Способ прогнозирования риска развития преэклампсии тяжелого течения

Изобретение относится к области медицинской диагностики и касается способа прогнозирования риска развития преэклампсии тяжелого течения у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрально-Черноземного региона России. Способ включает выделение ДНК из периферической венозной крови, анализ полиморфизма гена MMР-8 (rs1320632) в сочетании с другими предикторами развития данной патологии беременности. Прогнозируют риск развития преэклампсии тяжелого течения по уравнениям линейной дискриминантной функции: y1=-14,767+2,914х1+1,439х2+0,222х3+14,345х4, y2=-2,228+2,305х1-0,718х2+1,888х3-0,254х4, где х1 – генетический вариант по локусу MMР-8 (rs1320632) (АА - 1; АG или GG - 0), х2 - наличие преэклампсии у родственников (1 - да; 0 - нет), х3 – наличие заболеваний, передающихся половым путем (1 - да; 0 - нет), х4 - наличие гинекологических патологий в анамнезе (1 - да; 0 - нет), в случае, если значение y1 больше y2. Использование способа позволяет сформировать группы риска развития преэклампсии тяжелого течения при планировании беременности, что будет способствовать более эффективному осуществлению лечебно-профилактических мероприятий по предупреждению данной патологии беременности. 3 пр., 2 ил.

 

Изобретение относится к области медицинской диагностики, может быть использовано для прогнозирования риска развития преэклампсии тяжелого течения.

Преэклампсия (далее ПЭ) - осложнение беременности, характеризующееся развитием эндотелиальной дисфункции, полиорганной недостаточностью, нарушением свертывающей и противосвертывающей систем, микроциркуляции, обменных процессов, иммунного ответа [Серов, В.Н. Клинические рекомендации. Акушерство и гинекология. - 4-е изд. / В.Н. Серов, Г.Т. Сухих. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2014. - 1024 с.].

В основе развития преэклампсии могут лежать следующие механизмы: торможение инвазии цитотрофобласта в спиральные артерии матки, дисфункция эндотелия, оксидантный стресс, гиперкоагуляция, нарушения микроциркуляции.

В Российской Федерации частота ПЭ варьируется по разным территориям от 17,8% до 22,2% [Радзинский, В. Е. Иммунохимическая оценка перинатального риска [Текст]. / В. Е. Радзинский, С. Г. Морозов, Л. А. Чугунова // Вестник Российского университета дружбы народов. Сер. Медицина. – 2010. – № 5. – С. 7-12]. Возникновение преэклампсии у здоровых первобеременных отмечается в 6-12% случаев, а у женщин с сопутствующей экстрагенитальной патологией – 20-40%, при этом наблюдается существенный рост тяжелых и атипичных форм преэклампсии до 24%. Ежегодно в мире погибают в среднем 50000 женщин от тяжелой формы преэклампсии, а также связанных с ней осложнений (аспирационной пневмонии, отека легких и мозга, сердечной недостаточности, инсульта, HЕLLР-синдрома и т.д.).

Важной задачей практического акушерства является прогнозирование риска развития ПЭ тяжелой степени на основании исследованных полиморфизмов генов матриксных металлопротеиназ и других возможных факторов риска с целью выявления женщин, предрасположенных к развитию преэклампсии тяжелого течения.

Ген ММР-8 находится на 11 хромосоме в области 11q22.2–q22.3. Был исследован полиморфизм, связанный с заменой нуклеотида A в положении G -477 (-477А>G ММР-8 (rs1320632)).

В изученной научно-медицинской и доступной патентной литературе авторами не было обнаружено способа прогнозирования риска развития преэклампсии тяжелого течения на основе данных о полиморфном маркере матриксных металлопротеиназ ММР-8 (rs1320632) в сочетании с другими предикторами развития данной патологии беременности.

Для оценки сложившейся патентной ситуации был выполнен поиск по охранным документам за период с 1990 по 2016 гг. Анализ документов производился по направлению: способ прогнозирования развития преэклампсии тяжелого течения на основе молекулярно-генетических данных в зависимости от полиморфных маркеров генов матриксных металлопротеиназ.

