые, так и не обнаруживаемые. ʺЛечениеʺ может также означать продление выживаемости по сравнению с ожидаемым выживанием, при котором не получают лечения. Те, кто нуждается в лечении, включают тех, которые уже обладают состоянием или расстройством, а также предрасположенных к состоянию или расстройству, или тех, у кого состояние или расстройство должно быть предотвращено.

Фраза ʺтерапевтически эффективное количествоʺ означает количество соединения по настоящему изобретению, которое (i) лечит или предотвращает конкретное заболевание, состояния или расстройство, (ii) ослабляет, улучшает или устраняет один или более симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, или (iii) предотвращает или задерживает начало одного или более симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, описанного здесь. В случае рака, терапевтически эффективное количество лекарственного средства может уменьшать число раковых клеток; уменьшать размер опухоли; ингибировать (т.е. замедлять до некоторой степени и предпочтительно останавливать) инфильтрацию раковых клеток в периферические органы; ингибировать (т.е. замедлять до некоторой степени и предпочтительно останавливать) метастазирование опухоли; подавлять, в некоторой степени, рост опухоли и/или облегчать до некоторой степени один или более симптомов, связанных с раком. В зависимости от степени, с которой лекарственное средство может предотвращать рост и/или уничтожать существующие раковые клетки, она может быть цитостатической и/или цитотоксической. В случае лечения рака эффективность может быть измерена, например, посредством оценки времени до прогрессирования заболевания (ТТР) и/или определения степени ответа (RR).

Термин «рак» относится к или описывает физиологическое состояние у млекопитающих, которое обычно характеризуется нерегулируемым клеточным ростом. «Опухоль» включает одну или больше раковых клеток. Примеры рака включают, без ограничения, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкемию или лимфоидные злокачественные образования. Более конкретно, примеры таких опухолей включают плоскоклеточный рак (например, плоскоклеточный рак эпителия), рак легкого, включая мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточную карциному легкого (NSCLC), аденокарциному легких и плоскоклеточный рак легкого, рак брюшной полости, гепатоцеллюлярный рак желудка или рак желудка, включая желудочно-кишечный рак, рак поджелудочной железы, глиобластому, рак шейки матки, рак яичников, рак печени, рак мочевого пузыря, гепатому, рак молочной железы, толстой кишки, рак прямой кишки, рак толстой и подвздошной кишок, карциному эндометрия или матки, карциному слюнной железы, рак почек, ренальный рак, рак простаты, рак вульвы, рак щитовидной железы, карциному печени, анальную карциному, рак полового члена, а также рак головы и шеи.

ʺХимиотерапевтическое средствоʺ представляет собой химическое соединение, используемое для лечения рака, независимо от механизма действия. Химиотерапевтические средства включают следующие классы, без ограничения: алкилирующие агенты, антиметаболиты, веретенный яд растительных алкалоидов, цитотоксические/противоопухолевые антибиотики, ингибиторы топоизомеразы, антитела, фотосенсибилизаторы и ингибиторы киназ. Химиотерапевтические средства включают соединения, используемые в «целевой терапии» и традиционной химиотерапии. Примеры химиотерапевтических средств включают: эрлотиниб (TARCEVA®, Genentech/OSI Pharm.), Доцетаксел (Таксотер®, Sanofi-Aventis), 5-FU (фторурацил, 5-фторурацил, CAS №51-21-8), гемцитабин (GEMZAR®, Lilly), PD-0325901 (CAS №391210-10-9, Pfizer), цисплатин (цис-диамин, дихлорплатина (II), CAS №15663-27-1), карбоплатин (CAS No 41575-94-4), паклитаксел (таксол®, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.), трастузумаб (Герцептин®, Genentech), темозоломид (4-метил-5-оксо-2,3,4,6,8-пентазабицикло[4.3.0]нона-2,7,9-триен-9-карбоксамид, CAS №85622-93-1, TEMODAR®, ТЕМОДАЛ®, Schering Plough), тамоксифен ((Z)-2-[4-(1,2-дифенилбут-1-енил)фенокси]-N,N-диметилэтанамин, NOLVADEX®, ISTUBAL®, VALODEX®) и доксорубицин (ADRIAMYCIN®), Akti - 1/2, HPPD и рапамицин.

Дополнительные примеры химиотерапевтических средств включают: оксалиплатин (Элоксатин®, Sanofi), бортезомибом (VELCADE®, Millennium Pharm), сутент (сунитиниб®, SU 11248, Pfizer), летрозол (FEMARA®, Novartis), иматиниба мезилат (Gleevec®, Novartis), XL-518 (MEK ингибитор, Exelixis, WO 2007/044515), ARRY-886 (МЕК ингибитор, AZD6244, Array BioPharma, Astra Zeneca), SF-1126 (ингибитор PI3K, Semafore Pharmaceuticals), BEZ-235 (ингибитор PI3K, Novartis), XL-147 (ингибитор PI3K, Exelixis), PTK787/ZK 222584 (Novartis), фулвестрант (Faslodex®, AstraZeneca), лейковорин (фолиевая кислота), рапамицин (сиролимус, Rapamune®, Wyeth), аналог рапамицина, mTOR ингибитор, такой как эверолимус, MEK ингибитор (GDC-0973), Bcl-2 ингибитор, такой как навитоклакс, (АВТ-263) или АВТ-199), лапатиниб (Tykerb®, GSK572016, Glaxo Smith Kline), лонафарниб (Сарасар™, SCH 66336, Schering Plough), сорафениб (Нексавар®, BAY43-9006, Bayer Labs), гефитиниб (IRESSA®, AstraZeneca), иринотекан (CAMPTOSAR®, CPT-11, Pfizer), типифарниб (ZARNESTRA™, Johnson & Johnson), ABRAXANE™ (свободная от кремофора), композиции наночастиц паклитаксела с инженерным альбумином (American Pharmaceutical Partners,, Schaumberg, II), вандетаниб (rINN, ZD6474, ZACTIMA®, AstraZeneca), хлорамбуцил, AG1478, AG1571 (SU 5271; Sugen), темсиролимус (Torisel®, Wyeth), пазопаниб (GlaxoSmithKline), канфосфамид (TELCYTA®, Telik), тиотепа и циклофосфамид (CYTOXAN®, NEOSAR®); алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбоквон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метиламеламины, включая алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметиломеламин; ацетогенины (в частности буллатацин и буллатацинон); камптотецин (включая синтетический аналог топотекан); бриостатин; каллистатин, СС-1065 (включая его адозелезин, карзелезин и бизелезин синтетические аналоги), криптофицины (в частности, криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая синтетические аналоги, KW-2189 и СВ1-ТМ1); элеутеробин; панкратистатин; саркодиктиин; спонгистатин; мустины, такие как хлорамбуцил, хломафазин, хлорфосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлорэтамин, мехлорэтаминоксида гидрохлорид, мельфалан, новембехин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, урамустин; нитрозомочевины, такие как кармустин, хлорозотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин и ранимнустин; антибиотики, такие как энедииновые антибиотики (например, калихеамицин, калихеамицин гамма1I, калихеамицин омегаI1 (Angew Chem. Intl. Ed. Engl. (1994) 33: 183-186); динемицин, динемицин A; бисфосфонаты, такие как клодронат; эсперамицин; а также неокарциностатиновый хромофор и родственные хромопротеиновые хромофоры энедииновых антибиотиков), аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, карабицин, каминомицин, карцинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцин, морфолино-доксорубицин, цианоморфолинодоксорубицин, 2-пирролинодоксорубицин-доксорубицин и деоксидоксорубицин), эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, неморубицин, марцелломицин, митомицины, такие как митомицин С, микофеноловая кислота, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, порфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, зиностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат и 5-фторурацил (5-ФУ), аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; аналоги пурина, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидеоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин; андрогены, такие как калустерон, пропионат дромостанолона, эпитиостанол, мепитиостан, тестолактон; антиадренергетики, такие как аминоглютетимид, митотан, трилостан; компенсатор фолиевой кислоты, такой как фолиновая кислота; ацеглатон; альдофосфамида гликозид; аминолевулиновая кислота; энилурацил; амсакрин; бестрабуцил; бизантрен; эдатраксат; дефофамин; демеколцин; диазиквон; эльформитин; ацетат эллиптиния; эпотилон; этоглуцид; нитрат галлия; гидроксимочевина; лентинан; лонидайнин; майтанзиноиды, такие как майтансин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопиданмол; нитраэрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; лозоксантрон; подофилиновая кислота, 2-этилгидразид; прокарбазин; PSK® комплекс полисахаридов (JHS Natural Products, Eugene, OR); разоксан; ризоксин; сизофиран; спирогерманиум; тенуазоновую кислоту; триазиквон; 2,2',2ʺ-трихлортриэтиламин; трихотецены (особенно Т-2 токсин, верракурин А, роридин А и ангуидин); уретан; виндезин; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид (ʺAra-Сʺ); циклофосфамид; тиотепа; 6-тиогуанин, меркаптопурин, метотрексат; аналоги платины, такие как цисплатин и карбоплатин; винбластин; этопозид (VP-16); ифосфамид; митоксантрон; винкристин; винорельбин (Navelbine®); новантрон; тенипозид; эдатрексат; даунорубицин, аминоптерин; капецитабин (XELODA®, Roche); ибандронат, СРТ-11; ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифторметилорнитин (DMFO); ретиноиды, такие как ретиноевая кислота и их фармацевтически приемлемые соли, кислоты и производные любого из указанных выше.

Также включенными в определение «химиотерапевтический агент» являются: (i) анти-гормональные препараты, которые действуют, регулируя или ингибируя действие гормонов на опухоли, такие как антиэстрогены и селективные модуляторы рецептора эстрогена (СМРЭ), включая, например, тамоксифен (в том числе NOLVADEX®; тамоксифена цитрат), ралоксифен, дролоксифен, 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, кеоксифен, LY117018, онапристон и FARESTON® (цитрат торемифина), (ii), ингибиторы ароматазы, которые ингибируют фермент ароматазу, регулирующий выработку эстрогена в надпочечниках, таких как, например, 4 (5)-имидазолы, аминоглютетимид, MEGASE® (мегестролацетат), аромазина® (экземестан, Pfizer), форместатин, фадрозол, RIVISOR® (ворозол), FEMARA® (летрозол; Novartis) и Аримидекс® (анастрозол; AstraZeneca), (iii), антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид, бикалутамид, лейпролид и гозерелин, а также троксацитабин (1,3-диоксолан нуклеозид цитозиновый аналог), (iv), ингибиторы протеинкиназы, такие как ингибиторы MEK (WO 2007/044515); (v) ингибиторы липидкиназы; (vi) антисмысловые олигонуклеотиды, в частности те, которые ингибируют экспрессию генов сигнальных путей, вовлеченных в аберрантную пролиферацию клеток, например, PKC-альфа, Ralf и H-Ras, такие как облимерсен (GENASENSE®, Genta Inc.); (vii) рибозимы, такие как ингибиторы экспрессии VEGF (например, ANGIOZYME®) и ингибиторы экспрессии HER2, (viii), вакцины, такие как вакцины генной терапии, например, ALLOVECTIN®, LEUVECTIN® и VAXID®; Пролекин® рИЛ-2; ингибиторы топоизомеразы-I, такие как LURTOTECAN®; абареликс® rmRH; (ix) антиангиогенные агенты, такие как бевацизумаб (Avastin®, Genentech), и их фармацевтически приемлемые соли, кислоты и производные любого из указанных выше.

Также включены в определение ʺхимиотерапевтическое средствоʺ терапевтические антитела, такие как алемтузумаб (Campath), бевацизумаб (Avastin®, Genentech), цетуксимаб (ERBITUX®, Imclone); панитумумаб (Vectibix®, Amgen), ритуксимаб (RITUXAN®, Genentech/Biogen Idec), пертузумаб (OMNITARG™, 2C4, Genentech), трастузумаб (Герцептин®, Genentech) и тозитумомаб (Bexxar, Corixia).

Гуманизированные моноклональные антитела с терапевтическим потенциалом в качестве химиотерапевтических средств в комбинации с соединениями Формулы I по изобретению, включают: алемтузумаб, аполизумаб, аселизумаб, атлизумаб, бапинейзумаб, бевацизумаб, биватузумаб мертансин, кантузумаб мертансин, седелизумаб, цертолизумаб пегол, цидфузитузумаб, цидтузумаб, даклизумаб, экулизумаб, эфализумаб, эпратузумаб, эрлизумаб, фелвизумаб, фонтолизумаб, гемтузумаб озогамицин, инотузумаб озогамицин, ипилимумаб, лабетузумаб, лебрикизумаб, линтузумаб, матузумаб, меполизумаб, мотавизумаб, мотовизумаб, натализумаб, нимотузумаб, ноловизумаб, нумавизумаб, окрелизумаб, омализумаб, паливизумаб, пасколизумаб, пекфузитузумаб, пектузумаб, пертузумаб, пекселизумаб, раливизумаб, ранибизумаб, ресливизумаб, реслизумаб, ресивизумаб, ровелизумаб, руплизумаб, сибротузумаб, сиплизумаб, сонтузумаб, такатузумаб тетраксетан, тадоцизумаб, тализумаб, тефибазумаб, тоцилизумаб, торализумаб, трастузумаб, тукотузумаб цельмолейкин, токузитузумаб, умавизумаб, уртоксазумаб и визилизумаб.

«Метаболит» представляет собой продукт, продуцированный в организме из специфического соединения или его соли. Метаболиты соединений могут быть идентифицированы с использованием обычных методов, известных в уровне техники, при этом их активность определялась с использованием тестов, которые, например, описаны в настоящем изобретении. Такие продукты могут образовываться в результате окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, дезамидирования, этерификации, деэтерификации, ферментативного расщепления и т.д. введенного соединения. Соответственно, настоящее изобретение включает метаболиты соединений Формулы I по настоящему изобретению, включая соединения, образовавшиеся в результате процесса, включающего контактирование соединения настоящего изобретения с млекопитающим в течение времени, достаточного для образования его метаболического продукта.

Термин ʺлисток-вкладышʺ используется для обозначения инструкции, включенной перед продажей в упаковку с терапевтическим продуктом, который содержит информацию о показании, использовании, дозах, введении, противопоказаниях и/или предупреждениях относительно использования такого терапевтического продукта,

Термин ʺхиральныйʺ обозначает молекулы, которые обладают свойством неспособности наложения зеркальных партнеров, при этом термин ʺахиральныйʺ обозначает молекулы, которые являются налагаемыми на их партнеров в зеркальном отражении.

Термин ʺстереоизомерыʺ относится к соединениям, которые обладают идентичным химическим составом, но различаются положением их атомов или групп в пространстве.

ʺДиастереомерʺ относится к стереоизомеру с двумя и более центрами хиральности, при этом их молекулы не являются зеркальными отражениями друг друга. Диастереомеры обладают различными физическими свойствами, например, температурой плавления, точкой кипения, спектральными свойствами и реакционной способностью. Смеси диастереомеров могут быть разделены аналитическими методами с высоким разрешением, такими как кристаллизация, электрофорез и хроматография.

ʺЭнантиомерыʺ относятся к двум стереоизомерам соединений, которые не являются взаимоналагаемыми зеркальными отражениями друг друга.

Стереохимические определения и соглашения, используемые в настоящем изобретении, главным образом взяты из S.P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; и Eliel, E. и Wilen, S., ʺStereochemistry of Organic Compoundsʺ, John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994. Соединения по настоящему изобретению могут содержать центры асимметрии или хиральности и, таким образом, существовать в виде различных стереоизомерных форм. Подразумевается, что все стереоизомерные формы соединений настоящего изобретения, включая, но не ограничиваясь, диастереомеры, энантиомеры и атропизомеры, также как и их смеси, такие как рацемические смеси, являются частью настоящего изобретения. Многие органические соединения существуют в виде оптически активных форм, т.е. они обладают способностью вращать плоскость плоско-поляризованного света. В описании оптически активных соединений используются префиксы D и L, или R и S для обозначения абсолютных конфигураций молекул вокруг их хирального(ых) центра(ов). Префиксы d и I или (+) и (-) употребляются для обозначения знака вращения плоско-поляризованного света соединением, где (-) или 1 означают, что соединение является левовращающим. Соединение с префиксом (+) или d является правовращающим. Для данных химических структур эти стереоизомеры идентичны, за исключением того, что они являются зеркальными отражениями друг друга. Определенные стереоизомеры также могут быть названы как энантиомеры, и смесь таких изомеров часто называют смесью энантиомеров. Смесь с соотношением энантиомеров 50:50 называется рацемической смесью или рацематом, которая может образовываться в случае нестереоселективности или нестереоспецифичности химической реакции или процесса. Термины ʺрацемическая смесьʺ и ʺрацематʺ обозначают оптически неактивную эквимолярную смесь двух видов энантиомеров. Энантиомеры могут быть выделены из рацемической смеси посредством хиральных способов разделения, таких как сверхкритическая жидкостная хроматография (СКЖХ).

Присваивание конфигурации в хиральных центрах у разделенных энантиомеров может быть предварительной, и показано в структурных формулах таблицы 1 для иллюстративных целей, в то время как для определение стереохимии нуждается в, например, рентгеновских кристаллографических данных.

Термин ʺтаутомерʺ или ʺтаутомерная формаʺ относится к структурным изомерам с различной энергией, которые являются взаимопереходящими друг в друга через низкоэнергетический барьер. Например, протонные таутомеры (также известные как прототропные таутомеры) включают интерконверсию через миграцию протона, такую как кето-енольная или имин-енаминная изомеризация. Валентные таутомеры охватывают взаимопревращение путем реорганизации некоторых связывающих электронов.

Термин ʺфармацевтически приемлемые солиʺ обозначает соли, которые не являются биологически или иным образом нежелательными. Фармацевтически приемлемые соли включают кислотно-аддитивные соли, а также основно-аддитивные соли. Фраза ʺфармацевтически приемлемыйʺ обозначает, что вещество или композиция должны быть совместимыми химически и/или токсикологически с другими ингредиентами, составляющими композицию и/или млекопитающим, подвергающимся лечению

Термин ʺфармацевтически приемлемая кислотно-аддитивная сольʺ означает те фармацевтически приемлемые соли, которые образованы с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, угольная кислота, фосфорная кислота, и органическими кислотами, выбранными из алифатических, циклоалифатических, ароматических, аралифатических, гетероциклических, карбоновых и сульфоновых органических кислот, таких как муравьиная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, глюконовая кислота, молочная кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, аспарагиновая кислота, аскорбиновая кислота, глутаминовая кислота, антраниловая кислота, бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, эмбоновая кислота, фенилуксусная кислота, метансульфоновая кислота, ʺмезилалатʺ, этансульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота и салициловая кислота.

Термин ʺфармацевтически приемлемые основно-аддитивная сольʺ означает те фармацевтически приемлемые соли, которые образованы с органическим или неорганическим основанием. Примеры приемлемых неорганических оснований, включают соли натрия, калия, аммония, кальция, магния, железа, цинка, меди, марганца и алюминия. Соли, полученные из фармацевтически приемлемых органических нетоксичных оснований включают соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, включая природные замещенные амины, циклических аминов и основных ионообменных смол, таких как изопропиламин-, триметиламин-, диэтиламин-, триэтиламин-, трипропиламин-, этаноламин-, 2-диэтиламиноэтанол-, триметамин-, дициклогексиламин-, лизин-, аргинин-, гистидин-, кофеин-, прокаин-, гидрабамин-, холин-, бетаин-, этилендиамин-, глюкозамин-, метилглюкамин-, теобромин-, пурин-, пиперазин-, пиперидин-, N-этилпиперидин-, и полиаминовые смолы.

ʺСольватʺ обозначает ассоциацию или комплекс одной или более молекул растворителя и соединения по изобретению. Примеры растворителей, которые могут образовывать сольваты, включают, не ограничиваясь, воду, изопропанол, этанол, метанол, ДМСО, этилацетат, уксусная кислота и этаноламин. Термин ʺгидратʺ обозначает комплекс, в котором молекулой растворителя является вода.

Термин ʺЕС50ʺ представляет собой половину максимальной эффективной концентрации и обозначает концентрацию в плазме конкретного соединения, необходимой для получения 50% от максимума конкретного эффекта in vivo.

Термин ʺKiʺ представляет собой константу ингибирования и обозначает абсолютное сродство связывания конкретного ингибитора с рецептором. Она измеряется с помощью анализа конкурентного связывания и равна концентрации, при которой специфичный ингибитор будет занимать 50% рецепторов, при отсутствии конкурирующего л и ганда (например, радиоактивный лиганд). Значения Ki могут быть преобразованы логарифмически в рК значения (-logKi), для которых более высокие значения указывают экспоненциально большую эффективность.

Термин ʺIC50ʺ представляет собой половину максимальной ингибирующей концентрации и означает концентрацию конкретного соединения, необходимую для получения 50%-ного ингибирования биологического процесса in vitro. Значения IC50 могут быть логарифмически преобразованы в pIC50 значения (-logIC50), для которых более высокие значения указывают на экспоненциально большую эффективность. Значение IC50 не является абсолютным значением, а зависит от условий эксперимента, например, концентраций. Значение IC50 может быть преобразовано в абсолютную константу ингибирования (Ki), используя уравнение Ченга-Прусоффа (Biochem. Pharmacol. (1973) 22: 3099).

Термины ʺсоединение настоящего изобретенияʺ и ʺсоединения по настоящему изобретениюʺ и ʺсоединения формулы Iʺ включают соединения формул I и их стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры, сольваты, метаболиты и фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.

Все формулы или структуры, приведенные здесь, включая соединения формулы I, также предназначены для обозначения гидратов, сольватов и полиморфных форм таких соединений и их смесей.

Все формулы или структуры, приведенные здесь, включая соединения формулы I, предназначены как для обозначения меченных изотопами форм соединений, так и для немеченных форм. Меченные изотопами соединения имеют структуры, представленные формулами, приведенными здесь, исключением того, что один или более атомов заменены атомами, имеющими выбранную атомную массу или массовое число. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения по изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как, без ограничения, 2Н (дейтерий, D) 3Н (тритий), 11С, 13С, 14С, 15N, 18F, 31Ρ, 32Р, 35S, 36Cl и 125I. Различные меченные изотопами соединения по настоящему изобретению, например те, в которые включены радиоактивные изотопы, такие как ЗН, 13С и 14С входят в объем настоящего изобретения. Такие меченные изотопами соединения могут быть полезны при исследованиях метаболизма, исследованиях кинетики реакций, методах детекции или визуализации, таких как позитронно- эмиссионная томография (ПЭТ) или однофотонная эмиссионная компьютерная томография (ОФЭКТ), включая анализ распределения лекарств или субстратов в тканях, или при радиоационном лечении пациентов. Меченные или замещенные дейтерием терапевтические соединения по изобретению могут обладать улучшенными DMPK (метаболизм и фармакокинетика лекарственного средства) свойства, по отношению к распределению, метаболизму и экскреции (ADME). Замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, может давать определенные терапевтические преимущества в результате большей метаболической стабильности, например, увеличенный в естественных условиях период полураспада или сниженная дозировка. 18F-меченное соединение может быть полезным для ПЭТ или ОФЭКТ исследований. Меченные изотопами соединения по данному изобретению и их пролекарства могут быть получены путем проведения техник, описанных в схемах и в примерах и препаратах, данных ниже, заменой на легко доступный меченный изотопом реагент немеченного изотопом реагента. Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, в частности, дейтерием (т.е. 2Н или D), может давать определенные терапевтические преимущества в результате большей метаболической стабильности, например, увеличенный в естественных условиях период полураспада или снижение требований дозировки или улучшение терапевтического индекса. Необходимо понимать, что дейтерий в этом контексте рассматривается в качестве заместителя в соединении формулы (I). Концентрация таких тяжелого изотопа, в частности, дейтерия, может определяться фактором изотопного обогащения. В соединениях по данному изобретению любой атомом, специально не указанный в качестве конкретного изотопа, предназначен для обозначения любого стабильного изотопа атома. Если не указано иное, когда радикал обозначен специально как ʺНʺ или ʺводородʺ, радикал понимается как водороде с его изотопным составом природного состава. Соответственно, в соединениях по настоящему изобретению любой атом специально обозначены как дейтерий (D) предназначен для обозначения дейтерия.

ПИРАЗОЛ-4-ИЛ-ГЕТЕРОЦИКЛИЛ-КАРБОКСАМИДНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ

В настоящем изобретении предложены пиразол-4-ил-гетероциклил-карбоксамидные соединения Формулы I, включая Формулы Ia-i, и их фармацевтически приемлемые композиции, которые являются теоретически полезными при лечении заболеваний, состояний и/или расстройств, модулируемых Pim киназами.

Соединения Формулы I обладают следующей структурой:

и его стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры, или фармацевтически приемлемые соли, где:

R1 выбран из Н, C1-C12 алкила, C2-C12 алкенила, С212 алкинила, С620 арила, С312 карбоциклила, С220 гетероциклила, С120 гетероарила, и -(C1-C12 алкилен)-(С220 гетероциклила);

R2 выбран из структур:

где волнистая линия обозначает место присоединения и прерывистая линия обозначает возможную двойную связь;

R3 выбран из Н, -СН3, -СН2СН3, -СН(СН3)2, -СН2СН(СН3)2, -CH2NH2, -CH2NHCH3, -CH2CH2NH2, -CH2CHCH2NH2, -CH2CH(CH3)NH2, -CH2OH, -CH2CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH(OH)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH2OH, -CH2CH2SO2CH3, -CN, -CF3, -CO2H, -COCH3, -CO2CH3, -CO2C(CH3)3, -COCH(OH)CH3, -COCH2NH2, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -S(O)2N(CH3)2, -SCH3, -CH2OCH3, -S(O)2CH3, циклопропила, циклобутила, циклопентила, циклогексила и циклогептила;

R4 независимо выбран из F, CI, Br, I, -CH3, -CH2CH3, -СН(СН3)2, -С(СН3)3, -СН2СН(СН3)2, -СН=СН2, -СН=С(СН3)2, =СН2, -CH2F, -CHF2, -CF3, -СН2ОН, -СН2ОСН3, -CH2NH2, -CH2NHCH3, -CH2CH2NH2, -CH2CHCH2NH2, -CH2CH(CH3)NH2, -CH2OH, -CH2CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH(OH)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH2OH, -CH2CH2SO2CH3, -CN, -CO2H, -COCH3, -COCH2NH2, -CO2CH3, -CO2C(CH3)3, -COCH(OH)CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -NO2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CHF2, -NHCH2CF3, -NHCH2CH2OH, -NHCOCH3, -N(CH3)COCH3, -NHC(O)OCH2CH3, -NHC(O)OCH2Cl3, -NHC(O)OC6H5, -NHS(O)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3, =O, -OH, -OCH3, -OCHF2, -OCH2F, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCH2CH(CH3)2, -OC(CH3)3, -S(O)2N(CH3)2, -SCH3, -CH2OCH3, -S(O)2CH3, циклопропила, циклобутила, циклопентила, циклогексила, циклогептила, азетидинила, азепанила, оксетанила, оксетан-3-илметиламино, (3-метилоксетан-3-ил)метиламино, пирролидинила, пиперазинила, пиперидинила, (пиперидин-4-ил)зтила), пиранила, (пиперидин-4-илметила), морфолинометила, и морфолино;

или две, присоединенные к одному и тому же атому, группы R4 образуют спирокольцо, выбранное из циклопропила, циклобутила, циклопентила, циклогексила, пирролидинила, азетидинила, азепанила, оксетанила, пирролидинила, пиперазинила, или пиперидинилового кольца, где спирокольцо возможно замещено одной или более группами, независмо выбранными из -F, -ОН, =O, -СН3, -NH2, -CH2F, -СН2ОН, -СН2ОСН3, -CH2NH2, и -CF3;

или где две смежные группы R4 или R4 группа и R3 группа образуют пятичленное или шестичленное гетероциклическое конденсированное кольцо, где гетероциклическое конденсированное кольцо возможно замещено одной или'более группами, независмо выбранными из -F, -ОН,=O, -СН3, -NH2, -CH2F, -СН2ОН, -СН2ОСН3, -CH2NH2, и -CF3;

n представляет собой 0, 1, 2, или 3;

X выбран из структур:

где волнистая линия обозначает место присоединения;

R5 выбран из Н, Cl, Br, C1-C12 алкила, -(С112 алкилен)-(С312 карбоциклила), -(С112 алкилен)-(С220 гетероциклила), -(С28 алкенилен)-(С3-C12 карбоциклила), -(С28 алкенилен)-(С220 гетероциклила), С620 арила, -(С620 арилен)-(С220 гетероциклила), -(С620 арилен)-(С112 алкилен)-(С220 гетероциклила), С312 карбоциклила, С220 гетероциклила, и С120 гетероарила; где алкил, алкенил, алкинил, алкилен, карбоциклил, гетероциклил, арил, и гетероарил возможно замещены одной или более группами, независимо выбранными из F, Cl, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН(СН3)2, -СН2СН(СН3)2, -CH2NH2, -CH2CH2NH2, -CH2CHCH2NH2, -CH2CH(CH3)NH2, -CH2OH, -CH2CH2OH, -С(СН3)2ОН, -СН(ОН)СН(СН3)2, -С(СН3)2СН2ОН, -CH2CH2SO2CH3, -CN, -CF3, -CO2H, -СОСН3, -CO2CH3, -CO2C(СН3)3, -СОСН(ОН)СН3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -NO2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -N(CH3)COCH3, -NHS(O)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3, =O, -OH, -OCH3, -S(O)2N(CH3)2, -SCH3, -CH2OCH3, -S(O)2CH3, циклопропила, циклобутила, циклопентила, циклогексила, циклогептила, азетидинила, азепанила, оксетанила, пирролидинила, пиперазинила, пиперидинила, (пиперидин-4-ил)этила), пиранила, (пиперидин-4-илметила), морфолинометила, и морфолино; и

R6 независимо представляет собой Η или -ΝΗ2.

Типичные воплощения соединений Формулы I включают такие, где R1 представляет собой Н, C1-C12 алкил, включая -СН3, -СН2СН3, -CH2CHF2, и -CH2CF3, С312 карбоциклил, или -(C1-C12 алкилен)-(С220 гетероциклил), включая оксетан-3-илметил.

Типичные воплощения соединений Формулы I включают такие, где R1 представляет собой Н.

Типичные воплощения соединений Формулы I включают такие, где R1 представляет собой C1-C12 алкил или С312 карбоциклил.

Типичные воплощения соединений Формулы I включают такие, где R1 выбран из -СН3, -СН2СН3, -CH2CHF2, и -CH2CF3.

Типичные воплощения соединений Формулы I включают такие, где R1 представляет собой -(С112 алкилен)-(С220 гетероциклил).

Типичные воплощения соединений Формулы I включают такие, где R1 представляет собой оксетан-3-илметил.

Типичные воплощения соединений Формулы I включают такие, где R3 представляет собой Η или -СН3.

Типичные воплощения соединений Формулы I включают такие, где R4 независимо выбран из F, Cl, -ОН, -СН3, -СН2СН3, -CF3, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CHF2, -NHCH2CF3, -CH2NHCH3, и -OCH3; и n представляет собой 1, 2, или 3.

Типичные воплощения соединений Формулы I включают такие, где n представляет собой 1 или 2.

Типичные воплощения соединений Формулы I включают такие, где R5 представляет собой С620 арил, включая фенил, замещенный одним или более F, в частности одним или двумя F.

Типичные воплощения соединений Формулы I включают такие, где R6 представляет собой -ΝΗ2.

Типичные воплощения соединений Формулы I включают структуры Формулы Ia-i:

БИОЛОГИЧЕСКОЕ ТЕСТИРОВАНИЕ

Определение действия соединений Формулы I в отношении Pim киназы возможно несколькими прямыми и непрямыми способами детекции. Некоторые соединения по изобретению, описанные здесь, исследовались на их активность связывания с Pim киназой, включая изоформы Pim-1, Pim-2, и Pim-3, (Пример 901) и активность in vitro против опухолевых клеток (Пример 902). Некоторые соединения по настоящему изобретению обладали IC50 значениями активности связывания с Pim менее чем приблизительно 1 микромоль (мкМ). Некоторые соединения настоящего изобретения обладают значениями ЕС50 в отношении опухолевой, основанной на клетках, активности менее чем 1 микромоль (мкМ). Соединения Формулы I, обладающие значениями Ki/IC50/EC50 менее чем 1 мкМ по данным тестирования, описанного в Примере 901 и 902, могут быть терапевтически полезны в качестве ингибиторов Pim киназы (Pim-1, Pim-2 и/или Pim-3).

Типичные соединения Формулы I в Таблицах 1а и 1b были получены, охарактеризованы и протестированы в отношении ингибирования Pim киназы в соответствии со способами настоящего изобретения, и обладают следующими структурами и соответствующими названиями (ChemBioDraw Ultra, Version 11.0, CambridgeSoft Corp., Cambridge MA). Некоторые соединения с хиральными атомами в Таблицах 1а и 1b не были полностью охарактеризованы, например, до стереохимии. Предварительное распределение стереохимии или стереохимического отношения к другим группам может быть изображено в структурных формулах. Способы разделения стереоизомеров и данные характеристики приведены в Примерах

-

Настоящее изобретение включает композиции (например, фармацевтические композиции), содержащие соединение Формулы I и/или его сольваты, гидраты и/или соли и носитель (фармацевтически приемлемый носитель). Настоящее изобретение также включает композицию (например, фармацевтическую композицию), содержащую соединение Формулы I и/или его сольваты, гидраты и/или соли и носитель (фармацевтически приемлемый носитель), дополнительно содержащую второй химиотерапевтический агент, такой как описано в настоящем изобретении. Композиции согласно настоящему изобретению полезны для ингибирования ненормального клеточного роста или для лечения гиперпролиферативных заболеваний, таких как опухоли, у млекопитающих (например, человека). Например, соединения и композиции настоящего изобретения полезны при лечении множественной миеломы, лимфомы, острого миелоидного лейкоза, рака предстательной железы, рака молочной железы, печеночно-клеточного рака, рака поджелудочной железы и/или рака ободочной и прямой кишки у млекопитающих (например, человека).

Настоящее изобретение включает способ ингибирования аномального клеточного роста или лечения гиперпролиферативных заболеваний, таких как рак, у млекопитающих (например, человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения Формулы I и/или его сольватов, гидратов и/или солей или их композиций. Например, настоящее изобретение включает способ лечения множественной миеломы, лимфомы, острого миелоидного лейкоза, рака предстательной железы, рака молочной железы, печеночно-клеточного рака, рака поджелудочной железы и/или рака ободочной и прямой кишки у млекопитающих (например, человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения Формулы I и/или его сольватов, гидратов и/или солей или их композиций.

Настоящее изобретение включает способ ингибирования аномального клеточного роста или лечения гиперпролиферативных заболеваний, таких как рак, у млекопитающих (например, человека) включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения Формулы I и/или его сольватов, гидратов и/или соли или их композиций, в комбинации со вторым химиотерапевтическим агентом, таким, как описано в настоящем изобретении. Например, настоящее изобретение включает способ лечения множественной миеломы, лимфомы, острого миелоидного лейкоза, рака предстательной железы, рака молочной железы, печеночно-клеточного рака, рака поджелудочной железы и/или рака ободочной и прямой кишки у млекопитающих (например, человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения Формулы I и/или его сольватов, гидратов и/или солей или их композиций в комбинации со вторым химиотерапевтическим агентом, таким, как описано в настоящем изобретении.

Настоящее изобретение включает спобоб лечения лимфомы у млекопитающих (например, человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения Формулы I и/или его сольватов, гидратов и/или солей, или их композиций, как самостоятельно, так и в комбинации со вторым химиотерапевтическим средством, таким как терапевтические средства против антител В-клеток (напримре, ритуксан и/или дацетузумаб), гемцитабин, кортикостероиды (например, преднизолон и/или дексаметазон), коктейли для химиотерапии (например, CHOP (циклофосфамид, доксорубицин, винкристин, преднизолон) и/или ICE (изофосфамид, цитоксан, этопозид)), комбинации биопрепаратов и химиотерапии (например, Ритуксан-ICE, Дацетузумаб-Ритуксан-ICE, R-Gem, и/или DR-Gem), ингибитор Акт, ингибитор PI3K (например, GDC-0941 (Genentech) и/или GDC-0980 (Genentech)), рапамицин, рапамицин аналог, ингибитор mTOR, такой как эверолимус или сиролимус, MEK ингибитор (GDC-0973), а также Bcl-2 ингибитор (АВТ-263 или АВТ-199).

Настоящее изобретение включает спобоб лечения multiple myeloma у млекопитающих (например, человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения Формулы I и/или его сольватов, гидратов и/или солей, или их композиций, как самостоятельно, так и в комбинации со вторым химиотерапевтическим средством, таким как мелфалан, ʺImidsʺ (иммуномодуляторы, например, талидомид, леналидомид и/или помолидамид), кортикостероиды (например, дексаметазон и/или преднизолон) и бортезомиб или другой ингибитор протеасом.

Настоящее изобретение включает спобоб лечения множественной миеломы, хронической лимфоцитарной лейкемии (CLL), или острого миелолейкоза (AML) у млекопитающих (например, человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения Формулы I и/или его сольватов, гидратов и/или солей, или их композиций, как самостоятельно, так и в комбинации со вторым химиотерапевтическим средством, таким как цитарабин (AraC), антрациклины (например, даунорубицин и/или идарубицин), терапевтические средства против антимиелоидных антител (например, SGN-33), конъюгаты лекарственных средств против антимиелоидных антител (например, Mylotarg®).

Настоящее изобретение включает способ лечения хронической лимфоцитарной лейкемии (CLL) у млекопитающих (например, человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения Формулы I и/или его сольватов, гидратов и/или солей, или их композиций, как самостоятельно, так и в комбинации со вторым химиотерапевтическим средством, таким как флударабин, циклофосфамид, терапевтические средства против антител В-клеток (например, ритуксан и/или дацетузумаб).

Настоящее изобретение включает спобоб лечения хронического миелолейкоза (CML) у млекопитающих (например, человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения Формулы I и/или его сольватов, гидратов и/или солей, или их композиций, как самостоятельно, так и в комбинации со вторым химиотерапевтическим средством, таким как ингибитор BCR-abl (например, иматиниб, нилотиниб, и/или дазатиниб).

Настоящее изобретение включает спобоб лечения миелодиспластических заболеваний (MDS) и миелопролиферативных расстройств, включая полицитемию (PV), эссенциальную тромбоцитемию (ET) или миелофиброз (MF), у млекопитающих (например, человека), включающий введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения Формулы I и/или его сольватов, гидратов и/или солей, или их композиций, как самостоятельно, так и в комбинации.

Настоящее изобретение включает способ применения настоящих соединений для in vitro, in situ, и in vivo диагностики и лечения клеток млекопитающих, организма или связанных с ними патологических состояний.

Введение соединений настоящего изобретения (в дальнейшем ʺактивное вещество(а)ʺ) может быть осуществлено любыми способами, которые включают доставку соединений к месту их действия. Данные способы включают пероральные пути, интрадуоденальные пути, парентеральные инъекции (включая внутривенные, подкожные, внутримышечные, внутрисосудистые или инфузии), топикальное, ингаляции или ректальное введение.

Количество активного вещества будет зависеть от субъекта лечения, тяжести заболевания или патологических условий, скорости введения, доступности вещества и предписаний врача. Однако, эффективная дозировка находится в диапазоне от приблизительно 0.001 до приблизительно 100 мг на кг тела в день, предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 35 мг/кг/день, в единственной или разделенных дозах. Для 70-килограммового человека такое количество составило бы приблизительно от 0,05 до 7 г в день, предпочтительно от приблизительно 0.05 до приблизительно 2.5 г/день. В некоторых случаях, уровни дозировки меньшие чем нижний предел вышеупомянутого диапазона могут быть более чем подходящими, в то время как в других случаях еще большие дозы могут использоваться, не вызывая вредных побочных эффектов, при условии, что такие большие дозы сначала разделены на несколько маленьких доз для назначения в течение дня.

Активное вещество может применяться в качестве единственного лечения или в комбинации с одним или более химиотерапевтическими средствами, например, которые описаны в настоящем изобретении. Такое объединенное лечение может быть достигнуто посредством одновременного, последовательного или отдельного дозирования отдельных компонентов лечения.

Фармацевтическая композиция может, например, быть в форме, подходящей для перорального приема в виде таблетки, капсулы, пилюли, порошка, средства с длительным высвобождением, раствора, суспензии, в виде стерильного раствора, суспензии или эмульсии для парентеральной инъекции, для местного применения в виде мази или крема или для ректального введения в виде свечей. Фармацевтическая композиция может быть в единичной дозированной форме, подходящей для однократного приема или для точных доз. Фармацевтическая композиция будет включать обычный фармацевтический носитель или наполнитель и соединение согласно настоящему изобретению в качестве активного компонента. Кроме того, она может включать другие лекарственные или фармацевтические агенты, носители, вспомогательные вещества и т.д.

Примеры форм для парентерального введения включают растворы или суспензии соединений Формулы I в стерильных водных растворах, например, водном пропиленгликоле или растворе декстрозы. Такие дозированные формы могут быть буферизованы, если необходимо, подходящим способом.

Подходящие фармацевтические носители включают инертные разбавители или наполнители, воду и различные органические растворители. Фармацевтические композиции, если желательно, могут содержать дополнительные компоненты, такие как ароматизаторы, связывающие вещества, наполнители и т.п.. Таким образом, для перорального приема, таблетки, содержащие различные наполнители, такие как лимонная кислота, могут использоваться вместе с различными разрыхлителями, такими как крахмал, альгиновая кислота и некоторые сложные силикаты и со связующими агентами, такими как сахароза, желатин и камедь. Дополнительно, любриканты, такие как стеарат магния, лаурилсульфат натрия и тальк часто полезны при изготовлении таблеток. Твердые композиции подобного типа также могут быть использованы в мягко- и твердонаполненных желатиновых капсулах. Предпочтительные материалы, таким образом, включают лактозу или молочный сахар и высокомолекулярные полиэтиленгликоли. Когда для перорального приема желательно использовать водные суспензии или настойки, активное вещество в их составе может быть объединено с различными подсластителями или ароматизаторами, пигментами или красителями и, если желательно, эмульгирующими или суспендирующими агентами, вместе с разбавителями, такими как вода, этанол, пропиленгликоль, глицерин или их комбинации.

Способы получения различных фармацевтических композиций с определенным количеством активного вещества известны, или будут очевидны, для квалифицированных специалистов. Для примера, см. Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Ester, Pa., 15.sup.th Edition (1975).

ВВЕДЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ ФОРМУЛЫ I

Соединения формулы I по изобретению могут быть введены любым способом, соответствующим состоянию, подлежащему лечению. Подходящие способы включают пероральный, парентеральный (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное, внутриартериальное, внутрикожное, интратекальное и эпидуральное введение), трансдермальный, ректальный, назальный, местный (включа буккальный и сублингвальный), вагинальный, внутрибрюшинный, внутрилегочный и интраназальный. Для местной иммуносупрессивной терапии соединения могут быть введены внутриочаговым способом, в том числе перфузией или иным способом контактирования трансплантата с ингибитором перед трансплантацией. Следует понимать, что предпочтительный путь может изменяться в зависимости от, например, состояния реципиента. Когда соединение вводят перорально, оно может быть приготовлено в виде пилюли, капсулы, таблетки и т.д. вместе с фармацевтически приемлемым носителем или эксципиентом. В случае, когда соединение вводят парентерально, его можно приготовить с фармацевтически приемлемым парентеральным носителем и в единичной дозированной формы для инъекций, как подробно описано ниже.

Доза для лечения людей может составлять от приблизительно 10 мг до приблизительно 1000 мг соединения формулы I. Обычная доза может составлять от приблизительно 100 мг до приблизительно 300 мг соединения. Доза может быть введена один раз в день (QID), два раза в день (BID) или чаще, в зависимости от фармакокинетических и фармакодинамических свойств, включая всасывание, распределение, метаболизм и выведение конкретного соединения. Кроме того, на дозировку и режим введения могут оказывать влияние факторы токсичности. При пероральном введении пилюли, капсулы или таблетки могут поступать в организм ежедневно или реже в течение определенного периода времени. Лечение можно повторить в виде нескольких циклов терапии.

СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ СОЕДИНЕНИЯМИ ФОРМУЛЫ I

Соединения по настоящему изобретению могут применяться для лечения гиперпролиферативных заболеваний, состояний и/или расстройств, включая, без ограничения, такие, которые характеризуются сверхэкспрессией Pim киназ, например, Pim-1, Pim-2 и Pim-3 киназы. Таким образом, другой аспект настоящего изобретения относится к способам лечения или профилактики заболеваний или состояний, которые можно лечить или предупреждать посредством ингибирования Pim киназы. В одном варианте осуществления способ включает введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его стереоизомера, геометрического изомера, таутомера или фармацевтически приемлемой соли. В одном варианте осуществления пациента-человека лечат соединением формулы I и фармацевтически приемлемым носителем, адъювантом или наполнителем, где указанное соединение формулы I присутствует в количестве, достаточном для обнаруживаемого ингибирования активности Pim киназы.

Рак, который можно лечить в соответствии со способами по настоящему изобретению, включает, без ограничения, рак молочной железы, яичников, шейки матки, предстательной железы, яичек, мочеполовых путей, пищевода, гортани, глиобластомы, нейробластомы, рак желудка, кожи, кератоакантому, рак легкого, плоскоклеточную карциному, крупноклеточный рак, немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), мелкоклеточный рак, аденокарциному легких, костей, толстой кишки, аденому, поджелудочной железы, аденокарциному, щитовидной железы, фолликулярный рак, недифференцированную карциному, папиллярную карциному, семиному, меланому, саркому, рак мочевого пузыря, рак печени и желчных протоков, рак почки, миелоидные нарушения, лимфоидные нарушения, рак ʺволосатыхʺ клеток, ротовой полости и глотки (пероральный), губ, языка, рта, глотки, тонкой кишки, прямой и ободочной кишок, толстой кишки, прямой кишки, мозга и центральной нервной системы, лимфомы и лейкемии.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединению по настоящему изобретению для применения при лечении заболеваний или состояний, описанных здесь, у млекопитающего, например, человека, страдающего от такого заболевания или состояния. Также предложено применение соединения по данному изобретению при изготовлении лекарственного средства для лечения заболеваний и состояний, описанных здесь, у теплокровного животного, например, млекопитающего, например, человека, страдающего от такого расстройства.

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ

Для того чтобы использовать соединение формулы I для терапевтического лечения (включая профилактическое лечение) млекопитающих, включая человека, оно обычно приготовлено в соответствии со стандартной фармацевтической практикой в виде фармацевтической композиции. В соответствии с этим аспектом изобретения предлагается фармацевтическая композиция, содержащая соединение по настоящему изобретению в сочетании с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

Один вариант осуществления изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель, скользящее вещество, разбавитель или эксципиент.

Один вариант осуществления изобретения включает способ получения фармацевтической композиции, который включает объединение соединения по настоящему изобретению с фармацевтически приемлемым носителем.

Один из вариантов осуществления изобретение включает фармацевтическую композицию, как описано выше, дополнительно содержащую дополнительный терапевтический агент, выбранный из химиотерапевтического агента, противовоспалительного агента, иммуномодулирующего агента, нейротропного фактора, агента для лечения сердечно-сосудистого заболевания, агента для лечения заболеваний печени, противовирусного агента, агента для лечения заболеваний крови, агента для лечения диабета и агента для лечения иммунодефицитных состояний.

Типичную композицию получают смешиванием соединения формулы I и носителя, разбавителя или эксципиента. Подходящие носители, разбавители и эксципиенты хорошо известны специалистам в данной области техники и включают материалы, такие как углеводы, воски, водорастворимые и/или набухающие в воде полимеры, гидрофильные или гидрофобные материалы, желатин, масла, растворители, воду и т.п. Использование конкретного носителя, разбавителя или эксципиента будет зависеть от средств и цели, для которой соединение по настоящему изобретению применяется. Растворители обычно выбирают на основе растворителей, признанных специалистами в данной области техники как безопасные (GRAS) для введения млекопитающим. В общем, безопасные растворители являются нетоксичными водными растворителями, такими как вода и другие нетоксичные растворители, которые растворяются или смешиваются с водой. Подходящие водные растворители включают воду, этанол, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль (например, ПЭГ 400, ПЭГ 300), и т.д. и их смеси. Композиции могут также включать один или более буферов, стабилизирующих агентов, поверхностно-активных веществ, смачивающих агентов, смазывающих агентов, эмульгаторов, суспендирующих агентов, консервантов, антиоксидантов, кроющие агенты, скользящие вещества, технологические добавки, красители, подсластители, отдушки, ароматизаторы и другие известные добавки, обеспечивающие улучшенные потребительские качества препарата (то есть, соединения по настоящему изобретению или его фармацевтической композиции) или помощь в изготовлении фармацевтического продукта (т.е. лекарственного средства).

Композиции могут быть приготовлены с использованием обычных процедур растворения и смешивания. Например, нерасфасованная лекарственная форма (например, соединение по настоящему изобретению или стабилизированные формы соединения формулы I (например, комплекс с производным циклодекстрина или другим известным агентом комплексообразования) растворяют в подходящем растворителе в присутствии одного или более эксципиентов, описанных выше. Соединение по настоящему изобретению обычно приготавливают в виде фармацевтических дозированных форм для обеспечения легко контролируемую дозировку препарата и обеспечить соблюдение пациентом предписанного режима.

Фармацевтическая композиция (или состав) для применения могут быть упакованы различными способами, в зависимости от способа, используемого для введения препарата. Как правило, товар для распространения включает в себя контейнер, с размещенной в нем для хранения фармацевтической композиции в соответствующей форме. Подходящие контейнеры хорошо известны специалистам в данной области техники и включают такие материалы, как бутылки (пластик и стекло), саше, ампулы, пластиковые мешки, металлические цилиндры, и т.п. Контейнер может также включать в себя защитный механизм для предотвращения неосторожного доступа к содержимому упаковки. Кроме того, на контейнере может находиться этикетка, которая описывает содержимое контейнера. Этикетка может также включать соответствующие предупреждения.

Фармацевтические композиции соединений по настоящему изобретению могут быть получены для различных путей и типов введения. Например, соединение формулы I, имеющее желаемую степень чистоты, возможно может быть смешано с фармацевтически приемлемыми разбавителями, носителями, эксципиентами или стабилизаторами (Remington's Pharmaceutical Sciences (1980) 16th edition, Osol, A. Ed.), в виде лиофилизированной композиции, измельченного порошка или водного раствора. Композиция может быть получена путем смешивания при температуре окружающей среды при соответствующем рН и в нужной степени чистоты, с физиологически приемлемым носителем, то есть носители, которые являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозах и концентрациях. РН композиции в основном зависит от конкретного применения и концентрации соединения, но может варьироваться от примерно 3 до примерно 8. Композиция в ацетатном буфере при рН 5 является подходящим воплощением.

Соединение по настоящему изобретению для применения в настоящем изобретении, предпочтительно, стерильны. В частности, композиции, которые будут применяться для введения in vivo, должны быть стерильными. Такую стерилизацию легко осуществлять фильтрацией через стерильные фильтрующие мембраны.

Соединение обычно может храниться в виде твердой композиции, лиофилизированной композиции или в виде водного раствора.

Фармацевтические композиции по изобретению, содержащие соединение формулы I будут приготовлены, дозированы и введены таким образом, т.е. в количествах, концентрации, графиках, курсами, носителями и путями введения, в соответствии с надлежащей медицинской практикой. Факторы для рассмотрения в данном контексте включают конкретное заболевание, подлежащее лечению, конкретного млекопитающего, подвергаемого лечению, клиническое состояние конкретного пациента, причину расстройства, место доставки агента, способ введения, схему введения и другие факторы, известные практикующим врачам. ʺТерапевтически эффективное количествоʺ соединения для введения будет определяться указанными факторами и минимальным количеством, необходимым для профилактики, облегчения или лечения заболеваний, связанных с факторами свертывания крови. Такое количество предпочтительно ниже токсичного количества для пациента или количества, делающего пациента значительно более восприимчивым к кровотечению.

В качестве общего предложения, начальное фармацевтически эффективное количество соединения формулы I, вводимого парентерально на одну дозу будет находиться в диапазоне от приблизительно 0,01-100 мг/кг, в частности от приблизительно 0,1 до 20 мг/кг веса тела пациента в день, при этом типичный первоначальный диапазон используемого соединения от 0,3 до 15 мг/кг/день.

Приемлемые разбавители, носители, эксципиенты и стабилизаторы являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозах и концентрациях и включают буферы, такие как фосфат, цитрат и другие органические кислоты, антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (такие как хлорид октадецилдиметилбензиламмония; хлорид гексаметония; хлорид бензалкония, хлорид бензетония; фенол, бутиловый или бензиловый спирт; алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен, катехол, резорцин, циклогексанол, 3-пентанол и м-крезол); полипептиды с низкой молекулярной массой (приблизительно менее 10 остатков); белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон, аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу и декстрины; хелатирующие агенты, такие как EDTA; сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; комплексы металлов (например, Zn-белок), и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие как TWEEN™, или PLURONICS (или полиэтиленгликоль (ПЭГ). Активные фармацевтические ингредиенты могут быть также заключены в микрокапсулы, полученные, например, способами коацервации или путем межфазной полимеризации, например гидроксиметилцеллюлозные или желатиновые микрокапсулы и поли(метилметакрилатные) микрокапсулы, соответственно, в коллоидные системы доставки лекарственных средств (например, липосомы, альбуминовые микросферы, микроэмульсии, наночастицы и нанокапсулы) или в макроэмульсии. Такие способы описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980).

Могут быть получены препараты соединений формулы I с замедленным высвобождением. Подходящие примеры препаратов с замедленным высвобождением включают полупроницаемые матрицы из твердых гидрофобных полимеров, содержащие соединение формулы I, где матрицы находятся в виде формованных изделий, например, пленок или микрокапсул. Примеры матриц с замедленным высвобождением включают сложные полиэфиры, гидрогели (например, поли(2-гидроксиэтил-метакрилат) или поли(виниловый спирт)), полилактиды (US 3773919), сополимеры L-глутаминовой кислоты и гамма-этил-L-глутамата, неразлагающийся этилен-винилацетат, разлагаемые сополимеры молочной и гликолевой кислоты, такие как LUPRON DEPOT™ (инъецируемые микросферы, состоящие из сополимера молочной и гликолевой кислот и ацетата лейпролида), и поли-D-(-)-3-гидроксимасляную кислоту.

