Способ диагностики тяжести преэклампсии на основании оценки экспрессии днк - распознающих рецепторов dai-1 в ткани плаценты


G01N1/30 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

Владельцы патента RU 2641029:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству и гинекологии. Предложен способ морфологической диагностики тяжести преэклампсии. Проводят оценку уровня оптической плотности цитоплазмы синцитиотрофобласта промежуточных ворсин плаценты посредством иммуногистохимии с первичными антителами к DAI-1. При значениях оптической плотности менее 0,15 у.е. диагностируют преэклампсию тяжелого течения, при значениях выше 0,15 у.е. - преэклампсию умеренного течения и артериальную гипертензию беременных. Изобретение обеспечивает эффективную диагностику тяжести преэклампсии на основании оценки экспрессии ДНК-распознающих рецепторов DAI-1 в ткани плаценты. 3 ил., 3 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, связано с разработкой способа морфологической диагностики преэклампсии путем иммуногистохимического исследования плаценты, в том числе у пациенток со сложностью оценки тяжести преэклампсии и недостаточными клинико-лабораторными данными.

Преэклампсия (ПЭ) - это мультисистемное патологическое состояние, развивающееся при беременности, клинические признаки которого манифестируют после 20-й недели гестации, частота распространения достигает 2-8% [Duley L. The global impact of pre-eclampsia and eclampsia // Semin Perinatol. 2009. Vol. 33(3). P. 130-137].

К настоящему времени известны способы диагностики преэклампсии. Предложен способ диагностики преэклампсии у беременной с хронической артериальной гипертензией в сроки 24-40 недель беременности (RU 2483311 Макаров О.В. и др. 27.05.13), при котором с помощью твердофазного иммуноферментного анализа сыворотки крови определяют содержание аутоантител класса IgG к двуспиральной ДНК, антигенам мембран тромбоцитов ТrМ-001-15 и ТrМ-015-12, антигенам почечной ткани KiM-05-300 и KiS-07-120 и антигену митохондрий печени НММР. Далее, для каждого вида исследованных антител определяют соотношение аутоантител в опытной сыворотке к контрольной сыворотке. Однако недостатком данного метода является его трудоемкость и необходимость определения большого спектра антител. Зарегистрирован также способ диагностики преэклампсии (RU 2408259 С2, Абрамова и др., 10.01.2011) по сердечно-сосудистистым параметрам. Если при увеличении срока беременности скорость распространения пульсовой волны снижается, диагностируют физиологическое развитие беременности, а при отсутствии снижения или при нарастании скорости прогнозируют развитие преэклампсии. Недостатком указанного способа является необходимость наблюдения пациенток в течение длительного периода. В случаях, когда существует необходимость быстрой и достоверной верификации заболевания, данный способ не может быть применим.

Наряду с этим, известен способ морфологической диагностики преэклампсии путем иммуногистохимического выявления повышенного уровня активности ингибитора активатора плазминогена (plasminogen activator inhibitor -1, PAI-1) в структурах плаценты [Estelles A., Gilabert J., Keeton M., Eguchi Y., Aznar J., Grancha S., Espna F., Loskutoff D.J., Schleef R.R. Altered expression of plasminogen activator inhibitor type 1 in placentas from pregnant women with preeclampsia and/or intrauterine fetal growth retardation. // Blood. 1994. Vol. 84. Р. 143-150]. Однако при наличии у пациенток мутации генов тромбофилии и склонностью к тромбообразованию этот метод может не работать.

Другим способом морфологической диагностики преэклампсии является иммуногистохимическое выявление и определение соотношений фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) и его трех рецепторов (VEGFR1, VEGF-R2, VEGF-R3) [Tripathi R., Rath G., Jain A., Salhan S. Soluble and membranous vascular endothelial growth factor receptor-1 in pregnancies complicated by preeclampsia. // Ann. Anat. 2008. Vol. 190. P. 477-489; Tripathi R., Rath G., Ralhan R., Saxena S., Salhan S. Soluble and membranous vascular endothelial growth factor receptor-2 in pregnancies complicated by preeclampsia. // Yonsei Med. J. 2009. Vol. 50. Р. 656-666]. Однако недостатком данного способа является низкая степень их достоверности из-за отсутствия прямой связи - с процессами, происходящими только при беременности, такими как образование плаценты.