За прототип выбран патент РФ № 2568892 по заявке РФ № 2014135186/15, 28.08.2014 «Способ прогнозирования риска развития преэклампсии тяжелого течения» (Чурносов Михаил Иванович (RU), Каганович Евгения Николаевна (RU), Добродомова Ирина Сергеевна (RU), Орлова Валентина Семеновна (RU), Полоников Алексей Валерьевич (RU), Прощаев Кирилл Иванович (RU)). Способ предназначен для прогнозирования риска возникновения преэклампсии тяжелого течения у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья. Способ включает выделение ДНК из периферической венозной крови и анализ генетических полиморфизмов -308 G/A TNF (rs1800629), +36 A/G TNFR1 (rs767455), -801 G/A SDF 1 (rs1801157), C/G MCP-1 (rs285765). Повышенный риск развития преэклампсии тяжелого течения прогнозируют при наличии сочетания генетических вариантов -801A SDF1, +36 GG TNFR1 и -308 A TNF. Пониженный риск развития преэклампсии тяжелого течения прогнозируют при наличии сочетания генетических вариантов -801 G SDF1 и G МСР (rs285765). Использование изобретения позволяет повысить эффективность выявления тяжелого течения преэклампсии. Недостаток способа заключается в том, что анализируются только определенные генетические полиморфизмы, без включения патогенетически значимых факторов развития преэклампсии тяжелой степени.

Задачей настоящего исследования является расширение арсенала способов диагностики, а именно создание способа прогнозирования риска развития преэклампсии тяжелого течения по данным о генетическом полиморфизме ММР-8 (rs1320632) в сочетании с другими предикторами развития данного осложнения беременности.

Технический результат использования изобретения – получение критериев оценки риска развития преэклампсии тяжелого течения.

В соответствии с поставленной задачей был разработан способ прогнозирования преэклампсии, включающий:

- выделение ДНК из периферической венозной крови;

- анализ полиморфизмов генов ММР-8 (rs1320632);

- прогнозирование риска развития преэклампсии тяжелого течения у женщин в зависимости от выявленных генетических вариантов по локусу ММР-8 (rs1320632) в сочетании с другими предикторами развития данной патологии беременности для отнесения в группу женщин с ПЭ тяжелого течения по уравнениям линейной дискриминантной функции (далее ЛДФ):

y1 = -14,767+ 2,914х1+1,439х2+0,222х3+14,345х4;

y2 = -2,228+2,305х1-0,718х2+1,888х3-0,254х4,

где х1 – генетический вариант по локусу MMР-8 (rs1320632) (АА - 1; АG или GG - 0), х2 - наличие преэклампсии у родственников (1 - да; 0 - нет), х3 – наличие заболеваний, передающихся половым путем (далее ЗППП) (1 - да; 0 - нет), х4 - наличие гинекологических патологий в анамнезе (1 - да; 0 - нет). Прогноз риска развития данной патологии в случае, если y1 больше y2.

Новизна и изобретательский уровень заключаются в том, что из уровня техники не известна возможность прогноза риска развития преэклампсии тяжелого течения у женщин по наличию генетического варианта локуса ММР-8 (rs1320632) в сочетании с другими предикторами развития данной патологии беременности.

Способ осуществляют следующим образом.

ДНК выделяют из образцов периферической венозной крови беременных в 2 этапа. На первом этапе к 4 мл крови добавляют 25 мл лизирующего буфера, содержащего 320 мМ сахарозы, 1% тритон Х-100, 5 мМ MgCl2, 10 мМ трис-HCl (pH=7,6). Полученную смесь перемешивают и центрифугируют при 4ºС, 4000 об/мин в течение 20 минут. После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют 4 мл раствора, содержащего 25 мМ ЭДТА (рН=8,0) и 75 мМ NaCl, ресуспензируют. Затем прибавляют 0,4 мл 10% SDS, 35 мкл протеиназы К (10 мг/мл) и инкубируют образец при 37ºС в течение 16 часов.

На втором этапе из полученного лизата последовательно проводят экстракцию ДНК равными объемами фенола, фенол-хлороформа (1:1) и хлороформа с центрифугированием при 4000 об/мин в течение 10 минут. После каждого центрифугирования производят отбор водной фазы. ДНК осаждают из раствора двумя объемами охлажденного 96% этанола. Сформированную ДНК растворяют в бидистиллированной, деионизованной воде.