Композиции включают такие, которые подходят для способов введения описанных в настоящем изобретении. Композиции могут быть удобно представлены в виде единичной дозированной форме и могут быть приготовлены любым из способов, хорошо известных в области фармацевтики. Способы и композиции, в основном, можно найти в Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, PA). Такие способы включают стадию ассоциации активного ингредиента с носителем, который состоит из одного или нескольких вспомогательных ингредиентов. В общем, композиции получают путем равномерного и тщательного смешивания активного ингредиента с жидкими носителями или тонко измельченными твердыми носителями или и теми и другими, а затем, если необходимо, формованием продукта.

Композиции соединение формулы I, пригодные для перорального введения могут быть приготовлены в виде отдельных единиц, таких как пилюли, капсулы, сашеты или таблетки, каждая из которых содержит определенное количество соединения формулы I.

Прессованные таблетки могут быть получены прессованием в соответствующем аппарате активного ингредиента в свободно-текучей форме, такой как порошок или гранулы, возможно смешанного со связующим веществом, смазывающим веществом, инертным разбавителем, консервантом, поверхностно-активным или диспергирующим агентом. Формованные таблетки могут быть изготовлены формованием в соответствующем аппарате смеси порошкообразного активного ингредиента, увлажненного инертным жидким разбавителем. Таблетки необязательно можно покрывать оболочкой или наносить на них бороздки и, возможно, приготовить таким образом, чтобы обеспечить замедленное или контролируемое высвобождение активного ингредиента из них.

Таблетки, пастилки, таблетки для рассасывания, водные или масляные суспензии, диспергируемые порошки или гранулы, эмульсии, твердые или мягкие капсулы, например желатиновые капсулы, сиропы или эликсиры могут быть приготовлены для перорального применения. Композиции соединений формулы I, предназначенные для перорального применения, могут быть получены в соответствии с любым способом, известным в данной области для производства фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать один или более агентов, в том числе подсластители, ароматизаторы, красители и консерванты для обеспечения приятного вкуса препарата. Таблетки, содержащие активный ингредиент в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемым эксципиентом, который подходит для изготовления таблеток, являются приемлемыми. Эти наполнители могут представлять собой, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция или карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция или натрия; гранулирующие и дезинтегрирующие агенты, такие как кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связующие агенты, такие как крахмал, желатин или камедь; и смазывающие агенты, такие как стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Таблетки могут быть непокрытыми или могут быть покрыты оболочкой известными способами, в том числе микрокапсулирования для задержки дезинтеграции и адсорбции в желудочно-кишечном тракте и, тем самым, обеспечения пролонгированного действия в течение более длительного периода. Например, может быть использован материал для временной задержки, такой как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, самостоятельно или вместе с воском.

Для лечения глаз или других наружных тканей, например рта и кожи, композиции предпочтительно применяются в качестве местной мази или крема, содержащих активный ингредиент(ы) в количестве, например, от 0,075 до 20% мас./мас. При приготовлении в виде мази, активные ингредиенты могут быть использованы либо с парафиновой или смешивающейся с водой мазевой основой. Альтернативно, активные ингредиенты могут быть приготовлены в виде крема с основой масло-в-воде.

Если необходимо водная фаза кремовой основы может содержать многоатомный спирт, т.е. спирт, имеющий две или более гидроксильные группы, такие как пропиленгликоль, бутан-1,3-диол, маннит, сорбит, глицерин и полиэтиленгликоль (включая ПЭГ 400) и их смеси. Композиции для местного применения могут при необходимости включать соединение, которое увеличивает поглощение или проникновение активного ингредиента через кожу или другие пораженные участки. Примеры таких усилителей проникновения через кожу включают диметилсульфоксид и родственные аналоги.

Масляная фаза эмульсий по настоящему изобретению может быть составлена из известных ингредиентов известным способом. В то время как фаза может содержать только эмульгатор, она желательно содержит смесь по меньшей мере одного эмульгатора с жиром или маслом, или и с жиром и маслом. Предпочтительно, гидрофильный эмульгатор включают вместе с липофильным эмульгатором, который действует в качестве стабилизатора. Также предпочтительно включение как масла, так и жира. Вместе эмульгатор(ы) с или без стабилизатора(ов) образует так называемый эмульгирующий воск и воск вместе с маслом и жиром образуют так называемую эмульгирующую основу мази, которая образует масляную дисперсную фазу кремовых композиций. Эмульгаторы и стабилизаторы эмульсии, пригодные для использования в композиции по изобретению, включают Tween® 60, Span® 80, цетостеариловый спирт, бензиловый спирт, миристиловый спирт, глицерилмоностеарат и лаурилсульфат натрия.

Водные суспензии соединений формулы I содержат активные вещества в смеси с эксципиентами, подходящими для получения водных суспензий. Такие эксципиенты включают суспендирующий агент, такой как натрий- карбоксиметилцеллюлоза, кроскармеллоза, повидон, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и гуммиарабик, и диспергирующие или смачивающие агенты, такие как природные фосфатиды (например, лецитин), продукты конденсации алкиленоксида с жирной кислотой (например, полиоксиэтиленстеарат), продукт конденсации этиленоксида с длинноцепочечным алифатическим спиртом (например, гептадекаэтиленоксицетанол), продукты конденсации этиленоксида с неполным эфиром жирной кислоты и гекситангидрида (например, моноолеат полиоксиэтиленсорбитана). Водная суспензия может также содержать один или более консервантов, таких как этил- или н-пропил- п-гидроксибензоат, один или более красителей, один или более ароматизирующих агентов и один или более подсластителей, таких как сахароза или сахарин.

Фармацевтические композиции соединений формулы I могут быть в форме стерильного инъекционного препарата, например стерильной водной или маслянистой суспензии для инъекций. Эти суспензии могут быть получены в соответствии с известными способами с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов, которые были упомянуты выше. Стерильный инъекционный препарат может также представлять собой стерильный инъекционный раствор или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например раствор в 1,3-бутандиоле или приготовлен в виде лиофилизированного порошка. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые можно использовать, можно указать воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, обычно могут быть использованы стерильные нелетучие масла в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для данной цели может быть использовано любое мягкое нелетучее масло, в том числе синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, также могут быть использованы при получении препаратов для инъекций.

Количество активного ингредиента, которое можно комбинировать с материалом носителя для получения единичной дозированной формы, будет варьироваться в зависимости от подвергаемого лечению субъекта и конкретного способа введения. Например, композиция с замедленным высвобождением, предназначенная для перорального введения человеку, может содержать приблизительно от 1 до 1000 мг активного вещества, смешанного с соответствующим и подходящим количеством материала носителя, которое может варьировать от примерно 5 до примерно 95% от общей композиции (мас.:мас.). Фармацевтическая композиция может быть приготовлена для предоставления легко измеримых количеств для введения. Например, водный раствор, предназначенный для внутривенной инфузии может содержать от приблизительно 3 до 500 мкг активного ингредиента на миллилитр раствора для проведения инфузии подходящего объема со скоростью примерно 30 мл/ч.

Композиции, пригодные для парентерального введения включают водные и неводные стерильные инъекционные растворы, которые могут содержать антиоксид анты, буферы, бактериостатические факторы и растворенные вещества, которые придают композиции изотоничность с кровью предполагаемого реципиента, а также водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие агенты и загустители.

Композиции, пригодные для местного введения в глаз, включают также глазные капли, в которых активный ингредиент растворен или суспендирован в подходящем носителе, особенно в водном растворителе для активного ингредиента. Активный компонент предпочтительно присутствует в таких композициях в концентрации от приблизительно 0,5 до 20% мас./мас., например, приблизительно от 0,5 до 10% мас./мас., например, приблизительно 1,5% мас./мас.

Композиции, пригодные для местного применения в полости рта, включают таблетки для рассасывания, содержащие активный ингредиент в ароматизированной основе, обычно сахарозе и гуммиарабике или трагаканте, пастилки, содержащие активный ингредиент в инертной основе, такой как желатин и глицерин, или сахарозе и гуммиарабике; и растворы полоскания, содержащие активный ингредиент в соответствующем жидком носителе.

Композиции для ректального введения могут быть представлены в виде суппозиториев с подходящим основанием, содержащих, например, масло какао или салицилат.

Композиции, подходящие для внутрилегочного или назального введения обладают, например, размером частиц в диапазоне от 0,1 до 500 мкм (в том числе размером частиц в диапазоне между 0,1 и 500 мкм с шагом, таким как 0,5, 1, 30 мкм, 35 мкм, и т.д.), которые вводят путем быстрой ингаляции через носовой ход или при вдыхании через рот так, чтобы достигать альвеолярных мешочков. Подходящие композиции включают водные или масляные растворы активного ингредиента. Композиции, пригодные для аэрозольного введения или введения в виде сухого порошка могут быть получены в соответствии с обычными способами и могут доставляться с другими терапевтическими агентами, такими как соединения, до сих пор использующиеся при лечении или профилактике расстройств, как описано ниже.

Композиции, пригодные для вагинального введения, могут быть представлены в виде вагинальных суппозиториев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или спреев, содержащих в дополнение к активному ингредиенту такие носители, которые известны в данной области техники как подходящие.

Композиции могут быть упакованы в однодозовый или в многодозовый контейнеры, например, запечатанные ампулы и флаконы, и могут храниться в высушенном сублимацией (лиофилизированном) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например, воды, для инъекций непосредственно перед использованием. Приготовленные для немедленного приема растворы и суспензии для инъекций получают из стерильных порошков, гранул и таблеток ранее описанного вида. Предпочтительные единичные дозированные формы представляют собой те, которые содержат дневную дозу или единичную дневную суб-дозу, как описано выше, или соответствующую ее часть, активного ингредиента.

В настоящем изобретении также предложены ветеринарные композиции, содержащие по меньшей мере один активный ингредиент, как определено выше, вместе с ветеринарным носителем. Ветеринарными носителями являются вещества, используемые для введения композиции, они могут быть твердыми, жидкими или газообразными веществами, которые также являются инертным или приемлемыми в ветеринарии и совместимыми с активным ингредиентом. Эти ветеринарные композиции могут быть введены парентерально, перорально или любым другим желаемым способом.

КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕРАПИЯ

Соединения формулы I могут применяться самостоятельно или в комбинации с другими терапевтическими агентами для лечения заболевания или расстройства, описанного здесь, например, гиперпролиферативных расстройств (например, рака). В некоторых воплощениях соединение формулы I комбинируют в фармацевтической комбинированной композиции или режиме дозирования в качестве комбинированной терапии, со вторым соединением, которое обладает противовоспалительными свойствами или которое является полезным для лечения гиперпролиферативных расстройств (например, рака). Второе соединение фармацевтической комбинированной композиции или режима дозирования предпочтительно имеет взаимодополняющую активность по отношению к соединению формулы I, таким образом, что они не оказывают отрицательного влияния друг на друга. Такие соединения предпочтительно присутствуют в комбинации в количествах, которые эффективны для заданных целей. В одном воплощении композиция по изобретению включает соединение формулы I в комбинации с химиотерапевтическим агентом, таким как здесь описано.

Комбинированное лечение можно проводить в виде одновременного или последовательного режима. При последовательном введении комбинации можно вводить в два или более приемов. Комбинированное введение включает совместное введение с использованием отдельных препаратов или одного фармацевтического препарата и последовательное введение в любом порядке, где предпочтительно имеется период времени, когда оба (или все) активные средства одновременно проявляют свои биологические активности.

Подходящие дозировки для любого из вышеуказанных совместно вводимых агентов являются такими, как здесь применяются и могут быть снижены за счет комбинированного действия (синергии) нового идентифицированного агента и других химиотерапевтических агентов или лечения.

Комбинированная терапия может обеспечить ʺсинергиюʺ и оказаться ʺсинергичнойʺ, т.е. достигнутый эффект в случае, когда активные ингредиенты используются вместе, больше, чем сумма эффектов полученных при использовании соединений по отдельности. Синергетический эффект может достигаться в случаях, когда активные ингредиенты являются: (1) совместно приготовлены и введены одновременно или доставлены в комбинированной единичной дозированной форме, (2) доставляются чередованием или одновременно в виде отдельных препаратов, или (3) при некоторых других режимах. При доставке чередующейся терапией, синергетический эффект может быть достигнут при последовательных введении или доставке соединений, например, разными инъекциями с помощью отдельных шприцов, отдельными таблетками или капсулами, или отдельными инфузиями. В общем, во время чередующейся терапии эффективную дозу каждого активного ингредиента вводят последовательно, то есть сериями, тогда как в комбинированной терапии, эффективные дозы двух или более активных ингредиентов вводят вместе.

В одном из воплощений анти-раковой терапии, соединение формулы I, или его стереоизомер, геометрический изомер, таутомер, сольват, метаболит или фармацевтически приемлемая соль или пролекарство, могут быть комбинированы с другими химиотерапевтическими агентами, гормональными агентами или антителами, такими как описано здесь, а также в комбинации с хирургической терапией и лучевой терапией. Комбинированная терапия по настоящему изобретению включает, таким образом, введение, по меньшей мере, одного соединения формулы I, или его стереоизомера, геометрического изомера, таутомера, сольвата, метаболита или фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, а также использование по меньшей мере одного другого способа лечения рака. Количества соединения(ий) формулы I и другого фармацевтически активного химиотерапевтического агента(ов) и относительный временной режим введения будут выбраны для достижения желаемого комбинированного терапевтического эффекта.

МЕТАБОЛИТЫ СОЕДИНЕНИЙ ФОРМУЛЫ I

Кроме того, подпадающими под объем настоящего изобретения являются продукты метаболизма in vivo соединений формулы I, описанных здесь. Такие продукты могут быть результатом, например, окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, дезамидирования, этерификации, деэтерификации, ферментативного расщепления и т.п., вводимого соединения. Соответственно, изобретение включает метаболиты соединений формулы I, в том числе соединений, полученных способом, включающим контактирование соединения по настоящему изобретению с млекопитающим в течение времени, достаточном для получения его метаболического продукта.

Метаболиты обычно определяются путем получения меченого (например, 14С или 3Н) изотопом соединения по настоящему изобретению, его введения парентерально в детектируемой дозе (например, больше чем примерно 0,5 мг/кг) животному, такому как крыса, мышь, морская свинка, обезьяна или человеку, выдерживание достаточного времени для обмена веществ (обычно около от 30 секунд до 30 часов) и выделения продуктов его переработки из мочи, крови или других биологических образцов. Эти продукты легко выделить поскольку они являются мечеными (другие выделяют с помощью антител, способных связывать эпитопы, оставшиеся в метаболитах). Структуры метаболитов определяются обычным образом, например, MS, LC/MS или ЯМР-анализом. В общем, анализ метаболитов осуществляется таким же образом, как и обычные исследования метаболизма лекарств, хорошо известные специалистам в данной области техники. Метаболиты, до тех пор, пока для них не нашли другого в живом организме, могут быть полезны в диагностических анализах для терапевтического дозирования соединений по изобретению.

ГОТОВЫЕ ИЗДЕЛИЯ

В другом воплощении изобретения предложено изделие, или ʺнаборʺ, содержащие вещества, пригодные для лечения заболеваний и расстройств, описанных выше. Набор включает контейнер, содержащий соединение формулы I. Этот набор может дополнительно включать этикетку или листок-вкладыш на или вместе с контейнером. Термин ʺлисток-вкладышʺ используется для обозначения инструкций, обычно включаемых в коммерческие упаковки терапевтических продуктов, которые содержат информацию о показаниях, использовании, дозировке, введении, противопоказаниях и/или предупреждениях, касающихся применения таких терапевтических продуктов.

Подходящие контейнеры включают, например, бутылки, флаконы, шприцы, блистерную упаковку и т.п. Контейнер может быть выполнен из различных материалов, таких как стекло или пластик. Контейнер может содержать соединение формулы I или II или их композицию, которые являются эффективными для лечения состояния, и может иметь стерильное входное отверстие (например, контейнер может представлять собой пакет для внутривенного раствора или флакон, имеющий пробку, прокалываемую иглой для подкожной инъекции). По меньшей мере один активный агент в композиции представляет собой соединение формулы I. На этикетке или вкладыше указывается, что композиция используется для лечения выбранного состояния, такого как рак. Кроме того, этикетка или вкладыш могут указывать, что пациент, подлежащий лечению, обладает расстройством, таким как гиперпролиферативные расстройства, нейродегенерация, гипертрофия сердца, боль, мигрень или нейротравматические заболевания или случаи. В одном варианте осуществления этикетка или вкладыш указывает, что композиция, содержащая соединение формулы I, может быть использована для лечения расстройства являющегося результатом аномального роста клеток. На этикетке или вкладыше также может быть показано, что композиция может быть использована для лечения других расстройств. Альтернативно или дополнительно, изделие может также включать второй контейнер, содержащий фармацевтически приемлемый буфер, такой как бактериостатическая вода для инъекций (BWFI), фосфатно-солевой буфер, раствор Рингера и раствор декстрозы. Он может дополнительно включать другие вещества, желательные с коммерческой точки зрения и точки зрения пользователя, включая другие буферы, разбавители, фильтры, иглы и шприцы.

Набор может дополнительно содержать инструкции по введению соединения формулы I, и, если присутствует, второй фармацевтической композиции. Например, если набор содержит первую композицию, содержащую соединение формулы I, и вторую фармацевтическую композицию, набор может дополнительно содержать инструкции для одновременного, последовательного или раздельного введения первой и второй фармацевтических композиций пациенту, нуждающемуся в этом.

В другом воплощении, наборы подходят для доставки твердых пероральных форм соединения формулы I, например, таблеток или капсул. Такой набор предпочтительно включает множество единичных доз. Такие наборы могут включать в себя карты, содержащие дозы, ориентированные в порядке их предполагаемого использования. Примером такого набора является ʺблистерʺ. Блистерные упаковки хорошо известны в упаковочной промышленности и широко используются для упаковки фармацевтических единичных дозированных форм. При желании может быть предложена памятка, например, в виде цифр, букв или другой маркировки или с календарем-вкладышем, обозначающим дни в графике лечения, согласно которому могут вводиться дозы.

Согласно одному воплощению набор может включать: (а) первый контейнер, с соединением формулы I, содержащиеся в нем, и, возможно, (б) второй контейнер со второй фармацевтической композицией, содержащейся в нем, причем вторая фармацевтическая композиция содержит второе соединение с анти-гиперпролиферативной активностью. Альтернативно или дополнительно, набор может также содержать третий контейнер, включающий фармацевтически приемлемый буфер, такой как бактериостатическая воде для инъекций (BWFI), фосфатно-солевой буфер, раствор Рингера и раствор декстрозы. Он может дополнительно включать другие вещества, желательные с коммерческой точки зрения или точки зрения пользователя, включая другие буферы, разбавители, фильтры, иглы и шприцы.

В некоторых других воплощениях, где набор содержит композицию формулы I и второй терапевтический агент, набор может включать контейнер для содержания отдельных композиций, такой как разделенный флакон или разделенный пакет из фольги, однако, отдельные композиции могут также содержаться в одном, цельном контейнере. Обычно набор включает инструкции по введению отдельных компонентов. Форма в виде набора особенно желательна, когда отдельные компоненты предпочтительно вводить в различных дозированных формах (например, пероральной и парентеральной), вводятся с различными интервалами дозирования, или при необходимости титрования отдельных компонентов комбинации лечащим врачом.

ПОЛУЧЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ ФОРМУЛЫ I

Соединения формулы I могут быть синтезированы способами синтеза, которые включают процессы аналогичные хорошо известным в области химии, в частности, в свете содержащегося здесь описания, и процессы, описанные для других гетероциклов в: Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, Editors Katritzky и Rees, Elsevier, 1997, например Volume 3; Liebigs Annalen der Chemie, (9): 1910-16, (1985); Helvetica Chimica Acta, 41: 1052-60, (1958); Arzneimittel-Forschung, 40(12): 1328-31, (1990), каждый из которых полностью включен посредством ссылки. Исходные материалы, как правило, доступны из коммерческих источников, таких как Aldrich Chemicals (Milwaukee, WI) или могут быть легко получены с использованием способов, хорошо известных специалистам в данной области (например, получение способами, в основном, описанными в Louis F. Fieser и Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, v. 1-23, Wiley, N.Y. (1967-2006 ed.), или Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl. ed. Springer-Verlag, Berlin, включая дополнения (также доступно через онлайн базу данных Beilstein).

Превращения синтетической химии и методологии защитных групп (протекция и депротекция) полезные при синтезе соединений Формулы I и необходимые реагенты и промежуточные соединения известны в уровне техники и включают, например, те, которые описаны в R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley and Sons (1999); и L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) и последующих их изданиях.

Соединения формулы I могут быть получены отдельно или в виде библиотек соединений, содержащих по меньшей мере 2, например от 5 до 1000 соединений, или от 10 до 100 соединений. Библиотеки соединений формулы I могут быть получены путем комбинаторного подхода ʺразделение и смешиваниеʺ или несколькими параллельными синтезами с использованием либо жидкофазной либо твердофазной химии, по методикам, известным специалистам в данной области. Таким образом, согласно еще одному аспекту изобретения предложена библиотека соединений, содержащая по меньшей мере два соединения или их фармацевтически приемлемые соли.

Общие Методики и Примеры предлагают иллюстративные способы для получения соединений формулы I. Специалистам в данной области техники должно быть понятно, что другие способы синтеза могут быть использованы для синтеза соединений Формулы I. Несмотря на то, что конкретные исходные вещества и реагенты изображены и описаны на Фигурах, в Общих Методиках и Примерах, исходные материалы и реагенты легко могут быть заменены другими аналогичными для получения различных производных и/или условий реакции. Кроме того, многие соединения примеров, полученные описанными способами, могут быть далее модифицированы в свете данного описания с использованием обычных химических реакций, хорошо известных специалистам в данной области.

При получении соединений формулы I, может быть необходима защита функциональных групп (например, первичных или вторичных аминов) промежуточных соединений. Необходимость такой защиты будет варьироваться в зависимости от природы функциональной группы и условий способов получения. Подходящие амино-защитных группы включают ацетил, трифторацетил, трет-бутоксикарбонил (BOC), бензилоксикарбонил (Cbz) и 9-флуоренметиленоксикарбонил (Fmoc). Необходимость в такой защите может быть легко определена специалистом в данной области. Для общего описания защитных групп и их использования, см. Т.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991.

СПОСОБЫ РАЗДЕЛЕНИЯ

В способах получения соединений Формулы I, может быть предпочтительным разделение продуктов реакции друг от друга и/или от исходных материалов. Целевые продукты каждой стадии или ряда стадий отделяют и/или очищают до желаемой степени однородности по общим методикам в данной области. Обычно такое разделение включает многофазную экстракцию, кристаллизацию из растворителя или смеси растворителей, дистилляцию, сублимацию или хроматографию. Хроматография может включать в себя любое количество способов, включая, например, обратнофазовую и с нормальной фазой; гель-фильтрацию, ионнообменную, высокого, среднего и низкого давления жидкостную хроматографию и устройства; аналитическую в малом масштабе; хроматографию псевдодвижущегося слоя (SMB) и препаративную тонкослойную хроматографию, а также способы тонкослойной хроматографии малого масштаба и флеш-хроматографию.

Другой класс способов разделения включает обработку смеси реагентом, избирательно связывающим или другим способом, делающим желаемый продукт, непрореагировавший исходный материал, продукт реакции т.п. отделяемым. Такие реагенты включают адсорбенты или абсорбенты, такие как активированный уголь, молекулярные сита, ионообменные среды и т.п. В альтернативном варианте реагенты могут быть кислотами в случае оснований, оснований, в случае кислотного материала, связывающими реагентами, такими как антитела, белки, селективными хелатирующими агентами, такими как краун-эфиры, жидкими/жидкими ионными реагентами экстракции (LIX) и т.п.

Выбор соответствующих способов разделения, зависит от природы используемых материалов, таких как температура кипения и молекулярный вес при дистилляции и сублимации, наличие или отсутствие полярных функциональных групп при хроматографии, стабильность материалов в кислой и щелочной среде в многофазной экстракции, и т.п.

Смеси диастереомеров могут быть разделены на индивидуальные диастереомеры на основе их физических и химических различий способами, хорошо известными специалистам в данной области техники, например, с помощью хроматографии и/или фракционной кристаллизации. Энантиомеры могут быть разделены путем превращения энантиомерной смеси в диастереомерную смесь реакцией с соответствующим оптически активным соединением (например, хиральным вспомогательным агентом, таким как хиральный спирт или хлорангидрид кислоты Мошера), разделением диастереомеров и преобразованием (например, гидролизом) отдельных диастереомеров в соответствующие чистые энантиомеры. Кроме того, некоторые из соединений по настоящему изобретению могут быть атропизомерами (например, замещенные биарилы) и рассматриваются в рамках объема настоящего изобретения. Энантиомеры могут быть разделены с использованием колонки хиральной ВЭЖХ.

Отдельный стереоизомер, например, энантиомер, по существу свободный от его стереоизомеров может быть получен разделением рацемической смеси с использованием такого способа, как образование диастереомеров с использованием оптически активного разделяющего агента (Eliel, Ε. and Wilen, S. ʺStereochemistry of Organic Compounds,ʺ John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994; Lochmuller, С.H., (1975) J. Chromatogr., 113(3): 283-302). Рацемические смеси хиральных соединений по изобретению могут быть разделены и выделены любым подходящим способом, включая: (1) формирование ионных диастереомерных солей с хиральными соединениями и разделение путем фракционной кристаллизации или других способов, (2) образование диастереомерных соединений с хиральными дериватизирующими реагентами, разделение диастереомеров и превращение в чистые стереоизомеры, и (3) разделение, по существу чистых или обогащенных стереоизомеров непосредственно в хиральных условиях, таких как хиральный абсорбент при ВЭЖХ или СКЖХ (Сверхкритическая жидкостная хроматография). См. White and Burnett (2005) Jour, of Chrom. A1074: 175-185 и ʺDrug Stereochemistry, Analytical Methods and Pharmacology,ʺ (1993) Irving W. Wainer, Ed., Marcel Dekker, Inc., New York.

По способу (1), диастереомерные соли могут быть получены реакцией энантиомерно чистых хиральных оснований, таких как бруцин, хинин, эфедрин, стрихнин-метил-6-фенилэтиламина (амфетамин), и т.п. с асимметричными соединениями, несущими кислотную функциональную группу, таких как карбоновые кислоты и сульфоновые кислоты. Диастереомерные соли могут быть активированы для разделения фракционной кристаллизацией или ионной хроматографией. Для разделения оптических изомеров аминосоединений, добавление хиральных карбоновых или сульфоновых кислот, таких как камфорсульфоновой кислоты, винной кислоты, миндальной кислоты или молочной кислоты может привести к образованию диастереомерных солей.

Альтернативно, по способу (2), субстрат для разделения подвергают взаимодействию с одним энантиомером хирального соединения с образованием диастереомерной пары (Е. and Wilen, S. ʺStereochemistry of Organic Compoundsʺ, John Wiley & Sons, Inc., 1994, p. 322). Диастереомерные соединения могут быть получены реакцией ассиметричных соединений с энантиомерно чистыми хиральными дериватизирующими реагентами, такими как ментилпроизводные, с последующим разделением диастереомеров и гидролизом с получением чистого или обогащенного энантиомера. Способ определения оптической чистоты включает получение хиральных сложных эфиров, например, ментиловых эфиров, например, (-)ментилхлорформиата, в присутствии основания, или эфира Мошера, альфа-метокси-альфа-(трифторметил)фенилацетата (Jacob III. J. Org. Chem. (1982) 47: 4165) и анализа спектра ЯМР 1Н в присутствии двух атропизомерных энантиомеров или диастереомеров. Стабильные диастереомеры атропизомерных соединений могут быть разделены и выделены нормальной и обращеннофазовой хроматографией в соответствии со способами разделения атропизомерных нафтил-изохинолинов (WO 96/15111). По способу (3), рацемическая смесь двух энантиомеров может быть разделена с помощью хроматографии с использованием хиральной неподвижной фазы (ʺChiral Liquid Chromatographyʺ (1989) W.J. Lough, Ed., Chapman and Hall, New York; Okamoto, J. Chromatogr., (1990) 513: 375-378). Обогащенные или очищенные энантиомеры можно выделить способами, используемыми для разделения других хиральных молекул с асимметричными атомами углерода, такими как оптическое вращение и круговой дихроизм.

ОСНОВНЫЕ МЕТОДИКИ ПОЛУЧЕНИЯ

На Фиг. 1 показан иллюстративный синтез 4-аминопиразоловых соединений 5. 4-нитро-1Н-пиразол 1 конвертируют в 2 посредством обработки основанием в подходящем растворителе или без него, с последующим добавлением алкилирующего агента, такого как диметилсульфат. Соединение 2 может быть конвертировано в 5-хлор-4-нитро-1Н-пиразол 3 посредством обработки основанием, таким как гексаметилдисилазид лития, или nBuLi в подходящем растворителе при подходящей температуре, таком как ТГФ при -78°С. Соединение 3 может быть конвертировано в соединение 4 посредством прямой SnAr, или катализируемой переходным металлом реакции кросс-сочетания, например реакционные условия Сузуки, Соногашири, Хека, Бухвальда, Голберга известными способами. 4-Аминопиразол 5 может быть синтезировано из 4 посредством подходящих способов восстановления, таких как обработка цинковым порошком и формиатом аммония в тетрагидрофуране, или гидрогенизирование с Н2 и катализатором переходного металла, такого как палладий на угле.

На Фиг. 2 показан иллюстративный синтез 4-карбокси-тиазолов 11 из гидроксамидных соединений 6. Восстановление соединения 6 посредством восстанавливающего реагента в подходящем растворителе, таком как Na2S2O3 в воде дает 7, которое может быть конвертировано в 8 посредством ацилирующего реагента в подходящем растворителе с подходящим основанием, таким как бензоилхлорид в дихлорметане с бикарбонатом натрия. Соединение 8 может быть конвертировано в 9 посредством реагента, сдержащего серу, в подходящем реагенте, таком как реактив Лавессона в пиридине, и защищено в соединение 10 посредством подходящей Вос-защитной группы. Эфирный гидролиз соединения 10 с использованием подходящего основания и растворителя, таких как LiOH в метаноле и воде дает 11.

На Фиг. 3 показан иллюстративный синтез 2-замещенных, 4-карбокси-5-аминотиазолов 11 посредством С-2 бромирования соединения 12 с последующим взаимодействием по Сузуки 13. Реакция связывания Сузуки типа полезна для присоединения гетероцикла или гетероарила посредством замещения галида во 2-ом положении тиазолового, пиридилового, пиразинилового или пиримидинилового кольца при синтезе соединений Формулы I. Например, 2-бром (или хлор) тиазол 11 может взаимодействовать с приблизительно 1.5 эквивалентами реагента арил-, гетероциклил- или гетероарилбороновой кислоты или эфира и избытком водного карбоната натрия в ацетонитриле. Добавляют каталитическое количество, или более, низковалентного палладиевого реагента, такого как бис(трифенилфосфин)палладия (II) дихлорид. Могут использоваться различные бороновые кислоты или бороновые эфиры. Бороновые эфиры включают пинаколиновые эфиры (4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил). Также, азот гетероцикла или гетероарила может быть защищен, например в виде N-THP. В некоторых случаях используют ацетат калия вместо карбоната натрия для доведения рН водного слоя. Реакция может быть нагрета до приблизительно 140-150°C при повышенном давлении в микроволновой печи, такой как Biotage Optimizer (Biotage, Inc.) в течении 10-30 минут. Содержимое экстраируют этилацетатом, или другим органическим растворителем. После эвапорации органического слоя продукт кросс-сочетания Сузуки может быть очищен на силикагеле с помощью обратно-фазовой ВЭЖХ.

Различные палладиевые катализаторы могут использоватся в течение стадии связывания Сузуки для образования иллюстративных соединений Формулы I. Низковалентные, Pd(II) и Pd(0) катализаторы могут быть использованы в реакции кросс-сочетания Сузуки, включая PdCl2(PPh3)2, Pd(t-Bu)3, PdCl2 dppf CH2Cl2, Pd(PPh3)4, Pd(Oac)/PPh3, Cl2Pd[(Pet3)]2, Pd(DIPHOS)2, Cl2Pd(Bipy), [PdCl(Ph2PCH2PPh2)]2, Cl2Pd[P(o-tol)3]2, Pd2(dba)3/P(o-tol)3, Pd2(dba)/P(фурил)3, Cl2Pd[Р(фурил)3]2, Cl2Pd(PmePh2)2, Cl2Pd[P(4-F-Ph)3]2, Cl2Pd[P(C6F6)3]2, Cl2Pd[P(2-COOH-Ph)(Ph)2]2, Cl2Pd[P(4-COOH-Ph)(Ph)2]2, и инкапсулированные катализаторы Pd EnCat™ 30, Pd EnCat™ TPP30, и Pd(II)EnCat™ BINAP30 (US 2004/0254066).

На Фиг. 4 показан иллюстративный синтез 5-азепанил-N-(пиразол-4-ил)тиазол-карбоксамидных соединений 17, полученных связыванием 4-амино,5-азепанил пиразоловых соединений 14 и 2-бром, 4-карбокси-5-аминотиазолов 11. Соединения 14 и 11 могут быть связаны с использованием реагента амидного связывания, такого как HATU, HBTU с подходящим растворителем, таким как дихлорметан или ДМФ. Связанное промежуточное соединение 15 может быть затем конвертировано в соединения 17 посредством депротекции с использованием подходящей кислоты или основания в растворителе, таком как HCL в диоксане и воде или трифторуксусная кислота в дихлорметане или K2CO3 в ацетонитриле. В дополнение, когда R5 представляет собой галогеновую группу, например, бром, соединения 15 могут быть подвергнуты реакции Сузуки или Стилла с получением соединений 16. Удаление защитных групп соединений формулы 16 как в кислых, так и в щелочных условиях с подходящей кислотой или основанием в подходящем растворителе, таком как HCl в диоксане и воде или трифторуксусная кислота в дихлорметане или K2CO3 в ацетонитриле, может дать соединения 17.

На Фиг. 5 показан иллюстративный синтез 6-амино-N-(пиразол-4-ил)пиридил-карбоксамидных соединений 21, полученных связыванием 4-амино,5-азепанил пиразоловых соединений 14 и 2-бром, 3-Вос-амино,6-карбокси- пиридиловых соединений 18. Соединения 14 и 18 могут быть связаны с использованием реагента амидного связывания, такого как HATU, HBTU с подходящим растворителем, таким как дихлорметан или ДМФ. Связанное промежуточное соединение 19 может быть подвергнуто реакции Сузуки или Стилла с получением соединений 20. Удаление защитной группы соединений 20 в кислой или щелочной среде с подходящей кислотой или основанием в подходящем растворителе, таком как HCl, в диоксане и воде или трифторуксусной кислоте в дихлорметане или K2CO3 в ацетонитриле, могут дать соединения 21.

На Фиг. 6 показан иллюстративный синтез 6-амино-N-(пиразол-4-ил)пиразин-карбоксамидных соединений 26 посредством связывания 4-амино,5-диазепанил пиразоловых соединений 22 и 2-бром,3-замещенных, 6-карбокси-5-аминопиразиниловых соединений 23. Соединения 22 и 23 могут быть связаны с использованием реагента амидного связывания, такого как HATU, HBTU с подходящим растворителем, таким как дихлорметан или ДМФ. Связанное промежуточное соединение 24 может быть подвергнуто реакции Сузуки или Стилла с получением соединений 25. Удаление защитной группы соединений 25 в кислой или щелочной среде с подходящей кислотой или основанием в подходящем растворителе, таком как HCl, в диоксане и воде или трифторуксусной кислоте в дихлорметане или K2CO3 в ацетонитриле, могут дать соединения 26.

На Фиг. 7 показан иллюстративный синтез 5-азидо-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепана 32 из 2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепина 27. Соединения 27 могут быть конвертированы в соединения 28 посредством обработки m-СРВА или аналогичными способами, описанными в литературе. Соединения 29 могут быть синтезированы из соединений 28 посредством открытия эпоксида азидом натрия в соответствии с описанными в литературе способами. Удаление R защитной группы соединений 29 может быть проведено посредством кислых или щелочных условий или условий гидрогенизации или другими известными в литературе способами. Соединения 30 могут взаимодейстовать с соединениями 3 посредством нагревания с фторидом калия в подходящем растворителе, таком как диметиллсульфоксид с получением соединений 31. Соединения 31 могут быть О-алкилированы с использованием гидрида натрия и йодометана или другими способами метилирования, описанными в литературе с получением 5-азидо-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепановых соединений 32. Соединения 31 могут быть конвертированы в 32 с помощью нуклеофильного фторирующего реагента, такого как DAST. Соединения 31 могут быть конвертированы в 32 посредством окисления до кетона с последующим нуклеофильным добавлением органометаллических реагентов, таких как литий или реактив Гриньяра или с последующим нуклеофильным фторирующим реагентом, таким как DAST.

На Фиг. 8 показан иллюстративный синтез 5-Вос-амино-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепана 39 из 6,7-дигидро-1Н-азепин-3(2Н)-она 33. Соединения 33 могут быть конвертированы в 5-азидо-азепан-3-он 34 посредством нагревания с TMS-азидом и смолой Amberlite IRA 900F в подходящем растворителе, таком как ацетонитрил. Восстановление кетона 34 с использованием борогидрида натрия в ТГФ и воде или с помощью способов, описанных в литературе, дает 5-азидо-азепан-3-ол 35. Удаление R защитной группы соединений 35 может быть проведено посредством кислых или щелочных условий или условий гидрогенизации или другими известными в литературе способами. Получившийся амин может быть конвертирован в 5-азидо-1-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ол 36 посредством нагревания с 5-хлор-4-нитро-1Н-пиразолом 3 в присутствии фторида калия в растворителе, таком как диметилсульфоксид. Соединения 36 могут быть конвертированы в 5-(N-Вос)-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ол 37 с использованием восстановления азида Штаудингера посредством агревания с трифенилфосфином в ТГФ и воде с последущей защитой получившегося амина подходящей защитной группой, такой как Вос-защитная группа, с использованием способов, описанных в литературе. Окисление 37 посредством способа, такого как обработка реактивом Десса-Мартина или как описано в литературе дает трет-бутил 1-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6-оксоазепан-4-илкарбамат 38. Соединения 38 могут быть конвертированы в 39 посредством обработки деоксо-Fluor® в подходящем растворителе, таком как дихлорметан или посредством способов, описанных в литературе. Соединения 38 могут быть конвертированы в 39 посредством обработки органометаллическим реагентом, таким как литий или реактив Гриньяра или посредством способов, описанных в литературе.

На Фиг. 9 показан иллюстративный синтез 5-(4-азидо-1-фторциклогептил)-4-нитро-1Н-пиразола 45 из 4-нитро-1Н-пиразола 2. Обработка 4-нитро-1Н-пиразола 2 (г)-циклогепт-4-еноном 40 и основанием, таким как гексаметилдисилазид лития, при подходящей температуре в подходящем растворителе, таком как ТГФ или посредством способов, описанных в литературе, дает 1-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-4-енол 41. Обработка 41 деоксо-Fluor® в подходящем растворителе, таком как ДХМ или способами, описанными в литературе, дает 5-(1-тфорциклогепт-4-енил)-4-нитро-1Н-пиразол 42. Эпоксидирование 42 с m-СРВА или аналогичными способами, описанными в литературе, дает 5-(4-фтор-8-оксабицикло[5.1.0]октан-4-ил)-4-нитро-1Η-пиразол 43. Открытие эпоксида соединения 43 азидом натрия в соответствии с литературными способами, такими как азид натрия, дает 2-азидо-5-фтор-5-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогептанол 44. О-алкилирование соединения 44 с использованием гидрида натрия и йодометана, или другими способами метилирования, описанными в литературе, дает 45, где R2 представляет собой О-алкил и R3 представляет собой Н. Соединения 44 могут быть конвертированы в 45, где R2 и R3 представляют собой F, посредством нуклеофильного фторирования с помощью реагента, такого как DAST. Соединения 44 могут быть конвертированы в 45, где R2 (R5) представляет собой алкил и R3 представляет собой F посредством окисления в кетон с последующим нкулеофильным добавлением органометаллического реагента, такого как литий или реактив Гриньяра или последующим нуклеофильным фторированием реактивом, таким как DAST.

На Фиг. 10 показан иллюстративный синтез 3-фтор-1-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-амина 52 из 5-хлор-4-нитро-1Н-пиразола 3. Нагревание 3 с пиперидин-4-она гидрохлорида гидратом и фторидом калия в подходящем растворителе, таком как диметилсульфоксид или использование способов, описанных в литературе, дает 1-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-он 46. Нагревание 46 с триметилсилилхлоридом и триэтиламином в подходящем растворителе, таком как ДМФ, или использование способов, описанных в литературе, дает 1-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-4-(триметилсилилокси)-1,2,3,6-тетрагидропиридин 47. Фторирование соединения 47 с использованием SelectFluor® в ацетонитриле при подходящей температуре или использование способов, описанных в литературе, дает 3-фтор-1-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-он 48. Увеличение кольца соединения 48 до этил 6-фтор-1-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5-оксоазепан-4-карбоксилата 49 может быть достигнуто с использованием этилдиазоацетата и диэтилэтирата трифторида бора в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, при подходящих температурах или с использованием способов, описанных в литературе. Декарбоксилирование соединения 49 посредством нагревания с соляной кислотой при подходящей температуре или посредством способов, описанных в литературе, дает 3-фтор-1-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-он 50. Восстановительное аминирование соединения 50 посредством способов, описанных в литературе дает 3-фтор-1-(4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-амин 51. Амин 51 может быть защищен подходящей защитной группой, такой как трифторацетамид, с использованием трифторуксусного ангидрида с диизопропилэтиламином в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, или с использованием других способов, описанных в литературе, с получением амино-защищенного соединения 52.

ПРИМЕРЫ

Пример 1 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол

В 500 мл круглодонную колбу, содержащую 4-нитро-1-Н-пиразол (5 г, 44.2 ммоль) добавили гидроксид натрия (1М, 200 мл) и диметилсульфат (31 мл, 330 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 72 ч и смесь экстрагировали CH2Cl2 (2×150 мл). Органический слой отделили и растворитель выпарили с получением 1-метил-4-нитро-1Н-пиразола в виде белого осадка (4.30 г, 76%).

Следуя WO 2007/99326, в 500 мл 3-горлышковую круглодонную колбу добавили 1-метил-4-нитро-1Н-пиразол (4.30 г, 33.8 ммоль) и ТГФ (12 мл). Смесь охладили до -78°С и гексаметилдисилазид лития в ТГФ (1М, 88.4 мл, 90 ммоль) добавили по каплям через капельную воронку в течение 20 мин. Коричневую смесь перемешивали в течение 30 мин и нагрели до -45°С в течение 30 мин. Смесь снова охладили до-78°С и гексахлорэтан (10.5 г, 44.2 ммоль), растворенный в ТГФ (20 мл) добавили через капельную воронку в течение 15 мин. Смесь перемешивали в течение 2.5 ч, нагрели от -78°С до -40°С и контролировали течение реакции с помощью ЖХМС. После завершения реакции, ее погасили раствором насыщенного NH4Cl (150 мл), и добавили этилацетат (100 мл). Органический слой отделили и водный слой экстрагировали этилацетатом (100 мл). Объединенные органические слои промыли водой (150 мл), высушили над Na2SO4 и органический растворитель выпарили. Неочищенный продукт очистили посредством флеш-хроматографии (CH2Cl2/7% МеОН) с получением 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола в виде белого осадка (1.40 г, 20%). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ (8.13 (s, 1Η), 3.92 (s, 3Н); ESIMS m/z=162.0 (М+1)

Пример 2 трет-бутил 1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат.

В 10 мл пробирку для микроволновой печи добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол из Примера 1 (150 мг, 0.93 ммоль), трет-бутил азепан-4-илкарбамат (220 мг, 1.02 ммоль). Этанол (4 мл) и диизопропилэтиламин (1.00 мл, 8.00 ммоль) добавили и смесь облучали микроволновым излучением в течение 60 мин при 130°С. Смесь охладили, сконцентрировали и очистили посредством флеш-хроматографии, гептан/этилацетат 20% до 80% с получением желтого масла (306 мг, 97%).

В 50 мл круглодонную колбу добавили указанное нитросоединение (306 мг, 0.90 ммоль), железо (202 мг, 3.61 ммоль), хлорид аммония (241 мг, 4.5 ммоль), этанол (10 мл) и воду (1.5 мл). Смесь перемешивали в течение 1 ч при 60°С и контролировали течение реакции с помощью ЖХМС. После завершения реакции, смесь отфильтровали через слой целита и промыли этилацетатом (30 мл) и 10% водным раствором K3PO4 (30 мл). Органический слой промыли водой (30 мл), высушили над Na2SO4 и органический растворитель выпарили с получением трет-бутил 1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата в виде коричневого масла с чистотой >98% (264 мг, 95%). ESIMS m/z=310.1 (М+1).

Пример 3 трет-бутил 1-(1-метил-4-амино-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-илкарбамат.

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества трет-бутил пиперидин-4-илкарбамат, трет-бутил 1-(1-метил-4-амино-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-илкарбамат получили в виде коричневого масла (173 мг, 70%) за две стадии. ESIMS m/z=296.1 (М+1).

Пример 4 (S)-трет-бутил 1-(1-метил-4-амино-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-3-илкарбамат.

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества (S)-трет-бутил пиперидин-3-илкарбамат, (S)-трет-бутил 1-(1-метил-4-амино-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-3-илкарбамат получили в виде коричневого масла (206 мг, 75%) за две стадии. ESIMS m/z=296.1 (М+1).

Пример 4а 1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-3-(трифторметил)пиперидин

Следуя методике для промежуточного соединения 22 с использованием в качестве исходного вещества 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол и 3-(трифторметил)пиперидин, получили 107 в виде желтого масла (499 мг, 97%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ (8.03 (s, 1H), 3.77 (s, 3Н), 3.41-3.32 (m, 1H), 3.31-3.18 (m, 2H), 3.07-2.97 (m, 1H), 2.54-2.40 (m, 1H), 2.13-2.06 (m, 1H), 1.97-1.90 (m, 1H), 1.80-1.60 (m, 2H).

Пример 5 (S)-трет-бутил 1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пирролидин-3-илкарбамат

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества (S)-трет-бутил пирролидин-3-илкарбамат, (S)-трет-бутил 1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пирролидин-3-илкарбамат получили в виде коричневого масла (162 мг, 62%) за две стадии. ESIMS m/z=282.1 (М+1).

Пример 6 трет-бутил 4-((4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-илокси)метил)пиперидин-1-карбоксилат

В 50 мл круглодонную колбу добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол из Примера 1 (100 мг, 0.60 ммоль), трет-бутил 4-(гидроксиметил)пиперидин-1-карбоксилат (200 мг, 0.93 ммоль) и ДМФ (10 мл). NaH (37 мг, 1.55 ммоль) добавили медленно и смесь перемешивали в течение 1 ч. Смесь сконцентрировали и очистили посредством флеш-хроматографии, гептан/этилацетат 20% до 80% с получением масла (150 мг, 70%).

В 50 мл круглодонную колбу добавили указанное нитросоединение (150 мг, 0.44 ммоль), железо (173 мг, 3.10 ммоль), хлорид аммония (199 мг, 3.71 ммоль), этанол (10 мл) и воду (1.5 мл). Смесь перемешивали в течение 1 ч при 60°С и контролировали течение реакции с помощью ЖХМС. После завершения реакции, смесь отфильтровали через слой целита и промыли этилацетатом (30 мл) и 10% водным раствором K3PO4 (30 мл). Органический слой промыли, водой (30 мл), высушили над Na2SO4 и органический растворитель выпарили с получением трет-бутил 4-((4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-илокси)метил)пиперидин-1-карбоксилата в виде коричневого масла с чистотой >98% (135 мг, 99%). ESIMS m/z=311.1 (М+1).

Пример 7 (R)-трет-бутил 1-(1-метил-4-амино-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-3-илкарбамат

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества (R)-трет-бутил пиперидин-3-илкарбамат, (R)-трет-бутил 1-(1-метил-4-амино-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-3-илкарбамат получили в виде коричневого масла (187 мг, 68%) за две стадии. ESIMS m/z=296.1 (М+1).

Пример 8 трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-илокси)пиперидин-1-карбоксилат

Следуя методике, описанной в Примере 6 и используя в качестве исходного вещества трет-бутил 4-гидроксипиперидин-1-карбоксилат, трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-илокси)пиперидин-1-карбоксилат получили в виде коричневого масла (102 мг, 50%) за две стадии. ESIMS m/z=297.1 (М+1)

Пример 9 (R)-трет-бутил 1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пирролидин-3-илкарбамат

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества (R)-трет-бутил пирролидин-3-илкарбамат, (R)-трет-бутил 1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пирролидин-3-илкарбамат получили в виде коричневого масла (159 мг, 61%) за две стадии. ESIMS m/z=282.1 (М+1).

Пример 10 трет-бутил 4-((4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-иламино)метил)пиперидин-1-карбоксилат

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества трет-бутил 4-(аминометил)пиперидин-1-карбоксилат, трет-бутил 4-((4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-иламино)метил)пиперидин-1-карбоксилат получили в виде коричневого масла (124 мг, 43%) за две стадии. ESIMS m/z=310.1 (М+1).

Пример 11 (S)-трет-бутил (1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пирролидин-3-ил)метилкарбамат

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества (R)-трет-бутил пирролидин-3-илметилкарбамат, (S)-трет-бутил (1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пирролидин-3-ил)метилкарбамат получили в виде коричневого масла (230 мг, 84%) за две стадии. ESIMS m/z=296.1 (М+1)

Пример 12 (R)-трет-бутил (1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пирролидин-3-ил)метилкарбамат

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества (S)-трет-бутил пирролидин-3-илметилкарбамат, (R)-трет-бутил (1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пирролидин-3-ил)метилкарбамат получили в виде коричневого масла (200 мг, 73%) за две стадии. ESIMS m/z=296.1 (М+1).

Пример 13 трет-бутил (1-(4-амино-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метилкарбамат

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества трет-бутил пиперидин-4-илметилкарбамат, трет-бутил (1-(4-амино-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метилкарбамат получили в виде коричневого масла (270 мг, 98%) за две стадии. ESIMS m/z=310.1 (М+1).

Пример 14 (S)-трет-бутил (1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-3-ил)метилкарбамат

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества (R)-трет-бутил пиперидин-3-илметилкарбамат, (S)-трет-бутил (1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-3-ил)метилкарбамат получили в виде коричневого масла (270 мг, 98%) за две стадии. ESIMS m/z=310.1 (М+1).

Пример 15 (R)-трет-бутил (1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-3-ил)метилкарбамат

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества (S)-трет-бутил пиперидин-3-илметилкарбамат, (R)-трет-бутил (1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-3-ил)метилкарбамат получили в виде коричневого масла (268 мг, 98%) за две стадии. ESIMS m/z=310.1 (М+1)

Пример 16 (R)-бензил 1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества (R)-бензил азепан-4-илкарбамат, (R)-бензил 1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат получили в виде коричневого масла (191 мг, 60%) за две стадии. ESIMS m/z=344.1 (М+1).

Пример 17 (S)-бензил 1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества (S)-бензил азепан-4-илкарбамат, (S)-бензил 1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат получили в виде коричневого масла (220 мг, 63%) за две стадии. ESIMS m/z=344.1 (М+1).

Пример 18 трет-бутил 3-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-азабицикло[3.1.0]гексан-6-илкарбамат

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества трет-бутил 3-азабицикло[3.1.0]гексан-6-илкарбамат, трет-бутил 3-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-азабицикло[3.1.0]гексан-6-илкарбамат получили в виде коричневого масла (130 мг, 48%) за две стадии. ESIMS m/z=294.1 (М+1).

Пример 19 этил 2-амино-2-цианоацетат

К перемешанному раствору (Е)-этил 2-циано-2-(гидроксиимино)ацетата (20 г, 0.14 моль) в воде (250 мл) добавили насыщенный раствор NaHCO3 в воде (160 мл), с последующим добавлением Na2S2O4 (60 г, 0.423 моль). Реакционную смесь нагрели до 35°С и перемешивали в течение дополнительных 2 ч. Затем ее сделали насыщенной с помощью NaCl (150 г) и экстрагировали ДХМ (3×350 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором, высушили над Na2SO4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением этил 2-амино-2-цианоацетата в виде красного масла (7.8 г, 43%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 4.45 (s, 1H), 4.34 (q, J=7.0 Hz, 2H), 1.36 (t, J=7.0 Hz, 3H); MS (ESI) m/z: 129 [M+H+].

Пример 20 этил 2-бензамидо-2-цианоацетат

К перемешанному раствору соединения этил 2-амино-2-цианоацетата (0.64 г, 5 ммоль) в ДХМ (15 мл) добавили насыщенный раствор NaHCO3 в воде (15 мл). С При интенсивном перемешивании добавли бензоил хлорид (0.84 г, 6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение дополнительных 30 мин, после чего ее экстрагировали ДХМ (3×15 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (20 мл) и высушили над Na2SO4, отфильтровали, сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (5:1 РЕ/EtOAc) с получением этил 2-бензамидо-2-цианоацетата (0.25 г, 22%) в виде белого осадка: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 7.83-7.85 (m, 2H), 7.59 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.49 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.02 (d, J=7.0 Hz, 1H), 5.72 (d, J=7.5 Hz, 1H), 4.40 (q, J=7.5 Hz, 2H), 1.39 (t, J=7.0 Hz, 3H); MS (ESI) m/z: 233 [M+H+].

Пример 21 этил 5-амино-2-фенилтиазол-4-карбоксилат

К перемешанному раствору соединения этил 2-бензамидо-2-цианоацетата (0.46 г, 2 ммоль) в пиридине (20 мл) добавили реактив Лавессона (0.81 г, 2 ммоль). Реакционную смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 15 ч. Затем ее сконцентрировали и разбавили EtOAc (40 мл). Разбавленную смесь промыли водой (3×20 мл), солевым раствором (10 мл), высушили над Na2SO4, отфильтровали, и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (10:1 РЕ/EtOAc) с получением этил 5-амино-2-фенилтиазол-4-карбоксилата (0.2 г, 40%) в виде желтого осадка: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 7.80 (d, J=6.5 Hz, 1H), 7.36-7.41 (m, 3H), 4.43 (q, J=7.0 Hz, 2H), 1.44 (t, J=7.0 Hz, 3H); MS (ESI) m/z: 249 [M+H+].

