Диарилгидантоины

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новому гетероциклическому соединению [RD93], которая может быть полезно для лечения невосприимчивого к гормонам рака простаты, доброкачественной гиперплазии простаты, рака молочной железы и рака яичников. Технический результат: получено новое гетероциклическое соединение, обладающее полезными биологическими свойствами. 1 н. и 5 з.п.ф-лы, 41 ил., 11 табл., 61 пр.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к диарилгидантоинам, включающим диарилтиогидантоины, способам их синтеза и их применение для лечения резистентного к гормонам раку простаты. Настоящее изобретение обладает приоритетом US 60/756,552, 60/750351 и 60/680,835, описание которых включено в изобретение ссылкой.

Уровень техники

Рак простаты имеет наибольший коэффициент заболеваемости среди раковых заболеваний и второй среди причин смерти от раковых заболеваний среди западных мужчин. Когда рак локально ограничен, болезнь может быть вылечена хирургически или облучением. Однако 30% такого рака обнаруживают рецидив с отдаленной метастазирующей опухолью и другими запущенными заболеваниями. Запущенные заболевания лечатся кастрацией и/или назначением антиандрогенов, так называемой андроген ограничительной терапией. Кастрация снижает уровень циркулирующих андрогенов и понижает активность андрогенных рецепторов (AR). Назначение антиандрогенов блокирует AR функцию за счет конкурентного пути связывания андрогенов, понижая таким образом активность AR. Хотя эффективное вначале, указанное лечение быстро ослабевает, и рак становится резистентным к гормонам.

Недавно, был установлен сверхсинтез AR и признан причиной резистентного к гормонам рака простаты. См. Chen, C.D., Welsbie, D.S., Tran, С., Batk, S.Y., Chen, R., Vessela, R., Rosenfeld, M.G., and Sawyers, C.L., Molecular determinants of resistance to antiandrogen therapy, Nat. Med., 10: 33-39, 2004, которая включена в описание ссылкой. Сверхсинтеза AR достаточно для перехода от чувствительного к гормонам к резистентному к гормонам раку простаты, полагая, что более эффективные ингибиторы AR, чем имеющиеся медикаменты, могут замедлить развитие рака простаты. Было показано, что AR и их связывание с лигандами необходимо для роста резистентного к гормонам рака простаты, указывая, что AR все еще является целью при этой болезни. Было также показано, что сверхсинтез AR превращает антиандрогены из антагонистов в вещество, обладающее сродством к рецептору, при резистентном к гормонам раке простаты (антагонист AR ингибирует AR активность и AR вещество, обладающее сродством к рецептору, стимулирует активность AR). Данные указанной работы объясняют, почему кастрация и антиандрогены не способны предотвратить развитие рака простаты и раскрывают неизвестные свойства резистентного к гормонам рака простаты.

Бикалутамид (зарегистрированное патентованное название лекарственного средства: Casodex) наиболее часто применяемый антиандроген. Тогда как он обладает ингибирующим эффектом на AR при раке простаты, чувствительном к гормонам, он не может подавлять AR, когда рак становится резистентным к гормонам. Два недостатка существующих антиандрогенов ответственны за неудачу в предупреждении развития рака от стадии чувствительного к гормонам до резистентного к гормонам раку простаты. Один недостаток состоит в слабой антагонистической активности и другой в их высокой агонистический активности, при сверхсинтезе AR при резистентном к гормонам раке простаты. Поэтому для замедления развития и лечения смертельного резистентного к гормонам раку простаты необходимы более хорошие ингибиторы AR с более сильной антагонистической активностью и минимальной агонистической активностью.

Нестероидные антиандрогены, такие как бикалутамид, являются предпочтительными по сравнению со стероидными соединениями для рака простаты, потому что они более селективные и обладают меньшим количеством побочных эффектов. Этот класс соединений описан во многих патентах, таких как US 4,097,578, US 5,411,981, US 5,705,654, PCT WO 97/00071 и WO 00/17163 и US 2004/0009969, которые включены в описание ссылкой.

US 5,434,176 включает широкую формулу изобретения, которая охватывает большое число соединений, но ход синтеза представлен только для небольшой части указанных соединений и фармакологические данные только для двух из них и специалисту в данной области техники не просто представить другие определенные соединения.

Поскольку механизм резистентного к гормонам рака простаты не известен, отсутствуют биологические системы для тестирования указанных соединений, описанных в указанных патентах для оценки их эффективности по отношению к резистентному к гормонам раку простаты. В частности, способность сверхсинтеза AR при резистентном к гормонам раке простаты переводить ингибиторы из антагонистов в вещество, обладающее сродством к рецептору, не выяснена. Новые свойства резистентного к гормонам рака простаты представлены в PCT US 04/42221 и PCT US 05/05529, которые включены в описание ссылкой. PCT US 05/05529 представляет методологию идентификации антагонистических и агонистических характеристик соединений по отношению к андрогенным рецепторам. Однако для каждого полученного соединения необходимо затратить много времени для определения антагонистических и агонистических характеристик. То есть, отсутствует способ точного предсказания характеристик подходящих для лечения рака простаты исходя только из химической структуры соединения.

Существует необходимость в новых соединениях тиогидантоина, обладающих желаемыми фармакологическими свойствами, и синтетическом пути их получения. Поскольку активность чувствительна к небольшим структурным изменениям, одно соединение может быть эффективным в лечении рака простаты, тогда как второе соединение может не быть эффективным, даже если оно отличается от первого соединения только слегка, скажем заменой одного заместителя.

Нахождение соединений с высокой эффективностью в противодействии андрогенной активности, и которые обладают минимальной агонистической активностью, должны победить резистентный к гормонам рак простаты (HRPC) и остановить или замедлить развитие чувствительного к гормонам рака простаты (HSPC). Поэтому есть необходимость в известном уровне техники в нахождении селективных модуляторов андрогенных рецепторов, таких как нестероидные, нетоксичные и селективные к тканям модуляторы.

Раскрытие изобретения

Изобретение предлагает серии соединений с высокой антагонистической активностью с минимальной агонистической активностью по отношению AR. Указанные соединения ингибируют развитие резистентного к гормонам рака простаты.

Изобретение включает соединения с формулой

в которой Х выбран из группы, состоящей из трифторметила или йода, в которой где W выбран из группы, состоящей из О и NR5, в которой R5 выбран из группы, состоящей из Н, метила и , где D является S или O и E является N или O и G является алкилом, арилом, замещенным алкилом или замещенным арилом; или D является S или О и E-G вместе являются С1-С4 низшими алкилами,

в которой R1 и R2 вместе содержат восемь или менее атомов углерода и выбраны из группы, состоящей из алкила, замещенного алкила, включая галоалкил и вместе с углеродом, к которому они присоединены, циклоалкила или замещенной циклоалкильной группы,

в которой R3 выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, метила С1-С4 алкокси, формила, галоацетокси, трифторметила, циано, нитро, гидроксила, фенила, амино, метилкарбамоила, метоксикарбонила, ацетамидо, метансульфонамино, метансульфонила, 4-метансульфонил-1-пиперазинила, пиперазинила и С1-С6 алкила или алкенила необязательно замещенного гидроксилом, метоксикарбонила, циано, амино, амидо, нитро, карбамоила или замещенного карбамоила, включая метилкарбамоил, диметилкарбамоил и гидрокисэтилкарбамоил,

в которой R4 выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, алкила и галоалкила и

в которой R3 не является метиламинометилом или диметиаминометилом.

R5 может быть

, , или .

Соединение может иметь формулу

в которой R3 выбран из группы, состоящей из гидроксила, метилкарбамоила, метилкарбамоилпропила, метилкарбамоилэтила, метилкарбамоилметила, метилсульфонкарбамоилпропила, метиламинометила, диметиламинометила, метилсульфонилоксиметила, карбамоилметила, карбамоилэтила, карбоксиметила, метоксикарбонилметила, метансульфонила, 4-циано-3-трифторметилфенилкарбамоилпропила, карбоксипропила, 4-метансульфонил-1-пиперазинила, пиперазинила, метоксикарбонила, 3-циано-4-трифторметилфенилкарбамоила, гидроксиэтилкарбамоилэтила и гидроксиэтоксикарбонилэтила и

в которой R10 и R11 являются оба H или соответственно F и H или H и F. В некоторых осуществлениях R10 и R11 оба могут быть H или соответственно F и H. R3 может быть метилкарбамоилом.

В некоторых осуществлениях R1 и R2 являются независимо метилом или вместе с углеродом, с которым они связаны, циклоалкильной группой из 4 или 5 атомов углерода и R3 выбран из группы, состоящей из карбамоила, алкилкарбамоила, карбамоилалкила и алкилкарбамоилалкила, и R4 является F или H или R4 является 3-фтором.

В других осуществлениях R1 и R2 являются независимо метилом или вместе с атомом углерода, с которым они связаны, циклоалкильной группой с 4-5 атомами углерода, R3 выбран из группы, состоящей из пиано, гидрокси, метилкарбамоила, алкила замещенного метилкарбамоилом, алкила замещенного метилсульфонкарбамоилом, метиламинометила, диметиламинометила, метилсульфонилоксиметила, метоксикарбонила, ацетамидо, метансульфонамидо, алкила замещенного карбамоилом, карбоксиметила, метоксикарбонилметила, метансульфонила, алкила замещенного 4-циано-3-трифторметилфенилкарбамоилом, алкила замещенного карбокси, 4-(1,1-диметилэтокси)карбонил)-1-пиперазинила, 4-метансульфонил-1-пиперазинила, пиперазинила, алкила замещенного гидроксиэтилкарбамоилом, алкила замещенного гидроксиэтоксикарбонилом и 3-циано-4-трифторметилфенилкарбамоила и R4 является F.

Соединение изобретения может иметь формулу

в которой R3 выбран из группы, состоящей из метилкарбонила, метоксикарбонила, ацетамидо и метансульфонамидо и R4 выбран из группы, состоящей из F и H. Соединение изобретения может иметь формулу

в которой R4 выбран из группы, состоящей из F и Н.

В воплощениях изобретения, в которых R1 и R2 вместе с углеродом, с которым они связаны, являются

, или

Соединения изобретения могут быть соединениями, перечисленными в ряду 1, 2, 3 и/или 4 далее. Отдельные соединения изобретения включают

,

,

,

,

.

Изобретение также предлагает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество соединения в соответствии с любым из предыдущих соединений или фармацевтически приемлемую их соль и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

Изобретение включает способ лечения гиперпролиферативного нарушения, включающее назначение указанной фармацевтической композиции индивиду, нуждающемуся в указанном лечении, тем самым осуществляя лечение гиперпролиферативного нарушения. Гиперпролиферативное нарушение может быть резистентным к гормонам раком простаты. Дозировка может составлять около 0,001-100 мг на кг веса тела в день, около 0,01-100 мг на кг веса тела в день, около 0,1 - 10 мг на кг веса тела в день, около 10 мг на кг веса тела в день или около 1 мг на кг веса тела в день.

Соединение может вводиться внутривенной инъекцией, инъекцией в ткани, интраперитонеально, орально или через нос. Композиция может иметь форму, выбранную из группы, состоящей из раствора, дисперсии, суспензии, порошка, капсулы, таблетки, драже, медленно рассасывающейся капсулы, таблетки, драже.

Назначаемое соединение может быть выбрано из группы, состоящей из RD162', RD162ʺ, RD169 или RD 170, или их фармацевтически приемлемых солей. Назначаемое соединение может быть RD162, или его фармацевтически приемлемой солью.

Изобретение предлагает способ синтеза диарильных соединений формулы:

включающий смешивание соединения I

с соединением II

в первом полярном растворителе для образования смеси, нагревание смеси, добавление второго полярного растворителя, того же самого или отличного от первого полярного растворителя, и водного раствора кислоты к смеси, кипячение смеси с обратным холодильником, охлаждение смеси и смешивание с водой и выделение диарильного соединения из смеси, в котором R51 содержит алкильную цепь с 1-4 атомами углерода, R52 выбран из группы, состоящей из циано, гидрокси, метилкарбамоила, алкила замещенного метилкарбамоилом, алкила замещенного метилсульфонкарбамоилом, метиламинометила, диметиламинометила, метилсульфонилоксиметила, метоксикарбонила, 3-циано-4-трифторметилфенилкарбамоила, алкила замещенного карбамоилом, карбоксиметила, метоксикарбонилметила, метансульфонила, алкила замещенного трифторметилфенилкарбамоилом, карбокси-замещенного алкила, 4-метансульфонил-1-пиперазинила, пиперазинила, алкила замещенного гидроксиэтилкарбамоилом, алкила замещенного гидроксиэтоксикарбонилом и R53 выбран из группы, состоящей из F и Н.

R51 может содержать алкильную цепь с 1-2 атомами углерода, R52 может быть выбран из группы, состоящей из карбамоила и метилкарбамоила, и R53 может быть F.

Изобретение предлагает способы синтеза соединения формулы:

включающие смешивание 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрила и N-метил-4-(1-цианоциклобутиламино)-2-фторбензамида в диметилформамиде для образования первой смеси, нагревание первой смеси для образования второй смеси, добавление спирта и кислоты ко второй смеси для образования третьей смеси, кипячение с обратным холодильником для образования четвертой смеси, охлаждение четвертой смеси, смешивание четвертой смеси с водой и экстракцию органического слоя; выделение соединения из органического слоя.

Аналогичным образом изобретение предлагает способ синтеза RD162', включающий смешивание N-метил-2-фтор-4-(1,1-диметил-цианометил)-аминобензамида и 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрила в ДМФ и нагревание для образования первой смеси и операции, как описано выше.

Изобретение также предлагает способ синтеза соединения RD169, включающий смешивание N,N-диетил-4-[4-(1-цианоцикло-бутиламино)ренил]-бутанамида, 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрила и DMF и нагревания с обратным холодильником до образования первой смеси и операции с нею, как описано выше.

Изобретение также предлагает способ синтеза RD162ʺ, включающий смешивание N-метил-2-фтор-4-(1-цианоциклопентил)-аминобензамида и 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрила в ДМФ и нагревание при кипячении с обратным холодильником для образования первой смеси и операции, как описано выше.

Изобретение также предлагает способ синтеза RD170, включающий смешивание ДМСО, дихлорметана и оксалилхлорида для образования первой смеси, добавление 4-(4-(7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3,4]октан-5-ил)фенил)бутанамида к первой смеси для образования второй смеси; добавление триэтиламина ко второй смеси для образования третьей смеси; подогрев третьей смеси и охлаждение водным NH₄Cl для образования четвертой смеси; экстракцию органического слоя из четвертой смеси; и выделение соединения из органического слоя.

Дальнейшие соединения в соответствии с изобретением имеют формулу

в которой R5 является CN или NO2 или SO2R11, в которой R6 является CF3, алкилом, алкенилом, замещенным алкенилом, алкинилом, замещенным алкинилом, галогенированным алкилом, галогенированным алкенилом, галогенированным алкинилом, галогеном, в которой А является серой (S) или кислородом (О), в которой В является О или S или NR8, в которой R8, выбрана из группы, состоящей из Н, метила, арила, замещенного арила, алкила, замещенного алкила, алкенила, замещенного алкенила, алкинила, замещенного алкинила, арилалкила, арилалкенила, арилалкинила, ароматическим или неароматическим гетероциклом, замещенным ароматическим или неароматическим гетероциклом, циклоалкилом, замещенным циклоалкилом, SO2R11, NH11R12, (CO)OR11, (CO)NR11R12, (CO)R11, (CS)R11, (CS)NR11R12, (CS)OR11,

, , , и

в которой D является S или О и Е является N или О и G является алкилом, арилом, замещенным арилом; или D является S или О E-G вместе являются С1-С4 низшими алкилами,

в которой R1 и R2 независимо являются алкилом, галоалкилом, водородом, арилом, замещенным алкилом, алкенилом, замещенным алкенилом, алкинилом замещенным алкинилом, галогенированным алкенилом, галогенированным алкинилом, арилалкилом, ароматическим или неароматическим гетероциклом, замещенным ароматическим или неароматическим гетероциклом, циклоалкилом, замещенным циклоалкилом или R1 и R2 связаны с образованием цикла, который может быть гетероциклическим, замещенным гетероциклическим, циклоалкилом, замещенным циклоалкилом,

, или в которой Х является углеродом или азотом и может быть в любом положении кольца и в которой R3, R4 и R7 независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, метила, метокси, формила, галоацетокси, трифторметил, циано, нитро, гидроксила, фенила, амино, метилкарбамоила, алкила замещенного метилкарбамоилом, алкила замещенного диметилкарбамоилом, метоксикабонила, ацетамидо, метансульфонамино, алкила замещенного карбамоилом, метансульфонила, 4-метансульфонил-1-пиперазинила, пиперазинила, алкила замещенного гидроксиэтилкарбамоилом, алкила замещенного гидроксилом, алкенила замещенного гидроксилом, алкенила замещенного карбамоилом, алкила замещенного метоксикарбонилом, циано-замещенного алкила, , арила, замещенного арила, замещенного алкила, алкенила, замещенного алкенила, алкинила, замещенного алкинила, галогенированного алкенила, галогенированного алкинила, SO2R11, NH11R12, NR12(CO)OR11, NH(CO)NR11R12, NR12(CO)R11, O(CO)OR11, O(CO)OR11, O(CS)R11, NR12(CS)R11, NH(CS)NR11R12, NR12(CS)OR11, арилалкила, арилалкенила, арилалкинила, ароматического или неароматического гетероцикла, замещенного ароматического или неароматического гетероцикла, циклоалкила, замещенного циклоалкила, галоалкила, алкила замещенного метилсульфонкабамоилом, метиламинометила, диметиаминометила, метилсульфониоксиметила, метоксикарбонила, ацетамидо, метаслуьфонамидо, алкила, замещенного карбамоилом, карбоксиметила, метоксикарбонилметила, метансульфонила, алкила замещенного 4-циано-3-трифторметилфенилкарбамоилом, карбокси-замещенного алкила, 4-(1,1-диметилэтокси)карбонил)-1-пиперазинила, алкила замещенного гидроксиэтилкрбамоилом, алкила замещенного гидроксиэтоксикарбонилом, 3-циано-4-трифторметилфенилкарбамоила,

где R11 и R12 являются независимо водородом, арилом, аралкилом, замещенным аралкилом, алкилом, замещенным алкилом, алкенилом, замещенным алкенилом, алкинилом, замещенным алкинилом, галогенированным алкилом, галогенированным алкенилом, галогенированным алкинилом, арилалкилом, арилалкенилом, арилалкининлом, ароматическим или неароматическим гетероциклом, замещенным ароматическим или неароматическим гетероциклом, циклоалкилом или замещенным циклоалкилом, или R11 и R12 могут быть связаны с образованием цикла, который может быть гетероциклическим ароматическим или неароматическим, замещенным гетероциклическим ароматическим или неароматическим, циклоалкилом или замещенным циклоалкилом.

Такие соединения обладают существенной антагонистической активностью по отношению к рецепторам андрогенов и не обладают существенной агонистической активность по отношению к клеткам резистентного к гормонам рака простаты.

Изобретение предлагает способ, включающий создание, по меньшей мере, одного указанного соединения, измерение ингибирования соединением активности андрогенового рецептора и определение, если ингибирование выше заранее заданного уровня, измерение стимулирования соединением активности андрогенового рецептора раковых клеток резистентного к гормонам рака и определение, если стимуляция ниже второго заранее заданного уровня и выбор соединения, если ингибирование выше заранее заданного уровня и стимуляция ниже второго заранее заданного уровня. Заранее заданный уровень может уровнем бикалутамида. Стадия измерения ингибирования может включать измерение подавляющей концентрации (IC50) в AR ответе системы репортера или секреторная система специфических антигенов простаты. Стадия измерения стимулирования может включать измерение кратности индукции увеличением концентрации в AR ответе системе репортера или секреторной системе специфических антигенов простаты. Способ измерения ингибирования и/или стимулирования может включать измерение воздействия соединения на рост опухоли в животном.

Краткое описание чертежей

Следующие фигуры представляют результаты фармакологического испытания некоторых соединений.

Фиг.1 является графиком, представляющим наличие у бикалутамида агонистического эффекта на LNCaP-AR. Агонистическая активность бикалутамида в сверхсинтезе AR при резистентном к гормонам раке простаты. LNCaP клетки с сверхсинтезом AR обработаны возрастающими концентрациями ДМСО в качестве носителя или бикалутамидом в отсутствии R1881. Измерены активности AR ответа репортера,

Фиг.2 является графиком, представляющим анализ антагонистического действия бикалутамида на LNCaP-AR. Агонистическая активность бикалутамида при чувствительному к гормонам раке простаты. LNCaP клетки обработаны возрастающими концентрациями ДМСО в качестве носителя или бикалутамидом в отсутствии R1881. Измерены активности AR ответа репортера.

Фиг.3 является графиком, представляющим воздействие соединений на LNCaP-AR.

Фиг.4 является графиком, представляющим воздействие соединений на LNCaP-AR.

Фиг.5 является графиком, представляющим эффект ингибирования на LNCaP-AR.

На фиг.6-10, примером 5-3b является RD7 и пример 7-3b является RD37.

Фиг.6. Ингибирование роста клеток сверхэкспрессирующих AR LNCaP. Клетки LNCaP обедненные с клетками сверхэкспрессирующими AR обработаны возрастающими концентрациями ДМСО в качестве носителя или тестируемых веществ в присутствии 100 пМ R1881. После 4 дней культивирования рост клеток измерен MTS анализом.

Фиг.7. Эффект ингибирования на рост сверхэкспрессирующих AR LNCaP модели ксенотрансплантата. Мыши с адаптивной LN-AR ксенотрансплантантной опухолью рандомизированы и обработаны указанными соединениями орально раз в день. Размер опухоли определена калибром. (А) мыши получали 1 мг на кг бикалутамида, пример 7-3b, или носитель в течение 44 дней. (В) мыши получали 0,1, 1 или 10 мг на кг примера 7-3b в течение 44 дней.

Фиг.8. Эффект ингибирования PSA экспрессии сверхэкспрессирующих AR LNCaP модели ксенотрансплантата. Мыши подвержены действию носителя, 0,1, 1 или 10 мг на кг примера, 7-3b в течение 44 дней орально раз в день. Опухоли извлечены из мышей после 44 дней обработки, лизат опухоли экстрагинован, и уровень PSA в лизате ткани определен ELISA.

Фиг.9. Эффект ингибирования на рост и PSA резистентных к гормонам AR LNCaP модели ксенотрансплантата. Мыши с установленной опухолью раздомизированы и подвержены действию 1 мг на кг бикалутамида, примера 7-3b или носителя в течение 17 дней орально раз в день. (А), размер опухоли определен калибром. (В), опухоли извлечены из мышей после 17 дней обработки, лизат опухоли экстрагинован, и уровень PSA в лизате ткани определен ELISA.

Фиг.10. Эффект ингибирования на рост раковых клеток чувствительного к гормонам рака простаты. Обедненные по андрогену LNCaP клетки, обработанные возрастающими концентрациями ДМСО или тестируемых веществ в присутствии 1 рМ R1881. После 4 дней культивирования рост клеток измерен MTS анализом.

Фиг.11 является графиком размера опухоли. Сверхэкспрессирующие AR LNCaP клетки введены инъекцией в пах кастрированным SCID мышам подкожно. По достижению опухолью 100 кубических мм они рандомизируются на пять групп. В каждой группе по девять животных. По достижению у них опухоли этого размера, они получали либо носитель, бикалутамид или RD162 по 10 или 50 мг/кг ежедневно. Размер опухолей определяли по трем измерениям, ширина, длина и глубина, с применением штангенциркуля.

Фиг.12 представляет результаты по размерам опухоли. На 18 день животных снимали на CCD видеокамеру, через 3 часа после введения последней дозы. ROI опухоли представлена по измерению активности люциферазы в фотон/секунду. Правая панель представляет измерения ROI.

Фиг.13 является графиком, представляющим фармакинетические кривые для RD162 при внутривенном (верхняя кривая) и оральном введении (нижняя кривая).

Фиг.14 является графиком, представляющим поглощение PSA, измеренное для LN-AR клеток после введение различных доз некоторых соединений.

Фиг.15 представляет таблицу, показывающую некоторые характеристики соединений. Фиг.15 также представляет график, показывающий фармакинетические характеристики некоторых соединений в виде концентрации соединений в сыворотке, как функцию времени.

Фиг.16 является схемой, представляющей вес простаты после применения различных соединений. 10, 25 или 50 мг соединения на килограмм веса тела вводили ежедневно, как указано на легенде линейки. Соединения вводили здоровым FVB мышам. После обработки соединениями в течение 14 дней, вес мочеполового тракта определяли удалением и взвешиванием семенных пузырьков, простаты, мочевого пузыря. Трем мышам вводили данное соединение для получения данных, представленных линейкой в схеме. Группа мышей не подвергалась действию соединений: данные представлены на линейке, помеченной "необработанные". Другой группе мышей вводили только раствор носителя: данные представлены на линейке, помеченной "носитель".

Фиг.17 является графиком, представляющим анализ PSA, выполненный по описанию опыта, приведенного на фиг.6.

Фиг.18 является графиком, представляющим эффект различных дозовых режимов на объем опухоли.

Фиг.19 является графиком, представляющим скорость эмиссии фотонов, вызванного активностью люциферазы на 17 день по отношению к скорости на 0 день, после действия RD162 при дозах 0,1, 1 и 10 мг на килограмм веса тела в день и без действия RD162.

Фиг.20 представляет результаты эксперимента, в котором SCID мышам инъекцией вводили LN-AR (HR) линию клеток для индуцирования роста опухоли. Одна группа мышей подвергалась действию соединения RD162 при дозе 10 мг на килограмм веса тела в день; другая группа мышей подвергалась действию только раствора носителя. (А) Относительный объем опухоли как функция времени, представлен для каждой группы мышей. (В) Изображения эмиссии фотонов, связанной с активностью люциферазы, для каждой группы мышей на 31 день, показаны цветными контурами. (С) Скорость эмиссии фотонов, связанной с активностью люциферазы, показана при определенном времени для каждой группы мышей.

Фиг.21 является графиком, представляющим поглощение PSA, связанное с LN-AR клетками, под действием различных концентраций RD162, RD162', RD162ʺ и RD170, и раствора носителя.

Фиг.22 является графиком, представляющим поглощение PSA, связанное с LN-CaP клетками, под действием различных концентраций RD37, RD131, RD162, бикалутамида и ДМСО.

Фиг.23 представляет результаты эксперимента с немутантного типа нетрансгенными мышами (WT), кастрированными по люциферазе трансгенными мышами (Cast) и некастрированными по люциферазе трансгенными мышами (Intact). Данные представлены для кастрированных по люциферазе трансгенных мышей получавших драже с тестостероном, что давало 12,5 мг на килограмм веса тела с 90 дневным перерывом (T/Cast) и данные представлены для некастрированных по люциферазе трансгенных мышей получавших драже с тестостероном, что давало 12,5 мг на килограмм веса тела с 90 дневным перерывом (Intact+T). Данные представлены для кастрированных по люциферазе трансгенных мышей получавших драже с тестостероном и с бикалутамидом (BIC+T/Cast) или RD162 (RD162+T/Cast) по 10 мг на килограмм веса тела в день. (А) Вес мочеполового тракта на 14 день. (В) Скорость эмиссии фотонов на 14 день. Во всех случаях не вызвано состояние болезни резистентное к гормонам.

Фиг.24 является графиком, представляющим активность люциферазы линии клеток LIAR, под воздействием доз различных соединений, вводимых до концентраций 125-1000 нмоль.

Фиг.25 является графиком, представляющим активность люциферазы линии клеток LN/AR, для различных соединений, вводимых до концентраций 1,25-10 μмоль.

Фиг.26 является графиком, представляющим активность люциферазы линии клеток 4AR, для различных соединений, вводимых до концентраций 1,25-10 μмоль.

Фиг.27 является графиком уровней PSA для 1AR линии клеток для различных соединений, вводимых до концентраций 1,25-10 μмоль.

Фиг.28 является графиком уровней PSA для LN/AR линии клеток для различных соединений, вводимых до концентраций 125-1000 нмоль.

Фиг.28 является графиком активности люциферазы для различных соединений, вводимых до концентраций 125-1000 нмоль.

Раскрытие изобретения

Отдельные воплощения изобретения описаны ниже. В раскрываемых осуществлениях применена конкретная терминология для ясности. Однако, изобретение не ограничено выбранной этими воплощениями терминологией. Специалист в данной области техники признает, что могут быть применены другие эквивалентные части и измененные способы без выхода за объем притязаний изобретения. Все ссылки, цитированные в описании, включены в качестве ссылки, так, как если бы каждая из них была включена индивидуально в полном объеме.

Синтез диарилгидантоинов

Изобретение предусматривает синтез диарилтиогидантоинов с формулой

с R71, включающим алкильную цепь с 1-4 атомами углерода. Например, R72 может быть карбамоилом, т.е. -(CO)NH₂, или метилкарбамоилом, т.е. -(СО)NHCH₃. Амидная группа, связанная атомом углерода карбонила с другой структурой, означает карбамоильный заместитель. Например, R73 может быть атомом фтора или водорода. То есть, атом фтора может быть присоединен к любому из углеродов правого арильного кольца, который не связан с заместителем R72 или атомом азота. Альтернативно, атом фтора не может быть связан с углеродом правого арильного кольца, который не связан с заместителем R72 или атомом азота. Например, атом водорода может быть присоединен к любому из углеродов правого арильного кольца, который не связан с заместителем R72 или атомом азота.

