Метод диагностики паразитозов птиц и животных

Изобретение относится к области ветеринарии и связано с разработкой копрологического метода диагностики кишечных паразитов птиц и яиц клещей. Метод заключается в том, что берут пробу фекалий весом 1-2 г, помещают в копрологический стакан, заливают 10 мл дистиллированной воды, размешивают, доливают 20-30 мл воды, процеживают через металлическое сито в чистый стакан, дают взвеси отстояться в течение 5 мин, верхнюю часть сливают, оставшуюся часть переливают в центрифужную пробирку объемом 13 мл, центрифугируют в течение 3 мин при 1500 g, после сливают жидкость до осадка на дне пробирки, к осадку добавляют флотационную жидкость, состоящую из насыщенного раствора хлористого цинка - 1750 г на 1 л, и насыщенного раствора сахара - 1333 г на 1 л, взятых в соотношении 1,5:1 соответственно, размешивают и центрифугируют 3 мин при 1500 g, после чего микроскопируют поверхностную пленку. Способ является быстрым, позволяет выявить яйца и личинки кишечных паразитов птиц, их личинок, а также яйца клещей, и обладает высокой диагностической эффективностью. 3 табл., 1 пр.

 

Данное изобретение относится к области ветеринарии и связано с разработкой копрологического метода диагностики паразитов птиц и животных.

Важнейшей задачей ветеринарии в современных условиях развития индивидуальных предпринимательств, крестьянско-фермерских хозяйств в частных секторах РФ является помощь начинающим фермерам в производстве здоровой продукции. Она заключается в своевременной диагностике, лечении и профилактике различных заболеваний, в частности вызванных возбудителями паразитозов.

Несмотря на индивидуальный подход со стороны владельцев, птицы и животные подвержены заражению эндо- и эктопаразитами. Отсюда возникает вопрос о ликвидации экономических потерь, связанных с паразитарными болезнями. Кишечные паразиты наносят серьезный ущерб животноводству и птицеводству, складывающийся из падежа, снижения общей продуктивности. Ухудшаются вкусовые качества мяса из-за снижения содержания аминокислот, витаминов, макро- и микроэлементов и накопления токсических веществ в печени и в организме в целом. При этом птицы и животные, пораженные кишечными паразитами, выделяют во внешнюю среду яйца гельминтов, ооцист эймерий и цист амеб.

Одним из способов борьбы с кишечными паразитозами является лечебно-профилактическая дегельминтизация, целесообразность которой основывается на результатах своевременных и безошибочных паразитологических исследований.

Своевременная диагностика по праву занимает основное место в комплексе противопаразитарных мероприятий. Однако в настоящее время на практике используют устаревшие методы прижизненной диагностики кишечных паразитозов, эффективность которых не отвечает современным запросам. В литературе также встречаются устаревшие рекомендации относительно применения тех или иных методик, обладающих заведомо низкой диагностической эффективностью.

Основным и самым распространенным методом копрологической диагностики традиционно в России принято считать метод Фюллеборна. Однако этот метод является давно устаревшим, его диагностическая эффективность очень низкая, что не представляет никакой ценности в постановке диагноза на кишечные паразитозы.

Также распространенными методами являются: метод Котельникова-Хренова и метод Дарлинга.

Метод Котельникова-Хренова. Флотационный раствор состоит из насыщенного раствора нитрата аммония (техническая гранулированная аммиачная селитра, используемая как удобрение). Техника проведения: берут пробу весом 3-5 г, помещают в копрологический чистый стакан, заливают небольшим количеством жидкости, тщательно размешивают, затем добавляют 50-100 мл этого раствора и процеживают через металлическое сито или марлю, в 1 слой, в сухой, чистый стакан. Взвесь отстаивают 40-60 мин, затем прикосновением петли снимают поверхностную пленку, переносят ее на предметное стекло для микрокопирования [2].

Недостатком метода является быстрая кристаллизация капель и слабый диагностический эффект.

Метод Дарлинга. Пробу фекалий весом 3-5 г размешивают в стаканчике с водой в количестве 18-20 мл, процеживают через сито в другой стаканчик, полученную жидкость переливают в центрифужную пробирку и центрифугируют в течение 1-2 мин при 3000 об/мин. Затем надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют флотационную жидкость, состоящую из равных частей глицерина и насыщенного раствора хлорида натрия. Содержимое взбалтывают и вновь центрифугируют в том же режиме. При этом яйца всплывают, их снимают проволочной петлей с поверхности пленки и микроскопируют [2].

Недостатком метода является слабая диагностическая эффективность.

Задача изобретения - разработка усовершенствованного универсального диагностического копрологического метода, для определения паразитарной инвазии птиц и животных.

В процессе разработки метода были опробованы существующие копрологические методы для разных групп животных и экспериментальные с добавлением различных компонентов в разных соотношениях.

В ходе многочисленных экспериментов был установлен состав, по результатам которого показатели имели наивысшие результаты.

Способ диагностики кишечных паразитозов проводится по следующей схеме.

Вначале готовят комбинированную флотационную смесь из двух ингредиентов.

Компонент А. В 1 л кипящей воды растворяют 1750 г ZnCL2.

Компонент В. Насыщенный раствор сахара - 1333 г на 1 л воды. Для получения комбинированной флотационной жидкости смешивают компоненты А и В в соотношении 1,5:1. Плотность раствора составляет 1,557.