Также известно несколько способов диагностики тяжести преэклампсии. К ним относятся способ оценки тяжести преэклампсии с помощью изучения содержания тромбоцитов в венозной крови, когда по уровню тромбоцитопении судят о степени тяжести преэклампсии (Преэклампсия: руководство. / Под ред. акад. РАМН Г.Т. Сухих, проф. Л.Е. Мурашко. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. С. 226-228). Недостатком данного способа является низкая степень его достоверности из-за наличия многочисленных механизмов тромбоцитопении (в т.ч. аутоимунного механизма, связанного с диссеминированным внутрисосудистым свертыванием крови, анемией, изменением объема циркулирующей крови и другими), в том числе и не характерных для беременности, а также отсутствием четкой зависимости между степенью тяжести преэклампсии и выраженностью тромбоцитопении). Описан способ (RU 2478966 С1, Редьков О.В и др. 10.04.13) оценки степени тяжести преэклампсии, который включает анализ плазмы периферической венозной крови беременных, вынашивающих плод мужского пола, после 20 недель беременности определяют концентрацию плодной ДНК и при концентрации плодного генетического материала от 1,8 до 2,6 нг/мл прогнозируют преэклампсию средней степени тяжести и при концентрации 2,6 нг/мл и выше - преэклампсию тяжелой степени. Хотя данный способ очень точен, однако, не применим если женщина вынашивает девочку.

Известен иммуногистохимический способ диагностики гестоза (тяжелой преэклампсии) (RU 2407008 С1, Сарыева и др., 20.12.2010), при котором посредством морфологического и иммуногистохимического исследования базальной децидуальной оболочки и ворсинчатого хориона плаценты определяют индекс экспрессии маркеров апоптоза р53 и bcl-2 и по ним проводят определение тяжести преэклампсии. Несмотря на это, высокий индекс клеток, подвергнутых апоптозу, часто связан с расстройством кровообращения, наличием множественных инфарктов, развитием плацентарной недостаточности, что не связано с преэклампсией.

Описан также способ (RU 2487657 С1, Кулаков и др., 10.11.2012, 01.03.2012), при котором проводят морфометрию терминальных ворсин плаценты. Определяют общую площадь капилляров и площадь синцитиотрофобласта терминальных ворсин и рассчитывают отношение полученных значений площадей капилляров и синцитиотрофобласта. Однако данный метод может быть ориентировочным и разветвленный тип ангиогенеза ворсин плаценты может встречаться при наличии гипоксии плаценты различного генеза.

DAI-1 рецепторы (от англ. DNA-dependent activator of IFN-regulatory factors - ДНК связанный активатор интерферон-регулирующих факторов; цитоплазматические ДНК распознающие рецепторы [Biological DNA Sensor. The Impact of Nucleic Acids on Diseases and Vaccinology // 1 st Edition Editors by Ishii K., Tang C.K. 2013, 368 p. eBook ISBN 9780124051683; Takaoka A, Wang Z, Choi MK, Yanai H, Negishi H, Ban T, Lu Y, Miyagishi M, Kodama T, Honda K, Ohba Y, Taniguchi T. DAI (DLM-1/ZBP1) is a cytosolic DNA sensor and an activator of innate immune response // Nature. 2007. Vol. 26. N448. Pt. 7152. Р. 501-505].

Известно, что уровень свободной ДНК (как материнской, так и фетальной) повышается при преэклампсии [Ge Q., Не Y., Qiao D. Ren М., Zhang J. Quantification of Maternal Serum Cell-Free Fetal DNA in Early-Onset Preeclampsia // Int J Mol Sci. 2013; 14(4): 7571-7582;], фрагменты ДНК являются их лигандами, поэтому активность DAI-1 меняется.

Целью изобретения является повышение объективности диагностики преэклампсии, определение степени тяжести заболевания, улучшение перинатальных исходов.