Например, как будет представлено далее (см., например, фиг.3, 5, 11-13) соединения с формулой

демонстрируют неожиданно высокую антагонистическую активность с минимальной агонистической активностью по отношению к сверхсинтезированным AR при резистентном к гормонам раке простаты.

Список некоторых соединений в соответствии с настоящим изобретением представлен в таблицах 5-11. Соединения сгруппированы в ряды, с соединениями в рядах 1-3, как ожидается, превосходящими бикалутамид в лечении рака простаты, соединения ряда 4 ожидается сравнимы по эффективности с бикалутамидом и соединения рядов 5 и 6 хуже бикалутамида в лечении рака простаты. Более детальное описание протокола, примененного для ранжирования соединений в ряды, представлено ниже.

Определения

Примененный в описании термин "алкил" означает разветвленную или неразветвленную углеводородную цепь с около 1-8 углеродами, такую как метил, этил, n-пропил, втор-бутил, изо-бутил, трет-бутил, 2-метилпентил, гексил, изогексил, гептил, 4,4-диметил пентил, октил, 2,2,4-триметилпентил и тому подобное. "Замещенный алкил" включает алкильную группу, необязательно замещенную одной или более функциональными группами, которые могут быть присоединены к указанным цепям, такие как гидроксил, бром, фтор, хлор, йод, меркапто или тио, циано, алкилтио, гетероциклил, арил, гетероарил, карбоксил, карбалкоил, алкил, алкенил, нитро, амино, алкоксил, амидо и тому подобное для образования алкильной группы, такой как трифторметил, 3-гидроксигексил, 2-карбоксипропил, 2-фторэтил, карбоксиметил, цианобутил и тому подобное.

Если не оговорено обратное, термин, "циклоалкил", примененный в описании отдельно или как часть другой группы, включает насыщенные или частично ненасыщенные (содержащие 1 или более двойных связей) циклические углеводородные группы, содержащие в целом 3-20 углеродов, образующих кольцо, предпочтительно 3-10 углеродов, образующих кольцо, которые могут сопрягаться в 1 или 2 ароматических кольца, как описано для арила, который включает циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, циклодецил и циклододецил, циклогексенил. "Замещенный циклоалкил" включает циклоалкильную группу, необязательно замещенную 1 или более заместителями, таким как галоген, алкил, алкокси, гидрокси, арил, арилокси, арилалкил, циклоалкил, алкиламидо, алканоиламино, оксо, ацил, арилкарбониламино, амино, нитро, циано, тиол и/или алкилтио и/или заместителем, включенным в определение "замещенный алкил". Например,

и тому подобное.

Если не оговорено обратное, термин, "алкенил", как примененный в описании отдельно или как часть другой группы относится к радикалам с прямой или разветвленной цепью с 2-20 углеродами, предпочтительно с 2-12 углеродами и более предпочтительно 2-8 углеродами в нормальной цепи, которая включает одну или более двойных связей в нормальной цепи, такими как винил, 2-пропенил, 3-бутенил, 2-бутенил, 4-пентенил, 3-пентенил, 2-гексенил, 3-гексенил, 2-гептенил, 4-гептенил, 3-октенил, 3-ноненил, 4-деценил, 3-ундеценил, 4-додеценил, 4,8,12-тетрадеценил и тому подобное. "Замещенный алкенил" включает алкенильную группу, необязательно замещенную одним или более заместителями, такими как заместители, включенные выше в определение "замещенный алкил" и "замещенный циклоалкил".

Если не оговорено обратное, термин "алкинил", как примененный в описании отдельно или как часть другой группы относится к радикалам с прямой или разветвленной цепью с 2-20 углеродами, предпочтительно с 2-12 углеродами и более предпочтительно 2-8 углеродами в нормальной цепи, которая включает одну или более тройных связей в нормальной цепи, такими как 2-пропинил, 3-бутинил, 2-бутинил, 4-пентинил, 3-пенитил, 2-гексинил, 3-гексинил, 2-гептинил, 4-гептинил, 3-окинил, 3-нонинил, 4-децинил, 3-ундецинил, 4-додецинил и тому подобное. "Замещенный алкинил" включает алкинильную группу, необязательно замещенную одним или более заместителей, такими как включенными выше в определение "замещенный алкил" и "замещенный циклоалкил".

Примененный в описании термин "арилалкил", "арилалкенил", и "арилалкинил" отдельно или как часть другой группы, относится к алкильной, алкенильной и алкинильной группам, описанными выше, с арильным заместителем. Характерные примеры арилалкила включают, но не ограничены, бензилом, 2-фенилэтилом, 3-фенилпропилом, фенилэтилом, бензгидрилом и нафтилметилом и тому подобное. "Замещенный арилалкил" включает арилалкильные группы, в которых арильная часть необязательно замещена одним или более заместителями, такими, как заместители, включенные выше в определение "замещенный алкил" и "замещенный циклоалкил".

Примененный в описании термин "галоген" или "гало" отдельно или как часть другой группы относится к хлору, брому, фтору и йоду.

Примененные в описании термины "галогенированный алкил", "галогенированный алкенил" или "галогенированный алкинил" отдельно или как часть другой группы относится к "алкилу", " алкенилу" и "алкинилу", которые замещены одним или более атомами, выбранными из фтора, хлора, брома и йода.

Если не оговорено обратное, термин "арил" или "Ar", примененный в описании отдельно или как часть другой группы, относится к моноциклической или полициклической ароматическим группам, содержащим 6-10 углеродов части кольца (например, фенил или нафтил, включая 1-нафтил и 2-нафтил) и может необязательно включать одно или более дополнительных колец, конденсированных в карбоциклическое кольцо или гетероциклическое кольцо (например, арильные, циклоалкильные, гетероарильные или циклогетероалкильные кольца).

"Замещенный арил" включает арильную группу, необязательно замещенную одной или более функциональными группами, например, гало, галоалкил, алкил, галоалкил, алкокси, галоалкокси, алкенил, трифторметил, трифторметокси, алкинил, циклоалкилалкил, циклогетероалкил, циклогетероалкилалкил, арил, гетероарил, арилалкил, арилокси, арилоксиалкил, арилалкокси, алкоксикарбонил, арилкарбонил, арилалкенил, аминокарбониларил, арилтио, арилсульфинил, арилазо, гетероарилалкил, гетероарилалкенил, гетероарилгетероарил, гетероарилокси, гидрокси, нитро, циано, амино, замещенный амино, в котором амино включает 1 или 2 заместителя (которые являются алкилом, арилом или любым другим арильным соединением, упомянутым в определениях), тиол, алкилтио, арилтио, гетероарилтио, арилтиоалкил, алкоксиарилтио, алкилкарбонил, арилкарбонил, алкиламинокарбонил, ариламинокарбонил, алкоксикарбонил, аминокарбонил, алкилкарбонилокси, арилкарбонилокси, алкилкарбониламино, арилкарбониламино, арилсульфинил, арилсульфинидалкил, арилсульфониламино или арилсульфонаминокарбонил и/или любой алкильный заместитель, представленный в описании.

Если не оговорено обратное, термин "гетероциклический" или "гетероцикл", применяемый в описании, представляет незамещенный или замещенный устойчивую 5-или 10-членную моноциклическую кольцевую систему, которая может быть насыщенной или ненасыщенной и которая состоит из атомов углерода и из одного или четырех гетероатомов, выбранных из N, О или S, и в которой гетероатомы азота и серы необязательно могут быть окислены, и гетероатомы азота могут быть необязательно кватернизованы. Гетероциклическое кольцо может быть присоединено любым гетероатомом или атомом углерода, что приводит к созданию устойчивой структуры. Примеры таких гетероциклических групп включают, но не ограничены, пиперидинилом, пиперазинилом, оксопиперазинилом, оксопиперидинилом, оксопирролидинилом, оксоазепинилом, азепинилом, пирролилом, пирролидинилом, фуранилом, тиенилом, пиразолилом, пиразолидинилом, имидазолилом, имидазолинилом, пиридилом, пиразинилом, пиримидинилом, пиридазиналом, оксазолилом, оксазолидинилом, изооксазолилом, изоксазолидинилом, морфолинилом, тиазолилом, тиазолидинилом, изотизолилом, тиадиазолилом, тетрагидропиранилом, тиаморфолинилом, тиаморфолинил сульфоксидом, тиаморфолинил сульфоном и оксадиазолилом. Термин "гетероциклический ароматический", примененный в описании отдельно или как часть другой группы, относится к 5- или 7-членному ароматическому кольцу, которое включает 1, 2, 3 или 4 гетеро атомов, таким как азот, кислород или сера и такие кольца конденсированные с арильным, циклоалкильным, гетероарильным или гетероциклоалкильным кольцом (например, бензотиофенил, индолил) и включает возможные N-окисды. "Замещенный гетероарил" включает гетероарильную группу, необязательно замещенную 1-4 заместителями, такими как заместители, включенные выше в определение "замещенный алкил" и "замещенный циклоалкил". Примеры гетероарильных групп включают следующие:

и тому подобное.

Пример 1

4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрил, (1а)

4-Амино-2-трифторметилбензонитрила (2,23 г, 12 ммолей) добавляют порциями в течение 15 минут в хорошо перемешиваемую гетерогенную смесь тиофосгена (1 мл, 13 ммолей) в воде (22 мл) при комнатной температуре. Перемешивание продолжают дополнительно 1 ч. Реакционную среду экстрагируют хлороформом (3×15 мл). Объединенные органические фазы сушат над MgSO₄ и выпаривают досуха при пониженном давлении получая желаемый продукт, 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрил (1а), в виде коричневатого осадка и примененного на следующей стадии (2,72 г, 11,9 ммоль, 99%).

Пример 2

2-1). трет-бутиловый эфир (4-аминофенил)карбаминовой кислоты, (2а)

Водный раствор карбоната калия (1,52 г, 11 ммолей в 5 мл воды) добавляют к раствору 1,4-диаминобензола (3,24 г, 30 ммолей) в ТГФ (30 мл) и ДМФ (10 мл). К этой смеси добавляют ди-трет-бутилпирокарбонат Boc₂O (2,18 г, 10 ммолей), по каплям в течение 0,5 ч. Реакционную смесь перемешивают дополнительно 4 ч при комнатной температуре. Затем смесь выливают в холодную воду (40 мл) и экстрагируют хлороформом (3×50 мл). Объединенную органическую фазу сушат над MgSO₄ и концентрируют получая коричневый остаток, который подвергают флеш хроматографии (дихлорэтан/ацетон, 4:1) для получения трет-бутилового эфира (4-аминофенил)карбаминовой кислоты, (2а) в виде желтого твердого вещества (1,98 г, 9,5 ммолей, 95%) (выход в пересчете на Вос₂O).

2-2). трет-бутиловый эфир {4-[(1-циано-1-метилэтил)амино]фенил}карбаминовой кислоты, 2b

Смесь 2а (0,83 г, 4 ммоля), ацетон циангидрина (4 мл) и MgSO₄ (2 г) нагревают до 80°C и перемешивают 2,5 ч. После охлаждения до комнатной температуры, соединение 2b кристаллизуют из воды (30 мл). Твердое вещество отфильтровывают и сушат, получая трет-бутиловый эфир {4-[(1-циано-1-метилэтил)амино]фенил}карбаминовой кислоты, 2b (1,08 г, 3,9 ммоля, 98%).

2-3). трет-бутиловый эфир {4-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-4-имино-5,5-диметил-2-тиоксо-имидазолидин-1-ил]фенил}карбаминовой кислоты, (2с)

Триэтиламин (0,202 г, 2 ммоля) добавляют к раствору 1а (0,456 г, 2 ммоля) и 2b (0,57 г, 2 ммоля) в сухом ТГФ (5 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 15 ч и затем концентрируют, получая темный остаток, который подвергают флеш хроматографии (этиловый эфир/ацетон, 97:3) для получения трет-бутилового эфира {4-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-4-имино-5,5-диметил-2-тиоксо-имидазолидин-1-ил]фенил}карбаминовой кислоты, (2 с) (0,15 г, 0,3 ммоля, 15%).

2-4). 4-[3-(4-аминофенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 2d, [RD9]

Смесь 2с (0,15 г, 0,3 ммоля) в HCl aq, 3N (1 мл) и метанола (4 мл) нагревают с обратным холодильником 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (5 мл) и экстрагируют дихлорметаном (8 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан/ацетон, 9:1) для получения 4-[3-(4-аминофенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 2d, [RD9] (0,118 г, 0,29 ммоля, 97%) в виде желтого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 MHz, CDCl₃) δ 1,54 (s, 6H), 6,73-6,75 (m, 2H), 7,00-7,03 (m, 2H), 8,02 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 8,16 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,20 (d, J=8,2 Hz, 1H); ¹³С ЯМР (100 MHz, CDCl₃) 5 22,7, 66,2, 109,1, 114,3, 114,9, 120,4, 122,0 (q, J=272,5 Hz), 127,0 (q, J=4,9 Hz), 130,4, 132,5 (q, J=33,0 Hz), 133,4, 135,6, 138,5, 149,2, 175,3, 180,4.

2-5). 4-[3-(4-азидофенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 2е, [RD10]

Водный раствор серной кислоты (25% масс. 1 мл) добавляют к раствору 2d (0,10 г, 0,25 ммоля) в ацетоне (1 мл) при -5°C. Водный раствор NaNO₂ (0,024 г, 0,35 ммоля, в 0,5 мл воды) медленно добавляют к вышеуказанной смеси в течение 0,1 ч. Реакционную смесь перемешивают при -5°C дополнительно 1 ч затем добавляют по каплям водный раствор NaN₃ (0,02 г, 0,3 ммоля в 0,3 мл воды). После завершения добавления реакционную среду нагревают до комнатной температуры и дополнительно перемешивают 3 ч. Продукт экстрагируют дихлорметаном (3×5 мл). Объединенный органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 4-[3-(4-азидофенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 2е, [RD10] (0,08 г, 0,18 ммолей, 72%) в виде желтоватого твердого соединения.

¹Н ЯМР (400 MHz, CDCl₃) δ 1,54 (s, 6H), 7,17-7,20 (m, 2H), 7,27-7,30 (m, 2H), 7,84 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,96 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,3 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (100 MHz, CDCl₃) δ 23,7, 66,4. 110,1, 114,8, 120,4, 122,1 (q, J=272,5 Hz), 127,0 (q, J=4,7 Hz), 131,1, 131,5, 132,3, 133,3 (q, J=33,0 Hz), 135,3, 137,1, 141,7, 174,8, 180,1, MS для C₁₉H₁₃F₃N₆OS, расчитано 430,4, найдено 430,1.

Пример 3

3-1). 2-(4-гидроксифениламино)-2-метилпропаннитрил, 3а

Смесь 4-аминофенола (1,09 г, 10 ммолей), ацетон циангидрина (10 мл) и MgSO₄ (2 г) нагревают до 80°C и перемешивают 4 ч. После концентрирования среды в вакууме, соединение 3а кристаллизуют из воды (20 мл). Твердое вещество отфильтровывают и сушат для получения 2-(4-гидроксифениламино)-2-метилпропаннитрила, 3а (1,69 г, 9,6 ммолей, 96%).

3-2). 4-[3-(4-гидроксифенил)-5-имино-4,4-диметил-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 3b

Триэтиламин (0,101 г, 1 ммоль) добавляют к раствору 1а (0,456 г, 2 ммоля) и 3а (0,352 г, 2 ммоля) в сухом ТГФ (5 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C 48 ч и затем концентрируют для получения темного остатка, который подвергают флеш хроматографии (дихлорметан/ацетон, 85:15) для получения 4-[3-(4-гидроксифенил)-5-имино-4,4-диметил-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрила, 3b (0,274 г, 0,68 ммоля, 34%).

3-3). 4-[3-(4-гидроксифенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 3с, [RD8]

Смесь 3b (0,202 г, 0,5 ммоля) в HCl aq., 2N (2 мл) и метанола (5 мл) нагревают с обратным холодильником 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (10 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан/ацетон, 9:1) для получения 4-[3-(4-гидроксифенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиооксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 3с, [RD8] (0,198 г, 0,49 ммоля, 98%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,57 (s, 6H), 6,26 (s, ОН), 6,90-6,93 (m, 2H), 7,11-7,14 (m, 2H), 7,84 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,95-7,98 (m, 2H); ¹³С ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 23,6, 66,5, 109,9, 114,9, 115,7, 116,8, 121,9 (q, J=272,7 Hz), 127,2 (q, J=4,7 Hz), 130,6, 132,3, 133,5 (q, J=33,2 Hz), 135,3, 137,2, 157,0, 175,3, 180,2.

Пример 4

4-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]фениловый эфир хлоруксусной кислоты, 4а, [RD13]

Хлорид хлорацетила (0,045 г, 0,4 ммоля) добавляют к смеси 3с (0,101 г, 0,25 ммоля) и триэтиламина (0,041 г, 0,41 ммоля) в сухом ТГФ (1,5 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре 4 ч. Гидрохлорид триэтиламина отфильтровывают. Фильтрат концентрируют и хроматографируют (дихлорметан/ацетон, 95:5) для получения 84% 4-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]фенилового эфира хлоруксусной кислоты, 4а, [RD13] (0,101 г, 0,21 ммоля) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,58 (s, 6H), 4,32 (s, 2H), 7,33 (s, 4H), 7,83 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,9 Hz, 1H), 7,95-7,97 (m, 2H); ¹³С ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 23,7, 40,8, 66,5, 110,1, 114,8, 121,9 (q, J=272,5 Hz), 122,7, 127,1 (q, J=4,7 Hz), 130,9, 132,3, 132,9, 133,5 (q, J=33,2 Hz), 135,3, 137,1, 150,9, 165,5, 174,8, 180,0.

Пример 5

5-1а). 2-метил-2-(4-метилфенил)аминопропаннитрил, 5а

Смесь п-толуидина (1,07 г, 10 ммолей) и ацетон циангидрина (10 мл) нагревают до 80°C и перемешивают 4 ч. Среду концентрируют и сушат в вакууме для получения 2-метил-2-(4-метилфенил)аминопропаннитрила, 5а (1,72 г, 9,9 ммоля, 99%) в виде коричневого твердого вещества.

5-1b). 2-метил-2-(4-метилфенил)аминопропаннитрил, 5а

Цианид натрия (0,735 г, 15 ммолей) добавляют к смеси p-толуидина (1,07 г, 10 ммолей) и ацетона (1,16 г, 20 ммолей) в 90% уксусной кислоте (10 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 12 ч и затем добавляют этилацетат (50 мл). Органический слой промывают водой (4×30 мл), сушат над сульфатом магния и концентрируют в вакууме досуха для получения 2-метил-2-(4-метилфенил)аминопропаннитрил, 5а (1,65 г, 9,5 ммолей, 95%) в виде коричневого твердого вещества.

5-2). 4-[3-(4-метилфенил)-5-имино-4,4-диметил-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 5b

Триэтиламин (0,101 г, 1 ммоль) добавляют в раствор 1а (0,456 г, 2 ммоля) и 5а (0,348 г, 2 ммоля) в сухом ТГФ (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C 2 дня и затем концентрируют для получения темного остатка, который подвергают флеш хроматографии (дихлорметан/ацетон, 95:5) для получения 4-[3-(4-метилфенил)-5-имино-4,4-диметил-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрила, 5b (0,136 г, 0,34 ммоля, 17%).

5-3а). 4-[3-(4-метилфенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 5с

Смесь 5b (0,121 г, 0,3 ммоля) в HCl aq., 2N (2 мл) и метанола (5 мл) нагревают с обратным холодильником 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь вливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (10 ml). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 4-[3-(4-метилфенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 5с (0,118 г, 0,294 ммоля, 98%) в виде белого порошка.

5-3b). 4-[3-(4-метилфенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 5с, [RD7]

Смесь 1а (0,547 г, 2,4 ммоля) и 5а (0,348 г, 2 ммоля) в сухом ДМФ (0,6 мл) перемешивают 36 ч. К этой смеси добавляют метанол (20 мл) и 2N HCl (5 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь вливают в холодную воду (30 мл) и экстрагируют этилацетатом (40 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 4-[3-(4-метилфенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 5с, [RD7] (0,596 г, 1,48 ммоля, 74%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР(CDCl₃, 400 MHz) 5 1,61 (s, 6H), 2,44 (s, 3H), 7,17-7,20 (m, 2H), 7,33-7,36 (m, 2H), 7,86 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,96-7,98 (m, 2H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 21,3, 23,6, 66,4, 110,0, 114,9, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 129,2, 130,6, 132,2, 132,3, 133,4 (q, J=33,2 Hz), 135,2, 137,2, 140,1, 175,1, 179,9.

Пример 6

6-1). 2-метил-2-фениламинопропаннитрил, 6а

Смесь аминобензола (0,931 г, 10 ммолей) и ацетон циангидрина (2 мл) нагревают с обратным холодильником 20 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в этилацетат (40 мл) м промывают холодной водой (2×30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют в вакууме досуха для получения 2-метил-2-фениламинопропаннитрила 6а (1,51 г, 9,4 ммоля, 94%) в виде мутной коричневой жидкости.

6-2). 4-[3-фенил-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 6b, [RD10]

Смесь 1а (0,274 г, 1,2 ммоля) и 6а (0,160 г, 1 ммоля) в сухом ДМФ (0,2 мл) перемешивают 48 ч. К этой смеси добавляют метанол (10 ммолей) и 2N HCl (3 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь вливают в холодную воду (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (20 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 4-[3-фенил-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 6b, [RD10] (0,276 г, 0,71 ммоля, 71%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,60 (s, 6H), 7,28-7,31 (m, 2H), 7,50-7,58 (m, 3H), 7,85 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,96-7,99 (m, 2H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 23,7, 66,4, 110,2, 114,8, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 129,5, 129,8, 129,9, 132,2, 133,4 (q, J=33,2 Hz), 135,1, 135,2, 137,2, 175,0, 179,9.

Пример 7

7-1а). 1-(4-метилфенил)аминоциклобутаннитрил, 7а

Цианид натрия (0,147 г, 3 ммоля) добавляют к смеси p-толуидина (0,214 г, 2 ммоля) и циклобутанона (0,21 г, 3 ммоля) в 90% уксусной кислоте (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 12 ч затем добавляют 20 мл этилацетата. Органический слой промывают водой (3×10 мл), сушат над сульфатом магния и концентрируют в вакууме досуха для получения 1-(4-метилфенил)аминоциклобутаннитрила, 7а (0,343 г, 1,84 ммоля, 92%) в виде коричневого твердого вещества.

7-1b). 1-(4-метилфенил)аминоциклобутаннитрил, 7а

Триметилсилил цианид (0,93 мл, 7 ммолей) добавляют по каплям к смеси р-толуидина (0,535 г, 5 ммолей) и циклобутанона (0,42 г, 6 ммолей). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч и затем концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан) для получения 1-(4-метилфенил)аминоциклобутаннитрила, 7а (0,912 г, 4,9 ммоля, 98%) в виде желтоватого твердого вещества.

7-2). 4-(8-имино-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 7b

К раствору 1а (2,28 г, 10 ммолей) в сухом ДМФ (3 мл) постепенно добавляют в течение 20 часов раствор 7а (1,764 г, 9 ммолей) в сухом ДМФ (3 мл) при комнатной температуре. Среду дополнительно перемешивают 4 ч. После испарения ДМФ, остаток хроматографируют (дихлорметан/ацетон, 95:5) для получения 4-(8-имино-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрила, 7b (1,937 г, 4,68 ммоля, 52%).

7-3а). 4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 7с [RD37]

Смесь 7b (0,041 г, 0,1 ммоля) в HCl aq., 2N (3 мл) и метанола (1 мл) нагревают с обратным холодильником 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь выливают в холодную воду (5 мл) и экстрагируют этилацетатом (6 мл); Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрила, 7с (0,04 г, 0,096 ммоля, 96%) в виде белого порошка.

7-3b). 4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4] окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 7с, [RD37]

Смесь 1а (0,912 г, 4 ммоля) и 7а (0,558 г, 3 ммоля) в сухом ДМФ (0,5 мл) перемешивают при комнатной температуре 24 ч. К этой смеси добавляют метанол (30 мл) и HCl aq. 2N (6 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (50 мл) и экстрагируют этилацетатом (60 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрила, 7 с (0,959 г, 2,31 ммоля, 77%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,62-1,69 (m, 1H), 2,16-2,22 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,55-2,66 (m, 4H), 7,19-7,26 (m, 2H), 7,36-7,42 (m, 2H), 7,86 (dd, Jj=8,3 Hz, Jt=1,8 Hz, 1H), 7,96 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,99 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 21,3, 31,4, 67,4, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 129,5, 130,8, 132,2, 132,4, 133,3 (q, J=33,2 Hz), 135,2, 137,3, 140,1, 175,0, 180,0.

Пример 8

8-1). 1-(4-метилфенил)аминоциклопентаннитрил, 8а

Триметилсилил цианид (0,865 мл, 7 ммолей) добавляют по каплям к смеси р-толуидина (0,535 г, 5 ммолей) и циклопентанона (0,589 г, 7 ммолей). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч и затем концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан) для получения 1-(4-метилфенил)аминоциклопентаннитрила, 8а (0,981 г, 4,9 ммоля, 98%) в виде желтоватого твердого вещества.

8-2). 4-(4-Оксо-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 8b, [RD35]

Смесь 1а (0,296 г, 1,3 ммоля) и 8а (0,2 г, 1 ммоль) в сухом ДМФ (0,2 мл) перемешивают 48 ч. К этой смеси добавляют метанол (10 мл) и HCl aq. 2N (3 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 4-(4-Оксо-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифторметилбензонитрила, 8b, [RD35] (0,3 г, 0,7 ммоля, 70%) в виде белого порошка.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,47-1,57 (m, 2H), 1,81-1,92 (m, 2H), 2,20-2,24 (m, 2H), 2,27-2,34 (m, 2H), 2,43 (s, 3Н), 7,18-7,22 (m, 2H), 7,33-7,36 (m, 2H), 7,86 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,96 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,98 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 21,3, 25,2, 36,3, 75,1, 110,0, 114,9, 121,9 (q, J=272,5 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 129,5, 130,7, 123,2, 133,0, 133,4 (q, J=33,2 Hz), 135,1, 137,4, 140,0, 176,3, 180.2.

Пример 9

9-1). 1-(4-метилфенил)аминоциклогексаннитрил, 9а

Цианид натрия (0,147 г, 3 ммоля) добавляют к смеси p-толуидина (0,214 г, 2 ммоля) и циклогексанона (0,294 г, 3 ммоля) в уксусной кислоте 90% (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 12 ч и затем добавляют 20 мл этилацетата. Органический слой промывают водой (3×10 мл), сушат над сульфатом магния и концентрируют в вакууме досуха для получения 1-(4-метилфенил)аминоциклогексаннитрила 9а (0,398 г, 1,86 ммоля, 93%) в виде коричневатого твердого вещества.

9-2). 4-(4-имино-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3-диазаспиро[4.5]дец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 9b

Триэтиламин (0,05 г, 0,5 ммоля) добавляют к раствору 1а (0,228 г, 1 ммоль) и 9а (0,214 г, 1 ммоль) в сухом ТГФ (2 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 2 дня и затем концентрируют для получения темного остатка, который подвергают флеш хроматографии (дихлоримета/ацетон, 95:5) для получения 4-(4-имино-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3-диазаспиро[4.5]дец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрила, 9b (0,035 г, 0,08 ммоля, 8%).

9-3). 4-(4-Оксо-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3-диазаспиро[4.5]дец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 9с, [RD48]

Смесь 9b (0,035 г, 0,08 ммоля) в HCl aq., 2N (1 мл) и метанола (3 мл) нагревают с обратным холодильником 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (5 мл) и экстрагируют этилацетатом (6 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 4-(4-Оксо-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3-диазаспиро[4.5]дец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрила, 9с, [RD48] (0,034 г, 0,076 ммоля, 95%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,02-1,05 (m, 1H), 1,64-1,76 (m, 4H), 2,03-2,12 (m, 5H), 2,44 (s, 3H), 7,12-7,15 (m, 2H), 7,33-7,36 (m, 2H), 7,85 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,96 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,97 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 20,7, 21,3, 24,0, 32,6, 67,4, 109,9, 114,9, 122,0 (q, J=272,5 Hz), 127,3 (q, J=4,6 Hz), 130,0, 130,5, 132,0, 132,5, 133,3 (q, J=33,2 Hz), 135,2, 137,3, 140,1, 174,1, 180,1.

Пример 10

10-1). 1-(4-метилфенил)аминоциклогексаннитрил, 10а

Цианид натрия (0,147 г, 3 ммоля) добавляют к смеси p-толуидина (0,214 г, 2 ммоля) и циклогептанона (0,337 г, 3 ммоля) в уксусной кислоте 90% (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 12 ч и затем добавляют 20 мл этилацетата. Органический слой промывают водой (3×10 мл), сушат над сульфатом магния и концентрируют в вакууме досуха для получения 1-(4-метилфенил)аминоциклогексаннитрила, 10а (0,438 г, 1,92 ммоля, 96%) в виде коричневого твердого вещества.

10-2). 4-(4-имино-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3-диазаспиро[4.5]ундец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 10b

Триэтиламин (0,05 г, 0,5 ммоля) добавляют к раствору 1а (0,228 г, 1 ммоль) и 9а (0,228 г, 1 ммоль) в сухом ТГФ (2 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 2 дня и затем концентрируют для получения темного остатка, который подвергают флеш хроматографии (дихлорметан/ацетон, 95:5) для получения 4-(4-имино-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3-диазаспиро[4.5]ундец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрила, 10b (0,036 г, 0,08 ммоля, 8%).