Измерение концентрации ДНК осуществляют на спектрофотометре NanoDrop 2000. Концентрацию и чистоту выделенной ДНК оценивают при измерении оптической плотности (ОП) полученного раствора. Далее готовят «рабочие» концентрации образцов ДНК (10-20 нг в мкл) путем разведения «стоковой» ДНК деионизированной водой. Полученные «рабочие образцы» ДНК хранят при -80°С.

Выделенную ДНК подвергают полимеразной цепной реакции с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров. Последовательность праймеров и зондов для полиморфизма гена матриксных металлопротеиназ ММР-8 (rs1320632) были взяты из литературного источника [Association between -799 C/T single nucleotide polymorphism of the MMP-8 promoter region and thoracic aortic dissection [Text] / Y. Li, N. Li, W. Ma [et al.] // Mol. Med. Rep. – 2014. – Vol. 10, № 4. – P. 1857-1862].

Для исследования локуса ММР-8 (rs1320632) методом ПЦР готовят реакционную смесь объемом 25 мкл: 6,7 мМ трис-HСl (рH=8,8), 2,5мМ MgСl2, 0,1 мкг геномной ДНК, по 10 пкмоль каждого праймера, по 5 пкмоль каждого зонда, по 200 мкМ dАTР, dGTР, dСTР, dTTР и 1 единицу активной Tаq-полимеразы. После денатурации выполняют 40 циклов амплификации по схеме: отжиг праймеров и денатурация. Олигонуклеотидные праймеры и зонды синтезированы фирмой «Синтол».

Изобретение характеризуется:

Фиг.1. Дискриминации аллелей методом детекции TaqMan зондов по данным величин ОЕФ (относительные единицы флуоресценции) каждого зонда на амплификаторе CFX96 (Bio-Rad) c детектирующей системой в режиме реального времени полиморфизма ММР-8 (rs1320632), где - гомозиготы AA ММР-8 (rs1320632), - гомозиготы GG ММР-8 (rs1320632), - гетерозиготы AG ММР-8 (rs1320632), - отрицательный контроль.

Фиг.2. В таблице представлены показатели линейной дискриминантной функции (ЛДФ) для женщин с преэклампсией тяжелого течения и без преэклампсии с учетом предикторов развития данного осложнения беременности и генетических факторов.

Возможность использования предложенного способа для оценки риска развития преэклампсии тяжелого течения подтверждает анализ результатов обследования 1045 женщин: 468 женщин с диагнозом преэклампсия и 577 женщин с физиологическим течением беременности (контрольная группа). В исследуемые выборки включались индивидуумы русской национальности, являющиеся уроженками Центрально-Черноземного региона России и не имеющие родства между собой. Возраст в группе беременных с ПЭ варьировался от 17 до 45 лет (в среднем 27,74±5,4 лет), а в контрольной группе - от 15 до 49 лет (в среднем 27,80±6,5 лет) (р>0,05). Таким образом, группа контроля не отличалась от основной группы по возрасту, полу, национальности и месту рождения.

Диагностику преэклампсии осуществляли сотрудники Перинатального центра областной клинической больницы Святителя Иоасафа г. Белгорода в соответствии с Международной классификацией болезней 10-го пересмотра. Степень тяжести преэклампсии оценивали по критериям Федеральных клинических рекомендаций «Гипертензивные расстройства во время беременности, в родах и послеродовом периоде. Преэклампсия. Эклампсия» [Гипертензия во время беременности. Преэклампсия. Эклампсия: клинич. протокол [Электронный ресурс]. / Науч. центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В. И. Кулакова Минздравсоцразвития России; Ин-т Здоровья семьи; Проект «Мать и Дитя»; рук. авт. кол.: Г. Т. Сухих, Н. В. Вартапетова. – Москва, 2012. – 51 с. – Режим доступа: http://www.volgmed.ru/uploads/files/2013-4/18295]. Типирование молекулярно-генетических маркеров осуществляли в лаборатории «Молекулярной генетики человека» медицинского факультета Белгородского государственного национального исследовательского университета. Формирование базы данных и статистические расчеты осуществляли с использованием программы «STATISTICA 6.0». Прогнозирование риска развития ПЭ тяжелого течения осуществляли с использованием дискриминантного анализа [Реброва, О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA [Текст]. / О. Ю. Реброва. – [3-е изд.]. – Москва: Медиа Сфера, 2006. – 305 с.: ил.; Боровиков, В. П. Statistica: искусство анализа данных на компьютере [Текст]. / В. П. Боровиков. – 2-е изд. – Санкт-Петербург: Питер, 2003. – 688 с.].