Способ осуществляют следующим образом

Полученные парафиновые гистологические препараты толщиной 3 мкм из парацентральной части плаценты подвергают депарафинизации общепринятым методом путем последовательной обработки срезов, включающей 3 смены ксилола (по 10 минут), 3 смены 96° этилового спирта (по 10 минут), 80° этилового спирта (по 5 минут), 50° этилового спирта (5 минут), 2 смены дистиллированной воды (по 3 минуты). После процедуры депарафинизации и гидратации образцы проходили процедуру демаскировки антигена с Target Retrieval Solution 10х (Dako, Дания) в микроволновой печи при мощности 600°С. После этого стекла помещали в буфер на 20 мин при комнатной температуре для охлаждения. Эндогенную пероксидазную активность блокируют путем инкубации срезов в течение 5 минут с реагентом 3% Н2О2. Отмывание срезов производят трижды фосфатно-солевым буферным раствором (PBS рН=7,6) по 5 минут в каждом. После этого срезы инкубируют с первичными антителами к DAI-1 (1:1000; Thermo Fisher Scientific; USA) в течение 30 минут при комнатной температуре. Отмывание срезов производят трижды фосфатно-солевым буферным раствором (PBS рН=7,6) по 5 минут в каждом. Далее используют систему визуализации En Vision (Dako REAL En VisionTM Detection System, Дания) в течение 30 минут. Промывают трижды фосфатно-солевым буферным раствором. Процедуру окрашивания завершают 3-минутной инкубацией со смесью DAB+ с субстратом. В результате чего участки, где находится антиген, окрашиваются в коричневый цвет. Для улучшения визуализации структурных элементов плаценты срезы докрашивают водным раствором гематоксилина Майера в течение 5 секунд. После этого споласкивают срезы дистиллированной водой, затем проводят обезвоживание: 50° этиловый спирт (3 минуты), 80° этиловый спирт (3 минуты), 2 смены 96° этилового спирта (3 минуты), с последующей сменой 3-х ксилолов (по 3 минуты); и заключают препараты в синтетическую смолу (затем на препарат капали синтетическую смолу и накрывают покровным стеклом).

Негативным контролем являются срезы ткани плаценты, окрашенные по той же методике, но без инкубации с антителами. Позитивные контроли ставятся в соответствии со спецификацией производителя.

Продукты реакции визуализировались в виде коричневого окрашивания. Интенсивность окрашивания продукта реакции в структурных элементах ворсин в синцитиотрофобласте плаценты определяли по уровню оптической плотности.

На основании полученных данных препаратов при проведении измерения по 3 точкам измерений оптической плотности цитоплазмы синцитиотрофобласта промежуточных ворсин плаценты, нами выявлено, что в образцах плаценты при тяжелой преэклампсии в связи с выраженными дистрофическими изменениями, повреждением и слущиванием синцитиотрофобласта Hofmann-Kiefer K.F., Chappell D., Knabl J., Frank H.G., Martinoff N., Conzen P., Becker B.F., Rehm M. Placental syncytiotrophoblast maintains a specific type of glycocalyx at the fetomaternal border: the glycocalyx at the fetomaternal interface in healthy women and patients with HELLP syndrome// Reprod Sci. 2013. Vol. 20. №.10. P. 1237-45], уровень оптической плотности в цитоплазме синцитиотрофобласта DAI-1 была ниже 0,15 у.е. Учитывая, что повреждение синцитиотрофобласта, поддерживающих нормальное течение беременности, является ведущим в генезе преэклампсии, то сохранение и повышение экспрессии DAI-1 в цитоплазме синцитиотрофобласте характерно для более мягкого (умеренного) течения преэклампсии, а снижение - для тяжелой рис. 1а-в). Следует отметить, что экспрессия паттерн-распознающих рецепторов DAI-1 описана нами в структурах плаценты впервые. Чувствительность предлагаемого метода - 83%, специфичность - 66%.

Примеры

Пример 1. Пациентка Т., 35 лет, была родоразрешена на 38 неделе гестации. Из плаценты был вырезан кусочек размером 2×2×0,5 см, из которого по стандартной методике готовят гистологические срезы. Полученные срезы после общепринятой методики депарафинизациии подвергают процедуре иммуногистохимии с инкубацией с первичными антителами DAI-1, согласно описанной методике.

На готовых препаратах проводят определение уровня оптической плотности, средний уровень оптической плотности DAI-1 в цитоплазме синцитиотрофобласта соответствовал 0,08 ед., что свидетельствовало о тяжелой преэклампсии. При последующем получении данных клинико-лабораторного исследований и анализа истории родов установлено наличие признаков повышения артериального давления выше 160/100 мм рт.ст. и повышенного содержания белка в суточной моче выше 1 г/сут, на основании чего сделано клиническое заключение о развитии у беременной тяжелой преэклампсии.