10-3). 4-(4-оксо-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3-диазаспиро[4.5]ундец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 10с, [RD49]

Смесь 9b (0,036 г, 0,08 ммоля) в HCl aq., 2N (1 мл) и метанола (3 мл) нагревают с обратным холодильником 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (5 мл) и экстрагируют этилацетатом (6 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 10с (0,034 г, 0,075 ммоля, 94%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,24-134 (m, 2H), 1,37-1,43 (m, 2H), 1,53-1,60 (m, 2H), 1,74-1,82 (m, 2H), 2,19-2,25 (m, 4H), 2,44 (s, 3H), 7,16-7,19 (m, 2H), 7,32-7,35 (m, 2H), 7,83 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,95-7,97 (m, 2H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 21,4, 22,2, 30,9, 36,3, 71,1, 110,0, 114,9, 121,9 (q, J=272,5 Hz), 127,2 (q, J=4,6 Hz), 129,6, 130,5, 132,3, 133,0, 133,2 (q, J=33,2 Hz), 135,1, 137,4, 140,0, 175,9, 179,7.

Пример 11

11-1). 1-(4-гидроксифенил)аминоциклобутаннитрил, 11а

Триметилсилил цианид (0,93 мл, 7 ммоля) добавляют по каплям к смеси 4-гидроксианилина (0,545 г, 5 ммолей) и циклобутанона (0,42 г, 6 ммолей). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч и затем концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 98:2) для получения 11а (0,903 г, 4,8 ммоля, 96%) в виде желтоватого твердого продукта.

11-2). 4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-гидроксифенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 11b, [RD58]

Смесь 1а (0,57 г, 2,5 ммоля) и 7а (0,376 г, 2 ммоля) в сухом ДМФ (0,5 мл) перемешивают при комнатной температуре 40 ч. К этой смеси добавляют метанол (30 мл) и HCl aq. (5 мл). Вторую смесь кипятят к обратным холодильником 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (40 мл) и экстрагируют этилацетатом (50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 98:2) для получения 11b (0,659 г, 1,58 ммоля, 79%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,55-1,63 (m, 1H), 2,01-2,09 (m, 1H), 2,50-2,65 (m, 4H), 6,97-7,01 (m, 2H), 7,20-7,24 (m, 2H), 8,02 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 8,14 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,21 (d, J=8,3 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (Ацетон-d₆, 100 MHz) δ 13,4, 31,3, 67,5, 108,9, 114,8, 116,1, 123,5 (q, J=271,5 Hz), 127,4 (q, J=4,9 Hz), 131,3, 131,8 (q, J=32,7 Hz), 133,3, 135,5, 136,2, 138,5, 158,1, 175,1, 180,7.

Пример 12

12-1). 1-(4-бифениламино)циклобутанкарбонитрил, 12а

Триметилсилил цианид (0,2 мл, 1,5 ммоля) добавляют по каплям к смеси 4-бифениламина (0,169 г, 1 ммоль) и циклобутанона (0,098 г, 1,4 ммоля). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч и затем концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан) для получения 12а (0,24 г, 0,97 ммоля, 97%) в виде белого твердого вещества.

12-2). 4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-бифенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 12b [RD57]

Смесь 1а (0,137 г, 0,6 ммоля) и 12а (0,124 г, 0,5 ммоля) в сухом ДМФ (0,2 мл) перемешивают при комнатной температуре 3 дня. К этой смеси добавляют метанол (5 мл) и HCl aq. 2N (1 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (15 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 12b (0,162 г, 0,34 ммоля, 68%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,67-1,76 (m, 1H), 2,19-2,31 (m, 1H), 2,59-2,74 (m, 4H), 7,40-7,44 (m, 3H), 7,47-7,53 (m, 2H), 7,64-7,67 (m, 2H), 7,79-7,82 (m, 2H), 7,88 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,2 Hz, 1H), 8,02 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 31,5, 67,5, 110,0, 114,9, 122,0 (q, J=272,6 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 127,3, 128,1, 128,7, 129,0, 130,2, 132,3, 133,5 (q, J=33,2 Hz), 134,2, 135,2, 137,2, 139,6, 142,8, 174,9, 179,9.

Пример 13

13-1). 1-(2-нафтиламино)циклобутанкарбонитрил, 13а

Триметилсилил цианид (0,27 мл, 2 ммоля) добавляют по каплям к смеси 2-аминонафталина (0,143 г, 1 ммоль) и циклобутанона (0,098 г, 1,4 ммоля). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 12 ч и затем концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан) для получения 13а (0,209 г, 0,94 ммоля, 94%) в виде желтого твердого вещества.

13-2). 4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-бифенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 12b, [RD85]

Смесь 1а (0,137 г, 0,6 ммоля) и 13а (0,111 г, 0,5 ммоля) в сухом ДМФ (0,2 мл) перемешивают при комнатной температуре 3 дня. К этой смеси добавляют метанол (5 мл) и HCl aq. (1 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (15 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 12b (0,146 г, 0,325 ммоля, 65%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 158-1,68 (m, 1H), 2,17-2,29 (m, 1H), 2,61-2,75 (m, 4H), 7,40 (dd, J₁=8,6 Hz, J₂=2,0 Hz, 1H), 7,58-7,65 (m, 2H), 7,86-8,00 (m, 5H), 8,04 (J=1,8 Hz, 1H), 8,06 (d, J=8,6 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 31,6, 67,7, 110,0, 114,9, 122,0 (q, J=272,6 Hz), 126,8, 127,1 (q, J=4,8 Hz), 127,2, 127,7, 128,0, 128,3, 129,1, 130,2, 132,2, 132,5, 133,4, 133,5 (q, J=33,1 Hz), 133,6, 135,2, 137,2, 175,0, 180,1.

Пример 14

14-1). 2-(4-метил-2-пиридинамино)-2-метилпропаннитрил, 14а

Триметилсилил цианид (0,27 мл, 2 ммоля) добавляют по каплям к смеси 2-амино-4-метилпиридина (0,108 г, 1 ммоль) и ацетона (0,58 г, 10 ммолей). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 дней и затем концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 60:40) для получения 14а (0,133 г, 0,76 ммоля, 76%) в виде белого твердого вещества.

14-2). 4-[4,4-диметил-3-(4-метилпиридин-2-ил)-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 14b, [RD83]

Смесь 1а (0,91 г, 0,4 ммоля) и 14а (0,053 г, 0,3 ммоля) в сухом ДМФ (0,2 мл) перемешивают при комнатной температуре 6 дней. К смеси добавляют метанол (5 мл) и HCl aq. (1 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 5 ч. После охлаждения до комнатной температуре реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (15 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 14b (0,07 г, 0,174 ммоля, 58%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,70 (s, 6H), 2,44 (s, 3H), 7,19 (d, J=4,4 Hz, 1H), 7,45 (t, J=0,6 Hz, 1H), 7,82 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,2 Hz, 1H), 8,47 (d, J=5,0 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 21,1, 24,1, 67,1, 110,2, 114,8, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 124,4, 125,1, 127,3 (q, J=4,8 Hz), 132,4, 133,5 (q, J=33,2 Hz), 135,3, 137,1, 149,2, 149,5, 150,0, 175,2, 179,0.

Пример 15

15-1). 2-(2-пиридинамино)-2-метилпропаннитрил, 15а

Триметилсилил цианид (0,27 мл, 2 ммоля) добавляют по каплям к смеси 2-аминопиридина (0,094 г, 1 ммоль) и ацетона (0,58 г, 10 ммолей). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 дней и затем концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 60:40) для получения 15а (0,131 г, 0,81 ммоля, 81%) в виде белого твердого вещества.

15-2). 4-[4,4-диметил-3-(4-пиридин-2-ил)-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 15b, [RD82]

Смесь 1а (0,91 г, 0,4 ммоля) и 15а (0,048 г, 0,3 ммоля) в сухом ДМФ (0,3 мл) перемешивают при комнатной температуре 10 дней. К этой смеси добавляют метанол (5 мл) и HCl aq. (1 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 5 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (15 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 15b (0,059 г, 0,153 ммоля, 51%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,73 (s, 6H), 7,38 (dd, J₁=7,3 Hz, J₂=5,4 Hz, 1H), 7,71 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,87 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,95 (td, J₁=7,8 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=1,3 Hz, 1H), 7,98 (d, J=8,2 Hz, 1H), 8,62 (dd, J₁=4,7 Hz, J₂=1,3 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 24,2, 67,1, 110,3, 114,8, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 123,7, 123,8, 127,3 (q, J=4,8 Hz), 132,4, 133,6 (q, J=33,2 Hz), 135,3, 137,1, 138,2, 149,5, 149,6, 175,1, 179,0.

Пример 16

16-1). 1-(5-метил-2Н-пиразол-3-иламино)-циклобутанкарбонитрил, 16а

Триметилсилил цианид (0,532 мл, 4,0 ммоля) добавляют по каплям к смеси 3-амино-5-метилпиразола (0,194 г, 2,0 ммоля) и циклобутанона (0,154 г, 2,2 ммоля). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 40 ч и затем концентрируют в вакууме для получения темной жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан) для получения 16а (0,267 г, 1,52 ммоля, 76%) в виде желтоватого порошка.

16-2). 4-[5-(5-метил-2Н-пиразол-3-ил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-7-ил]-2-трифторметил-бензонитрил, 16b, [RD84]

Смесь 1а (0,0684 г, 0,3 ммоля) и 16а (0,053 г, 0,3 ммоля) в сухом ДМФ (0,2 мл) перемешивают при комнатной температуре 4 дня. К этой смеси добавляют метанол (10 мл) и HCl aq. 2N (2 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 5 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (30 мл) и экстрагируют этилацетатом (30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 97:3) для получения 16b (0,0826 г, 0,2 ммоля, 67%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (ацетон d₆, 400 MHz) δ 1,66-1,76 (m, 1H), 2,00-2,07 (m, 1H), 3,35 (s, 3Н), 2,56-2,63 (m, 2H), 2,85-2,93 (m, 2H), 8,04 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,6 Hz, 1H), 8,18 (d, J=1,6 Hz, 1H), 8,22 (d, J=8,2 Hz, 1H), 11,99 (s, 1H); ¹³C ЯМР (ацетон d₆, 100 MHz) δ 10,2, 13,1, 31,1, 67,4, 102,5, 109,1, 114,8, 122,5 (q, J=271,4 Hz), 127,8 (q, J=4,8 Hz), 131,9 (q, J=33,6 Hz), 133,6, 135,6, 138,4, 139,9, 145,0, 175,0, 179,6.

Пример 17

4-[3-(4-гидроксифенил)-4,4-диметил-2,5-дитиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 17а, [RD59]

Смесь 3с (0,081 г, 0,2 ммоля) и реагента Лавсона (Lawesson) (0,097 г, 0,24 ммоля) в толуоле (3 мл) кипятят с обратным холодильником 15 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (10 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:пентан, 9:1) для получения 17а (0,0185 г, 0,044 ммоля, 22%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,65 (s, 6H), 6,95-6,97 (m, 2H), 7,15-7,18 (m, 2H), 7,75 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,86 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,98 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 27,9, 77,8, 110,9, 114,7, 116,7, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 128,1 (q, J=4,8 Hz), 129,1, 130,7, 133,3, 133,5 (q, J=33,2 Hz), 135,5, 140,3, 156,8, 179,9, 207,9,

Пример 18

4-[3-(4-гидроксифенил)-4,4-диметил-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 18а, [RD60]

Пероксид водорода 30% (3 мл, 26 ммолей) добавляют по каплям к раствору 3с (0,121 г, 0,4 ммоля) в ледяной уксусной кислоте (3 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре 12 ч и затем добавляют 20 мл этилацетата. Органический слой промывают водой (3×15 мл), сушат над сульфатом магния, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 18а (0,102 г, 0,261 ммоля, 87%) в виде белого порошка.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,52 (s, 6H), 6,70-6,73 (m, 2H), 7,01-7,04 (m, 2H), 7,92 (d, J=8,4 Hz, 1H), 8,00 (dd, J₁=8,4 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 8,15 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 23,7, 63,7, 108,4, 115,0, 116,7, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 123,5 (q, J=4,8 Hz), 124,0, 128,5, 130,5, 133,6 (q, J=33,2 Hz), 135,5, 136,2, 153,4, 157,2, 174,5.

Пример 19

19-1). 3-фтор-2-метил-2-(4-метилфенил)аминопропионитрил, 19а

Триметилсилил цианид (0,146 мл, 1,1 ммоля) добавляют по каплям к смеси р-толуидина (0,107 г, 1 ммоль) и фторацетона (0,082 г, 1,1 ммоля). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 12 ч и затем концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан) для получения 9а (0,179 г, 0,93 ммоля, 93%) в виде желтоватого твердого вещества.

19-2). 4-(4-фторметил-4-метил-5-оксо-2-тиоксо-3-(4-метилфенил)имидазолидин-1-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 19b, [RD68]

Смесь 1а (0,16 г, 0,7 ммоля) и 19а (0,096 г, 0,5 ммоля) в сухом ДМФ (0,3 мл) перемешивают при комнатной температуре 48 ч. К этой смеси добавляют метанол (10 мл) и HCl aq. 2N (2 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 6 ч. После - охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (30 мл) и экстрагируют этилацетатом (30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 19b (0,168 г, 0,4 ммоля, 80%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,49 (s, 3Н), 2,44 (s, 3Н), 4,35 (dd, J₁=47,2 Hz, J₂=10.0 Hz, 1H), 4,71 (dd, J₁=45,2 Hz, J₂=10 Hz, 1H), 7,22-7,26 (m, 2H), 7,35-7,39 (m, 2H), 7,82 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,93 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J=8,2 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 17,0 (d, J=4,6 Hz), 21,3, 69,3 (d, J=18,3 Hz), 81,9 (d, J=179,5 Hz), 109,9, 114,8, 121,8 (q, J=272,6 Hz), 127,2 (q, J=4,7 Hz), 129,3, 130,9, 131,6, 132,3, 133,3 (q, J=33,2 Hz), 135,3, 137,0, 140,5, 174,1, 181,4; ¹⁹F ЯМР (CDCl₃, 376 MHz) δ -62,5, 110,9.

Пример 20

20-1). 2-метил-2-(4-трифторметилфенил)аминопропаннитрил, 20а

Смесь 4-трифторметиланилина (1,61 г, 10 ммолей), ацетон циангидрина (5 мл) сульфата магния (2 г) нагревают до 80°C и перемешивают 12 ч. К среде добавляют этилацетат (50 мл) и затем промывают водой (3×30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄ и концентрируют в вакууме досуха для получения 20а (2,166 г, 9,5 ммоля, 95%) в виде коричневого твердого вещества.

20-2). 4-(4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксо-3-(4-трифторметилфенил)имидазолидин-1-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 20b, [RD66]

Смесь 1а (0,114 г, 0,5 ммоля) и 20а (0,092 г, 0,4 ммоля) в сухом ДМФ (0,3 мл) перемешивают при комнатной температуре 48 ч. К этой смеси добавляют метанол (10 мл) и HCl aq. (3 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (20 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 20b (0,117 г, 0,256 ммоля, 64%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,61 (s, 6H), 7,45-7,49 (m, 2H), 7,80-7,83 (m, 2H), 7,85 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,99 (d, J=8,2 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 23,8, 66,6, 110,3, 114,8, 121,8 (q, J=272,6 Hz), 123,5 (q, J=271,1 Hz), 127,0 (q, J=4,6 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 130,3, 131,9 (q, J=32,9 Hz),, 132,2, 133,5 (q, J=33,3 Hz), 135,3, 136,9, 138,4, 174,6, 179,9.

Пример 21

21-1). 3-хлор-2-хлорметил-2-(4-метилфенил)аминопропаннитрил, 21а

Триметилсилил цианид (0,27 мл, 2 ммоля) добавляют по каплям к смеси р-толуидина (0,107 г, 1 ммоль) и 1,3-дихлорацетона (0,254 г, 2 ммоля). Реакционную смесь нагревают до 80°C и перемешивают 6 ч. К смеси добавляют 20 мл этилацетата и затем промывают водой (2×20 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 21а (0,192 г, 0,79 ммоля, 79%) в виде коричневого порошка.

21-2). 4-(4,4-бисхлорметил-5-оксо-2-тиоксо-3-(4-метилфенил)имидазолидин-1-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 21b, [RD67]

Смесь 1а (0,16 г, 0,7 ммоля) и 21а (0,122 г, 0,5 ммоля) в сухом ДМФ (0,5 мл) перемешивают при комнатной температуре 10 дней. К этой смеси добавляют метанол (10 мл) и HCl aq. 2N (2 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 21b (0,09 г, 0,19 ммоля, 38%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 2,44 (s, 3H), 3,54 (d, J=11,8 Hz, 2H), 3,93 (d, J=11,8 Hz, 2H), 7,37-7,40 (m, 2H), 7,48-7,51 (m, 2H), 7,79 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,88 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J=8,2 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 21,4, 42,8, 74,3, 110,7, 114,7, 121,7 (q, J=272,6 Hz), 127,2 (q, J=4,7 Hz), 128,8, 131,0, 131,1, 132,4, 133,8 (q, J=33,2 Hz), 135,5, 136,9, 140,9, 169,5, 182,5.

Пример 22

22-1). 1-(4-метилфенил)аминоциклогексаннитрил, 22а

Цианид натрия (0,245 г, 5 ммолей) добавляют к смеси антраниловой кислоты (0,411 г, 3 ммоля) и ацетона (1 мл, 13,6 ммоля) в 90% уксусной кислоте (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 12 ч и затем добавляют 50 мл этилацетата. Органический слой промывают раствором NaCl (3×30 мл). Органический слой сушат над сульфатом магния, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 90:10) для получения 22а (0,551 г, 2,7 ммоля, 90%) в виде коричневого твердого вещества.

22-2). 2-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]бензойная кислота, 22b, [RD65]

Смесь 1а (0,114 г, 0,* ммолей) и 22а (0,103 г, 0,5 ммоля) в сухом ДМФ (0,5 мл) перемешивают при комнатной температуре 3 дня. К этой смеси добавляют метанол (10 мл) и HCl aq. 2N, (3 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (этилацетат:пентан) для получения 22b (0,143 г, 0,33 ммоля, 66%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,47 (s, 3H), 1,78 (s, 3H), 7,39 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,63 (t, J=7,7 Hz, 1H) 7,76-7,82 (m, 2H), 7,90-7,98 (m, 2H), 8,22 (d, J=6,8 Hz, 1H), 8,96 (bs, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 20,6, 26,2, 67,6, 110,1, 114,8, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 127,2 (q, J=4,7 Hz), 128,9, 131,0, 130,2, 132,5, 133,2 (q, J=33,3 Hz), 133,7, 134,7, 135,4, 135,8, 137,3, 169,8, 175,3, 180,7.

Пример 23

23-1). 1-(2-метилфенил)аминоциклобутаннитрил, 23а

Триметилсилил цианид (0,66 мл, 5 ммолей) добавляют по каплям к смеси р-толуидина (0,321 г, 3 ммоля) и циклобутанона (0,28 г, 4 ммоля). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч и затем концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан) для получения 23а (0,541 г, 2,91 ммоля, 97%) в виде желтоватого твердого вещества.

23-2). 4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(2-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 23b, [RD71]

Смесь 1а (0,114 г, 0,5 ммоля) и 23а (0,093 г, 0,5 ммоля) в сухом ДМФ (0,3 мл) перемешивают при комнатной температуре 3 дня. К этой смеси добавляют метанол (10 мл) и HCl aq. 2N, (3 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 23b (0,116 г, 0,28 ммоля, 56%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,63-1,69 (m, 1H), 2,26 (s, 3H), 2,28-2,41 (m, 2H), 2,58-2,76 (m, 3H), 7,21 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,39-7,49 (m, 3H), 7,89 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,2 Hz, 1H), 8,00 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 14,2, 18,0, 30,7, 32,2, 67,6, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 127,0 (q, J=4,7 Hz), 127,5, 129,8, 130,2, 131,9, 132,3, 133,4, 133,5 (q, J=34,3 Hz), 135,2, 135,8, 137,1, 138,0, 175,3, 178,7.

Пример 24

24-1). 1-аминоциклопентанкарбонитрил, 24а

Безводный аммиак барботируют через смесь циклопентанона (0,452 г) и триметилсилил цианида (0,66 мл, 5 ммолей). Избыток аммиака возвращают с применением холодильника с сухим льдом-ацетоном. После одного 1 ч заворота аммиака его удаляют из среды и затем оставшуюся смесь концентрируют в вакууме для получения 24а (0,522 г, 4,75 ммоля, 95%) в виде бесцветной жидкости.

24-2). 4-(4-имино-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 24b

Триметиламин (0,101 г, 0,1 ммоля) добавляют к раствору 1а (0,684 г, 3 ммоля) и 24а (0,33 г, 3 ммоля) в сухом ТГФ (5 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 5 ч и затем концентрируют для получения коричневого остатка, который подвергают флеш хроматографии (дихлорметан/ацетон, 93:7) для получения 24b (0,741 г, 2,19 ммоля, 73%).

24-3). 4-(4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 24с, [RD77]

Смесь 24b (0,741 г, 2,19 ммоля) в HCl aq., 2N (4 мл) и метанола (20 мл) кипятят с обратным холодильником 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (40 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 24 с (0,72 г, 2,12 ммоля, 97%) в виде белого порошка.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,86-190 (m, 2H), 1,96-2,05 (m, 4H), 2,26-2,30 (m, 2H), 7,80 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,92 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,2 Hz, 1H) 8,20 (bs, NH); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 25,3, 38,1, 71,0, 110,1, 114,8, 121,8 (q, J=272,7 Hz), 126,8 (q, J=4,7 Hz), 131,9, 133,6 (q, J=34,3 Hz), 135,3, 136,7, 176,1, 179,8.

Пример 25

25). 4-[1-(4-нитрофенил)-4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 25а, [RD55]

Смесь 25с (0,0678 г, 0,2 ммоля), 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ена (0,05 г, 0,33 ммоля) и 4-фторнитробензола (0,056 г, 0,4 ммоля) в диметилформамиде (0,5 мл) помещают в аргоне в запаянную трубку нагревают до 130°C 40 ч. Реакционную смесь выливают в этилацетат (5 мл) и промывают водой (2×10 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 25а (0,038 г, 0,084 ммоля, 42%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,53-1,56 (m, 2H), 1,90-1,93 (m, 2H), 2,14-2,18 (m, 2H), 2,37-2,40 (m, 2H), 7,54-7,57 (m, 2H), 7,85 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J=8,2 Hz, 1H), 8.39-8,43 (m, 2H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 25,2, 36,5, 75,3, 110,3, 114,8, 121,8 (q, J=272,6 Hz), 125,2, 127,0 (q, J=4,7 Hz), 131,4, 132,1, 133,6 (q, J=34,3 Hz), 135,3, 136,9, 141,7, 148,1, 175,6, 180,2.

Пример 26

26). 4-[1-(4-цианофенил)-4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 26а, [RD54]

Смесь 24с (0,0678 г, 0,2 ммоля), 1,8-диазабицикло [5.4.0]ундец-7-ена (0,061 г, 0,4 ммоля) и 4-фторцианобензола (0,048 г, 0,4 ммоля) в диметилформамиде (0,5 мл) помещают в аргоне в запаянную трубку нагревают до 140°C 5 дней. Реакционную смесь выливают в этилацетат (5 мл) и промывают водой (2×10 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 26а (0,023 г, 0,052 ммоля, 26%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,51-1,55 (m, 2H), 1,90-1,93 (m, 2H), 2,12-2,16 (m, 2H), 2,33-2,38 (m, 2H), 7,47-7,50 (m, 2H), 7,81-7,87 (m, 3Н), 7,95-7,99 (m, 2H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 25,2, 36,5, 75,3, 110,3, 113,9, 114,7, 117,5, 121,8 (q, J=272,6 Hz), 127,0 (q, J=4,8 Hz), 131,2, 132,1, 133,6 (q, J=34,3 Hz), 133,8, 135,3, 136,9, 140,0, 175,6, 180,1.

Пример 27

27-1). 1-метил-4-(4-метилфениламино)пиперидин-4-карбонитрил, 27а

Цианид натрия (0,318 г, 6,5 ммоля) добавляют к смеси p-толуидина (0,535 г, 5 ммолей) и 1-метил-4-пиперидинона (0,678 г, 6 ммолей) в 90% уксусной кислоте (5 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч и, затем добавляют 100 мл дихлорметана. Органический слой промывают раствором NaOH, 2N (2×50 мл), сушат над сульфатом магния, концентрируют и хроматографируют (DCM и затем ацетон) для получения 27а (0,722 г, 3,15 ммоля, 63%).

27.2). 4-(4-имино-8-метил-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3,8-триазаспиро[4.5]дец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 27b

Триэтиламин (0,02 г, 0,2 ммоля) добавляют к раствору 1а (0,.228 г, 1 ммоль) и 27а (0,114 г, 0,5 ммоля) в сухом ТГФ (2 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 20 ч и затем концентрируют для получения темного остатка, который подвергают флеш хроматографии (дихлорметан/ацетон, 90:10, и затем ацетон) для получения 27b (0,059 г, 0,13 ммоля, 26%).

27-3). 4-(8-метил-4-оксо-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3,8-триазаспиро[4.5]дец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 27с, [RD53]

Смесь 27b (0,059 г, 0,13 ммоля) в HCl aq., 2N (1 мл) и метанола (3 мл) кипятят с обратным холодильником 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (5 мл) и экстрагируют этилацетатом (10 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 60:40) для получения 27 с (0,055 г, 0,012 ммоля, 92%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (Ацетон-d₆, 400 MHz) δ 1,93-1,99 (m, 1H), 2,00-2,04 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,24-2,28 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,61-2,72 (m, 4H), 7,18-7-20 (m, 2H), 7,32-7,35 (m, 2H), 8,03 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 8,16 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,22 (d, J=8,2 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (Ацетон-d₆, 100 MHz) δ 20,3, 31,4, 45,1, 49,8, 65,1, 109,1, 114,8, 122,4 (q, J=275,1 Hz), 127,7 (q, J=4,8 Hz), 130,0, 130,5, 131,9 (q, J=32,6 Hz), 132,6, 133,5, 135,6, 138,3, 139,4, 174,0, 180,6.

Пример 28

4-(8-метил-4-оксо-2-тиоксо-1,3,8-триазаспиро[4.5]дец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 28а, [RD52]

Соединение 28а синтезируют в соответствии с методикой, описанной в US 5958936.

¹Н ЯМР (Ацетон-d₆, 400 MHz) δ 1,93-2,00 (m, 2H), 2,09-2,16 (m, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,42-2,49 (m, 2H), 2,75-2,80 (m, 2H), 7,97 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 8,11 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,20 (d, J=8,2 Hz, 1H), 9,80 (bs, NH); ¹³C ЯМР (Ацетон-d₆, 100 MHz) δ 32,9, 45,4, 50,1, 62,3, 109,1, 114,8, 122,4 (q, J=271,6 Hz), 127,5 (q, J=4,8 Hz), 131,8 (q, J=32,7 Hz), 133,2, 135,6, 135,6, 138,0, 175,2, 180,4.

Пример 29

4-[3-(4-гидроксибутил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил, RU 59063

Соединение RU 59063 синтезируют в соответствии с методикой, описанной Тетчем (Teutsch) и др. [J.Steroid. Biochem. Molec. Biol. 1994, 48(1), 111-119].

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,55 (s, 6H), 1,58-1,62 (m, 2H), 1,86-1,89 (m, 2H), 2,25 (bs, ОН), 3,65-3,71 (m, 4Н), 7,74 (dd, J₁=8,0 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,92 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J=8,0 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 23,1, 24,7, 29,6, 43,9, 61,7, 65,2, 109,7, 114,9, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 127,1 (q, J=4,8 Hz), 132,2, 133,7 (q, J=34,3 Hz), 135,2, 137,2, 175,3, 178,2.

Пример 30

30-1). 1-метиламиноциклобутанкарбонитрил, 30а

Метиламин барботируют через охлаждаемую смесь циклобутанона (0,21 г, 3 ммоля) и триметилсилил цианида (0,396 г, 4 ммоля) до удвоения объема. Смесь перемешивают 3 ч и затем концентрируют досуха для получения 30а (0,33 г, количественный).

30-2). 4-(5-метил-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 30b, [RD73]

Смесь 1а (0,114 г, 0,5 ммоля) и 30а (0,055 г, 0,5 ммоля) в сухом ДМФ (0,2 мл) перемешивают при комнатной температуре 0,5 ч. К этой смеси добавляют 10 мл метанола и 2 мл 2N HCl. Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения ЗОЬ (0,148 г, 0,435 ммоля, 87%) в виде белого порошка.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,95-2,06 (m, 1H), 2,21-2,32 (m, 1H), 2,58-2,71 (m, 4Н), 3,44 (s, 3Н), 7,77 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=2,0 Hz, 1H), 7,89 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,93 (d, J=8,2 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 30,3, 30,4, 66,1, 109,7, 114,9, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 126,9 (q, J=4,8 Hz), 132,1, 133,2 (q, J=34,3 Hz), 135,2, 137,3, 175,1, 178,7.

30-3). 4-(5-метил-6,8-диоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 30с, [RD74]

Пероксид водорода (2 мл, 30%) добавляют к смеси 30b (0,068 г, 0,2 ммоля) в ледяной уксусной кислоте (3 мл). После перемешивания при комнатной температуре 10 ч, реакционную смесь выливают в этилацетат (20 мл) и затем промывают водой (2×20 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон) для получения 30с (0,057 г, 0,176 ммоля, 88%) 3 в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,91-2,35 (m, 1H), 2,21-2,31 (m, 1H), 2,50-2,61 (m, 4H), 3,12 (s, 3H), 7,89 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,97 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=2,0 Hz, 1H), 8,12 (d, J=2,0 Hz, 1H),; ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,9, 25,4, 29,3, 63,4, 108,1, 115,1, 121,6 (q, J=272,6 Hz), 122,9 (q, J=4,8 Hz), 127,9, 133,5 (q, J=34,3 Hz), 135,3, 136,5, 152,7, 174,4.