На основании построенной методом дискриминантного анализа статистической модели прогнозирования риска развития преэклампсии тяжелого течения с учетом патогенетически значимых признаков, характеризующих медико-биологический статус женщин до беременности, таких как возраст возникновения беременности, показатели артериального давления, наличие ЗППП, семейный анамнез и т.д., а также генетических характеристик по исследуемым локусам матриксных металлопротеиназ, была разработана модель прогнозирования ПЭ тяжелого течения, которая включала четыре статистически значимых признака: наличие преэклампсии у родственников, наличие гинекологических патологий в анамнезе, наличие заболеваний, передающихся половым путем, и генетический вариант по локусу MMР-8 (rs1320632), которые при проведении данного анализа получили значение критерия Уилкса 0,292 при F(4,654)=396,10 и р<0,0000. Параметры дискриминантного анализа представлены в таблице на фиг. 2.

Полученные данные позволяют сделать вывод, что изучаемые группы беременных с преэклампсией тяжелого течения и без преэклампсии по набору из всех исследованных признаков показывают неслучайную межгрупповую дисперсию. Анализ показателей F-критериев и вероятности статистической ошибки 1-го рода (р) по каждому из признаков указывает на то, что по исследуемым показателям р<0,05. Это свидетельствует о возможности их включения в дискриминантный анализ.

В группе беременных с тяжелым течением ПЭ точность распознавания равна 74,70%, а в группе женщин без ПЭ -100,00%. В среднем данный показатель составляет 96,81%.

С целью проверки работоспособности модели в анализ нами были дополнительно включены две пациентки. У 1-й пациентки, у беременной С., определены следующие показатели: генетический вариант по локусу MMР-8 (rs1320632) - АG+GG, наличие преэклампсии у родственников - да, наличие заболеваний, передающихся половым путем, – да, наличие гинекологических патологий в анамнезе – да.

Подставляя полученные значения показателей в вышеуказанные уравнения линейной дискриминантной функции, получают значения y1 и y2:

y1= -14,767+ 2,914*0+1,439*1+0,222*1+14,345*1=1,23;

y2= -2,228+2,305*0-0,718*1+1,888*1-0,254*1=-1,31.

Поскольку значение y1 больше y2, сделан вывод о необходимости отнесения беременной С. в группу с повышенным уровнем риска развития ПЭ тяжелого течения. Дальнейшее наблюдение подтвердило правильность прогноза.

У беременной З. определены следующие показатели: генетический вариант по локусу MMР-8 (rs1320632) - АА, наличие преэклампсии у родственников - нет, наличие заболеваний, передающихся половым путем, – нет, наличие гинекологических патологий в анамнезе – нет.

Подставляя полученные значения показателей в вышеуказанные уравнения линейной дискриминантной функции, получают значения y1 и y2:

y1 = -14,767+ 2,914*1+1,439*0+0,222*0+14,345*0=-11,762;

y2 = -2,228+2,305*1-0,718*0+1,888*0-0,254*0=0,077.

Поскольку значение y2 больше y1, сделан вывод, что нет необходимости отнесения беременной З. в группу с повышенным уровнем риска развития ПЭ тяжелого течения. Дальнейшее наблюдение подтвердило правильность прогноза.

Разработанный способ прогнозирования позволит формировать группы риска по развитию преэклампсии тяжелого течения среди женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрально-Черноземного региона России, при планировании беременности и на ранних сроках беременности, что будет способствовать более эффективному осуществлению лечебно-профилактических мероприятий по предупреждению данной патологии беременности.