Пример 22 этил 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фенилтиазол-4-карбоксилат

К раствору соединения этил 5-амино-2-фенилтиазол-4-карбоксилата (248 мг, 1 ммоль) в CH3CN (10 мл) добавили DMAP (6 мг, 0.05 ммоль) с последующим (Вос)2O (262 мг, 1.2 ммоль). Реакционную смесь выдержали при комнатной температуре в течение дополнительных 30 мин. Смесь затем эвапорировали под вакуумом с получением этил 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фенилтиазол-4-карбоксилата в виде красного осадка (340 мг, 95%), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Пример 23 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фенилтиазол-4-карбоновая кислота

К раствору соединения этил 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фенилтиазол-4-карбоксилата (348 мг, 1 ммоль) в МеОН/H2O (10 мл, 1:1) добавили LiOH⋅H2O (20 мг, 5 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50-55°С до тех пор, пока исходные соединения не использовались по данным ТСХ. Ее охладили при около 0-4°С и по каплям добавили конц. HCl до pH приблизительно 5. Получившуюся смесь затем экстрагировали ДХМ (3×20 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (2×20 мл), высушили над Na2SO4, отфильтровали, и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (50:1 ДХМ : МеОН) с получением 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фенилтиазол-4-карбоновой кислоты (0.22 г, 68%) в виде белого осадка: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.69 (s, 1H), 7.89-7.91 (m, 2H), 7.46-7.47 (m, 3H), 1.57 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 321 [M+H+]

Пример 24 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2-фторфенил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 2-фторбензоилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2-фторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.70 (s, 1H), 8.19-8.23 (m, 1H), 7.42-7.45 (m, 1H), 7.20-7.30 (m, 2H), 1.57 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 339 [M+H+]

Пример 25 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 2, 6-дифторбензоилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz) δ (ppm): 7.42-7.46 (m, 1H), 7.06 (t, J=8.5 Hz, 2H), 1.47 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 355 [M+H+].

Пример 26 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2-хлорфенил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 2-хлорбензоилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2-хлорфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (ДМСО, 500 MHz) δ (ppm): 13.57 (s, 1H), 10.05 (s, 1H), 8.14-8.17 (m, 1H), 7.63-7.65 (m, 1H), 7.49-7.51 (m, 2H), 1.53 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 355 [M+H+].

Пример 27 2-(5-бромо-2-фторфенил)-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 5-бромо-2-фторбензоилхлорид конвертировали в 2-(5-бромо-2-фторфенил)-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.70 (s, 1H), 8.32-8.34 (m, 1H), 7.49-7.52 (m, 1H), 7.09-7.13 (m, 1H), 1.57 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 418 [M+H+].

Пример 28 2-(5-бромо-2-хлорфенил)-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 5-бромо-2-хлорбензоилхлорид конвертировали в 2-(5-бромо-2-хлорфенил)-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.70 (s, 1H), 8.31 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.47 (dd, J=2.5 Hz, J=8.5 Hz, 1H), 7.35 (d, J=9.0 Hz, 1H), 1.57 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 433 [M+H+].

Пример 29 2-(3-бромфенил)-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 3-бромбензоилхлорид конвертировали в 2-(3-бромфенил)-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.68 (s, 1Η), 8.08 (s, 1Η), 7.78 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.56 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.32 (t, J=8.0 Hz, 1H), 1.57 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 399 [M+H+]

Пример 30 2-(4-бромо-2-фторфенил)-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 4-бромо-2-фторбензоилхлорид конвертировали в 2-(4-бромо-2-фторфенил)-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.67 (s, 1H), 8.07 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.42 (d, J=9.5 Hz, 1H), 1.57 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 417[M+H+]

Пример 31 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(пиридин-2-ил)тиазол-4-карбоновая кислота

К раствору пиколиновой кислоты (1.23 г, 10 ммоль), EDC⋅HCl (1.91 г, 10 ммоль) и НОВТ (1.35 г, 10 ммоль) в ТГФ (80 мл) добавили DIPEA (3.6 г, 30 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь выдержали при этой температуре в течение 1 ч, после чего добавили раствор этил 2-амино-2-цианоацетата (1.28 г, 10 ммоль) в ТГФ (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение дополнительных 6 ч. Затем ее сконцентрировали, и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (5:1 РЕ/EtOAc) с получением этил 2-циано-2-(пиколинамидо)ацетата (0.7 г, 30%) в виде желтого осадка.

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, этил 2-циано-2-(пиколинамидо)ацетат конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(пиридин-2-ил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.72 (s, 1Η), 8.61 (d, J=4.5 Hz, 1H), 8.09 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.81 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.34 (dd, J=5.5 Hz, J=7.0 Hz, 1H), 1.57 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 322 [M+H+].

Пример 32 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-изопропилтиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, изобутирилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-изопропилтиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.54 (s, 1H), 3.16-3.21 (m, 1H), 1.54 (s, 9H), 1.37 (d, J=7.0 Hz, 6H); MS (ESI) m/z: 287 [M+H+].

Пример 33 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-циклогесилтиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, хлорид циклогексанкарбоновой кислоты конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-цикклогесилтиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.53 (s, 1H), 2.84-2.89 (m, 1H), 2.08-2.12 (m, 2H), 1.84 (dd, J=3.5 Hz, J=10.0 Hz, 2H), 1.73 (d, J=13.0 Hz, 1H), 1.53 (s, 9H), 1.35-1.50 (m, 4H), 1.25-1.27 (m, 1H); MS (ESI) m/z: 327 [M+H+].

Пример 34 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-о-толилтиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 2-метилбензоилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-о-толилтиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz) δ (ppm): 7.34 (s, 1H), 7.13-7.22 (m, 3Н), 2.32 (s, 3Н), 1.43 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 335 [M+H+].

Пример 35 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2-метоксифенил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 2-метоксибензоилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2-метоксифенил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz) δ (ppm): 9.63 (s, 1H), 8.27 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.42 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.09 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.04 (d, J=9.0 Hz, 1H), 1.57 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 351 [M+H+]

Пример 36 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2-(трифторметил)фенил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 2-(трифторметил)бензоил хлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2-(трифторметил)фенил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CD3OD, 500 MHz) δ (ppm): 7.76 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.58-7.64 (m, 3H), 1.46 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 389 [M+H+].

Пример 37 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-метилтиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, ацетилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-метилтиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.62 (s, 1H), 2.62 (s, 3Н), 1.54 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 259 [M+H+]

Пример 38 5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновая кислота

В атмосфере азота (N2), НСООН (2.44 г, 53 ммоль) добавили к Ac2O (6.48 г, 63.6 ммоль) при 0°С. После того, как ей дали нагреться до комнатной температуры, реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 15 ч. Ей дали остыть до комнатной температуры. Этот смешанный ангидрид кислоты затем добавили по каплям к раствору этил 2-амино-2-цианоацетата (128 мг, 1 ммоль) в безводном ТГФ (5 мл) при 0°С. Затем охладающую ванну удалили, реакционную смесь выдержали при комнатной температуре в течение дополнительного 1 ч. Реакционную смесь сконцентрировали и очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (5:1 РЕ/EtOAc) с получением этил 2-циано-2-формамидоацетата (110 мг, 70%) в виде белого осадка.

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, этил 2-циано-2-формамидоацетат конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.70 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 1.55 (s, 9H); MS(ESI) m/z: 245 [M+H+]

Пример 39 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4- карбоновая кислота

К раствору 5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4- карбоновой кислоты (1.72 г, 10 ммоль) в ДХМ (50 мл) добавили тремя порциями NBS (1.95 г, 11 ммоль); реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь сконцентрировали под вакуумом; получившийся остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (6:1 Петролейный эфир-EtOAc) с получением 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновой кислоты (1.75 г, 70%) в виде белого осадка: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 13.65 (s, 1H), 10.03 (s, 1H), 1.49 (s, 9H). MS(ESI) m/z: 324 [M+H+]

Пример 40 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,5-дифторфенил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 2,5-дифторбензоилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,5-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.68 (s, 1H), 7.87-7.91 (m, 1H), 7.15-7.26 (m, 1H), 7.08-7.13 (m, 1H), 1.57 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 357 [M+H+]

Пример 41 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,4-дифторфенил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 2,4-дифторбензоилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,4-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.66 (s, 1H), 8.16-8.21 (m, 1H), 6.95-7.04 (m, 2H), 1.62 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 357 [M+H+]

Пример 42 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,3-дифторфенил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 2,3-дифторбензоилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,3-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ (ppm): 7.45 (s, 1H), 7.07-7.16 (m, 2H), 1.42 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 357 [M+H+].

Пример 43 2-бензил-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 2-фенилацетилхлорид конвертировали в 2-бензил-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.63 (s, 1H), 7.27-7.35 (m, 5H), 4.25 (s, 2H), 1.50 (s, 9H); MS(ESI) m/z: 335 [М+Н+].

Пример 44 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(хинолин-7-ил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, хинолин-7-карбонилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(хинолин-7-ил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (ДМСО, 500 MHz) δ (ppm): 10.14 (s, 1H), 9.11 (d, J=5 Hz, 1h), 8.68 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.21-8.25 (m, 2H), 7.75-7.77 (m, 1H), 1.54 (s, 9H); MS(ESI) m/z: 372 [M+H+]

Пример 45 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, имидазо[1,2-а]пиридин-2-карбонилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (ДМСО, 500 MHz) δ (ppm): 10.12 (s, 1H), 8.58 (d, 5 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.61(d, 5Hz, 1H), 7.31-7.34 (m, 1H), 6.97-6.99 (m, 1H), 1.53 (s, 9H); MS(ESI) m/z: 361 [M+H+].

Пример 46 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-трет-бутилтиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, пивалоилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-трет-бутилтиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δ (ppm): 9.55 (s, 1H), 1.55 (s, 9H), 1.42 (s, 9H); MS (ESI) m/z: 301 [М+Н+].

Пример 47 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(3-хлорфенил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 3-хлорбензоилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(3-хлорфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (ДМСО, 500 MHz) δ (ppm): 9.67 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.72 (d, J=7 Hz, 1H), 7.38-7.40 (m, 2H), 1.56 s, 9H); MS (ESI) m/z: 355 [M+H+].

Пример 48 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(4-хлорфенил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методикам из Примеров 19-23 и показанным на Фигуре 2, 4-хлорбензоилхлорид конвертировали в 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(4-хлорфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту: 1H-NMR (ДМСО, 500 MHz) δ (ppm): 9.66 (s, 1H), 7.81 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.42 (d, J=8.5 Hz, 2H), 1.56 (s, 9H); MS(ESI) m/z: 355 [M+H+].

Пример 49 5-амино-N-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид

Следуя методике, описанной в Примере 113, 1-метил-1Н-пиразол-4-амин, 5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновая кислота взаимодействовали с получением 5-амино-N-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамида в виде белого осадка (13 мг, 32%) за две стадии. ESIMS m/z=336.1 (М+1)

Пример 50 трет-бутил 3-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)фенилкарбамат

В 10 мл пробирку для микроволновой печи добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Η-пиразол из Примера 1 (150 мг, 0.93 ммоль), 3-(трет-бутоксикарбониламино)фенилбороновую кислоту (440 мг, 1.86 ммоль), дихлоро[1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий (II) (152 мг, 0.019 ммоль), 1:1 M растовр Na2CO3/KOAc (1 мл) и ацетонитрил (4 мл). Смесь облучали при 130°С в микроволновой печи в течение 40 мин и смесь охладили, сконцентрировали и очистили посредством флеш-хроматографии, гептан/этилацетат 20% до 95% с получением желтого масла. В 50 мл круглодонную колбу добавили указанное нитросоединение (120 мг, 0.90 ммоль), железо (156 мг, 2.8 ммоль), хлорид аммония (200 мг, 3.7 ммоль), этанол (10 мл) и воду (1.5 мл). Смесь перемешивали в течение 1 ч и контролировали течение реакции с помощью ЖХМС. После завершения реакции, смесь отфильтровали через слой целита и промыли этилацетатом (30 мл) и 10% водным раствором K3PO4 (30 мл). Органический слой промыли водой (30 мл), высушили над Na2SO4 и органический растворитель выпарили с получением трет-бутил 3-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)фенилкарбамата в виде коричневого масла с чистотой >98% (120 мг, 45%) за две стадии. ESIMS m/z=289.1 (М+1)

Пример 51 1-метил-5-о-толил-1Н-пиразол-4-амин

Следуя методике, описанной в Примере 2 и используя в качестве исходного вещества о-толилбороновую кислоту, 1-метил-5-о-толил-1Н-пиразол-4-амин получили в виде коричневого масла (148 мг, 85%) за две стадии. ESIMS m/z=188.1 (М+1)

Пример 52 2-(4-циклопропил-2-фторфенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан

Стадия 1: 3-фтор-4-нитрофенил трифторметансульфонат

К перемешанному раствору 3-фтор-4-нитрофенола (10.00 г, 63.65 ммоль) и трифторметансульфонового ангидрида (20.0 мл, 119 ммоль, 1.87 eq.) в безводном ДХМ (100.0 мл) при 0°С добавили по каплям триэтиламин (33.27 мл, 238.7 ммоль, 3.75 экв.). Получившуюся коричневую реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь медленно погасили водой и экстрагировали ДХМ (3×100 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (1х), высушили над Na2SO4, отфильтровали, и сконцентрировали при пониженном давлении. Неочищенное масло очистили посредством колоночной флеш-хроматографии, элюируя 0 до 65% ДХМ/гексан с получением 15.67 г (85.1%) 3-фтор-4-нитрофенил трифторметансульфоната в виде масла. 1Н NMR (500 MHz, CDCl3) δ (8.23 (t, J=8.52 Hz, 1H), 7.34-7.27 (m, 2H).

Стадия 2: 4-циклопропил-2-фтор-1-нитробезол

Смесь 3-фтор-4-нитрофенил трифторметансульфоната (7.15 г, 24.73 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (2.55 г, 29.67 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)-ферроцен]дихлорпалладия (II), в комплексе с дихлорметаном (1:1) (1.62 г, 1.98 ммоль), и 2М карбоната цезия в воде (19.8 мл, 39.56 ммоль) в толуоле (39.5 мл) дегазировали в течение 20 мин. Реакционную смесь перемешивали при 90°С в атмосфере N2 в течение 2.5 ч. Реакционную смесь охладили до КТ, разбавили этилацетатом (200 мл), и отфильтровали через слой целита. Фильтрат промыли солевым раствором, высушили над Na2SO4, отфильтровали, и сконцентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очистили посредством колоночной флеш-хроматографии, элюируя 0 до 75% ДХМ/гексан с получением 4.11 г (91.7%) 4-циклопропил-2-фтор-1-нитробензола в виде масла. 1Н NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.98 (dd, J=10.2, 6.6 Hz, 1H), 7.12-7.02 (m, 2H), 2.11-1.97 (m, 1H), 1.20-1.11 (m, 2H), 0.89-0.82 (m, 2H).

Стадия 3: 4-циклопропил-2-фторанилин

Смесь 4-циклопропил-2-фтор-1-нитробензола (3.36 г, 18.55 ммоль), порошкообразного железа (4.35 г, 77.9 ммоль), и 2М хлорида аммония в воде (19.8 мл) и 3:2:1 об/об. EtOH : ТГФ : H2O (86 мл) перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в атмосфере N2 в течение 17 ч. Реакционную смесь охладили до КТ и отфильтровали через слой целита. Слой целита хорошо промыли этилацетатом (~50 мл). Насыщенный водный раствор NaHCO3 медленно добавили к фильтрату для нейтрализации реакционной смеси. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои промыли водой и солевым раствором, высушили над Na2SO4, отфильтровали, и сконцентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очистили посредством колоночной флеш-хроматографии, элюируя 0 до 75% этилацетат/гексан с получением 2.80 г (99%) оранжевого масла, которое затвердевало при 20°С. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ (6.75-6.63 (m, 3Н), 3.57 (s, 2H), 1.87-1.72 (m, 1H), 0.93-0.83 (m, 2H), 0.64-0.51 (m, 2H); MS (ESI) m/z: 152.3 [M+H]+.

Стадия 4: 4-циклопропил-2-фтор-1-йодобензол

К перемешанной смеси 4-циклопропил-2-фторанилина (1.63 г, 10.78 ммоль) в воде (20 мл) при 0°С добавили концентрированную серную кислоту (8.6 мл, 15.0 экв.) по каплям, сохраняя при этом постоянную температуру при 0°С. Раствор нитрита натрия (781.0 мг, 11.32 ммоль, 1.05 экв.) в воде (2.7 мл) добавили и перемешивали в течение 5 минут. Эту получившуюся реакционную смесь затем добавили к раствору йодида калия (3.76 г, 22.64 ммоль, 2.1 экв.) в воде (9.7 мл), и реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 3 ч. ДХМ (400 мл) добавили к охлажденной реакционной смеси. Двухфазные слои разделили, и водный слой экстрагировали ДХМ (2×150 мл). Объединенные органические слои промыли насыщенным водным Na2S2O4, водой, и солевым раствором, высушили над Na2SO4, отфильтровали, и сконцентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очистили посредством колоночной флеш-хроматографии, элюируя 100% гептаном с получением 2.01 г (71.28%) 4-циклопропил-2-фтор-1-йодобензола в виде прозрачного масла. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ (7.57 (dd, J=8.0, 6.9 Hz, 1H), 6.76 (dd, J=9.4, 1.9 Hz, 1H), 6.64 (dd, J=8.2, 1.9 Hz, 1H), 1.94-1.77 (m, 1H), 1.09-0.95 (m, 2H), 0.79-0.56 (m, 2H).

Стадия 5: В пробирку для высокого давления поместили 4-циклопропил-2-фтор-1-йодобензол (1.32 г, 5.04 ммоль), боронат биспинаколового эфира (1.53 г, 6.04 ммоль), ацетат калия (1.98 г, 20.15 ммоль), [1,1-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(II) (368.5 мг, 0.50 ммоль), и Ν,Ν-диметилформамид (35 мл). Реакционную смесь дегазировали Ν2 в течение 15 минут. Пробирку закрыли и реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 16 ч. Охлажденную реакционную смесь разбавили этилацетатом (75 мл) и водой (25 мл) и затем отфильтровали через слой целита. Двухфазные слои разделили и органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над Na2SO4, отфильтровали, и сконцентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очистили посредством колоночной флеш-хроматографии, элюируя 0 до 75% ЕА/гептан с получением 859.0 мг (65.1%) 2-(4-циклопропил-2-фторфенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана в виде прозрачного масла. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ (7.58 (s, 1Н), 6.83 (d, J=7.7 Hz, 1H), 6.68 (d, J=10.8 Hz, 1H), 1.91-1.81 (m, 1Н), 1.33 (s, 12 H), 0.98 (dd, J=8.3, 2.0 Hz, 2Н), 0.74-0.66 (m, 2Н)

Пример 53 ((R)-1-{4-[(2-бромо-5-трет-бутоксикарбониламино-тиазол-4-карбонил)-амино]-2-метил-2Н-пиразол-3-ил}-пергидро-азепин-4-ил)-карбаминовой кислоты бензиловый эфир

К перемешанному раствору 2-бромо-5-(изопропоксикарбониламино)-тиазол-4-карбоновой кислоты (650.0 мг, 2.01 ммоль) и [(R)-1-(4-амино-2-метил-2Н-пиразол-3-ил)-азепан-4-ил]-карбаминовой кислоты бензилового эфира (828.9 мг, 2.41 ммоль, 1.2 экв.) в безводном N,N-диметилформамиде (22 мл) добавили HATU (1.07 г, 2.81 ммоль, 1.4 экв.) с последующим N,N-диизопропилэтиламином (0.88 мл, 5.03 ммоль, 2.5 экв.), и реакционную смесь перемешивали при КТ в атмосфере N2 в течение 7 дней. Реакционную смесь разбавили этилацетатом (150 мл). Органический слой промыли 50% солвым раствором/водой, водой и солевым раствором, высушили над Na2SO4, отфильтровали, и сконцентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очистили посредством колоночной флеш-хроматографии, элюируя 45 до 100% этилацетат/гептан с получением 1.30 г (79.7%) ((R)-1-{4-[(2-бромо-5-трет-бутоксикарбониламино-тиазол-4-карбонил)-амино]-2-метил-2Н-пиразол-3-ил}-пергидро-азепин-4-ил)-карбаминовой кислоты бензилового эфира в виде тягучего геля. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ (10.28 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.33 (s, 5H), 5.09 (s, 2H), 4.98 (s, 1H), 3.89 (s, 1H), 3.72 (s, 3Н), 3.36 - 3.21 (m, 2H), 3.16-3.03 (m, 2H), 2.19-2.01 (m, 2H), 2.00-1.61 (m, 4H), 1.51 (s, 9H)

Пример 54 N-(5,5-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Периодинан Десса-Мартина (2.3 г, 5.4 ммоль) добавили по порциям к раствору бензил 4-азидо-5-гидроксиазепан-1-карбоксилата (1.3 г, 4.5 ммоль) в ДХМ (25 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 18 ч, смесь разбавили ДХМ и погасили водным NaHCO3 (40 мл) с последующим водным Na2S2O3 (20%, 40 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 20 мин. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) дала бензил 4-азидо-5-оксоазепан-1-карбоксилат (1.10 г, 84%) в виде прозрачного масла. К раствору этого масла (1.10 г, 3.8 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавили деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 3.5 мл, 9.5 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь разбавили ДХМ, охладили в ванне со льдом/водой и погасили посредством покапельного добавления насыщенного водного NaHCO3 (20 мл). Наблюдалось выделение пузырьков газа. Получившуюся смесь перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Неочищенный продукт очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-40% EtOAc/изогексан) с получением бензил 5-азидо-4,4-дифторазепан-1-карбоксилата (0.65 г, 56%) в виде прозрачного масла. Это масло растворили в ТГФ (10 мл) и воде (2 мл) и добавили трифенилфосфин (0.58 г, 2.2 ммоль). После перемешивания и нагревания при 60°С в течение 18 ч, смесь сконцентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт растворили в ДХМ и органический слой промыли водой, отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. К неочищенному продукту в ДХМ (20 мл), охлажденному в ванне со льдом/водой, добавили DIPEA (1.1 мл, 6.36 ммоль) с последующим трифторуксусным ангидридом (0.75 мл, 5.3 ммоль) по каплям. Смеси дали нагреться до комнатной температуры, перемешивали в течение 18 ч и разбавили ДХМ. Воду добавили и органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-60% EtOAc/изогексан) с получением бензил 4,4-дифтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-карбоксилата (0.59 г, 73%) в виде прозрачного масла. Этот трифторацетамид (0.57 г, 1.5 ммоль) растворили в МеОН (50 мл) и пропустили через H-Cube® (полный Н2 режим, 70°С, скорость потока: 1 мл/мин, 30 мм 10% Pd/C картридж). Растворитель удалили при пониженном давлении с получением неочищенного N-(5,5-дифторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида. К раствору указанного азепана (0.37 г, 1.5 ммоль) в EtOH (4 мл) добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол из Примера 1 (0.73 г, 4.5 ммоль) и DIPEA (0.65 мл, 3.8 ммоль). Смесь нагревали при 130°С в микроволновой печи в течение 6 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и неочищенный продукт очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) с получением N-(5,5-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида в виде бледно-желтого масла (0.31 г, 56%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ (8.05 (s, 1Η), 6.77 (d, J=9.0 Hz, 1H), 4.72-4.58 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.55-3.39 (m, 2H), 3.33-3.18 (m, 2H), 2.52-2.17 (m, 3H), 2.14-2.04 (m, 1H).

Пример 55 трет-бутил 4-(5-(4,4-дифтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-5-илкарбамат

Раствор N-(5,5-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида (0.29 г, 0.78 ммоль) в МеОН (20 мл) пропустили через Н-Cube® (полный Н2 Режим, 70°С, скорость потока: 1 мл/мин, 30 мм 10% Pd/C картридж). Растворитель удалили при пониженном давлении с получением неочищенного амина. К раствору этого амина (0.26 г, 0.78 ммоль) в ДХМ (15 мл) добавили DIPEA (0.68 мл, 3.9 ммоль), РуВОР (0.61 г, 1.17 ммоль) и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту из Примера 25 (0.30 г, 0.86 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь разбавили ДХМ и промыли водой. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-80% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 4-(5-(4,4-дифтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)-азепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-5-илкарбамат в виде белого осадка (0.37 г, 69%). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ (10.28 (s, 1Н), 8.71 (s, 1Н), 7.82 (s, 1Н), 7.42-7.33 (m, 1Н), 7.11-7.01 (m, 2Н), 6.72 (d, J=9.0 Hz, 1H), 4.73-4.57 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.51-3.37 (m, 2H), 3.36-3.25 (m, 2H), 2.49-2.36 (m, 2H), 2.25-2.03 (m, 2H), 1.55 (s, 9H).

Пример 56 3,3-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин

Смесь 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола из Примера 1 (0.1 г, 4.5 ммоль), 3,3-дифторпиперидина гидрохлорида (0.14 г, 0.93 ммоль) и DIPEA (0.5 мл, 2.8 ммоль) в EtOH (3 мл) нагревали при 130°С в микроволновой печи в течение 1 ч. Дополнительное количество DIPEA (0.5 мл, 2.8 ммоль) и 3,3-дифторпиперидина гидрохлорида (0.29 г, 1.8 ммоль) добавили и смесь нагревали при 130°С в микроволновой печи в течение 2 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и неочищенный продукт очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-60% EtOAc/изогексан) с получением 3,3-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидина в виде желтого масла (127 мг, 83%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ (8.04 (s, 1H), 3.80 (s, 3Н), 3.41-3.29 (m, 2H), 3.26-3.04 (m, 2H), 2.17-2.03 (m, 2H), 1.97-1.88 (m, 2H).

Пример 57 трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(3,3-дифторпиперидин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Следуя методике для Примера 55, используя в качестве исходного вещества 3,3-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту из Примера 25, получили трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(3,3-дифторпиперидин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде кремового осадка (57 мг, 20%). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ (10.33 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.41-7.32 (m, 1H), 7.11-7.01 (m, 2H), 3.76 (s, 3Н), 3.32 (t, J=11.0 Hz, 2H), 3.19-3.13 (m, 2H), 2.10-1.97 (m, 2H), 1.94-1.85 (m, 2H), 1.53 (s, 9H).

Пример 58 трет-бутил 3-(метил(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)амино)пропилкарбамат

Смесь 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола из Примера 1 (0.81 г, 5 ммоль), трет-бутил 3-аминопропилкарбамата (0.85 г, 4.88 ммоль) и DIPEA (1.8 мл, 10.5 ммоль) в EtOH (5 мл) нагревали при 130°С в микроволновой печи в течение 90 мин. При охлаждении реакционную смесь сконцентрировали при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил 3-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-иламино)пропилкарбамата в виде желтой смолы (1.27 г, 85%). Смесь этой смолы (0.3 г, 1 ммоль), K2CO3 (0.41 г, 3 ммоль) и метилйодида (0.1 мл, 1.58 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при 60°С в течение 18 ч. Дополнительное количество метилйодида (0.1 мл, 1.58 ммоль) добавили и перемешивание при 60°С продолжили в течение 24 ч. Реакционную смесь охладили и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток тритурировали в ДХМ (100 мл), отфильтровали и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 3-(метил(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)амино)пропилкарбамат в виде бледно-желтой смолы (0.122 г, 38%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ (8.03 (s, 1Η), 4.60 (s, 1Н), 3.77 (s, 3Н), 3.20-3.14 (m, 4Н), 2.86 (s, 3Н), 1.72-1.61 (m, 2Н), 1.42 (s, 9Н).

Пример 59 трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(трет-бутил-(3-метиламино)пропилкарбамоил-3-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Раствор трет-бутил 3-(метил(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)амино)пропилкарбамата (122 мг, 0.39 ммоль) в МеОН (15 мл) пропустили через H-Cube® (полный Н2 режим, 50°С, скорость потока: 1 мл/мин, 30 мм 10% Pd/C картридж). Растворитель удалили при пониженном давлении с получением красного масла (0.12 г). К раствору этого масла в ДХМ (10 мл) добавили 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту из Примера 25 (166 мг, 0.47 ммоль), РуВОР (0.33 г, 0.64 ммоль) и DIPEA (0.5 мл, 2.86 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 66 ч. Добавили воду (20 мл) и перемешивание продолжили в течение 30 мин. Слои разделили и водный слой экстрагировали ДХМ. Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(трет-бутил-(3-метиламино)пропилкарбамоил-3-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде белого осадка (207 мг, 90%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ (10.37 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.42-7.32 (m, 1H), 7.10-7.02 (m, 2H), 4.65 (s, 1H), 3.75 (s, 3Н), 3.20-3.14 (m, 2H), 3.10 (t, J=7 Hz, 2H), 2.85 (s, 3Н), 1.76-1.66 (m, 2H), 1.55 (s, 9H), 1.39 (s, 9H).

Пример 60 5-хлор-1-этил-4-нитро-1Η-пиразол

Следуя методике для Примера 1, используя в качестве исходного вещества 1-этил-4-нитропиразол, получили 5-хлор-1-этил-4-нитро-1Н-пиразол в виде бесцветного осадка (1.3 г, 74%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ (8.16 (s, 1Η), 4.26 (q, J=7 Hz, 2H), 1.50 (t, J=7 Hz, 3H).

Пример 61 5-хлор-1-циклопропилметил-4-нитро-1H-пиразол

Следуя методике для Примера 1, используя в качестве исходного вещества 1-циклопропилметил-4-нитропиразол, получили 5-хлор-1-циклопропилметил-4-нитро-1Н-пиразол в виде бесцветного масла (1.16 г, 56%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ (8.17 (s, 1H), 4.07 (d, J=7 Hz, 2H), 1.39-1.28 (m, 1H), 0.66-0.59 (m, 2H), 0.50-0.40 (m, 2H).

Пример 62 5-хлор-1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол

Следуя методике для Примера 1, используя в качестве исходного вещества 1-циклопропил-4-нитропиразол, получили 5-хлор-1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол в виде бесцветного осадка (0.23 г, 63%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ (8.09 (s, 1Н), 3.62-3.54 (m, 1Н), 1.38-1.28 (m, 2Н), 1.25-1.13 (m, 2Н).

Пример 63 (R)-N-(азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Раствор (R)-трет-бутил 4-(бензилоксикарбониламино)азепан-1-карбоксилата (3.25 г, 0.33 ммоль) в МеОН (100 мл) перемешивали при комнатной температуре при атмосферном давлении газообразного водорода в присутствии 10% Pd/C (1 г) в течение 1.5 ч. Смесь отфильтровали через целит и растворитель удалили при пониженном давлении с получением (R)-трет-бутил 4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-карбоксилата в виде бледно-серого масла (2 г, 100%). К перемешанному раствору этого масла (1.8 г, 8.4 ммоль) и DIPEA (3 мл, 17.18 ммоль) в ДХМ (100 мл) при комнатной температуре добавили трифторуксусный ангидрид (1.31 мл, 9.27 ммоль) по каплям в течение 5 мин и получившийся бледно-желтый раствор перемешивали в течение 18 ч. Добавили насыщенный водный гидрокарбонат натрия (150 мл) и перемешивание продолжили в течение 1 ч. Слои разделили, органические слои пропустили через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении с получением (R)-трет-бутил 4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-карбоксилата в виде бледно-желтого масла (2.61 г, 100%). К раствору этого масла (2.6 г, 8.38 ммоль) в ДХМ (50 мл) при комнатной температуре добавили трифторуксусную кислоту (25 мл) и смесь перемешивали в течение 2 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток растворили в ДХМ и пропустили через SCX колонку, промывая ДХМ и МеОН и элюируя 1 н аммиаком в МеОН. Растворитель удалили при пониженном давлении с получением (R)-N-(азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида в виде бледно-желтого масла (1.3 г, 74%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ (7.83 (s, 1H), 4.44-4.37 (m, 1H), 3.13-3.03 (m, 2H), 2.88 (dt, J=13.2, 6.6 Hz, 1H), 2.65-2.55 (m, 1H), 2.03-1.79 (m, 3H), 1.75 (s, 1H), 1.69-1.58 (m, 3H).

Пример 64 (S)-N-(азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для Примера 510, используя в качестве исходного вещества (S)-трет-бутил 4-(бензилоксикарбониламино)азепан-1-карбоксилат, 25 получили (S)-N-(азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде бледно-желтого масла (1.35 г, 75% за три стадии). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ (7.86 (s, 1Η), 4.44-4.37 (m, 1Н), 3.15-3.03 (m, 2Н), 2.92-2.81 (m, 1Н), 2.67-2.55 (m, 1Н), 2.02-1.81 (m, 4Н), 1.76-1.56 (m, 3Н).

Пример 64а трет-бутил 3-фтор-5-(4-метоксибензилокси)азепан-1-30 карбоксилат

Раствор (Z)-трет-бутил 3-оксо-2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепин-1-карбоксилата (2 г, 9.48 ммоль), (4-метоксифенил)метанола (6.55 г, 47.4 ммоль) и DBU (0.14 мл, 0.95 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) нагревали при 60°С в течение 23 ч. Растворители удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-40% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 5-(4-метоксибензилокси)-3-оксоазепан-1-карбоксилат в виде прозрачного масла (1.99 г). К раствору этого масла (1.33 г, 3.8 ммоль) в воде/ТГФ (20 мл/20 мл) добавили NaBH4 и смесь перемешивали в течение 1.5 ч. ТГФ удалили при пониженном давлении и водную фазу экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-60% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 3-гидрокси-5-(4-метоксибензилокси)азепан-1-карбоксилат (1.30 г) в виде прозрачного масла. Это масло (1.15 г, 3.28 ммоль) растворили в ДХМ (20 мл) и деоксо-Fluor® добавили (50% в ТГФ, 5.93 мл, 16.4 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч, разбавили ДХМ (30 мл), охладили в ванне со льдом/водой и погасили посредством покапельного добавления насыщенного водного NaHCO3 раствора (50 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-30% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 3-фтор-5-(4-метоксибензилокси)азепан-1-карбоксилат (746 мг, 39% за три стадии) в виде прозрачного масла. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ (7.36-7.30 (m, 2H), 6.95 (d, J=8.2 Hz, 2H), 5.19-4.64 (m, 1H), 4.65-4.43 (m, 2H), 4.06-3.20 (m, 8H), 2.35-1.67 (m, 4H), 1.55-1.50 (m, 9H).

Пример 64b 3-фтор-5-(4-метоксибензилокси)-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан

К раствору трет-бутил 3-фтор-5-(4-метоксибензилокси)азепан-1-карбоксилата (740 мг, 0.21 ммоль) в МеОН (5 мл) добавили HCl (4 M в 1,4-диоксане, 5.3 мл, 21 ммоль) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и остаток растворили в МеОН и загрузили на SCX колонку. Колонку промыли МеОН и, элюируя 7 н. аммиаком в МеОН. Растворители удалили при пониженном давлении с получением желтого масла. К раствору этого масла в безводном ДМСО (15 мл) добавили фторид калия (0.32 г, 8.4 ммоль) и 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол (372 мг, 2.31 ммоль) и смесь нагревали при 65°С в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавили водой (300 мл) и экстрагировали EtOAc (2×50 мл). Объединенные органические слои промыли водой (3×50 мл) и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (20-100% EtOAc/изогексан) дала 3-фтор-5-(4-метоксибензилокси)-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан в виде желтого масла (300 г, 55% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ (7.33-7.23 (m, 3Н), 6.89-6.86 (m, 2Н), 4.82-4.66 (m, 2Н), 4.49-3.93 (m, 1Н), 3.81 (s, 3Н), 3.30-2.99 (m, 4Н), 2.95-2.74 (m, 4Н), 2.35-2.03 (m, 2Н), 1.98-1.83 (m, 2Н).

Пример 65 N-(1-(1-этил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для Примера 503, используя в качестве исходного вещества 5-хлор-1-этил-4-нитро-1Н-пиразол и 2,2,2-трифтор-N-(гексагидро-1Н-азепин-4-ил)-ацетамид, получили N-(1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде бледно-желтой смолы (0.136 г, 55%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ (8.07 (s, 1H), 6.39-6.37 (m, 1H), 4.22-4.19 (m, 1H), 4.12 (q, J=7 Hz, 2H), 3.42-3.35 (m, 1H), 3.27-3.18 (m, 3H), 2.25-2.05 (m, 2H), 2.00-1.75 (m, 4H), 1.47 (t, J=7 Hz, 3H).

Пример 66 (R)-N-(1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для Примера 503, используя в качестве исходного вещества 5-хлор-1-этил-4-нитро-1Н-пиразол и (R)-2,2,2-трифтор-N-(гексагидро-1Н-азепин-4-ил)-ацетамид (0.1 г, 0.476 ммоль), получили (R)-N-(1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде бледно-желтой смолы (0.1 г, 60%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 (s, 1H), 6.39-6.36 (m, 1H), 4.23-4.19 (m, 1H), 4.12 (q, J=7 Hz, 2H), 3.42-3.35 (m, 1H), 3.27-3.18 (m, 3H), 2.25-2.05 (m, 2H), 2.00-1.75 (m, 4H), 1.47 (t, J=7 Hz, 3H).

Пример 67 (S)-N-(1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для Примера 503, используя в качестве исходных веществ 5-хлор-1-этил-4-нитро-1Н-пиразол и (S)-2,2,2-трифтор-N-(гексагидро-1Н-азепин-4-ил)-ацетамид, получили (S)-N-(1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде бледно-желтой смолы (0.12 г, 44%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 (s, 1H), 6.42-6.40 (m, 1H), 4.22-4.18 (m, 1H), 4.12 (q,J=7Hz, 2H), 3.42-3.35 (m, 1H), 3.27-3.18 (m, 3H), 2.25-2.05 (m, 2H), 2.00-1.75 (m, 4H), 1.47 (t, J=7 Hz, 3H).

Пример 68 (R)-N-(1-(1-циклопропилметил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для Примера 503, используя в качестве исходных веществ 5-хлор-1-цикпопропилметил-4-нитро-1Н-пиразол и (R)-2,2,2-трифтор-N-(гексагидро-1H-азепин-4-ил)-ацетамид, получили (R)-N-(1-(1-циклопропилметил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде бледно-желтой смолы (0.98 г, 55%).1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.08 (s, 1H), 6.42-6.39 (m, 1H), 4.22-4.14 (m, 1H), 4.00-3.85 (m, 2H), 3.44-3.32 (m, 1H), 3.30-3.15 (m, 3H), 2.25-2.05 (m, 2H), 2.00-1.75 (m, 4H), 1.30-1.20 (m, 1H), 0.70-0.62 (m, 2H), 0.50-0.35 (m, 2H).

Пример 69 (R)-N-(1-(1-цикпопропил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для Примера 503, используя в качестве исходных веществ 5-хлор-1-цикпопропил-4-нитро-1Н-пиразол и (R)-2,2,2-трифтор-N-(гексагидро-1Н-азепин-4-ил)-ацетамид, получили (R)-N-(1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде бледно-желтой смолы (0.105 г, 61%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.96 (s, 1H), 6.55-6.38 (m, 1H), 4.30-4.15 (m, 1H), 3.65-3.53 (m, 1H), 3.55-3.25 (m, 4H), 2.25-2.05 (m, 6H), 1.35-1.05 (m, 4H).

Пример 70 трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(1-этил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Раствор N-(1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида (136 мг, 0.39 ммоль) в МеОН (15 мл) пропустили через Н-Cube® (70 бар, 25°С, скорость потока: 1 мл/мин, 30 мм 10% Pd/C картридж). Растворитель удалили при пониженном давлении с получением неочищенного амина в виде фиолетовой смолы (121 мг). К раствору этого амина в ДХМ (10 мл) добавили 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту из Примера 25 (149 мг, 0.42 ммоль), HATU (0.43 г, 1.14 ммоль) и DIPEA (1 мл, 5.72 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Воду (30 мл) добавили и перемешивание продолжили в течение 15 мин. Слои разделили и воодный экстрагировали ДХМ. Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка остатка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(1-этил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде бесцветного осадка (170 мг, 68%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.39 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.42-7.33 (m, 1H), 7.12-7.02 (m, 2H), 6.35 (d, J=8 Hz, 1H), 4.25-4.13 (m, 1H), 4.05 (q, J=7 Hz, 2H), 3.45-3.25 (m, 2H), 3.23-3.10 (m, 2H), 2.25-1.65 (m, 6H), 1.56 (s, 9H), 1.45 (t, J=7 Hz, 3H).

Пример 71 (R)-трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(1-этил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Следуя методике для Примера 517, используя в качестве исходных веществ (R)-N-(1-(1-этил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту из Примера 25, получили (R)-трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(1-этил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде кремового осадка (0.148 г, 76%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.40 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.43-7.34 (m, 1H), 7.12-7.02 (m, 2H), 6.37 (d, J=8 Hz, 1H), 4.23-4.16 (m, 1H), 4.05 (q, J=7 Hz, 2H), 3.43-3.31 (m, 2H), 3.25-3.15 (m, 2H), 2.22-2.05 (m, 2H), 2.03-1.89 (m, 2H), 1.89-1.72 (m, 2H), 1.57 (m, 12H).

Пример 72 (S)-трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(1-этил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Следуя методике для Примера 517, используя в качестве исходных веществ (S)-N-(1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту из Примера 25, получили (S)-трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(1-этил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде кремового осадка (151 мг, 66%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.40 (s, 1H), 8.75 (s,1H), 7.95 (s,1H), 7.45-7.34 (m, 1H), 7.12-7.02 (m, 2H), 6.37 (d, J=8 Hz, 1H), 4.23-4.16 (m, 1H), 4.05 (q, J=7 Hz, 2H), 3.43-3.31 (m, 2H), 3.25-3.15 (m, 2H), 2.22-2.05 (m, 2H), 2.03-1.89 (m, 2H), 1.89-1.72 (m, 2H), 1.55 (s, 9H), 1.46 (t, J=7 Hz, 3H).

Пример 73 (R)-трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(1-циклопропилметил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Проводили взаимодействие (R)-N-(1-(1-цикпопропилметил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновой кислоты с получением (R)-трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(1-циклопропилметил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамата в виде кремового осадка (136 мг, 77%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.39 (s,1H), 8.75 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.41-7.36 (m, 1H), 7.10-7.02 (m, 2H), 6.37 (d, J=8 Hz, 1H), 4.25-4.10 (m, 1H), 3.90-3.83 (m, 2H), 3.43-3.31 (m, 2H), 3.30-3.15 (m, 2H), 2.25-2.05 (m, 2H), 2.03-1.70 (m, 4H), 1.57 (s, 9H) 1.35-1.20 (m, 1H), 0.64-0.59 (m, 2H), 0.43-0.38 (m, 2H).

Пример 74 (R)-трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(1-циклопропил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1H-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

(R)-N-(1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновая кислота из Примера 25 взаимодействовали с получением (R)-трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(1-циклопропил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1H-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамата в виде кремового осадка (142 мг, 73%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.40 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.41-7.34 (m, 1H), 7.10-7.00 (m, 2H), 6.39 (d, J=8 Hz, 1H), 4.25-4.15 (m, 1H), 3.45-3.36 (m, 3H), 3.35-3.15 (m, 2H), 2.25-2.12 (m, 1H), 2.10-1.70 (m, 5H), 1.55 (s, 9H), 1.35-1.15 (m, 2H), 1.10-1.00 (m, 2H).

Пример 75 (R)-трет-бутил 2-(2-фторфенил)-4-(1-этил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Следуя методике для Примера 506, используя в качестве исходных веществ (R)-N-(1-(1-этил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2-фторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту, получили (R)-трет-бутил 2-(2-фторфенил)-4-(1-этил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1H-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде кремового осадка (330 мг, 72%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.37 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.15-8.05 (m, 1H), 7.45-7.35 (m, 1H), 7.30-7.15 (m, 3H), 6.31 (d, J=8 Hz, 1H), 4.25-4.15 (m, 1H), 4.07 (q, J=7 Hz, 2H), 3.43-3.31 (m, 2H), 3.25-3.15 (m, 2H), 2.25-2.10 (m, 2H), 2.10-1.70 (m, 4H), 1.57 (s, 9H) 1.47 (t, J=7 Hz, 3H).

Пример 76 (R)-трет-бутил 2-(2-фторфенил)-4-(1-циклопропилметил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Следуя методике для Примера 506, используя в качестве исходного вещества (R)-N-(1-(1-циклопропилметил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2-фторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту, получили (R)-трет-бутил 2-(2-фторфенил)-4-(1-циклопропилметил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1H-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде кремового осадка (350 мг, 70%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.36 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.15-8.05 (m, 1H), 7.45-7.35 (m, 1H), 7.28-7.15 (m, 3Н), 6.31 (d, J=7.5 Hz, 1H), 4.25-4.15 (m, 1H), 3.95-3.85 (m, 2H), 3.43-3.30 (m, 2H), 3.28-3.15 (m, 2H), 2.25-2.08 (m, 2H), 2.08-1.70 (m, 4H), 1.55 (s, 9H), 1.35-1.20 (m, 1H), 0.70-0.60 (m, 2H), 0.50-0.35 (m, 2H).

Пример 77 (R)-трет-бутил 2-(2-фторфенил)-4-(1-циклопропил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Следуя методике для Примера 506, используя в качестве исходного вещества (R)-N-(1-(1-цикпопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2-фторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту, получили (R)-трет-бутил 2-(2-фторфенил)-4-(1-циклопропил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде кремового осадка (370 мг, 76%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.36 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.12-8.00 (m, 1H), 7.45-7.30 (m, 1H), 7.28-7.15 (m, 3Н), 6.40-6.27 (m, 1H), 4.30-4.15 (m, 1H), 3.43-3.15 (m, 5H), 2.25-1.75 (m, 6H), 1.55 (s, 9H), 1.35-1.15 (m, 2H), 1.10-0.95 (m, 2H).

Пример 78 трет-бутил (1-(4-амино-1-метил-1H-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метилкарбамат

Раствор 5-хлор-1-метил-4-нитро-1H-пиразола из Примера 1 (1.9 г, 11.77 ммоль), 4-(boc-аминометил)пиперидина (3.78 г, 17.66 ммоль) и DIPEA (6.15 мл, 35.31 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали в микроволновой печи при 130°С в течение 1 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток перерастворили в ДХМ. Органический слой промыли водой, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил (1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метилкарбамата в виде желтого осадка (3.95 г, 98%). К раствору этого осадка (3.84 г, 11.30 ммоль) в МеОН (125 мл) добавили 10% Pd/C (0.42 г, 3.96 ммоль) и формиат аммония (2.85 г, 45.2 ммоль). Смесь нагревали при 80°С в течение 2.5 ч. Смесь сконцентрировали при пониженном давлении и остаток перерастворили в EtOAc и промыли водой. Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением трет-бутил (1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метилкарбамата в виде коричневого масла (3.49 г, 99%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.04 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.11-3.07 (m, 6H), 2.67 (s, 2H), 1.77 (d, J=12.8 Hz, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.39-1.26 (m, 2H). 1H скрыт пиком воды.

Пример 79 трет-бутил 4-(5-(4-(бутилоксикарбониламинометил)пиперидин-1-ил)-1-метил-1H-пиразол-4-илкарбамоил)-2-бромотиазол-5-илкарбамат

Раствор РуВОР (2.84 г, 5.46 ммоль) и 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновой кислоты (1.39 г, 4.29 ммоль) в ДХМ (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Раствор трет-бутил (1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метилкарбамата (1.2 г, 3.90 ммоль) и DIPEA (1.1 мл, 6.24 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавили и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь разбавили ДХМ и промыли водой. Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил 4-(5-(4-(бутилоксикарбониламинометил)пиперидин-1-ил)-1-метил-1H-пиразол-4-илкарбамоил)-2-бромотиазол-5-илкарбамата в виде розового осадка (2.32 г, 96%). 1H NMR (400 MHz, d6-ДМСО) δ 10.62 (s, 1H), 9.64 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.86 (t, J=5.8 Hz, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.07 (d, J=11.4 Hz, 2H), 2.95 (t, J=11.5 Hz, 2H), 2.87 (t, J=6.3 Hz, 2H), 1.67 (d, J=12.3 Hz, 2H), 1.52 (s, 9H), 1.45 (s, 1H), 1.40 (s, 9H), 1.27-1.16 (m, 2H).

Пример 80 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифтор-3-метоксифенил)тиазол-4-карбоновая кислота

Следуя методике для Примеров 19-23, используя в качестве исходного вещества 2,6-дифтор-3-метоксибензоилхлорид, получили 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифтор-3-метоксифенил)тиазол-4-карбоновую кислоту в виде бледно-желтого осадка (120 мг, 70%). 1H NMR (400 MHz, d6-ДМСО) δ 7.32-7.23 (m, 1H), 7.22-7.15 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 1.49 (s, 9H).

Пример 81 (R)-бензил 1-(4-(5-трет-бутоксикарбонил-амино-2-бромотиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат

Раствор РуВОР (1.31 г, 2.52 ммоль) и 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновой кислоты (0.61 г, 1.89 ммоль) в ДХМ (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Раствор (R)-бензил азепан-4-илкарбамата (0.62 г, 1.80 ммоль) и DIPEA (0.5 мл, 2.88 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавили и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь разбавили ДХМ и промыли водой. Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/гексан) с получением (R)-бензил 1-(4-(5-трет-бутоксикарбонил-амино-2-бромотиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата в виде розового осадка (1.04 г, 89%). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.28 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.38-7.27 (m, 5H), 5.09 (s, 2H), 5.00-4.92 (m, 1H), 3.91-3.84 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.36-3.24 (m, 2H), 3.15-3.04 (m, 2H), 2.19-2.03 (m, 2H), 1.96-1.79 (m, 3H), 1.75-1.63 (m, 1 Н), 1.52 (s, 9H).

Пример 82 (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-метил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Проводили связывание 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновой кислоты и (R)-N-(азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида с получением (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-метил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1H-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамата в виде свтело-оранжевого осадка (500 мг, 74%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.27 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 6.41 (d, J=8.2 Hz, 1H), 4.23-4.15 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.38-3.29 (m, 2H), 3.22-3.08 (m, 2H), 2.22-2.08 (m, 2H), 2.03-1.93 (m, 2H), 1.88-1.69 (m, 2H), 1.52 (s, 9H).

Пример 83 (R)-4-(бензилоксикарбониламино)азепан или (S) 4-(бензилоксикарбониламино)азепан

В 250 мл 3-горлышковую-круглодонную колбу добавили трет-бутил 4-аминоазепан-1-карбоксилат (8.80 г, 41.0 ммоль), триэтиламин (29 мл, 0.21 моль) и метиленхлорид (20 мл). Смесь охладили до -20°С и бензил хлорформиат (8.4 г, 49 ммоль) добавили по каплям посредством шприца в течение 10 мин. Гетерогенную смесь нагрели до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Контролировали течение реакции с помощью ЖХМС и после завершения реакции, растворитель выпарили и неочищенный продукт очистили посредством флеш-хроматографии, гептан/этилацетат 10% до 30% с получением белого осадка (6.0 г, 42%).

Рацемический азепин разделили при помощи хиральной SFC (Сверхкритической жидкостной хроматографии, см. White и Burnett (2005) Jour. of Chrom. A1074: 175-185) под давлением диоксида углерода на колонке Chiralpak OJ-Н (100×4.6 мм, 5 микрон), 15% метанол/CO2, со скоростью потока 200 мл/мин, давлении 100 бар и при 40°С в течение 5 мин. с получением двух энантиомеров ((R)-трет-бутил 4-(бензилоксикарбониламино)азепан-1-карбоксилата и (S)-трет-бутил 4-(бензилоксикарбониламино)азепан-1-карбоксилата).

В 100 мл круглодонную колбу добавили один из энантиомеров, диоксан (20 мл) и 12 н. HCl (4 мл). Смесь перемешивали в течение 2 ч и растворитель выпарили. Продукт, HCl соль, (2.2 г, 37%) изомера 1 и (2.4 г, 40%) изомера 2 сразу использовали на следующей стадии.

Пример 84 трет-бутил 5-азидо-3-гидрокси-3-метилазепан-1-карбоксилат

К перемешанному раствору (Z)-трет-бутил 3-оксо-2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепин-1-карбоксилата (15 г, 71.1 ммоль) в ацетонитриле (25 мл) добавили триметилсилилазид (28.2 мл, 213 ммоль) с последующей смолой Amberlite IRA 900F (загрузка: 2-3 ммоль/г, 18 г) и смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч. После выдерживания при комнатной температуре в течение 16 ч, смолу отфильтровали, промыли ацетонитрилом и растворитель удалили при пониженном давлении с получением желтого масла. К раствору этого масла (813 мг, 3.2 ммоль) в безводном Et2O (20 мл), охлажденному в ванне с ледяной солью добавили раствор метиллития (1.6 М in Et2O, 2.1 мл, 3.36 ммоль) по каплям в течение 10 минут. После перемешивания в течение дополнительных 1.5 ч, насыщенный NaHCO3 (10 мл) добавили и смесь экстрагировали EtOAc (2×20 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении с получением зеленого масла (0.8 г, 81% за четыре стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.00-2.65 (m, 6H), 2.30-1.60 (m, 4H), 1.55-1.20 (m, 12H).