Пример 31

31-1). 1-метиламиноциклопентанкарбонитрил, 31а

Метиламин барботируют через охлаждаемую смесь циклопентанона (0,252 г, 3 ммоля) и триметилсилил цианида (0,396 г, 4 ммоля) до удвоения объема. Смесь перемешивают 3 ч и затем концентрируют досуха для получения 31а (0,372 г, количественный).

31-2). 4-(1-метил-4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 31b, [RD75]

Смесь 1а (0,114 г, 0,5 ммоля) и 31а (0,062 г, 0,5 ммоля) в сухом ДМФ (0,2 мл) перемешивают при комнатной температуре 0,5 ч. К этой смеси добавляют 10 мл метанола и 2 мл 2N HCl. Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 31b (0,159 г, 0,45 ммоля, 90%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,91-2,05 (m, 6H), 2,16-2,21 (m, 2H), 3,27 (s, 3H), 7,77 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,89 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,91 (d, J=8,2 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 26,4, 30,3, 35,4, 73,2, 109,5, 114,9, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 126,9 (q, J=4,8 Hz), 132,2,133,2 (q, J=34,3 Hz), 135,2, 137,5, 176,8, 178,5.

31-3). 4-(1-метил-2,4-диоксо-1,3-диаза-спиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 31с, [RD76]

Пероксид водорода (2 мл, 30%) добавляют к смеси 31b (0,07 г, 0,2 ммоля) в ледяной уксусной кислоте (3 мл). После перемешивания при комнатной температуре 10 ч, реакционную смесь выливают в этилацетат (20 мл) и затем промывают водой (2×20 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон) для получения 31 с (0,057 г, 0,168 ммоля, 84%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,88-1,99 (m, 6H), 2,12-2,17 (m, 2H), 2,98 (s, 3H), 7,88 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,97 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 8,12 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 25,2, 26,5, 34,8, 70,1, 108,0, 115,1, 122,0 (q, J=272,5 Hz), 122,9 (q, J=4,9 Hz), 127,9, 133,5 (q, J=32,9 Hz), 135,3, 136,6, 152,7, 176,1,

Пример 32

4-(8-метилимино-6-тиоксо-5-п-толил-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил, 32а, [RD90]

Смесь 7b (0,042 г, 0,1 ммоля), DBU (0,023 г, 0,15 ммоля) и йодметана (0,073 г, 0,5 ммоля) в ДМФ (0,3 мл) перемешивают 15 ч при комнатной температуре. После упаривания ДМФ среду хроматографируют (дихлорметан) для получения 32а (0,011 г, 0,026 ммоля, 26%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,58-1,65 (m, 1H), 2,04-2,13 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,70-2,77 (m, 2H), 3,06-3,10 (m, 2H), 3,58 (s, CH₃-N, главный изомер) [2,70 (s, CH₃-N, второстепенный изомер)], 7,20-7,34 (m, 4H), 7,75-7,91 (m, 3H); (CDCl₃, 100 MHz) δ 12,6, 21,4, 30,2, 33,7 (35,3 для других изомеров), 66,9, 109,1, 115,2, 122,1 (q, J=272,5 Hz), 128,5 (q, J=4,9 Hz), 129,8, 130,4, 130,6, 132,8, 133,2 (q, J=32,9 Hz), 133,5, 134,9, 139,8, 157,0, 180,2.

Пример 33

1-[3-(4-циано-3-трифторметил-фенил)-5,5-диметил-2-тиоксо-1-п-толил-имвдазолидин-4-илиден]-3-этил-тиомочевина, 3а, [RD91]

Смесь 5b (0,06 г, 0,149 ммоля), этилтиоизоцианата (0,087 г, 1 ммоля) и CuI (0,01 г, 0,05 ммоля) в ДМФ (0,1 мл) нагревают в микроволновой печи 45 минут. Затем среду промывают раствором хлорида натрия и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (HPLC, колонка с оксидом алюминия) для получения 33а (0,054 г, 0,108 ммоля, 72%) в виде белого порошка.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,15 (t, J=7,23 Hz, 3H), 1,70 [1,75 второстепенный изомер] (s, 6Н), 2,42 (s, 3H), 3,28-3,39 (m, 2H) [3,15-3,22 (m, 2H), второстепенный изомер], 6,50 (bs, 1H) [6,93 (bs, 1H), второстепенный изомер], 7,14-7,18 (m, 2H), 7,32-7,35 (m, 2H), 7,77-7,94 (m, 3H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,31 (13,83 второстепенный), 21,3, 25,22 (24,89 второстепенный), 40,31 (40,67 второстепенный), 68,1, 109,9, 114,9, 122,3 (q, J=272,5 Hz), 127,6 (q, J=4,9 Hz), 129,1, 129,59 (129,55 второстепенный), 130,52 (130,57 второстепенный), 132,27 (132,15 второстепенный), 132,9 (q, J=32,9 Hz), 134,27 (134,15 второстепенный), 134,9, 135,2, 156,33 (156,06 второстепенный), 180,28 (180,06 второстепенный), 187,24 (186,63 второстепенный).

Пример 34

1-[7-(4-циано-3-трифторметил-фенил)-6-тиоксо-5-п-толил-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-8-илиден]-3-фенил-тиомочевина, 34а, [RD92]

Смесь 7b (0,021 г, 0,05 ммоля) и фенилтиоизоцианата (0,027 г, 0,2 ммоля) в ДМФ (0,3 мл) перемешивают 2 дня при 60°C. После упаривания ДМФ среду хроматографируют (дихлорметан) для получения 34а (0,015 г, 0,028 ммоля, 57%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,59-1,67 (m, 1H), 2,12-2,22 (m, 1H), 2,45 (s, 3Н), 2,61-2,71 (m, 2H), 2,81-2,87 (m, 2H), 7,18-7,27 (m, 6H), 7,33-7,41 (m, 5H), 7,60-7,62 (m, 1H), 8,40 (bs, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,6, 21,4, 32,3, 69,6, 110,7, 114,8, 121,6, 122,0 (q, J=272,5 Hz), 126,3,128,0 (q, J=4,9 Hz), 128,9, 129,4, 130,7, 132,5, 133,2 (q, J=32,9 Hz), 134,1, 134,9, 137,7, 139,2, 140,2, 154,8, 180,3, 185,5.

Пример 35

1-(4-Циано-3-трифторметил-фенил)-3-[7-(4-циано-3-трифторметил-фенил)-6-тиоксо-5-р-толил-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-8-илиден]-тиомочевина, 35а, [RD93]

Смесь 1a (0,502 г, 2,2 ммоля) и 7а (0,186 г, 1 ммоль) в ДМФ (1 мл) перемешивают при комнатной температуре. После 20 часов перемешивания смесь концентрируют при пониженном давлении для получения вязкой оранжевой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 99:1) для получения 35а (0,269 г, 0,42 ммоля, 42%) в виде желтого порошка.

Структура 35а, определенная рентгеноструктурным анализом.

Пример 36

36-1). 1-(4-гидроксиметилфениламино)-циклобутанкарбонитрил, 36а

Триметилсилил цианид (0,66 мл, 5 ммолей) добавляют по каплям к смеси 4-аминобензойной кислоты (0,492 г, 4 ммоля) и циклобутанона (0,35 г, 5 ммолей) в дихлорметане (10 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 6 ч и затем концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан) для получения 36а (0,677 г, 3,36 ммоля, 84%) в виде коричневого твердого вещества.

36-2). 4-[8-(4-гидроксиметилфенил)-5-оксо-7-тиоксо-6-азаспиро[3.4]окт-6-ил]-2-трифторметил-бензонитрил, 36b, [RD110]

Смесь la (0,342 г, 1,5 ммоля) и 36а (0,21 г, 1 ммоль) в сухом ДМФ (0,5 мл) перемешивают при комнатной температуре 24 ч. К этой смеси добавляют метанол (20 мл) и HCl aq. 2N (5 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (40 мл) и экстрагируют этилацетатом (60 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон) для получения 36b (0,296 г, 0,69 ммоля, 69%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,63-1,68 (m, 1H), 2,17-2,26 (m, 1H), 2,52-2,68 (m, 4H), 4,75 (s, 2H), 7,30 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,58 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,88 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,95-7,98 (m, 2H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 31,5, 64,4, 67,5, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 128,3, 130,0, 132,2, 133,3, 133,4 (q, J=33,2 Hz), 134,2, 137,2, 142,9, 174,9, 179,9.

Пример 37

4-[5-(4-формилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил]-2-трифторметил-бензонитрил, 37а, [RD114]

К смеси 36b (0,303 г, 0,7 ммоля) и реагент Десс-Мартина (0,417 г, 1 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляют пиридин (1,01 г, 1 ммоль). Смесь перемешивают 2 часа при комнатной температуре и затем добавляют этиловый эфир (10 мл) для осаждения побочных продуктов реакции. После фильтрации и концентрации при пониженном давлении смесь хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения 37а (0,24 г, 0,56 ммоля, 80%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,62-1,73 (m, 1H), 2,24-2,30 (m, 1H), 2,50-2,58 (m, 2H), 2,69-2,75 (m, 2H), 7,53 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,85 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,97-7,99 (m, 2H), 8,11 (d, J=8,1 Hz, 2H), 10,12 (s, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 31,7, 67,5, 110,2, 114,8, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 127,0 (q, J=4,7 Hz), 129,1, 131,0, 131,2, 132,2, 133,3 (q, J=33,2 Hz), 135,3, 136,9, 140,5, 174,5, 179,8, 190,8.

Пример 38

4-{5-[4-(1-гидроксиэтил)-фенил]-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил}-2-трифторметил-бензонитрил, 38а [RD116]

Смесь 37а (0,043 г, 0,1 ммоля) и сухого ТГФ (1 мл) помещают под аргоном и охлаждают до -78°C. Затем добавляют метилмагний йодид (1,1 мл, 0,1 M). Смесь перемешивают при -78°C 30 минут и медленно нагревают до комнатной температуры. Среду промывают водой (3 мл) и экстрагируют этилацетатом (10 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 95:5) для получения 38а (0,037 г, 0,082 ммоля, 82%) в виде белого порошка.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) 8 1,57 (d, J=6,5 Hz, 3Н), 1,61-1,71 (m, 1H), 2,09 (d, J=3,2 Hz, ОН), 2,16-2,28 (m, 1H), 2,52-2,60 (m, 2H), 2,63-2,69 (m, 2H), 5,00 (dd, J₁=6,5 Hz, q, J₂=3,1 Hz, 1H), 7,29 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,60 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,85 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,95-7,98 (m, 2H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 25,3, 31,5, 67,4, 69,8, 110,0, 114,9, 121,9 (q, J=272,6 Hz), 127,0 (q, J=4,7 Hz), 127,1, 129,9, 132,2, 133,4 (q, J=33,2 Hz), 134,1, 135,2, 137,1, 147,6, 174,9, 179,9.

Пример 39

Этиловый эфир 3-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-акриловой кислоты, 39а [RD117]

Смесь 37а (0,043 г, 0,1 ммоля) и (карбэтоксиэтилиден)трифенилфосфорана (0,039 г, 0,12 ммоля) в дихлорметане (2 мл) перемешивают при комнатной температуре 10 часов. концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 39а (0,048 г, 0,096 ммоля, 96%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,35 (t, J=7,1 Hz, 3Н), 1,66-1,70 (m, 1H), 2,19-2,65 (m, 1Н), 2,51-2,69 (m, 2H), 2,66-2,72 (m, 2H), 4,28 (q, J=7,1 Hz, 2H), 6,51 (d, J=16,1 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,72 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,73 (d, J=16,1 Hz, 1H), 7,85 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,96-7,98 (m, 2H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 14,3, 31,6, 60,8, 67,5, 110,0, 114,9, 120,5, 121,8 (q, J=272,6 Hz), 127,0 (q, J=4,7 Hz), 129,5, 130,5, 132,2, 133,4 (q, J=33,2 Hz), 135,2, 136,0, 136,5, 137,0, 142,7, 166,5, 174,7, 179,8.

Пример 40

4-{5-[4-(3-гидроксипропенил)-фенил]-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил}-2-трифторметилбензонитрил, 40а [RD120]

К смеси 39а (0,05 г, 0,1 ммоля) в дихлорметане (2 мл) при -78°C добавляют раствор диизобутилалюминий гидрида в ТГФ (0,11 мл, 1М, 0,11 ммоля). Смесь перемешивают при -78°C 3 часа. После нагревания до комнатной температуры смесь промывают водным раствором тиосульфата натрия и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения 40а (0,040 г, 0,089 ммоля, 89%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,57-1,68 (m, 1H), 2,17-2,39 (m, 1H), 2,55-2,61 (m, 2H), 2,61-2,67 (m, 2H), 4,39 (d, J=4,7 Hz, 2H), 6,47 (dt, J₁=16,0 Hz, J₂=5,3 Hz, 1H), 6,70 (d, J=16,0 Hz, 1H), 7,29 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,59 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,85 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,96-7,98 (m, 2H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 31,5, 63,4, 67,4, 110,0, 114,8, 120,5, 121,8 (q, J=272,6 Hz), 127,0 (q, J=4,7 Hz), 127,9, 129,2, 130,1, 131,1, 132,1, 133,4 (q, J=33,2 Hz), 135,2, 137,1, 138,4, 174,8, 179,9.

Пример 41

41-1) 3-[4-(1-цианоциклобутиламино)-фенил]-пропионовая кислота, 41а (41-1)

Триметилсилил цианид (0,4 г, 4 ммоля) добавляют по каплям к смеси 3-(4-аминофенил)-пропионовой кислоты (0,33 г, 2 ммоля), циклобутанона (0,35 г, 5 ммолей) и сульфата натрия (1 г) в 1,4-диоксане (5 мл). Смесь перемешивают 15 часов. После фильтрации для удаления сульфата натрия среду концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 50:50) для получения 41а (0,472 г, 1,93 ммоля, 97%) в виде желтоватого твердого вещества.

41-2) метиловый эфир 3-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-пропионовой кислоты, 41b (41-2) [RD128]

Смесь 1a (0,661 г, 2,9 ммоля) и 41а (0,472 г, 1,93 ммоля) в сухом ДМФ (2 мл) перемешивают при комнатной температуре 15 часов. К этой смеси добавляют метанол (10 мл) и HCl aq. (5 мл, 2М). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 41b (0,582 г, 1,19 ммоля, 62%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,60-1,70 (m, 1H), 2,14-2,26 (m, 1H), 2,51-2,56 (m, 2H), 2,58-2,67 (m, 2H), 2,71 (t, J=7,8 Hz, 2H), 3,05 (t, J=7,8 Hz, 2H), 3,69 (s, 3H), 7,23 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,41 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,85 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,98 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 30,5, 31,4, 35,1, 51,8, 67,5, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J=272,7 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 129,9, 130,0, 133,2, 132,3, 133,3 (q, J=33,2 Hz), 135,7, 137,2, 142,5, 173,1, 174,9, 179,9.

41-3) 3-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-пропионовая кислота 41с (41-3) [RD132]

Смесь 41b (0,487 г, 1 ммоль) в метаноле (10 мл) и раствора гидроксида натрия (10 мл, 2М) перемешивают при комнатной температуре 5 часов. Метанол отгоняют. рН остатка доводят до рН=5 HCl aq. (2М) и затем экстрагируют этилацетатом (3×50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄ и концентрируют досуха для получения 41с (0,472 г, 0,99 ммоля, 99%).

41-4) 3-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-пропиламид, 41d (41-4) [RD133]

К суспензии 41с (0,094 г, 0,2 ммоля) в ТГФ (10 мл) при -5°C добавляют тионилхлорид (0,019 мл, 0,26 ммоля). Среду перемешивают при -5°C в течение одного часа. Барботируют аммиак через смесь. Избыток аммиака конденсирую обратным холодильником при -78°C 30 минут и затем испаряют. Среду фильтруют. Фильтрат концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацтон, 70:30) для получения 41d (0,09 г, 0,19 ммоля, 95%) в виде желтоватого порошка.

¹H ЯМР (ацетон-d₆, 400 MHz) δ 1,52-160 (m, 1H), 2,01-2,09 (m, 1H), 2,49-2,58 (m, 4H), 2,61-2,67 (m, 2H), 2,98 (t, J=7,5 Hz, 2H), 6,20 (bs, 1H), 6,78 (bs, 1H), 7,31 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,44 (d, J=8,2 Hz, 2H), 8,03 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 8,15 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,22 (d, J=8,3 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (ацетон-d₆, 100 MHz) δ 13,4, 30,7, 31,2, 36,4, 67,5, 109,0, 114,8, 122,5 (q, J=271,5 Hz), 127,5 (q, J=4,7 Hz), 129,5, 130,0, 131,8 (q, J=32,5 Hz), 133,3, 133,8, 135,6, 138,4, 143,2, 171,6, 174,9, 178,0.

41-5) 3-{4-[7-(4-Циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-N-метил-пропионамид, 41е (41-5) [RD134]

К суспензии 41с (0,094 г, 0,2 ммоля) в ТГФ (10 мл) при -5°C добавляют тионилхлорид (0,019 мл, 0,26 ммоля). Среду перемешивают при -5°C один час. Метиламин барботируют через смесь при -5°C 30 минут. Среду фильтруют. Фильтрат концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 75:25) для получения 41е (0,092 г, 0,19 ммоля, 95%) в виде желтоватого порошка.

¹Н ЯМР (ацетон-d₆, 400 MHz) δ 1,51-1,60 (m, 1H), 2,01-2,11 (m, 1H), 2,48-2,58 (m, 4H), 2,61-2,67 (m, 2H), 2,77 (d, J=4,6 Hz, 3Н), 2,98 (t, J=7,5 Hz, 2H), 7,03 (bs, NH), 7,33 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,42 (d, J=8,2 Hz, 2H), 8,01 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 8,13 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,20 (d, J=8,3 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (ацетон-d₆, 100 MHz) 5 13,4, 25,3, 30,0, 31,2, 37,0, 67,6, 109,0, 114,8, 122,5 (q, J=271,5 Hz), 127,4 (q, J=4,7 Hz), 129,5, 130,0, 131,9 (q, J=32,5 Hz), 133,3, 133,8, 135,6, 138,4, 143,1, 171,7, 175,0, 178,0.

41-6) 3-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-N-(2-гидроксиэтил)-пропионамид, 41f (41-6) [RD135]

К суспензии 41с (0,094 г, 0,2 ммоля) в ТГФ (10 мл) при -5°C добавляют тионилхлорид (0,019 мл, 0,26 ммоля). Среду перемешивают при -5°C один час. Затем к смеси добавляют 2-аминоэтанол (0,0183 г, 0,03 ммоля) при-5°C. После перемешивания дополнительно 30 минут, среду фильтруют. Фильтрат концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 50:50) для получения 41f (0,093 г, 0,18 ммоля, 90%) в виде желтоватого порошка.

¹Н ЯМР (ацетон-d₆, 400 MHz) δ 1,51-161 (m, 1H), 2,01-2,11 (m, 1H), 2,49-2,66 (m, 6Н), 2,99 (t, J=7,5 Hz, 2H), 3,27 (dd, J₁=11,2 Hz, J₂=5,6 Hz, 3H), 3,51 (dd, J₁=11,2 Hz, J₂=5,6 Hz, 2H), 3,87 (bs, OH), 7,20 (bs, NH), 7,33 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,43 (d, J=8,2 Hz, 2H), 8,02 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 8,14 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,22 (d, J=8,3 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (ацетон-d₆, 100 MHz) δ 13,4, 31,0, 31,2, 37,1, 42,0, 61,2, 67,6, 109,0, 114,8, 122,5 (q, J=271,5 Hz), 127,4 (q, J=4,7 Hz), 129,6, 130,0, 131,9 (q, J=32,5 Hz), 133,3, 133,8, 135,6, 138,4, 143,0, 171,9, 175,0, 178,1.

42-1) 4-[4-(1-Цианоциклобутиламино)-фенил]-масляная кислота 42а

Триметилсилил цианид (0,50 г, 5 ммолей) добавляют по каплям к смеси 4-(4-аминофенил)-масляной кислоты (0,537 г, 3 ммоля), циклобутанона (0,35 г, 5 ммолей) и сульфата натрия (1 г) в 1,4-диоксане (10 мл). Смесь перемешивают 15 часов. После фильтрации для удаления сульфата натрия среду концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 50:50) для получения 42а (0,665 г, 2,58 ммоля, 86%) в виде желтоватого твердого вещества.

42-2) метиловый эфир 4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-масляной кислоты, 42b [RD129]

Смесь 1а (0,547 г, 2,4 ммоля) и 42а (0,342 г, 1,5 ммоля) в сухом ДМФ (2 мл) перемешивают при комнатной температуре 15 часов. К этой смеси добавляют метанол (10 мл) и HCl aq. (5 мл, 2М). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан) для получения 42b (0,594 г, 1,18 ммоля, 79%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,60-1,70 (m, 1H), 1,98-2,07 (m, 2H), 2,14-2,26 (m, 1H), 2,40 (t, J=7,4 Hz, 2H), 2,52-2,60 (m, 2H), 2,62-2,68 (m, 2H), 2,74 (t, J=7,4 Hz, 2H), 3,68 (s, 3H), 7,22 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,38 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,86 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,98 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 26,1, 31,4, 33,5, 34,8, 51,7, 67,5, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J=272,7 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 129,7, 130,1, 132,3, 133,0, 133,3 (q, J=33,2 Hz), 135,2, 137,2, 143,5, 173,8, 175,0, 179,9.

42-3) 4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-масляная кислота, 42с [RD141]

Смесь 42b (0,501 г, 1 ммоль) в метаноле (10 мл) и раствора гидроксида натрия (10 мл, 2М) перемешивают при комнатной температуре 5 часов. Метанол отгоняют. pH остатка регулируют до рН=5 HCl aq. (2M) и затем среду экстрагируют этилацетатом (3×50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄ и концентрируют досуха для получения 42с (0,482 г, 0,99 ммоля, 99%), структура, которого иллюстрируется формулой 5.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,60-1,70 (m, 1H), 1,98-2,07 (m, 2H), 2,14-2,26 (m, 1H), 2,45 (t, J=7,3 Hz, 2H), 2,51-2,59 (m, 2H), 2,62-2,68 (m, 2H), 2,77 (t, J=7,3 Hz, 2H), 7,23 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,40 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,85 (dd, J=8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,97 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 25,9, 31,4, 33,4, 34,7, 67,5, 109,9, 114,9. 121,9 (q, J=272,6 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 129,8, 130,1, 132,3, 133,0, 133,4 (q, J=33,1 Hz), 135,2, 137,2, 143,3, 174,9, 178,9, 179,9.

42-4) 4-{4-[7-(4-Циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-бутирамид, 42d [RD130]

К суспензии 42с (0,097 г, 0,2 ммоля) в ТГФ (10 мл) при -5°C добавляют тионилхлорид (0,019 мл 0,26 ммоля). Среду перемешивают при -5°C один час. Затем барботируют через смесь. Избыток аммиака конденсируют обратным холодильником при -78°C 30 минут и затем отгоняют. Среду фильтруют. Фильтрат концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 70:30) для получения 42d (0,093 г, 0,19 ммоля, 95%) в виде желтоватого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,57-1,70 (m, 1H), 2,00-2,08 (m, 2H), 2,16-2,25 (m, 1H), 2,31 (t, J=7,3 Hz, 2H), 2,51-2,59 (m, 2H), 2,62-2,68 (m, 2H), 2,77 (t, J=7,3 Hz, 2H), 5,56 (bs, 1H), 5,65 (bs, 1H), 7,22 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,39 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,85 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,97 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 26,5, 31,4, 34,8, 35,0, 67,5, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J=272,7 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 129,8, 130,1, 132,2, 133,0, 133,3 (q, J=33,2 Hz), 135,2, 137,2, 143,5, 173,8, 174,9, 179,9.

42-5) 4-{4-[7-(4-Циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-N-метил-бутирамид, 42е [RD131]

К суспензии 42с (0,097 г, 0,2 ммоля) в ТГФ (10 мл) при -5°C добавляют тионилхлорид (0,019 мл, 0,26 ммоля). Среду перемешивают при -5°C один час. Затем барботируют метиламин через смесь при -5°C 30 минут. Среду фильтруют. Фильтрат концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 75:25) для получения 42е (0,095 г, 0,19 ммоля, 95%) в виде желтоватого порошка.

¹НЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,52-1,64 (m, 1H), 1,94-2,01 (m, 2H), 2,10-2,17 (m, 1H), 2,20 (t, J=7,3 Hz, 2H), 2,46-2,62 (m, 4H), 2,69 (t, J=7,3 Hz, 2H), 2,73 (d, J=4,7 Hz, 3H), 6,09 (bs, 1H), 7,16 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,33 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,82 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,91 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,94 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 26,2, 26,8, 31,4, 35,0, 35,7, 67,5, 109,7, 114,9, 121,9 (q, J=272,7 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 129,7, 130,0, 132,3, 133,8, 133,3 (q, J=33,2 Hz), 135,2, 137,3, 143,7, 173,3, 174,9, 179,8.

42-6) N-(4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]фенил}-бутаноил)-метансульфонамид, 42f [RD157]

Смесь 4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]фенил}масляной кислоты (42с) (0,049 г, 0,1 ммоля), 2,4,6-трихлорбензоил хлорид (0,244 г, 1 ммоль), 4-диметиламинопиридин (0,122 г, 1 ммоль) и метансульфонамид (0,019 г, 0,2 ммоля) в дихлорметане перемешивают при комнатной температуре 20 часов. Смесь концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 80:20) для получения N-(4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]фенил}-бутаноил)-метансульфонамид (42f) [RD157] (0,053 г, 0,094 ммоля, 94%), в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 8.

¹Н ЯМ/Р (ацетон-d₆, 400 MHz) δ 1,51-160 (m, 1H), 1,96-2,11 (m, 3H), 2,49 (t, J=7,3 Hz, 2H), 2,51-2,57 (m, 2H), 2,61-2,67 (m, 2H), 2,75 (t, J=7,5 Hz, 2H), 2,94 (bs, 1H), 3,24 (s, 3H), 7,33 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,43 (d, J=8,2 Hz, 2H), 8,02 (dd, J=8,3, 1,6 Hz, 1H), 8,02 (d, J=1,6 Hz, 1H), 8,21 (d, J=8.3 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (ацетон-d₆, 100 MHz) δ 13,4, 25,8, 31,2, 34,3, 35,2, 40,6, 67,6, 109,0, 114,8, 122,5 (q, J=271,5 Hz), 127,5 (q, J=4,9 Hz), 129,6, 130,1, 131,9 (q, J=33,6 Hz), 133,3, 133,9, 135,6, 138,4, 143,1, 171,9, 175,0, 180,5.

42-7) N-метил-4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-6,8-диоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}бутирамид, 42g [RD158]

Пероксид водорода (30%, 0,4) добавляют по каплям к раствору N-метил-4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]фенил}бутанамида (42е) (0,032 г, 0,064 ммоля) в ледяной уксусной кислоте (0,5 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре 5 часов и затем промывают водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над сульфатом магния, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 80:20) для получения N-метил-4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-6,8-диоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}бутирамида (42g) [RD158] (0,029 г, 0,06 ммоля, 94%), в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 9.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,63-1,71 (m, 1H), 1,93-2,04 (m, 2H), 2,18-2,27 (m, 3H), 2,44-2,53 (m, 2H), 2,57-2,65 (m, 2H), 2,70 (t, J=7,3 Hz, 2H), 2,79 (d, J=4,8 Hz, 3H), 5,79 (bs, 1H), 7,21 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,34 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,92 (d, J=8,4 Hz, 1H), 8,03 (dd, J=8,3, 1,8 Hz, 1H), 8,18 (d, J=1,8 Hz, 1H).

Пример 43

43-1) трет-бутиловый эфир 4-(4-аминофенил)-пиперазин-1-карбоновой кислоты, 43а

Смесь 4-йоданилина (0,654 г, 3 ммоля), трет-бутиловый эфир пиперазин-1-карбоновой кислоты (0,67 г, 3,6 ммоля), фосфат калия (1,272 г, 6 ммолей), этиленгликоль (0,33 мл) и йодид меди (0,03 г, 0,15 ммоля) в 2-пропаноле (3 мл) помещают под аргоном в запаянную трубку и нагревают до 80°C 30 часов. После охлаждения до комнатной температуры, среду промывают водой (50 мл) и экстрагируют этилацетатом (100 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 70:30) для получения (0,36 г, 1,3 ммоля, 43%) в виде желтого порошка.

43-2) трет-бутиловый эфир 4-[4-(1-цианоциклобутиламино)фенил]-пиперазин-1-карбоновой кислоты, 43b

Триметилсилил цианид (0,3 г, 3 ммоля) добавляют по каплям к смеси 43а (0,415 г, 1,5 ммоля), циклобутанона (0,21 г, 3 ммоля) и сульфата натрия (1 г) в дихлорметане (5 мл). Смесь перемешивают 15 часов. После фильтрации для удаления сульфата натрия среду концентрируют в вакууме для получения коричневой жидкости, которую хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 75:25) для получения 43b (0,448 г, 1,26 ммоля, 84%) в виде желтого твердого вещества.