Способ прогнозирования риска возникновения преэклампсии тяжелого течения у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрально-Черноземного региона России, включающий выделение ДНК из периферической венозной крови и анализ генетических полиморфизмов, отличающийся тем, что проводят анализ генетических вариантов по локусу ММР-8 (rs1320632), а прогноз осуществляют по уравнениям линейной дискриминантной функции:

y1 = -14,767+2,914х1+1,439х2+0,222х3+14,345х4;

y2 = -2,228+2,305х1-0,718х2+1,888х3-0,254х4,

где х1 – генетический вариант по локусу MMР-8 (rs1320632) (АА - 1; АG или GG - 0), х2 - наличие преэклампсии у родственников (1 - да; 0 - нет), х3 – наличие заболеваний, передающихся половым путем (1 - да; 0 - нет), х4 - наличие гинекологических патологий в анамнезе (1 - да; 0 - нет), при этом, если значение y1 больше y2, прогнозируют риск развития данной патологии.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования степени вероятности выполнения циторедуктивной операции в оптимальном объеме у больных диссеминированным раком яичников.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для обнаружения антитела в тестируемом образце, содержащем жидкость организма субъекта-млекопитающего.

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии и неврологии, и предназначено для прогнозирования развития рассеянного склероза (PC) у больных с оптическим невритом (ОН) подострого течения.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к трасплантологии, и может быть использована для обнаружения циркулирующих в крови клеток, полученных из ткани пуповины человека, после их введения.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к применению выделенного антитела к CXCR4 в диагностике рака, что может быть использовано в медицине. В частности, раскрыты способы диагностики и/или прогнозирования онкогенного расстройства, связанного с экспрессией CXCR4, определения, является ли указанное расстройство или пациент, страдающий им восприимчивым к лечению анти-CXCR4 антителом, способы определения эффективной схемы лечения и наборы для лечения указанных заболеваний.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для ранней диагностики и мониторинга заболевания у субъекта с использованием циркулирующих тканевых макрофагов.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использована для диагностики ассоциированного с кишечником заболевания и/или ассоциированной с кишечником патологии у животного.