Пример 2. Пациентка С., 33 лет, в связи с появлением эпизодов повышенного артериального давления и подозрением на развитие преэклампсии поступила для наблюдения и последующего родоразрешения. После операции кесарева сечения из плаценты вырезали кусочек размером 2×2×0,5 см, из которого по стандартной методике готовят парафиновые гистологические препараты. Полученные срезы после общепринятой методики депарафинизации с последующим иммуногистохимическим окрашиванием с применением первичных антител к DAI-1. На готовых препаратах проводили определение уровня оптической плотности, средний уровень экспрессии в цитоплазме синцитиотрофобласта DAI-1 у данной пациентки соответствовал 0,2 у.е., что свидетельствовало об отсутствии тяжелой преэклампсии. При анализе результатов клинического течения и лабораторных показателей мочи в истории родов сделано заключение об отсутствии тяжелой преэклампсии.

Пример 3. Пациентка Б., 38 лет на сроке 34 недель поступила с артериальным давлением 150/100 мм рт.ст., белком в моче 0,9 г в сутки. Была госпитализирована и находилась на стационарном лечении 2 недели. В связи с нарастанием тяжести преэклампсии была подвергнута оперативному родоразрешению. Из плаценты вырезан кусочек размером 2×2×0,5 см, из которого по стандартной методике готовят парафиновые гистологические препараты, а после методики депарафинизации подвергли процедуре иммуногистохимии, согласно описанной методике. После постановки иммуногистохимической реакции с первичными антителами к DAI-1 и анализа уровня оптической плотности, нами было выявлено, что средний уровень экспрессии DAI-1 в цитоплазме синцитиотрофобласта равен 0,35 ед, что свидетельствует об отсутствии тяжелой преэклампсии, что в дальнейшем было подтверждено данными истории болезни (у пациентки была выявлена умеренная преэклампсия). Сохранение окрашивания в синцитиотрофобласте является положительным прогностическим критерием для оценки тяжести преэклампсии.

Учитывая, что преэклампсия – заболевание, неограниченное рамками гестационного периода, поэтому установление тяжести преэклампсии важно для последующего лечения женщин (Клинические рекомендации РФ (протоколы лечения): Гипертензивные расстройства во время беременности, в родах и в послеродовом периоде. Преэклампсия. Эклампсия. 2016). Предлагаемый способ позволяет улучшить результаты постановки диагноза, а следовательно, и лечения данного контингента больных.

Диагностические возможности предлагаемого способа были проверены при сопоставлении результатов морфологического исследования материала плаценты и данных клинико-лабораторных обследований 47 беременных, находившихся на лечении в Научном центре акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова. У 14 из них была диагностирована тяжелая преэклампсия, у 33 - умеренная преэклампсия и артериальная гипертензия.

Подписи к рисункам

Иммуногистохимическое окрашивание ворсин плаценты DAI-1 при артериальной гипертензии и при преэклампсии, ×400.

Фиг. А - Иммуногистохимическое окрашивание DAI-1 в ворсинах плаценты, при артериальной гипертензии.

Фиг. Б - Иммуногистохимическое окрашивание DAI-1 в ворсинах плаценты, при умеренной преэклампсии.

Фиг. В - Иммуногистохимическое окрашивание DAI-1 в ворсинах плаценты, при тяжелой преэклампсии.

Список литературы:

- Duley L. The global impact of pre-eclampsia and eclampsia // Semin Perinatol. 2009. Vol 33(3). P. 130-137.

- Estelles A., Gilabert J., Keeton M., Eguchi Y., Aznar J., Grancha S., Espna F., Loskutoff D.J., Schleef R.R. Altered expression of plasminogen activator inhibitor type 1 in placentas from pregnant women with preeclampsia and/or intrauterine fetal growth retardation // Blood. 1994. Vol. 84. P. 143-150.