43-3) трет-бутиловый эфир 4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-имино-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-пиперазин-1-карбоновой кислоты, 43с [RD139]

и трет-бутиловый эфир 4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-(4-циано-3-трифтрометил-фенилтиокарбамоилимино)-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-пиперазин-1-карбоновой кислоты, 43d [RD140]

Смесь 1а (0,228 г, 1 ммоль) и 43b (0,472 г, 0,63 ммоля) в сухом ДМФ (1 мл) перемешивают при комнатной температуре 20 часов. Смесь концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 90:10) для получения 43с (0,173 г, 0,296 ммоля, 47%), в виде желтоватого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 10, и 43d (0,169 г, 0,21 ммоля, 33%), в виде желтого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 11.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,48, (s, 9H), 1,57-1,67 (m, 1H), 2,01-2,09 (m, 1H), 2,59-2,70 (m, 4H), 3,25 (t, J=5,1 Hz, 4H), 3,59 (t, J=4,9 Hz, 4H), 7,02 (d, J=8,9 Hz, 2H), 7,20 (d, J=8,9 Hz, 2H), 7,81 (d, J=7,4 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,97 (d, J=8,1 Hz, 1H).

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,48, (s, 9H), 1,57-1,64 (m, 1H), 2,01-2,10 (m, 1H), 2,60-2,89 (m, 4H), 3,24 (t, J=5,1 Hz, 4H), 3,57 (t, J=4,9 Hz, 4H), 7,02 (d, J=8,9 Hz, 2H), 7,20 (d, J=8,9 Hz, 2H), 7,54-7,98 (m, 4H), 7,97 (d, J=8,1 Hz, 1H).

43-4) 4-[8-Оксо-5-(4-пиперазин-1-ил-фенил)-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил]-2-трифторметилбензонитрил, 43е [RD137]

Смесь 43с (0,117 г, 0,2 ммоля), метанола (5 мл) и HCl aq. (2 мл, 2М) кипятят с обратным холодильником 2 часа. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь BbinndiOT в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 50:50 и затем метанол: ацетон, 50:50) для получения 43е (0,089 г, 0,184 ммоля, 92%) в виде белого порошка.

¹НЯМР (CD₃OD, 400 MHz) δ 1,51-1,61 (m, 1H), 2,01-2,11 (m, 1H), 2,48-2,59 (m, 4H), 2,90-2,97 (m, 4H), 3,25-3,30 (m, 4H), 7,03 (d, J=8,9 Hz, 2H), 7,16 (d, J=8,9 Hz, 2H), 7,86 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 8,02 (d, J=8,3 Hz, 1H), 8,07 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (СD₃ОD, 100 MHz) δ 13,2, 30,9, 45,1, 48,9, 67,5, 108,9, 114,8, 115,9, 122,3 (q, J=271,7 Hz), 126,4, 127,3 (q, J=4,7 Hz), 130,4, 132,2 (q, J=33,2 Hz), 133,0, 135,4, 138,1, 152,1, 175,4, 180,4.

43-5) 4-{5-[4-(4-метансульфонилпиперазин-1-ил)-фенил]-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил}-2-трифторметилбензонитрил, 43f [RD138]

Смесь 43е (0,049 г, 0,1 ммоля), метансульфонил хлорида (0,012 мл, 0,15 ммоля) и триэтиламина (0,15 мл) в дихлорметане перемешивают при комнатной температуре 5 часов. Среду фильтруют. Фильтрат концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения 43f (0,042 г, 0,074 ммоля, 74%) в виде белого порошка.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,62-1,70 (m, 1H), 2,14-2,23 (m, 1H), 2,51-2,58 (m, 2H), 2,61-2,67 (m, 2H), 2,84 (s, 3H), 3,39 (s, 8H), 7,05 (d, J=8,9 Hz, 2H), 7,20 (d, J=8,9 Hz, 2H), 7,84 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,97 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 31,4, 34,6, 45,7, 48,4, 67,5, 109,8, 114,9, 117,0, 121,9 (q, J=272,7 Hz), 126,8, 127,1 (q, J=4,7 Hz), 130,7, 132,3, 133,4 (q, J=33,2 Hz), 135,2, 137,3, 151,1, 175,0, 180,2.

Пример 44

44-1) 3-{4-[7-(4-Циано-3-трифторметил-фенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-акриловая кислота, 44а

Смесь 39а (0,025 г, 0,05 ммоля) в метаноле (2 мл) и раствора гидроксида натрия (2 мл, 2М) перемешивают при комнатной температуре 5 часов. Метанол отгоняют. рН остатка доводят до рН=5 HCl aq. (2М) и затем экстрагируют этилацетатом (3×50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄ и концентрируют досуха для получения 44а (0,02 г, 0,042 ммоля, 85%).

44-2) 3-{4-[7-(4-Циано-3-трифторметил-фенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-акриламид, 44b [RD119]

К суспензии 44b (0,02 г, 0,042 ммоля) в ТГФ (1 мл) при -5°C добавляют тионилхлорид (0,007 мл, 0,1 ммоля). Среду перемешивают при -5°C один час. Затем барботируют аммиак через смесь. Избыток аммиака конденсируют обратным холодильником при -78°C 30 минут, затем испаряют. Среду фильтруют. Фильтрат концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 70:30) для получения 44b (0,014 г, 0,03 ммоля, 71%) в виде желтоватого порошка.

¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, 400 MHz) δ 1,49-1,52 (m, 1H), 1,88-1,93 (m, 1H), 2,37-2,46 (m, 2H), 2,57-2,62 (m, 2H), 6,66 (d, J=15,9 Hz, 1H), 7,16 (bs, 1H), 7,43 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,47 (d, J=15,9 Hz, 1H), 7,58 (bs, 1H), 8,03 (dd, J₁=8,3 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 8,23 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,34 (d, J=8,3 Hz, 1H).

Пример 45 [RD145]

Триметилсилил цианид (0,4 г, 4 ммоля) добавляют по каплям к смеси гидрохлорида 4-метансульфонилфениламина (0,415 г, 2 ммоля), циклобутанона (0,28 г, 4 ммоля) и сульфата натрия (1 г) в ДМФ (3 мл). Смесь перемешивают 15 часов при 120°C. После фильтрации для удаления сульфата натрия фильтрат промывают раствором хлорида натрия и экстрагируют этилацетатом. Органический слой концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 90:10) для получения 1-(4-метансульфонилфениламино)циклобутанкарбонитрила (45а) (0,116 г, 0,44 ммоля, 22%) в виде желтоватого твердого вещества. Также выделяют 4-метансульфонилфениламин (0,201 г, 1,17 ммоля, 59%).

Смесь 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрила (1а) (0.0141 г, 0,62 ммоля) и 1-(4-метансульфонилфениламино)циклобутанкарбонитрила (45а) (0,11 г, 0,42 ммоля) в сухом ДМФ (2 мл) перемешивают при комнатной температуре 3 дня. К смеси добавляют метанол (10 мл) и aq. 2N HCl (5 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют водой (3×30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 97:3) 4-[5-(4-метансульфонилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3,4]окт-7-ил]-2-трифторметилбензонитрила (45b) [RD145] (0,031 г, 0,065 ммоля, 15%), в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 14.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,63-1,72 (m, 1H), 2,21-2,28 (m, 1H), 2,46-2,54 (m, 2H), 2,68, 2,74 (m, 2H), 3,16 (s, 3H), 7,57 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,85 (dd, J=8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J=8,3 Hz, 1H), 8,17 (d, J=8,3 Hz, 2H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,6, 31,8, 44,4, 67,5, 110,2, 114,8, 122,4 (q, J=271,5 Hz), 127,0 (q, J=4,9 Hz), 129,4, 131,4, 132,1, 133,6 (q, J=33,3 Hz), 135,3, 136,8, 140,3, 141,8, 174,4, 179,9.

Пример 46

Триметилсилил цианид (0,69 г, 7 ммолей) добавляют по каплям к смеси 4-аминофенилуксусной кислоты (0,755 г, 5 ммолей) и циклобутанона (0,49 г, 7 ммолей) в диоксане (20 мл). Смесь перемешивают 8 часов при 80°C. Смесь концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 60:40) для получения [4-(1-цианоциклобутиламино)фенил]уксусной кислоты (46а) (1,138 г, 4,95 ммоля, 99%) в виде белого твердого вещества.

46-1) RD146

Смесь 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрила (1а) (0,638 г, 2,8 ммоля) и [4-(1-цианоциклобутиламино)фенил] уксусной кислоты (46а) (0,46 г, 2,0 ммоля) в ДМФ (5 мл) перемешивают при комнатной температуре 15 часов. К этой смеси добавляют метанол (20 мл) и aq. 2N HCl (10 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (чистый дихлорметан и затем дихлорметан: ацетон, 95:5) для получения метилового эфира {4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]фенил}уксусной кислоты (46b) [RD146] (0,532 г, 1,124 ммоля, 56%) в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 15.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,60-1,69 (m, 1H), 2,15-2,25 (m, 1H), 2,50-2,58 (m, 2H), 2,61-2,66 (m, 2H), 3,72 (bs, 5H), 7,27 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,50 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J=8,3,1,8 Hz, 1H), 7,94 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,97 (d, J=1,6 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 31,4, 44,7, 52,3, 67,4, 109,9, 114,9, 122,0 (q, J=272,5 Hz), 127,0 (q, J=4,9 Hz), 130,0, 131,1, 132,3, 133,0 (q, J=33,3 Hz), 134,1, 135,2, 135,9, 137,2, 171,4, 174,9, 179,9.

46-2) RD147

Смесь метилового эфира {4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]фенил}уксусной кислоты (46b) (0,095 г, 0,2 ммоля) и раствора гидроксида натрия (1 мл, 2М) в метаноле (2 мл) перемешивают при комнатной температуре 2 часа. Метанол отгоняют. рН остатка доводят до рН 5 aq. 2М HCl и затем смесь экстрагируют этилацетатом (3×10 мл). Органический слой сушат над MgSO₄ и концентрируют досуха для получения {4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]фенил}уксусной кислоты (46с) [RD147] (0,087 г, 0,19 ммоля 95%), структура которого иллюстрируется формулой 16.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,60-1,69 (m, 1H), 2,15-2,25 (m, 1H), 2,50-2,64 (m, 4H), 3,73 (s, 2H), 7,26 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,51 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J=8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,96 (d, J=1,6 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 31,4, 40,2, 40,8, 67,4, 109,9, 114,9, 122,0 (q, J=272,5 Hz), 127,0 (q, J=4,9 Hz), 129,9, 131,2, 132,3, 133,3 (q, J=33,3 Hz), 133,9, 135,2, 136,1, 137,2, 174,1, 174,9, 179,9.

46-3) RD148

Тионилхлорид (0,238 г, 2 ммоля) добавляют по каплям к смеси {4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]фенил}уксусной кислоты (46с) (0,357 г, 0,777 ммоля) в ТГФ (5 мл) охлаждают до 0°C. Смесь перемешивают при комнатной температуре 1 час и затем барботируют аммиак через смесь. Избыток аммиака конденсируют холодильником при -78°C 30 минут и затем отгоняют. Среду фильтруют и фильтрат концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 70:30) для получения 2-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]фенил}ацетамида (46d) [RD148] (0,345 г, 0,75 ммоля, 97%), в виде желтоватого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 17.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,62-1,66 (m, 1H), 2,18,2,23 (m, 1H), 2,49-2,55 (m, 2H), 2,61-2,66 (m, 2H), 3,63 (s, 2H), 5,91 (bs, 1H), 6,10 (bs, 1H), 7,27 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,50 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,83 (dd, J=8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,96 (d, J=1,6 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 31,5, 42,5, 67,4, 109,9, 114,9, 121,9 (q, J=272,4 Hz), 127,1 (q, J=4,9 Hz), 130,2, 131,1, 132,2, 133,3 (q, J=33,3 Hz), 134,1, 135,2, 136,8, 137,2, 172,8, 174,8, 180,0.

46-4) RD149

Тионилхлорид (0,238 г, 2 ммоля) добавляют по каплям к смеси {4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]фенил}уксусной кислоты (46с) (0,357 г, 0,777 ммоля) в ТГФ (5 мл) охлажденном до 0°C. Смесь перемешивают 1 час при комнатной температуре и затем в смесь добавляют метиламин (0,5 мл). Смесь перемешивают дополнительно 2 часа. Среду фильтруют и фильтрат концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 80:20) для получения N-метил-2-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил] фенил }ацетамида (46е) [RD149] (0,348 г, 0,738 ммоля 95%), в виде желтоватого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 18.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,61-1,70 (m, 1H), 2,17-2,31 (m, 1H), 2,50-2,56 (m, 2H), 2,61-2,68 (m, 2H), 2,82 (d, J=4,8 Hz, 3Н), 3,62 (s, 2H), 7,27 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,50 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J=8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,96 (d, J=1,6 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7,26,6, 31,5,43,1, 67,4, 110,0, 114,9, 122,0 (q, J=272,5 Hz), 127,1 (q, J=4,9 Hz), 130,2, 131,0, 132,2, 133,3 (q, J=33,3 Hz), 134,1, 135,2, 137,0, 137,1, 170,1, 174,8, 179,9.

Пример 47

N-{4-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксо-имидазолидин-1-ил]фенил}метансульфонамид (47а) [RD150]

Смесь 4-[3-(4-аминофенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил (2d) (0,02 г, 0,05 ммоля), метансульфонил хлорида (0,009 г, 0,075 ммоля) и пиридина (0,006 г, 0,075 ммоля) в дихлорметане (1 мл) перемешивают 15 часов при комнатной температуре. Среду промывают водой (2 мл) и экстрагируют этилацетатом (5 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (HPLC, колонка с оксидом алюминия) для получения N-{4-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксо-имидазолидин-1-ил]фенил}метансульфонамида (47а) [RD150] (0,009 г, 0,018 ммоля, 36%), в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 2.

¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, 400 MHz) δ 1,46 (s, 6H), 3,07 (s, 3H), 7,32 (s, 4H), 8,05 (dd, J=8,2, 1,2 Hz, 1H), 8,26 (d, J=1,2 Hz, 1H), 8,35 (d, J=8,2 Hz, 1H), 10,08 (bs, 1H); ¹³C ЯМР (ДМСО-d₆, 100 MHz) δ 23,3, 40,4, 66,7, 109,0, 115,5, 119,9, 122,6 (q, J=272,2 Hz), 128,5 (q, J=4,7 Hz), 130,8, 131,2, 131,5 (q, J=32,3 Hz), 134,5, 136,6, 138,6, 139,5, 175,4, 180,4.

Пример 48

N-{4-[3-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксо-имидазолидин-1-ил]фенил}ацетамид, 48а, [RD151]

Смесь 4-[3-(4-аминофенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрила (2d) [RD9] (0,008 г, 0,02 ммоля) ацетил хлорида (0,004 г, 0,03 ммоля) и триэтиламина (0,003 г, 0,03 ммоля) в дихлорметане (1 мл) перемешивают при 0°C 2 часа. Смесь концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 90:10) для получения N-{4-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксо-имидазолидин-1-ил] фенил} ацетамида, 48а, [RD151] (0,007 г, 0,016 ммоля, 80%), в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 3.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,58 (s, 6H), 2,21 (s, 3H), 7,24 (d, J=8,6 Hz, 2H), 7,48 (bs, 1H), 7,69 (d, J=8,6 Hz, 2H), 7,83 (dd, J=8,2, 1,9 Hz, 1H), 7,96 (d, J=1,2 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,2 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 23,6, 53,4, 66,4, 110,0, 114,8, 120,7, 122,6 (q, J=272,2 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 129,1, 130,2, 132,2, 133,5 (q, J=32,3 Hz), 135,2, 137,1, 139,2, 168,1, 175,0, 180,0.

Пример 49

Концентрированную серную кислоту медленно добавляют к смеси 4-аминобензойной кислоты (4 г, 29,2 ммоля) в метаноле, охлажденном до 0°C. После добавления смесь перемешивают при комнатной температуре 5 часов. Смесь промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над MgSO₄ и концентрируют в вакууме для получения метилового эфира 4-аминобензойной кислоты (49а) (4,22 г, 27,9 ммоля, 96%) в виде желтоватого твердого вещества.

Смесь метилового эфира 4-аминобензойной кислоты (0,32 г, 2,12 ммоля) ацетон циангидрина (3 мл) и сульфата натрия (1 г) кипятят с обратным холодильником 15 часов. После фильтрации для удаления сульфата натрия, фильтрат промывают раствором хлорида натрия и экстрагируют этилацетатом. Органический слой концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 60:40) для получения метилового эфира 4-[(цианодиметилметил)-амино]-бензойной кислоты (49b) (0,398 г, 1,95 ммоля, 92%) в виде белого твердого вещества.

49-1) RD152

Смесь 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрил (1а) (0,228 г, 1 ммоль) и метиловый эфир 4-[(пианодиметилметил)-амино]-бензойной кислоты (49b) (0,14 г, 0,64 ммоля) в ДМФ (2 мл) нагревают микроволновым облучением до 60°C 12 часов. К этой смеси добавляют метанол (6 мл) и aq. 2N HCl (2 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан; дихлорметан:ацетон, 75:25) для получения метилового эфира 4-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксо-имидазолидин-1-ил]бензойной кислоты (49с) [RD152] (0,18 г, 0,4 ммоля, 63%), в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 19.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,60 (s, 6H), 3,95 (s, 3H), 7,40 (d, J=8,6 Hz, 2H), 7,84 (dd, J=8,2, 1,9 Hz, 1H), 7,96 (d, J=1,2 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,2 Hz, 1H), 8,21 (d, J=8,6 Hz, 2H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 23,8, 52,6, 66,6, 110,3, 114,8, 121,9 (q, J=272,7 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 129,8, 131,2, 131,4, 132,2, 133,5 (q, J=32,3 Hz), 135,3, 137,0, 139,2, 165,9, 174,7, 179,7.

49-2) RD153

Смесь метилового эфира 4-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксо-имидазолидин-1-ил]бензойной кислоты (49 с) (0,02 г, 0,0435 ммоля) и метиламина (2 мл, отогнанного из его 40% водного раствора) выдерживают при -20°C 15 часов. После испарения метиламина смесь хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 80:20) для получения 4-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксо-имидазолидин-1-ил]-N-метилбензамид (49d) [RD153] (0,01 г, 0,0224, 51%), структура которого иллюстрируется формулой 20. Также получен 4-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксо-имидазолидин-1-ил]бензойной кислоты (49с) (0,08 г, 0,0179 ммоля, 41%).

¹H ЯМР (Ацетон-d₆, 400 MHz) δ 1,60 (s, 6H), 2,90 (d, J=4,6 Hz, 3H), 7,48 (d, J=8,6 Hz, 2H), 7,80 (bs, 1H), 7,99 (d, J=8,6 Hz, 2H), 8,06 (dd, J=8,2, 1,8 Hz, 1H), 8,18 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,25 (d, J=8,2 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (Ацетон-d₆, 100 MHz) δ 23,8, 54,0, 66,5, 110,3, 114,8, 121,9 (q, J=272,7 Hz), 127,1 (q, J=4,7 Hz), 128,2, 129,9, 133,5 (q, J=32,3 Hz), 135,7, 135,8, 138,2, 138,3, 139,2, 166,0, 174,9, 179,7.

Пример 50

50-1) RD154

Смесь 4-[8-(4-гидроксиметилфенил)-5-оксо-7-тиоксо-6-азаспиро[3.4]окт-6-ил]-2-трифторметил-бензонитрила (36b) (0,086 г, 0,2 ммоля) и ангидрида метансульфонила (0,07 г, 0,4 ммоля) в дихлорметане (1 мл) перемешивают при комнатной температуре 15 часов. Смесь концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацтеон, 98:2) для получения 4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]фенилметилового эфира метансульфоновой кислоты (50а) [RD154] (0,089 г, 0,175 ммоля, 88%), в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 22.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,63-1,70 (m, 1H), 2,17-2,31 (m, 1H), 2,48-2,57 (m, 2H), 2,64-2,70 (m, 2H), 3,04 (s, 3H), 5,30 (s, 2H), 7,37 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,62 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J=8,3,1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,98 (d, J=1,6 Hz, 1H).

50-2) RD155

Метиламин (0,5 мл) барботируют через смесь 4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]фенилметилового эфира метансульфоновой кислоты (50а) (0,059 г, 0,015 ммоля) в ТГФ (3 мл), охлажденного до -78°C. После 1 часа проведения реакции при -78°C, смесь концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацтеон, 95:5; метанол) для получения 4-[5-(4-метиламинометилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил]-2-трифторметилбензонитрила (50b) [RD155] (0,042 г, 0,095 ммоля, 82%), в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 23.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,57-1,70 (m, 1H), 2,16-2,24 (m, 1H), 2,52 (s, 3H), 2,53-2,57 (m, 2H), 2,60-2,68 (m, 2H), 3,85 (s, 2H), 7,27 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,55 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J=8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,97 (d, J=1,6 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 31,5, 36,4, 55,6, 67,4, 110,0, 114,9, 122,0 (q, J=272,5 Hz), 127,0 (q, J=4,9 Hz), 129,1, 129,6, 129,8, 132,2, 133,3 (q, J=33,3 Hz), 133,7, 135,2, 142,4, 174,8, 179,9.

50-3) RD156

Смесь 4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]фенилметилового эфира метансульфоновой кислоты (50а) (0,02 г, 0,039 ммоля) и диметиламина (0,5 мл; отогнанного из его 40% водного раствора) в ТГФ (1 мл) перемешивают 2 часа при -78°C. смесь концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 95:5; ацетон) для получения 4-[5-(4-диметиламинометилфенил)-8-оксо-6-тиокср-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил]-2-трифторметилбензонитрила (50с) [RD156] (0,017 г, 0,037 ммоля, 95%), в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 24.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,57-1,70 (m, 1H), 2,16-2,24 (m, 1H), 2,32 (s, 6H), 2,55-2,60 (m, 2H), 2,63-2,69 (m, 2H), 3,53 (s, 2H), 7,27 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,55 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J=8,3, 1,8 Hz, 1H), 7,95 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,97 (d, J=1,6 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 31,5, 45,5, 63,7, 67,4, 110,0, 114,9, 122,0 (q, J=272,5 Hz), 127,0 (q, J=4,9 Hz), 129,1, 129,6, 129,8, 132,2, 133,3 (q, J=33,3 Hz), 133,7, 135,2, 142,4, 174,8, 179,9.

Пример 51

Цианид натрия (0,245 г, 5 ммолей) добавляют к смеси 4-аминобензойной кислоты (0,274 г, 2 ммоля) и циклобутанона (0,21 г, 3 ммоля) в 90% уксусной кислоте (4,5 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 15 часов. Смесь промывают водной HCl (рН 2) и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над сульфатом магния и концентрируют досуха в вакууме для получения 4-(1-цианоциклобутиламино)бензойной кислоты) (51а) (0,426 г, 1,97 ммоля, 99%) в виде твердого белого вещества.

51-1) RD159 и RD160

Смесь 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрила (1а) (0,51 г, 2,22 ммоля) и 4-(1-цианоциклобутиламино)бензойной кислоты (51а) (0,343 г, 1,59 ммоля) в ДМФ (2 мл) нагревают микроволновым облучением до 60°C и перемешивают 16 часов. К этой смеси добавляют метанол (10 мл) и aq. 2M HCl (5 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 12 часов. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения метилового эфира 4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]бензойной кислоты (51b) [RD159] (0,09 г, 0,196 ммоля, 12%), в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 25, и N-(3-циано-4-трифторметилфенил)-4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]бензамида (51b') [RD160] (0,28 г, 0,45 ммоля, 29%), в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 26.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,67-1,71 (m, 1H), 2,20-2,26 (m, 1H), 2,49-2,57 (m, 2H), 2,66-2,73 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 7,42 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,85 (dd, J=8,3, 1,7 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,98 (d, J=1,7 Hz, 1H), 8,26 (d, J=8,3 Hz, 2H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,7, 31,6, 52,6, 67,5, 110,1, 114,8, 121,8 (q, J=272,7 Hz), 127,0 (q, J=4,7 Hz), 130,2, 131,4, 131,5, 132,2, 133,4 (q, J=33,2 Hz), 135,2, 137,0, 139,2, 165,9, 174,6, 179,7.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,67-1,71 (m, 1H), 2,18-2,26 (m, 1H), 2,50-2,58 (m, 2H), 2,68-2,74 (m, 2H), 7,47 (d, J=8,5 Hz, 2H), 7,83 (d, J=8,7 Hz, 1H), 7,84 (dd, J=8,3, 1,9 Hz, 1H), 7,96 (d, J=8,0 Hz, 1H), 9,97 (d, J=1,9 Hz, 1H), 8,10-8,14 (m, 3H), 8,21 (d, J=1,9 Hz, 1H), 8,88, (s, 1H).

51-2) RD161

Смесь метилового эфира 4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]бензойной кислоты (51b) (0,046 г, 0,1 ммоля) и метиламина (1 мл отогнанного из его 40% водного раствора) выдерживают при -20°C 15 часов. После испарения метиламина смесь хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 80:20) для получения N-метил-4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]бензамида (51с) [RD161] (0,041 г, 0,085, 84%), структура которого иллюстрируется формулой 27.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,63-1,70 (m, 1H), 2,18-2,26 (m, 1H), 2,48-2,56 (m, 2H), 2,65-2,71 (m, 2H), 3,05 (d, J=4,8 Hz, 3H), 6,32 (bs, 1H), 7,39 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,84 (dd, J=8,3, 1,7 Hz, 1H), 7,95-7,98 (m, 4H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,6, 27,0, 31,6, 67,4, 110,3, 114,8, 121,8 (q, J=272,7 Hz), 127,0 (q, J=4,7 Hz), 128,7, 130,3, 132,1, 133,3 (q, J=33,2 Hz), 135,2, 136,3, 137,0, 137,8, 167,2, 174,6, 179,8.

Пример 52 [RD162]

Тионил хлорид (2,38 г, 20 ммолей) добавляют по каплям к раствору 2-фтор-4-нитробензойной кислоты (2,97 г, 16 ммолей) в ДМФ (50 мл), охлажденном до -5°C. Смесь дополнительно перемешивают 1 час при -5°C. Метиламин (0,62 г, 20 ммолей; свежеотогнанного из его 40% водного раствора) добавляют к реакционной смеси. Вторую смесь перемешивают дополнительно 1 час. К смеси добавляют этилацетат (300 мл), которую промывают раствором хлорида натрия (3×150 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, и концентрируют для получения N-метил-2-фтор-4-нитробензамида (52а) (2,89 г, 14,6 ммоля, 91%) в виде желтого твердого вещества. ¹Н ЯМР (Ацетон d6, 400 MHz) δ 3,05 (d, J=4,3 Hz, 3Н), 6,31 (dd, J=13,5, 2,1 Hz, 1H), 6,40 (dd, J=8,5, 2,1 Hz, 1H), 7,64 (dd, J=8,6, 8,6 Hz, 1H).

Смесь N-метил-2-фтор-4-нитробензамида (52а) (2,89 г, 14,6 ммоля) и железа (5,.04 г, 90 ммолей) в этилацетате (40 мл) и уксусной кислоты (40 мл) кипятят с обратным холодильников 1 час. Твердые частицы отфильтровывают. Фильтрат промывают водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан: ацетон, 95:5) для получения N-метил-2-фтор-4-аминобензамида (52b) (2,3 г, 13,7 ммоля, 94%) в виде желтоватого твердого вещества. ¹Н ЯМР (ацетон-d₆, 400 MHz) δ 2,86 (d, J=4,3 Hz, 3Н), 5,50 (bs, 2H), 6,37 (dd, J₁=14,7 Hz, J₂=2,1 Hz, 1H), 6,50 (dd, J=8,5, 2,1 Hz, 1H), 7,06 (bs, 1H), 7,68 (dd, J=8,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (ацетон-d₆, 100 MHz) δ 25,8, 99,6 (d, J=13,8 Hz), 109,2 (d, J=12,8 Hz), 110,0 (d, J=1,6 Hz), 132,5 (d, J=4,8 Hz), 153,5 (d, J=12,6 Hz), 162,2 (d, J=242,5 Hz), 164,0 (d, J=3,1 Hz).

Цианид натрия (1,47 г, 30 ммолей) добавляют к смеси N-метил-2-фтор-4-аминобензамида (52b) (1,68 г, 10 ммолей) и циклобутанона (1,4 г, 20 ммолей) в 90% уксусной кислоте (20 мл). Реакционную смесь перемешивают при 80°C 24 часа. Смесь промывают водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над сульфатом магния и концентрируют досуха в вакууме. Твердое вещество промывают смесью 50:50 этилацетата и гексана (10 мл) для удаления циклобутанон циангидрина для получения после фильтрации N-метил-4-(1-цианоциклобутиламино)-2-фторбензамида (52с) (2,19 г, 8,87 ммоля, 89%). ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,87-1,95 (m, 1H), 2,16-2,27 (m, 1H), 2,35-2,41 (m, 2H), 2,76-2,83 (m, 2H), 2,97 (d, J=4,4 Hz, 3Н), 4,68 (bs, 1H), 6,29 (dd, J=14,3, 1,8 Hz, 1H), 6,48 (dd, J=8,3, 1,8 Hz, 1H), 6,75 (q, J=4,4 Hz, 1H), 7,90 (dd, J=8,3, 8,3 Hz, 1H); ¹³С ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 15,7, 26,7, 33,9, 49,4, 100,2 (d, J=29,5 Hz), 110,6, 111,0 (d, J=11,8 Hz), 133,1 (d, J=4,2 Hz), 148,4 (d, J=12,0 Hz), 162,0 (d, J=244,1 Hz), 164,4 (d, J=3,6 Hz).