Изобретение относится к ветеринарии, эпизоотологии, а именно к способам дифференциальной экспресс-диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота. Способ дифференциальной экспресс-диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота, включающий исследование сывороток животных в иммуноферментном анализе с использованием специфического антигена из типичных бруцелл вида abortus, ОПС-антигена и конъюгата на основе рекомбинантного белка G, отличается тем, что исследование сывороток проводят параллельно непрямым и конкурентным методами иммуноферментного анализа с использованием ОПС-антигена в качестве конкурирующего агента, а интерпретацию результатов проводят по формуле Кэо=D1/D2*100, где D1 - оптическая плотность, измеряемая в лунке, содержащей ОП-С антиген; D2 - оптическая плотность, измеряемая в лунке, не содержащей ОП-С антиген; Кэо - коэффициент, определяющий степень эпизоотической опасности по бруцеллезу животного, от которого получен исследованный образец сыворотки крови, и при 0≤К≤60 - отсутствие у животного эпизоотической опасности по бруцеллезу; 61≤К≤100 и выше - наличие у животного высокой эпизоотической опасности по бруцеллезу.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа измерения активности натуральных клеток-киллеров (NK-клеток), включающего стимулирование NK-клеток в образце цельной крови посредством инкубирования образца цельной крови со средством, включающим по меньшей мере один стимулирующий цитокин, выбранный из группы, состоящей из интерлейкина 2, интерлейкина 15 и интерлейкина 18, и измерение количества секретируемых NK-клетками цитокинов, секретированных в образце цельной крови.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа идентификации В-клеточного клона, который специфически связывается с мишеневым антигеном, предусматривающего наличие множества В-клеток; взаимодействие В-клеток с мишеневым антигеном, где мишеневый антиген содержит первую сортируемую метку, и окрашивание множества В-клеток анти-IgG антителами, содержащими вторую сортируемую метку, и анти-IgM антителами, содержащими третью сортируемую метку; отделение от множества В-клеток одной или нескольких В-клеток, которые могут специфически связываться с мишеневым антигеном, используя клеточный сортер.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для получения аналитической тест-системы на основе суспензионных микрочипов для детекции маркеров заболеваний. Для этого создают суспензионные микрочипы путем оптического кодирования микросфер различного диаметра флуоресцентными красителями с их последующим конъюгированием с биологическими распознающими молекулами. Создают детектирующие компоненты путем конъюгирования биологических детектирующих молекул с флуоресцентными красителями. Для оптического кодирования микросфер различного диаметра используют полупроводниковые флуоресцентные нанокристаллы, которые наносят послойно на поверхность микросфер. При этом слой полупроводниковых флуоресцентных нанокристаллов одного цвета пространственно отделяют от соседнего слоя полупроводниковых флуоресцентных нанокристаллов другого цвета тремя и более слоями полиэлектролитов. Для формирования внешнего слоя полиэлектролита используют полимер, включающий функциональные группы для специфического и/или ориентированного конъюгирования биологических распознающих молекул. Для маркирования биологических детектирующих молекул используют флуоресцентные красители, возбуждаемые на одной длине волны с используемыми полупроводниковыми флуоресцентными нанокристаллами. Изобретение позволяет создать тест-системы, позволяющие детектировать и количественно определять множество различных белковых маркеров, например онкологических заболеваний женской репродуктивной системы, методами проточной цитометрии на стандартных проточных цитометрах. 21 з.п. ф-лы, 3 ил.
Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, детским инфекционным болезням, и предназначено для диагностики формы тяжести вызванного вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ) и бактериями инфекционного мононуклеоза у детей. Выполняют обследование детей, больных инфекционным мононуклеозом, вызванным ВЭБ и бактериями, при котором определяют наличие или отсутствие сплошного налета на небных миндалинах ребенка. Исследуют его слюну, в которой определяют концентрацию IFN-γ, пг/мл. При наличии сплошного налета и IFN-γ<7,5 пг/мл или при отсутствии сплошного налета и значении IFN-γ<3,0 пг/мл диагностируют тяжелую форму инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями. При наличии сплошного налета и IFN-γ≥7,5 пг/мл или при отсутствии сплошного налета и IFN-γ≥3,0 пг/мл диагностируют среднетяжелую форму инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями. Использование изобретения позволяет исключить инвазивность и сократить время диагностики, а также обеспечивает возможность диагностировать формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями. 6 пр.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и представляет собой способ определения в одной постановке цист лямблий и ооцист криптоспоридий в биологическом материале - кале, в смывах объектов окружающей среды и в почве, заключающийся в подготовке пробы, внесении в пробу иммуномагнитных частиц, иммунохимическом связывании, в результате чего образуются агрегаты цист и ооцист с магнитными частицами, улавливании агрегатов цист и ооцист в магнитном поле, отмывке зафиксированных агрегатов цист и ооцист буферным раствором, диссоциации меркаптоэтанолом или соляной кислотой, разделении цист, ооцист и магнитных частиц в магнитном поле, переносе выделенных цист и ооцист на предметное стекло для последующего иммунофлуоресцентного мечения и последующей оценки микроскопированием с применением насадки «Опти-Люм» на микроскоп, где результат учитывают исходя из того, что цисты лямблий представляют собой сверкающие и флюоресцирующие яблочно-зеленым светом объекты, от округлых до овальных от 8 до 14 мкм в длину на 7-10 мкм в ширину, с ярко подсвеченными краями, ооцисты же криптоспоридий представляют собой сверкающие и флюоресцирующие яблочно-зеленым светом объекты, от овальных до сферических от 3 до 5 мкм в диаметре, с ярко подсвеченными краями. Изобретение обеспечивает повышение эффективности определения в одной постановке цист лямблий и ооцист криптоспоридий в биологическом материале - кале, в смывах с овощей и объектов окружающей среды, в почве и сокращение временных затрат на исследование одной пробы исследуемого материала адаптированным до 15 минут. 7 пр., 7 табл., 1 ил.