Пример 84а 5-азидо-3-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ол

Раствор трет-бутил 5-азидо-3-гидрокси-3-метилазепан-1-карбоксилата (0.8 г, 3 ммоль) в ДХМ (15 мл) и трифторуксусной кислоты (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 ч и затем сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в минимальном объеме ДХМ, загрузили на SCX колонку, промыли ДХМ и МеОН и, элюировали 1 н. аммиаком в МеОН. Растворитель удалили при пониженном давлении. К раствору остатка в безводном ДМСО (10 мл) добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол (574 мг, 3.56 ммоль) и фторид калия (675 мг, 12.7 ммоль). Смесь нагревали при 70°С в течение 16 ч в атмосфере азота, затем охладили и влили в воду (300 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×150 мл) и объединенные органические слои промыли водой (100 мл) и солевым раствором (50 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали с получением коричневой смолы. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 5-азидо-3-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ол в виде смеси четырех диастереоизомеров (0.38 г, 47% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 4.12-3.90 (m, 1H), 3.85 и 3.74 (2s, 3Н), 3.60-3.40 (m, 1H), 3.40-3.30 (m, 1H), 3.25-3.10 (m, 1H), 3.00-2.60 (m, 2H), 2.30-2.10 (m, 2H), 2.00-1.70 (m, 2H), 1.35-1.15 (m, 3Н). ЖХМС (ES+) m/z 296 (M+1).

Эту смесь разделили на две пары диастереоизомеров посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) с получением:

Менее полярной пары диастереоизомеров (111А) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 68.04 (s, 1H), 4.12-3.95 (m, 1H), 3.83 (s, 3Н), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.45-3.30 (m, 1H), 3.25-3.10 (m, 1H), 2.95-2.85 (m, 1H), 2.55 (brs, 1H), 2.30-2.10 (m, 2H), 2.00-1.70 (m, 2H), 1.25 (s, 3Н). ЖХМС (ES+) m/z 296 (M+1).

Более полярной пары диастереоизомеров (111В) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 4.00-3.92 (m, 1H), 3.90 (s, 3Н), 3.55-3.45 (m, 1H), 3.40-3.30 (m, 1H), 3.25-3.15 (m, 1H), 3.00-2.85 (m, 1H), 2.83 (s, 1H), 2.30-2.10 (m, 3Н), 1.95-1.85 (m, 1H), 1.20 (s, 3Н). ЖХМС (ES+) m/z 296 (M+1).

Пример 84b трет-бутил 6-фтор-6-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат

Трифенилфосфин (338 мг, 1.29 ммоль) добавили к перемешанному раствору 5-азидо-3-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ола (380 мг, 1.29 ммоль) в ТГФ (15 мл) и воде (3 мл) и смесь нагревали при 60°С в течение 16 ч. Реакционную смесь сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в ДХМ (20 мл) и DIPEA (0.67 мл, 3.86 ммоль) и добавили ди-трет-бутилдикарбонат (565 мг, 3.58 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч, сконцентрировали при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением бледно-оранжевого осадка (0.4 г). К раствору этого осадка (0.4 г, 1.29 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавили деоксо-Fluor® (1.2 мл, 3.31 ммоль, 50% в ТГФ) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Насыщенный NaHCO3 (30 мл) добавили и перемешивание продолжили в течение 15 минут. Водный слой экстрагировали ДХМ (30 мл) и объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 6-фтор-6-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат в виде бледно-оранжевой смолы (315 мг, 64% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 5.30-4.90 (m, 1H), 4.75-4.15 (m, 1H), 3.90-3.75 (m, 3Н), 3.65-3.00 (m, 4H), 2.55-1.75 (m, 4H), 1.48 (s, 9H), 1.45-1.25 (m, 3H). ЖХМС (ES+) m/z 394 (M+Na).

Пример 84с трет-бутил 6-гидрокси-6-метил-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат (Менее полярная пара диастереомеров)

Трифенилфосфин (113 мг, 0.43 ммоль) добавили к перемешанному раствору 5-азидо-3-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ола (менее полярная пара диастереомеров) (103 мг, 0.35 ммоль) в ТГФ (5 мл) и воде (1 мл) и смесь нагревали при 60°С в течение 16 ч. Реакционную смесь сконцентрировали при пониженном давлении и остаток растворили в ДХМ (10 мл) и добавили DIPEA (0.19 мл, 1.09 ммоль) перед ди-трет-бутилдикарбонатом (153 мг, 0.70 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и затем промыли насыщеным NaHCO3 (15 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением бледно-оранжевой смолы (110 мг, 86% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 4.62 (br s, 1H), 4.2-4.10 (m, 1H), 3.87 (s, 3Н), 3.60-3.45 (m, 1H), 3.35-3.10 (m, 2H), 2.90-2.80 (m, 1H), 2.73 (br s, 1H), 2.25-2.10 (m, 1H), 2.05-1.90 (m, 1H), 1.80-1.65 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.19 (s, 3Н). ЖХМС (ES+) m/z 370 (M+1).

Пример 84d трет-бутил 6-гидрокси-6-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат (Более полярная пара диастереоизомеров)

Следуя методике для промежуточного соединения 113с использованием в качестве исходного вещества 5-азидо-3-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ола (более полярная пара диастереоизомеров) получили трет-бутил 6-гидрокси-6-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат (более полярная пара диастереоизомеров) в виде бледно-оранжевой смолы (100 мг, 97%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 4.70 (br s, 1H), 4.05-3.90 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.35-3.25 (m, 1H), 3.15-3.05 (m, 1H), 2.95-2.85 (m, 1H), 2.30-2.10 (m, 1H), 2.10-1.80 (m, 4H), 1.45 (s, 9H), 1.26 (s, 3Н). ЖХМС (ES+) m/z 370 (M+1).

Пример 84е трет-бутил 6-метокси-6-метил-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат (Менее полярная пара диастереоизомеров)

К раствору 5-азидо-3-метил-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-3-ола (менее полярная пара диастереоизомеров) (115 мг, 0.53 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота добавили гидрид натрия (25 мг, 0.63 ммоль, 60% дисперсия в масле) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Метилйодид (0.05 мл, 0.80 ммоль) добавили и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Воду со льдом (50 мл) добавили и смесь экстрагировали EtOAc (2×25 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (20 мл), отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Остаток растворили в ТГФ (5 мл) и воде (1 мл) и добавили трифенилфосфин (102 мг, 0.39 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 16 ч. Смесь сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в ДХМ (10 мл) и DIPEA (0.2 мл, 1.15 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонат (170 мг, 0.78 ммоль) добавили. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем промыли насыщеным NaHCO3 (15 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 6-метокси-6-метил-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат (менее полярная пара диастереоизомеров) в виде бледно-оранжевой смолы (118 мг, 79% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 4.55 (brs, 1H), 4.20-4.10 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.45-3.25 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 3.20-2.95 (m, 2H), 2.30-2.10 (m, 2H), 1.80-1.50 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.08 (s, 3H). ЖХМС (ES+) m/z 384 (M+1).

Пример 84f трет-бутил 6-метокси-6-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат (Диастереомер В)

Следуя методике для промежуточного соединения 115 с использованием в качестве исходного вещества 5-азидо-3-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ола (более полярной пары диастереоизомеров) получили трет-бутил 6-метокси-б-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат (более полярной пары диастереоизомеров) в виде бледно-оранжевой смолы (110 мг, 68% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 5.70 (br s, 1H), 4.05-3.90 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.50-3.25 (m, 2H), 3.15 (s, 3H), 3.10-2.90 (m, 2H), 2.25-2.05 (m, 2H), 2.00-1.85 (m, 1H), 1.75-1.60 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.14 (s, 3H). ЖХМС (ES+) m/z 384 (M+1).

Пример 85 трет-бутил 5-(бензилиденаминоокси)-3,3-дифторазепан-1-карбоксилат

(Z)-трет-бутил 3-оксо-2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепин-1-карбоксилат (330 мг, 1.56 ммоль), (Е)-бензальдегид оксим (286 мг, 2.36 ммоль) и DBU (0.007 мл, 0.05 ммоль) смешали в MeCN (0.5 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили с помощью препаративной ВЭЖХ с получением трет-бутил 5-(бензилиденаминоокси)-3-оксоазепан-1-карбоксилата в виде коричневого масла (127 мг).

Раствор этого масла (125 мг, 0.37 ммоль) в ДХМ (20 мл) обработали деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 0.67 мл, 1.86 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь разбавили ДХМ (20 мл), охладили в ванне со льдом/водой и погасили посредством покапельного добавления насыщенного водного NaHCO3 (30 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-30% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 5-(бензилиденаминоокси)-3,3-дифторазепан-1-карбоксилат (101 мг, 18% за две стадии) в виде прозрачного масла. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11-8.03 (m, 1H), 7.61-7.55 (m, 2H), 7.40-7.36 (m, 3Н), 4.52-4.42 (m, 1H), 4.02-3.56 (m, 3H), 3.51-3.27 (m, 1H), 2.67-2.51 (m, 1H), 2.42-2.21 (m, 2H), 2.09-1.91 (m, 1H), 1.50-1.45 (m, 9H).

Пример 85а Бензальдегид O-6,6-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ила оксим

Следуя методике для промежуточного соединения 109 с использованием в качестве исходного вещества трет-бутил 5-(бензилиденаминоокси)-3,3-дифторазепан-1-карбоксилата получили бензальдегид O-6,6-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ила оксим в виде желтого масла (52 мг, 33%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.21-7.98 (m, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.63-7.58 (m, 2H), 7.41-7.36 (m, 3Н), 4.71-4.62 (m, 1H), 3.85 (s, 3Н), 3.80-3.65 (m, 1H), 3.47-3.39 (m, 2H), 3.26-3.23 (m, 1H), 2.77 (q, J=13.2 Hz, 1H), 2.58-2.29 (m, 2H), 2.23-2.10 (m, 1H).

ПРОМЕЖУТОЧНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ

Промежуточное соединение 1 трет-бутил метил((1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метил)карбамат

Раствор 5-хлор-1-метил-4-нитро-1H-пиразола из Примера 1 (0.2 г, 1.23 ммоль), трет-бутил метил(пиперидин-4-илметил)карбамата (0.29 г, 1.36 ммоль) и DIPEA (1 мл, 5.7 ммоль) в EtOH (3 мл) нагревали при 130°С в микроволновой печи в течение 2 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (40% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил (1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метилкарбамата в виде желтого масла (0.34 г, 80%). К раствору этого масла (0.15 мг, 0.44 ммоль) в ДМФ (5 мл) охлажденному до 0°С, добавили гидрид натрия (27 мг, 0.66 ммоль, 60% в минеральном масле) и смесь перемешивали при 0°С в течение 15 мин. Йодометан (0.03 мл, 0.53 ммоль) добавили и смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин. Дополнительное количество гидрида натрия (14 мг, 0.33 ммоль) и йодометана (0.02 мл, 0.78 ммоль) добавили, реакционной смеси дали нагреться до 10°С и перемешали в течение 1 ч. Добавили воду (10 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (60 мл). Органический слой промыли водой (7×10 мл), промыли солевым раствором (10 мл), отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка остатка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (30% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил метил((1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метил)карбамат в виде желтого масла (148 мг, 95%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.01 (s, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.38-3.26 (m, 2H), 3.25-3.15 (m, 2H), 3.12-2.95 (m, 2H), 2.89 (s, 3H), 1.90-1.71 (m, 3H), 1.60-1.32 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).

Промежуточное соединение 2 трет-бутил 6,6-дифтор-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилат

Раствор 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола (1.62 г, 10.0 ммоль), 1,4-диазепан-6-ола (4.18 г, 15.0 ммоль) и DIPEA (6.6 мл) в EtOH (6 мл) нагревали при 130°С в микроволновой печи в течение 3 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток растворили в ДХМ (60 мл) и ДМФ (10 мл). Ди-трет-бутилдикарбонат (8.73 г, 40 ммоль) и DIPEA (3.48 мл) добавили и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил 6-гидрокси-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилата (2.13 г) в виде желтого масла. К раствору этого масла (2.13 г, 6.2 ммоль) в ДХМ (20 мл), добавили по порциям периодинан Десса-Мартина (3.18 г, 7.49 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 18ч, смесь разбавили ДХМ (20 мл) и погасили насыщенным водным NaHCO3 (40 мл) с последующим 20% водным тиосульфатом натрия (40 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 20 мин. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6-оксо-1,4-диазепан-1-карбоксилат (1.6 г) в виде вязкого желтого масла. К раствору этого масла (0.49 г, 1.43 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавили деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 1.3 мл, 3.6 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь разбавили ДХМ (30 мл), охладили в ванне со льдом/водой и погасили посредством покапельного добавления насыщенного водного NaHCO3 (50 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Неочищенный продукт очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-60% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил 6,6-дифтор-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилата (467 мг, 42% за четыре стадии) в виде прозрачного масла. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 4.05-3.27 (m, 11H), 1.50 (s, 9H).

Промежуточное соединение 3 трет-бутил 4-(4-(2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат

Раствор трет-бутил 6,6-дифтор-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилата (467 мг, 1.29 ммоль) в МеОН (30 мл) пропустили через H-Cube® (70 бар, 60°С, скорость потока: 1 мл/мин, 30 мм 10% Pd/C картридж). Растворитель удалили при пониженном давлении с получением красного масла (428 мг). К раствору этого масла в ДХМ (15 мл) добавили 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновую кислоту (459 мг, 1.42 ммоль), РуВОР (1.0 г, 1.94 ммоль) и DIPEA (0.57 мл, 3.22 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Воду (20 мл) добавили и смесь разбавили ДХМ (100 мл). Органический слой промыли водой (20 мл), отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-80% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 4-(4-(2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат в виде бежевой пены (565 мг, 69% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.23 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 4.07-3.95 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.64 (s, 2H), 3.56-3.42 (m, 2H), 3.38-3.28 (m, 2H), 1.53 (s, 9H), 1.49 (s, 9H).

Промежуточное соединение 4 (R)-N-(азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Раствор (R)-трет-бутил 4-(бензилоксикарбониламино)азепан-1-карбоксилата (3.25 г, 0.33 ммоль) в МеОН (100 мл) перемешивали при комнатной температуре при атмосферном давлении газообразного водорода в присутствии 10% палладия на угле (1 г) в течение 1.5 ч. Смесь отфильтровали через целит® и растворитель удалили при пониженном давлении с получением (R)-трет-бутил 4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-карбоксилата в виде бледно-серого масла (2 г, 100%). К перемешанному раствору этого масла (1.8 г, 8.4 ммоль) и DIPEA (3 мл, 17.2 ммоль) в ДХМ (100 мл) при комнатной температуре добавили трифторуксусный ангидрид (1.31 мл, 9.3 ммоль) по каплям в течение 5 мин и получившийся бледно-желтый раствор перемешивали в течение 18 ч. Добавили насыщенный водный раствор NaHCO3 (150 мл) и перемешивание продолжили в течение 1 ч. Слои разделили, органические слои пропустили через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении с получением (R)-трет-бутил 4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-карбоксилата в виде бледно-желтого масла (2.61 г, 100%). К раствору этого масла (2.6 г, 8.38 ммоль) в ДХМ (50 мл) при комнатной температуре добавили трифторуксусную кислоту (25 мл) и смесь перемешивали в течение 2 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток растворили в ДХМ и пропустили через SCX колонку, промывая ДХМ и МеОН и элюируя 1 н. аммиаком в МеОН. Растворитель удалили при пониженном давлении с получением (R)-N-(азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида в виде бледно-желтого масла (1.3 г, 74%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.83 (s, 1H), 4.44-4.37 (m, 1H), 3.13-3.03 (m, 2H), 2.88 (dt, J=13.2, 6.6 Hz, 1H), 2.65-2.55 (m, 1H), 2.03-1.79 (m, 3H), 1.75 (s, 1Н), 1.69-1.58 (m, 3H).

Промежуточное соединение 5 5-хлор-1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол

К перемешанному раствору 1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразола (1.0 г, 5.13 ммоль) в безводном ТГФ (20 мл), охлажденному до -70°С, добавили по каплям раствор гексаметилдисилазида лития (1 М в ТГФ, 8.47 мл, 8.47 ммоль). После перемешивания при -70°С в течение 40 мин, реакционной смеси дали нагреться до -55°С в течение 20 мин. После потворного охлаждения до -70°С, раствор перхлорэтана (1.74 г, 7.34 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавили медленно и реакционную смесь перемешивали при -70°С в течение 1.5 ч. Насыщенный водный раствор хлорида аммония (30 мл) добавили с последующей водой (15 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка остатка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 5-хлор-1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол в виде серо-белого осадка (438 мг, 37%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.24 (s, 1H), 6.18 (tt, J=54.8, 4.2 Hz, 1H), 4.58 (td, J=12.8, 4.2 Hz, 2H).

Промежуточное соединение 6 (R)-N-(1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифтор-N-метилацетамид

Раствор 5-хлор-1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразола (438 мг, 2.07 ммоль), (R)-N-(азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида (438 мг, 2.07 ммоль) и DIPEA (1 мл) в EtOH (4 мл) нагревали при 155°С в микроволновой печи в течение 5 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением (R)-N-(1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида в виде бледно-оранжевой смолы (518 мг). Часть этой смолы (39 мг, 0.10 ммоль) в безводном ТГФ (2 мл) обработали гидридом натрия (60% в минеральном масле, 5 мг, 0.12 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 10 мин добавили йодометан (0.01 мл, 0.20 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакцию повторили с оставшимся (R)-N-(1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамидом. Воду (50 мл) добавили осторожно и смесь экстрагировали EtOAc (2×100 мл). Органические слои объединили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении с получением (R)-N-(1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифтор-N-метилацетамида в виде бледно-желтой смолы (518 мг). Эту смолу (514 мг, 1.29 ммоль) растворили в МеОН (20 мл) и обработали формиатом аммония (325 мг, 6.15 ммоль) и 10% палладием на угле (50 мг). Смесь нагревали при 85°С в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры катализатор отфильтровали и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между ДХМ (50 мл) и водой (30 мл) и водный слой экстрагировали ДХМ (2×50 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и растворитель удалили при пониженном давлении с получением (R)-N-(1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифтор-N-метилацетамида в виде бледно-желтой смолы (348 мг, 46% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.13 (s, 1H), 6.19 (tq, J=55.4, 4.4 Hz, 1H), 4.65-4.15 (m, 3Н), 3.40-3.10 (m, 4H), 3.10 и 2.97 (2 s, 3H), 2.80 (br s, 2H), 2.10-1.70 (m, 6H).

Промежуточное соединение 7 (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-(2,2,2-трифтор-N-метилацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

К раствору (R)-N-(1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифтор-N-метилацетамида (248 мг, 0.67 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавили DIPEA (1.0 мл, 5.7 ммоль), РуВОР (700 мг, 1.34 ммоль) и 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)-тиазол-4-карбоновую кислоту (282 мг, 0.87 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Добавили воду (50 мл) и перемешивание продолжили в течение 1 ч. Смесь экстрагировали ДХМ (50 мл), объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-(2,2,2-трифтор-N-метилацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде бледно-желтой смолы (405 мг, 90%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.27 и 10.26 (2s, 1H), 8.32 и 8.27 (2s, 1H), 7.88 и 7.85 (2s, 1H), 6.36-6.02 (m, 1H), 4.67-4.11 (m, 2H), 3.41-3.08 (m, 5H), 3.08 и 2.95 (2s, 3H), 2.22-1.71 (m, 4H), 1.31-1.18 (m, 2H).

Промежуточное соединение 8 1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол

Раствор 5-хлор-1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразола (470 мг, 2.22 ммоль), азепан-4-ола (281 мг, 2.44 ммоль) и DIPEA (1 мл) в EtOH (3 мл) нагревали при 155°С в микроволновой печи в течение 5 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением 1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола в виде бледно-оранжевой смолы (400 мг). Эту смолу (390 мг, 1.35 ммоль) растворили в МеОН (25 мл) и обработали формиатом аммония (340 мг, 5.38 ммоль) и 10% палладием на угле (50 мг). Смесь нагревали при 85°С в течение 4 ч. После выдерживания при комнатной температуре в течение ночи дополнительное количество формиата аммония (205 мг, 3.25 ммоль) и 10% палладия на угле (50 мг) добавили в реакционную смесь, которую затем нагревали при 85°С в течение 1 ч. Катализатор отфильтровали и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между ДХМ (30 мл) и водой (20 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении с получением 1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ола в виде оранжевого масла (265 мг, 42% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.17 (s, 1H), 6.27-5.91 (m, 1H), 4.39-4.23 (m, 2H), 4.16-4.04 (m, 1H), 3.30-3.11 (m, 4H), 2.60 (br s, 3Н), 2.55 (s, 2H), 2.08-1.81 (m, 3H), 1.80-1.71 (m, 1H).

Промежуточное соединение 9 трет-бутил 2-бромо-4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-гидроксиазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 7, используя в качестве исходного вещества 1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол и 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)-тиазол-4-карбоновую кислоту получили трет-бутил 2-бромо-4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-гидроксиазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде бесцветного осадка (265 мг, 69%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.39 (s, 1H), 9.14 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 6.18 (tt, J=55.9, 4.5 Hz, 1H), 4.38-4.27 (m, 2H), 3.33-3.12 (m, 5H), 2.20 (br s, 1H), 2.35-1.58 (m, 4H), 1.70-1.48 (m, 2H).

Промежуточное соединение 10 (R)-трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-метилпиперазин-1-карбоксилат

К раствору 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола из Примера 1 (355 мг, 2.2 ммоль) и фторида калия (511 мг, 8.8 ммоль) в безводном ДМСО (20 мл) добавили (R)-трет-бутил 3-метилпиперазин-1-карбоксилат (507 мг, 2.53 ммоль) и смесь нагревали в микроволновой печи при 100°С в течение 10 ч. Смесь разделили между водой (40 мл) и EtOAc (100 мл) и органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала (R)-трет-бутил 3-метил-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперазин-1-карбоксилат в виде оранжевой смолы (627 мг). К раствору этой смолы (179 мг, 0.55 ммоль) и формиата аммония (256 мг, 4.4 ммоль) в МеОН (10 мл) в атмосфере азота добавили 10% палладий на угле (59 мг, 0.55 ммоль). Смесь нагревали при 70°С в течение 4 ч перед тем, как ее охладили, отфильтровали и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой (20 мл) и ДХМ (60 мл) и органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением (R)-трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-метилпиперазин-1-карбоксилата в виде коричневой смолы (150 мг, 80% за две стадии). ЖХМС (ES+) m/z 296 (М+1).

Промежуточное соединение 11 (S)-трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-этилпиперазин-1-карбоксилат

Следуя методике для промежуточного соединения 10 с использованием в качестве исходного вещества 5-хлор-1-метил-4-нитро-1H-пиразола из Примера 1 и (S)-трет-бутил 3-этилпиперазин-1-карбоксилата получили (S)-трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-этилпиперазин-1-карбоксилат в виде оранжевой смолы (110 мг, 65% за две стадии). ЖХМС (ES+) m/z 310 (М+1).

Промежуточное соединение 12 (R)-трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-этилпиперазин-1-карбоксилат

Следуя методике для промежуточного соединения 10 с использованием в качестве исходного вещества 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола из Примера 1 и (R)-трет-бутил 3-этилпиперазин-1-карбоксилата получили (R)-трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-этилпиперазин-1-карбоксилат в виде оранжевой смолы (118 мг, 67% за две стадии). ЖХМС (ES+) m/z 310 (М+1).

Промежуточное соединение 13 (S)-N-(азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для промежуточного соединения 4 используя в качестве исходного вещества (S)-трет-бутил 4-(бензилоксикарбониламино)азепан-1-карбоксилат получили (S)-N-(азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде бледно-желтого масла (1.35 г, 75% за три стадии). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.86 (s, 1H), 4.44-4.37 (m, 1H), 3.15-3.03 (m, 2H), 2.92-2.81 (m, 1H), 2.67-2.55 (m, 1H), 2.02-1.81 (m, 4H), 1.76-1.56 (m, 3H).

Промежуточное соединение 14 (S)-N-(1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифтор-N-метилацетамид

Следуя методике для промежуточного соединения 6 с использованием в качестве исходного вещества (S)-N-(азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида и 5-хлор-1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразола получили (S)-N-(1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифтор-N-метилацетамид в виде бледно-красной смолы (100 мг, 32% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.13 (s, 1H), 6.19 (tq, J=55.4, 4.4 Hz, 1H), 4.65-4.15 (m, 3H), 3.40-3.10 (m, 4H), 3.10 и 2.97 (2s, 3H), 2.80 (brs, 2H), 2.10-1.70 (m, 6H).

Промежуточное соединение 15 (S)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-(2,2,2-трифтор-N-метилацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 7 с использованием в качестве исходного вещества (S)-N-(1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифтор-N-метилацетамида и 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)-тиазол-4-карбоновой кислоты получили (S)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-(2,2,2-трифтор-N-метилацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде бледно-розовой смолы (80 мг 57%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.27 (s, 1H), 8.31 и 8.27 (2s, 1H), 7.88 и 7.85 (2s, 1H), 6.34-6.05 (m, 1H), 4.41-4.31 (m, 2H), 3.42-3.29 (m, 5H), 3.10 и 2.95 (2s, 3H), 2.08-1.75 (m, 4H), 1.40-1.15 (m, 2H).

Промежуточное соединение 16 3-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-он

Три одинаковых раствора гидрата гидрохлорида пиперидин-4-она (1.84 г, 12.0 ммоль), 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола из Примера 1 (1.3 г, 8.0 ммоль) и фторида калия (1.86 г, 32 ммоль) в безводном ДМСО (20 мл) нагревали в микроволновой печи при 100°С в течение 12 ч. Смеси объединили, влили в воду (700 мл) и экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-5% МеОН/ДХМ) дала 1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-он в виде желтого осадка (1.97 г, 36%). К раствору этого кетона в ДМФ (40 мл) добавили NEt3 (3.05 мл, 21.9 ммоль) и хлортриметилсилан (1.55 мл, 12.3 ммоль). Реакционную пробирку закрыли и смесь нагревали при 90°С в течение 16 ч. Смесь охладили и продукт экстрагировали EtOAc (2×50 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% Et2O/изогексан) дала 1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-4-(триметилсилилокси)-1,2,3,6-тетрагидропиридин в виде желтой смолы (1.53 г, 59%). Эту смолу растворили в MeCN (130 мл) и охладили до 0°С. Раствор SelectFluor® (1.99 г, 5.61 ммоль) в 2:1 МеСМ : ДМФ (10 мл) добавили по каплям в течение 20 мин и смесь перемешивали при температуре между -5°С и 0°С в течение 2 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток разделили между EtOAc (50 мл) и водой (40 мл). Продукт экстрагировали EtOAc (50 мл) и ДХМ (50 мл), и объединенные органические слои пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 3-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-он в виде бледно-желтого осадка (1.23 г, 99%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 (s, 1H), 5.04 (ddd, J=48.3, 8.2, 5.7 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.77-3.64 (m, 2H), 3.64-3.51 (m, 1H), 3.50-3.43 (m, 1H), 2.88-2.72 (m, 2H).

Промежуточное соединение 17 2,2,2-трифтор-N-(3-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)ацетамид

К раствору 3-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-она (1.07 г, 4.40 ммоль) в ДХМ (10 мл) при -5°С добавили по каплям раствор диэтилового эфирата трехфтористого бора (0.71 мл, 5.72 ммоль) в ДХМ (1 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин перед тем как добавили раствор этилдиазоацетата (0.60 мл, 5.72 ммоль) в ДХМ (1 мл). Смесь перемешивали при -5°С в течение 1 ч перед тем, как ей дали нагреться до комнатной температуры. Воду (5 мл) добавили и смесь перемешивали в течение 30 мин. Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала этил 6-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5-оксоазепан-4-карбоксилат в виде желтой смолы (0.85 г, 58%). Эту смолу перерастворили в 3 М соляной кислоте (30 мл) и нагревали при 100°С в течение 4 ч. Смесь сконцентрировали при пониженном давлении, перерастворили в ДХМ (30 мл) и промыли водой (20 мл). Органическую фазу пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 3-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-он в виде бледно-желтого осадка (0.30 г, 45%). К раствору этого осадка (0.30 г, 1.15 ммоль) в безводном МеОН (6 мл) и ДХМ (6 мл) добавили ацетат аммония (0.709 г, 9.20 ммоль) и измельченные активированные 4 Å молекулярные сита. Смесь нагревали при 55°С в течение 4 ч перед тем, как ее охладили до комнатной температуры. Цианоборогидрид натрия (80 мг, 1.27 ммоль) добавили по порциям и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь отфильтровали и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток перерастворили в ДХМ (10 мл) и промыли 10% водным NaOH (10 мл). Водные остатки после промывки экстрагировали EtOAc (3×20 мл) и объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле, функционализированном аминогруппами (0-100% EtOAc/изогексан) дала 3-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-амин в виде желтой смолы (0.205 г, 69%). К раствору этой смолы (0.20 г, 0.79 ммоль) и DIPEA (0.37 мл, 2.13 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавили по каплям трифторуксусный ангидрид (0.11 мл, 0.78 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч перед тем, как ее промыли водой (10 мл). Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 3-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат в виде бледно-желтого осадка (140 мг, 55%). ЖХМС (ES+) m/z 354 (М+1).

Промежуточное соединение 18 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-3-ол

К раствору (Z)-трет-бутил 3-оксо-2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепин-1-карбоксилата (2.0 г, 9.5 ммоль) в ацетонитриле (3 мл), добавили триметилсилиламид (3.76 мл, 28.4 ммоль) с последующей смолой AMBERLITE® IRA 900F (загрузка: 2-3 ммоль/г-1, 2.4 г) и получившуюся смесь нагревали при 60°С за бонезащитной стенкой в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры, раствор отфильтровали, промыли смолу ацетонитрилом и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении (температура ванны <40°С) с получением трет-бутил 5-азидо-3-оксоазепан-1-карбоксилата в виде желтой жидкости (2.21 г). К раствору азида (2.2 г, 8.70 ммоль) в ТГФ/воде (1/1, 40 мл), добавили по порциям NaBH4 (0.82 мг, 21.8 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь разбавили водой (100 мл) и экстрагировали EtOAc (100 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-60% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 5-азидо-3-гидроксиазепан-1-карбоксилат в виде масла (2.01 г). К раствору этого масла (2.0 г, 7.8 ммоль) в МеОН (20 мл), добавили HCl (4 М в 1,4-диоксане, 43 мл, 173 ммоль) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и неочищенный остаток растворили в МеОН и пропустили через SCX колонку, промыли МеОН и элюировали 7 н. аммиаком в МеОН с получением 5-азидоазепан-3-ола в виде желтого масла. К этому маслу в безводном ДМСО (20 мл) добавили фторид калия (1.68 г, 28.9 ммоль) и 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол из Примера 1 (1.17 г, 7.2 ммоль) и смесь нагревали при 65°С в течение 16 ч. Смесь разбавили водой (300 мл) и экстрагировали EtOAc (2×50 мл). Объединенные органические слои промыли водой (3×20 мл), отделили, высушили над MgSO4 и растворители удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-30% EtOAc/изогексан) дала 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ол в виде вязкого желтого масла (1.9 г, 72% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 и 8.02 (2 s, 1H), 4.15-3.97 (m, 2H), 3.95-3.83 (m, 4H), 3.58-3.46 (m, 1H), 3.39-3.16 (m, 3Н), 2.29-1.91 (m, 4H).

Промежуточное соединение 19 трет-бутил 6,6-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат

К раствору 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ола, промежуточного соединения 18 (3.4 г, 16 ммоль) в ТГФ (40 мл) и воде (8 мл) добавили трифенилфосфин (1.89 г, 7.2 ммоль) и смесь нагревали при 65°С за защитным экраном в течение 16 ч. Растворители удалили при пониженном давлении с получением 5-амино-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ола (загрязненного трифенилфосфиноксидом) в виде вязкого масла. К этому амину в ДХМ (40 мл) добавили ди-трет-бутилдикарбонат (4.49 г, 20.6 ммоль) и DIPEA (4.78 мл, 27.4 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил 6-гидрокси-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата в виде желтого масла (1.2 г). К раствору этого масла (1.2 г) в ДХМ (25 мл) добавили по порциям периодинан Десса-Мартина (1.72 г, 1.51 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 ч, смесь разбавили ДХМ (25 мл) и погасили насыщенным водным NaHCO3 (40 мл) с последующим 20% водным тиосульфатом натрия (40 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 20 мин. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-60% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6-оксоазепан-4-илкарбамат (0.56 г) в виде желтого масла. К раствору этого масла (0.51 г, 1.46 ммоль) в ДХМ (15 мл) добавили деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 1.85 мл, 5.1 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь разбавили ДХМ (30 мл), охладили в ванне со льдом/водой и погасили посредством покапельного добавления насыщенного водного NaHCO3 (30 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 6,6-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат (510 мг, 64% за четыре стадии) в виде масла.1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 4.18-4.01 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.79-3.19 (m, 4H), 2.56-2.42 (m, 1H), 2.38-1.99 (m, 4H), 1.46 (s, 9H).

Промежуточное соединение 20 трет-бутил 6-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат

К раствору 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ола, Промежуточное соединение 18 (3.4 г, 16 ммоль) в ТГФ (40 мл) и воде (8 мл), добавили трифенилфосфин (1.89 г, 7.2 ммоль) и смесь нагревали при 65°С в течение 16 ч. Растворители удалили при пониженном давлении с получением 5-амино-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ола (загрязненного трифенилфосфиноксидом) в виде вязкого масла. К этому амину в ДХМ (40 мл) добавили ди-трет-бутилдикарбонат (4.49 г, 20.6 ммоль) и DIPEA (4.78 мл, 27.4 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил 6-гидрокси-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата в виде желтого масла (2.6 г). К раствору этого масла (2.6 г, 10.2 ммоль) в ДХМ (50 мл) добавили деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 6.7 мл, 18.6 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь разбавили ДХМ (30 мл), охладили в ванне со льдом/водой и погасили посредством покапельного добавления насыщенного водного NaHCO3 (30 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 6-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат (1.07 г, 66% за три стадии) в виде бледно-желтого масла. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.14-7.97 (m, 1H), 5.04-4.46 (m, 3H), 3.96-2.99 (m, 6H), 2.42-1.64 (m, 5H), 1.70-1.22 (m, 9H).

Промежуточное соединение 21 (S)-трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-метилпиперазин-1-карбоксилат

Следуя методике для промежуточного соединения 10 с использованием в качестве исходного вещества 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола из Примера 1 и (S)-трет-бутил 3-метилпиперазин-1-карбоксилата получили (S)-трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-метилпиперазин-1-карбоксилат в виде оранжевой смолы (134 мг, 73% за две стадии). ЖХМС (ES+) m/z 296 (М+1).

Промежуточное соединение 22 трет-бутил 8-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-2,8-диазаспиро[4.5]декан-2-карбоксилат

Смесь 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола из Примера 1 (150 мг, 0.93 ммоль), трет-бутил 2,8-диазаспиро[4.5]декан-2-карбоксилата (244 мг, 1.02 ммоль) и DIPEA (1 мл) в EtOH (3 мл) нагревали при 130°С в микроволновой печи в течение 2 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и неочищенный продукт очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (50% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил 8-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-2,8-диазаспиро[4.5]декан-2-карбоксилата в виде желтого масла (245 мг, 72%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.49-3.39 (m, 2H), 3.30-3.00 (m, 6H), 1.90-1.60 (m, 6H), 1.55 (s, 9H).

Промежуточное соединение 23 (S)-5-(2,4-Диметилпиперазин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-амин

К раствору 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола из Примера 1 (355 мг, 2.2 ммоль) и фторида калия (511 мг, 8.8 ммоль) в безводном ДМСО (20 мл) добавили (R)-трет-бутил 3-метилпиперазин-1-карбоксилат (1.15 экв, 2.53 ммоль) и смесь нагревали в микроволновой печи при 100°С в течение 10 ч. Смесь разделили между водой (40 мл) и EtOAc (100 мл), органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала (S)-трет-бутил 3-метил-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперазин-1-карбоксилат в виде оранжевой смолы (627 мг). К раствору этой смолы (212 мг, 0.65 ммоль) в ДХМ (9 мл) добавили трифторуксусную кислоту (3 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь сконцентрировали при пониженном давлении и остаток разделили между водой (20 мл) и ДХМ (30 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперазина в виде желтой смолы (120 мг). К раствору этой смолы (119 мг, 0.53 ммоль) и уксусной кислоты (0.12 мл, 2.12 ммоль) в МеОН (10 мл) добавили водный формальдегид (37 мас. % в воде, 0.17 мл, 2.12 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем добавили цианоборогидрид натрия (83 мг, 1.33 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 70 ч. Смесь сконцентрировали при пониженном давлении и остаток разделили между водой (20 мл) и ДХМ (30 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2,4-диметил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперазина в виде желтой смолы (109 мг). К раствору этой смолы (108 мг, 0.45 ммоль) и формиата аммония (209 мг, 3.6 ммоль) в МеОН (10 мл) в атмосфере азота добавили 10% палладий на угле (48 мг, 0.45 ммоль). Смесь нагревали при 70°С в течение 4 ч перед тем, как ее охладили, отфильтровали и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой (20 мл) и ДХМ (50 мл) и органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением (S)-5-(2,4-диметилпиперазин-1-ил)-1-метил-1H-пиразол-4-амина в виде коричневой смолы (94 мг, 62% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.07 (s, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.51-3.41 (m, 1H), 3.36 (td, J=5.7, 2.6 Hz, 1H), 2.94-2.84 (m, 3Н), 2.36 (s, 3Н), 2.28 (td, J=5.6, 3.0 Hz, 1H), 1.92 (dd, J=11.2, 9.8 Hz, 1H), 0.86 (d, J=6.3 Hz, 3Н). Заменяемый NH2 не наблюдался.

Промежуточное соединение 24 (R)-5-(2,4-Диметилпиперазин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-амин

Следуя методике для промежуточного соединения 23, используя в качестве исходного вещества 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол из Примера 1 и (R)-трет-бутил 3-метил-пиперазин-1-карбоксилат, получили (R)-5-(2,4-диметилпиперазин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-амин в виде коричневого осадка (94 мг, 62% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.07 (s, 1H), 3.66 (s, 3Н), 3.59-3.44 (m, 2H), 2.99-2.86 (m, 3Н), 2.46-2.31 (m, 4H), 2.03 (t, J=10.7 Hz, 1H), 0.87 (d, J=6.3 Hz, 3Н). Заменяемый NH2 не наблюдался.

Промежуточное соединение 25 5-хлор-1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол

Следуя методике для промежуточного соединения 5, используя в качестве исходного вещества 1-цикпопропил-4-нитропиразол, получили 5-хлор-1-цикпопропил-4-нитро-1H-пиразол в виде бесцветного осадка (0.23 г, 63%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.09 (s, 1H), 3.62-3.54 (m, 1H), 1.38-1.28 (m, 2H), 1.25-1.13 (m, 2H).

Промежуточное соединение 26 трет-бутил 4-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат

Следуя методике для промежуточного соединения 2, используя в качестве исходного вещества 5-хлор-1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол получили, после колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан), трет-бутил 4-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат в виде желтого масла (520 мг, 9% за четыре стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.96 (s, 1H), 4.07-3.34 (m, 9H),1.49 (s, 9H), 1.34-1.17 (m, 2H), 1.08-1.01 (m, 2H).

Промежуточное соединение 27 трет-бутил 4-(4-(2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоксамидо)-1-циклопропил-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат

Следуя методике для промежуточного соединения 3, используя в качестве исходного вещества трет-бутил 4-(1-цикпопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат получили, после колоночной хроматографии на силикагеле, (0-50% EtOAc/изогексан), трет-бутил 4-(4-(2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоксамидо)-1-цикпопропил-1Н-пиразол-5-ил)-6, 6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат в виде серо-белой пены (573 мг, 62% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.23 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 3.71-3.63 (m,4H), 3.45-3.10 (m, 5H), 1.49 (s, 9H), 1.44 (s, 9H), 1.27-1.18 (m, 2H), 1.06-0.99 (m, 2H).

Промежуточное соединение 28 4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол

К раствору 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола из Примера 1 (390 мг, 2.4 ммоль) и 4-гидрокси-4-метилазепан гидрохлорида (0.48 г, 2.9 ммоль) в EtOH (9.5 мл) добавили DIPEA (1.9 мл, 10.9 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 130°С в микроволновой печи в течение 1 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-5% МеОН/ДХМ) с получением 4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола в виде бесцветного масла (410 мг, 66%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.56-3.47 (m, 1H), 3.28-3.20 (m, 2H), 3.08-3.04 (m, 1H), 2.17-2.03 (m, 1H), 1.95-1.81 (m, 4H), 1.78-1.67 (m, 1H), 1.56 (brs, 1H), 1.25 (s, 3H).

Промежуточное соединение 29 трет-бутил 2-бромо-4-(5-(4-гидрокси-4-метилазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

К раствору 4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола (212 мг, 0.83 ммоль) в МеОН (15 мл) добавили формиат аммония (386 мг, 5.63 ммоль) и 10% палладий на угле (88 мг, 0.83 ммоль) и смесь нагревали при 80°С в течение 18 ч. Смесь отфильтровали через целит® и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между ДХМ (20 мл) и водой (20 мл) и водный слой снова экстрагировали ДХМ (3×20 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении с получением 1-(4-амино-1-метил-1H-пиразол-5-ил)-4-метилазепан-4-ола в виде красного масла. К раствору этого масла (140 мг, 0.623 ммоль) в ДХМ (25 мл) добавили 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновую кислоту (241 мг, 0.75 ммоль), РуВОР (454 мг, 1.94 ммоль) и DIPEA (0.17 мл, 1.0 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавили воду (20 мл) и смесь разбавили ДХМ (100 мл). Органический слой промыли водой (20 мл), отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 2-бромо-4-(5-(4-гидрокси-4-метилазепан-1-ил)-1-метил-1H-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде серо-белого осадка (280 мг, 63% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.49 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.41-3.30 (m, 1H), 3.24-3.11 (m, 3Н), 2.39 (br s, 1 Н), 2.07-1.75 (m, 5H), 1.84-1.78 (m, 1 Н), 1.52 (s, 9H), 1.43 (s, 3H).

Промежуточное соединение 30 трет-бутил 4-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат

Следуя методике для промежуточного соединения 2, используя в качестве исходного вещества 5-хлор-1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол, получили трет-бутил 4-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат в виде бледно-зеленой смолы (11% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.13 и 8.12 (2s, 1H), 6.33-6.02 (m, 1H), 4.60-4.40 (m, 2H), 4.10-3.30 (m, 8H), 1.48 (s, 9H).

Промежуточное соединение 31 трет-бутил 4-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6-гидрокси-1,4-диазепан-1-карбоксилат

Смесь 5-хлор-1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразола (800 мг, 3.78 ммоль), 1,4-диазепан-6-ола дигидробромида (1.58 г, 5.67 ммоль) и DIPEA (2.5 мл, 14.35 ммоль) в EtOH (6 мл) нагревали при 130°С в микроволновой печи в течение 3 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток пропустили через SCX колонку, промывая ДХМ и 1:1 МеОН : ДХМ и МеОН и элюируя 1 н. аммиаком в МеОН, с получением 1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-6-ола в виде бледно-желтой смолы (1.0 г). Эту смолу (1.0 г, 3.44 ммоль) растворили в ДХМ (100 мл) и обработали ди-трет-бутилдикарбонатом (2.25 г, 10.31 ммоль) и DIPEA (2.4 мл, 13.75 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 ч и промыли насыщенным водным раствором NaHCO3 (100 мл). Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100%) EtOAc/изогексан дала трет-бутил 4-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6-гидрокси-1,4-диазепан-1-карбоксилат в виде бледно-зеленой смолы (46% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 (s, 1H), 6.18 (tdd, J=55.6, 5.6, 3.2 Hz, 1H), 4.49-4.31 (m, 2H), 4.19-2.95 (m, 10Н), 1.60-1.40 (m,9H).

Промежуточное соединение 32 5-хлор-1-(4-метоксибензил)-4-нитро-1Н-пиразол

Следуя методике для промежуточного соединения 5 используя в качестве исходного вещества 1-(4-метоксибензил)-4-нитро-1H-пиразол gave 5-хлор-1-(4-метоксибензил)-4-нитро-1Н-пиразол в виде желтого осадка (536 мг, 46%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.17 (s, 1H), 7.25 (d, J=8.3 Hz, 2H), 6.89 (d, J=8.3 Hz, 2H), 5.30 (s, 2H), 3.80 (s, 3H).

Промежуточное соединение 33 (S)-трет-бутил4-(4-амино-1-(4-метоксибензил)-1Н-пиразол-5-ил)-3-метилпиперазин-1-карбоксилат

К раствору 5-хлор-1-(4-метоксибензил)-4-нитро-1Н-пиразола (268 мг, 1.0 ммоль) и фторида калия (232 мг, 4.0 ммоль) в безводном ДМСО (20 мл) добавили (S)-трет-бутил 3-метилпиперазин-1-карбоксилат (230 мг, 1.15 ммоль) и смесь нагревали в микроволновой печи при 100°С в течение 8 ч. Смесь разделили между водой (30 мл) и EtOAc (50 мл) и органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала (S)-трет-бутил 4-(1-(4-метоксибензил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-3-метилпиперазин-1-карбоксилат в виде желтой смолы (380 мг). К раствору этой смолы (371 мг, 0.86 ммоль) в этаноле/воде (20 мл/2 мл) добавили хлорид аммония (230 мг, 4.3 ммоль) и порошкообразное железо (192 мг, 3.44 ммоль) и смесь нагревали при 80°С в течение 1.5 ч. Смесь охладили, отфильтровали через целит® и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой (30 мл) и ДХМ (40 мл) и органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-5% МеОН/ДХМ) дала (S)-трет-бутил 4-(4-амино-1-(4-метоксибензил)-1Н-пиразол-5-ил)-3-метилпиперазин-1-карбоксилат в виде красной смолы (330 мг, 84% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.17-7.11 (m, 3H), 6.82 (d, J=8.6 Hz, 2H), 5.34 (d, J=14.4 Hz, 1H), 5.17 (d, J=14.4 Hz, 1H), 3.98-3.80 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.23 (ddd, J=9.9, 6.4, 3.3 Hz, 1H), 3.01 (td, J=11.4, 3.0 Hz, 1H), 2.92-2.83 (m, 1H), 2.66 (s, 1H), 2.57 (s, 1H), 1.47 (s, 9H), 0.81 (d, J=6.3 Hz, 3H).

Промежуточное соединение 34 трет-бутил 4-(4-амино-1-(4-метоксибензил)-1Н-пиразол-5-ил)пиперазин-1-карбоксилат

Следуя методике для промежуточного соединения 33, используя в качестве исходного вещества 5-хлор-1-(4-метоксибензил)-4-нитро-1Н-пиразол и (R)-трет-бутил 3-метилпиперазин-1-карбоксилат, получили (R)-трет-бутил 4-(4-амино-1-(4-метоксибензил)-1Н-пиразол-5-ил)-3-метилпиперазин-1-карбоксилат в виде красной смолы (325 мг, 81% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.16-7.11 (m, 3H), 6.82 (d, J=8.6 Hz, 2H), 5.16 (d, J=14.8 Hz, 1H), 5.05 (d, J=14.8 Hz, 1H), 4.10-3.80 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.26-3.19 (m, 1H), 3.01 (td, J=11.4, 3.0 Hz, 1H), 2.86 (t, J=13.2 Hz, 1H), 2.66 (s, 2H), 2.57 (s, 2H), 1.47 (s, 9H), 0.81 (d, J=6.3 Hz, 3H).

Промежуточное соединение 35 (S)-5-(2-этил-4-метилпиперазин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-амин

Следуя методике для промежуточного соединения 24, используя в качестве исходного вещества (S)-трет-бутил 3-этил-пиперазин-1-карбоксилат, получили (S)-5-(2-этил-4-метилпиперазин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-амин в виде коричневого осадка (100 мг, 86% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.38 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 3.75-3.55 (m, 5H), 3.29 (dt, J=11.4, 2.4 Hz, 1H), 3.22 (ddd, J=6.0, 5.5, 2.6 Hz, 1H), 2.95 (dt, J=12.5, 2.8 Hz, 1H), 2.64 (dd, J=11.8, 3.6 Hz, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.29 (t, J=10.9 Hz, 1H), 1.48-1.31 (m, 1H), 1.26-1.11 (m, 1H), 0.82 (t, J=7.6 Hz, 3H). NH2 частично заменился.

Промежуточное соединение 36 (R)-5-(2-этил-4-метилпиперазин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-амин

Следуя методике для промежуточного соединения 24, используя в качестве исходного вещества (R)-трет-бутил 3-этил-пиперазин-1-карбоксилат, получили (R)-5-(2-этил-4-метилпиперазин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-амин в виде коричневого осадка (100 мг, 86% за четыре стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.40 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.66-3.46 (m, 2H), 3.24 (dt, J=11.3, 2.4 Hz, 1H), 3.16 (ddd, J=5.8, 5.6, 2.7 Hz, 1H), 2.94 (dt, J=12.3, 2.8 Hz, 1H), 2.77-2.34 (m, 4H), 2.21 (t, J=10.8 Hz, 1H), 1.47-1.32 (m, 1H), 1.27-1.10 (m, 1H), 0.81 (t, J=7.5 Hz, 3H). NH2 частично заменился.

Промежуточное соединение 37 трет-бутил 4-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6-фтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат

К раствору трет-бутил 4-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6-гидрокси-1,4-диазепан-1-карбоксилата (370 мг, 0.95 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавили деоксо-Fluor® (50% раствор в ТГФ, 1.0 мл, 2.37 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Насыщенный водный раствор NaHCO3 (10 мл) добавили медленно и смесь перемешивали в течение 15 мин. Водный слой экстрагировали ДХМ (10 мл), объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле дала трет-бутил 4-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6-фтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат в виде бледно-зеленой смолы (366 мг, 74%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.12 (s, 1H), 6.34-6.00 (m, 1H), 5.08-2.75 (m, 11H), 1.48 (s, 9H).

Промежуточное соединение 38 трет-бутил 6,6-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ил(метил)карбамат

К охлажденному (ванна вода со льдом) раствору трет-бутил 6,6-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата (190 мг, 0.51 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавили гексаметилдисилазид лития (1М в ТГФ, 0.8 мл, 0.8 ммоль) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Йодометан (0.06 мл, 1.02 ммоль) добавили и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавили воду (2 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (30 мл). Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-70% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 6,6-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил(метил)карбамат (180 мг, 90%) в виде желтого масла. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.09-7.99 (m, 1H), 4.57-4.38 (m, 1H), 3.85 (s, 3Н), 3.84-3.53 (m, 1H), 3.45-3.15 (m, 3Н), 2.81 (s, 3Н), 2.53-2.29 (m, 2H), 2.16-2.01 (m, 2H), 1.48 (s, 9H).

Промежуточное соединение 39 5-бромо-4-нитро-1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразол

К перемешанному раствору 1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразол-5-амина (990 мг, 6.0 ммоль) в уксусной кислоте (5 мл) добавили по каплям уксусный ангидрид (0.57 мл, 6.0 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Дополнительное количество уксусного ангидрида (0.57 мл, 6.0 ммоль) добавили в реакционную смесь, которую охладили на ледяной бане для добавления дымящейся азотной кислоты (0.28 мл, 6 ммоль) по каплям. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 7 ч и растворитель удалили при пониженном давлении. Остаток растворили в EtOH (15 мл) и добавили концентрированную соляную кислоту (10 мл). Смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 16 ч. После концентрирования при пониженном давлении остаток разделили между ДХМ (50 мл) и 5% водным раствором NaHCO3 (100 мл). Смесь отфильтровали и водный слой экстрагировали ДХМ (100 мл). Органические слои объединили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении с получением бледно-оранжевого осадка (540 мг). Этот осадок (540 мг, 2.57 ммоль) растворили в бромоформе (2.9 мл, 33 ммоль) и к раствору добавили по каплям трет-бутилнитрит (0.92 мл, 7.71 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин и затем нагревали при 145°С в течение 1.5 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением 5-бромо-4-нитро-1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразола в виде бледно-желтого осадка (536 мг, 33% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.30 (s, 1H), 4.86 (q, J=7.8 Hz, 2H).

Промежуточное соединение 40 (R)-N-(1-(4-амино-1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для промежуточного соединения 8 с использованием в качестве исходного вещества 5-бромо-4-нитро-1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразола (150 мг, 0.55 ммоль) и (R)-N-(азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида (115 мг, 0.55 ммоль) получили (R)-N-(1-(4-амино-1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде бесцветной смолы (110 мг, 53%). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.25 (s, 1H), 7.11 (br s, 1H), 4.54 (q, J=8.5 Hz, 2H), 4.35-4.22 (m, 1H), 3.40-3.23 (m, 2H), 3.21-3.08 (m, 2H), 2.62 (br s, 2H), 2.17-2.08 (m, 1H), 2.06-1.91 (m, 1Н), 1.92-1.71 (m, 4H).

Промежуточное соединение 41 трет-бутил 4-(4-нитро-1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилат

Следуя методике для промежуточного соединения 22 с использованием в качестве исходного вещества 5-бромо-4-нитро-1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразола и трет-бутил 1,4-диазепан-1-карбоксилата получили трет-бутил 4-(4-нитро-1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилат в виде бледно-желтой смолы (197 мг, 91%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.19-8.12 (m, 1H), 4.76-4.66 (m, 2H), 3.65-3.49 (m, 4H), 3.32-3.23 (m, 4H), 1.92-1.78 (m, 2H), 1.52-1.47 (m, 9H).

Промежуточное соединение 42 Бензил 4-гидрокси-5-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-карбоксилат

К раствору бензил 4-азидо-5-гидроксиазепан-1-карбоксилата (1.4 г, 4.83 ммоль) в ТГФ/воде (30 мл/6 мл) добавили трифенилфосфин (1.26 г, 4.83 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 16 ч. EtOAc (100 мл) добавили и смесь промыли водой (20 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Получившееся масло тритурировали в Et2O, получившийся осадок отфильтровали и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении с получением желтого масла. К раствору этого масла в безводном ДХМ (20 мл) при 0°С добавили DIPEA (2.5 мл, 14.4 ммоль) и трифторуксусный ангидрид (1.0 мл, 7.22 ммоль). Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч. Добавили воду (20 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (100 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (50% EtOAc/изогексан) дала бензил 4-гидрокси-5-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-карбоксилат в виде желто-золотого вязкого масла (934 мг, 54% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.40-7.29 (m, 5H), 6.49 (s, 1H), 5.20-5.11 (m, 2H), 3.94-3.25 (m,6H), 2.35-1.65 (m, 5H).