Смесь 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрила (1a) (2,16 г, 9,47 ммоля) и N-метил-4-(1-цианоциклобутиламино)-2-фторбензамида (52 с) (1,303 г, 5,27 ммоля) в ДМФ (20 мл) нагревают облучением микроволнами до 80°C 16 часов. К этой смеси добавляют метанол (50 мл) и aq. 2N HCl (20 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 3 часа. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (100 мл) и экстрагируют этилацетатом (150 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения N-метил-4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диаза-спиро[3.4]окт-5-ил]-2-фторбензамида (52d) [RD162] (1,43 г, 3,0 ммоля, 57%), в виде желтого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 28.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,65-1,75 (m, 1H), 2,18-2,30 (m, 1H), 2,49-2,57 (m, 2H), 2,67-2,73 (m, 2H), 3,07 (d, J=4,4 Hz, 3H), 6,75 (q, J=4,6 Hz, 1H), 7,17 (dd, J=11,5, 1,9 Hz, 1H), 7,26 (dd, J=8,3, 1,9 Hz, 1H), 7,83 (dd, J=8,2, 2,0 Hz, 1H), 7,95 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,3 Hz, 1H) 8,30 (dd, J=8,3, 8,3 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,6, 27,0, 31,7, 67,4, 110,3, 114,8, 118,2, 118,5, 121,9 (q, J=272,7 Hz), 126,6, 127,0 (q, J=4,8 Hz), 132,1, 133,3 (q, J=33,2 Hz), 133,8, 135,3, 136,8, 139,1 (d, J=10,9 Hz), 160,5 (d, J=249,1 Hz), 162,7 (d, J=3,3 Hz), 174,3, 179,8; ¹⁹F NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ -111,13, -62,58.

Пример 53 [RD163]

Смесь 4-нитро-3-фторфенола (0,314 г, 2 ммоля) и железа (0,56 г, 10 ммолей) в этилацетате (4 мл) и уксусной кислоте (2 мл) кипятят с обратным холодильником 3 часа. Твердые частицы отфильтровывают. Фильтрат промывают водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют для получения 4-амино-3-фторфенол (53а) (0,25 г, 19,6 ммоля, 98%) в виде коричневого твердого вещества. ¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 6,48-6,58 (m, 2H), 6,61-6,70 (m, 1H), 7,87 (bs, 3H).

Цианид натрия (0,194 г, 4 ммоля) добавляют к смеси 4-амино-3-фторфенола (0,29 г, 2,28 ммоля) и циклобутанона (0,175 г, 2,5 ммоля) в 90% уксусной кислоте (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 15 часов. Среду промывают водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над сульфатом магния, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 90:10) для получения 1-(2-фтор-4-гидроксифениламино)-циклобутанкарбонитрила (53b) (0,271 г, 1,31 ммоля, 58%) в виде желтоватого твердого вещества. ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 2,13-2,20 (m, 2H), 2,36-2,41 (m, 2H), 2,70,2,75 (m, 2H), 4,00 (bs, 1H), 6,46 (bs, 1H), 6,52 (ddd, J₁=2,2 Hz, J₂=0,65 Hz, J₃=0,22 Hz, 1H), 6,57 (d, J=2,3 Hz), 6,62 (dd, J₁=3,0 Hz, J₂=0,67 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 15,7, 34,1, 50,9, 104,0 (d, J=21,9 Hz), 111,0 (d, J=3,4 Hz), 115,8 (d, J=3,7 Hz), 121,8, 125,3 (d, J=12,3 Hz), 150,1 (d, J=10,4 Hz), 152,8 (d, J=239,3 Hz).

Смесь 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрила (1a) (0,228 г, 1,0 ммоль) и 1-(2-фтор-4-гидроксифениламино)-циклобутанкарбонитрила (53b) (0,145 г, 0,7 ммоля) в сухом ДМФ (2 мл) перемешивают при комнатной температуре 24 часа. К этой смеси добавляют метанол (10 мл) и aq. 2М HCl (2 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 1 час. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (чистый дихлорметан и затем дихлорметан:ацетон, 90:10) для получения 4-[5-(2-фтор-4-гидроксифенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил]-2-трифторметилбензонитрила (53с) [RD163] (0,17 г, 0,39 ммоля, 56%), в виде белого порошка, структура которого иллюстрируется формулой 29.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,66-1,75 (m, 1H), 2,18-2,28 (m, 1H), 2,42-2,50 (m, 1H), 2,54-2,67 (m, 3H), 6,76 (d, J=2,2 Hz, 2H), 7,15 (t, J=2,1 Hz, 1H), 7,35 (bs, 1H), 7,87 (dd, J₁=8,2 Hz, J₂=1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,98 (d, J=1,8 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 13,8, 31,0, 67,6, 104,8 (d, J=22,3 Hz), 109,8, 112,6, 114,4 (d, J=13,1 Hz), 114,9, 121,9 (q, J=272,8 Hz), 127,1 (q, J=4,8 Hz), 132,0, 132,3, 133,5 (q, J=33,3 Hz), 135,3, 137,2, 159,3 (d, J=11,2 Hz), 159,6 (d, J=249,7 Hz), 175,2, 180,5; ¹⁹F ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ -117,5, -62,49.

Пример 54 [RD168]

Смесь 4-нитро-2-фторбензонитрила (1,83 г, 5 ммолей) и железа (1,68 г, 6 ммолей) в смеси уксусной кислоты (40 мл) и этилацетата (40 мл) кипятят с обратным холодильником 2 часа. Твердое вещество отфильтровывают, и фильтрат промывают водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над сульфатом магния, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения 4-амино-2-фторбензонитрила (54а) (0,653 г, 4,0 ммоля, 96%).

Цианид натрия (0,74 г, 15 ммолей) добавляют к смеси 4-амино-2-фторбензонитрила (1,36 г, 10 ммолей) и циклопентанона (1,26 г, 15 ммолей) в 90% уксусной кислоте (10 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 3 часа и затем среду нагревают до 80°C и дополнительно перемешивают 5 часов. Среду промывают водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над сульфатом магния, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 97:3) для получения 4-(1-циклопентиламино)-2-фторбензонитрила (54b) (2,07 г, 9,03 ммоля, 90%) в виде желтого твердого вещества.

¹H ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,69-1,91 (m, 4H), 2,13-2,18 (m, 2H), 2,37-2,42 (m, 2H), 5,08 (bs, 1H), 6,54-6,62 (m, 2H), 7,39 (t, J=7,3 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 23,7, 39,8, 56,8, 89,6 (d, J=15,8 Hz), 101,2 (d, J=23,8 Hz), 110,9, 115,2, 120,8, 134,1 (d, J=2,4 Hz), 150,3 (d, J=11,2 Hz), 164,5 (d, J=254,1 Hz).

Смесь 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрила (1a) (0,171 г, 0,75 ммоля) и 4-(1-цианоциклопентиламино)-2-фторбензонитрила (54b) (0,115 г, 0,5 ммоля) в сухом ДМФ (1 мл) нагревают микроволновым облучением при 60°C 48 часов. К этой смеси добавляют метанол (3 мл) и aq 2M HCl (2 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 1 час. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (10 мл) и экстрагируют этилацетатом (15 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 98:2) для получения 4-[1-(4-циано-3-фторфенил)-4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил]-2-трифторметилбензонитрила (54с) [RD168] (0,017 г, 0,037 ммоля, 7%), в виде желтоватого порошка, структура которого иллюстрирует формула 30.

¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 MHz) δ 1,53-1,63 (m, 2H), 1,89-2,00 (m, 2H), 2,09-2,16 (m, 2H), 2,35-2,42 (m, 2H), 7,27-7,37 (m, 2H), 7,78-7,90 (m, 3Н), 7,95 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,3 Hz, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃, 100 MHz) δ 25,2, 36,5, 75,3, 103,2 (d, J=15,3 Hz), 110,4, 112,8, 114,7, 119,2 (d, J=20,7 Hz), 121,9 (q, J=272,8 Hz), 127,0 (q, J=4,8 Hz), 132,1, 133,7 (q, J=33,2 Hz), 134,6, 135,3, 135,8, 136,8, 141,8 (d, J=9,5 Hz), 163,4 (d, J=261,5 Hz), 175,3, 180,1.

Пример 55 [RD136 и RD142]

Могут быть синтезированы дополнительные диарилгидантоиновые соединения, включая следующие соединения, иллюстрируемые формулами 35 и 36.

Пример 56 [RD162']

В дальнейшем реакции, чувствительные к воздуху и влаге, проводят в атмосфере аргона с применением стеклянной посуды, высушенной в печи и обычным применением шприцев. Реакции контролируют SiO₂ TCX пластинками при УФ свете (254 нм) с последующей визуализацией с p-анисальдегидом или окрашивающим раствором нингидрина. Колоночную хроматографию проводят на силикагеле 60. ¹Н ЯМР спектры измеряют при 400 MHz в CDCl₃, если не оговорено обратное, данные представлены далее в ppm (σ) из внутреннего стандарта (TMS, 0,0 ppm): химический сдвиг, множественность, перекрытие, константа связи в Hz.).

Перйодную кислоту (1,69 г, 7,41 ммоля) растворяют в ацетонитриле (25 мл) интенсивным перемешиванием и затем триоксид хрома (0,016 г, 1,60 ммоля) растворяют в растворе. 2-Фтор-4-нитротолуол (0,33 г, 2,13 ммоля) добавляют к вышеуказанному раствору с перемешиванием. Сразу обрадуется осадок с экзотермической реакцией. После 1 ч перемешивания, маточную жидкость реакционной смеси декантируют в колбу и растворитель удаляют испарением. Остаток экстрагируют метиленхлоридом (2×30 мл) и водой (2×30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, и концентрируют, что дает 2-фтор-4-нитробензойную кислоту (формула 37) (0,32 мг, 81%) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР σ 8,06 (ddd, 1 Н, J=9,9, 2,2 и 0,3), 8,13 (ddd, 1 Н, J=8,6, 2,2 и 0,9), 8,25 (ddd, 1 H, J=8,6, 7,0 и 0,3).

Тионил хлорид (0,15 г, 1,30 ммоля) медленно добавляют к раствору 2-фтор-4-нитробензойной кислоты (формула 37) (0,20 г, 1,10 ммоля) в сухом ДМФ (5 мл), охлажденном до -5°C. Смесь дополнительно перемешивают дополнительно 1 час при -5°C. Избыток метиламина (свежеотогнанный из его 40% водного раствора) добавляют в реакционную среду. Вторую смесь перемешивают дополнительно 1 час. Этилацетат (50 мл) добавляют к смеси, которую промывают раствором хлоридом натрия (2×50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, и концентрируют для получения N-метил-2-фтор-4-нитробензамида (формула 38) (0,18 г, 85%) в виде желтоватого твердого вещества. ¹Н ЯМР (ацетон-d₆) δ 3,05 (d, 3 H, J=4,3), 6,31 (dd, 1 H, J=13,5 и 2,1), 6,40 (dd, 1H, J=8,6 и 2,1), 7,64 (dd, 1H, J=8,6 и 8,6).

Смесь N-метил-2-фтор-4-нитробензамида (формула 38) (0,18 г, 0,91 ммоля) и железа (0,31 г, 5,60 ммоля) в этилацетате (5 мл) и уксусной кислоты (5 мл) кипятят с обратным холодильником 1 ч. Твердые частицы отфильтровывают. Фильтрат промывают водой, экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и очищают SiO₂ колоночной хроматографией (дихлорметан: ацетон, 95:5) для получения N-метил-2-фтор-4-аминобензамида (формула 39) (0,14 г, 92%) в виде желтоватого твердого вещества. ¹Н ЯМР (ацтетон-d₆) δ 2,86 (d, 3 H, J=4,3), 5.50 (br s, 2 H), 6,37 (dd, 1 H, J=14.7 и 2,1), 6,50 (dd, 1H, J=8,6 и 2,1), 7,06 (br s, 1H), 7,68 (dd, 1H, J=8,8 и 8,8).

Смесь N-метил-2-фтор-4-аминобензамида (формула 39) (96 мг, 0,57 ммоля), ацетон циангидрина (0,3 мл, 3,14 ммоля) и сульфата магния (50 мг) нагревают до 80°C, перемешивают 12 ч. К среде добавляют этилацетат (25 мл) и затем промывают водой (2×25 мл). Органический слой сушат над MgSO₄ и концентрируют и остаток очищают SiO₂ колоночной хроматографией (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения N-метил-2-фтор-4-(1,1-диметил-цианометил)-аминобензамида (формула 40) (101 мг, 75%) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР δ 1,74 (s, 6 H), 2,98 (dd, 3 H, J=4,8 и 1,1), 6,58 (dd, 1 H, J=14,6 и 2,3), 6,63 (dd, 1 H, J=8,7 и 2,3), 6,66 (br s, 1 H), 7,94 (dd, 1 H, J=8,7 и 8,7).

4-Амино-2-трифторметилбензонитрил (2,23 г, 12 ммолей) добавляют порциями за 15 минут в хорошо перемешиваемую смесь тиофосгена (1 мл, 13 ммолей) в воде (22 мл) при комнатной температуре. Перемешивание продолжают дополнительно 1 ч. Реакционную среду экстрагируют хлороформом (3×15 мл). Объединенную органическую фазу сушат над MgSO₄ испаряют досуха при пониженном давлении для получения желаемого продукта 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрила (формула 41) в виде коричневатого твердого вещества и применяют, например, на следующей стадии (2,72 г, 11,9 ммоля, 99%). ¹H ЯМР δ 7,49 (dd, 1 H, J=8,3 и 2,1), 7,59 (d, 1 H, J=2,1), 7,84 (d, 1 H, J=8,3).

56-1) RD162'

Смесь N-метил-2-фтор-4-(1,1-диметил-цианометил)-аминобензамида (формула 40) (30 мг, 0,13 ммоля) и 4-изотиоцианато-2-трифторметилбензонитрила (формула 41) (58 мг, 0,26 ммоля) в ДМФ (1 мл) нагревают облучением микроволновым облучением при 100°C 11 часов. К этой смеси добавляют метанол (20 мл) и aq. 1N HCl (5 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 1,5 часа. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (50 мл) и экстрагируют этилацетатом (50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и остаток очищают SiO₂ колоночной хроматографией (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения RD162' (формула 42) (15 мг, 25%) в виде бесцветных кристаллов. ¹Н ЯМР δ 1,61 (s, 6 H), 3,07 (d, 3 H, J=4,1), 6,71 (m, 1 H), 7,15 (dd, 1H, J=11,7 и 2,0), 7,24 (dd, 1H, J=8,4 и 2,0). 7,83 (dd, 1H, J=8,2 и 2,1), 7,95 (d, 1H, J=2,1), 7,99 (d, 1H, J=8,2), 8,28 (dd, 1H, J=8,4 и 8,4).

Пример 57

Смесь N-метил-2-фтор-4-аминобензамида (формула 39) (62 мг, 0,37 ммоля), циклопентанона (0,07 мл, 0,74 ммоля) и TMSCN (0,1 мл, 0,74 ммоля) нагревают до 80°C и перемешивают 13 ч. К этой среде добавляют этилацетат (2×20 мл) и затем промывают водой (2×20 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и остаток очищают колоночной хроматографией с силикагелем (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения N-метил-2-фтор-4-(1-цианоциклопентил)аминобензамида (формула 43) (61 мг, 63%) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР δ 7,95 (dd, 1H, J=8,8, 8,8 Hz), 6,65 (br s, 1Н), 6,59 (dd, 1H, J=8,8, 2,3 Hz), 6,50 (dd, 1H, J=14,6, 2,3 Hz), 4,60 (br s, 1H), 2,99 (dd, 3H, J=4,8, 1,1 Hz), 2,36-2,45 (m, 2H), 2,10-2,18 (m, 2H), 1,82-1,95 (m, 4H).

57-1) RD162ʺ

Смесь N-метил-2-фтор-4-(1-цианоциклопентил)аминобензамида (формула 43) (57 мг, 0,22 ммоля) и 4-изотиоцианато-2-трифторметил бензонитрила (0,15 г, 0,65 ммоля) в ДМФ (3 мл) нагревают микроволновым облучением (открытая емкость) при 130°C 12 часов. К этой смеси добавляют метанол (20 мл) и aq. 1 N HCl (5 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 1,5 часа. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (50 мл) и экстрагируют этилацетатом (50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и остаток очищают колоночной хроматографией с силикагелем (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения 4-(3-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нонан-1-ил)-2-фтор-N-метилбензамида, RD162ʺ (формула 44) (8 мг, 7%) в виде желтоватого твердого вещества. ¹Н NMR δ 8,28 (dd, 1H, J=8,4, 8,4 Hz), 7,98 (d, 1H, J=8,3 Hz), 7,96 (d, 1H, J=1,8 Hz), 7,84 (dd, 1H, J=8,3, 1,8 Hz), 7,27 (dd, 1H, J=8,4, 1,8 Hz), 7,17 (dd, 1H, J=11,7, 1,8 Hz), 6,67-6,77 (m, 1H), 3,07 (d, 3H, J=4,3 Hz), 2,32-2,41 (m, 2H), 2,13-2,21 (m, 2H), 1,85-1,96 (m, 2H), 1,49-1,59 (m, 2H),

Пример 58

Ангидрид трифторуксусной кислоты (0,85 мл, 6,14 ммоля) добавляют к раствору 4-(4-аминофенил)масляной кислоты (0,5 г, 2,79 ммоля) в хлороформе (10 мл) при 0°C. Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают 3 часа. Смесь разделяют хлороформом (20 мл) и водой (20 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и остаток очищают колоночной хроматографией с силикагелем (дихлорметан:ацетон, 9:1) для получения 4-[4-(2,2,2-трифторацетиламино)фенил]бутановой кислоты (формула 45) (0,53 г, 69%). ¹Н ЯМР δ 7,81 (br s, 1H), 7,48 (d, 2H, J=8,5 Hz), 7,22 (d, 2H, J=8,5 Hz), 2,68 (t, 2H, J=7,5 Hz), 2,38 (t, 2H, J=7,5 Hz), 1,96 (p, 2H, J=7,5 Hz).

Тионил хлорид (71 мг, 0,60 ммоля) медленно добавляют к раствору 4-[4-(2,2,2-трифторацетиламино)фенил]бутановой кислоты (формула 45) (0,15 г, 0,55 ммолей) в ДМФ (5 мл), охлажденном до -5°C. Смесь дополнительно перемешивают 1 час при -5°C. Избыток диметиламина (свежеотогнанного из его 40% водного раствора) добавляют в реакционную среду. Вторую смесь дополнительно перемешивают 1 час. Добавляют этилацетат (50 мл) в смесь, которую промывают раствором хлорида натрия (2×50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, и концентрируют для получения N-диметил 4-[4-(2,2,2-трифторацетиламино)фенил]бутанамида (формула 46) (0,17 г, колич.) в виде желтоватого твердого вещества. ¹Н ЯМР δ 9,70 (br s, 1H), 7,55 (d, 2H, J=8,6 Hz), 7,11 (d, 2H, J=8,6 Hz), 2,91 (s, 3H), 2,89 (s, 3H), 2,60 (t, 2H, J=7,7 Hz), 2,27 (t, 2H, J=7,7 Hz), 1,89 (p, 2H, J=7,7 Hz).

Раствор 1 N NaOH (3 мл) добавляют к раствору N,N-диметил-4-[4-(2,2,2-трифторацетиламино)фенил]бутанамида (формула 46) (0,17 г, 0,55 ммоля) в метаноле (2 мл) при комнатной температуре. Смесь перемешивают 14 часов. Смесь разделяют хлороформом (25 мл) и водой (25 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и остаток очищают колоночной хроматографией с силикагелем (дихлорметан:ацетон, 9:1) для получения N,N-диметил-4-(4-аминофенил)бутанамида (формула 47) (74 мг, 66%) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР δ 6.97 (d, 2H, J=8,3 Hz), 6,61 (d, 2H, J=8,3 Hz), 3,56 (br s, 2H), 2,92 (s, 6 H), 2,56 (t, 2H, J=7,7 Hz), 2,28 (t, 2H, J=7,7 Hz), 1,91 (p, 2H, J=7,7 Hz).

Смесь N,N-диметил-4-(4-аминофенил)бутанамида (формула 47) (74 мг, 0,36 ммоля), циклобутанона (54 мг, 0,78 ммоля) и TMSCN (77 мг, 0,78 ммоля) нагревают до 80°C и перемешивают 15 ч. К среде добавляют этилацетат (2×20 мл) и затем промывают водой (2×20 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан:ацетон, 9:1) для получения N,N-диметил 4-[4-(1-цианоциклобутиламино)фенил]бутанамида (формула 48) (58 мг, 57%) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР δ 7,07 (d, 2Н, J=8,5 Hz), 6,59 (d, 2H, J=8,5 Hz), 3,94 (br s, 1H), 2,94 (s, 3H), 2,93 (s, 3H), 2,75-2,83 (m, 2H), 2,60 (t, 2H, J=7,6 Hz), 2,33-2,42 (m, 2H), 2,30 (t, 2H, J=7,6 Hz), 2,11-2,28 (m, 2H), 1,93 (p, 2H, J=7,6 Hz).

Смесь N,N-диметил 4-[4-(1-цианоциклобутиламино)фенил]бутанамида (формула 48) (58 мг, 0,20 ммоля) и 4-изотиоцианато-2-трифторметил бензонитрила (74 мг, 0,32 ммоля) в ДМФ (3 мл) кипятят с обратным холодильником 2 часа. К смеси добавляют метанол (20 мл) и aq. 1N HCl (5 мл). Вторую смесь кипятят с обратным холодильником 1,5 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (50 мл) и экстрагируют этилацетатом (50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения 4-(4-(7-(4-Циано-3-(трифторметил)фенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]октан-5-ил)фенил)-N,N-диметилбутанамида, RD169 (формула 49) (44 мг, 42%) в виде бледно-желтоватого твердого вещества. ¹Н ЯМР δ 7,98 (s, 1H), 7,97 (d, 1H, J=8,2 Hz), 7,86 (d, 1H, J=8,2 Hz), 7,42 (d, 2H, J=8,3 Hz), 7,22 (d, 2H, J=8,3 Hz), 2,99 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 2,78 (t, 2H, J=7,5 Hz), 2,62-2,70 (m, 2H), 2,52-2,63 (m, 2H), 2,40 (t, 2H, J=7,5 Hz), 2,15-2,30 (m, 1H), 2,04 (p, 2H, J=7,5 Hz), 1,62-1,73 (m, 1H).

Пример 59

Смесь 4-(4-аминофенил)масляной кислоты (0,20 г, 1,12 ммоля), циклобутанона (0,17 мл, 2,23 ммоля) и TMSCN (0,30 мл, 2,23 ммоля) нагревают до 80°C и перемешивают 13 ч. К среде добавляют этилацетат (2×30 мл) и затем промывают водой (2×30 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан:ацетон, 9:1) для получения 4-[4-(1-цианоциклобутиламино)фенил]бутановой кислоты (формула 50) (0,21 г, 74%) в виде желтоватого твердого вещества. ¹Н ЯМР δ 7,06 (d, 2H, J=8,6 Hz), 6,59 (d, 2H, J=8,6 Hz), 2,75-2,83 (m, 2H), 2,59 (t, 2H, J=7,5 Hz), 2,37 (t, 2H, J=7,5 Hz), 2,33-2,42 (m, 2H), 2,11-2,28 (m, 2H), 1,92 (p, 2H, J=7,5 Hz).

Смесь 4-[4-(1-цианоциклобутиламино)фенил]бутановой кислоты (формула 50) (0,21 г, 0,83 ммоля) и 4-изотиоцианато-2-трифтор бензонитрила (0,25 г, 1,08 ммоля) в толуоле (10 мл) нагревают с обратным холодильником 1 час. К этой смеси добавляют aq. 1 N HCl (5 мл). Вторую смесь нагревают с обратным холодильником 1,5 часа. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливают в холодную воду (50 мл) и экстрагируют этилацетатом (50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и остаток очищают колоночной хроматографией с силикагелем (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения 4-(4-(7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]октан-5-ил)фенил)бутановой кислоты RD141 (формула 51) (60 мг, 15%). ¹Н ЯМР δ 7,98 (d, 1Н, J=1,8 Hz), 7,97 (d, 1H, J=8,3 Hz), 7,86 (dd, 1H, J=8,3, 1,8 Hz), 7,42 (d, 2H, J=8,5 Hz), 7,24 (d, 2H, J=8,5 Hz), 2,79 (t, 2H, J=7,5 Hz), 2,62-2,68 (m, 2H), 2,51-2,59 (m, 2H), 2,47 (t, 2H, J=7,5 Hz), 2,14-2,26 (m, 1H), 2,06 (p, 2H, J=7,5 Hz), 1,60-1,70 (m, 1H).

Пример 60

К раствору 4-(4-(7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]октан-5-ил)фенил)бутановой кислоты RD141 (формула 51) (60 мг, 0,12 ммоля) в ДМФ (3 мл) добавляют тионил хлорид (0,01 мл, 0,15 ммоля) при 0°C.Смесь перемешивают при 0°C 1 час. Аммиак барботируют через смесь. Смесь разделяют этилацетатом (25 мл) и водой (25 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 70:30) для получения 4-(4-(7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]октан-5-ил)фенил)бутанамид, RD130 (формула 52) (37 мг, 61%) в виде белого порошка. ¹Н ЯМР δ 7,97 (d, 1H, J=1,8 Hz), 7,95 (d, 1H, J=8,3 Hz), 7,85 (dd, 1H, J=8,3 Hz), 7,39 (d, 2H, J=8,3 Hz), 7,22 (d, 2H, J=8,3 Hz), 5,59 (br s, 2H), 2,77 (t, 2H, J=7,5 Hz), 2,62-2,68 (m, 2H), 2,51-2,59 (m, 2H), 2,31 (t, 2H, J=7,5 Hz), 2,16-2,25 (m, 1H), 2,05 (p, 2H, J=7,5 Hz), 1,57-1,70 (m, 1H).

Пример 61

Раствор ДМСО (0,01 мл, 0,12 ммоля) в сухом дихлорметане (1 мл) добавляют к перемешиваемому раствору оксалил хлорида (0,01 мл, 0,09 ммоля) в сухом дихлорметане (2 мл) при -78°C. После 15 мин раствор в дихлорметане 4-(4-(7-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]октан-5-ил)фенил)бутанамида, RD130 (формула 52) (35 мг, 0,07 ммоля) добавляют к реакционной смеси. Перемешивание продолжают 20 мин при -78°C, и затем добавляют триэтиламин (0,03 мл, 0,22 ммоля). После 30 мин при -78°C реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и затем реакцию останавливают насыщенным раствором aq. NH₄Cl. Реакционную смесь разбавляют дихлорметаном и экстрагируют дихлорметаном. Органический слой сушат над MgSO₄, концентрируют и хроматографируют (дихлорметан:ацетон, 95:5) для получения 4-(5-(4-(3-цианопропил)фенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]октан-7-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила, RD170 (формула 53) (29 мг, 87%) в виде вязкого масла. ¹Н ЯМР δ 7,98 (d, 1Н, J=1,8 Hz), 7,98 (d, 1H, J=8,3 Hz), 7,86 (dd, 1H, J=8,3, 1,8 Hz), 7,43 (d, 2H, J=8,4 Hz), 7,27 (d, 2H, J=8,4 Hz), 2,90 (t, 2H, J=7,3 Hz), 2,63-2,73 (m, 2H), 2,52-2,62 (m, 2H), 2,42 (t, 2H, J=7,3 Hz), 2,18-2,30 (m, 1H), 2,07 (p, 2H, J=7,3 Hz), 1,63-1,73 (m, 1H).

Специалист в данной области техники сможет модифицировать и/или объединять синтезы, раскрытые в описании, для получения других диарилгидантоинов.

Соединения изобретения также включают соединения со следующими формулами.

где R выбран из водорода, арила, замещенного арила, алкила, замещенного алкила, алкенила, замещенного алкенила, алкинила, замещенного алкинила, галогенированного алкила, галогенированного алкенила, галогенированного алкинила, арилалкила, арилалкенила, арилалкинила, ароматического или неароматического гетероцикла, замещенного ароматического или неароматического гетероцикла, циклоалкила, замещенного циклоалкила, галогена, SO₂R₁₁, NR₁₁R₁₂, NR₁₂(CO)OR₁₁, NH(CO)NR₁₁R₁₂, NR₁₂(CO)R₁₁, O(CO)R₁₁, O(CO)OR₁₁, O(CS)R₁₁, NR₁₂(CS)R₁₁, NH(CS)NR₁₁R₁₂, NR₁₂(CS)OR₁₁.

R₁ и R₂ независимо выбраны из водорода, арила, алкила, замещенного алкила, алкенила, замещенного алкенила, алкинила, замещенного алкинила, галогенированного алкила, галогенированного алкенила, галогенированного алкинила, арилалкила, арилалкенила, арилалкинила, ароматического или неароматического гетероцикла, замещенного ароматического или неароматического гетероцикла, циклоалкила, замещенного циклоалкила.

R₁ и R₂ могут быть соединены для образования цикла, который может быть гетероциклом, замещенным гетероциклом, циклоалкилом, замещенным циклоалкилом.

R₃ выбран из арила, замещенного арила, алкила, замещенного алкила, алкенила, замещенного алкенила, алкенила, замещенного алкинила, арилалкила, арилалкенила, арилалкинила, ароматического или неароматического гетероцикла, замещенного ароматического или неароматического гетероцикла, циклоалкила, замещенного циклоалкила, SO₂R₁₁, NR₁₁R₁₂, (CO)OR₁₁, (CO)NR₁₁R₁₂, (CO)R₁₁, (CS)R₁₁, (CS)R₁₁, (CS)NR₁₁R₁₂, (CS)OR₁₁.