- Tripathi R., Rath G., Jain A., Salhan S. Soluble and membranous vascular endothelial growth factor receptor-1 in pregnancies complicated by preeclampsia//Ann. Anat. 2008. Vol. 190. P. 477-489;

- Tripathi R., Rath G., Ralhan R., Saxena S., Salhan S. Soluble and membranous vascular endothelial growth factor receptor-2 in pregnancies complicated by preeclampsia // Yonsei Med. J. 2009. Vol. 50. P. 656-666.

- Преэклампсия: руководство / Под ред. акад. РАМН Г.Т. Сухих, проф. Л.Е. Мурашко. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. С. 226-228.

- Ge Q., Не Y., Qiao D. Ren М., Zhang J. Quantification of Maternal Serum Cell-Free Fetal DNA in Early-Onset Preeclampsia // Int J Mol Sci. 2013; 14(4): 7571-7582

- Biological DNA Sensor. The Impact of Nucleic Acids on Diseases and Vaccinology // 1st Edition Editors by Ishii K., Tang C.K. 2013, 368 p. eBook ISBN 9780124051683.

- Takaoka A, Wang Z, Choi MK, Yanai H, Negishi H, Ban T, Lu Y, Miyagishi M, Kodama T, Honda K, Ohba Y, Taniguchi T. DAI (DLM-1/ZBP1) is a cytosolic DNA sensor and an activator of innate immune response //Nature. 2007. Vol. 26. N448. Pt. 7152. P. 501-505.

- Hofmann-Kiefer K.F., Chappell D., Knabl J., Frank H.G., Martinoff N., Conzen P., Becker B.F., Rehm M. Placental syncytiotrophoblast maintains a specific type of glycocalyx at the fetomaternal border: the glycocalyx at the fetomaternal interface in healthy women and patients with HELLP syndrome // Reprod Sci. 2013. Vol. 20. №.10. P. 1237-45.

- Клинические рекомендации РФ (протоколы лечения): Гипертензивные расстройства во время беременности, в родах и в послеродовом периоде. Преэклампсия. Эклампсия. 2016

Способ морфологической диагностики тяжести преэклампсии на основании оценки экспрессии ДНК-распознающих рецепторов DAI-1 в ткани плаценты, отличающийся тем, что проводят оценку уровня оптической плотности цитоплазмы синцитиотрофобласта промежуточных ворсин плаценты посредством стандартной процедуры иммуногистохимии с первичными антителами к DAI-1, при значениях оптической плотности менее 0,15 у.е. диагностируют преэклампсию тяжелого течения, а при значениях выше 0,15 у.е. - преэклампсию умеренного течения и артериальную гипертензию беременных.



 

Похожие патенты:

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ идентификации антитела, которое специфически связывается с интересующим антигеном на клеточной поверхности, предусматривающий иммунизацию животного вектором экспрессии, кодирующим антиген клеточной поверхности; приведение в контакт клеток, содержащих на своей поверхности антитела и выделенных из животного, подвергнутого иммунизации, причем антитела связаны с первой сортируемой меткой, с клетками, экспрессирующими антиген, связанный со второй сортируемой меткой; определение специфического связывания с использованием клеточного сортера по наличию первой и второй сортируемой метки в клеточном комплексе; а также идентификацию участков, определяющих комплементарность с антигеном (CDR), у идентифицированного антитела и прививку CDR на каркасную область акцепторного антитела.

Настоящее изобретение относится к иммунологии. Предложено поликлональное или моноклональное антитело, которое специфически связывает эпитоп, состоящий из пептида TKSLDKGYNK нейротоксина Clostridium, и получено путем применения олигопептида с упомянутым эпитопом.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лепрологии, и может быть использовано для прогнозирования обострений лепрозных невропатий у больных лепрой и невропатий нелепрозной этиологии.
Изобретение относится к области медицины и касается композиции и способов для разделения клеток на основе агглютинации. .
Изобретение относится к области медицины, в частности к инфекционным болезням и лабораторной диагностике. .
Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии. .

Изобретение относится к области медицины, а именно к пульмонологии, и может быть использовано для решения вопроса об эффективности терапии глюкокортикоидными гормонами и подбора адекватной дозы препаратов глюкокортикоидных гормонов у больных бронхиальной астмой (БА).

Изобретение относится к средствам определения состояния и классификации биологического материала. .