Промежуточное соединение 43 N-(1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-5-гидроксиазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Раствор бензил 4-гидрокси-5-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-карбоксилата (935 мг, 3.0 ммоль) в МеОН (100 мл) пропустили через H-Cube® (полный H2, 50°С, скорость потока: 1 мл/мин, 30 мм 10% Pd/C картридж). Растворитель удалили при пониженном давлении с получением 4-гидрокси-5-(2,2,2-трифторацетамидо)азепана в виде бледно-желтого осадка (514 мг). К раствору этого осадка (500 мг, 2.21 ммоль) в безводном ДМСО (10 мл) добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол из Примера 1 (150 мг, 0.93 ммоль) и фторид калия (513 мг, 8.85 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 65°С в течение 16 ч. Смесь влили в воду (200 мл) и экстрагировали EtOAc (5×50 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка остатка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (70% EtOAc/изогексан) дала 2,2,2-трифтор-N-(5-гидрокси-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)ацетамид в виде желтого осадка (640 мг). Часть этого осадка (200 мг, 0.57 ммоль) растворили в МеОН (25 мл) и пропустили через Н-Cube® (полный H2, 50°С, скорость потока: 1 мл/мин, 30 мм 10% Pd/C картридж). Растворитель удалили при пониженном давлении с получением N-(1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-5-гидроксиазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида в виде оранжевой пены (172 мг, 68% за 3 стадии). 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 9.22 (d, J=8.1 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.84 (d, J=5.0 Hz, 1H), 3.91-3.73 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 3.28-2.96 (m, 4H), 2.00-1.75 (m, 4H). Заменяемый NH2 не наблюдался.

Промежуточное соединение 44 трет-бутил 6-гидрокси-6-метил-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилат

К охлажденному раствору (ванна лед с водой) ди-трет-бутил 6-оксо-1,4-диазепан-1,4-дикарбоксилата (570 мг, 1.82 ммоль) в ТГФ (10 мл), добавили по каплям раствор метилмагния бромида (3 М в Et2O, 0.79 мл, 2.36 ммоль). Смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч. Водный насыщенный раствор хлорида аммония (5 мл) добавили и смесь разбавили EtOAc (30 мл) и водой (30 мл). Слои разделили и органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-70% EtOAc/изогексан) дала ди-трет-бутил 6-гидрокси-6-метил-1,4-диазепан-1,4-дикарбоксилат в виде масла (0.45 г). К раствору этого масла (0.45 г, 1.36 ммоль) в МеОН (2 мл), добавили HCl в 1,4-диоксане (4 М, 6.8 мл, 27.3 ммоль) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворители удалили при пониженном давлении. Остаток растворили в МеОН и пропустили через SCX колонку, промывая МеОН и элюируя 1 н. аммиаком в МеОН. Растворитель удалили при пониженном давлении с получением 6-метил-1,4-диазепан-6-ола в виде масла. К этому амину в EtOH (3 мл) добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол из Примера 1 (209 мг, 1.29 ммоль) и DIPEA (0.9 мл, 5.44 ммоль) и смесь нагревали в микроволновой печи при 130°С в течение 3 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении. К неочищенному трет-бутил 6-гидрокси-6-метил-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилату в ДХМ (10 мл) добавили ди-трет-бутилдикарбонат (1.18 г, 5.44 ммоль) и DIPEA (0.9 мл, 5.44 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, растворитель удалили при пониженном давлении и остаток растворили в ДХМ (30 мл). Добавили воду (20 мл) и органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-80% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 6-гидрокси-6-метил-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилат (235 мг, 22% за четыре стадии) в виде желтого масла. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 4.16-3.79 (m, 7H), 3.52-2.81 (m,4H), 1.70-1.80 (brs, 1H), 1.51 (s, 9H), 1.16 (s, 3H).

Промежуточное соединение 45 трет-бутил 6-фтор-6-метил-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилат

К раствору трет-бутил 6-гидрокси-6-метил-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилата (100 мг, 0.28 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавили деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 0.26 мл, 0.7 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь разбавили ДХМ (30 мл), охладили в ванне лед с водой и погасили посредством покапельного добавления насыщенного водного NaHCO3 (40 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Неочищенный продукт очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил 6-фтор-6-метил-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилата (70 мг, 70%) в виде чистого бесцветного масла. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 3.80 (s, 3Н), 3.73-3.32 (m, 6H), 3.26-3.03 (m, 2H), 1.50 (s, 9H), 1.32 (d, J=20.1 Hz, 3Н).

Промежуточное соединение 46 трет-бутил 6,6-дифтор-4-(4-нитро-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилат

5-хлор-4-нитро-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол (815 мг, 2.93 ммоль), 1,4-диазепан-6-ол (510 мг, 4.39 ммоль) и DIPEA (2.55 мл, 14.6 ммоль) объединили в EtOH (10 мл) и нагревали в микроволновой печи при 130°С в течение 1 ч и растворители удалили при пониженном давлении с получением 1-(4-нитро-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-6-ола. К этому амину добавили ди-трет-бутилдикарбонат (2.56 г, 11.7 ммоль) и DIPEA (2.55 мл, 14.6 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 ч, растворитель удалили при пониженном давлении и остаток растворили в ДХМ (30 мл). Добавили воду (20 мл) и органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 6-гидрокси-4-(4-нитро-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилат в виде масла (590 мг). К раствору этого масла (570 мг, 1.26 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавили по порциям периодинан Десса-Мартина (0.68 г, 1.51 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 ч, смесь разбавили ДХМ и погасили насыщенным водным NaHCO3 (40 мл) с последующим 20% водным тиосульфатом натрия (30 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 20 мин. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 4-(4-нитро-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-ил)-6-оксо-1,4-диазепан-1-карбоксилат (0.36 г) в виде масла. К раствору этого масла (0.35 г, 0.76 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавили деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 0.69 мл, 1.91 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь разбавили ДХМ (30 мл), охладили в ванне со льдом/водой и погасили посредством покапельного добавления насыщенного водного NaHCO3 (30 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Неочищенный продукт очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил 6,6-дифтор-4-(4-нитро-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилата (280 мг, 19% за четыре стадии) в виде желтого масла. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.12-8.03 (m, 1H), 5.61-5.34 (m, 2H), 4.01-3.41 (m, 6H), 3.59-3.09 (m, 4H), 1.67-1.34 (m, 9H), 0.94-0.86 (m, 2H), SiMe3 закрывался пиком внутреннего стандарта TMS.

Промежуточное соединение 47 трет-бутил 6-метокси-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилат

Раствор 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола из Примера 1 (1.62 г, 10.0 ммоль), 1,4-диазепан-6-ол (4.18 г, 15.0 ммоль) и DIPEA (6.6 мл) в EtOH (6 мл) нагревали при 130°С в микроволновой печи в течение 3 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток растворили в ДХМ (60 мл) и ДМФ (10 мл). Ди-трет-бутилдикарбонат (8.73 г, 40 ммоль) и DIPEA (3.48 мл) добавили и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил 6-гидрокси-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилата в виде желтого масла (2.13 г). К раствору этого масла (205 мг, 0.6 ммоль) в ТГФ (5 мл) при 0°С добавили гидрид натрия (60% в минеральном масле, 24 мг, 0.6 ммоль). Через 30 мин добавили йодометан (0.04 мл, 0.6 ммоль) и получившуюся смесь оставили нагреваться до комнатной температуры на 1.5 ч. Смесь разбавили ДХМ (20 мл) и промыли водой (20 мл) и насыщенным водным NaHCO3 (20 мл). Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 6-метокси-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилат в виде желтой смолы (116 мг, 33% за две стадии). ЖХМС (ES+) m/z 356 (М+1).

Промежуточное соединение 48 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол

Трифторуксусную кислоту (20 мл) добавили к раствору трет-бутил 4-азидо-5-гидроксиазепан-1-карбоксилата (7.43 г, 29.0 ммоль) в ДХМ (70 мл) и смесь нагревали за защитным экраном при 35°С в течение 4 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и остаток перерастворили в МеОН и пропустили через SCX колонку, промыли ДХМ и МеОН и элюировали 3-10% 7 н. аммиаком в МеОН/ДХМ с получением 6-азидоазепан-4-ола в виде желтого масла (4.38 г, 28.0 ммоль), которое растворили в безводном ДМСО (100 мл). Добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1H-пиразол из Примера 1 (5.20 г, 32.2 ммоль) и фторид калия (6.51 г, 112 ммоль). Смесь нагревали при 70°С в течение 16 ч, дали остыть до комнатной температуры, влили в воду (1000 мл) и экстрагировали EtOAc (4×250 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол в виде желтой смолы (7.27 г, 77% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 3.94-3.66 (m, 4H), 3.65 (td, J=9.7, 3.8 Hz, 1H), 3.44-3.18 (m, 4H), 2.50 (d, J=2.8 Hz, 1H), 2.24-2.12 (m, 2H), 2.02-1.89 (m, 2H).

Промежуточное соединение 48а 4-азидо-5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан

К раствору 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола (4.0 г, 14.2 ммоль) в безводном ДХМ (100 мл), охлажденному до 0°С добавили медленно триэтиламин (4.0 мл, 28.5 ммоль) с последующим DMAP (175 мг, 1.42 ммоль) и 4-метилбензол-1-сульфонилхлоридом (4.1 г, 21.4 ммоль) по порциям. Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. Дополнительное количество 4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (1.4 г, 7.12 ммоль) добавили в реакционную смесь, которую перемешивали при комнатной температуре в течение дополнительных 24 ч. Добавили воду (40 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (100 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (30-70% EtOAc/изогексан) дала 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ил 4-метилбензолсульфонат в виде темно-кремового осадка (2.81 г). Этот осадок (2.3 г, 5.29 ммоль) обработали раствором TBAF (1.0 М в ТГФ, 21 мл, 21.1 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры, добавили воду (30 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2×150 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (30-40% EtOAc/изогексан) дала 4-азидо-5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан в виде желтого вязкого масла (804 мг, 20% за две стадии) 1H NMR (400 MHz, CDCl2) δ 8.04 (s, 1H), 5.06 (ddt, J=46.2, 8.1, 2.5 Hz, 1H), 4.00 (dd, J=20.8, 8.1Hz, 1H), 3.79 (s, 3Н), 3.43-3.34 (m, 2H), 3.26-3.11 (m, 2H), 2.43-2.30 (m, 1H), 2.30-2.18 (m, 1H), 2.12-1.92 (m, 2H).

Промежуточное соединение 49 N-((4S,5S)-1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

К раствору 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1М-пиразол-5-ил)азепан-4-ола (7.26 г, 25.8 ммоль) в безводном ДХМ (100 мл) добавили по каплям деоксо-Fluor® (12.1 мл, 32.84 ммоль, 50% в ТГФ) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь охладили на ледяной бане и насыщенный водный раствор NaHCO3 (40 мл) добавили медленно (наблюдалось выделение пузырьков газа) и смесь экстрагировали ДХМ (150 мл). Органический слой промыли насыщенным водным раствором NaHCO3 (2×30 мл), отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением 4-азидо-5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепана в виде желтой смолы (5.55 г). Реакцию повторили для получения дополнительного количества материала. Раствор этой смолы (6.40 г, 22.6 ммоль) в ТГФ/воде (120 мл/24 мл) обработали трифенилфосфином (5.93 г, 22.6 ммоль) и смесь нагревали при 60°С в течение 16 ч. Смесь разделили между EtOAc (150 мл) и водой (20 мл) и органический слой отделили, промыли солевым раствором (20 мл), пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток перерастворили в МеОН и пропустили через SCX колонку, промыли МеОН и элюировали 3-10% 7 н. аммиаком в МеОН/ДХМ с получением 5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-амина в виде желтого масла (5.70 г). К раствору этого масла (5.7 г, 22.1 ммоль) и DIPEA (11.5 мл, 66.3 ммоль) в ДХМ (50 мл) добавили по каплям трифторуксусный ангидрид (3.38 мл, 24.3 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавили воду (15 мл) и органическую фазу отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением 2,2,2-трифтор-N-(5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)ацетамида в виде желтой смолы (7.8 г). К раствору этой смолы (7.8 г, 22.0 ммоль) и формиата аммония (10.23 г, 176.0 ммоль) в МеОН (100 мл) в атмосфере азота добавили 10% палладий на угле (585 мг, 5.5 ммоль). Смесь нагревали при 70°С в течение 4 ч перед тем, как ее охладили, отфильтровали и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой (20 мл) и ДХМ (100 мл) и органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением N-((4S,5S)-1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида в виде коричневого осадка (4.72 г, 49% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.03 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 4.90-4.76 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.52-3.43 (m, 2H), 3.12 (td, J=11.9, 5.4 Hz, 1H), 2.96 (dt, J=14.8, 4.2 Hz, 1H), 2.43-2.31 (m, 1H), 2.13-1.85 (m, 3H). Заменяемый NH2 не наблюдался.

Промежуточное соединение 49а N-((4S,5R)-1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Раствор 4-азидо-5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепана (1.4 г, 4.95 ммоль) в ТГФ/воде (30 мл/6 мл) обработали трифенилфосфином (1.3 г, 4.95 ммоль) и смесь нагревали при 60°С за защитным экраном в течение 4 ч. Смесь разделили между EtOAc (200 мл) и насыщенным водным раствором NaHCO3 (30 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл) и объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Получившееся масло тритурировали с диэтиловым эфиром, получившийся осадок отфильтровали и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении с получением 5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-амина, загрязненного трифенилфосфиноксидом в виде желтого масла. К раствору этого масла (1.27 г, 4.95 ммоль) в безводном ДХМ (40 мл) при 0°С добавили медленно DIPEA (2.6 мл, 14.8 ммоль) с последующим трифторуксусным ангидридом (0.83 мл, 5.94 ммоль) по каплям. Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. Добавили воду (40 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (150 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (40% EtOAc/изогексан) дала 2,2,2-трифтор-N-(5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)ацетамид в виде желтого вязкого масла (1.4 г). К раствору этого масла (1.4 г, 3.97 ммоль) и формиата аммония (2.5 г, 39.7 ммоль) в МеОН (40 мл) в атмосфере азота добавили 10% палладий на угле (140 мг). Смесь нагревали при 70°С в течение 30 мин перед тем, как ее охладили, отфильтровали и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой (30 мл) и ДХМ (75 мл). Водный слой экстрагировали ДХМ (2×75 мл) и объединенные органические слои отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением N-((4S,5R)-1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида в виде оранжево-желтого стекловидного вещества (1.1 г, 69% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 5.02-4.85 (m, 1H), 4.69-4.55 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.42-3.20 (m, 3Н), 3.11 (ddd, J=14.4, 6.7, 3.3 Hz, 1H), 2.36-2.22 (m, 1H), 2.23-1.94 (m, 2H), 1.90-1.82 (m, 1H). NH2 не наблюдался.

Промежуточное соединение 49b 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол

К раствору анти-5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола (1.75 г, 6.23 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавили по порциям периодинан Десса-Мартина (3.2 г, 7.47 ммоль). Поскольку наблюдалась эксзотермическая реакция, смесь охладили в ванне с холодной водой. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Насыщенный водный раствор NaHCO3 (50 мл) добавили и смесь экстрагировали ДХМ (200 мл). Органический слой промыли последовательно насыщенным водным раствором тиосульфата натрия (2×50 мл) и насыщенным водным раствором NaHCO3 (2×50 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (30-60% EtOAc/изогексан) дала 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-он в виде желтого осадка (1.55 г). К раствору этого осадка (1.5 г, 5.38 ммоль) в безводном ТГФ (40 мл) в атмосфере азота, охлажденной до -78°С, добавили по каплям раствор L-SELECTRIDE® (1М в ТГФ, 6.5 мл, 6.45 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 90 мин. Смеси дали нагреться до комнатной температуры и добавили воду (30 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (2×100 мл) и объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (50-70% EtOAc/изогексан) дала син-5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол в виде оранжево-желтого масла (845 мг, 50% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07-8.01 (m, 1H), 4.21-4.16 (m, 1H), 3.98-3.92 (m, 1H), 3.80 (s, 2H), 3.44-3.30 (m, 2H), 3.28-3.19 (m, 1H), 3.14 (ddd, J=13.3, 7.4, 4.0 Hz, 1H), 2.33-2.22 (m, 1H), 2.21-2.09 (m, 1H), 2.07 (d, J=5.1Hz, 1H), 2.01-1.86 (m, 2H). ОН не наблюдался.

Промежуточное соединение 49 с трет-бутил 5-метокси-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат

К раствору 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ола (420 мг, 1.49 ммоль) в безводном ДМФ (15 мл), охлажденному до 0°С, добавили гидрид натрия (60% в минеральном масле, 90 мг, 2.24 ммоль). После перемешивания в течение 15 мин, йодометан (0.14 мл, 2.24 ммоль) добавили и реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Добавили воду (20 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (150 мл). Органический слой промыли водой (6×30 мл) и солевым раствором (20 мл), отделили, высушили над MgSO4, и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле дала 4-азидо-5-метокси-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан в виде желтого масла (350 мг). Раствор этого масла (350 мг, 1.19 ммоль) в ТГФ/воде (15 мл/3 мл) обработали трифенилфосфином (311 мг, 1.19 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 60°С за защитным экраном в течение 18 ч. Добавили воду (2 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2×50 мл) Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Получившееся масло тритурировали в Et2O, получившийся осадок отфильтровали и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении с получением желтого масла. К раствору этого масла (319 мг, 1.19 ммоль) в безводном ДХМ (10 мл) при 0°С добавили раствор ди-трет-бутилдикарбоната (310 мг, 1.42 ммоль) в ДХМ (10 мл) и DIPEA (1.0 мл, 5.93 ммоль). Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 72 ч. Добавили воду (20 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (100 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (40-50% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 5-метокси-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат в виде желтого масла (355 мг, 64% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 5.14 (d, J=8.9 Hz, 1H), 4.00-3.90 (m, 1H), 3.78 (s, 3Н), 3.68-3.60 (m, 1H), 3.48 (t, J=12.6 Hz, 1H), 3.39 (s, 3Н), 3.33-3.23 (m, 1H), 3.19-3.11 (m, 1H), 3.04-2.95 (m, 1H), 2.25-2.06 (m, 2H), 1.88-1.76 (m, 2H), 1.45 (s, 9H).

Промежуточное соединение 49d трет-бутил 5-гидрокси-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат

Раствор син-5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола (420 мг, 1.49 ммоль) в ТГФ/воде (15 мл/3 мл) обработали трифенилфосфином (392 мг, 1.49 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 9 ч. Добавили соедвой раствор (5 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2×75 мл) Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Получившееся масло тритурировали Et2O, получившийся осадок отфильтровали и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении с получением желтого осадка. К раствору этого осадка в безводном ДХМ (10 мл) добавили раствор ди-трет-бутилдикарбоната (391 мг, 1.79 ммоль) в ДХМ (10 мл) и DIPEA (1.3 мл, 7.47 ммоль). Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. Добавили воду (10 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (100 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (60-75% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 5-гидрокси-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат, загрязненный трифенилфосфиноксидом в виде желтого масла (172 мг). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 5.20 (brs, 1H), 4.19 (br s, 1H), 3.98-3.90 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.52-3.42 (m, 1H), 3.34-3.05 (m, 3H), 2.72 (br s, 1H), 2.23-2.10 (m, 1H), 2.04-1.95 (m, 2H), 1.92-1.80 (m,1H), 1.46 (s, 9H).

Промежуточное соединение 50 5-азидо-1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол

Следуя методике для промежуточного соединения 48 с использованием в качестве исходного вещества трет-бутил 4-азидо-5-гидроксиазепан-1-карбоксилата и 5-хлор-1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразола получили 5-азидо-1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол в виде желтой смолы (1.16 г, 50% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.14-8.09 (m, 1H), 6.11 (tt, J=27.8, 4.4 Hz, 1H), 4.50-4.39 (m, 2H), 3.83 (tt, J=8.8, 3.1Hz, 1H), 3.67 (td, J=4.7, 3.6 Hz, 1H), 3.45-3.21 (m, 4H), 2.37 (d, J=2.9 Hz, 1H), 2.25-2.12 (m, 2H), 2.03-1.91 (m, 2H).

Промежуточное соединение 51 N-(1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для промежуточного соединения 49 с использованием в качестве исходного вещества 5-азидо-1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола получили N-(1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде красной смолы (720 мг, 50% за четыре стадии). ЖХМС (ES+) m/z 374 (М+1).

Промежуточное соединение 52 6,6-дифтор-N,N-диметил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-амин

К раствору трет-бутил 6,6-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата (0.96 г, 2.56 ммоль) в МеОН (3 мл) добавили HCl в 1,4-диоксане (4 М, 12.8 мл, 51.2 ммоль) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и остаток растворили в ДХМ (30 мл). Органический слой промыли насыщенным водным раствором NaHCO3 (30 мл), высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении с получением 6,6-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-амина. Этот амин растворили в МеОН /ТГФ (1:1, 50 мл) и обработали формальдегидом (38% в воде, 0.45 мл, 6.21 ммоль). Через 5 мин, цианоборогидрид натрия (0.39 г, 6.21 ммоль) добавили по порциям и получившуюся смесь перемешивали в течение 5 ч. Дополнительное количество формальдегида (38% в воде, 0.45 мл, 6.21 ммоль) и цианоборогидрида натрия (0.39 г, 6.21 ммоль) добавили и получившуюся смесь перемешивали в течение 60 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и неочищенный остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-10% МеОН/ДХМ) с получением 6,6-дифтор-N,N-диметил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-амина в виде желтого масла (0.64 г, 82% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07-8.03 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.70-3.57 (m, 2H), 3.42-3.29 (m, 1H), 3.24-3.05 (m, 1H), 3.04-2.98 (m, 1H), 2.51-2.40 (m, 1H), 2.35-2.29 (m, 6H), 2.20-2.01 (m, 2H), 1.97-1.82 (m, 1H).

Промежуточное соединение 53 трет-бутил 6-метокси-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат

К раствору 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-3-ола, Промежуточное соединение 18 (0.85 г, 3.0 ммоль) в ДМФ (5 мл), охлажденному до 0°С в атмосфере азота, добавили гидрид натрия (60% в минеральном масле, 133 мг, 3.3 ммоль) и получившуюся смесь перемешивали в течение 10 мин. Йодометан (0.37 мл, 6.0 ммоль) добавили и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавили воду (200 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2×50 мл). Объединенные органические слои высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) дала 5-азидо-3-метокси-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан в виде масла (0.76 г). Этот азид (0.76 г, 2.6 ммоль) в ТГФ (15 мл) и воде (3 мл) обработали трифенилфосфином (0.71 г, 2.7 ммоль). Смесь нагревали при 65°С в течение 16 ч и растворители удалили при пониженном давлении с получением 6-метокси-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-амина. Этот амин суспендировали в ДХМ (40 мл) и добавили ди-трет-бутилдикарбонат (1.13 г, 5.2 ммоль) и DIPEA (1.36 мл, 7.8 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 ч растворитель удалили при пониженном давлении и остаток растворили в ДХМ (40 мл). Добавили воду (20 мл) и органический слой отделили, высушили над Na2SO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 6-метокси-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат (0.84 г, 74% за три стадии) в виде масла. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (d, J=4.3 Hz, 1H), 5.39 (d, J=7.9 Hz, 1H), 4.21-3.94 (m, 1H), 3.84 (s, 3Н), 3.56-3.42 (m, 2H), 3.35-3.03 (m, 6H), 2.28-1.89 (m, 4H), 1.46 (s, 9H).

Промежуточное соединение 53а N-(1-(4-амино-1-цикпопропил-1Н-пиразол-5-ил)-6-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

К раствору 5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ола (0.69 г, 2.25 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавили деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 1.06 мл, 2.86 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 62 ч. Смесь разбавили ДХМ (30 мл), охладили в ванне со льдом/водой и погасили посредством покапельного добавления насыщенного водного NaHCO3 (100 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-3,3-дифторазепан (410 мг) в виде вязкого желтого масла. К раствору этого масла (400 мг, 1.3 ммоль) в ТГФ (10 мл) и воде (2 мл) добавили трифенилфосфин (341 мг, 1.3 ммоль) и смесь нагревали при 60°С за защитным экраном в течение 16 ч. Смесь разбавили EtOAc (30 мл) и промыли водой (3×20 мл). Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и растворители удалили при пониженном давлении. Остаток пропустили через SCX колонку, промывая ДХМ и МеОН и элюируя 3-10% 1 н. аммиаком в МеОН /ДХМ с получением 1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифторазепан-4-амина (555 мг), загрязненного трифенилфосфиноксидом, в виде вязкого желтого масла. К раствору этого масла (360 мг, 1.28 ммоль) и DIPEA (0.67 мл, 3.84 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавили трифторуксусный ангидрид (0.2 мл, 1.41 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Органический слой промыли водой (2×20 мл), отделили и пропустили через катридж для разделения фаз. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением N-(1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида (280 мг) в виде вязкого желтого масла.

К раствору этого масла (276 мг, 0.73 ммоль) и формиата аммония (340 мг, 5.84 ммоль) в МеОН (15 мл) в атмосфере азота добавили 10% палладий на угле (31 мг, 0.29 ммоль). Смесь нагревали при 80°С в течение 4 ч перед тем, как ее охладили, отфильтровали и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой (10 мл) и ДХМ (50 мл). Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением N-(1-(4-амино-1-циклопропил-1Н-пиразол-5-ил)-6-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида (210 мг, 28% за 4 стадии) в виде вязкого красного масла. ЖХМС (ES+) m/z 350 (М+1).

Промежуточное соединение 54 N-(1-(4-амино-1-метил-1H-пиразол-5-ил)-5-метоксиазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

К раствору 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола (500 мг, 1.78 ммоль) в безводном ДМФ (15 мл), охлажденному до 0°С, добавили гидрид натрия (60% в минеральном масле, 107 мг, 2.67 ммоль). После перемешивания в течение 15 мин, йодометан (0.17 мл, 2.67 ммоль) добавили и реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 90 мин. Добавили воду (20 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (200 мл), промыли водой (6×20 мл) и солевым раствором (20 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4, и сконцентрировали при пониженном давлении с получением 4-азидо-5-метокси-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепана в виде желтого масла (484 мг). Раствор этого масла (480 мг, 1.63 ммоль) в ТГФ/воде (15 мл/3 мл) обработали трифенилфосфином (426 мг, 1.63 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 5 ч. EtOAc (100 мл) добавили и смесь промыли насыщенным водным раствором NaHCO3 (20 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл) и объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Получившееся масло тритурировали в Et2O, получившийся осадок отфильтровали и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении с получением желтого масла. К раствору этого масла в безводном ДХМ (20 мл) при 0°С добавили DIPEA (0.85 мл, 4.88 ммоль) и трифторуксусный ангидрид (0.27 мл, 1.95 ммоль). Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 4 ч. Добавили воду (20 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (100 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (40-50% EtOAc/изогексан) дала 2,2,2-трифтор-N-(5-метокси-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)ацетамид в виде желтого масла (530 мг). Раствор этого масла (520 мг, 1.42 ммоль) в МеОН (20 мл) обработали формиатом аммония (900 мг, 14.2 ммоль) и 10% палладием на угле (50 мг). Смесь нагревали при 65°С в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры катализатор отфильтровали и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между насыщенным водным раствором NaHCO3 (20 мл) и ДХМ (50 мл). Водный слой экстрагировали ДХМ (3×50 мл) и объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением N-(1-(4-амино-1-метил-1H-пиразол-5-ил)-5-метоксиазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида в виде оранжевой пены (486 мг, 82% за 4 стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.85 (brs, 1H), 7.17 (s, 1H), 4.64 (dd, J=14.5, 7.2 Hz, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.57-3.36 (m, 2H), 3.41 (s, 3H), 3.15-3.05 (m, 1H), 2.93-2.85 (m, 1H), 2.61 (br s, 2H), 2.43-2.33 (m, 1H), 1.92-1.77 (m, 4H).

Промежуточное соединение 55 5-азидо-1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ол

Следуя методике для промежуточного соединения 18 с использованием в качестве исходного вещества (Z)-трет-бутил 3-оксо-2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепин-1-карбоксилата, получили 5-азидо-1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ол в виде светло-коричневой смолы (88% за четыре стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 (s, 1H), 6.36-5.99 (m, 1H), 4.89-4.70 (m, 1H), 4.55-4.23 (m, 1H), 4.18-4.00 (m, 1H), 3.96-3.76 (m, 1H), 3.73-3.44 (m, 2H), 3.42-3.12 (m, 2H), 2.32-1.95 (m, 5H).

Промежуточное соединение 56 трет-бутил 1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифторазепан-4-илкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 19 с использованием в качестве исходного вещества 5-азидо-1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ола, получили трет-бутил 1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифторазепан-4-илкарбамат, в виде бледно-зеленой смолы (1.34 г, 46% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.17-8.06 (m, 1H), 6.34-6.00 (m, 1H), 4.72-4.30 (m, 3Н), 4.12-3.95 (m, 1H), 3.66-3.10 (m, 4H), 2.59-2.03 (m, 4H), 1.45-1.41 (m, 9H).

Промежуточное соединение 57 (R)-N-(1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для промежуточного соединения 28, используя в качестве исходного вещества 5-хлор-1-цикпопропил-4-нитро-1Н-пиразол и (R)-2,2,2-трифтор-N-(гексагидро-1Н-азепин-4-ил)-ацетамид, получили (R)-N-(1-(1-цикпопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде бледно-желтой смолы (105 мг, 61%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.96 (s, 1H), 6.55-6.38 (m, 1H), 4.30-4.15 (m, 1H), 3.65-3.53 (m, 1H), 3.55-3.25 (m, 4H), 2.25-2.05 (m, 6H), 1.35-1.05 (m, 4H).

Промежуточное соединение 57а 5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-3-ол

К раствору (2)-трет-бутил 3-оксо-2,3,6,7-татрагидро-1H-азепин-1-карбоксилата (15.0 г, 71.1 ммоль) в ацетонитриле (25 мл) добавили триметилсилиламид (28.2 мл, 213 ммоль) с последующей смолой Amberlite IRA 900F (загрузка: 2-3 ммоль/г, 18 г) и получившуюся смесь нагревали при 60°С за защитным экраном в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры, раствор отфильтровали, промыли смолу ацетонитрилом и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении (температура ванны <40°С) с получением трет-бутил 5-азидо-3-оксоазепан-1-карбоксилата в виде бледно-оранжевого масла. К раствору этого масла в ТГФ/воде (150 мл/150 мл), охлажденному на ледяной бане добавили по порциям в течение 15 минут NaBH4 (6.73 г, 178 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь экстрагировали EtOAc (2×400 мл), объединенные органические слои промыли водой (2×250 мл) и солевым раствором (150 мл), отделили, высушили над MgSO4, и растворитель удалили при пониженном давлении с получением трет-бутил 5-азидо-3-гидроксиазепан-1-карбоксилата в виде бесцветного масла (19.2 г). К раствору этого масла (4.0 г, 15.6 ммоль) в ДХМ (60 мл) добавили ТФУ (30 мл) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и неочищенный остаток растворили в ДХМ и пропустили через SCX колонку, промывая ДХМ, 1:1 МеОН/ДХМ и МеОН и элюируя 1 н. аммиаком в МеОН с получением 5-азидоазепан-3-ола в виде бледно-желтой смолы (2.36 г). К этой смоле (1.17 г, 7.48 ммоль) в безводном ДМСО (25 мл) добавили фторид калия (1.74 г, 29.9 ммоль) и 5-хлор-1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол (1.61 г, 8.6 ммоль) и смесь нагревали при 70°С в течение 16 ч. Смесь разбавили водой (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические слои промыли водой (3×20 мл), отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и удалили растворители при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ол в виде вязкого желтого масла (2.24 г, 81% за четыре стадии). ЖХМС (ES+) m/z 308 (М+1).

Промежуточное соединение 57b N-(1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-б,6-дифторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

К раствору 5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-ола (1.54 г, 5.0 ммоль) в ДХМ (50 мл) добавили по порциям периодинан Десса-Мартина (2.54 г, 6.0 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч, смесь разбавили ДХМ (25 мл) и погасили насыщенным водным NaHCO3 (50 мл) с последующим насыщенным водным тиосульфатом натрия (50 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 20 мин. Органический слой отделили и водную фазу экстрагировали EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и удалили растворители при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-3-он (1.22 г) в виде бледно-желтого осадка. К раствору этого осадка (1.22 г, 4.0 ммоль) в ДХМ (60 мл) добавили деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 2.68 мл, 7.3 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 62 ч. Смесь разбавили ДХМ (30 мл), охладили в ванне со льдом/водой и погасили посредством покапельного добавления насыщенного водного NaHCO3 (100 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-3,3-дифторазепан (860 мг) в виде вязкого желтого масла. К раствору этого масла (0.85 г, 2.6 ммоль) в ТГФ (20 мл) и воде (4 мл) добавили трифенилфосфин (682 мг, 2.6 ммоль) и смесь нагревали при 60°С за защитным экраном в течение 16 ч. Смесь разбавили EtOAc (30 мл) и промыли водой (3×20 мл). Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и удалили растворители при пониженном давлении. Остаток пропустили через SCX колонку, промывая ДХМ и 1:1 МеОН : ДХМ и МеОН и элюируя 1 н. аммиаком в МеОН с получением 1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифторазепан-4-амина (783 мг) загрязненного трифенилфосфиноксидом) в виде вязкого темно-желтого масла. К раствору этого масла (0.78 г, 2.60 ммоль) и DIPEA (1.36 мл, 7.80 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавили трифторуксусный ангидрид (0.4 мл, 2.86 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Органический слой промыли водой (2×20 мл), отделили и пропустили через катридж для разделения фаз. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением N-(1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида в виде желтого осадка (880 мг, 44% за 4 стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.99-7.95 (m, 1H), 6.55 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.59-4.50 (m, 1H), 3.74-3.62 (m, 3Н), 3.44-3.34 (m, 2H), 2.55-2.44 (m, 2H), 2.31-2.14 (m, 2H), 1.39-1.07 (m, 4H).

Промежуточное соединение 58 (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-цикпопропил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

К раствору (R)-N-(1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида (0.725 г, 2.00 ммоль) в МеОН (20 мл) добавили 10% палладий на угле (0.75 г, 7.07 ммоль) и формиат аммония (0.507 г, 8.03 ммоль). Смесь нагревали при 80°С в течение 3 ч. Смесь отфильтровали через целит® и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток перерастворили в ДХМ (20 мл) и добавили 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоновую кислоту (0.74 г, 2.29 ммоль), РуВОР (1.57 г, 3.01 ммоль) и DIPEA (1 мл, 5.6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавили воду (20 мл) и перемешивание продолжили в течение 10 мин. Слои разделили и водный слой экстрагировали ДХМ (2×20 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и растворитель удалили при пониженном давлении. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-циклопропил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1H-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамата в виде светло-коричневого осадка (0.98 г, 77% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.26 (s, 1Н), 8.43 (s, 1Н), 7.71 (s, 1H), 6.47 (d, J=8.3 Hz, 1H), 4.25-4.15 (m, 1H), 3.47-3.35 (m, 3Н), 3.29-3.13 (m, 2H), 2.46-1.57 (m, 6H), 1.52 (s, 9H), 1.23-1.17 (m, 2H), 1.12-0.96 (m, 2H).

Промежуточное соединение 58а 5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ол

Следуя методике для промежуточного соединения 48 с использованием в качестве исходного вещества трет-бутил 4-азидо-5-гидроксиазепан-1-карбоксилата получили 5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол в виде желтой смолы (1.2 г, 72%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.96 (s, 1H), 3.82 (tt, J=8.5, 4.8 Hz, 1H), 3.65 (add, J=10.0, 8.5, 3.8 Hz, 1H), 3.62-3.54 (m, 1H), 3.52-3.37 (m, 2H), 3.31 (tdd, J=14.1, 5.7, 3.8 Hz, 2H), 2.50 (d, J=3.1 Hz, 1H), 2.24-2.13 (m, 2H), 2.04-1.92 (m, 2H), 1.31-1.20 (m, 2H), 1.14-1.05 (m, 2H).

Промежуточное соединение 58b N-(1-(4-амино-1-циклопропил-1Н-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для промежуточного соединения 49 с использованием в качестве исходного вещества 5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола получили N-(1-(4-амино-1-цикпопропил-1H-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде оранжевой смолы (900 мг, 67% за 4 стадии). ЖХМС (ES+) m/z 350 (М+1).

Промежуточное соединение 59 5-хлор-1-этил-4-нитро-1Н-пиразол

Следуя методике для промежуточного соединения 5, используя в качестве исходного вещества 1-этил-4-нитропиразол, получили 5-хлор-1-этил-4-нитро-1Н-пиразол в виде бесцветного осадка (1.3 г, 74%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.16 (s, 1H), 4.26 (q, J=7 Hz, 2H), 1.50 (t, J=7 Hz, 3H).

Промежуточное соединение 60 N-(1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для промежуточного соединения 28, используя в качестве исходного вещества 5-хлор-1-этил-4-нитро-1Н-пиразол и 2,2,2-трифтор-N-(гексагидро-1H-азепин-4-ил)-ацетамид, получили N-(1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде бледно-желтой смолы (136 мг, 55%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 (s, 1H), 6.39-6.37 (m, 1H), 4.22-4.19 (m, 1H), 4.12 (q, J=7 Hz, 2H), 3.42-3.35 (m, 1H), 3.27-3.18 (m, 3H), 2.25-2.05 (m, 2H), 2.00-1.75 (m, 4H), 1.47 (t, J=7 Hz, 3H).

Промежуточное соединение 61 (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-этил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 58, используя в качестве исходного вещества (R)-N-(1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид, получили (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-этил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде светло-коричневого осадка (186 мг, 31% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.30 (s, 1H),8.41 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 6.44 (d, J=8.2 Hz, 1H), 4.25-4.17 (m, 1H), 4.06 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.40-3.32 (m, 2H), 3.23-3.10 (m, 2H), 2.23-2.09 (m, 2H), 2.06-1.94 (m,2H), 1.91-1.68 (m, 2H), 1.54 (s, 9H), 1.48 (t, J=7.2 Hz, 3H).

Промежуточное соединение 62 1-((3-Метилоксетан-3-ил)метил)-1Н-пиразол-4-амин

Смесь 4-нитропиразола (1.13 г, 10 ммоль) и K2CO3 (3.4 г, 25 ммоль) в MeCN (50 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин перед добавлением 3-(бромметил)-3-метилоксетана (1.8 г, 11 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч, отфильтровали и фильтрационный остаток промыли MeCN. Фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (градиент 0-100% EtOAc/изогексан) с получением 1-((3-метилоксетан-3-ил)метил)-4-нитро-1Н-пиразола в виде бесцветного осадка (1.43 г, 73%). Часть этого осадка (206 мг, 1.04 ммоль) растворили в МеОН (20 мл) обработали формиатом аммония (260 мг, 4.13 ммоль) и 10% палладием на угле (50 мг). Смесь нагревали при 80°С в течение 1.5 ч, охладили, отфильтровали через целит® и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении с получением 1-((3-метилоксетан-3-ил)метил)-1Н-пиразол-4-амина в виде бледно-розовой смолы (160 мг, 92%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.15 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 4.66 (d, J=6.1Hz, 2H), 4.37 (d, J=6.1 Hz, 2H), 4.19 (s, 2H), 2.91 (s, 2H), 1.23 (s, 3H).

Промежуточное соединение 63 трет-бутил 4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)бут-3-инилкарбамат

Раствор трет-бутил 3-бутин-1-илкарбамата (123 мг, 0.728 ммоль) в NEt3 (4 мл) обработали 5-бромо-1-метил-4-нитро-1Н-пиразолом (100 мг, 0.485 ммоль) и диметилсульфоксидным комплексом бромида меди (I) (10 мг, 0.049 ммоль). Смесь дегазировали четыре раза откачкой и заполнением газообразным азотом перед добавлением тетракис(трифенилфосфин)-палладия (0) (28 мг, 0.024 ммоль). Дегазацию повторили дважды и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Добавили дополнительное количество трет-бутил 3-бутин-1-илкарбамат (123 мг, 0.728 ммоль) и диметилсульфоксидного комплекса бромида меди (I) (10 мг, 0.049 ммоль) и смесь дегазировали три раза. Тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (28 мг, 0.024 ммоль) добавили и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Смесь разбавили EtOAc (100 мл) и промыли водой (20 мл) и солевым раствором (20 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка остатка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (30-40% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 4-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)бут-3-инилкарбамат в виде желтого масла (112 мг, 78%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.05 (s, 1H), 5.03 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.46 (q, J=6.4 Hz, 2H), 2.79 (t, J=6.4 Hz, 2H), 1.67-1.27 (m, 9H).

Промежуточное соединение 64 5-хлор-1-циклопропилметил-4-нитро-1Н-пиразол

Следуя методике для промежуточного соединения 5, используя в качестве исходного вещества 1-циклопропилметил-4-нитропиразол, получили 5-хлор-1-циклопропилметил-4-нитро-1H-пиразол в виде бесцветного масла (1.16 г, 56%). 1Н-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.17 (s, 1H), 4.07 (d, J=7Hz, 2H), 1.39-1.28 (m, 1H), 0.66-0.59 (m, 2H), 0.50-0.40 (m, 2H).

Промежуточное соединение 65 (R)-N-(1-(1-циклопропилметил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для промежуточного соединения 28, используя в качестве исходного вещества 5-хлор-1-цикпопропилметил-4-нитро-1H-пиразол и (R)-2,2,2-трифтор-N-(гексагидро-1H-азепин-4-ил)-ацетамид, получили (R)-N-(1-(1-циклопропилметил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде бледно-желтой смолы (0.98 г, 55%). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.08 (s, 1H), 6.42-6.39 (m, 1H), 4.22-4.14 (m, 1H), 4.00-3.85 (m, 2H), 3.44-3.32 (m, 1H), 3.30-3.15 (m, 3H), 2.25-2.05 (m, 2H), 2.00-1.75 (m, 4H), 1.30-1.20 (m, 1H), 0.70-0.62 (m, 2H), 0.50-0.35 (m, 2H).

Промежуточное соединение 66 (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-(циклопропилметил)-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 58, используя в качестве исходного вещества (R)-N-(1-(1-циклопропилметил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид, получили (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-циклопропилметил-5-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде светло-коричневого осадка (310 мг, 57% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.28 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.83-7.75 (m, 1H), 6.40 (d, J=8.2 Hz, 1H), 4.22-4.14 (m, 1H), 3.90-3.80 (m, 2H), 3.39-3.30 (m, 2H), 3.23-3.11 (m, 2H), 2.02-1.91 (m, 3Н), 1.89-1.67 (m, 4H), 1.52 (s, 9H), 0.65-0.59 (m, 2H), 0.47-0.37 (m, 2H).

Промежуточное соединение 67 5-амино-N-(5-хлор-1-метил-1H-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид

Следуя методике для Примера 110 с использованием в качестве исходного вещества 3-хлор-1-метил-1Н-пиразол-4-амина, получили 5-амино-N-(5-хлор-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид в виде серо-белого осадка (146 мг, 46% за 3 стадии). 1H NMR (400 MHz, d6-ДМСО) δ 8.89 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.60-7.50 (m, 3Н), 7.28 (t, J=8.6 Hz, 2H), 3.80 (s, 3Н). ЖХМС (ES+) m/z 370 (M+1).

Промежуточное соединение 68 5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-(3-метоксипропил)-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид

Следуя методике для Примера 107, получили, после очистки с помощью препаративной ВЭЖХ, 5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-(3-метоксипропил)-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид (0.14 г, 28% за две стадии) в виде кремового осадка. 1H (400 MHz, d6-ДМСО) δ 9.75 (s, 1Н), 7.97 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.58-7.52 (m, 3Н), 7.30-7.25 (m, 2H), 4.09 (t, J=17.0 Hz, 2H), 3.27 (s, 3H), 3.23 (t, J=15.4 Hz, 2H), 1.98-1.93 (m, 2H). ЖХМС (ES+) m/z 394 (M+1)

Промежуточное соединение 69 5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид

Следуя методике для Примера 107 получили, после очистки с помощью препаративной ВЭЖХ, 5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид (0.17 г, 43% за две стадии) в виде светло-коричневого осадка. 1Н (400 MHz, d6-ДМСО) δ 9.75 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.58-7.52 (m, 3Н), 7.29-7.25 (m, 2H), 4.40-4.36 (m, 1H), 3.97-3.93 (m, 2H), 3.49-3.43 (m, 2H), 1.97-1.87 (m, 4H) ЖХМС (ES+) m/z 406 (M+1).

Промежуточное соединение 201 трет-бутил 8-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)-5,8-диазаспиро[2.6]нонан-5-карбоксилат

К раствору 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола (323 мг, 2.0 ммоль), триэтиламина (0.7 мл, 5.0 ммоль) и фторида калия (581 мг, 10.0 ммоль) в безводном ДМСО (20 мл) добавили 5,8-диазаспиро[2.6]нонана дигидробромид (686 мг, 2.4 ммоль) и смесь нагревали в микроволновой печи при 65°С в течение 4 ч. Смесь разбавили EtOAc (30 мл) и промыли насыщенным водным NaHCO3 (3×20 мл). Водный слой затем экстрагировали ДХМ (3×20 мл) и объединенные органические слои пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток загрузили на колонку SCX-2, которую промыли МеОН и элюировали 3% 7М аммиаком в МеОН /ДХМ и сконцентрировали при пониженном давлении с получением 5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5,8-диазаспиро[2.6]нонана в виде желтой смолы (153 мг). К раствору этого промежуточного соединения в ДХМ (10 мл) добавили ди-трет-бутилдикарбонат (157 мг, 0.72 ммоль) и DMAP (4 мг, 0.03 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь промыли водой (3×10 мл) и органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением трет-бутил 8-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5,8-диазаспиро[2.6]нонан-5-карбоксилата в виде желтой смолы (200 мг, 28% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 и 8.00 (2s, 1H), 3.85-3.77 (m, 3Н), 3.75-3.67 (m, 2H), 3.47-3.27 (m, 4H), 3.29-2.97 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 0.73-0.55 (m, 2H), 0.47-0.38 (m, 2H).

Промежуточное соединение 202 1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-2-он

Смесь азепан-2-она (136 мг, 1.2 ммоль), 5-бромо-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола (206 мг, 1.0 ммоль), Xantphos (116 мг, 0.20 ммоль) и карбонатана цезия (456 мг, 1.40 ммоль) в диоксане (4 мл) дегазировали барботированием азота через нее в течение 15 мин. Затем добавили трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0) (46 мг, 0.05 ммоль) и смесь дегазировали в течение дополнительных 10 мин перед тем, как ее нагревали в микроволновой печи при 140°С в течение 3 часов. Воду (10 мл) добавили и смесь экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили посредством хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением 1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-2-она в виде коричневой смолы (107 мг, 44%). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 (s, 1H), 3.96 (dd, J=15.2, 10.0 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.53 (dd, J=15.2, 7.2 Hz, 1H), 2.82-2.74 (m, 2H), 2.13-1.96 (m, 3H), 1.83-1.67 (m, 3H).

Промежуточное соединение 203 трет-бутил 4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5-оксо-1,4-диазепан-1-карбоксилат

Следуя методике для промежуточного соединения 202 с использованием в качестве исходного вещества 5-бромо-1-метил-4-нитро-1H-пиразол и трет-бутил 5-оксо-1,4-диазепан-1-карбоксилата, получили трет-бутил 4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5-оксо-1,4-диазепан-1-карбоксилат в виде коричневой смолы (136 мг, 33%). 1H NMR (400 MHz, d4-MeOD) δ 8.18 (s, 1H), 4.04-3.72 (m, 5H), 3.90-3.62 (m, 4H), 3.02-2.86 (m, 2H), 1.52 (s, 9H).

Промежуточное соединение 204 4-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)-1,4-оксазепан-5-one

Следуя методике для промежуточного соединения 202 с использованием в качестве исходного вещества 5-бромо-1-метил-4-нитро-1H-пиразола и 1,4-оксазепан-5-она, получили 4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-оксазепан-5-он в виде оранжевого осадка (40 мг, 13%). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 (s, 1H), 4.18 (dd, J=13.3, 6.4 Hz, 1H), 4.12-3.99 (m, 2H), 3.96-3.82 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.64 (dd, J=15.7, 6.4 Hz, 1H), 3.08 (ddd, J=15.6, 8.5, 2.1 Hz, 1H), 2.94 (ddd, J=15.6, 7.5, 1.8 Hz, 1H).

Промежуточное соединение 205 5-азидо-1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол

Раствор 5-азидоазепан-4-ола (2.5 г, 16.0 ммоль) растворили в безводном ДМСО (20 мл) и добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1H-пиразол (2.70 г, 15.4 ммоль) и фторид калия (3.71 г, 64 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 16 ч, дали остыть до комнатной температуры, влили в воду (300 мл) и экстрагировали EtOAc (2×50 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 5-азидо-1-(1-этил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ол в виде желтой смолы (2.5 г, 53%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.18-7.95 (m, 1H), 4.16-4.07 (m, 2H), 3.80 (tt, J=9.1, 3.1Hz, 1H), 3.67-3.59 (m, 1H), 3.42-3.18 (m, 4H), 2.51 (d, J=2.9Hz, 1H), 2.24-2.12 (m, 2H), 2.07-1.87 (m, 2H), 1.46 (t, J=7.3 Hz, 3H).

Промежуточное соединение 206 трет-бутил 1-(1-этил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-илкарбамат

К раствору 5-азидо-1-(1-этил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ола (1.25 г, 4.2 ммоль) в безводном ДХМ (20 мл) добавили по каплям деоксо-Fluor® (3.8 мл, 10.6 ммоль, 50% в ТГФ) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь охладили на ледяной бане, медленно добавили насыщенный водный NaHCO3 раствор (40 мл) (наблюдалось выделение пузырьков газа) и смесь экстрагировали ДХМ (2×20 мл). Органический слой промыли насыщенным водным раствором NaHCO3 (2×10 мл), пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением 4-азидо-5-фтор-1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепана в виде желтой смолы (0.91 г). Раствор этой смолы (0.9 г, 3.0 ммоль) в ТГФ/воде (20 мл/4 мл) обработали трифенилфосфином (0.8 г, 3.0 ммоль) и смесь нагревали при 60°С в течение 16 ч. Смесь охладили и сконцентрировали до 4 мл при пониженном давлении, разбавили EtOAc (30 мл) и экстрагировали 1М HCl (4×10 мл). Объединенные водные экстракты промыли EtOAc (20 мл) и затем защелачили с помощью 6 н. NaOH и экстрагировали ДХМ (3×20 мл). Объединенные органические слои отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением 5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-амина в виде желтого масла (0.82 г). К раствору этого масла (0.8 г, 2.9 ммоль) и DIPEA (0.77 мл, 4.4 ммоль) в ДХМ (25 мл) добавили ди-трет-бутилдикарбонат (0.97 г, 4.4 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавили воду (15 мл) и органическую фазу отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-илкарбамат в виде желтого осадка (1.1 г, 70% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 (s, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.74 (td, J=7.4, 3.6 Hz, 1H), 4.65-4.58 (m, 1H), 4.16-4.05 (m, 3Н), 3.42-3.29 (m, 2H), 3.16 (d, J=11.4 Hz, 2H), 2.31-2.18 (m, 2H), 2.20-2.06 (m, 2H), 1.94-1.82 (m, 1H), 1.60-1.45 (m, 10Н).

Промежуточное соединение 207 трет-бутил 1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5-метоксиазепан-4-илкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 120 с использованием в качестве исходного вещества 5-азидо-1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола, получили трет-бутил 1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5-метоксиазепан-4-илкарбамат в виде желтой смолы (0.59 г, 70% за три стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.09-8.03 (m, 1H), 4.21-3.99 (m, 4H), 3.54-3.30 (m, 4H), 3.33-3.05 (m, 4H), 2.40-2.30 (m, 1H), 2.08-1.98 (m, 1H), 1.95-1.78 (m, 2H), 1.50-1.40 (m, 12H).

Промежуточное соединение 208 трет-бутил 1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5-метоксиазепан-4-илкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 120 с использованием в качестве исходного вещества 5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ола, получили трет-бутил 1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5-метоксиазепан-4-илкарбамат в виде желтой смолы (0.67 г, 70% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.96 (s, 1H), 5.38 (m, 1H), 4.15-4.08 (m, 1H), 3.68-3.31 (m, 7H), 3.28-3.18 (m, 1H), 3.07 (ddd, J=14.1, 6.2, 3.1 Hz, 1H), 2.42-2.32 (m, 1H), 2.05-1.92 (m, 2H), 1.93-1.80 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.26-1.13 (m, 4H).

Промежуточное соединение 209 син-5-азидо-1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол

Следуя методике для промежуточного соединения 119 с использованием в качестве исходного вещества анти-5-азидо-1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола, получили син-5-азидо-1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол в виде коричневой смолы (0.57 г, 92% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.15-8.07 (m, 1H), 6.35-6.02 (m, 1H), 4.55-4.35 (m, 2H), 3.83 (tt, J=8.8, 2.9 Hz, 1H), 3.70-3.62 (m, 1H), 3.37 (t, J=11.8 Hz, 1H), 3.32-3.18 (m, 3Н), 2.46 (d, J=2.9 Hz, 1H), 2.25-2.12 (m, 2H), 2.11-1.85 (m, 2H).

Промежуточное соединение 210 трет-бутил 1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5-гидроксиазепан-4-илкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 122 с использованием в качестве исходного вещества 5-азидо-1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола, получили трет-бутил 1-(1-(2,2-дифторэтил)-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5-гидроксиазепан-4-илкарбамат в виде желтой смолы (0.33 г, 47% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.12 (s, 1H), 6.32-6.05 (m, 1H), 5.06 (d, J=7.9 Hz, 1H), 4.64-4.40 (m, 2H), 4.23 (m, 1H), 3.89 (m, 1H), 3.45-3.29 (m, 2H), 3.18-3.09 (m, 2H), 2.60 (m,1H), 2.20-1.93 (m, 3Н), 1.86 (dd, J=14.1, 5.4 Hz, 1H), 1.44 (s, 9H).