R₅ является CN или NO₂, или SO₂R₁₁.

R₆ является CF₃, алкилом, замещенным алкилом, алкенилом, замещенным алкенилом, алкинилом, замещенным алкинилом, галогенированным алкилом, галогенированным алкенилом, галогенированным алкинилом, галогеном.

А является атомом серы (S) или атомом кислорода (О).

В является О или S, или NR₃

Х является углеродом или азотом и может находиться в любом положении кольца.

R₁₁ и R₁₂ независимо выбраны из водорода, арила, аралкила, замещенным аралкилом, алкила, замещенным алкилом, алкенилом, замещенным алкенилом, алкинила, замещенным алкинилом, галогенированным алкилом, галогенированным алкенилом, галогенированным алкинилом, арилалкила, арилалкенила, арилалкинила, ароматического или неароматического гетероцикла, замещенного ароматического или неароматического гетероцикла, циклоалкила, замещенного циклоалкила.

R₁₁ и R₁₂ могут быть соединены для образования цикла, который может быть гетероциклом, замещенным гетероциклом, циклоалкилом, замещенным циклоалкилом.

Фармакологическое испытание соединений

Соединения, для которых выше раскрыт способ синтеза, проверяют на антагонистическую и агонистическую активность по отношению к клеткам AR резистивного к гормонам рака простаты с применением порядка проверки, подобного РСТ US 04/42221 и РСТ US 05/05529, которые включены в описание ссылкой. Много соединений демонстрируют высокую антагонистическую активность с минимальной агонистической активностью для сверхсинтеза AR при резистентном к гормонам раке простаты.

Биологические испытания in vitro

Воздействие соединений на AR анализом репортера

Соединения испытывают с применением AR ответа искусственной системы репортера в линии клеток резистентной к гормонам рака простаты. В этой системе клетки рака простаты LNCaP стабильно вызывают синтез приблизительно в 5 раз более высокого уровня AR по сравнению с эндогенным уровнем. Экзогенный AR обладает свойствами подобными эндогенным AR, так как оба стабилизируется синтетическим андрогеном R1881. Клетки сверхэкспрессирующие AR также созданы для стабильного включения AR ответа репортера и активность репортера этих клеток демонстрирует резистентность к гормонам рака простаты. Это соответствует низкой концентрации синтетического андрогена R1881, ингибируется только высокими концентрациями бикалутамида (см. таблицу 1), и проявляет агонистиническую активность с бикалутамидом (фиг.1 и таблица 2). В соответствии с опубликованными данными, бикалутамид ингибирует AR ответ репортера и не обладает агонистической активностью по отношению к клеткам резистентного к гормонам рака простаты (фиг.2).

Определена агонистическая активность соединений, синтез которых описан выше, в присутствии 100 пМ R1881. Созданные LNCaP клетки (LNCaP-AR, также обозначаемые LN-AR) сохраняют в среде Iscove's, содержащей 10% фетальной сыворотки быка (FBS). За два дня до испытания вещества клетки выращивают в среде Iscove's, содержащей 10% очищенной активированным углем FBS (CS-FBS) для удаления андрогенов. Клетки разделяют и выращивают в среде Iscove's, содержащей 10% CS-FBS с 100 рМ R1881 и возрастающими концентрациями испытуемых соединений. Активность репортера определяют после двух дней инкубирования.

В таблица 1 приведены IC50 этих соединений в замедлении AR резистентного к гормонам рака простаты. Контрольное вещество бикалутамид имеет IC50 при 889 нМ. Большинство испытанных соединений (диарилгидантоины) имеют IC50 между 100 и 200 нМ в ингибировании AR резистентного к гормонам рака простаты. В отличие от антиандрогенных соединений, перечисленных в качестве примеров US 5,705,654, такие соединения как, 30-2, 30-3, 31-2, 31-3 и 24-3 (RD73-RD77), не обладают активностью в ингибировании AR в этой системе.

Таблица 1

Антагонистическая активность по отношению к AR резистентного к гормонам рака простаты, определенная AR ответом репортера и эндогенного синтеза PSA.

		IC50 (нМ)	IC50 нМ)
Пример	Название	Репортер	PSA
Бикалутамид Сравнение	N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-3-[(4-фторфенил)сульфонил]-2-гидрокси-2-метилпропанамид	889	>1000
29 Сравнение	4-[3-(4-гидроксибутил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил	No (*)	No
6-2 (6b) [RD10]	4-[3-фенил-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил	149	n/a (**)
5-3b (5с) [RD7]	4-[3-(4-метилфенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметил-бензонитрил	125	132
3-3 (3с) [RD8]	4-[3-(4-гидроксифенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил	137	122
2-4 (2d) [RD9]	4-[3-(4-аминофенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил	273	n/a
4 (4a) [RD13]	4-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]фениловый эфир хлоруксусной кислоты	131	n/a
8-2 (8b) [RD35]	4-(4-Оксо-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил	147	n/a
7-3b (7c) [RD37]	4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил	124	128
9-3 (9c) [RD48]	4-(4-оксо-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3-диазаспиро[4.5]дец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил	194	n/a
10-3 (10c) [RD49]	4-(4-оксо-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3-диазаспиро[4.5]ундец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил	232	n/a
2 Сравнение (28a) [RD52]	4-(8-метил-4-оксо-2-тиоксо-1,3,8-триазаспиро[4.5]дец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил	No	n/a
27-3 (27c) [RD53]	4-(8-метил-4-оксо-2-тиоксо-1-(4-метилфенил)-1,3,8-триазаспиро[4.5]дец-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил	638	n/a
26 (26a) [RD54]	4-[1-(4-цианофенил)-4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил]-2-трифторметилбензонитрил	469	n/a
25 (25a) [RD55]	4-[1-(4-нитрофенил)-4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил]-2-трифторметилбензонитрил	498	n/a
12-2 (12b) [RD57]	4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-бифенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил	283	n/a

		IC50 (нМ)	IC50 нМ)
Пример	Название	Репортер	PSA
11-2 (11b)[RD58]	4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-гидроксифенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил	162	n/a
17 (17a) [RD59]	4-[3-(4-гидроксифенил)-4,4-диметил-2,5-дитиоксоимидазолидит-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил	278	287
18 (18a) [RD60]	4-[3-(4-гидроксифенил)-4,4-диметил-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил	369	511
22-2 (22b) [RD65]	2-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-4-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]бензойная кислота	523	>500
20-2 (20b) [RD66]	4-(4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксо-3-(4-трифторметилфенил)имидизолидин-1-ил)-2-трифторметилбензонитрил	143	144
21-2 (21b) [RD67]	4-(4,4-бисхлорметил-5-оксо-2-тиоксо-3-(4-метилфенил)имидазолидин-1-ил)-2-трифторметилбензонитрил	521	>500
19-2 (19b) [RD68]	4-(4-фторметил-4-метил-5-оксо-2-тиоксо-3-(4-метилфенил)имидазолидин-1-ил)-2-трифторметилбензонитрил	126	129
23-2 (23b) [RD71]	4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(2-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил	258	232
30-2 Сравнение (30b) [RD73]	4-(5-метил-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил	No	No
30-3 Сравнение (30с) [RD74]	4-(5-метил-6,8-диоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил	No	No
31-2 Сравнение (31b)[RD75]	4-(1-метил-4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил	No	No
31-3 Сравнение (31c) [RD76]	4-(1-метил-2,4-диоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил	No	No
24-3 Сравнение (24с) [RD77]	4-(4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил	No	No
15-2 (15b) [RD82]	4-[4,4-диметил-3-(4-пиридин-2-ил)-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил	723	n/a
14-2 (14b) [RD83]	4-[4,4-диметил-3-(4-метилпиридин-2-ил)-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил	457	n/a
16-2 Сравнение (16b) [RD84]	4-[5-(5-метил-2Н-пиразол-3-ил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил]-2-трифторметилбензонитрил	>1000	n/a

		IC50 (нМ)	IC50 нМ)
Пример	Название	Репортер	PSA
13-2 (12b) [RD85]	4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-бифенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил	>1000	n/a
32 (32a) [RD90]	4-(8-метилимино-6-тиоксо-5-р-толил-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил	222	421
33 (33а) [RD91]	1-[3-(4-циано-3-трифторметилфенил)-5,5-диметил-2-тиоксо-1-р-толилимидазолидин-4-илиден]-3-этил-тиомочевина	157	239
34 (34а) [RD92]	1-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-6-тиоксо-5-р-толил-5,7-диазаспиро[3.4]окт-8-илиден]-3-фенил-тиомочевина	176	276
35 (35а) [RD93]	1-(4-циано-3-трифторметилфенил)-3-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-6-тиоксо-5-р-толил-5,7-диазаспиро[3,4]окт-8-илиден]-тиомочевина	144	158
36-2 (36b) [RD110]	4-[8-(4-гидроксометилфенил)-5-оксо-7-тиоксо-6-азаспиро[3.4]окт-6-ил]-2-трифторметилбензонитрил	311	337
37 (37a) [RD114]	4-[5-(4-формилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил]-2-трифторметилбензонитрил	n/a	263
38 (38a) [RD116]	4-{5-[4-(1-гидроксиэтил)-фенил]-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил}-2-трифторметилбензонитрил	n/a	187
39 (39a) [RD117]	Этиловый эфир 3-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}акриловой кислоты	n/a	197
40 (40a) [RD120]	4-{5-[4-(3-гидроксипропенил)фенил]-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил}-2-трифторметилбензонитрил	n/a	114
41-2 (41b):RD128]	Метиловый эфир 3-{4-[7-(4-циано-3-трифтрометилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]фенил}-пропионовой кислоты	No	n/a
41-4 (41d) [RD133]	3-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-пропионамид	224	n/a
41-5 (41e) RD134]	3-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-N-метил-пропионамид	234	n/a
41-6 (41f) [RD135]	3-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-N-(2-гидроксиэтил)-пропионамид	732	n/a
42-2 (42b) RD129]	Метиловый эфир 4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-масляной кислоты	432	n/a

		IC50 (нМ)	IC50 нМ)
Пример	Название	Репортер	PSA
42-4 (42d) [RD130]	4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-бутирамид	112	n/a
42-5 (42e) [RD131]	4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-N-метил-бутирамид	92	n/a
43-4 (43e) [RD137]	4-[8-Оксо-5-(4-пиперазин-1-ил-фенил)-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил]-2-трифторметилбензонитрил	718	n/a
43-5 (43f) [RD138]	4-{5-[4-(4-метансульфонилпиперазин-1-ил)-фенил]-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил}-2-трифторметилбензонитрил	138	n/a
44-2 (44b) [RD119]	44-2) 3-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-фенил}-акриламид,		113
(*) No: соединение не ингибирует AR ответ репортера; (**) n/a: соединение не тестировалось.

Одно неизвестное свойство сверхэкспрессии AR резистентного к гормонам рака простаты состоит в его способности переведения антагонистов в агонисты. Поэтому только соединения с минимальной или с отсутствием агонистической активности можно отнести к анти-андрогенам при этой болезни. Для определения агонистической активности различных соединений проверяют их активность в стимуляции AR с применением AR ответа репортера в качестве меры в LN-AR системе в отсутствии R1881. В таблице 2 показана агонистическая активность различных соединений. В соответствии с предшествующими результатами бикалутамид активирует AR резистентного к гормонам рака простаты. Производные диарилгидантоина, такие как примеры 7-3b (RD37), 33 (RD91), 34 (RD92) и 35 (RD93) не обладают агонистической активностью. Напротив, RU59063 и другие анти-андрогенные соединения, приведенные в качестве примеров в US 5,705,654, такие как примеры 30-2, 30-3, 31-2, 31-3 и 24-3 (RD73-RD77) сильно активируют AR резистентного к гормонам рака простаты.

Таблица 2
Агонистическая активность отдельных испытуемых веществ по отношению к AR ответу репортера резистентного к гормонам рака простаты Кратность воздействия с увеличением концентраций соединений
Пример	Название	0,1 μМ	1 μМ	10 μМ
ДМСО	Диметилсульфоксид	1,00(*)	1,00	1,00
R1881	меитилтриенолон	44,33	n/a(**)	n/a
Бикалутамид	N-14-циано-3-(трифтрометил)фенил]-3-[(4-фторфенил)сульфонил]-2-гидрокси-2-метилпропанамид	1,66	3,04	10,40

Пример	Название	0,1 μМ	1 μМ	10 μМ
29 Соед.	4-[3-(4-гидроксибутил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифтрометилбензонитрил	10,99	20,84	34,62
7-3b (7с) [RD37]	4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазоспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифтрометилбензонитрил	0,87	1,19	0,89
33 (33а) [RD91]	1-[3-(4-циано-3-трифтрометил-фенил)-5,5-диметил-2-тиоксо-1-р-толил-имидазолидин-4-илиден]-3-этил-тиомочевина	1,30	1,18	1,28
34 (34а) [RD92]	1-[7-(4-циано-3-трифтрометил-фенил)-6-тиоксо-5-р-толил-5,7-диазаспиро[3.4]окт-8-илиден]-3-фенил-тиомочевина	1,19	1,41	1,17
35 (35а) [RD93]	1-(4-Циано-3-трифтрометил-фенил)-3-[7-(4-циано-3-трифтрометил-фенил)-6-тиоксо-5-р-толил-5,7-диазаспиро[3.4]окт-8-илиден]-тиомочевина	1,26	1,10	1,30
30-2 Соед. (30b) [RD73]	4-(5-метил-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифтрометилбензонитрил	14,88	19,41	35,22
30-3 Соед. (30с). [RD74]	4-(5-метил-6,8-диоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифтрометилбензонитрил	11,39	14,26	30,63
31-2 Соед. (31b) [RD76]	4-(1-метил-4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифтрометилбензонитрил	17,03	16,63	33,77
31-3 Соед. (31с) [RD76]	4-(1-метил-2,4-диоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифтрометилбензонитрил	11,99	19,77	38,95
24-3 Соед. (24с) [RD77]	4-(4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифтрометилбензонитрил	14,88	22,48	37,09
(*)Кратность воздействия: активность вызванная отдельным тестируемым веществом по сравнению с активностью носителя ДМСО; (**) n/а: соединение не тестировалось.

Для определения специфичности AR ингибиторов, выбранные соединения испытывают на клетках LNCaP со сверхэкспрессией рецепторов глюкокортикоидов (GR), ближайших членов AR в семействе рецепторов ядер. Указанные клетки также обладают GR ответом репортера и активность репортера индуцируется дексаметазоном антагонистом GR и индукция блокируется RU486, ингибитором GR. Пример 7-3b (RD37) (4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифтрометил бензонитрил) не влияет на GR в этой системе.

Влияние соединений на AR по измерению уровня секреции специфических антигенов простаты (PSA)

Установлено, что уровень PSA является индикатором активности AR рака простаты. Для определения есть ли эффект соединений на AR функцию в физиологическом окружении, определяют уровень секреции эндогенных PSA индуцированных R1881 в AR-сверхэкспрессии клеток LNCaP (LNCaP-AR, также обозначаемых как LN-AR). Клетки LNCaP-AR являются линией клеток карциномы лимфатического узла простаты преобразованных плазмидами, которые осуществляют синтез рецепторов андрогенов. Клетки LNCaP-AR содержат в Iscove's среде, содержащей 10% FBS. За два дня до обработки соединением клетки выращивают в Iscove's среде, содержащей 10% CS-FBS для удаления андрогенов. Клетки разделяют и выращивают в Iscove's среде, содержащей 10% CS-FBS с соответствующими концентрациями R1881 и тестируемых соединений. После четырех дней инкубации, уровень секреции PSA определяют с применением PSA ELISA (American Qualex, San Clemente, CA)

Уровень секреции PSA клеток LNCaP-AR сильно индуцируется 25 рМ R1881. Напротив, PSA не индуцируется в родительских клетках LNCaP до достижения концентрации R1881 100 рМ. Это согласуется с нашим предшествующим отчетом, где AR резистентного к гормонам раке простаты является сверхчувствительным к андрогенам. Ингибирование AR активности в зависимости от дозы проводят для определения IC50s различных соединений синтеза PSA и результаты представлены в таблице 1. IC50s выбранных соединений на синтез PSA очень напоминает значения, определенные анализом репортера, подтверждая, что производные диарилгидантоина являются ингибиторами AR резистентного к гормонам рака простаты.

Также определяют агонистическую активность выбранных соединений на AR резистентного к гормонам рака простаты с применением секреции PSA в качестве дополнительной метки. Для этого клетки LNCaP без андрогенов AR сверхсинтеза инкубируют с увеличением концентраций соединений, синтез которых описан выше в отсутствии R1881 и измеряют секрецию PSA в культуральной среде после 4 дней.

В таблице 3 показана агонистическая активность выбранных соединений. Согласующиеся результаты получены анализом репортера: производные диарилгидантоинов, таких как из примеров 7-3b (RD37), 33 (RD91), 34 (RD92), и 35 (RD93) не обладают агонистической активностью. Напротив, RU59063, и другие антиандрогенные соединения, перечисленные в качестве примеров US 5,705,654, например, 30-2 (RD73), 30-3 (RD74) и 31-2 (RD75) стимулируют синтез PSA при резистентном к гормонам раке простаты.

Таблица 3
Агонистическая активность выбранных тестируемых соединений на эндогенные PSA при резистентном к гормонам раке простаты Кратность воздействия с ростом концентраций соединений
Пример	Название	0,1 μМ	1 μМ	10 μМ
ДМСО	Диметилсульфоксид	1,00 (*)	1,00	1,00
R1881	метилтриенолон	20,69	н/а (**)	н/а
Бикалутамид	N-[4-циано-3-(трифторметил)фенил]-3-[(4-фторфенил)сульфонил]-2-гидрокси-2-метилпропанамид	2,00	2,55	5,55
29 Соед.	4-[3-(4-гидроксибутил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметилбензонитрил	6,88	11,50	21,50
7-3b (7с) [RD37]	4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил	1,25	1,20	1,15
33 (33а) [RD91]	1-[3-(4-циано-3-трифторметил-фенил)-5,5-диметил-2-тиоксо-1-р-толил-имидазолидин-4-илиден]-3-этил-тиомочевина	1,06	1,30	0,85
34 (34а) [RD92]	1-[7-(4-циано-3-трифторметил-фенил)-6-тиоксо-5-р-толил-5,7-диазаспиро[3.4]окт-8-илиден]-3-фенил-тиомочевина	1,31	1,05	0,90
35 (35а) [RD93]	1-(4-Циано-3-трифторметил-фенил)-3-[7-(4-циано-3-трифторметил-фенил)-6-тиоксо-5-р-толил-5,7-диазаспиро[3.4]окт-8-илиден]-тиомочевина	1,44	1,30	1,05
30-2 Соед.. (30b) [RD73]	4-(5-метил-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил	6,25	17,95	25,65
30-3 Соmр. (30с) [RD74]	4-(5-метил-6,8-диоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил	7,50	15,20	23,75
31-2 Соmр. (31b) [RD75]	4-(1-метил-4-оксо-2-тиоксо-1,3-диазаспиро[4.4]нон-3-ил)-2-трифторметилбензонитрил	8,13	18,20	17,50
(*) Кратность воздействия: активность вызванная отдельными тестируемыми соединениями по отношению к активности ДМСО в качестве носителя (**) н/а: соединение не анализируется в этом тесте.

Влияние соединений на митохондриальную активность AR анализом MTS

Клетки LNCaP-AR содержат в Iscove's среде, содержащей 10% FBS. Соединения тестируют по их влиянию на рост клеток резистентного к гормонам рака простаты.

Применяют сверхэкспрессирующие клетки LNCaP, поскольку эти клетки ведут себя также как клетки резистентного к гормонам рака простаты in vitro и in vivo (1). Определяют митохондриальную активность MTS анализом, дополнительно к росту. Клетки LNCaP со сверхэкспрессией AR (LN-AR) содержат в Iscove's среде, содержащей 10% FBS. За два дня до обработки соединениями клетки выращивают в Iscove's среде, содержащей 10% CS-FBS для удаления андрогенов. Затем клетки разделяют и выращивают в Iscove's среде, содержащей 10% CS-FBS с подходящими концентрациями R1881 и возрастающими концентрациями тестируемых соединений. После четырех дней инкубации рост клеток определяют MTS (Promega, Madison, WI).

В соответствии с анализом репортера и определением PSA, рост сверхэкспрессии AR LNCaP стимулирует 25 микроМ R1881, но родительские клетки не стимулируют до достижения R1881 концентрации 100 микроМ. Фиг.2 представляет ингибирующее действие выбранных соединений на рост резистентного к гормонам рака простаты в присутствии 100 рМ R1881. Современный клинический препарат бикалутамид не ингибируют резистентного к гормонам рака простаты. Напротив, соединения примера 5-3b (RD7) (4-[3-(4-метилфенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметил-бензонитрил) и примера 7-3b (RD37) (4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил) эффективно ингибируют резистентный к гормонам рак простаты.

Проверяют, имеется ли ингибирование роста при MTS анализе за счет AR, соединения примера 5-3b (RD7) (4-[3-(4-метилфенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметил-бензонитрил) и примера 7-3b (RD37) (4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил) проверяют на клетках DU-145, линия клеток рака простаты лишенной AR экспрессии. Указанные соединения не обладают ингибирующим эффектом на клетки DU-145. Соединения не ингибируют клетки, отличные от клеток экспрессирующих AR рака простаты, и не обладают эффектом на рост MCF7 и SkBr3, двух видов общеприменимых клеток рака молочной железы или 3Т3, линии клеток фибропластов нормальной мыши.

Примеры биологической активности in vitro производных диарилгидантоинов представлены на фиг.3, 4 и 5. Например, фиг.3 показывает, что относительная активность люциферазы при концентрации соединений 500 нМ, уменьшается следующим образом: RD152>RD153>RD145>RD163>RD161=RD162 > бикалутамид. Фиг.4 показывает, что относительный уровень PSA при концентрации соединений 500 нМ, уменьшается следующим образом: RD138>RD131>RD37>RD133>RD134>RD137>RD138>RD135 > бикалутамид. Фиг.5 показывает, что относительные единицы MTS при концентрации соединений 500 нМ, уменьшаются следующим образом: RD168>RD37>RD141>RD162 > бикалутамид.

Ингибирующий эффект на ксенотрансплантатные опухоли резистентного к гормонам рака простаты.

Соединение примера 7-3b (RD37) (4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил) применяют для определения имеют ли производные диарилгидантоина in vivo эффект на резистентный к гормонам рак простаты. Сначала проверяют указанные соединения на ксенотрансплантантных опухолях вызванных сверхэкспрессирующими AR клетками LNCaP. Выращенные в Matrigel (Collaborative Biomedical) клетки вводят подкожной инъекцией в пах кастрированному самцу SCID мыши. Размер опухоли в трех измерениях определяют еженедельно с применением штангенциркуля. После установления ксенотрансплантантной опухоли (размер опухоли достигает, по меньшей мере, 40 мм), мыши с опухолью рандомизируются и подвергаются действию различных доз соединений орально один раз в день. В соответствии с клиническим наблюдением, современный клинический препарат бикалутамид не ингибирует рост резистентного к гормонам рака простаты (также как носитель) (фиг.7а). Напротив, соединение примера 7-3b (RD37) (4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил) сильно ингибирует рост этих опухолей (фиг 7а) и ингибирование зависит от дозы (фиг.7b). Кроме того, соединение примера 7-3b (RD37) ингибирует синтез PSA (фиг.8), клиническая метка для резистентного к гормонам рака простаты.

Соединение примера 7-3b (RD37) (4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил) также проверяют на другой ксенотрансплантантной модели резистентного к гормонам рака простаты LAPC4. Указанная модель представляет собой мышиную модель, в которой использованы кастрированные животные, которым привит указанный рак простаты. Эта модель скрывает клиническое развитие рака простаты (2). Подобно установленному с применением ксенотрансплантантной модели сверхэкспрессии AR LNCaP, клинический препарат бикалутамид не ингибируют рост и экспрессию PSA в резистентной к гормонам ксенотрансплантантной модели LAPC4 (то же, что и носитель) (фиг.9а и 9b). Напротив, соединение примера 7-3b (RD37) сильно ингибируют рост и экспрессию PSA в указанных опухолях (фиг.9а и 9b).

Эффект ингибирования роста клеток чувствительного к гормонам рака простаты.

Для определения ингибируют ли производные диарилгидантоина также клетки чувствительного к гормонам рака простаты тестируют некоторые выбранные соединения на рост клеток LNCaP измерением MTS митохондриальной активности. При отсутствии эффекта на рост резистентного к гормонам рака простаты, клинический препарат бикалутамид умеренно ингибирует чувствительные к гормонам клетки LNCaP с зависимостью от дозы. Соединение примера 5-3b (RD7) (4-[3-(4-метилфенил)-4,4-диметил-5-оксо-2-тиоксоимидазолидин-1-ил]-2-трифторметил-бензонитрил) и примера 7-3b (RD37) (4-(8-оксо-6-тиоксо-5-(4-метилфенил)-5,7-диазаспиро[3.4]окт-7-ил)-2-трифторметилбензонитрил) ингибируют чувствительный к гормонам рак простаты с 10-кратной эффективностью по сравнению с бикалутамидом (фиг.10).

In vivo биологические испытания

Все эксперименты над животными осуществляют в соответствии с руководящими принципами Animal Research Committee of the University of California at Los Angeles. Животные получены из Taconic и содержались в ламинарном боксе в определенной в определенной бактериальной колонии. Клетки LNCaP-AR и LNCaP-вектора содержались в RPMI среде дополненной 10% FBS. 10⁶ клеток в 100 μл 1:1 Matrigel:RPMI среде водят подкожной инъекцией в пах нетронутых или кастрированных самцов SCID мышей. Размер опухоли в трех измерениях (длина×ширина×глубина) определяют еженедельно с применением штангенциркуля. Мышей рандомизируют (разделяют) на тестируемые группы, когда размер опухоли достигает около 100 мм³. Соединение дают орально каждый день 10 мг/кг и 50 мг/кг. Для получения фармакодинамических данных животных снимают оптической CCD камерой, через 3 часа после последней введенной дозы. ROI опухоли определяют в фотон/сек по активности люциферазы. Правые панели показывают измерения ROI. Данные представлены на фиг.11 и 12. Через 18 дней RD162 является эффективным для предотвращения роста опухоли, и даже уменьшения размера опухоли, и очевидно более эффективным, чем бикалутамид.

Фармакинетику бикалутамида, 4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-толуола [RD37], N-метил-4-{4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]фенил}бутанамида [RD131] и N-метил-4-[7-(4-циано-3-трифторметилфенил)-8-оксо-6-тиоксо-5,7-диазаспиро[3.4]окт-5-ил]-2-фторбензамида (52d) [RD162] оценивают in vivo с применением 8- недельных FVB мышей, которые поставлены Charles River Laboratories. Мышей разделяют на группы по три для каждого момента времени. Две мыши не подвергают действию соединений и две другие мыши обрабатывают раствором носителя. Каждую группу обрабатывают 10 мг на килограмм веса тела.

Соединение растворяют в смеси 1:5:14 ДМСО:PEG400:Н₂O. (раствор носителя) и вводят в мышь через хвостовую вену. Животных обогревают под лампой около 20 минут до обработки для расширения их хвостовых вен. Каждую мышь помещают в фиксатор мыши (Fisher Sci. Cat# 01-288-32А) и вводят инъекцией 200 μл соединения в растворе носителя в расширенную хвостовую вену. После введения соединения животных умерщвляют посредством ингаляции СО₂ через различные моменты времени: 5 мин, 30 мин, 2 ч, 6 ч, 16 ч. Животных сразу обескровливают после воздействия CO₂ пункцией сердца (1 мл BD шприц + 27G 5/8 игла). Для оральной дозировки соединение растворяют в смеси 50:10:1:989 ДМСО:карбоксиметилцеллюлоза:Tween80:H₂O до орального введения шприцем для кормления.

Образцы сыворотки анализируют для определения концентрации соединения HPLC (высокопроизводительной жидкой хроматографией) которая (Waters 600 насос, Waters 600 контроллер и Waters 2487 детектор) снабжена колонкой Alltima С18 (3μ, 150 мм × 4,6 мм). Соединения RD37, RD131 и RD162 определяют при длине волны 254 нм и бикалутамид определяют при длине волны 270 нм.

Образцы для HPLC анализа готовят в соответствии со следующей процедурой:

- Клетки крови отделяют от сыворотки центрифугированием.

- К 400 μл сыворотки добавляют 80 μл 10 μМ раствора внутреннего стандарта и 520 μл ацетонитрила. Происходит осаждение.

- Смесь перемешивают 3 минуты и затем помещают в ультразвуковое поле на 30 минут.

- Твердые частицы отфильтровывают и отделяют центрифугированием.

- Фильтрат высушивают в токе аргона досуха. Образцы восстанавливают до 80 μл ацетонитрилом перед анализом HPLC для определения концентрации соединения.

- Калибровочную кривую применяют для улучшения точности.

Концентрация RD162 в плазме в качестве функции времени, полученная при внутривенном и оральном введении, представлена на фиг.13. Стационарная концентрация (Css) бикалутамида, RD131 и RD162 представлена в таблице 4. Концентрация в стационарном состоянии RD162 по существу такая же, как и бикалутамида и существенно лучше, чем RD131.