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены cпособ выявления ингибиторов супрессии супрессора опухолевого роста Pdcd4 в опухолевых клетках и генетическая конструкция pLucPdcd4, представляющая собой плазмиду, кодирующую репортерный белок, представляющий собой химеру люциферазы светлячка с белком Pdcd4 человека.

Изобретение относится к геометрическим формам образцов для испытания материалов. Сборная конструкция образца (10) для испытаний содержит множество слоев, выполненных из армированного волокном полимерного материала, совместно образующих слоистый материал постоянной толщины.

Группа изобретений относится к технологии и технике отбора проб жидкости из трубопровода и может найти применение в нефтедобывающей и других отраслях промышленности, где требуется высокая точность определения параметров перекачиваемой по трубопроводам жидкости.

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в практике аналитических, агрохимических, медицинских лабораторий. Осуществляют концентрирование микроэлементов для последующего аналитического определения путем соосаждения с диантипирилметаном, образующим в системе вода - минеральная кислота - тиоцианат аммония коллектор дитиоцианат диантипирилметания.

Изобретение относится к устройствам для взятия проб в жидком или текучем состоянии и может быть использовано в ядерных реакторах с жидкометаллическим теплоносителем для отбора проб расплавленного теплоносителя.

Изобретение относится к производственной сфере народного хозяйства, в частности к области гигиены труда и производственной санитарии, и может быть использовано для количественной оценки вредных примесей в воздухе, вдыхаемом человеком.

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и биотехнологии, в частности к созданию тест-системы ИФА с использованием вируса нодулярного дерматита крупного рогатого скота при разработке и производстве средств диагностики.

Группа изобретений относится к области медицины, в частности к онкологии, гинекологии, клинической лабораторной диагностике, патологической анатомии, и представляет собой способы (варианты) комплексной морфологической диагностики рака яичников на основе получения клеточного осадка из экссудата брюшной полости или из смыва брюшной полости, полученного путем лапароцентеза, под контролем ультразвука или пункции заднего свода влагалища, по результатам комплексной морфологической диагностики устанавливают клинический диагноз.

Предложены способ и устройство испытания испытуемого объекта (204). Способ испытания прочности соединений композитного объекта (204) включает: генерирование волны (228) напряжения в текучей среде (306) в полости (302) в конструкции (300) генератора волн; направление волны (228) напряжения через текучую среду (306) в полости (302) в композитный объект (204) и задание определенного количества свойств (310) волны (228) напряжения в текучей среде (306) на основании конфигурации (308) полости (302) в конструкции (300) генератора волн.
Изобретение относится к области анализа химического состава полезных ископаемых, в частности к выбору способа подготовки проб углеродистых пород к определению благородных металлов различными аналитическими методами, в частности атомно-абсорбционным и масс-спектрометрическим с ионизацией в индуктивно-связанной плазме.

Изобретение относится к области медицины, в частности к медицинской генетике и сердечно-сосудистой хирургии. Предложен способ прогнозирования риска развития синдрома полиорганной недостаточности у пациентов после коронарного шунтирования. Проводят анализ клинико-анамнестических показателей и молекулярно-генетическое тестирование с определением полиморфизмов генов TLR6 и TREM-1. Каждому прогностическому критерию присваивают оценочный балл. Минимальный риск прогнозируют при сумме баллов от 0 до 2,5. Средний риск - при сумме от 3,0 до 4,0 баллов. Высокий риск - от 4,5 до 5,5 баллов. Изобретение обеспечивает эффективное прогнозирование риска развития синдрома полиорганной недостаточности после коронарного шунтирования путем определения полиморфизмов генов-кандидатов и расчета суммарного риска по оценочной шкале на основании баллового эквивалента. 7 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству и гинекологии. Предложен способ морфологической диагностики тяжести преэклампсии. Проводят оценку уровня оптической плотности цитоплазмы синцитиотрофобласта промежуточных ворсин плаценты посредством иммуногистохимии с первичными антителами к DAI-1. При значениях оптической плотности менее 0,15 у.е. диагностируют преэклампсию тяжелого течения, при значениях выше 0,15 у.е. - преэклампсию умеренного течения и артериальную гипертензию беременных. Изобретение обеспечивает эффективную диагностику тяжести преэклампсии на основании оценки экспрессии ДНК-распознающих рецепторов DAI-1 в ткани плаценты. 3 ил., 3 пр.

Наверх