Промежуточное соединение 211 син-5-азидо-1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол

Следуя методике для промежуточного соединения 119 с использованием в качестве исходного вещества анти-5-азидо-1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола, получили син-5-азидо-1-(1-этил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол в виде коричневой смолы (0.5 г, 81% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.08-8.04 (m, 1H), 4.25-4.07 (m, 2H), 3.44-3.28 (m, 1H), 3.27-3.09 (m, 1H), 2.32-2.21 (m, 1H), 2.23-2.09 (m, 1H), 1.99-1.84 (m, 2H), 1.42-1.14 (m, 5H), 1.10-0.84 (m, 3Н).

Промежуточное соединение 212 трет-бутил 1-(1-этил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)-5-метоксиазепан-4-илкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 120 с использованием в качестве исходного вещества син-5-азидо-1-(1-этил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ола, получили трет-бутил 1-(1-этил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)-5-метоксиазепан-4-илкарбамат в виде желтой смолы (0.46 г, 70% за три стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 5.11 (t, J=8.8 Hz, 1H), 4.14 (q, J=7.3 Hz, 2H), 3.94 (m, 1Н), 3.65-3.61 (m, 1H), 3.59-3.18 (m, 4H), 3.31-3.20 (m, 1H), 3.18-3.10 (m, 1H), 2.99 (d, J=13.4 Hz, 1H), 2.26-2.02 (m, 2H), 1.88-1.76 (m, 2H), 1.45-1.35 (m, 12H).

Промежуточное соединение 213 3-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октан

8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октанадигидрохлорид (150 мг, 1.0 ммоль) и DIPEA (0.26 мл, 1.5 ммоль) перемешивали в ДМСО (4 мл) в течение 15 мин при комнатной температуре. Затем добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол (150 мг, 0.95 ммоль) и фторид калия (170 мг, 3 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 18 ч. Смеси дали охладиться до комнатной температуры и влили в воду (4 мл). Водную фазу экстрагировали EtOAc (3×10 мл) и объединенные органические слои промыли солевым раствором (10 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением 3-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октана (220 мг, 92%). 1H NMR (400 MHz CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 4.43 (s, 2H), 3.86 (s, 3Н), 3.73-3.70 (m, 2H), 2.61-2.58 (m 2H), 2.09-2.07 (m, 4H).

Промежуточное соединение 214 3-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-3-азабицикло[3.2.1]октан

Следуя методике для промежуточного соединения 213 с использованием в качестве исходного вещества (1R, 5S)-3-азабицикло[3.2.1]октана гидрохлорида, получили 3-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)-3-азабицикпо[3.2.1]октан в виде серо-белого осадка (290 мг, 99%). 1H NMR (400 MHz CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 3.81 (s, 3Н), 3.44 (d, J=10.1Hz, 2H), 2.66-2.59 (m, 2H), 2.29 (br s, 2H), 1.78-1.71 (m, 4H), 1.64-1.59 (m, 2H).

Промежуточное соединение 215 4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-тиазепана 1,1-диоксид

1,4-тиазепана гидрохлорид (153 мг, 1 ммоль) и DIPEA (0.26 мл, 1.5 ммоль) перемешивали в ДМСО (4 мл) в течение 15 мин при комнатной температуре. Затем добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол (150 мг, 0.95 ммоль) и фторид калия (170 мг, 3 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 18 ч. Смеси дали охладиться до комнатной температуры и влили в воду (4 мл). Водную фазу экстрагировали EtOAc (3×10 мл) и объединенные органические слои промыли солевым раствором (10 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением 3-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октана (220 мг, 92%). Это промежуточное соединение растворили в ДХМ (10 мл), охладили до 0°С, обработали т-хлорпербензойной кислотой (400 мг, 1.9 ммоль) и получившуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Получившийся преципитат отфильтровали промыли холодным ДХМ (5 мл). Фильтрат промыли 2М NaOH (5 мл) и солевым раствором (5 мл), пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением 4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-тиазепана 1,1-диоксида (280 мг, 97% за две стадии) в виде желтого осадка. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.14 (s, 1H), 3.87 (s, 3Н), 3.59-3.55 (m, 2H), 3.41-3.36 (m, 6H), 2.29-2.24 (m, 2H).

Промежуточное соединение 218 (Z)-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-4-енол

К раствору 1-метил-4-нитро-1Н-пиразола (1.5 г, 11.8 ммоль) и (Z)-цикпогепт-4-енон (1.4 г, 13.0 ммоль) в безводном ТГФ (30 мл) в атмосфере азота охладили до -78°С добавили по каплям раствор гексаметилдисилазида лития (1.0 М в ТГФ, 30 мл, 29.5 ммоль). Реакционной смеси дали нагреться до -40°С и перемешивали в течение 90 мин. Насыщенный водный раствор хлорида аммония (30 мл) добавили (сначала по каплям) и смеси дали нагреться до комнатной температуры и экстрагировали EtOAc (150 мл). Органический слой промыли водой (30 мл), промыли солевым раствором (20 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (20-25% EtOAc) дала (Z)-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-4-енол в виде рыжеватого масла (1.37 г, 49%).1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 5.96-5.86 (m, 2H), 4.13 (s, 3H), 3.70 (s, 1H), 2.63-2.54 (m, 2H), 2.41-2.31 (m, 2H), 2.16-2.03 (m, 2H), 2.00-1.92 (m, 2H).

Промежуточное соединение 219 5-((1Е,4Z)-циклогепта-1,4-диенил)-1 -метил-4-нитро-1Н-пиразол

К раствору (Z)-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-4-енола (1.35 г, 5.70 ммоль) в безводном ДХМ (60 мл) добавили по каплям раствор деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 6.2 мл, 17.1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 90 мин. Смесь охладили до 0°С и насыщенный водный раствор NaHCO3 (70 мл) добавили, первоначально по каплям, и экстрагировали ДХМ (100 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4, и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (15-20% EtOAc/гексан) дала 5-((1Е,4Z)-циклогепта-1,4-диенил)-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол в виде бледно-желтого масла (523 мг, 42%). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 5.90 (t, J=5.6 Hz, 1H), 5.88-5.79 (m, 1H), 5.71-5.63 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.14-3.08 (m, 2H), 2.62-2.55 (m, 2H), 2.44-2.37 (m, 2H).

Промежуточное соединение 220 (Z)-5-(1-Фторцикпогепт-4-енил)-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол

Следуя методике для промежуточного соединения 219, получили (Z)-5-(1-фторциклогепт-4-енил)-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол в виде серо-белого осадка (615 мг, 45%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 и 8.02 (2s, 1H), 5.98-5.94 (m, 2H), 4.10 и 4.08 (2s, 3Н), 2.67-2.54 (m, 3Н), 2.49 (t, J=13.6 Hz, 1H), 2.10-1.93 (m, 4H).

Промежуточное соединение 221 (Е)-2-азидо-5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-4-енол

К раствору 5-((1Е,4Z)-циклогепта-1,4-диенил)-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола (520 мг, 2.37 ммоль) в ДХМ (20 мл), охлажденному до 0°С, добавили по порциям m-СРВА (70%, 646 мг, 2.61 ммоль). Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 90 мин. Насыщенный водный раствор NaHCO3 (30 мл) добавили и смесь экстрагировали ДХМ (100 мл). Органический слой промыли 2М раствором NaOH (3×30 мл), отделили, высушили над MgSO4, и сконцентрировали при пониженном давлении с получением бледно-желтого осадка (595 мг). Суспензию этого осадка (590 мг, 2.51 ммоль) в МеОН/воде (16 мл/4 мл) обработали хлоридом аммония (333 мг, 6.28 ммоль) и азидом натрия (816 мг, 12.6 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 18 часов. МеОН удалили при пониженном давлении, остаток разбавили водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc (100 мл). Органический слой промыли солевым раствором (20 мл), отделили, высушили над MgSO4, и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (50-60% EtOAc/изогексан) дала (Е)-2-азидо-5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-4-енол в виде бледно-желтого масла (294 мг, 42% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 5.96 (dd, J=8.3, 4.9 Hz, 1H), 3.84-3.70 (m, 4H), 3.56-3.47 (m, 1H), 2.71 (add, J=15.5, 8.3, 2.3 Hz, 1H), 2.61-2.36 (m, 4H), 2.23-2.14 (m, 1H), 1.89-1.76 (m, 1H).

Промежуточное соединение 222 трет-бутил 2-(2,б-дифторфенил)-4-(5-(4-фтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)цикпогептил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат (Диастереомер 1)

К раствору (Е)-2-азидо-5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-4-енола (450 мг, 1.62 ммоль) в безводном ДХМ (20 мл) в атмосфере азота добавили по каплям раствор деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 1.5 мл, 4.05 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Насыщенный водный раствор NaHCO3 (20 мл) добавили и смесь экстрагировали ДХМ (75 мл). Органический слой промыли раствором NaHCO3 (20 мл), отделили, высушили над MgSO4, и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка остатка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (20-40% EtOAc/изогексан) дала бледно-желтое масло (260 мг). Раствор этого масла (250 мг, 0.89 ммоль) в ТГФ/воде (10 мл/2 мл) обработали трифенилфосфином (234 мг, 0.89 ммоль) и смесь нагревали при 60°С в течение 6 ч. Дополнительное количество трифенилфосфина (24 мг, 0.09 ммоль) добавили в реакционную смесь, которую нагревали при 60°С в течение 1 ч. Смесь разделили между EtOAc (75 мл) и насыщенным водным раствором NaHCO3 (10 мл) и органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением желтого масла. К раствору этого масла (227 мг, 0.89 ммоль) и DIPEA (0.47 мл, 2.69 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавили по каплям трифторуксусный ангидрид (0.15 мл, 1.07 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 72 ч. Добавили воду (20 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (100 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4, и сконцентрировали при пониженном давлении с получением бледно-желтого вязкого масла (240 мг). Раствор этого масла (240 мг, 0.69 ммоль) в МеОН (50 мл) пропустили через H-Cube® (полный Н2, 70°С, скорость потока: 1 мл/мин, 10% Pd/C картридж). Растворитель удалили при пониженном давлении с получением бледно-желтой пены (195 мг). К раствору этой пены (190 мг, 0.59 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавили DIPEA (1.0 мл), РуВОР (767 мг, 1.48 ммоль) и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту (231 мг, 0.65 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавили воду (30 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (100 мл и 30 мл). Органические слои объединили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (60-70% EtOAc/изогексан) с последующей хиральной препаративной ВЭЖХ дали трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(4-фтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)циклогептил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат (Диастереомер 1) в виде серо-белого осадка (53 мг, 5% за пять стадий). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.31 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.40-7.33 (m, 1H), 7.10-7.01 (m, 2H), 6.41 (d, J=7.3 Hz, 1H), 4.81-4.62 (m, 1H), 4.17-4.06 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.90-2.79 (m, 1H), 2.40-2.28 (m, 1H), 2.22-1.89 (m, 5H), 1.79-1.67 (m, 1 H), 1.60-1.48 (m, 10 H).

Промежуточное соединение 223 трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(4-фтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)циклогептил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат (Диастереомер 2)

Следуя методике для промежуточного соединения 222, получили трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(4-фтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)циклогептил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат (Диастереомер 2) в виде белого осадка (28 мг, 3% за пять стадий). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.31 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.41-7.32 (m, 1H), 7.12-7.02 (m, 2H), 6.50 (d, J=7.4 Hz, 1H), 4.81-4.63 (m, 1H), 4.18-4.05 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.87-2.79 (m, 1H), 2.38-2.25 (m, 1H), 2.21-1.91 (m, 5H), 1.68-1.50 (m, 2H), 1.54 (s, 9H).

Промежуточное соединение 224 трет-бутил 2-(2,б-дифторфенил)-4-(5-(4-фтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)циклогептил)-1-метил-1H-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат (Диастереомер 3 и Диастереомер 4)

Следуя методике для промежуточного соединения 222, получили после очистки посредством колоночной хроматографии на силикагеле, трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(4-фтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)циклогептил)-1-метил-1H-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат (Диастереомер 3 и Диастереомер 4) в виде рацемической смеси энантиомеров в виде серо-белого осадка (82 мг, 8% за пять стадий). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.35 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.44-7.35 (m, 1H), 7.11-7.01 (m, 2H), 6.46 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.64-4.44 (m, 1H), 4.26-4.19 (s, 1H), 3.85 (s, 3Н), 3.05-2.95 (s, 1H), 2.36-2.27 (m, 1H), 2.09-1.84 (m, 7H), 1.54 (s, 9H).

Промежуточное соединение 225 трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(4-фтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)циклогептил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат (Диастереомер 5)

Следуя методике для промежуточного соединения 222, получили трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(4-фтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)циклогептил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат (Диастереомер 5) в виде белого осадка (28 мг, 3% за пять стадий). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.31 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.40-7.33 (m, 1H), 7.14-7.04 (m, 2H), 6.63 (d, J=8.5 Hz, 1H), 5.06-4.88 (m, 1H), 4.30-4.16 (m, 1H), 3.85 (s, 3Н), 3.09-2.99 (m, 1H), 2.35-1.88 (m, 8H), 1.54 (s, 9H).

Промежуточное соединение 226 трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(4-фтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)циклогептил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат (Диастереомер 6, Диастереомер 7 и Диастереомер 8)

Следуя методике для промежуточного соединения 222, получили трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(4-фтор-5-(2,2,2-трифторацетамидо)циклогептил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат (Диастереомер 6, Диастереомер 7 и Диастереомер 8) в виде белого осадка (76 мг, 7% за пять стадий). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.35 и 10.31 (2s, 1H), 8.74 и 8.61 (2s, 1H), 7.84 и 7.75 (2s, 1H), 7.41-7.34 (m, 1H), 7.12-7.02 (m, 2H), 6.73-6.58 (m, 1H), 4.31-4.11 (m, 1H), 3.86 и 3.85 (2s, 3Н), 3.08-2.97 (m, 1H), 2.44-1.71 (m, 9H), 1.55 (s, 9H).

Промежуточное соединение 227 (Е)-5-(6,6-Дифторциклогепт-1-енил)-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол

(Е)-3-Оксоциклогепт-1-енил трифторметансульфонат (1.8 г, 6.98 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (2.42 г, 9.52 ммоль), ацетат калия (1.56 г, 15.8 ммоль) и Pd(dppf)Cl2 ДХМ комплекс (0.32 г, 0.39 ммоль) суспендировали в дегазированном диоксане (20 мл) и смесь нагревали до 80°С в течение 16 ч. После охлаждения, смесь отфильтровали и остаток на фильтре промыли диоксаном (3×20 мл). Этот раствор дегазировали барботированием азота через него в течение 10 мин и добавили к нему дегазированый водный раствор ацетат калия/карбонат натрия (1 M, 1:1, 20.9 мл, 20.9 ммоль), Pd(dppf)Cl2 ДХМ комплекс (0.32 г, 0.39 ммоль) и 5-хлор-1-метил-4-нитро-1 Н-пиразол (1.54 г, 9.51 ммоль). Смесь нагревали до 110°С в течение 24 ч, дали охладиться до комнатной температуры и отфильтровали через целит®. Фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении и остаток растворили в EtOAC (30 мл) и промыли водой (3×20 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала масло (460 мг). Раствор этого масла (440 мг, 1.86 ммоль) в ДХМ (8 мл) обработали деоксо-Fluor® (50% раствор в ТГФ, 1.57 мл, 4.34 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь разбавили ДХМ (20 мл), охладили в ванне вода со льдом и осторожно погасили насыщенным водным NaHCO3 (50 мл). Органический слой промыли водой (2×20 мл), пропустили через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-40% EtOAc/изогексан) дала (Е)-5-(6,6-дифторциклогепт-1-енил)-1-метил-4-нитро-1 Н-пиразол в виде масла (0.16 г, 33% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 6.24-6.16 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 2.49-2.31 (m, 4H), 1.88-1.75 (m, 3H), 1.60 (d, J=6.5 Hz, 1H).

Промежуточное соединение 228 N-(4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)ацетамид

4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ол (610 мг, 2.40 ммоль) растворили в ацетонитриле (4 мл) и охладили до 0°С, перед тем как концентрированную серную кислоту (2.1 мл) добавили по каплям. Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч перед тем, как ее влили на лед (150 г), защелачили с помощью KOH и экстрагировали ДХМ (2×30 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (20 мл), пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением N-(4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)ацетамида в виде желтого осадка (660 мг, 93%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.05-7.98 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 3.81-3.73 (m, 3H), 3.35 (ddd, J=14.2, 9.3, 2.2 Hz, 1H), 3.22 (t, J=5.9 Hz, 2H), 3.09 (ddd, J=14.2, 7.6, 2.5 Hz, 1H), 2.43-2.31 (m, 2H), 2.05-1.95 (m, 3H), 1.89-1.74 (m, 4H), 1.53-1.36 (m, 3H).

Промежуточное соединение 229 N-(1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-5-этоксиазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

Следуя методике для промежуточного соединения 54 с использованием в качестве исходного вещества 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ола и йодэтана, получили N-(1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-5-этоксиазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид в виде розовой смолы (151 мг, 60% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.73 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 4.60-4.53 (m, 1H), 3.69-3.36 (m, 8H), 3.16-3.05 (m, 1H), 2.90 (dt, J=14.4, 4.4 Hz, 1H), 2.64-2.27 (m, 3Н), 1.89-1.76 (m, 3H), 1.22 (t, J=7.0 Hz, 3H).

Промежуточное соединение 230 син-5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол

Следуя методике для промежуточного соединения 119 с использованием в качестве исходного вещества анти-5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола, получили син-5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-ол в виде коричневого масла (560 мг, 78% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.97-7.92 (m, 1H), 3.94 (dt, J=9.0, 2.7 Hz, 1H), 3.73-3.62 (m, 1H), 3.53-3.22 (m, 5H), 2.24-2.12 (m, 2H), 2.02-1.88 (m, 2H), 1.28-1.23 (m, 2H), 1.15-1.05 (m, 2H). ОН не наблюдался.

Промежуточное соединение 231 трет-бутил 1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-5-метоксиазепан-4-илкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 120 с использованием в качестве исходного вещества син-5-азидо-1-(1-циклопропил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола, получили трет-бутил 1-(1-циклопропил-4-нитро-1 Н-пиразол-5-ил)-5-метоксиазепан-4-илкарбамат в виде желтого масла (440 мг, 61% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.95 (s, 1H), 5.21 (d, J=9.0 Hz, 1H), 4.00 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.73-3.51 (m, 3H), 3.56-3.27 (m, 4H), 3.26-3.18 (m, 1H), 3.10 (d, J=13.5 Hz, 1H), 2.28-2.16 (m, 1H), 2.15-2.06 (m, 1H), 1.93-1.79 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.37-1.03 (m, 4H).

Промежуточное соединение 232 1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-4-(трифторметил)азепан-4-ол

К раствору бензил 4-оксоазепан-Ч-карбоксилата (2.0 г, 8.08 ммоль) в трифторметилтриметилсилане (1.42 мл, 9.70 ммоль) добавили фторид цезия (70.4 мг, 0.40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до полного использования трифторметилтриметилсилана по данным 19F NMR и погасили с помощью 1 М растовора HCl (50 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×50 мл) и объединенные органические слои промыли солевым раствором (50 мл), отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала бензил 4-гидрокси-4-(трифторметил)азепан-1-карбоксилат в виде желтого масла (1.48 г). К раствору этого масла (1.3 г, 4.1 ммоль) в этаноле (20 мл) добавили метилциклогексадиен (4.6 мл) и 10% палладий на угле (0.13 г). Реакционную смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 30 мин перед тем, как ее охладили до комнатной температуры, отфильтровали через целит®, промыли МеОН и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в ДМСО (10 мл) и добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол (637 мг, 3.94 ммоль) и фторид калия (916 мг, 15.76 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 16 ч, погасили водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Объединенные органические слои промыли водой (100 мл) и солевым раствором (100 мл), отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)-4-(трифторметил)азепан-4-ол в виде желтого осадка (1.06 г, 40% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 3.78 (s, 3Н), 3.71 (add, J=14.7, 10.5, 2.0 Hz, 1H), 3.31 (dt, J=11.8, 4.4 Hz, 1H), 3.14 (td,J=11.3,4.6Hz, 1 H), 3.06 (ddd, J=14.7, 5.7, 2.9 Hz, 1H), 2.31-2.13 (m, 1H), 2.14-1.94 (m, 5H), 1.92-1.83 (m,1H).

Промежуточное соединение 233 (Е)-7-азидо-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-3-енол

Следуя методике для промежуточного соединения 221, получили (E)-7-азидо-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-3-енол в виде бледно-желтого масла (244 мг, 35% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 5.95 (dd, J=8.2, 5.1 Hz, 1H), 3.80 (s, 3Н), 3.69-3.61 (m, 2H), 2.74-2.63 (m, 1H), 2.61-2.41 (m, 3Н), 2.28-2.19 (m, 1H), 1.97-1.86 (m, 1Н). ОН не наблюдался.

Промежуточное соединение 234 трет-бутил (Е)-2-метокси-5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)цикпогепт-4-енилкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 120 с использованием в качестве исходного вещества (Е)-7-азидо-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-3-енола, получили трет-бутил (Е)-2-метокси-5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-4-енилкарбамат в виде бледно-желтого осадка (360 мг, 62% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.05 (s, 1H), 5.82 (t, J=6.5 Hz, 1H), 4.77 (s, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.82 (s, 3Н), 3.42 (s, 3Н), 3.37 (t, J=7.6 Hz, 1H), 2.71-2.44 (m, 3Н), 2.34 (t, J=11.7 Hz, 1 Н), 2.22-2.11 (m, 1 Н), 1.86-1.74 (m, 1 Н), 1.47 (s, 9H).

Промежуточное соединение 235 трет-бутил 4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат

К раствору бензил 4-оксоазепан-1-карбоксилата (2.0 г, 8.09 ммоль) в диэтиловом эфире (18 мл), охлажденному до -78°С, добавили по каплям раствор метиллития литийбромидного комплекса (1.5 М в Et2O, 10.8 мл, 16.17 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин перед тем, как ее погасили насыщенным раствором хлорида аммония (50 мл). Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) дала бензил 4-гидрокси-4-метилазепан-1-карбоксилат в виде светло-желтого масла (1.94 г). Раствор этого масла (884 мг, 3.36 ммоль) в МеОН (10 мл) пропустили через H-Cube® (полный Н2, 50°С, скорость потока: 1 мл/мин, 30 мм 10% Pd/C картридж) и растворитель удалили при пониженном давлении. Остаток растворили в ДМСО (10 мл) и добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол (521 мг, 3.23 ммоль) и фторид калия (750 мг, 12.91 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 75°С в течение 16 ч перед тем, как ее погасили водой (30 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×30 мл) и объединенные органические слои промыли водой (20 мл), отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ол в виде желтого масла (290 мг). К раствору этого масла (260 мг, 1.04 ммоль) и хлорацетонитрила (139 мл, 2.09 ммоль) в уксусной кислоте (1.0 мл) при 0°С добавили по каплям концентрированную серную кислоту (308 мл, 3.15 ммоль). Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение дополнительных 2 ч перед тем, как ее погасили водным 2 М NaOH (10 мл) и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) дала 2-хлор-N-(4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)ацетамид в виде желтого масла (264 мг). К раствору этого масла (264 мг, 0.80 ммоль) в этаноле (1.4 мл) и уксусной кислоте (0.6 мл) добавили тиомочевину (73 мг, 0.96 ммоль). Реакционную смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 16 ч, погасили 1М раствором NaOH (5 мл) и экстрагировали EtOAc (10 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Остаток пропустили через SCX колонку, элюируя 1М NH3 в МеОН, с получением 4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-амина в виде смолы (172 мг). К раствору этой смолы (166 мг, 0.65 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавили DIPEA (0.57 мл, 3.27 ммоль) с последующим ди-трет-бутилдикарбонатом (171 мг, 0.78 ммоль). Реакционную смесь оставили перемешиваться при комнатной температуре в течение 16 ч, погасили водой (10 мл) и экстрагировали ДХМ (3×10 мл). Объединенные органические слои пропустили через фазовый разделитель и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат в виде желтого масла (188 мг, 14% over six steps). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 4.53 (s, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.38-3.28 (m, 1H), 3.28-3.16 (m, 2H), 3.11-3.03 (m, 1H), 2.28-2.12 (m, 2H), 1.90-1.69 (m, 4H), 1.44 (d, J=7.2 Hz, 12H).

Промежуточное соединение 236 5-(4-фтор-8-оксабицикло[5.1.0]октан-4-ил)-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол

К раствору (Z)-5-(1 -фторциклогепт-4-енил)-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола (900 мг, 3.77 ммоль) в ДХМ (30 мл) при 0°С добавили по порциям мета-хлорпероксибензойную кислоту (1.0 г, 4.14 ммоль). Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 90 мин перед тем, как ее погасили насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (30 мл). Смесь экстрагировали ДХМ (100 мл), промыли водным 2 М NaOH (2×50 мл) и солевым раствором (30 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением 5-(4-фтор-8-оксабицикло[5.1.0]октан-4-ил)-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола в виде бесцветного осадка (982 мг, количественно) в виде отношения диастереомеров 2:5. 1H NMR (400 MHz, CDCl2) δ 8.07 и 8.01 (2 s, 1H), 4.12-4.00 (m, 3H), 3.27-3.11 (m, 2H), 2.90-2.63 (m, 2H), 2.24-1.74 (m, 6H).

Промежуточное соединение 237 2-азидо-5-фтор-5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)цикпогептанол

Раствор 5-(4-фтор-8-оксабицикло[5.1.0]октан-4-ил)-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола (260 мг, 1.02 ммоль) в ДМФ/воде (10 мл/1 мл) обработали хлоридом аммония (135 мг, 2.55 ммоль) и азидом натрия (332 мг, 5.1 ммоль) и смесь нагревали при 100°С в течение 48 часов. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc (100 мл) и органический слой промыли водой (7×20 мл), промыли солевым раствором (20 мл), отделили, высушили над MgSO4, и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (40% EtOAc/изогексан) дала 2-азидо-5-фтор-5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогептанол в виде белого осадка (145 мг, 48%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 и 8.05 (2s, 1H), 4.08 и 4.06 (2s, 3H), 3.83 (dd, J=10.7, 8.2 Hz, 1H), 3.65-3.58 (m, 1H), 2.87-2.55 (m, 2H), 2.33-2.21 (m, 2H), 2.17-1.98 (m, 3H), 1.98-1.84 (m, 2H).

Промежуточное соединение 238 трет-бутил 5-фтор-2-метокси-5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)цикпогептилкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 120 с использованием в качестве исходного вещества 2-азидо-5-фтор-5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогептанола, получили трет-бутил 5-фтор-2-метокси-5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогептилкарбамат в виде серо-белого осадка (155 мг, 53% за три стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 4.08 и 4.06 (2s, 3H), 3.82 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.39 (s, 3H), 2.98-2.62 (m, 1H), 2.16-1.84 (m, 7H), 1.61-1.49 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).

Промежуточное соединение 239 трет-бутил 1-(4-амино-1-метил-1H-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-илкарбамат

К раствору 5-азидо-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола (5.4 г, 19.2 ммоль) в ДХМ (150 мл) при 0°С добавили по каплям раствор Deoxofluor® в ТГФ (18.5 мл, 51.1 ммоль) за период в 15 мин. Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры в течение 18 ч. Затем смесь охладили до 0°С перед тем как добавили насыщенный раствор гидрокарбоната натрия (300 мл) по каплям. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч перед тем, как слои разделили и водный слой экстрагировали ДХМ (200 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 4-азидо-5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан в виде бледно-зеленой смолы (3.66 г). К раствору этой смолы (3.66 г, 12.9 ммоль) в ТГФ (200 мл) добавили воду (20 мл) и трифенилфосфин (3.38 г, 12.9 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 18 ч перед тем, как ее охладили до комнатной температуры и сконцентрировали при пониженном давлении. Затем остаток разбавили EtOAc (500 мл), погасили 1 н. HCl водным раствором (100 мл) и промыли водой (2×100 мл). Объединенные водные слои промыли EtOAc (300 мл) перед тем, как их подщелачили до рН 14 с помощью твердого гидроксида натрия и экстрагировали ДХМ (3×250 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении с получением 5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-амина в виде бледно-зеленой смолы (3.1 г). К раствору этой смолы (3.1 г, 12.0 ммоль) в ДХМ (150 мл) добавили триэтиламин (4 мл, 28.6 ммоль) с последующим ди-трет-бутилдикарбонатом (3.95 г, 18.0 ммоль). Реакционную смесь оставили перемешиваться при комнатной температуре в течение 2 ч, перед тем, как ее сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил-5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат в виде бледно-желтого осадка (3.7 г, 86%). К раствору этого осадка (1.5 г, 4.19 ммоль) в МеОН (100 мл) добавили формиат аммония (1.95 г, 33.58 ммоль) с последующим 10% палладием на угле (178 мг, 1.68 ммоль) и смесь нагревали при 75°С в течение 2 ч. Смесь отфильтровали через целит® и растворители сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в воде (100 мл) и экстрагировали ДХМ (3×100 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении с получением трет-бутил 1-(4-амино-1-метил-1H-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-илкарбамата в виде фиолетового осадка (1.37 г, 54% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.13 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.75 (d, J=46.1 Hz, 1H), 4.26 (s, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.49-3.30 (m, 2H), 3.13-2.88 (m, 2H), 2.62 (s, 2H), 2.29-2.15 (m, 1H), 2.10-1.97 (m, 1H), 1.89-1.80 (m, 1H), 1.75-1.54 (m, 1H), 1.45 (s, 9H).

Промежуточное соединение 240 трет-бутил 1-(4-(5-(трет-бутокси-карбонил)-амино-2-бромотиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-илкарбамат

Раствор РуВОР (3.06 г, 5.03 ммоль) и 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбонил-амино)тиазол-4-карбоновой кислоты (1.63 г, 5.04 ммоль) в ДХМ (50 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. трет-бутил 1-(4-амино-1-метил-1H-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-илкарбамат (1.37 г, 4.20 ммоль) и DIPEA (1.17 мл, 6.71 ммоль) добавили и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. Реакционную смесь разбавили ДХМ (50 мл) и промыли водой (3×50 мл). Органические слои пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка остатка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 1-(4-(5-амино-2-бромотиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1H-пиразол-5-ил)-5-фторазепан-4-илкарбамат в виде розового осадка (2.50 г, 94%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.27 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.86-4.60 (m, 1H), 3.81-3.64 (m, 3Н), 3.44-3.27 (m, 2H), 3.15-3.07 (m, 2H), 2.28-2.10 (m, 3H), 1.92-1.70 (m, 2H), 1.52 (s, 9H), 1.44 (s, 9H).

Промежуточное соединение 240а 6-азидо-6-метил-циклогекс-3-ен-1-ол

Гидрокарбонат натрия (7.5 г, 89 ммоль) и т-хлорпербензойную кислоту (20 г, 89 ммоль) добавили по порциям к раствору 1-метилциклогекса-1,4-диена (8.4 г, 89 ммоль) в ДХМ (250 мл), охлажденному до -15°С и смесь перемешивали в течение 30 мин. РЕАКЦИЮ погасили 20% раствором сульфита натрия (100 мл) и нагрели до комнатной температуры. Водный слой экстрагировали ДХМ (3×100 мл) и объединенные органические слои промыли водным раствором сульфита натрия (100 мл), водным NaHCO3 (100 мл), водой (100 мл) и солевым раствором (100 мл), пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением эпоксида в виде бесцветного масла. Эпоксид (2.1 г, 19.1 ммоль) добавили медленно к смеси азида натрия (6.2 г, 95 ммоль) в уксусной кислоте (5 мл) и воде (25 мл), перемешивая при 30°С, и получившуюся смесь перемешивали в течение 16 ч продувая любую образованную азотистоводородную кислоту in situ на конденсатором в раствор гипохлорита натрия. Смесь охладили до комнатной температуры и погасили водным NaHCO3 (20 мл). Смесь экстрагировали эфиром (3×50 мл) и объединенные органические слои промыли 2 н. водным NaOH (50 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением 6-азидо-6-метил-циклогекс-3-ен-1-ола в виде желтого масла (1.8 г, 82% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.58-5.55 (m, 2H), 3.77-3.73 (m, 1H), 2.46 (d, J=6.5 Hz, 1H), 2.30-2.27 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 2.06-2.03 (m, 2H).

Промежуточное соединение 241 5-азидо-1-бензил-5-метилазепан-4-ол

Раствор 6-азидо-6-метилциклогекс-3-енола (3.9 г, 25 ммоль) в МеОН/ДХМ (100 мл/20 мл), охлажденный до -78°С, дегазировали барботированием азота через него в течение 5 мин. Затем реакционную смесь барботировали озоном, пока она не окрасилась в иссера-голубой цвет. Снова барботировали азотом холодную реакционную смесь, пока не остался только голубой цвет. Раствор бензиламина (2.7 г, 25 ммоль), растворенного в МеОН (5 мл), добавили с последующим NaCNBH3 (6.4 г, 101.5 ммоль) в МеОН (10 мл). Смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и остаток разделили между EtOAc (50 мл) и водой (50 мл). Водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc (3×50 мл) и объединенные органические слои промыли солевым раствором (40 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка остатка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (1-10% 7 М NH3 в МеОН/ДХМ) дала 5-азидо-1-бензил-5-метилазепан-4-ол в виде вязкого желтого масла (4.8 г, 73%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.25-7.34 (m, 5H), 3.69-3.62 (m, 2H), 3.51-3.47 (m, 2Н), 2.96-2.89 (m, 1H), 2.69-2.62 (m, 3Н), 2.19-2.11 (m, 1H), 1.99-1.85 (m, 1H), 1.78-1.68 (m, 1H), 1.61-1.57 (m, 1H), 1.43 (s, 3H).

Промежуточное соединение 242 5-амино-1-бензил-5-метилазепан-4-ол

К раствору 5-азидо-1-бензил-5-метилазепан-4-ола (1.5 г, 5.76 ммоль) в ТГФ (12 мл) и воде (4 мл) медленно добавили раствор триметилфосфина (1 М в толуоле, 28 мл, 28.9 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 65°С в течение 18 ч. Смеси дали охладиться до комнатной температуры и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в 1 М HCl (30 мл) и экстрагировали EtOAc (2×25 мл). Водный слой подщелачили до рН14 водным 6 М NaOH и экстрагировали ДХМ (3×30 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения, сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (1-10% 7 М NH3 в МеОН/ДХМ) дала 5-амино-1-бензил-5-метилазепан-4-ол в виде вязкого желтого масла (1.2 г, 89%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.34-7.20 (m, 5H), 3.60-3.52 (m, 2H), 3.50-3.46 (m, 2H), 2.80-2.79 (m, 1H), 2.70-2.45 (m, 4H), 2.15-1.95 (m, 1H), 1.79-1.72 (m, 2H), 1.49-1.40 (m, 2H), 1.19 (s, 3H).

Промежуточное соединение 243 N-(1-бензил-5-гидрокси-4-метилазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид

К раствору 5-амино-1-бензил-5-метилазепан-4-ола (1.2 г, 5.12 ммоль) и Et3N (0.77 г, 7.68 ммоль) в ТГФ (20 мл) при 0°С добавили по каплям трифторуксусный ангидрид (1.18 г, 5.63 ммоль, 0.78 мл). Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 ч. Смесь разделили между EtOAc (10 мл) и водой (10 мл) и водный слой экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (30 мл), высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (1-5% (7 M NH3 в МеОН)/ДХМ) дала N-(1-бензил-5-гидрокси-4-метилазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамид (0.8 г, 47%) в виде желтой смолы. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.34-7.28 (m, 5H), 6.65 (br s, 1H), 4.22-4.15 (m, 1H), 3.60 (dd, J=9.6, 9.7 Hz, 2H), 2.90-2.75 (m, 1H), 2.70-2.65 (m, 1H), 2.60-2.49 (m, 2H), 2.20-2.10 (m, 1H), 1.95-1.80 (m, 2H), 1.75-1.55 (m, 2H), 1.58 (s, 3H).

Промежуточное соединение 244 2,2,2-Трифтор-N-(5-гидрокси-4-метилазепан-4-ил)ацетамид

К раствору N-(1-бензил-5-гидрокси-4-метилазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида (1.7 г, 5.0 ммоль) в МеОН (30 мл) добавили 1М HCl (1 мл) и гидроксид палладия на угле (0.25 г). Смесь встряхивали в атмосфере газообразного водорода (40 фунт/кв. дюйм) в течение 72 ч. Смесь отфильтровали через целит®, промыли МеОН (30 мл). Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток пропустили через SCX колонку, элюировали (1-10% (7 M NH3 в МеОН)/ДХМ) с получением 2,2,2-трифтор-N-(5-гидрокси-4-метилазепан-4-ил)ацетамида в виде желтой смолы (0.8 г, 66%). 1H (400 MHz, CDCl3) δ 6.90 (br s, 1Н), 4.22-4.16 (m, 1H), 3.70-3.60 (m, 1H), 3.40-3.35 (m, 1H), 3.15-2.99 (m, 1H), 2.90-2.75 (m, 2H), 2.20-2.05 (m, 1H), 1.99-1.75 (m, 4H), 1.53 (s, 3H).

Промежуточное соединение 245 2,2,2-Трифтор-N-(5-гидрокси-4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)ацетамид

Следуя методике для промежуточного соединения 213 с использованием в качестве исходного вещества 2,2,2-трифтор-N-(5-гидрокси-4-метилазепан-4-ил)ацетамида, получили 2,2,2-трифтор-N-(5-гидрокси-4-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)ацетамид в виде белого осадка (400 мг, 88%). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 3.77 (s, 2H), 3.54 (dd, J=10.2, 3.2 Hz, 1H), 3.49 (s, 3H), 3.41-3.32 (m, 1H), 3.30-3.22 (m, 1H), 3.13 (dt, J=13.1, 4.7 Hz, 2H), 2.22-2.00 (m, 1H), 1.95-1.72 (m, 2H), 1.24-1.15 (m, 3H), 1.08 (d, J=7.0 Hz, 1H).

Промежуточное соединение 246 трет-бутил 1-(4-(5-(трет-бутоксикарбонил-амино)-2-бромотиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифторазепан-4-илкарбамат

К раствору трет-бутил 6,6-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата (2.5 г, 6.67 ммоль) в этаноле (100 мл) и воде (10 мл) добавили хлорид аммония (3.5 г, 65.0 ммоль) и порошкообразное железо (3.0 г, 53.7 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 2.5 ч, перед тем, как ее охладили до комнатной температуры, отфильтровали через целит®, промыли МеОН и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в ДХМ (200 мл), погасили насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (300 мл) и 10% раствором сульфита натрия (100 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Слои разделили и водный слой экстрагировали ДХМ (100 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-30% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифторазепан-4-илкарбамат в виде оранжевой пены (2.12 г). Раствор РуВОР (1.92 г, 3.70 ммоль) и 2-бромо-5-(трет-бутоксикарбонил-амино)тиазол-4-карбоновой кислоты (795 мг, 2.46 ммоль) в ДХМ (50 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Добавили трет-бутил 1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифторазепан-4-илкарбамат (850 мг, 2.46 ммоль) и DIPEA (2.0 мл, 11.4 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавили ДХМ (50 мл) и промыли насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (100 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка остатка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 1-(4-(5-(трет-бутоксикарбонил-амино)-2-бромотиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифторазепан-4-илкарбамат в виде бледно-желтой пены (1.35 г, 77% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.24 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.04 (s, 1H), 3.77 (s, 3Н), 3.63-3.43 (m, 2H), 3.38-3.24 (m, 2H), 2.52-2.40 (m, 2H), 2.13-2.05 (m, 1H), 1.99 (s, 1H), 1.53 (s, 9H), 1.43 (s, 9H).

Промежуточное соединение 247 трет-бутил 1-(4-(5-(трет-бутокси-карбонил-амино)-2-бромотиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-6-метокси-6-метилазепан-4-илкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 245 с использованием в качестве исходного вещества трет-бутил 6-метокси-6-метил-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата, получили трет-бутил 1-(4-(5-(трет-бутокси-карбонил-амино)-2-бромотиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1М-пиразол-5-ил)-6-метокси-6-метилазепан-4-илкарбамат в виде бледно-желтой пены (530 мг, 79% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.43 (s, 1H), 9.25 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.03 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.71 (s, 3Н), 3.38 (s, 3Н), 3.39-3.19 (m, 4H), 3.06 (d, J=14.5 Hz, 1H), 2.36 (d, J=14.2 Hz, 1H), 2.16 (d, J=13.4 Hz, 1H), 1.77 (d, J=12.1 Hz, 1H), 1.52 (s, 9H), 1.43 (s, 9H), 1.12 (s, 3Н).

Промежуточное соединение 248 (E)-3-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-2-енон

К раствору циклогептан-1,3-диона (10 г, 79.3 ммоль) в ДХМ (500 мл) добавили пиридин (12.8 мл, 158.6 ммоль). Раствор охладили при -78°С перед добавлением трифторметансульфонового ангидрида (13.2 мл, 95.1 ммоль) по каплям. Смесь нагрели до 0°С и оставили перемешиваться в течение 4 ч перед тем, как ее погасили 1М HCl (150 мл). Органический слой промыли насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (200 мл), пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением (E)-3-оксоциклогепт-1-енил трифторметансульфоната в виде коричневого масла. К раствору этого масла (1.8 г, 6.97 ммоль) в дегазированном диоксане (200 мл) добавили ацетат калия (15.6 г, 158.6 ммоль), бис(пинаколато)дибор (24.2 г, 95.1 ммоль) и [1,1'-бис(дифенилфосфино)-ферроцен] дихлорпалладиевый(И) комплекс с дихлорметаном (3.24 г, 3.97 ммоль) и смесь нагревали при 90°С в течение 18 ч. Смесь охладили до комнатной температуры, отфильтровали через целит®, промыли МеОН (50 мл) и растворители удалили при пониженном давлении. Остаток растворили в дегазированном диоксане (200 мл) перед тем, как добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-1 Н-пиразол (15.4 г, 95.1 ммоль) с последующим [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен] дихлорпалладием (II), комплекс с дихлорметаном (3.24 мг, 3.97 ммоль) и 1/1 водным раствором карбоната натрия/ацетата калия (63 мл, 3.8 М). Смесь нагревали при 105°С в течение 3 ч. Смеси дали охладиться до комнатной температуры, отфильтровали через целит® и промыли МеОН (50 мл). Фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в EtOAc (50 мл) и промыли водой (50 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) дала (Е)-3-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-2-енон в виде светло-коричневого осадка (7.2 г, 39% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.08 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.81-2.77 (m, 2H), 2.71-2.67 (m. 2H), 2.07-1.97 (m, 4H).

Промежуточное соединение 249 (2E,6Z)-3-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)циклогепта-2,6-диенон

К раствору LiHMDS (1 М в ТГФ, 1.28 мл, 1.28 ммоль) при -78°С добавили (Е)-3-(1-метил-4-нитро-1 Н-пиразол-5-ил)циклогепт-2-енон (150 мг, 0.64 ммоль) и смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Раствор фенилселена бромида (453 мг, 1.92 ммоль) в ТГФ (0.5 мл) добавили и реакционную смесь нагрели до 0°С и перемешивали в течение 45 мин перед тем, как ее погасили насыщенным saturated водным раствором хлорида аммония (2 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×5 мл) и объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением (Е)-3-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-7-(фенилселанил)циклогепт-2-енона в виде масла. Это масло растворили в ДХМ (3 мл) и добавили пиридин (0.1 мл, 1.28 ммоль), с последующими пероксидом водорода (30% мае. в воде, 0.37 мл, 3.34 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавили 1 М HCl (10 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (2×5 мл). Объединенные органические слои промыли 1 М HCl (5 мл), водой (5 мл) и солевым раствором (5 мл), разделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала (2E,6Z)-3-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепта-2,6-диенон в виде желтого масла (26 мг, 17% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 (s, 1H), 6.88-6.82 (m, 1H), 6.26-6.23 (dd, J=12.0, 1.6 Hz, 1H), 6.19 (d, J=2.0 Hz, 1H), 3.87 (s, 3Н), 2.82-2.73 (m, 4H).

Промежуточное соединение 250 (Е)-трет-бутил 5-(1-метил-4-нитро-1 Н-пиразол-5-ил)-3-оксоцикллогепт-4-енилкарбамат

К раствору (2E,6Z)-3-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепта-2,6-диенона (690 мг, 2.95 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) добавили триметилсилиламид (1 мл, 7.57 ммоль) и смолу Amberlite™ IRA900F (590 мг, 1.47 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение 5 ч, охладили до комнатной температуры, отфильтровали и сконцентрировали при пониженном давлении с получением (Е)-6-азидо-3-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)циклогепт-2-енона в виде желтого масла. К раствору этого масла (810 мг, 2.93 ммоль) в ТГФ (20 мл) и воде (6 мл) добавили борогидрид натрия (166 мг, 4.40 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч перед тем, как ее разбавили водой (50 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (100 мл) и органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала (Е)-6-азидо-3-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогепт-2-енол в виде желтого масла. Это масло (810 мг, 2.91 ммоль) растворили в ТГФ (15 мл) и добавили к суспензии полимер-содержащего трифенилфосфина (3.1 г, 5.76 ммоль) в ТГФ (45 мл) и воде (1.5 мл). Смесь аккуратно перемешивали при 60°С в течение 18 ч, охладили до комнатной температуры и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавили в ДХМ (30 мл) и добавили ди-трет-бутилдикарбонат (754 мг, 3.46 ммоль) и DIPEA (1.51 мл, 8.64 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч, разбавили ДХМ (50 мл) и погасили насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (50 мл). Органический слой промыли водой (50 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала (Е)-трет-бутил 5-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)-3-оксоцикллогепт-4-енилкарбамат в виде белой пены (620 мг, 59% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.05 (s, 1H), 6.03-5.99 (m, 1H), 4.82-4.60 (m, 2H), 3.86-3.82 (m, 4H), 2.82-2.34 (m, 1H), 2.29-2.35 (m, 1H), 2.34-2.20 (m, 2H), 2.15-2.04 (m, 1H), 1.85-1.51 (m, 2H), 1.45 (s, 9H).

Промежуточное соединение 251 (Z)-трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(1-метил-5-(2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепин-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

К раствору (Z)-2,3,6,7-татрагидро-1H-азепина гидрохлорида (32.3 г, 0.24 ммоль) в ДМСО (650 мл) добавили 3-хлор-1-метил-4-нитро-1H-пиразол (37.2 г, 0.23 ммоль) с последующим DIPEA (64 мл, 0.36 ммоль) и фторидом калия (56.2 г, 0.96 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 75°С в течение 25 ч перед тем, как ее охладили до комнатной температуры, влили в воду (1.5 л) и экстрагировали EtOAc (4×500 мл). Объединенные органические слои промыли водой (400 мл) и солевым раствором (300 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением (Z)-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-3-ил)-2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепина в виде светло-коричневого осадка (50.7 г). К раствору этого осадка (1.80 г, 8.1 ммоль) в этаноле (80 мл) и воде (8 мл) добавили хлорид аммония (2.15 г, 40.1 ммоль) и порошкообразное железо (1.77 г, 31.8 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 1.5 ч, перед тем, как ее охладили до комнатной температуры, отфильтровали через целит® и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в ДХМ (200 мл) и промыли водой (200 мл). Водный слой экстрагировали ДХМ (100 мл) и объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением (Z)-1-метил-3-(2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепин-1-ил)-1H-пиразол-4-амина в виде коричневого масла (1.36 г, 87%). Раствор HATU (3.22 г, 8.47 ммоль), 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)-тиазол-4-карбоновой кислоты (2.52 г, 7.07 ммоль), (Z)-1-метил-3-(2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепин-1-ил)-1Н-пиразол-4-амина (1.36 г, 7.07 ммоль) и DIPEA (2.48 мл, 14.2 ммоль) в ДМФ (30 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавили ДХМ (50 мл) и промыли водой (100 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка остатка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (5-80% 10% МеОН в ДХМ/ДХМ) дала (Z)-трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(1-метил-5-(2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепин-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде коричневого осадка (2.71 г, 72% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.39 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.40-7.30 (m, 1H), 7.08-6.99 (m, 2H), 5.93-5.84 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.19 (t, J=5.1 Hz, 4H), 2.42-2.37 (m, 4H), 1.58-1.48 (m, 9H).

Промежуточное соединение 252 1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-он

К раствору 3-хлор-1-метил-4-нитро-1 Н-пиразола (1.0 г, 6.17 ммоль) в этаноле (10 мл) добавили DIPEA (2 мл, 11.4 ммоль) с последующим 4-гидроксипиридином (686 мг, 6.79 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 130°С в микроволновой печи в течение 60 мин перед тем, как растворители удалили при пониженном давлении. Очистка остатка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (75-100% EtOAc/изогексан) дала 1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ол в виде ярко-желтого осадка (1.46 г). К раствору этого масла (1.40 г, 6.17 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавили по порциям периоинан Десса-Мартина (3.1 г, 7.41 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, разбавили ДХМ (100 мл) и промыли насыщенным водным гидрокарбоната натрия (30 мл), с последующим насыщенным водным тиосульфатом натрия (30 мл), насыщенным водным гидрокарбонатом натрия (30 мл) и солевым раствором (30 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (50-75% EtOAc/изогексан) дала 1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-он в виде желтого осадка (1.32 г, 95% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.54 (t, J=6.0 Hz, 4H), 2.65 (t, J=6.0 Hz, 4H).

Промежуточное соединение 253 4-(Азидометил)-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ол

Гидрид натрия (255 мг, 6.38 ммоль) добавили по порциям к ДМСО (15 мл) при 0°С. Реакционную смесь нагрели до комнатной температуры и перемешивали в течение 15 мин перед тем, как добавили йодид триметилсульфоксония (1.34 г, 6.09 ммоль). После перемешивания в течение 90 мин при комнатной температуре, добавили раствор 1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)пиперидин-4-она (1.3 г, 5.80 ммоль) в ДМСО (15 мл). Смесь нагревали при 55°С в течение 2 ч, затем влили в воду (200 мл) и экстрагировали EtOAc (3×80 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением 6-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)-1-окса-6-азаспиро[2.5]октана в виде оранжевой жидкости. К раствору этой жидкости (1.38 г, 5.80 ммоль) в МеОН (25 мл) и воде (5 мл) добавили хлорид аммония (768 мг, 14.4 ммоль) с последующим азидом натрия (1.9 г, 29.2 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 18 ч, дали остыть до комнатной температуры и удалили МеОН при пониженном давлении. Остаток разбавили водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc (150 мл). Органический слой промыли водой (20 мл) и солевым раствором (20 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (50-75% EtOAc/изогексан) дала 4-(азидометил)-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ол в виде желтого масла (1.03 г, 63% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.64-3.54 (m, 2H), 3.42 (s, 2H), 3.05-2.96 (m, 2H), 1.92 (s, 1H), 1.81-1.77 (m, 4H).

Промежуточное соединение 254 трет-бутил (4-метокси-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метилкарбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 120 с использованием в качестве исходного вещества 4-(азидометил)-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ола, получили трет-бутил (4-метокси-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метилкарбамат в виде желтого масла (330 мг, 88% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.01 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.51 (t, J=11.8 Hz, 2H), 3.28 (d, J=5.9 Hz, 2H), 3.25 (s, 3H), 2.92 (d, J=11.8 Hz, 2H), 1.91 (d, J=13.5 Hz, 2H), 1.66 (t, J=13.5 Hz, 2H), 1.45 (s, 9H).

Промежуточное соединение 255 2,2,2-Трифтор-N-(5-фтор-2-гидрокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогептил)ацетамид

Раствор 2-азидо-5-фтор-5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)циклогептанола (280 мг, 094 ммоль) в ТГФ/воде (20 мл/4 мл) обработали трифенилфосфином (270 г, 1.03 ммоль) и смесь нагревали при 60°С за защитным экраном в течение 18 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и остаток очистили через SCX картридж, промыли МеОН и элюировали 3 н. NH3 в МеОН с получением 2-амино-5-фтор-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогептанола в виде бесцветного масла. К раствору этого масла (256 мг, 0.94 ммоль) в безводном ДХМ (20 мл) при 0°С добавили медленно DIPEA (0.49 мл, 2.82 ммоль) с последующим трифторуксусным ангидридом (0.16 мл, 1.13 ммоль) по каплям. Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. Добавили воду (20 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (100 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (30-50% EtOAc/изогексан) дала 2,2,2-трифтор-N-(5-фтор-2-гидрокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогептил)ацетамид в виде бледно-желтого масла (130 мг, 38% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 и 8.06 (2s, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.08 и 4.06 (2s, 3H), 4.05-3.92 (m, 2H), 3.06-2.69 (m, 3H), 2.32-1.89 (m, 6H).

Промежуточное соединение 257 4-(аминометил)-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)пиперидин-4-ол

Гидрид натрия (60% в минеральном масле, 200 мг, 4.9 ммоль) добавили по порциям к ДМСО (15 мл) при 0°С. Реакционную смесь нагрели до комнатной температуры и перемешивали в течение 15 мин перед тем, как добавили йодид триметилсульфоксония (1.0 г, 4.6 ммоль). После перемешивания в течение 90 мин при комнатной температуре, добавили раствор 1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-она (1.0 г, 4.45 ммоль) в ДМСО (15 мл). Смесь нагревали при 55°С в течение 3 ч, затем влили в воду (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением 6-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-1-окса-6-азаспиро[2.5]октана в виде оранжевой жидкости. К раствору этой жидкости (0.4 г, 1.67 ммоль) в реакционной пробирке добавили а 7 М раствор NH3 в МеОН (20 мл) и смесь перемешивали в закрытой пробирке при комнатной температуре в течение 24 ч. Реакционную смесь сконцентрировали при пониженном давлении и остаток очистили посредством хроматографии на силикагеле (1-10% 7 М NH3 в МеОН/ДХМ) с получением 4-(аминометил)-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)пиперидин-4-ола в виде желтого осадка, (350 мг, 60% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.64-3.54 (m, 2H), 3.09-3.03 (m, 2H), 2.72 (s, 2H), 1.73-1.62 (m, 4H). Заменяемый не наблюдался.