Таблица 4.
Стационарная концентрация бикалутамида, RD131 и RD162 в плазме мыши.
Название	IC50 [нМ]	LogP	Css, 10 мг/кг [μМ]	Css, 25 мг/кг [μМ]	Css, 50 мг/кг [μМ]
Бикалут.	1000	2,91	10,0	11,4	11,9
RD131	92	3,44	0,39	0,43	0,40
RD162	122	3,20	9,9	10,7	10,2

Распределение соединений по рядам

Таблицы 5-10 представляют диарилгидантоины, сгруппированные в ряды 1-6. Таблица 11 представляют диарилгидантоины, которые не были помещены в ряды. Размещение соединений в ряды основывается на доступных данных совмещенных с результатами анализа. Рассматриваемые данные включают in vitro анализ (система ответа репортера AR в линии клеток LNCaP, определение уровня PSA, митохондриальный MTS анализ) и in vivo эксперименты (прямое измерение размера опухоли или по излучению, вызванному репортерным геном люциферазы, фармакинетический анализ на основе содержания в плазме крови). Не все соединения проанализированы всеми методами. Представлены не все полученные результаты. При ранжировании соединений одного относительно другого судят по их полезности при лечении рака простаты, в частности, когда для двух ранжируемых соединений не проводится одинаковых экспериментов. Характеристики, рассматриваемые при ранжировании включают антагонистическую активность AR, отсутствие AR агонизма к резистентным к гормонам клеткам, предотвращение роста опухоли, уменьшения опухоли и фармакинетическое поведение с преимущественным более длительным времени присутствия в крови.

Ряд1

В общем соединения ряда 1 являются диарилгидантоинами с дважды замещенным левым арильным кольцом, которые дважды замещены по правому углероду гидантоина, с кислород- или N-заместителем левого углерода гидантоина. Полагают, что амидо заместитель гидролизует до кислорода в водных растворах, как это происходит в биологических системах, in vitro и in vivo. RD100 обладает хорошей активностью с йодом вместо CF₃ заместителем в левом арильном кольце.

Соединения ряда 1 (см. таблицу 5) признаны значительно более хорошими для лечения рака простаты, чем бикалутамид. Однако установлено, что RD37 и RD131 быстро метаболизируются, то есть обладают коротким временем нахождения в крови. RD162 обладает желательной фармакинетикой.

Фиг.17 показывает, что при введении бикалутамида, уровни PSA клеток LNCaP остаются неизменными или возрастают по отношению к введению раствора носителя, тогда как при введении RD162, уровни PSA снижаются. Фиг.18 иллюстрирует, что при введении раствора носителя опухоль продолжает увеличиваться. Напротив, при введении RD162 с дозой 1 мг на кг веса тела в день, скорость роста опухоли снижается, и размер опухоли стабилизируется после 17 дней. При введении RD162 с дозой 10 мг на кг веса тела в день, размер опухоли уменьшается во времени. Фиг.19 иллюстрирует, что при введении RD162 10 мг на кг веса тела в день, эмиссия фотонов, вызванная активностью люциферазы снижается. Фиг.20 показывает, что введение RD162 с этой дозировкой приводит к снижению или стабилизации размера опухоли и снижению эмиссии фотонов, вызванной активностью люциферазы.

Фиг.21 показывает, что введение RD162, RD162', RD162ʺ, RD169 и RD170 с дозами 100, 200, 500 и 1000 нМ, уровни PSA клеток LN-AR снижаются. Более того, чем выше доза, тем ниже уровень PSA. Фиг.23 представляет вес мочеполового тракта и скорость эмиссии фотонов, вызванной активностью люциферазы, начальные и после 14 дней введения бикалутамида или RD162 для нетронутых и кастрированных мышей. Вес и скорость эмиссии фотонов возрастает и для нетронутых и кастрированных мышей. Введение кастрированным мышам RD162 приводит к снижению веса и эмиссии фотонов по сравнению с кастрированными мышами без введения, как и с введением бикалутамида.

Таким образом, соединения ряда 1 особенно предпочтительны для применения в качестве AR антагонистов и терапевтических средств против резистентного к гормонам рака простаты. Они могут быть применены для лечения других болезней, связанных с AR, таких как доброкачественная гиперплазия простаты, выпадение волос и акне. Эти и родственные соединения могут быть полезными в качестве модуляторов других ядерных рецепторов, таких как глюкокортикоидных рецепторов, рецепторов эстрогенов и рецепторов активатора пролиферации пероксисом и в качестве терапевтических средств для болезней, в которых играют роль ядерные рецепторы, такие как рак молочной железы, рак яичников, диабет, болезни сердца и болезней, связанных с метаболизмом. Они могут быть полезными в испытаниях, например, в качестве стандартов, промежуточных продуктов или пролекарства.

Ряд 2

Ряд 2 соединений (см. таблицу 6) значительно лучше, чем бикалутамид для лечения рака простаты, хотя имеются указания, что RD54 может действовать в качестве агониста. Фиг.3 показывает, что соединения RD145, RD152, RD153, RD162 и RD163 в ряду 1 и RD161 в ряду 2 при дозировке в диапазоне концентраций 125-1000 нМ снижают активность люциферазы в клетках LNCaP-AR тогда как контрольные растворы ДМСО и бикалутамида обладают слабым эффектом или эффект отсутствует. Фиг 4 иллюстрирует, например, что при концентрации 1000 нМ, соединения RD37 и RD131, в ряду 1, вызывают большее снижение уровня PSA клеток LNCaP-AR, чем RD133, RD134 и RD138 в ряду 2. Фиг.11 представляет объем опухоли во времени и иллюстрирует, что при введении бикалутамида или раствора носителя, опухоль продолжает расти, тогда как при введении RD162, из ряда 1, размер опухоли снижается. Фиг.12 иллюстрирует эмиссию фотонов, вызванную активностью люциферазы, которая остается неизменной или возрастает при введении бикалутамида по сравнению с введением раствора носителя, тогда как эмиссия фотонов снижается при введении RD162. Фиг 14 иллюстрирует, что при введении бикалутамида, имеется небольшое снижение уровней PSA или оно отсутствует, тогда как введение RD131 и RD162, уровни PSA снижаются. Фиг.15 иллюстрирует, что ICso RD37, RD131 и RD162, из ряда 1, намного ниже, чем ICso бикалутамида.

В общем, соединения ряда 2 структурно похожи на соединения ряда 1, но с различными заместителями в правом арильном кольце. Соединения ряда 2 являются полезными при применении в качестве антагонистов AR и в качестве лекарственного средства против резистентного к гормонам рака простаты. Они могут быть полезными для лечения других болезней, связанных с AR, такими как доброкачественная гиперплазия простаты, выпадение волос и акне. Указанные и родственные соединения также могут быть полезными в качестве модуляторов других ядерных рецепторов, таких как рецепторов эстрогенов и рецепторов активатора пролиферации пероксисом и в качестве терапевтических средств для болезней, в которых играют роль ядерные рецепторы, такие как рак молочной железы, рак яичников, диабет, болезни сердца и болезней, связанных с метаболизмом. Они могут быть полезными в испытаниях, например, в качестве стандартов, промежуточных продуктов или пролекарства.

Ряд 3

Соединения ряда 3 (см. таблицу 7) оцениваются как немного лучшие, чем бикалутамид при лечении рака простаты. RD133, RD134 и RD138 (из ряда 2) вызывают большее снижение уровня PSA клеток LNCaP-AR, чем RD135 и RD137 из ряда 3. Все эти соединения вызывают большее снижение уровня PSA, чем бикалутамид.

Другие соединения ряда 3 (не показаны) не являются диарилгидантоинами и сравнимы по активности с моноарилгидантоинами известного уровня техники RD2, RD4 и RD5.

Таким образом, соединения ряда 3 применимы в качестве антагонистов AR и лекарственных средств против резидентного к гормонам раку простаты. Они могут быть полезными для лечения других болезней, связанных с AR, такими как доброкачественная гиперплазия простаты, выпадение волос и акне. Указанные и родственные соединения также могут быть полезными в качестве модуляторов других ядерных рецепторов, таких как рецепторов эстрогенов и рецепторов активатора пролиферации пероксисом и в качестве лекарственных средств для болезней, в которых играют роль ядерные рецепторы, такие как рак молочной железы, рак яичников, диабет, болезни сердца и болезней, связанных с метаболизмом. Они могут быть полезными в испытаниях, например, в качестве стандартов, промежуточных продуктов или пролекарства.

Таблица 7

Ряд 4

Соединения ряда 4 (см. таблица 8) оцениваются как не лучшие, чем бикалутамид при лечении рака простаты. RD 39 и RD40 ряда 4 и RD37 ряда 1, например, различаются только в заместителе нижнего правого углерода гидантоинового кольца. Заместители правого арильного кольца также могут влиять на активность.

Некоторые соединения ряда 4 (включая представленные соединения и другие, которые не показаны) не являются диарильными соединениями (без правого арильного кольца), не являются тиогидантоинами, не являются дважды замещенными по нижнему правому углероду гидантоинового кольца, и/или с другими заместителями, отличными от кислорода или амидо по нижнему левому углероду гидантоинового кольца. Это обеспечивает доказательство неожиданного преимущества диарилтиогидантоинов, дважды замещенных по нижнему правому углероду гидантоинового кольца с кислородом или амидо по нижнему левому углероду гидантоинового кольца.

Таким образом, соединения ряда 4 могут быть полезными в качестве антагонистов AR и лекарственного средства для резистентного к гормонам рака простаты, по меньшей мере, в той степени, в которой они сравнимы с бикалутамидом. Они могут быть полезными для лечения других болезней, связанных с AR, такими как доброкачественная гиперплазия простаты, выпадение волос и акне. Указанные и родственные соединения также могут быть полезными в качестве модуляторов других ядерных рецепторов, таких как рецепторов эстрогенов и рецепторов активатора пролиферации пероксисом и в качестве лекарственных средств для болезней, в которых играют роль ядерные рецепторы, такие как рак молочной железы, рак яичников, диабет, болезни сердца и болезней, связанных с метаболизмом. Они могут быть полезными в испытаниях, например, в качестве стандартов, промежуточных продуктов или пролекарства.

Ряд 5

Соединения ряда 5 (см. таблицу 9) являются неактивными или практически неактивными и таким образом хуже, чем бикалутамид для лечения рака простаты. Заместители в правом арильном кольце являются важными для выраженной активности.

Некоторые соединения ряда 5 (некоторые из них показаны, и некоторые из них не показаны) не являются диарильными соединениями (без правого арильного кольца), не являются тиогидантоинами, не являются дважды замещенными по нижнему правому углероду гидантоинового кольца, и/или с другими заместителями, отличными от кислорода или амидо по нижнему левому углероду гидантоинового кольца. Это обеспечивает доказательство неожиданного преимущества диарилтиогидантоинов, дважды замещенных по нижнему правому углероду гидантоинового кольца с кислородом или амидо по нижнему левому углероду гидантоинового кольца. В частности концевой заместитель в RD155, RD 156 и 158 (СН₂NR_xR_y, где R_x,y=H или метилу) не придает активность указанным соединениям.

Соединения ряда 5 не представляются желательными при лечении рака простаты или в качестве антагонистов AR, хотя указанные соединения могут быть полезными в качестве модуляторов других ядерных рецепторов, таких как рецепторов эстрогенов и рецепторов активатора пролиферации пероксисом и в качестве лекарственных средств для болезней, в которых играют роль ядерные рецепторы, такие как рак молочной железы, рак яичников, диабет, болезни сердца и болезней, связанных с метаболизмом. Они могут быть полезными в испытаниях, например, в качестве стандартов, промежуточных продуктов или пролекарства.

Ряд 6

Соединения ряда 6 (см. таблицу 10) являются неактивными или практически неактивными и кроме того являются сильными агонистами и таким образом являются более плохими, чем бикалутамид для лечения рака простаты. Сравнительные ранжированные соединения с очень слабым эффектом по сравнению с соединениями изобретения. Особенно, RD72 обладает очень низкой активностью с хлором в качестве заместителя в левом арильном кольце, тогда как RD7, с трифторметаном и RD100 с йодом включены в ряд 1. Результаты для соединений ряда 6 дают доказательства неожиданного преимущества дважды замещенных диарилтиогидантоинов по нижнему правому углероду гидантоинового кольца и с кислородом или амидо у нижнего левого углерода и с определенными заместителями в левом арильном кольце.

Соединения ряда 6 представляются желательными для лечения рака простаты или в качестве антагонистов AR.

Неранжированные соединения

Для некоторых соединений недостаточно экспериментальных данных чтобы их ранжировать. Указанные неранжированные соединения представлены в таблице 11.

На основе данных и методов изобретения и применяя оценку на основе рассмотрения многих соединений, включая некоторые, не представленные здесь, можно сделать некоторые замечания о неранжированных соединениях. Сравнительный пример RD1 вероятно следует поставить в ряд 3 со сравнительными примерами RD3-RD5. RD89 вероятно гидролизует до RD37 (ряд 1), и поэтому должен обладать сравнимой активностью. RD104 вероятно гидролизует до RD58 (ряд 1), и поэтому должен обладать сравнимой активностью. RD105 вероятно гидролизует до RD8 (ряд 1), и RD 139 и RD140 вероятно гидролизуют до RD138 (ряд 2), и поэтому должны обладать сравнимой активностью.

Вкратце, получены и идентифицированы соединения, которые дают доказательства гораздо большей эффективности по сравнению с бикалутамидом в лечении рака простаты.

Чувствительность антираковой активности соединений к структурным различиям

Авторы изобретения определили, какие возможные небольшие изменения в структуре гидантоиновых соединений могут привести к значительным изменениям характеристик соединений в лечении рака простаты. Например, RD161 и RD162 отличаются единственным заместителем в виде фтора в арильном кольце и RD162 находится в ряду 1, тогда как RD161 находится в ряду 2, оба превосходят бикалутамид в лечении рака простаты, но RD162 лучше. Однако, RD149, которое отличается от RD 161 только присутствием дополнительного атома углерода между метилкарбамоильной группой и арильным кольцом, не лучше чем бикалутамид для лечения рака простаты и помещены в ряд 4. Воздействие RD161, RD162 и RD149 на активность люциферазы можно видеть на фиг.24. При заданной концентрации соединения активность люциферазы при воздействии RD161 и RD162 меньше, чем активность люциферазы при воздействии RD149.

RD9 отличается от RD8 только тем, что амино группа замещена на гидроксильную группу. Однако тогда как RD8 находится в ряду 1, значительно превосходит бикалутамид в лечении рака простаты, RD9 находится в ряду 4, не лучше бикалутамида. Воздействие RD8 и D9 на активность люциферазы в линии клеток 1AR можно видеть на фиг.27. Для заданной дозы активность люциферазы при воздействии RD8 меньше, чем активность лициферазы при воздействии RD9. Воздействие RD8 и RD9 на активность люциферазы в линии клеток 4AR можно видеть на фиг.26. Для заданной дозы активность люциферазы при воздействии RD8 меньше, чем активность люциферазы при воздействии RD9. Воздействие RD8 и RD9 на уровни PSA в линии клеток LN/AR можно видеть на фиг.25. Для заданной дозы уровень PSA при воздействии RD8 меньше, чем уровень PSA при воздействии RD9.

RD130 и RD131 отличаются одно от другого только одним заместителем в конце карбамоильной группы и оба соединения помещены в ряд 1, хотя было установлено, что RD131 особенно предпочтительно. RD129 такое же, что и RD130, за исключением метокси группы в амино группе. Однако, RD129 помещен в ряд 3. RD128 подобен RD129, но на один углерод меньше в цепи, связывающей эфирную группу с арильным кольцом; RD128 помещен в ряд 3. Воздействие RD130, RD131, RD128 и RD129 на уровни PSA в линии клеток LN/AR можно видеть на фиг.28. Для заданной концентрации уровень PSA при воздействии RD130 и RD131 меньше, чем уровень PSA при воздействии RD128 и RD129.

RD153 и RD155 отличаются одно от другого тем, что первое имеет метилкарбамоильную группу, связанную с арильным кольцом и диметильным заместителем, связанным с тиогидантоиновой группой, тогда как последний имеет метиламино группу, связанную с правым арильным кольцом и циклобутильным заместителем, связанным с тиогидантоиновой группой. Тогда как RD153 находится в ряду 1, намного лучше бикалутамида при лечении рака простаты, RD155 находится в ряду 5, неактивное или практически неактивное при лечении рака простаты. Воздействие RD153 и RD155 на активность люциферазы в линии клеток LN/AR можно видеть на фиг.29. Для заданной концентрации активность люциферазы при воздействии RD153 меньше, чем активность люциферазы при воздействии RD155.

RD58 и RD60 отличаются одно от другого замещением тио на оксо группу и диметильным заместителем в циклобутильном заместителе. Тогда как RD58 находится в ряду 1, RD60 находится в ряду 4.

Фармацевтические композиции и применение

Соединения изобретения полезны в качестве фармацевтических композиций, полученных с применением терапевтически эффективного количества соединений изобретения, определенных в описании, и фармацевтически приемлемых носителя или разбавителя.

Диарилгидантоины изобретения могут входить в фармацевтические композиции и назначены субъекту, нуждающемуся в лечении, например, млекопитающему, такому как человек, в разнообразных формах, приспособленных для выбранного пути приема, например, орально, через нос, внутрибрюшинно или парентерально, внутривенно, внутримышечно, местным применением, подкожно или инъекцией в ткань.

Таким образом, диарилгидантоины изобретения могут назначаться системно, например, орально в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем, таким как инертный разбавитель или усваиваемый съедобный носитель или ингаляцией, или вдуванием. Они могут быть заключены в капсулы с твердой или мягкой желатиновой оболочкой, могут быть спрессованы в таблетки или могут быть включены непосредственно в пищу пациента. При оральном терапевтическом назначении диарилгидантоины могут быть совмещены с одним или более наполнителями и применяться в форме таблеток для проглатывания, буккальных таблеток, пастилок, эликсиров, суспензий, сиропов, вафель и тому подобное. Диарилгидантоины могут быть совмещены с тонкоизмельченным порошкообразным носителем и могут приниматься субъектом ингаляцией или вдуванием. Такие композиции и рецептуры могут содержать, по меньшей мере 0,1% диарилгидантоинов. Процентное содержание композиций и лекарств конечно может изменяться и легко может составлять около 2%-60% от веса заданной одноразовой дозы. Количество диарилгидантоинов в указанных терапевтически полезных композициях таково, что достигается эффективный уровень дозы.

Таблетки, пастилки, пилюли, капсулы и тому подобное также могут содержать следующее: связующие, такие как трагакантовая камедь, гуммиарабик, кукурузный крахмал или желатин; наполнители, такие как, дикальций фосфат; разрыхлитель, такой как кукурузный крахмал, картофельный крахмал, альгиновая кислота и тому подобное; скользящее вещество, такое как стеарат магния; и подсластитель, такой как сахароза, фруктоза, лактоза или аспартам или ароматизирующее вещество, такое как мятное масло, масло грушанки или вишневая отдушка. Когда одноразовая доза является капсулой, она может содержать в дополнение к вышеуказанным материалам жидкий носитель, такой как растительное масло или полиэтиленгликоль. Различные материалы могут присутствовать в качестве покрытия или иначе модифицировать физическую форму твердой одноразовой дозы. Например, таблетки, пилюли или капсулы могут быть покрыты желатином, воском, шеллаком, сахаром и подобным. Сироп или эликсир может содержать активное соединение, сахарозу или фруктозу в качестве подсластителя, метил и пропилпарабены в качестве консервантов, краситель и отдушку, такие как вишневую и апельсиновую вкусовую добавку. Конечно, любой материал, применяемый при изготовлении любой формы одноразовой дозы, должен быть фармацевтически приемлемым и по существу нетоксичным с используемыми количествами. Кроме того, диарилгидантоины могут быть включены в составы с замедленным высвобождением. Например, диарилгидантоины могут быть включены в капсулы, таблетки и пилюли с замедленным рассасыванием.

Диарилгидантоины также могут быть введены внутривенно или внутрибрюшинно инфузией или инъекцией. Растворы диарилгидантоинов могут быть получены в воде, необязательно смешанными с нетоксическим сурфактантом. Также могут быть получены дисперсии в глицерине, жидком полиэтиленгликоле, триацетине и их смесях и в маслах. При обычных условиях хранения и применения указанные рецептуры могут содержать консервант, препятствующий росту микроорганизмов.

Фармацевтические формы доз для инъекций или инфузий могут включать стерильный водный раствор или дисперсии стерильных порошков, включающие диарилгидантоины, адаптированные для немедленного приготовления стерильных растворов для инъекции или инфузий или дисперсий, необязательно инкапсулированные в липосомы. Во всех случаях, конечная форма дозы должна быть стерильной, жидкой и стабильной в условиях изготовления и хранения. Жидкий носитель может быть растворителем или жидкой дисперсионной средой, включающей, например, воду этанол, многоатомный спирт (например, глицерин, пропиленгликоль, жидкий полиэтиленгликоль и тому подобное), растительные масла, нетоксичные эфиры глицерина и их подходящие смеси. Собственная текучесть может поддерживаться образованием липосом, путем сохранения требуемого размера частиц в случае дисперсий или применением сурфактантов. Предупреждение действия микроорганизмов может быть осуществлено различными антибактериальными и противогрибковыми средствами, например, парабенами, хлорбутанолом, фенолом, сорбиновой кислотой, тримезоралом и тому подобное. Во многих случаях предпочтительно включать изотонические средства, например, сахара, буферы или хлорид натрия. Пролонгированное поглощение композиций для инъекций может быть выполнено применением в композициях средств, замедляющих поглощение, например, моностеарата алюминия и желатина.

Стерильные растворы для инъекций готовят включением диарилгидантоинов в требуемых количествах в подходящий растворитель с различными другими вышеуказанными ингредиентами с последующей стерилизацией фильтрацией. В случае стерильных порошков для приготовления стерильных растворов для инъекций предпочтительными способами получения являются способы вакуумной сушки и лиофилизации, которые дают порошки активного ингредиента плюс любые дополнительные желательные ингредиенты, присутствующие в предшествующих растворах, стерилизованных фильтрацией.

Для местного применения диарилгидантоины могут быть применены в чистом виде. Однако, в общем, желательно применять их на коже в качестве композиций или рецептур в сочетании с дерматологически приемлемым носителем, который может быть твердым или жидким.

Полезные твердые носители включают мелкодисперсные твердые вещества, такие как тальк, глина, микрокристаллическая целлюлоза диоксид кремния, оксид алюминия и тому подобное. Другие твердые носители включают нетоксичные полимерные наночастицы и микрочастицы. Полезные жидкие носители включают воду, спирты или гликоли или вода/спирт/гликоль смеси, в которых диарилгидантоины могут быть растворены или диспергированы до эффективного содержания, необязательно с нетоксичными сурфактантами. Вспомогательные средства, такие как отдушка и дополнительные антимикробные средства могут быть добавлены для оптимизации свойств для определенного применения. Полученные жидкие композиции могут применяться в гигроскопических прокладках, используемых для пропитки бандажа и другой одежды, или распылением на обрабатываемую площадь аэрозольным распылителем или насосом.

Загустители, такие как синтетические полимеры, жирные кислоты, соли и эфиры жирных кислот, жирные спирты, модифицированная целлюлоза или модифицированные минералы также могут быть применены с жидкими носителями для образования устойчивых мазей, гелей, притираний, мыла и тому подобное, для непосредственного применения на коже потребителя.

Примеры полезных дерматологических композиций, которые могут быть применены для нанесения диарилгидантоинов на кожу существуют в известном уровне техники; например, см. Jacquet et al. (US 4,608,392), Geria (US 4,992,478), Smith et al. (US 4,559,157) и Wortzman (US 4,820,508), которые все включены в описание ссылкой.

Подходящая дозировка соединений формулы I может определена сравнением их активности in vitro и in vivo на моделях на животных. Способы для экстраполяции эффективной дозировки на мышах и других животных к человеку существует в известном уровне техники; например, см. US 4,938,949, который включен в описание ссылкой.

Например, концентрация диарилгидантоинов в жидкой композиции, такой как лосьон, может составлять около 0,1-25% масс. или около 0,5-10% масс. Концентрация в полутвердой или твердой композиции, такой как гель или порошок может составлять около 0,1-5% масс. или около 0,5-2,5% масс.

Количество гидантоинов, необходимое при применении в лечении, будет изменяться не только от определенной выбранной соли но также от пути введения, природы заболевания, которое лечится, и возраста и состояния пациента и, в конечном счете, от выбора лечащего терапевта или клинициста.

Эффективная дозировка и способы введения средств изобретение являются традиционными. Точное количество (эффективная доза) средства будет меняться от субъекта к субъекту в зависимости, например, от биологического вида, возраста, веса и общего или клинического состояния субъекта, тяжести или механизма любого нарушения, которое лечится, применяемого особого средства или носителя, способа и графика приема и тому подобного. Терапевтически эффективная доза может быть определена эмпирически обычными процедурами, известными специалисту в данной области техники. См., например, The Pharmacological Basis of Therapeutics, Goodman and Gilman, eds., Macmillan Publishing Co., New York. Например, эффективная доза может быть определена сначала либо анализом культуры клеток, либо в подходящих моделях на животных. Модель на животном также может быть применена для определения подходящих уровней концентрации и путей введения. Указанная информация затем может быть применена для определения полезных доз и путей введения для человека. Терапевтическая доза также может быть выбрана по аналогии с дозировкой сравнимых лекарственных средств.

Конкретный вид введения и режим дозировки будет выбираться лечащим клиницистом, принимая во внимание особенности случая ^например, субъекта, болезни, стадии болезни и если случай профилактического приема). Лечение может включать дневную или дневные дозы соединения(й) на период от нескольких дней до месяцев или даже лет.

В общем, однако, подходящая доза будет находиться в диапазоне около 0,001-100 мг/кг, например, около 0,01-100 мг/кг веса тела в день, например, выше около 0,1 мг на килограмм или в диапазоне около 1-10 мг на килограмм веса тела реципиента в день. Например, подходящая доза может составлять около 1 мг/кг, 10 мг/кг или 50 мг/кг веса тела в день.

Диарилгидантоины легко вводят в форму одноразовой дозы; например, содержащей 0,05-10000 мг, 0,5-10000 мг, 5-1000 мг или около 100 мг активного ингредиента в форме одноразовой дозы.

Диарилгидантоины могут быть введены для достижения пика концентраций в плазме, например, около 0,5-75 μМ, около 1-50 μМ, около 2-30 μM или около 5-25 μМ. Типичные желательные концентрации в плазме, по меньшей мере, или не более 0,25, 0,5, 1, 5, 10, 25, 50, 75, 100 или 200 μМ. Например, уровни в плазме могут быть около 1-100 микромолярными или около 10-25 микромолярными. Это может быть достигнуто, например, внутривенной инъекцией 0,05-5% растворов диарилгидантоинов в физиологическом растворе или оральным введение в виде пилюли, содержащей около 1-100 мг диарилгидантоинов. Желательные уровни в крови может быть поддерживаться непрерывной инфузией для обеспечения около 0,00005-5 мг на кг веса тела в час, например, по меньшей мере, или не более 0,00005, 0,0005, 0,005, 0,05, 0,5 или 5 мг/кг/ч. Альтернативно указанные уровни могут быть получены периодическими инфузиями, содержащими около 0,0002-20 мг на кг веса тела, например, по меньшей мере, или не более 0,0002, 0,002, 0,02, 0,2, 2, 20, или 50 мг диарилгидантоинов на кг веса тела.

Диарилгидантоины легко могут быть представлены в одной дозе или в разделенных дозах принимаемых через подходящие интервалы, например, в виде двух, трех, четырех или более разделенных доз в день. Разделенные дозы сами могут быть далее разделены, например, на большое число отдельных произвольных приемов, таких как множественные ингаляции из аппарата для вдувания.

Много идентифицированных выше соединений демонстрируют незначительную или отсутствие агонистической активности по отношению к клеткам резистентного к гормонам рака простаты. Поскольку указанные соединения являются сильными ингибиторами AR, они могут быть применены не только для лечения рака простаты, но также для лечения других болезней, связанных с AR, таких как доброкачественная гиперплазия простаты, потери волос и акне. Поскольку AR принадлежат к семейству ядерных рецепторов, указанные соединения могут служить основой для синтеза средств, направленных на другие ядерные рецепторы, такие как рецепторы эстрогенов и рецепторы активатора пролиферации пероксисом. Поэтому, они могут быть далее усовершенствованы для лечения других болезней, таких как рак молочной железы, рак яичников, диабет, болезни сердца и болезней, связанных с метаболизмом, в которых играют роль ядерные рецепторы.

Осуществления представленные и изученные в настоящем описании, направлены только на объяснение специалисту в данной области техники наилучшего способа, известного авторам изобретения, выполнения и применения изобретения. Ничто в настоящем описании не следует рассматривать в качестве ограничения объема притязаний настоящего изобретения. Все представленные примеры являются типичными и не ограничивающими. Вышеописанные осуществления изобретения могут быть модифицированы или изменены, не выходя за объем притязаний изобретения, что понятно специалисту в данной области техники в свете вышеуказанных пояснений. Поэтому следует понимать, что в рамках формулы и ее эквивалентов, изобретение может быть реализовано иначе, чем конкретно описано.

1. Соединение формулы:

2. Соединение по п.1 для терапевтического лечения человека или животного.

3. Соединение по п.1 для лечения невосприимчивого к гормонам рака простаты.

4. Соединение по п.1 для лечения доброкачественной гиперплазии простаты.

5. Соединение по п.1 для лечения рака молочной железы (груди).

6. Соединение по п.1 для лечения рака яичников.