Изобретение относится к медицине, в частности к гинекологии и эндокринологии, и представляет собой способ диагностики степени тяжести гиперандрогении, включающий определение индекса свободного тестостерона (ИСТ) на основе глобулина, связывающего половые стероиды, и тестостерона крови, отличающийся тем, что ИСТ рассчитывают по формуле где Тобщий – уровень общего тестостерона, нмоль/л, ГСПС – уровень глобулина, связывающего половые стероиды, нмоль/л, и при величине ИСТ от 31 до 36 и наличии клинических проблем, выбранных из гирсутизма, дермопатии и нарушений менструального цикла, диагностируют легкую степень тяжести заболевания, при величине ИСТ от 36 до 100 диагностируют среднюю степень тяжести заболевания, а при величине ИСТ более 100 диагностируют тяжелую степень тяжести заболевания. Изобретение обеспечивает точность и эффективность метода диагностики степени тяжести гиперандрогении и, соответственно, снижения фертильности. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для визуализации биологических объектов. Для этого осуществляют мечение анализируемых клеточных компонент, клеток, тканей или органов флуоресцентными зондами. Зонды состоят из биологических распознающих молекул и флуоресцентных красителей, излучающих в инфракрасной области оптического спектра. После чего возбуждают флуоресценцию красителей с помощью инфракрасного излучения и регистрируют их флуоресценцию. В качестве флуоресцентных красителей применяют полупроводниковые нанокристаллы (PbS/CdS/ZnS, CuInS2/ZnS, Ag2S), флуоресцирующие в инфракрасном диапазоне спектра. При этом регистрацию флуоресцентного сигнала от полупроводниковых нанокристаллов проводят через 5-50 наносекунд после возбуждения их флуоресцентного сигнала. Изобретение позволяет визуализировать мишени внутри исследуемого биологического образца или живого организма за счет повышения контрастности получаемого изображения и повышения чувствительности детекции мишеней, маркированных флуоресцентными зондами. 11 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии и онкогематологии, и может быть использовано для контроля качества исследуемого образца при мониторинге минимальной резидуальной болезни при множественной миеломе методом проточной цитофлуориметрии аспирата костного мозга. Для этого вначале проводят лизис аспирата костного мозга и после центрифугирования оценивают клеточность полученной суспензии на наличие ядросодержащих клеток и до 3×106 ядросодержащих клеток образца из полученного осадка окрашивают моноклональными антителами, инкубируют и анализируют образец. При этом полученный осадок окрашивают с использованием шестицветной панели моноклональных антител: CD38, меченого флуоресцеин изотиоцианатом, CD138, меченого фикоэритрином, CD45, меченого аллофикоцианином-Су7, CD19, меченого перидинин-хлорофиллом-Су5.5, CD56, меченого фикоэретрином-Су7, CD27, меченого аллофикоцианином. После инкубации производят цитометрический анализ и выделяют всю популяцию плазматических клеток на основе экспрессии маркеров CD38, CD138 и CD45. Оценивают уровни экспрессии на плазматических клетках маркеров CD19, CD56, CD45 и CD27 и при наличии на плазматических клетках двух или более признаков их аномальности, в частности отсутствие экспрессии CD19, отсутствие экспрессии CD45, отсутствие экспрессии CD27 или наличие экспрессии CD56, плазматическую клетку считают резидуальной. И при выявлении таких клеток в исследуемом образце его анализируют на наличие В-клеточных предшественников по маркерам CD45 и CD38, и при их количестве менее 0,33% от всей популяции ядросодержащих клеток суспензии костного мозга оценивают качество аспирата костного мозга как неудовлетворительное, то есть образец чрезмерно разведен периферической кровью, и во избежание ложноотрицательного результата на наличие минимальной резидуальной болезни при множественной миеломе рекомендуют повторное проведение пункции костного мозга, а при наличии 0,33% и более В-клеточных предшественников оценивают качество образца костного мозга как удовлетворительное и указывают долю найденных резидуальных плазматических клеток от всех ядросодержащих клеток. Использование данного способа позволяет проводить оценку качества аспирата костного мозга в процессе проведения мониторинга минимальной резидуальной болезни при множественной миеломе, включающего его исследование на наличие популяции клеток многоцветной проточной цитофлуориметрией. 2 пр., 3 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, перинатологии и клинической иммунологии, и предназначено для прогнозирования эффективности стандартного лечения задержки роста плода. У женщин в сроке 32-36 недель беременности в периферической крови определяют относительное содержание CD27+ клеток в популяции CD19+ В-лимфоцитов. При его значении, равном 19,4% или менее, прогнозируют эффективность стандартного лечения задержки роста плода. Использование изобретения обеспечивает точность, чувствительность и специфичность прогнозирования эффективности стандартного лечения задержки роста плода, что позволяет определить тактику ведения беременных женщин и своевременно провести дополнительные лечебные мероприятия в группе женщин при данной патологии беременности. 1 табл., 3 пр.