Промежуточное соединение 258 трет-бутил N-((4-гидрокси-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-4-пиперидил)метил)карбамат

К раствору 4-(аминометил)-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)пиперидин-4-ола (150 мг, 0.58 мл), триэтиламина (0.12 мл, 0.88 ммоль) и DMAP (17 мг, 0.15 ммоль) в ДХМ (10 мл), охлажденному до 0°С, добавили медленно раствор ди-трет-бутилдикарбоната (140 мг, 0.65 ммоль) в ДХМ (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавили воду (10 мл) и водный слой экстрагировали ДХМ (3×15 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (15 мл), пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (1-10% МеОН/ДХМ) дала трет-бутил N-((4-гидрокси-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-4-пиперидил)метил)карбамат в виде желтого осадка (140 мг, 68%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 5.10-5.03 (m, 1H), 3.76 (s, 3Н), 3.61-3.49 (m, 2H), 3.25 (d, J=6.3 Hz, 2H), 3.08-2.96 (m, 2H), 1.77-1.72 (m, 4H), 1.46 (s, 9H). ОН не наблюдался.

Промежуточное соединение 259 трет-бутил 3-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-11-окса-3,8-диазаспиро[5.5]undecane-8-карбоксилат

К раствору 4-(аминометил)-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)пиперидин-4-ола (0.5 г, 1.95 ммоль) в ТГФ (25 мл) добавили K2CO3 (0.68 г, 4.98 ммоль), растворенный в воде (10 мл). После охлаждения до 0°С, медленно добавили хлорацетилхлорид (0.19 мл, 2.45 ммоль). Смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч, разделили между водой (15 мл) и EtOAc (15 мл) и водный слой экстрагировали EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (20 мл), высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением желтого осадка. Его растворили в трет-бутаноле (15 мл) и ТГФ (3 мл) и добавили трет-бутоксид калия (0.34 г, 2.9 ммоль). Смесь нагревали при 85°С в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разделили между водой (20 мл) и EtOAc (20 мл) и водный слойэкстрагировали EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (1-10%, МеОН/ДХМ) дала желтый осадок (0.47 г). Этот осадок растворили в ТГФ (15 мл) и добавили раствор борана (1 М в ТГФ, 10 мл). Реакционную смесь нагревали при 66°С в течение 72 ч перед охлаждением до комнатной температуры. Реакцию погасили 1 М соляной кислотой (5 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (20 мл), высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. К раствору полученного промежуточного соединения (200 мг) в ДХМ (10 мл) добавили триэтиламин (0.12 мл, 0.85 ммоль) и DMAP (20 мг, 0.14 ммоль). Смесь охладили до 0°С и медленно добавили раствор ди-трет-бутилдикарбоната (0.18 г, 0.85 ммоль) в ДХМ (2 мл). Смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч. Добавили воду (5 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (3×10 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (10-100%, EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 3-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-11-окса-3,8-диазаспиро[5.5]ундекан-8-карбоксилат в виде серо-белого осадка (110 мг, 44% за 3 стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 3.82-3.59 (m, 5H), 3.50-3.32 (m, 4H), 2.00-1.85 (m, 4H), 1.82-1.69 (m, 4H), 1.44 (s, 9H).

Промежуточное соединение 265 5-((4-Метоксифенил)метокси)-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ol

К раствору (Z)-2,3,6,7-татрагидро-1Н-азепин гидрохлорида (5.0 г, 25.38 ммоль) в МеОН (25 мл) при 0°С добавили HCl в диоксане (4 М, 0.10 моль, 25 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 5 мин, нагрели до комнатной температуры и перемешивали в течение дополнительных 3.5 ч. Смесь сконцентрировали при пониженном давлении и неочищенный остаток растворили в ДМСО (90 мл). Добавили DIPEA (8.80 мл, 50.52 ммоль) с последующим 5-хлор-1-метил-4-нитро-пиразолом (4.1 г, 25.37 ммоль) и фторидом калия (5.9 г, 101.54 ммоль) и смесь нагревали при 70°С в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры, реакцию погасили водой (500 мл) и экстрагировали EtOAc (3×200 мл). Объединенные органические слои промыли водой (200 мл) и солевым раствором (200 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала бледно-желтый осадок (5.22 г). К раствору этого осадка (3.13 г, 14.10 ммоль) в ДХМ (50 мл) добавили 3-хлорпербензойную кислоту (7.30 г, 21.10 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 ч. Смесь разбавили ДХМ (250 мл), промыли насыщенным водным NaHCO3 (250 мл) и 1 М водным NaOH (150 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала бледно-желтый осадок (3.03 г). К раствору этого осадка (1.29 г, 5.42 ммоль) и пара-метоксибензилового спирта (3.74 г, 27.10 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавили меди (II) трифторметансульфонат (0.20 г, 0.54 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Дополнительное количество меди (II) трифторметансульфоната (0.10 г, 0.26 ммоль) добавили и смесь перемешивали в течение дополнительных 48 ч. Смесь погасили водой (250 мл) и экстрагировали ДХМ (2×250 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (20-90% EtOAc/изогексан, затем 0-20% EtOAc/ДХМ) дала 5-((4-метоксифенил)метокси)-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ол в виде бледно-желтой смолы (800 мг, 8% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (t, J=3.4 Hz, 1H), 7.31-7.25 (m, 2H), 6.92-6.87 (m, 2H), 4.65 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.49-4.38 (m, 1H), 3.98-3.67 (m, 4H), 3.73 (s, 3H), 3.57-3.44 (m, 1H), 3.34-3.23 (m, 2H), 3.22-3.12 (m, 2H), 2.95 (d, J=1.3 Hz, 1H), 2.25-2.10 (m, 2H), 1.91-1.75 (m, 2H).

Промежуточное соединение 266 трет-бутил N-(2-(2,6-дифторфенил)-4-((5-(4-гидрокси-5-((4-метоксифенил)метокси)азепан-1-ил)-1-метил-пиразол-4-ил)карбамоил)тиазол-5-ил]карбамат

К раствору 5-((4-метоксифенил)метокси)-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ола (0.80 г, 2.18 ммоль) в EtOH (30 мл) и воде (3 мл) добавили порошкообразное железо (0.90 г, 16.11 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 2 ч, охладили до комнатной температуры, отфильтровали через целит® и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в ДХМ (50 мл) и промыли водой (50 мл). Водный слой снова экстрагировали ДХМ (50 мл) и объединенные органические слои пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением бледно-оранжевой смолы. К раствору этой смолы (0.55 г, 1.60 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавили 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту (0.62 г, 1.76 ммоль), HATU (0.85 г, 2.40 ммоль) и DIPEA (0.56 мл, 3.20 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 66 ч, погасили насыщенным водным NaHCO3 (200 мл) и экстрагировали EtOAc (3×150 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (100 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-10% МеОН/EtOAc) дала трет-бутил N-(2-(2,6-дифторфенил)-4-((5-(4-гидрокси-5-((4-метоксифенил)метокси)азепан-1-ил)-1-метил-пиразол-4-ил)карбамоил)тиазол-5-ил]карбамат в виде бледно-розового осадка (530 мг, 35% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.44 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.38-7.28 (m, 1H), 7.25 (d, J=8.2 Hz, 2H), 7.00 (t, J=8.7 Hz, 2H), 6.92-6.84 (m, 2H), 4.61 (d, J=11.1 Hz, 1H), 4.40 (d, J=11.1 Hz, 1H), 3.91 (t, J=8.6Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.55 (td, J=8.4, 3.4 Hz, 1H), 3.34-3.13 (m, 4H), 3.10 (s, 1H), 2.22-2.14 (m, 2H), 1.93-1.77 (m, 2H), 1.62-1.50 (m, 9H).

Промежуточное соединение 267 5-азидо-4-метокси-4-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан

К перемешанному раствору трет-бутил 4-азидо-5-гидрокси-азепан-1-карбоксилата (2.4 г, 9.38 ммоль) в ДХМ (100 мл) добавили одной порцией периодинан Десса-Мартина (5.16 г, 12.19 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Дополнительное количество ДХМ (100 мл) добавили с последующим насыщенным NaHCO3 (100 мл) и 10% Na2S2O3 (30 мл). Перемешивание продолжили в течение 30 мин. Слои разделили и водный слой экстрагировали ДХМ (100 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала бесцветное масло (1.99 г). К охлажденному на льду раствору этого масла в безводном Et3O (30 мл) в атмосфере азота добавили раствор метиллития литийбромидного комплекса в Et2O (1.5 M, 5.8 мл, 8.62 ммоль) медленно в течение 15 мин. Смесь перемешивали на льду в течение 1 ч, дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. После охлаждения на льду, добавили насыщенный солевой раствор (100 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×100 мл) и объединенные экстракты высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (20-40% EtOAc/изогексан) дала бесцветное масло (0.92 г). Это масло растворили в безводном ДМФ (5 мл) в атмосфере азота, охладили на льду и добавили гидрид натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 203 мг, 5.08 ммоль) по порциям в течение 15 мин. После перемешивания на льду в течение 15 мин, йодометан (1.06 мл, 16.94 ммоль) добавили по каплям и смесь перемешивали на льду в течение 30 мин. Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 4 ч. Добавили насыщенный солевой раствор (100 мл) и смесь экстрагировали Et2O (3×100 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении с получением бледно-зеленого масла (1.05 г). Это масло растворили в МеОН (10 мл) и добавили раствор HCl в диоксане (4 М, 10 мл). Раствор нагрели до 40°С и перемешивали в течение 2.5 ч. Концентрированно при пониженном давлении дало светло-коричневую смолу (1.03 г), которую растворили в ДМСО (10 мл). К этому раствору добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-пиразол (712 мг, 4.41 ммоль), фторид калия (720 мг, 13.56 ммоль) и DIPEA (1.2 мл, 6.78 ммоль) и смесь нагревали при 70°С в атмосфере азота в течение 19 ч. Смесь охладили, влили в воду (300 мл) и экстрагировали EtOAc (3×150 мл). Объединенные органические слои промыли водой (150 мл) и солевым раствором (150 мл), отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала 5-азидо-4-метокси-4-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан в виде бледно-желтого осадка (830 мг, 11% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.47-3.35 (m, 2H), 3.32-3.20 (m, 5H), 3.06-2.95 (m, 1H), 2.60-2.40 (m, 1H), 2.18-2.08 (m, 1H), 2.06-1.92 (m, 1H), 1.80-1.65 (m, 1H), 1.39 (s, 3H).

Промежуточное соединение 268 трет-бутил N-(5-метокси-5-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил)карбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 122 с использованием в качестве исходного вещества 5-азидо-4-метокси-4-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепана, получили трет-бутил N-(5-метокси-5-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил)карбамат в виде желтой смолы (780 мг, 75% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 5.25-5.15 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.74-3.65 (m, 1H), 3.65-3.50 (m, 1H), 3.48-3.35 (m, 1H), 3.20 (s, 3H), 3.19-3.10 (m, 1H), 3.00-2.85 (m, 1H), 2.45-2.30 (m, 1H), 2.20-2.05 (m, 1H), 1.90-1.70 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.28 (s, 3H).

Промежуточное соединение 269 G02693495 трет-бутил N-(1-(4-((5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбонил)амино)-2-метил-пиразол-3-ил)-5-метокси-5-метил-азепан-4-ил]карбамат

10% Палладий на угле (0.2 г) добавили к перемешанному раствору трет-бутил N-(5-метокси-5-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил)карбамата (0.77 г, 2.01 ммоль) и формиата аммония (1.6 г, 25 ммоль) в МеОН (30 мл) в атмосфере азота и смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь отфильтровали через целит® и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между ДХМ (100 мл) и насыщенным водным NaHCO3 (150 мл) и водный слой экстрагировали ДХМ (100 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и растворитель удалили при пониженном давлении с получением светло-коричневой смолы (700 мг). Эту смолу растворили в ДХМ (10 мл) и ДМФ (10 мл) и добавили 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту (0.84 г, 2.2 ммоль), HATU (1.14 г, 3 ммоль) и DIPEA (0.7 мл, 4 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. ДХМ удалили при пониженном давлении и добавили насыщенный NaHCO3 (300 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×200 мл), объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил N-(1-(4-((5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбонил)амино)-2-метил-пиразол-3-ил)-5-метокси-5-метил-азепан-4-ил]карбамат в виде бледно-желтого осадка (540 мг, 39% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.39 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.45-7.30 (m, 1H), 7.12-6.95 (m, 2H), 5.30-5.20 (m, 1H), 3.73 (s, 3Н), 3.72-3.65 (m, 1H), 3.50-3.28 (m, 2H), 3.25-3.15 (m, 1H), 3.14 (s, 3Н), 3.05-2.95 (m, 1H), 2.40-2.20 (m, 1H), 2.18-2.05 (m, 1H), 1.95-1.70 (m, 2H), 1.55 (s, 9H), 1.45 (s, 9H), 1.22 (s, 3Н).

Промежуточное соединение 270 трет-бутил N-((4R,5S)-5-гидрокси-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил)карбамат

Рацемическую смесь трет-бутил 5-гидрокси-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата (5.13 г, 14.13 ммоль) подвергли хиральному SFC разделению на энантиомеры и получили трет-бутил N-((4R,5S)-5-гидрокси-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил)карбамат в виде желтой смолы (2.08 г, 98.3% ее, 40%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.93 (t, J=8.6 Hz, 1H), 3.79 (s, 3Н), 3.52-3.44 (m, 1H), 3.33-3.26 (m, 1H), 3.22-3.08 (m, 2H), 2.53 (s,1H), 2.19-2.11 (m, 1H), 2.02-1.95 (m, 2H), 1.92-1.82 (m, 1H), 1.46 (s, 9H).

Промежуточное соединение 271 трет-бутил N-((4S,5R)-5-гидрокси-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил)карбамат

Рацемическую смесь трет-бутил 5-гидрокси-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата (5.13 г, 14.13 ммоль) подвергли хиральному SFC разделению на энантиомеры и получили трет-бутил N-((4S,5R)-5-гидрокси-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил)карбамат в виде желтой смолы (2.02 г, 97.6% ее, 39%). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.93 (t, J=8.6 Hz, 1H), 3.79 (s, 3Н), 3.52-3.44 (m, 1H), 3.33-3.26 (m, 1H), 3.22-3.08 (m, 2H), 2.53 (s,1H), 2.19-2.11 (m, 1H), 2.02-1.95 (m, 2H), 1.92-1.82 (m, 1H), 1.46 (s, 9H).

Промежуточное соединение 272 трет-бутил N-((4R,5S)-1-(4-((5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбонил)амино)-2-метил-пиразол-3-ил)-5-гидрокси-азепан-4-ил]карбамат

К раствору трет-бутил N-((4R,5S)-5-гидрокси-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил)карбамата (1.92 г, 5.40 ммоль) в метаноле (40 мл) добавили 10% палладий на угле (37 мг, 0.35 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч при комнатной температуре при давлении 600 фунт/кв. дюйм в атмосфере водорода. Смесь отфильтровали через целит® и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного амино-пиразола (1.5 г). Раствор РуВОР (3.35 г, 6.44 ммоль) и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновой кислоты (1.8 г, 5.06 ммоль) в ДХМ (50 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Раствор неочищенного амино-пиразола (1.5 г, 4.60 ммоль) и DIPEA (1.28 мл, 7.36 ммоль) в ДХМ (50 мл) добавили и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 70 ч. Реакционную смесь разбавили ДХМ (50 мл) и промыли водой (3×50 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством хроматографии на силикагеле (0-3% МеОН/ДХМ) и тритурирование с горячим Et2O, а затем горячим МеСМ, дали трет-бутил N-((4R,5S)-1-(4-((5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбонил)амино)-2-метил-пиразол-3-ил)-5-гидрокси-азепан-4-ил]карбамат в виде серо-белого осадка (1.85 г, 51% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.67 (s, 1H), 9.76 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.41-7.34 (m, 1H), 7.09 (t, J=8.8 Hz, 2H), 5.00 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 3.83 (s, 1H), 3.72 (s, 3Н), 3.45-3.25 (m, 4H), 3.20-3.12 (m, 1H), 2.20-1.84 (m, 3Н), 1.84-1.78 (m, 1Н), 1.55 (s, 9H), 1.42 (s, 9H).

Промежуточное соединение 273 трет-бутил N-((4S,5R)-1-(4-((5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбонил)амино)-2-метил-пиразол-3-ил)-5-гидрокси-азепан-4-ил]карбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 272 с использованием в качестве исходного вещества трет-бутил N-((4S,5R)-5-гидрокси-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил)карбамата, получили трет-бутил N-((4S,5R)-1-(4-((5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбонил)амино)-2-метил-пиразол-3-ил)-5-гидрокси-азепан-4-ил]карбамат в виде белого осадка (1.34 г, 37% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.67 (s, 1H), 9.76 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.41-7.34 (m, 1H), 7.09 (t, J=8.8 Hz, 2H), 5.00 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 3.83 (s, 1H), 3.72 (s, 3Н), 3.45-3.25 (m, 4H), 3.20-3.12 (m, 1H), 2.20-1.84 (m, 3Н), 1.84-1.78 (m, 1Н), 1.55 (s, 9H), 1.42 (s, 9H).

Промежуточное соединение 274 анти-7-азидо-4-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогепт-3-ен-1-ол

Следуя методике для промежуточного соединения 221. также получили ажпи-7-азидо-4-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогепт-3-ен-1-ол в виде бледно-желтого масла (294 мг, 42% выход). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 5.96 (dd, J=8.3, 4.9 Hz, 1H), 3.82 (s, 3Н), 3.80-3.73 (m, 1H), 3.56-3.48 (m, 1H), 2.71 (ddd, J=15.5, 8.3, 2.3 Hz, 1H), 2.58-2.39 (m,4H), 2.24-2.14 (m, 1H), 1.86-1.73 (m, 1H).

Промежуточное соединение 275 син-7-азидо-4-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогепт-3-ен-1-ол

Следуя методике для промежуточного соединения 119 с использованием в качестве исходного вещества анти-7-азидо-4-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогепт-3-ен-1-ола, получили син-7-азидо-4-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогепт-3-ен-1-ол в виде желтого масла (346 мг, 67% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 5.93-5.85 (m, 1H), 3.94-3.88 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.98 (ddd, J=15.2, 9.5, 6.4 Hz, 1H), 2.65 (dd, J=15.7, 9.0 Hz, 1H), 2.41 (dd, J=15.2, 6.9 Hz, 1H), 2.30 (dd, J=15.9, 9.4 Hz, 1H), 2.04-1.87 (m, 4H).

Промежуточное соединение 276 трет-бутил N-(-2-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогепт-4-ен-1-ил)карбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 120 с использованием в качестве исходного вещества син-7-азидо-4-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогепт-3-ен-1-ола, получили трет-бутил N-(-2-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогепт-4-ен-1-ил)карбамат в виде бесцветного масла (189 мг, 89% за три стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.05 (s, 1H), 5.92 (ddd, J=8.4, 4.7, 1.6 Hz, 1H), 5.23 (s, 1H), 3.91-3.81 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.66-3.62 (m, 1H), 3.41 (s, 3H), 2.93 (ddd, J=15.1, 11.1,4.7 Hz, 1H), 2.78 (t, J=12.9 Hz, 1H), 2.23 (dd, J=15.1, 8.5 Hz, 1H), 2.15-1.82 (m, 3H), 1.46 (s, 9H).

Промежуточное соединение 277 G02693497 трет-бутил N-(5-(4-((5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбонил)амино)-2-метил-пиразол-3-ил]-2-метокси-циклогептил]карбамат

Раствор трет-бутил N-(-2-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогепт-4-ен-1-ил)карбамата (180 мг, 0.49 ммоль) в МеОН (30 мл) пропустили через H-Cube® (полный Н2, 70°С, скорость потока: 1 мл/мин, 30 мм 20% Pd/C картридж). Растворитель удалили при пониженном давлении с получением бесцветного масла. К раствору этого масла в ДХМ (30 мл) добавили DIPEA (2.00 мл, 11.48 ммоль) и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2-фторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту (171 мг, 0.50 ммоль) с последующим РуВОР (596 мг, 1.15 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакцию погасили водой (20 мл) и экстрагировали ДХМ (80 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством хроматографии на силикагеле (70-80% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил N-(5-(4-((5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбонил)амино)-2-метил-пиразол-3-ил]-2-метокси-циклогептил]карбамат в виде смеси четырех диастереомеров в виде серо-белого осадка (175 мг, 54% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.39 и 10.36 (2s, 1H), 8.69 и 8.62 (2s, 1H), 8.32-8.28 и 8.21-8.14 (2 m, 1H), 7.85 и 7.75 (2s, 1H), 7.43-7.36 (m, 1Н), 7.32 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.25-7.17 (m, 1H), 5.19 и 5.08 (2d, J=8.8 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.78-3.54 (m, 2H), 3.37 и 3.27 (2s, 3H), 3.11-2.94 (m, 1H), 2.32-1.30 (m, 8H), 1.55 (s, 9H), 1.43 (s, 9H).

Промежуточное соединение 278 трет-бутил 4-метил-6-оксо-3,7-дигидро-2Н-азепин-1-карбоксилат

Раствор н-бутиллития в гексанах (2.5 M, 5.1 мл, 12.75 ммоль) добавили по каплям в течение 10 мин к перемешанному раствору N-(3-метил-3-бутен-1-ил)-1,1-диметилэтилового эфира (2.14 г, 11.57 ммоль) в безводном ТГФ (30 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Через 1.25 ч, 1-хлор-3-(трифенил-λ5-фосфанилиден)пропан-2-он (4.07 г, 11.57 ммоль) добавили по порциям в течение 15 мин и перемешивание продолжили при комнатной температуре в течение 18 ч. Осторожно добавили воду (100 мл) и реакционную смесь экстрагировали EtOAc (3×150 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-10% МеОН/ДХМ) дала бледно-оранжевую смолу (5.7 г). Ее растворили в безводном ТГФ (60 мл) и добавили ацетальдегид (6.4 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала бледно-оранжевое масло (2.18 г). Это масло растворили в ДХМ (30 мл), дерксигенировали азотом и добавили катализатор Граббса 2-го поколения (335 мг, 0.34 ммоль). Смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 20 ч. Смеси дали охладиться до комнатной температуры и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-30% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 4-метил-6-оксо-3,7-дигидро-2Н-азепин-1-карбоксилат в виде темно-коричневого масла (1.23 г, 47% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.30 (s, 1H), 4.30-4.10 (m, 2H), 3.65-3.50 (m, 2H), 2.70-2.55 (m, 2H), 2.05-1.90 (m, 3H), 1.48 и 1.44 (2s, 9H).

Промежуточное соединение 279 5-азидо-5-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-3-ол

Следуя методике для промежуточного соединения 18 с использованием в качестве исходного вещества трет-бутил 4-метил-6-оксо-3,7-дигидро-2H-азепин-1-карбоксилата, получили 5-азидо-5-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-3-ол в виде бледно-зеленой смолы (720 мг, 64% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04-8.03 (m, 1H), 4.25-3.90 (m, 1H), 3.88 и 3.84 (2s, 3H), 3.75-3.45 (m, 1H), 3.45-2.90 (m, 3H), 2.30-2.18 (m, 1H), 2.15-1.75 (m, 4H), 1.55 (2s, 3H).

Промежуточное соединение 280 трет-бутил N-(6,6-дифтор-4-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил)карбамат

К раствору 5-азидо-5-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-3-ола (720 мг, 2.44 ммоль) в ДХМ (100 мл) добавили за одну порцию периодинан Десса-Мартина (1.35 г, 3.17 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, разбавили ДХМ (100 мл) и погасили насыщенным водным NaHCO3 (200 мл) с последующим 20% водным Na2S2O3 (100 мл). Получившуюся смесь перемешивали в течение 15 мин, органический слой отделили и водный слой экстрагировали ДХМ (100 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и растворитель удалили при пониженном давлении с получением бледно-зеленой смолы (720 мг). К раствору этой смолы в ДХМ (50 мл) добавили деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 3.12 мл, 8.6 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Дополнительное количество деоксо-Fluor® (3.1 мл) добавили и смесь нагревали при 40°С в течение 28 ч. Смесь охладили и погасили посредством покапельного добавления насыщенного водного NaHCO3 (200 мл) и разбавили ДХМ (100 мл). Органический слой отделили и водный слой экстрагировали ДХМ (100 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала бледно-желтую смолу (626 мг). Эту смолу растворили в ТГФ (20 мл) и воде (4 мл) и добавили трифенилфосфин (522 мг, 2 ммоль). Смесь нагревали при 70°С за защитным экраном в течение 16 ч. Дополнительное количество трифенилфосфина (500 мг) добавили и нагревание продолжили в течение дополнительных 5 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и остаток растворили в ДХМ (30 мл). К этому раствору добавили ди-трет-бутилдикарбонат (1.08 г, 5 ммоль) и DIPEA (0.7 мл, 4 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 66 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил N-(6,6-дифтор-4-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил)карбамата в виде бесцветного осадка (540 мг, 57% за четыре стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.82-3.55 (m, 1H), 3.52-3.05 (m, 3H), 2.70-2.45 (m, 2H), 2.30-2.05 (m, 1H), 2.04-1.85 (m, 1H), 1.52 (s, 3H), 1.45 (s, 9H).

Промежуточное соединение 281 трет-бутил N-(4-((5-(5-(трет-бутоксикарбониламино)-3,3-дифтор-5-метил-азепан-1-ил)-1-метил-пиразол-4-ил)карбамоил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-5-ил]карбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 269 с использованием в качестве исходного вещества трет-бутил N-(6,6-дифтор-4-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил)карбамата, получили трет-бутил N-(4-((5-(5-(трет-бутоксикарбониламино)-3,3-дифтор-5-метил-азепан-1-ил)-1-метил-пиразол-4-ил)карбамоил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-5-ил)карбамат в виде желтого осадка (409 мг, 58% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.39 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.45-7.30 (m, 1H), 7.15-7.00 (m, 2H), 5.12 (br s, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.75-3.42 (m, 2H), 3.40-3.10(m, 2H), 2.70-2.45 (m, 2H), 2.40-2.15 (m, 1H), 1.95-1.70 (m, 1H), 1.55 (s, 9H), 1.46 (s, 3H), 1.33 (s, 9H).

Промежуточное соединение 285 3-этил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)пиперидин-4-он

К раствору трет-бутил 3-этил-4-оксо-пиперидин-1-карбоксилата (380 мг, 1.67 ммоль) в ДХМ (15 мл) при комнатной температуре добавили ТФУ (3 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь сконцентрировали при пониженном давлении с получением этилпериодинана в виде его трифторацетатной соли. Смесь этой соли (410 мг, 1.7 ммоль), 5-хлор-1-метил-4-нитро-пиразола (330 мг, 2.0 ммоль) и DIPEA (0.75 мл, 4.2 ммоль) в EtOH (15 мл) нагревали при 130°С в течение 2 ч при облучении микроволновым излучением. Реакционную смесь сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (10-50% EtOAc/изогексан) дала 3-этил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)пиперидин-4-он в виде светло-желтого осадка, (250 мг, 58% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.05 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.65-3.54 (m, 1H), 3.53-3.41 (m, 2H), 3.36-3.21 (m, 1H), 2.78-2.64 (m, 1H), 2.64-2.49 (m, 2H), 2.01-1.87 (m, 1H), 1.44-1.29 (m, 1H), 0.94 (t, J=7.5 Hz, 3H).

Промежуточное соединение 286 4-(Азидометил)-3-этил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)пиперидин-4-ол

Следуя методике для промежуточного соединения 253 с использованием в качестве исходного вещества 3-этил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)пиперидин-4-она, получили 4-(азидометил)-3-этил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)пиперидин-4-ол в виде желтой смолы (170 мг, 66% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.62-3.53 (m, 2H), 3.40 (d, J=12.2 Hz, 1H), 3.34-3.15 (m, 1H), 3.06-2.94 (m, 2H), 1.97-1.77 (m, 3H), 1.37-1.15 (m, 2H), 0.92 (t, J=7.4 Hz, 3H). ОН не наблюдался.

Промежуточное соединение 287 трет-бутил N-((3-этил-4-метокси-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-4-пиперидил)метил)карбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 120 с использованием в качестве исходного вещества 4-(азидометил)-3-этил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)пиперидин-4-ола, получили трет-бутил N-((3-этил-4-метокси-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-4-пиперидил)метил)карбамат в виде светло-желтого осадка (110 мг, 70% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 4.95-4.35 (m, 1H), 3.76 (s, 3Н), 3.53-3.43 (m, 2H), 3.36-3.09 (m, 7H), 2.07-1.93 (m, 1H), 1.44-1.10 (m, 4H), 0.96-0.81 (m, 12H).

Промежуточное соединение 292 3-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октан-6-ол

Раствор 7-оксабицикло[2.2.1]гепт-2-ен-5-ола (0.7 г, 6.2 ммоль) в МеОН/ДХМ (25 мл/5 мл), охлажденный до -78°С, дегазировали барботированием азота через него в течение 5 мин. Затем реакционную смесь барботировали озоном, пока она не окрасилась в иссера-голубой цвет. Снова барботировали азотом холодную реакционную смесь, пока не остался только голубой цвет. Раствор бензиламина (0.67 г, 6.2 ммоль), растворенного в МеОН (5 мл), добавили с последующим NaCNBH3 (1.6 г, 25 ммоль) в МеОН (10 мл). Смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и остаток разделили между EtOAc (30 мл) и водой (30 мл). Водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc (3×50 мл) и объединенные органические слои промыли солевым раствором (20 мл), высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением бензилзащищенного амина. Его растворили в EtOH (40 мл) и затем добавили 2 М водную HCl (1 мл) и Pd(OH)2/C (0.2 г). Смесь перемешивали при давлении 600 фунт/кв. дюйм в атмосфере водорода при 70°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры, отфильтровали через целит, промыли EtOH (40 мл). Фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении с получением дебензилированного продукта в виде хлористоводородной соли. К суспензии хлористоводородной соли (1.1 г, 6.6 ммоль) в ДМСО (15 мл) добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-пиразол (1.2 г, 7.3 ммоль), DIPEA (1.7 мл, 9.7 ммоль) и фторид калия (1.1 г, 20 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 85°С в течение 16 ч. Смесь охладили до комнатной температуры, разделили между водой (25 мл) и EtOAc (25 мл) и водный слой экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (25 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (10-50% EtOAc/изогексан) дала 3-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октан-6-ол в виде серо-белого осадка, (550 мг, 62% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 4.66-4.57 (m, 1H), 4.38 (d, J=7.6 Hz, 1H), 4.19 (d, J=6.3 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.82-3.73 (m, 1H), 3.68 (dd, J=11.1, 2.8 Hz, 1H), 3.12 (d, J=11.1Hz, 1H), 2.71-2.59 (m, 2H), 2.38 (d, J=7.0 Hz, 1H), 1.97(dd, J=12.9, 3.9 Hz, 1H).

Промежуточное соединение 293 6-азидо-3-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-8-окса-3-азабицикпо[3.2.1]октан

3-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октан-6-ол (500 мг, 1.96 ммоль) растворили в ДХМ (15 мл) и добавили триэтиламин (0.41 мл, 2.95 ммоль). После охлаждения 0°С, медленно добавили метансульфонилхлорид (0.19 мл, 2.45 ммоль) и реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. Смесь разбавили ДХМ (10 мл), погасили водой (10 мл) и водный слой экстрагировали ДХМ (3×20 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (10 мл), пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением светло-коричневого осадка. Этот осадок (450 мг, 1.35 ммоль) растворили в ДМФ (20 мл), добавили азид натрия (450 мг, 6.8 ммоль) и смесь нагревали при 150°С в течение 18 ч, за защитным экраном. Смеси дали охладиться до комнатной температуры, смесь разделили между водой (20 мл) и EtOAc (20 мл) и водный слой экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (20 мл), высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (10-50%, EtOAc/изогексан) дала 6-азидо-3-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октан в виде коричневой смолы (25 мг, 68% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 5 8.05 (s, 1H), 4.65 (d, J=7.4 Hz, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.28 (dd, J=8.0, 3.2 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.75-3.70 (m, 2H), 2.83-2.73 (m, 1H), 2.64-2.49 (m, 2H), 2.20 (ddd, J=13.4, 7.3, 3.2 Hz, 1H).

Промежуточное соединение 294 трет-бутил N-(3-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октан-6-ил)карбамат

К раствору 6-азидо-3-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октана (250 г, 0.8 ммоль) в ТГФ (10 мл) и воде (2 мл), добавили триметилфосфин (1 М раствор в толуоле, 5 мл, 4.47 ммоль) и смесь нагревали при 65°С в течение 16 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и получившийся остаток растворили в (2 М, 15 мл) и промыли EtOAc (2×10 мл). Водный слой подщелачили до pH 14 с помощью 5 М водным раствором NaOH и экстрагировали ДХМ (3×20 мл). Объединенные ДХМ слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении с получением кремового осадка, (220 мг). К раствору этого амина в ДХМ (10 мл) добавили триэтиламин (0.18 мл 1.3 ммоль) и DMAP (26 мг, 0.22 ммоль). Смесь охладили до 0°С и медленно добавили раствор ди-трет-бутилдикарбоната (0.28 г, 1.3 ммоль) в ДХМ (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь разбавили ДХМ (10 мл) и промыли водой (10 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (1-10% МеОН/ДХМ) дала трет-бутил N-(3-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октан-6-ил)карбамат в виде серо-белого осадка (110 мг, 66% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.03 (s, 1H), 4.64-4.52 (m, 1H), 4.20 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.50-3.41 (m, 4H), 2.69-2.46 (m, 3H), 1.84-1.76 (m, 1H), 1.45 (s, 9H).

Промежуточное соединение 295 трет-бутил N-(5-фтор-2-гидрокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогептил)карбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 294 с использованием в качестве исходного вещества 2-азидо-5-фтор-5-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5- ил)цикпогептанол, получили трет-бутил N-(5-фтор-2-гидрокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогептил)карбамат в виде бесцветного осадка (572 мг, 61% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 и 8.05 (2s, 1H), 4.70 (br s, 1H), 4.07 и 4.06 (2s, 3H), 3.86-3.67 (m, 3H), 2.96 (ddd, J=40.6, 15.3, 10.4 Hz, 1H), 2.74 (dt, J=44.6, 13.8 Hz, 1H), 2.25-2.04 (m, 2H), 2.01-1.79 (m, 3H), 1.72-1.63 (m, 1H), 1.47 (s, 9H).

Промежуточное соединение 302 O1-бензил O4-этил 5-гидрокси-4-метил-азепан-1,4-дикарбоксилат

К раствору 1-(бензилоксикарбонил)-4-пиперидинона (20.0 г, 85.80 ммоль) в Et2O (200 мл) при 0°С добавили эфират трехфтористого бора (12.0 мл, 94.40 ммоль) с последующим добавлением этилдиазоацетата (11.7 мл, 94.40 ммоль), выдерживая температуру ниже 7°С.Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, погасили 2 М водным раствором карбоната натрия (150 мл) и экстрагировали EtOAc (3×150 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-50% EtOAc/изогексан) дала светло-желтое масло. Это масло (10 г, 31.30 ммоль) растворили в ДМФ (75 мл) при 0°С и гидрид натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 1.38 г, 34.50 ммоль) добавили по порциям. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч перед тем, как добавили йодометан (2.15 мл, 34.50 ммоль). Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. Смесь разбавили Et2O (100 мл) и погасили водой (100 мл). Водный слой экстрагировали Et2O (3×75 мл) и объединенные органические слои промыли водой (2×100 мл) и солевым раствором (2×100 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (50% Et2O/изогексан) дала светло-желтое масло. Часть этого масла (0.90 г, 2.70 ммоль) растворили в МеОН (4 мл) и добавили к перемешанной суспензии NaBH4 (0.12 г, 3.24 ммоль) в МеОН (5 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 3 ч, перед тем, как ее погасили 1 М водным раствором HCl (5 мл). Водный слой экстрагировали ДХМ (3×10 мл) и объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (25-100% EtOAc/изогексан) дала O1-бензил O4-этил 5-гидрокси-4-метил-азепан-1,4-дикарбоксилат в виде бесцветного масла (480 мг, 1% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.37-7.28 (m, 5H), 5.17-5.10 (m, 2H), 4.20-4.07 (m, 2H), 3.78-3.20 (m, 7H), 2.32-2.24 (m, 1H), 2.07-1.86 (m, 3Н), 1.73-1.62 (m, 1H), 1.30-1.19 (m, 3Н). Заменяемый ОН не наблюдался.

Промежуточное соединение 303 бензил 3а-метил-2-оксо-3,4,5,7,8,8а-гексагидрооксазоло[4,5-d]азепин-6-карбоксилат

К раствору O1-бензил O4-этил 5-гидрокси-4-метил-азепан-1,4-дикарбоксилата (0.48 г, 1.43 ммоль) в диоксане (5 мл) добавили 1 М водный раствор NaOH (2.9 мл, 2.87 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь подкислили до pH 3 с помощью 2 М водной HCl и экстрагировали Et2O (10 мл) и ДХМ (10 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала бесцветное масло (0.42 г). Часть этого масла (0.21 г, 0.68 ммоль), дифенилфосфорилазид (0.17 мл, 0.82 ммоль) и триэтиламин (0.12 мл, 0.88 ммоль) растворили в толуоле (7 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 мин и нагревали при 90°С за защитным экраном в течение 40 мин. Добавили трет-бутанол (0.05 мл, 0.56 ммоль) и реакционную смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 16 ч за защитным экраном. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и погасили насыщенным водным NaHCO3 (10 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (15 мл) и органический слой промыли водой (10 мл) и солевым раствором (10 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала бензил 3а-метил-2-оксо-3,4,5,7,8,8а-гексагидрооксазоло[4,5-с1]азепин-6-карбоксилат в виде желтого масла (100 мг, 22% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38-7.28 (m, 5H), 5.26-4.97 (m, 3Н), 4.51 (s, 1H), 3.98-3.76 (m, 1H), 3.43-3.06 (m, 2H), 2.17 (s, 1H), 1.96-1.77 (m, 3Н), 1.58 (s, 3Н). Заменяемый не наблюдался.

Промежуточное соединение 304 3а-метил-6-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-3,4,5,7,8,8а-гексагидрооксазоло[4,5-d]азепин-2-он

К раствору бензил 3а-метил-2-оксо-3,4,5,7,8,8а-гексагидрооксазоло[4,5-d]азепин-6-карбоксилата (305 мг, 1.0 ммоль) и 1-метил-1,4-циклогексадиена (1.1 мл, 10.00 ммоль) в EtOH (10 мл) добавили 10% палладий на угле (53 мг, 0.50 ммоль) в атмосфере азота и смесь нагревали при 60°С в течение 2 ч. Смесь охладили до комнатной температуры, отфильтровали через целит® и сконцентрировали при пониженном давлении. К раствору остатка (170 мг, 1.00 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавили 5-хлор-1-метил-4-нитро-пиразол (178 мг, 1.10 ммоль) и фторид калия (232 мг, 4.00 ммоль) и смесь нагревали в микроволновой печи при 110°С в течение 4 ч. Реакцию погасили водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством хроматографии на силикагеле (0-5% МеОН/ДХМ) дала желтый осадок (220 мг, 74% за две стадии). Материал объединили с другой порцией с получением 350 мг для разделения диастереоизомеров посредством обратно-фазовой препаративной ВЭЖХ. Основной диастереомер выделили в виде желтого осадка (196 мг, 67% за две стадии) 1H NMR (400 MHz, d6-ДМСО) δ 8.11 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 4.48 (dd, J=6.6, 2.7 Hz, 1H), 3.74 (s, 3Н), 3.10-3.01 (m, 2H), 2.20-1.96 (m, 3H), 1.85 (dd, J=15.2, 7.8 Hz, 1H), 1.32 (s, 3Н). Два протона после пика воды. ЖХМС (ES+) m/z 296 (М+1).

Промежуточное соединение 305 8-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол

Следуя методике для промежуточного соединения 218 с использованием в качестве исходного вещества 1-метил-4-нитро-1H-пиразол и 1,4-циклогександиона моноэтиленацеталя, получили 8-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ол в виде светло-бежевого осадка (3.68 г, 83%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 4.45 (s, 1H), 4.12 (s, 3H), 4.04-3.93 (m, 4H), 2.44-2.34 (m, 2H), 2.23-1.95 (m, 4H), 1.75-1.67 (m, 2H).

Промежуточное соединение 306 4-фтор-4-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогексанон

К раствору 8-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-ола (3.68 г, 13.0 ммоль) в безводном ДХМ (80 мл) в атмосфере азота добавили по каплям раствор деоксо-Fluor® (50% в ТГФ, 14.1 мл, 39.0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После охлаждения до 0°С, насыщенный водный NaHCO3 (100 мл) добавили, первоначально по каплям, и смесь экстрагировали ДХМ (2×75 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (30-50% EtOAc/изогексан) дала бледно-желтое масло. Часть этого масла (780 мг, 2.74 ммоль) растворили в ТГФ (20 мл) и обработали 2 М водной HCl (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, нагревали при 60°С в течение 7 ч и перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавили воду (10 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (100 мл). Органический слой промыли солевым раствором (20 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (25-40% EtOAc/изогексан) дала 4-фтор-4-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогексанон в виде белого осадка (490 мг, 30% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.10 и 8.09 (2s, 1H), 4.17 и 4.15 (2s, 3H), 3.16-2.94 (m, 2H), 2.84-2.72 (m, 2H), 2.51 (dd, J=15.4, 5.6 Hz, 2H), 2.43-2.33 (m, 2H).

Промежуточное соединение 307 трет-бутил N-[[4-фтор-1-гидрокси-4-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогексил]метил]карбамат

Гидрид натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 183 мг, 4.56 ммоль) добавили по порциям в безводный ДМСО (15 мл) в атмосфере азота при 0°С. Реакционную смесь нагрели до комнатной температуры и перемешивали в течение 15 мин перед тем, как йодид триметилсульфоксония (0.96 г, 4.36 ммоль) добавили по порциям. После перемешивания в течение 90 мин при комнатной температуре, раствор 4-фтор-4-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогексанона (1.0 г, 4.15 ммоль) в ДМСО (15 мл) добавили по каплям. Смесь нагревали при 55°С в течение 2 ч, охладили до комнатной температуры, влили в воду (200 мл) и экстрагировали EtOAc (3×60 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением смолы. Раствор этой смолы (1.1 г, 4.15 ммоль) в 7 М NH3 в МеОН (30 мл) и ДХМ (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 дней. Растворитель удалили при пониженном давлении и получившееся желтое масло (1.1 г, 4.15 ммоль) растворили в ДХМ (30 мл) и DIPEA (3.6 мл), 20.7 ммоль). Раствор обработали раствором ди-трет-бутилдикарбоната (1.1 г, 4.98 ммоль) в ДХМ (20 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавили воду (20 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (100 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (50% EtOAC/петролейный эфир 40-60) дала трет-бутил N-[[4-фтор-1-гидрокси-4-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)циклогексил]метил]карбамат в виде бежевой пены (858 мг, 56% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 и 8.06 (2s, 1H), 5.05-4.95 (m, 1H), 4.09 и 4.07 (2s, 3H), 3.21 (d, J=6.3 Hz, 2H), 2.95-2.72 (m, 2H), 2.54 (s, 1H), 1.99-1.87 (m, 2H), 1.85-1.65 (m, 4H), 1.45 (s, 9H).

Промежуточное соединение 308 трет-бутил N-[(4R)-6,6-дифтор-4-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил]карбамат

Промежуточное соединение 280 дополнительно очистили посредством хиральной СКЖХ с получением трет-бутил N-[(4R)-6,6-дифтор-4-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил]карбамата (первый элюируемый изомер) (440 мг) ее 100%. ЖХМС (ES+) m/z 412 (М+23).

Промежуточное соединение 309 трет-бутил N-[(4S)-6,6-дифтор-4-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил]карбамат

Следуя методике для Промежуточного соединения 308, дальнейшая элюция дала трет-бутил N-[(4S)-6,6-дифтор-4-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил]карбамат (второй элюируемый изомер) (430 мг) ее 93%. ЖХМС (ES+) m/z 412 (M+23).

Промежуточное соединение 310 трет-бутил N-[4-[[5-[(5R)-5-(трет-бутоксикарбониламино)-3,3-дифтор-5-метил-азепан-1-ил]-1-метил-пиразол-4-ил]карбамоил]-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-5-ил]карбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 269 с использованием в качестве исходного вещества трет-бутил N-[(4R)-6,6-дифтор-4-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил]карбамата, получили трет-бутил N-[4-[[5-[(5R)-5-(трет-бутоксикарбониламино)-3,3-дифтор-5-метил-азепан-1-ил]-1-метил-пиразол-4-ил]карбамоил]-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-5-ил]карбамат в виде светло-коричневого осадка (210 мг, 57%) ее 98.6%. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.39 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.45-7.30 (m, 1H), 7.15-7.00 (m, 2H), 5.12 (br s, 1H), 3.78 (s, 3Н), 3.75-3.40 (m, 2H), 3.35-3.10 (m, 2H), 2.70-2.45 (m, 2H), 2.40-2.15 (m, 1H), 1.95-1.70 (m, 1H), 1.55 (s, 9H), 1.46 (s, 3Н), 1.33 (s, 9H).

Промежуточное соединение 311 трет-бутил N-[4-[[5-[(5S)-5-(трет-бутоксикарбониламино)-3,3-дифтор-5-метил-азепан-1-ил]-1-метил-пиразол-4-ил]карбамоил]-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-5-ил]карбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 269 с использованием в качестве исходного вещества трет-бутил N-[(4S)-6,6-дифтор-4-метил-1-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)азепан-4-ил]карбамата (Промежуточное соединение 309), получили бледно-коричневый осадок (246 мг). Его затем очистили с помощью хиральной СКЖХ с получением трет-бутил N-[4-[[5-[(5S)-5-(трет-бутоксикарбониламино)-3,3-дифтор-5-метил-азепан-1-ил]-1-метил-пиразол-4-ил]карбамоил]-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-5-ил]карбамата в виде светло-коричневого осадка (190 мг, 51%) ее 98.5%. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.39 (s, 1H), 8.79 (8, 1H),7.88(s, 1H), 7.45-7.30 (m, 1H), 7.15-7.00 (m, 2H), 5.12 (brs, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.75-3.40 (m, 2H), 3.35-3.10 (m, 2H), 2.70-2.45 (m, 2H), 2.40-2.15 (m, 1H), 1.95-1.70 (m, 1H), 1.55 (s, 9H), 1.46 (s, 3H), 1.33 (s, 9H).

Промежуточное соединение 312 5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нон-8-ен

К раствору цирконоценхлорида (20.8 г, 71 ммоль) в ТГФ (300 мл) при -78°С добавили медленно этилмагния бромид (1 М в ТГФ, 142 мл, 142 ммоль) и смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин перед тем, как нагрели до 0°С. Перемешивание продолжили до тех пор, пока не получили красный раствор. Смесь перемешивали в течение дополнительных 30 мин. Медленно добавили трет-бутил 6-оксо-3,7-дигидро-2Н-азепин-1-карбоксилат (15 г, 71 ммоль) в ТГФ (100 мл) и смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток растворили в ДХМ (150 мл). Тетрахлорид титана (8 мл, 71 ммоль) добавили и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. В реакционную смесь медленно добавили насыщенный раствор хлорида аммония (100 мл), получив белую суспензию. Слои разделили и водный слой экстрагировали ДХМ (3×200 мл). Объединенные органические слои промыли насыщенным водным NaHCO3 (200 мл) и солевым раствором (200 мл), высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (10-50% Et2O/изогексан) дала требуемый Вос-защищенный материал. Его растворили в ДХМ (50 мл), добавили ТФУ (10 мл) и смесь перемешивали при 40°С в течение 4 ч. Удаление растворителя при пониженном давлении дало амин в виде трифторацетатной соли. Ее растворили в ДМСО (50 мл) и DIPEA (6.2 мл, 35 ммоль), добавили фторид калия (3.1 г, 19.1 ммоль) и 5-хлор-1-метил-4-нитро-пиразол (3.0 г, 19.1 ммоль). Смесь нагревали при 85°С в течение 16 ч перед тем, как охладили до комнатной температуры. Смесь разделили между водой (50 мл) и EtOAc (50 мл), водный слой экстрагировали EtOAc (3×50 мл) и объединенные органические слои промыли солевым раствором (50 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (10-50% EtOAc/изогексан) дала 5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нон-8-ен в виде серо-белого осадка (2.0 г, 56% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.00 (s, 1H), 5.69 (dt, J=11.2, 5.4 Hz, 1H), 5.22-5.11 (m, 1H), 3.82 (s, 3Н), 3.47-3.38 (m, 2H), 3.18 (s, 2H), 2.55-2.48 (m, 2H), 0.72-0.61 (m, 4H).

Промежуточное соединение 313 8-азидо-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан-9-ол

К раствору 5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нон-8-ена (1.0 г, 4.1 ммоль) в ДХМ (25 мл) добавили т-СРВА (1.1 г, 4.8 ммоль) и получившуюся смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Насыщенный водный NaHCO3 (15 мл) добавили и водный слой экстрагировали ДХМ (3×20 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (10-50%, EtOAc/изогексан) дала эпооксидное промежуточное соединение в виде желтого осадка. Его растворили в ДМСО (30 мл) и добавили уксусную кислоту (3 мл) и азид натрия. Смесь нагревали при 110°С в течение 16 ч за защитным экраном. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разделили между насыщенным водным NaHCO2 (10 мл) и EtOAc (10 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (3×20 мл) и объединенные органические слои промыли солевым раствором (20 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (10-50%, EtOAc/изогексан) дала 8-азидо-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан-9-ол в виде желтой смолы (160 мг, 54% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.01 (s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.79-3.72 (m, 1H), 3.55 (dd, J=7.4, 2.4 Hz, 1H), 3.51-3.34 (m, 1H), 3.31-3.18 (m, 2H), 2.92 (d, J=13.4 Hz, 1H), 2.33-2.24 (m, 1H), 2.20 (d, J=2.7 Hz, 1H), 2.09-1.98 (m, 1H), 1.00-0.94 (m, 1H), 0.81-0.71 (m, 1H), 0.53-0.44 (m, 2H).

Промежуточное соединение 314 9-азидо-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан-8-ол

Следуя методике для промежуточного соединения 313, также получили 9-азидо-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан-8-ол в виде желтой смолы (350 мг, 68% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 3.99-3.92 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.53-3.20 (m, 4H), 2.76 (d, J=13.7 Hz, 1H), 2.61 (d, J=5.9 Hz, 1H), 2.35-2.15 (m, 1H), 2.17-1.82 (m, 1H), 0.94-0.73 (m, 2H), 0.61-0.51 (m, 2H).

Промежуточное соединение 315 8-азидо-9-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан

К раствору 8-азидо-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан-9-ола (200 мг, 0.67 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавили по порциям периодинан Десса-Мартина (340 мг, 0.80 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь разбавили ДХМ (50 мл), добавили насыщенный водный NaHCO3 (50 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (50 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (20 мл), пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (10-50% EtOAc/изогексан) дала кетоновое промежуточное соединение. К раствору этого кетона (190 мг, 0.62 ммоль) в безводном ТГФ (7 мл) в атмосфере азота, охлажденном до -78°С, добавили по каплям раствор L-селектрида (1 М в ТГФ, 0.8 мл, 0.78 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч. Смеси дали нагреться до комнатной температуры и добавили воду (10 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (2×30 мл) и объединенные органические слои промыли солевым раствором (20 мл), высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении с получением спиртового промежуточного соединения. К раствору этого спирта (160 мг, 0.52 ммоль) в безводном ДМФ (5 мл), охлажденному до 0°С, добавили гидрид натрия (60% в минеральном масле, 25 мг, 0.62 ммоль). После перемешивания в течение 15 мин, добавили йодометан (0.05 мл, 0.78 ммоль) и реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. Смесь сконцентрировали при пониженном давлении и остаток разделили между водой (30 мл) и EtOAc (30 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл) и объединенные органические слои промыли солевым раствором (20 мл), отделили, высушили над MgSO4, и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (10-50% EtOAc/изогексан) дала 8-азидо-9-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан в виде серо-белого осадка (120 мг, 55% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 3.84 (s, 3Н), 3.84-3.72 (m, 1H), 3.58 (s, 3Н), 3.57-3.47 (m, 2H), 3.22-3.15 (m, 1H), 2.93 (s, 1H), 2.40-2.28 (m, 1H), 2.24 (d, J=12.5 Hz, 1H), 2.07-1.91 (m, 1H), 0.79-0.72 (m, 1H), 0.67-0.46 (m, 3H).

Промежуточное соединение 316 9-азидо-8-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан

Следуя методике для промежуточного соединения 315 с использованием в качестве исходного вещества 9-азидо-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан-8-ола, получили 9-азидо-8-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан в виде желтой смолы (170 мг, 62% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 3.90 (d, J=13.4 Hz, 1H), 3.84 (s, 2H), 3.73-3.67 (m, 1H), 3.45-3.36 (m, 1H), 3.41 (s, 3Н), 3.28 (s, 1H), 3.21-3.14 (m, 2H), 2.32-2.15 (m, 2H), 2.09-1.99 (m, 1H), 0.82-0.74 (m, 1H), 0.69-0.51 (m, 3Н).

Промежуточное соединение 317 трет-бутил N-[9-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан-8-ил]карбамат

Раствор 8-азидо-9-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонана (120 мг, 0.37 ммоль) в ТГФ/воде (5 мл/1 мл) обработали триметилфосфином (1.0 М в толуоле, 1.8 мл, 1.8 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 70°С за защитным экраном в течение 4 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток подкислили с помощью 1 М водной HCl и промыли EtOAc (2×20 мл). Водный слой подщелачили до pH 14 водным 6 М NaOH и экстрагировали ДХМ (2×30 мл). Объединенные органические слои пропустили через катридж для фазового разделения и сконцентрировали при пониженном давлении с получением светло-коричневой смолы. К раствору этой смолы (80 мг, 0.27 ммоль) в безводном ДХМ (5 мл) при 0°С добавили DIPEA (0.1 мл, 0.54 ммоль) с последующим раствором ди-трет-бутилдикарбоната (90 мг, 0.41 ммоль) в ДХМ (5 мл). Реакционной смеси дали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 4 ч. Добавили воду (5 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (2×30 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (10 мл), пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (10-50% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил N-[9-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан-8-ил]карбамат в виде желтой смолы (110 мг, 72% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.00 (s, 1H), 5.08 (d, J=8.9 Hz, 1H), 3.97-3.86 (m, 2H), 3.81 (s, 3Н), 3.60 (ddd, J=13.6, 10.5, 2.8 Hz, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.12-3.04 (m, 1H), 2.74 (s, 1H), 2.16 (d, J=12.6 Hz, 1H), 2.25-1.86 (m, 1H), 1.95-1.85 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.77-0.57 (m, 4H).