Способ определения стадии грибовидного микоза относится к медицине, а именно к дерматовенерологии, и может быть использован для определения стадии грибовидного микоза - наиболее часто встречаемой нозологической разновидности первичных кожных лимфом. Сущность способа: у больного берут биопсию кожи из очага поражения, затем проводят иммуногистохимические исследования с использованием моноклональных антител CD3, CD4 и Ki67 путем компьютерной морфометрии. Затем усредняют данные показатели и рассчитывают суммарную удельную значимость иммунопозитивности указанных моноклональных антител по формуле: F=1,75*Х1+2,03*Х2+12,81*Х3+0,22, где: F - суммарная удельная значимость иммунопозитивности моноклональных антител CD3, CD4 и Ki67; X1 - среднее значение объемной доли позитивной окраски CD3; Х2 - среднее значение объемной доли позитивной окраски CD4; Х3 - среднее значение объемной доли позитивной окраски Ki67; 1,7; 2,03; 12,81 и 0,22 - поправочные коэффициенты. При значении F от 0,220 до 1,535 диагностируют эритематозно-пятнистую стадию, при значении F от 1,536 до 2,888 диагностируют инфильтративно-бляшечную стадию, а при значении F от 2,889 до 4,700 - опухолевую стадию грибовидного микоза. Изобретение обеспечивает повышение объективности и точности диагностирования стадии грибовидного микоза. 8 ил., 4 табл., 3 пр.

Настоящее изобретение относится к иммунологии. Предложены антитело и его фрагмент, которые связываются с фосфо-эпитопом на белке Тау, а также кодирующие их полинуклеотиды; линии клеток, продуцирующие антитела; вектор, содержащая его клетка-хозяин и способ получения антитела и его функционального фрагмента. Кроме того, предложены фармацевтический состав, способ лечения, облегчения или защиты от таупатии; способ индукции пассивной иммунной реакции у животного; способ диагностики связанного с белком тау заболевания, расстройства или состояния или предрасположенности к связанному с белком тау заболеванию; способ мониторинга минимального остаточного заболевания у пациента после лечения антителом против тау; способ прогнозирования ответа больного на лечение антителом против тау; способы обнаружения мультимеров фосфо-Тау (pTau) в образце мозга, в том числе посмертного обнаружения; диагностический набор. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в диагностике и терапии заболеваний, связанных с Тау-белком. 19 н. и 23 з.п. ф-лы, 10 ил., 15 табл., 11 пр.

Изобретение относится к области иммунологии. Предложено гуманизированное антитело, специфичное к STEAP-1, и его антигенсвязывающий фрагмент. Описаны: полинуклеотид, кодирующий антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, вектор, клетка-хозяин, способ получения анти-STEAP-1-антитела. Также раскрыты: способ визуализации опухоли, фармацевтическая композиция, лекарственное средство для лечения клеточно-пролиферативного нарушения, иммуноконъюгаты и цистеин-встроенное антитело на основе указанного антитела. Данное изобретение обеспечивает новые антитела к STEAP-1 и может найти применение в медицине. 14 н. и 16 з.п. ф-лы, 29 ил., 2 табл., 9 пр.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и касается способа прогнозирования риска развития преэклампсии тяжелого течения у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрально-Черноземного региона России. Способ включает выделение ДНК из периферической венозной крови, анализ полиморфизма гена MMР-8 в сочетании с другими предикторами развития данной патологии беременности. Прогнозируют риск развития преэклампсии тяжелого течения по уравнениям линейной дискриминантной функции: y1-14,767+2,914х1+1,439х2+0,222х3+14,345х4, y2-2,228+2,305х1-0,718х2+1,888х3-0,254х4, где х1 – генетический вариант по локусу MMР-8, х2 - наличие преэклампсии у родственников, х3 – наличие заболеваний, передающихся половым путем, х4 - наличие гинекологических патологий в анамнезе, в случае, если значение y1 больше y2. Использование способа позволяет сформировать группы риска развития преэклампсии тяжелого течения при планировании беременности, что будет способствовать более эффективному осуществлению лечебно-профилактических мероприятий по предупреждению данной патологии беременности. 3 пр., 2 ил.

Наверх