Промежуточное соединение 318 трет-бутил N-[8-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан-9-ил]карбамат

Следуя методике для промежуточного соединения 317 с использованием в качестве исходного вещества 9-азидо-8-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонана, получили трет-бутил N-[8-метокси-5-(2-метил-4-нитро-пиразол-3-ил)-5-азаспиро[2.6]нонан-9-ил]карбамат в виде желтой смолы (160 мг, 67% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.01 (s, 1H), 5.12 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.82 (s, 3Н), 3.68-3.57 (m, 2H), 3.52-3.38 (m, 1H), 3.36 (s, 3Н), 3.32 (d, J=12.7 Hz, 1H), 3.21-3.14 (m, 1H), 2.74 (d, J=12.8 Hz, 1H), 2.13-1.88 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 0.91-0.81 (m, 1H), 0.68-0.53 (m, 2H), 0.43-0.36 (m, 1H).

Таблицы 1а и 1b Соединения Формулы I 101-531

Пример 101 5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-метил-5-(4-((метиламино)метил)пиперидин-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 101

Раствор Промежуточного соединения 1, трет-бутил метил((1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метил)карбамата (145 мг, 0.41 ммоль) в МеОН (40 мл) пропустили через H-Cube® (полный H2, 50°С, скорость потока: 1 мл/мин, 30 мм 10% Pd/C картридж). Растворитель удалили при пониженном давлении с получением неочищенного трет-бутил (1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метил(метил)карбамата в виде красно-коричневого масла (117 мг). К раствору этого амина (115 мг, 0.36 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавили DIPEA (1.0 мл), РуВОР (0.46 г, 0.89 ммоль) и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту из Примера 25 (127 мг, 0.36 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь разбавили ДХМ (80 мл) и промыли водой (20 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (75% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил (1-(4-(5-трет-бутоксикарбониламино-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пиперидин-4-ил)метил(метил)карбамат в виде сиреневой пены (200 мг). Эту пену (200 мг, 0.30 ммоль) перемешивали с HCl в 1,4-диоксане (4 М, 3.8 мл, 15.1 ммоль) в МеОН (5 мл) при комнатной температуре в течение 3 дней. Растворители удалили при пониженном давлении и неочищенный остаток перерастворили в МеОН и загрузили на SCX колонку. Колонку промыли МеОН и, элюируя 7 н. аммиаком в МеОН, получили 101 в виде бежевого осадка (99 мг, 53% за три стадии). 1H NMR (400 MHz, d6-ДМСО) δ 8.75 (s, 1Н), 7.59-7.49 (m, 3H), 7.44 (s, 1H), 7.32-7.22 (m, 2H), 6.90 (br s, 1Н), 3.63 (s, 3H), 3.14-2.96 (m, 4H), 2.66 (d, J=6.8 Hz, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.77 (d, J=12.6 Hz, 2H), 1.78-1.55 (m, 1Н), 1.36-1.22 (m, 2H). ЖХМС (ES+) m/z 462 (M+1).

Пример 102 (R)-5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-метил-5-(3-метилпиперазин-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 102

Стадия А. трет-бутил (±)-2-метил-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперазин-1-карбоксилат.

Смесь 2-метилпиперазина (1 г, 6.2 ммоль), 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразола из Примера 1 (2.48 г, 12.4 ммоль), DIPEA (2.4 г, 18.6 ммоль) в EtOH (10 мл) нагревали в микроволновой печи при 140°С в течение 5 часов. Растворитель удалили при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очистили посредством хроматографии на силикагеле с использованием МеОН/ДХМ (10:1) в качестве элюирующих растворителей с получением трет-бутил (±)-2-метил-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперазин-1-карбоксилата (1.0 г, 40%) в виде желтого осадка. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm): 8.03 (s, 1H), 4.38 (s, 1H), 3.99-3.68 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.67-3.65 (m, 1H), 3.46-3.41 (m, 1H), 3.31-3. 25 (m, 1H), 2.90-2.88 (d, J=9.6Hz, 1H), 2.71-2.68 (d, J=9.2 Hz,1H), 1.49 (s, 9H), 1.36-1.34 (d, J=5.2Hz, 3H).

Стадия В. трет-бутил (±)-4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилат.

К раствору трет-бутил (±)-2-метил-4-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)пиперазин-1-карбоксилата (500 мг, 1.54 ммоль) в МеОН (20 мл) и H2O (5 мл) добавили цинк (845 мг, 13 ммоль) и NH4Cl (1.4 г, 26 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и отфильтровали через целит. Фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очистили с помощью хроматографии на силикагеле, РЕ/EtOAc (10/1-1/10) в качестве элюирующих растворителей, с получением трет-бутил (±)-4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилата (650 мг, ~100%) в виде красного осадка. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ (ppm): 7.22 (s, 1H), 4.35-4.33 (m, 1H), 4.12-4.11 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.43-3.46 (m, 1H), 3.25-3.30 (m, 2H), 3.01-3.00 (m, 1H), 2.89-2.87 (d, J=12 Hz, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.34-1.36 (d, J=5.6 Hz, 3H); MS (ESI) m/z=296 (M+H).

Стадия С. трет-бутил (±)-4-(4-(5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилат.

К раствору трет-бутил (±)-4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилата (400 мг, 2.05 ммоль), 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновой кислоты (630 мг, 2.46 ммоль), HATU (0.83 г, 8.19 ммоль) в ДМФ (15 мл) добавили TEA (1.5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 20 часов и влили в воду (100 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл × 2). Объединенные органические слои промыли водой (50 мл × 2) и солевым раствором (30 мл × 2), высушили над Na2SO4, отфильтровали, и сконцентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очистили посредством хроматографии на силикагеле с использованием ДХМ/МеОН (1:1) в качестве элюирующих растворителей с получением трет-бутил (±)-4-(4-(5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилат (280 мг, 52%) в виде белого осадка. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm): 10.32 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.38-7.35 (m, 1H), 7.06-7.03 (m, 2H), 4.34 (s, 1H), 3.94-3.97 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.67-3.40 (m, 1H), 3.20-3.25 (m, 2H), 3.04-3.06 (m, 1H), 2.88-2.90 (m, 1H), 1.55 (s, 9H), 1.47 (s, 9H), 1.34-1.36 (d, J=6.4Hz, 3H); MS (ESI) m/z=434 (M+H+).

Стадия D. трет-бутил (R)-4-(4-(5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)-тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилат и трет-бутил (S)-4-(4-(5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилат.

Хиральное разделение посредством препаративной ВЭЖХ трет-бутил (±)-4-(4-(5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-метил-пиперазин-1-карбоксилата (280 мг) дало трет-бутил (S)-4-(4-(5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилат (80 мг) и трет-бутил (R)-4-(4-(5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилат (80 мг).

Стадия Е. Раствор трет-бутил (R)-4-(4-(5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилата (80 мг, 0.126 ммоль) в ТФУ (1 мл) и ДХМ (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. pH смеси довели до приблизительно 8-9 посредством добавления аммиака и сконцентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ с получением 102 (40 мг, 73%). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm): 8.48 (s, 1H), 8.33(s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.30-7.36 (m, 1H), 7.03-7.07 (m, 2H), 6.14-6.17 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.53-3.48 (m, 1H), 2.90-3.34 (m, 6H), 1.32 (d, J=6.5 Hz, 3H); MS (ESI) m/z=434 (М+1+).

Пример 103 (S)-5-амино-N-(5-(3-аминоазепан-1-ил)-1-(2,2-дифторэтил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 103

Хиральное разделение с помощью СКЖХ рацемической смеси дало 103 в виде одиночного энантиомера. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 7.77 (s, 1H), 7.60-7.43 (m, 3H), 7.27 (dd, J=14.5, 5.8 Hz, 2H), 6.39 (tt, J=55.3, 4.2 Hz, 1H), 4.54-4.28 (m, 2Н), 3.23-3.02 (m, 4H), 3.00-2.90 (m, 2H), 1.85-1.40 (m, 6H). MS(ESI) m/z: 498.2 [M+H+].

Пример 104 (R)-5-амино-N-(5-(3-аминоазепан-1-ил)-1-(2,2-дифторэтил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 104

Хиральное разделение с помощью СКЖХ рацемической смеси дало 104 в виде одиночного энантиомера. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 7.78 (s, 1H), 7.60-7.42 (m, 3H), 7.34-7.21 (m, 2H), 6.39 (tt, J=55.3, 4.1 Hz, 1H), 4.54-4.29 (m, 2H), 3.25-3.02 (m, 4H), 3.00-2.90 (m, 2H), 1.87-1.36 (m, 8H). MS (ESI) m/z: 498.2 [M+H+].

Пример 105 5-амино-N-(5-(6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2-фтор-5-метилфенил)тиазол-4-карбоксамид 105

Смесь Промежуточного соединения 3, трет-бутил 4-(4-(2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилата (283 мг, 0.44 ммоль), Na2CO3 (93 мг, 0.88 ммоль) и 2-фтор-5-метилфенилбороновой кислоты (95 мг, 0.62 ммоль) в DME (4.9 мл) и воде (1.6 мл) дегазировали осторожным барботированием азота через смесь в течение 10 мин. Затем добавили [1,Г-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий (II) (36 мг, 0.04 ммоль) и смесь дегазировали в течение дополнительных 10 мин перед тем, как ее нагревали в микроволновой печи при 120°С в течение 1 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и остаток растворили в ДХМ (50 мл) и промыли водой (2×20 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и растворитель удалили при пониженном давлении. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-80% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил 4-(4-(5-трет-бутоксикарбониламино-2-(2-фтор-5-метилфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилата (179 мг) и трет-бутил 4-(4-(5-амино-2-(2-фтор-5-метилфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1H-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилата (50 мг). Выделенные промежуточные соединения объединили и суспендировали МеОН (2 мл) и к ним добавили раствор HCl в 1,4-диоксане (4 M, 1.7 мл, 6.75 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток растворили в EtOAc (50 мл) и промыли 1 М раствором NaOH (20 мл). Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-10% МеОН/ДХМ) с получением 105 в виде бежевого осадка (59 мг, 30% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.98 (s, 1H), 7.90 (dd, J=7.0, 2,5 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.16-7.11 (m, 1H), 7.09-7.01 (m, 1H), 6.09 (s, 2Н), 3.77 (s, 3Н), 3.63 (t, J=13.5 Hz, 2H), 3.46-3.29 (m, 4H), 3.06 (t, J=5.5 Hz, 2H), 2.39 (s, 3Н), 1.95 (s, 1H). ЖХМС (ES+) m/z 466 (M+1).

Пример 106 5-амино-N-(5-(6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,5-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 106

Следуя методике для Примера 105, взаимодействие трет-бутил 4-(4-(2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1H-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилата и 2,5-дифторфенилбороновой кислоты дало 106 в виде бежевого осадка (57 мг, 28% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.90 (s, 1H), 7.88-7.81 (m, 2H), 7.18-7.10 (m, 1H), 7.06-6.99 (m, 1H), 6.16 (s, 2H), 3.78 (s, 3Н), 3.70-3.56 (m, 2H), 3.44 (t, J=14.0 Hz, 2H), 3.35 (t, J=5.5 Hz, 2H), 3.11-3.05 (m, 2H), 1.95 (s, 1H). ЖХМС (ES+) m/z 470 (M+1).

Пример 107 (R)-5-амино-N-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-(метиламино)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 107

К раствору (R)-N-(1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-N-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)-2,2,2-трифтор-N-метилацетамида (100 мг, 0.28 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавили DIPEA (0.5 мл, 2.87 ммоль), РуВОР (293 мг, 0.56 ммоль) и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-циклопропилтиазол-4-карбоновую кислоту (125 мг, 0.35 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Смесь разбавили ДХМ (50 мл) и промыли водой (10 мл). Органический слой отделили посредством пропускания через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала (R)-трет-бутил 4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-(2,2,2-трифтор-N-метилацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-5-илкарбамат в виде бледно-желтого осадка (172 мг). Эту смолу (170 мг, 0.24 ммоль) перемешивали в HCl в 1,4-диоксане (4 M, 5 мл) и МеОН (5 мл) при 50°С в течение 4 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ с получением 107 в виде моноформиатной соли в виде белого осадка (62 мг, 41% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, d4-MeOD) δ 8.56 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.49 (tt, J=8.5, 6.2 Hz, 1H), 7.20-7.12 (m, 2H), 6.24 (tt, J=55.5, 4.2 Hz, 1H), 4.48 (td, J=14.0, 4.2 Hz, 2H), 3.40-3.20 (m, 5H), 2.68 (s, 3Н), 2.28-1.74 (m, 6H). ЖХМС (ES+) m/z 512 (M+1).

Пример 108 (R)-5-амино-N-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-(метиламино)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,5-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 108

Смесь (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-(2,2,2-трифтор-N-метилацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамата (200 мг, 0.29 ммоль), Na2CO3 (62 мг, 0.59 ммоль) и 2,5-дифторбензолбороновой кислоты (66 мг, 0.41 ммоль) в DME (3 мл) и воде (1 мл) дегазировали осторожным барботированием азота через смесь в течение 5 мин. Затем добавили [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(II) (30 мг, 0.037 ммоль) и смесь нагревали в микроволновой печи при 120°С в течение 60 мин. Растворители удалили при пониженном давлении и остаток растворили в растворе HCl в 1,4-диоксане (4 М, 5 мл) и МеОН (5 мл) и перемешивали при 70°С в течение 48 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток растворили в МеОН/ДХМ и пропустили через СКЖХ картридж, промывая ДХМ и МеОН и элюируя 1 н. аммиаком в МеОН. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ с получением 108 в виде моноформиатной соли в виде светло-коричневого осадка (21 мг, 14% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, d4-MeOD) δ 8.53 (s, 1Н), 8.15-7.95 (m, 1Н), 7.58 (s, 1H), 7.35-7.05 (m, 2H), 6.25 (tt, J=55.6, 4.1 Hz, 1Н), 4.54-4.43 (m, 2H), 3.43-3.22 (m, 5H), 2.68 (s, 3H), 2.28-1.74 (m, 6H). ЖХМС (ES+) m/z 512 (M+1).

Пример 109 (R)-5-амино-N-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-(метиламино)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2-фтор-5-метилфенил)тиазол-4-карбоксамид 109

Следуя методике для Примера 108, взаимодействие (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-(2,2,2-трифтор-N-метилацетамидо)азепан-1-ил)-1H-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамата (200 мг, 0.29 ммоль) и 2-фтор-5-метилбензолбороновой кислоты (63 мг, 0.41 ммоль) дало 109 в виде моноформиатной соли в виде светло-коричневого осадка (67 мг, 45% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, d4-MeOD) δ 8.56 (s, 1Н), 8.07 (dd, J=7.3, 2.2 Hz, 1Н), 7.61 (s, 1Н), 7.26-7.20 (m, 1Н), 7.12 (dd, J=11.4, 8.4 Hz, 1Н), 6.25 (tt, J=55.6, 4.2 Hz, 1Н), 4.48 (td, J=13.9, 4.2 Hz, 2H), 3.41-3.33 (m, 3H), 3.30-3.13 (m, 2H), 2.58 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.23-1.72 (m, 6H). ЖХМС (ES+) m/z 508 (M+1).

Пример 110 5-амино-N-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-гидроксиазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 110

К раствору 1-(4-амино-1-(2,2-дифторэтил)-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ола (100 мг, 0.39 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавили DIPEA (0.5 мл, 2.87 ммоль), РуВОР (300 мг, 0.58 ммоль) и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-циклопропилтиазол-4-карбоновую кислоту (164 мг, 0.46 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь разбавили ДХМ (100 мл) и промыли водой (20 мл). Органический слой отделили посредством пропускания через катридж для разделения фаз и растворитель удалили при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% EtOAc/изогексан) дала трет-бутил 4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-гидроксиазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-5-илкарбамат в виде бесцветного осадка (145 мг). Этот осадок (145 мг, 0.24 ммоль) перемешивали в HCl в 1,4-диоксане (4 М, 5 мл) при комнатной температуре в течение 20 ч. Растворители удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ с получением 110 в виде кремового осадка (80 мг, 44% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, d4-MeOD) δ 7.81 (s, 1H), 7.46 (tt, J=8.5, 6.2 Hz, 1H), 7.19-7.11 (m, 2H), 6.22 (tt, J=55.6, 4.2 Hz, 1H), 4.45 (td, J=13.9, 4.2 Hz, 2H), 4.01-3.93 (m, 1H), 3.32-3.15 (m, 5H), 2.10-1.90 (m, 3Н), 1.87-1.65 (m, 3Н). ЖХМС (ES+) m/z 499 (М+1).

Пример 111 5-амино-N-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-гидроксиазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2-фтор-5-метилфенил)тиазол-4-карбоксамид 111

Следуя методике для Примера 105, используя в качестве исходного вещества трет-бутил 2-бромо-4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-гидроксиазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат (0.13 г, 0.23 ммоль) и 2-фтор-5-метилбензолбороновую кислоту (53 мг, 0.35 ммоль) получили 111 в виде черного осадка (56 мг, 50% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, d6-ДМСО) δ 8.93 (s, 1H), 8.08 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.42 (s, 2H), 7.24 (d, J=8.7 Hz, 2H), 6.39 (tt, J=55.3, 4.2 Hz, 1H), 4.55 (d, J=3.8 Hz, 1H), 4.42 (td, J=14.5, 4.2 Hz, 2H), 3.86-3.80 (m, 1H), 3.29-3.03 (m, 4H), 2.37 (s, 3Н), 1.94-1.84 (m, 3Н), 1.77-1.55 (m, 3Н). ЖХМС (ES+) m/z 495 (М+1).

Пример 112 (R)-5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-метил-5-(2-метилпиперазин-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 112

Раствор РуВОР (313 мг, 0.60 ммоль) и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновой кислоты из Примера 25 (153 мг, 0.43 ммоль) в ДХМ (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Раствор (R)-трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-метилпиперазин-1-карбоксилата (133 мг, 0.45 ммоль) и DIPEA (0.12 мл, 0.68 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавили и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь разбавили ДХМ (50 мл) и промыли водой (20 мл). Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Выделенное промежуточное соединение перерастворили в ДХМ (6 мл) и добавили ТФУ (2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь сконцентрировали при пониженном давлении и остаток перерастворили в ДХМ (50 мл) и промыли насыщенным водным NaHCO3 (2×10 мл). Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством препаративной ВЭЖХ дала 112 в виде белого осадка (41 мг, 22% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.66 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.38-7.25 (m, 1H), 7.03 (t, J=9.0 Hz, 2H), 6.20 (s, 2H), 3.77 (s, 3Н), 3.27-3.15 (m, 2H), 3.10-2.93 (m, 4H), 2.59 (dd, J=12.5, 9.5 Hz, 1H), 0.88 (d, J=6.3 Hz, 3Н). Алкил NH не наблюдался. ЖХМС (ES+) m/z 434 (М+1).

Пример 113 (S)-5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(5-(2-этилпиперазин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 113

Следуя методике для Примера 112, взаимодействие (S)-трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-этилпиперазин-1-карбоксилата и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновой кислоты из Примера 25, получили 113 в виде белого осадка (27 мг, 19% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.68 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.31 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.03 (t, J=9.2 Hz, 2H), 6.20 (s, 2H), 3.77 (s, 3Н), 3.24-3.14 (m, 2H), 3.12-2.93 (m, 4H), 2.60 (t, J=10.8 Hz, 1H), 1.48-1.28 (m, 1H), 1.28-1.16 (m, 1H), 0.79 (t, J=7.6 Hz, 3Н). Алкил NH не наблюдался. ЖХМС (ES+) m/z 448 (М+1).

Пример 114 (R)-5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(5-(2-этилпиперазин-1-ил)-1-метил-1H-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 114

Следуя методике для Примера 112, взаимодействие (R)-трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-этилпиперазин-1-карбоксилата и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновой кислоты из Примера 25, получили 114 в виде белого осадка (30 мг, 21% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.68 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.36-7.27 (m, 1H), 7.02 (t, J=8.9 Hz, 2H), 6.24 (s, 2H), 3.76 (s, 3Н), 3.25-3.15 (m, 2H), 3.11-2.90 (m, 4H), 2.58 (t, J=5.5 Hz, 1H), 1.41-1.31 (m, 1H), 1.28-1.14 (m, 1H), 0.79 (t, J=7.5 Hz, 3Н). Алкил NH не наблюдался. ЖХМС (ES+) m/z 448 (М+1).

Пример 115 (R)-5-амино-N-(5-(4-аминоазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(3-циклопропил-2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 115

Стадия А. трет-бутил 2-(5-циклопропил-2-фторфенил)-4-(1-метил-5-(4-(бензилоксикарбониламино)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат

трет-бутил 2-(5-хлор-2-фторфенил)-4-(1-метил-5-(4-(бензилоксикарбониламино)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат (309 мг, 0.44 ммоль), циклопропилтрифторборат калия (98 мг, 0.66 ммоль), ацетат палладия (20.0 мг, 0.088 ммоль), бутил-ди-1-адамантилфосфин (50.1 мг, 0.133 ммоль) и карбонат цезия (437 мг, 1.33 ммоль) поместили в 40 мл реакционную пробирку и продули азотом три раза. Добавили толуол (10.8 мл) и воду (1.2 мл) и смесь нагревали при 105°С в течение четырех дней, контролируя с помощью ЖХМС. Реакционную смесь отфильтровали через целит и промыли тщательно метанолом. Фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении и остаток очистили посредством флеш-хроматографии, элюируя 0-100% этилацетатом в гептане с получением трет-бутил 2-(5-циклопропил-2-фторфенил)-4-(1-метил-5-(4-(бензилоксикарбониламино)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамата (192 мг, 62%).

Стадия В. Cbz и Вое группы удалили из трет-бутил 2-(5-циклопропил-2-фторфенил)-4-(1-метил-5-(4-(бензилоксикарбониламино)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамата с получением 115. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 8.83 (br, 1Н), 7.59 (s, 1Н), 7.48 (br, 2H), 7.20-7.05 (m, 2H), 3.65 (d, J=4.6 Hz, 3Н), 3.18-3.04 (m, 4H), 3.3.05-2.95 (m, 1Н), 2.1.-2.02 (m, 1Н), 1.85-1.75 (m, 3Н), 1.68-1.43 (m, 3Н), 0.98 (dt, J=8.4, 3.1 Hz, 2H), 0.79-0.68 (m, 2H). MS(ESI) m/z: 488.2 [M+H+].

Пример 116 (R)-5-амино-N-(5-(4-аминоазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифтор-3-метилфенил)тиазол-4-карбоксамид 116

Соединение 116 получили в соответствии с методикой, описанной в Примере 115. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 8.81 (s, 1Н), 7.58 (s, 1Н), 7.47 (s, 2H), 7.40 (dd, J=15.0, 8.5 Hz, 1H), 7.17 (t, J=9.3 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.19-2.93 (m, 5H), 2.27 (s, 3H), 1.93-1.72 (m, 3H), 1.67-1.43 (m, 3H). MS (ESI) m/z: 462.2 [M+H+].

Пример 117 (S)-5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-метил-5-(3-метилпиперазин-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 117

Следуя методике для Примера 102, проводили взаимодействие (S)-4-(4-(5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилата с получением 117 в виде белого осадка (40 мг, 73%). 1H NMR (500 MHz, ДМСО-d6) δ (ppm): 8.81 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.51-7.57 (m, 3H), 7.36 (s, 1H), 7.25-7.29 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.17-3.19 (m,3H), 2.91-3.14 (m,4H), 1.10(d, J=5.2 Hz, 3H); MS (ESI) m/z=434 (М+1+).

Пример 118 5-амино-N-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-гидроксиазепан-1-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-(2,5-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 118

Следуя методике для Примера 105, проводили взаимодействие трет-бутил 2-бромо-4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-гидроксиазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамата (130 мг, 0.23 ммоль) и 2,5-дифторбензолбороновой кислоты (55 мг, 0.35 ммоль) с получением 118 в виде темно-зеленого осадка (66 мг, 57% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, d4-MeOD) δ 8.10-8.00 (m, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.30-7.20 (m, 1H), 7.19-7.11 (m, 1H), 6.24 (tt, J=55.6, 4.2 Hz, 1H), 4.51-4.40 (m, 2H), 4.01-3.92 (m, 1H), 3.45-3.30 (m, 2H), 3.31-3.16 (m, 3H), 2.13-1.91 (m,2H), 1.90-1.67 (m, 2H). ЖХМС (ES+) m/z 499 (M+1).

Пример 119 (S)-5-амино-N-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-(метиламино)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2-фтор-5-метилфенил)тиазол-4-карбоксамид 119

Следуя методике для Примера 108, проводили взаимодействие (R)-трет-бутил 2-бромо-4-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-(2,2,2-трифтор-N-метилацетамидо)азепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамата (80 мг, 0.12 ммоль) и 2-фтор-5-метилбензолбороновой кислоты (30 мг, 0.20 ммоль) с получением 119 в виде моноформиатной соли в виде бледно-розового осадка (11 мг, 19% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, d4-MeOD) δ 8.56 (s, 1H), 8.08 (dd, J=7.3, 2.2 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.26-7.20 (m, 1H), 7.12 (dd, J=11.4, 8.4 Hz, 1H), 6.41-6.08 (m, 1H), 4.54-4.43 (m, 2H), 3.40-3.33 (m, 3H), 3.32-3.24 (m, 2H), 2.64 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 2.33-1.94 (m, 3H), 1.91-1.76 (m, 3H). ЖХМС (ES+) m/z 508 (M+1).

Пример 120 5-амино-N-(5-(4-амино-3-фторазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 120

К раствору Промежуточного соединения 17, 2,2,2-трифтор-N-(3-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-ил)ацетамида (70 мг, 0.20 ммоль), и формиата аммония (101 мг, 1.60 ммоль) в МеОН (5 мл) в атмосфере азота добавили 10% палладий на угле (21 мг, 0.20 ммоль). Смесь нагревали при 70°С в течение 3 ч перед тем, как ее охладили, отфильтровали и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой (10 мл) и ДХМ (50 мл). Органический слой отделили, пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении с получением N-(1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида в виде красной смолы (64 мг). Раствор РуВОР (146 мг, 0.28 ммоль) и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту из Примера 25 (78 мг, 0.22 ммоль) в ДХМ (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Раствор N-(1-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3-фторазепан-4-ил)-2,2,2-трифторацетамида (65 мг, 0.20 ммоль) и DIPEA (56 мкл, 0.32 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавили и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 ч. Дополнительное количество ДХМ (50 мл) добавили и смесь промыли водой (20 мл). Органический слой пропустили через катридж для разделения фаз и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-100% Е120/ДХМ) дала трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(3-фтор-4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамат в виде рацемической смеси четырех диастереоизомеров в виде белого осадка (82 мг). Этот осадок перерастворили в смеси ДХМ (12 мл) и ТФУ (2 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении. Затем остаток перерастворили в 7 н. аммиаке вМеОН (20 мл) и нагревали при 55°С в течение 24 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении, и очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-5% 7 н. аммиаком в МеОН /ДХМ) дала две разделенные пары энантиомеров трет-бутил 2-(2,6-дифторфенил)-4-(5-(3-фтор-4-(2,2,2-трифторацетамидо)азепан-1-ил)-1-метил-1H-пиразол-4-илкарбамоил)тиазол-5-илкарбамата. Одну пару энантиомеров 120 получили в виде белого осадка (41 мг). 1H NMR (400 MHz, d4-MeOD) δ 7.60 (s, 1H), 7.53-7.43 (m, 1H), 7.15 (t, J=8.8 Hz, 2H), 4.48-4.30 (m, 1H), 3.83-3.72 (m, 3H), 3.57 (d, J=4.4 Hz, 1H), 3.59-3.45 (m, 1H), 3.37-3.29 (m, 2H), 3.14 (td, J=11.4, 5.2 Hz, 1H), 1.95-1.84 (m, 3H), 1.82-1.71 (m, 1H). ЖХМС (ES+) m/z 466 (M+1).

Пример 121 5-амино-N-(5-(5-амино-3,3-дифторазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 121

Следуя методике для Примера 101, Промежуточное соединение 19, трет-бутил 6,6-дифтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат, получили после растворения в 5% МеОН/ДХМ (350 мл), промыли насыщенным NaHCO3 (50 мл) и водой (4×50 мл) и удалили растворитель при пониженном давлении, 121 в виде бежевого осадка (1.1 г, 34% за 3 стадии). 1H NMR (400 MHz, d6-ДМСО) δ 8.83 (s, 1H), 7.57-7.47 (m, 4H), 7.31-7.22 (m, 2H), 3.78-3.45 (m, 4H), 3.45-3.02 (m, 3H), 2.25-2.06 (m, 2H), 1.92-1.55 (m, 5H). ЖХМС (ES+) m/z 484 (M+1).

Пример 122 5-амино-N-(5-((3S,5S)-5-амино-3-фторазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 122

Следуя методике для Примера 101, Промежуточное соединение 20, трет-бутил 6-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту из Примера 25, получили, после колоночной хроматографии на силикагеле (0-10% МеОН/ДХМ, 1% 7 н. аммиаком в МеОН), белый осадок (93 мг, 7% за три стадии). Соединение 122 получили в виде одиночного энантиомера после СКЖХ хирального разделения рацемической смеси. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.51 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.38-7.28 (m, 2H), 7.08-6.98 (m, 3H), 6.18-6.07 (m, 2H), 4.83-4.66 (m, 1H), 4.30-4.21 (m, 1H), 4.16-4,09 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.40-3.16 (m, 3H), 3.11 (m, 1H), 2.98-2.89 (m, 1H), 1.95-1.76 (m, 2H). ЖХМС (ES+) m/z 466 (M+1).

Пример 123 (S)-5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-метил-5-(2-метилпиперазин-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 123

Следуя методике для Примера 112, используя в качестве исходного вещества (S)-трет-бутил 4-(4-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-3- и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)-тиазол-4-карбоновую кислоту, получили 123 в виде белого осадка (61 мг, 32% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.66 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.34-7.27 (m, 1H), 7.03 (t, J=8.8 Hz, 2H), 6.11 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.28-3.16 (m, 2H), 3.08-2.93 (m, 4H), 2.59 (dd, J=12.4, 9.5 Hz, 1H), 0.88 (d, J=6.3 Hz, 3H). Алкил NH не наблюдался. ЖХМС (ES+) m/z 434 (M+1).

Пример 124 5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-метил-5-(2,8-диазаспиро[4.5]декан-8-ил)-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 124

Следуя методике для Примера 101, используя в качестве исходного вещества трет-бутил 8-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)-2,8-диазаспиро[4.5]декан-2-карбоксилат, получили 124 в виде бежевого осадка (140 мг, 47% за 3 стадии). 1H NMR (400 MHz, d6-ДМСО) 1H NMR δ 8.85 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.61-7.45 (m, 4H), 7.29 (t, J=8.8 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.22 (t, J=7.5 Hz, 2H), 3.14-2.96 (m, 6H), 1.81 (t, J=7.5 Hz, 2H), 1.73-1.60 (m, 4H). ЖХМС (ES+) m/z 474 (M+1).

Пример 125 5-амино-N-(5-(4-амино-3-фторазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 125

Следуя методике для Примера 121, также получили одну пару энантиомеров 125 в виде серо-белого осадка (37 мг). 1Н NMR (400 MHz, d4-MeOD) δ 7.73 (s, 1H), 7.53-7.41 (m, 1H), 7.14 (t, J=8.8 Hz, 2H), 4.78-4.56 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.55 (t, J=15.3 Hz, 1H), 3.51-3.31 (m, 2H), 3.20-2.97 (m, 2H), 2.14 (q, J=12.2 Hz, 1H), 2.05-1.83 (m, 1Н), 1.78-1.69 (m, 2H). ЖХМС (ES+) m/z 466 (M+1).

Пример 126 5-амино-N-(5-((3R,5R)-5-амино-3-фторазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 126

Следуя методике для Примера 101, используя в качестве исходного вещества Промежуточное соединение 20, трет-бутил 6-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамат и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту из Примера 25, получили, после колоночной хроматографии на силикагеле (0-10% МеОН/ДХМ, 1% 7 н. аммиаком в МеОН), белый осадок (273 мг, 19% за три стадии). Соединение 126 получили в виде одиночного энантиомера после хирального СКЖХ разделения рацемической смеси. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.52 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.37-7.28 (m, 2H), 7.08-6.98 (m, 3H), 6.13 (s, 2H), 4.83-4.78 и 4.72-4.68 (2 m, 1H), 3.79-3.72 (m, 3H), 3.54-3.30 (m, 3H), 3.24-3.12 (m, 2H), 2.31-2.22 (m, 1H), 2.18-2.07 (m, 1H), 1.93-1.76 (m, 2H). ЖХМС (ES+) m/z 466 (M+1).

Пример 127 5-амино-N-(5-((3S,5R)-3-амино-5-фторпиперидин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 127

Смесь трет-бутил (3S,5R)-1-(4-(5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)-тиазол-4-карбоксамидо)-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-5-фторпиперидин-3-илкарбамата (100 мг, 0.15 ммоль) в HCl/MeOH (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 20 часов и сконцентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток разбавили МеОН (10 мл), нейтрализовали 28% раствором аммиака, и сконцентрировали с получением а неочищенного продукта. Неочищенный продукт очистили посредством препаративной ВЭЖХ с получением 127 (40 мг, 59%). 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ (ppm): 7.51-7.49 (m, 2H), 7.17-7.12 (m, 2H), 4.95-4.86 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.31-3.25 (m, 3H), 2.97-2.90 (m, 1H), 2.31-2.23 (m, 1H), 1.64-1.48 (m, 1H); MS (ESI) m/z: 452 [M+H+].

Пример 128 N-(5-(1,4-диазепан-1-ил)-1-(оксетан-3-илметил)-1Н-пиразол-4-ил)-5-амино-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 128

Удаление Вос-группы из трет-бутил 4-(4-(5-амино-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-(оксетан-3-илметил)-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилата в 1:1 метиленхлориде: ТФУ далр 128. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 11.57 (s, 1Н), 8.57 (s, 1H), 7.65 (s, 2H), 7.61-7.43 (m, 1H), 7.29 (t, J=8.7 Hz, 2H), 5.21-5.03 (m, 1H), 4.58-4.36 (m, 2H), 4.26-4.04 (m, 2H), 3.59 (s, 2H), 3.46-3.36 (m, 2H), 2.98 (t, J=6.1Hz, 2H), 2.79 (t, J=5.7 Hz, 2H), 1.60-1.40 (m, 2H). MS (ESI) m/z: 490.2 [M+H+].

Пример 129 N-(5-(1,4-диазепан-1-ил)-1-(оксетан-3-илметил)-1Н-пиразол-4-ил)-5-амино-2-(2-фтор-5-метилфенил)тиазол-4-карбоксамид 129

Удаление Вое группы из трет-бутил 4-(4-(5-амино-2-(2-фтор-5-метилфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-(оксетан-3-илметил)-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилата в 1:1 метиленхлорид: ТФУ дало 129. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 10.78 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.41 (s, 2H), 7.90 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.55 (s, 2H), 7.26 (d, J=9.0 Hz, 2H), 4.61-4.42 (m, 2H), 4.27-4.11 (m, 2H), 3.70-3.54 (m, 2H), 3.00 (t, J=5.4 Hz, 2H), 2.84 (t, J=5.5 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 1.71-1.57 (m, 2H). MS(ESI) m/z: 486.2 [M+H+].

Пример 130 N-(5-(1,4-диазепан-1-ил)-1-(оксетан-3-илметил)-1Н-пиразол-4-ил)-5-амино-2-(2,5-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 130

Удаление Вое группы из трет-бутил 4-(4-(5-амино-2-(2,5-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-(оксетан-3-илметил)-1Н-пиразол-5-ил)-1,4-диазепан-1-карбоксилата в 1:1 метиленхлорид : ТФУ дало 130. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) 6 10.43 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.36 (s, 2H), 8.06-7.94 (m, 1H), 7.60 (s, 2H), 7.51-7.37 (m, 1H),7.36-7.24 (m, 1H), 4.56 (dd, J=10.5, 8.2 Hz, 1H), 4.47 (dd, J=11.2, 8.1Hz, 1H), 4.25 (dd, J=10.7, 5.5 Hz, 1H), 4.18 (dd, J=11.2, 5.7 Hz, 1H), 3.60-3.36 (m, 7H), 2.94 (t, J=5.5 Hz, 2H), 2.83-2.74 (m, 2H), 1.75-1.56 (m, 2H). MS(ESI) m/z: 486.2 [M+H+].

Пример 131 (R)-5-амино-2-(2-фторфенил)-N-(5-(4-гидрокси-4-метилазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 131

Хиральное разделение рацемической смеси посредством СКЖХ дало 131 в виде одиночного энантиомера. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 8.85 (s, 1H), 8.33-8.20 (m, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.50-7.24 (m, 5H), 4.24 (s, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.43-3.32 (m, 1H), 3.28-3.17 (m, 1H),3.11-2.98 (m, 1H), 2.96-2.83 (m, 1H), 2.05-1.88 (m, 1H), 1.84-1.64 (m, 4H), 1.63-1.45 (m, 1H), 1.17 (s, 3H). MS(ESI) m/z: 445.2 [M+H+].

Пример 132 (S)-5-амино-2-(2-фторфенил)-N-(5-(4-гидрокси-4-метилазепан-1-ил)-1-метил-1H-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 132

Хиральное разделение рацемической смеси посредством СКЖХ дало 132 в виде одиночного энантиомера. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 8.85 (s, 1H), 8.33-8.22 (m, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.50-7.23 (m, 5H), 4.24 (s, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.42-3.33 (m, 1H), 3.27-3.19 (m, 1H),3.11-2.98 (m, 1H), 2.96-2.80 (m, 1H), 2.06-1.89 (m, 1H), 1.80-1.63 (m, 4H), 1.63-1.47 (m, 1H), 1.17 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 445.2 [M+H+].

Пример 133 (R)-5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-метил-5-(5-(трифторметил)-1,4-диазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 133

Хиральное разделение рацемической смеси посредством СКЖХ дало 133 в виде одиночного энантиомера. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 11.98 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.64-7.39 (m, 3H), 7.37-7.21 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.22-2.97 (m, 6H), 2.89 (dd, J=14.6, 10.5 Hz, 1H), 2.79-2.60 (m, 1H), 2.25 (dd, J=12.4, 10.6 Hz, 1H), 1.83-1.59 (m, 1H), 0.68 (d, J=6.7 Hz, 3H). MS(ESI) m/z: 448.2 [M+H+].

Пример 134 (S)-5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-метил-5-(5-(трифторметил)-1,4-диазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 134

Хиральное разделение рацемической смеси посредством СКЖХ дало 134 в виде одиночного энантиомера. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 11.98 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.64-7.39 (m, 3H), 7.37-7.21 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.22-2.97 (m, 6H), 2.89 (dd, J=14.6, 10.5 Hz, 1H), 2.79-2.60 (m, 1H), 2.25 (dd, J=12.4, 10.6 Hz, 1H), 1.83-1.59 (m, 1H), 0.68 (d, J=6.7 Hz, 3H). MS(ESI) m/z: 448.2 [M+H+].

Пример 135 (S)-5-амино-N-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-гидроксиазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 135

Хиральное разделение рацемической смеси посредством СКЖХ дало 135 в виде одиночного энантиомера. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 8.69 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.59-7.43 (m, 3H), 7.27 (t, J=8.7 Hz, 2H), 6.37 (tt, J=55.3, 4.1Hz, 1H), 4.41 (td, J=14.5,4.1Hz, 2H), 3.79 (d, J=7.8 Hz, 1H), 3.24-2.94 (m, 4H), 1.96-1.75 (m, 3H), 1.73-1.48 (m, 3H). MS(ESI) m/z: 499.1 [M+H+].

Пример 136 (R)-5-амино-N-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-гидроксиазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 136

Хиральное разделение рацемической смеси посредством СКЖХ дало 136 в виде одиночного энантиомера. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 8.69 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.58-7.42 (m, 3H), 7.27 (t, J=8.7 Hz, 2H), 6.37 (tt, J=55.3, 4.0 Hz, 1H), 4.47 (d, J=3.8 Hz, 1H), 4.40 (td, J=14.5, 4.1Hz, 2H), 3.87-3.72 (m, 1H), 3.23-2.94 (m, 4H), 1.92-1.76 (m, 3H), 1.73-1.46 (m, 3H). MS(ESI) m/z: 499.1 [M+H+].

Пример 137 (S)-5-амино-N-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-гидроксиазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2-фтор-5-метилфенил)тиазол-4-карбоксамид 137

Хиральное разделение рацемической смеси посредством СКЖХ дало 137 в виде одиночного энантиомера. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 8.91 (s, 1H), 8.07 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.41 (s, 2H), 7.23 (d, J=9.0 Hz, 2H), 6.38 (tt, J=55.4, 4.1 Hz, 1Н), 4.53 (s, 1H), 4.42 (td, J=14.5, 4.1 Hz, 2H), 3.89-3.76 (m, 1H), 3.27-2.98 (m, 4H), 2.36 (s, 3Н), 1.95-1.79 (m, 3H), 1.79-1.48 (m, 3H). MS(ESI) m/z: 495.2 [M+H+].

Пример 138 (R)-5-амино-N-(1-(2,2-дифторэтил)-5-(4-гидроксиазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2-фтор-5-метилфенил)тиазол-4-карбоксамид 138

Хиральное разделение рацемической смеси посредством СКЖХ дало 138 в виде одиночного энантиомера. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 8.91 (s, 1H), 8.07 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.41 (s, 2H), 7.23 (d, J=9.0 Hz, 2H), 6.38 (tt, J=55.4, 4.1Hz, 1H), 4.53 (d, J=3.8 Hz, 1H), 4.42 (td, J=14.5, 4.1 Hz, 2H), 3.93-3.74 (m, 1H), 3.27-3.00 (m, 4H), 2.37 (s, 3H), 1.97-1.78 (m, 3H), 1.78-1.49 (m, 3H). MS(ESI) m/z: 495.2 [M+H+].

Пример 139 5-амино-N-(5-((4R,5R)-4-амино-5-фторазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 139

Стадия А: К раствору бензил 4-азидо-5-гидроксиазепан-1-карбоксилата (1.0 г, 3.45 ммоль) в безводном ДХМ (10 мл) добавили деоксо-Fluor® (1.6 мл, 8.62 ммоль, 50% в ТГФ) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Насыщенный водный раствор NaHCO3 добавили (20 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (100 мл). Органический слой промыли насыщенным водным раствором NaHCO3 (20 мл), отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (20% EtOAc/изогексан) с получением бензил 4-азидо-5-фторазепан-1-карбоксилата в виде смеси син и анти изомеров в виде бледно-желтого масла (0.76 г).

Стадия В: Раствор бензил 4-азидо-5-фторазепан-1-карбоксилата (0.5 г, 1.71 ммоль) в ТГФ/воде (10 мл/2 мл) обработали трифенилфосфином (0.45 г, 1.71 ммоль) и смесь нагревали при 60°С в течение 24 ч. Смесь разделили между EtOAc (100 мл) и водой (20 мл) и промыли солевым раствором (20 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4, и сконцентрировали при пониженном давлении с получением бесцветного масла. Это масло тритурировали в Et2O, получившийся осадок отфильтровали, промыли Et2O и фильтрат сконцентрировали при пониженном давлении с получением бесцветного масла. Реакцию повторили в половинном масштабе и объединенные порции растворили в безводном ДХМ (20 мл) и обработали ди-трет-бутилдикарбонатом (1.1 г, 5.11 ммоль) и NEt3 (1.1 мл, 7.67 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавили воду (10 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (100 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (40% EtOAc/изогексан) дала бензил 4-(трет-бутоксикарбониламино)-5-фторазепан-1-карбоксилат в виде смеси син и анти изомеров в виде бесцветного масла (0.55 г).

Стадия С: Раствор бензил 4-(трет-бутоксикарбониламино)-5-фторазепан-1-карбоксилата (0.55 г, 1.50 ммоль) в МеОН (75 мл) пропустили через H-Cube® (полный H2, 50°С, скорость потока: 1 мл/мин, 30 мм 10% Pd/C картридж). Растворитель удалили при пониженном давлении с получением трет-бутил 5-фторазепан-4-илкарбамата в виде смеси син и анти изомеров в виде бесцветного масла (317 мг).

Стадия D: К раствору трет-бутил 5-фторазепан-4-илкарбамата (310 мг, 1.34 ммоль) в EtOH (4 мл) добавили DIPEA (1 мл, 5.7 ммоль) и 5-хлор-1-метил-4-нитро-1Н-пиразол (216 мг, 1.34 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 130°С в микроволновой печи в течение 8 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (30-40% EtOAc/изогексан) с получением двух транс изомеров, трет-бутил 5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата и трет-бутил 5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата в виде белого стекловидного осадка (65 мг), загрязненного некоторым количеством син изомера.

Стадия Е: Раствор трет-бутил 5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1Н-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата и трет-бутил 5-фтор-1-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)азепан-4-илкарбамата (65 мг, 0.182 ммоль) в МеОН (20 мл) пропустили через H-Cube® (полный Н2, 50°С, скорость потока: 1 мл/мин, 30 мм 10% Pd/C картридж). Растворитель удалили при пониженном давлении с получением свободного амина в виде бледно-желтого стекловидного осадка (51 мг).

Стадия F: К раствору этого амина (51 мг, 0.156 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавили 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновую кислоту (56 мг, 0.156 ммоль), РуВОР (203 мг, 0.39 ммоль) и DIPEA (0.5 мл, 2.9 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавили воду (10 мл) и смесь экстрагировали ДХМ (40 мл). Органический слой отделили, высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Очистка остатка посредством колоночной хроматографии на силикагеле (60% EtOAc/изогексан) дала два транс изомера трет-бутил 4-(5-(4-Вос-амино-5-фторазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-5-илкарбамата в виде бледно-сиреневого осадка (36 мг), загрязненного небольшим количеством син (цис) изомера.

Стадия G: Раствор/суспензию двух транс изомеров трет-бутил 4-(5-(4-Вос-амино-5-срторазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-илкарбамоил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-5-илкарбамата (35 мг, 0.053 ммоль) в МеОН (2 мл) обработали раствором HCl в диоксане (4 М, 0.65 мл, 2.63 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ с получением 5-амино-N-(5-(4-амино-5-фторазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамида в виде серо-белого осадка (3 мг, 0.16% за восемь стадий). 4-амино и 5-фторо группы были в транс положении. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.81 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.38-7.27 (m, 1H), 7.08-6.98 (m, 2H), 6.14 (s, 2H), 4.92-4.77 (m, 1H), 3.73 (s, 3Н), 3.50-3.29 (m, 3H), 3.18-3.05 (m, 2H), 2.29-2.24 (m, 1H), 2.11-1.76 (m, 3H). Алкил NH2 не наблюдался. ЖХМС (ES+) m/z 466 (М+1)

Хиральное разделение 5-амино-N-(5-(4-амино-5-фторазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамида с помощью СКЖХ дало 139 в виде одиночного энантиомера. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 8.82 (s, 1H), 7.59-7.42 (m, 4H), 7.26 (t, J=8.7 Hz, 2H), 4.55-4.31 (m, 1H), 3.63 (s, 3Н), 3.23-3.03 (m, 5H), 2.20-2.02 (m, 1Н), 2.02-1.88 (m, 1Н), 1.88-1.76 (m, 1Н), 1.67-1.52 (m, 1H). MS(ESI) m/z: 466.1 [M+H+].

Пример 140 5-амино-N-(5-((4S,5S)-4-амино-5-фторазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 140

Методика Примера 139 проводилась с получением 5-амино-N-(5-(4-амино-5-фторазепан-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамида, где 4-амино и 5-фторо группы были в цис-положении. Хиральное разделение рацемической смеси посредством СКЖХ дало 140 в виде одиночного энантиомера. 1H NMR (400 MHz, ДМСО) δ 8.82 (s, 1H), 7.59-7.42 (m, 4H), 7.26 (t, J=8.7 Hz, 2H), 4.55-4.31 (m, 1H), 3.63 (s, 3Н), 3.23-3.03 (m, 5H), 2.20-2.02 (m, 1Н), 2.02-1.88 (m, 1Н), 1.88-1.76 (m, 1Н), 1.67-1.52 (m, 1Н). MS(ESI) m/z: 466.1 [M+H+].

Пример 141 (S)-5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-метил-5-(2-метилпиперазин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 141

Следуя методике для Примера 112, (S)-5-(2,4-диметилпиперазин-1-ил)-1-метил-1H-пиразол-4-амин и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновая кислота из Примера 25 взаимодействовали с получением 141 в виде розового осадка (86 мг, 46% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.59 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.35-7.28 (m, 1H), 7.02 (t, J=8.7 Hz, 2H), 6.13 (s, 2H), 3.77 (s, 3Н), 3.43-3.31 (m, 2H), 2.98 (d, J=11.6 Hz, 1H), 2.83 (t, J=11.4 Hz, 2H), 2.35 (s, 3Н), 2.32-2.25 (m, 1H), 1.96 (t, J=10.2 Hz, 1H), 0.90 (d, J=6.3 Hz, 3Н). ЖХМС (ES+) m/z 448 (M+1).

Пример 142 (R)-5-амино-2-(2,6-дифторфенил)-N-(1-метил-5-(2-метилпиперазин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)тиазол-4-карбоксамид 142

Следуя методике для Примера 110, (R)-5-(2,4-диметилпиперазин-1-ил)-1-метил-1Н-пиразол-4-аптпе и 5-(трет-бутоксикарбониламино)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоновая кислота из Примера 25 взаимодействовала с получением 142 в виде белого осадка (54 мг, 29% за две стадии). 1Н NMR (400 MHz, CDCl2) δ 8.59 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.36-7.25 (m, 1H), 7.02 (t, J=8.7 Hz, 2H), 6.12 (s, 2H), 3.77 (s, 3Н), 3.43-3.30 (m, 2H), 2.98 (dt, J=11.5, 2.8 Hz, 1H), 2.83 (t, J=11.4 Hz, 2H), 2.35 (s, 3Н), 2.42-2.20 (m, 1H), 1.96 (t, J=10.2 Hz, 1H), 0.92 (d, J=8.6 Hz, 3Н). ЖХМС (ES+) m/z 448 (M+1).

Пример 143 5-амино-N-(1-циклопропил-5-(6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,5-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 143

Следуя методике для Примера 105, использовали трет-бутил 4-(4-(2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоксамидо)-1-циклопропил-1H-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат и 2,5-дифтор-фенилбороновую кислоту с получением 143 в виде бежевой пены (60 мг, 42% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H), 7.92-7.84 (m, 2H), 7.17-7.08 (m, 1H), 7.07-6.99 (m, 1H), 6.15 (s, 2H), 3.68 (t, J=13.2 Hz, 2H), 3.52-3.32 (m, 5H), 3.11 (t, J=5.4 Hz, 2H), 1.95 (s, 1Н), 1.26-1.20 (m, 2H). 1.08-1.00 (m, 2H). ЖХМС (ES+) m/z 496 (M+1).

Пример 144 5-амино-N-(1-циклопропил-5-(6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2-фтор-5-метилфенил)тиазол-4-карбоксамид 144

Следуя методике для Примера 105, трет-бутил 4-(4-(2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоксамидо)-1-циклопропил-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилат и 2-фтор-5-метилфенилбороновая кислота взаимодействовали с получением 144 в виде бежевой пены (75 мг, 53% за две стадии). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.99 (s, 1H), 7.92 (dd, J=7.2, 2.2 Hz, 1H), 7.84-7.79 (m, 1H), 7.16-7.11 (m, 1H), 7.10-7.00 (m, 1H), 6.09 (s, 2H), 3.69 (t, J=13.3 Hz, 2H), 3.51-3.35 (m, 5H), 3.09 (t, J=5.5 Hz, 2H), 2.39 (s, 3Н), 2.05-1.80 (m, 1H), 1.29-1.19 (m, 2H), 1.09-0.98 (m, 2H). ЖХМС (ES+) m/z 492 (M+1).

Пример 145 5-амино-N-(1-циклопропил-5-(6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамид 145

Смесь трет-бутил 4-(4-(2-бромо-5-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-4-карбоксамидо)-1-циклопропил-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1- карбоксилата (191 мг, 0.29 ммоль), дигидрата фторида калия (90 мг, 0.96 ммоль) и 2,6-дифтор-фенилбороновой кислоты (137 мг, 0.87 ммоль) в ТГФ (3 мл) дегазировали осторожным барботированием азота через смесь в течение 15 мин. Затем добавили смесь трис(дибензилиденацетон)дипалладий/три-трет-бутил фосфония тетрафторборат (молярное соотношение: 1/1.2) (35 мг, 0.029 ммоль) и смесь дегазировали, нагревали в микроволновой печи при 100°С в течение 2 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении. Добавили воду (5 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2×20 мл). Объединенные органические слои высушили над MgSO4 и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле (0-60% EtOAc/изогексан) с получением трет-бутил 4-(4-(5-трет-бутоксикарбониламино-2-(2,6-дифторфенил)тиазол-4-карбоксамидо)-1-циклопропил-1Н-пиразол-5-ил)-6,6-дифтор-1,4-диазепан-1-карбоксилата в виде оранжевого осадка (95 мг, 0.13 ммоль), который растворили в растворе HCl в 1,4-диоксане (4 М, 0.7 мл, 2.73 ммоль) и МеОН (0.2 мл) и перемешивали при 70°С в течение 48 ч. Растворитель удалили при пониженном давлении и остаток