С каждой пробы пинцетом берут помет массой 1-2 г, переносят его в копрологический стакан (объемом 50 мл), заливают 10 мл дистиллированной воды (допускается водопроводная), тщательно размешивают до появления равномерной взвеси, затем добавляют еще 20-30 мл, размешивают и процеживают через металлическое сито или марлю, в один слой, в сухой чистый стакан. Отстаивают 5 мин, после надосадочную жидкость сливают. На дне стакана оставляют такое количество взвеси, которое бы уместилось в центрифужную пробирку. Затем проводят 3-минутное центрифугирование при 1500 g. После всю жидкость до осадка сливают, а к осадку добавляют флотационную жидкость. Осадок взбалтывают до получения равномерной взвеси и снова центрифугируют в течение 3 мин при 1500 g. После металлической петлей снимают поверхностную пленку, переносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом.

Пример. Материалом для сравнительной оценки эффективности существующих методов выявления паразитов служили пробы фекалий цесарок, полученные единовременно из одного частного сектора (КФХ «Шишикиных» Пестречинского района). Собранные фекалии тщательным образом перемешивали, после чего в равной степени распределяли по чистым стаканчикам (объемом 50 мл) для дальнейших исследований.

Статистическую обработку цифровых данных проводили по разработанным программам в Microsoft Exel. Достоверность устанавливали по методу Стьюдента-Фишера [4].

Данные о сравнительной эффективности различных копрологических методов диагностики паразитозов птиц при естественном заражении представлены в таблице 1.

Из таблицы 1 видно, что при исследовании пробы фекалий по методу Фюллеборна в 1 мл поверхностной пленки было обнаружено 16,1±2,42 яиц аскаридий, 8,0±1,27 яиц гетеракисов, 9,8±1,13 яиц томинксов, 28,4±5,57 ооцист эймерий, яиц стронгилоидесов метод не выявил. Методы Котельникова-Хренова и Дарлинга показали более лучшие результаты, но также не выявили яйца стронгилоидесов. Усовершенствованный метод диагностики птиц показал наилучший результат, с помощью которого в 1 мл было выявлено 256,4±12,78 яиц аскаридий, 156,6±23,76 яиц гетеракисов, 164,7±±11,46 яиц томинксов, 151,3±18,15 яиц стронгилоидесов, 348,3±41,92 ооцист эймерий. Также обнаружены цисты кишечных амеб, яйца клещей и сами клещи на разных стадиях своего развития.

Кроме того, в ходе экспериментов был проведен опыт с использованием этих же проб фекалий недельной и двухнедельной давности, где из яиц уже вылупились личинки. Новый метод позволил обнаружить как сами яйца, так личинки различных гельминтов.

При изучении паразитофауны у птиц разных половозрастных групп в частных секторах на территории РТ использовали разработанный нами метод и применяющийся на практике метод Фюллеборна.

Результаты копрологических исследований представлены в таблице 2.

Из таблицы видно, что видовой состав паразитов в КФХ «Шишикиных» Пестречинского района РТ у птиц представлен аскарисами, гетеракисами, томинксами, стронгилоидесами и ооцистами эймерий. Исследования, проведенные с 340 пробами помета птиц разных видов и половозрастных групп, из 4 частных секторов показали, что методом Фюллеборна яйца аскарисов выявлены в 26% проб, яйца гетеракисов в 6%, томинксов в 32,1%, ооцист эймерий в 50,5%. Яиц стронгилоидесов метод Фюллеборна не выявил. Новым способом диагностики паразитозов яиц аскарисов выявлено в 66,8% проб, гетеракисов в 43,1%, томинксов в 64%, стронгилоидесов в 47,1%, ооцист эймерий в 97,1%. Таким образом, процент зараженных животных, выявленных новым методом, был значительно больше, чем установленных методом Фюллеборна. Эта закономерность прослеживается при исследовании всех птиц из частных секторов №1, №2, №3.

Аналогичные исследования проводили и при изучении паразитофауны у животных разных половозрастных групп в частных секторах на территории РТ. Результаты приведены в таблице 3.

Из таблицы 3 видно, что в частных секторах на территории различных районов РТ у коз видовой состав паразитов представлен стронгилятами, эймериями и кишечными амебами. У кроликов - стронгилятами, пассалурами, эймериями. У лошадей - стронгилятами, параскарисами, анаплацефалами и кишечными амебами. У овец - стронгилятами, мониезиями, эймериями и кишечными амебами. У КРС - стронгилятами, эймериями и кишечными амебами. Исследования, проведенные с 10 пробами фекалий коз разных пород и половозрастных групп в КФХ «Шишикиных», показали, что методом Фюллеборна выявлено яиц стронгилят меньше на 80%, эймерий на 50%. Цист амеб метод Фюллеборна не выявил. Аналогичные результаты с другими животными в разных частных секторах говорят о том, что новый метод позволяет выявить возбудителей паразитов даже при минимальной степени инвазии. Проведя лечебно-профилактическую дегельминтизацию, также можно вовремя предотвратить снижение продуктивности животных.

Время, затраченное на исследование одной пробы фекалий при использовании разработанного нами метода, в среднем составляет 11 мин.

Высокая диагностическая эффективность данного метода позволяет использовать его для исследования птиц и животных со слабой степенью инвазии.

Преимущество нового метода по сравнению с другими методами состоит в том, что капли исследуемого материала после высыхания на предметном стекле можно длительное время (более 2 месяцев) изучать и использовать для учебных и научных целей.

Источники информации

1. Лутфуллин М.Х. Ветеринарная гельминтология: учебник для вузов, по спец. "Ветеринария" / М.Х. Лутфуллин, Д.Г. Латыпов, М.Д. Корнишина. - Казань: Идел-Пресс, 2007. - 232 с.

2. Лабораторное исследование кала у животных: учебное - методическое пособие / М.Х. Лутфуллин, К.Х. Папуниди, А.Х. Волков, Д.Г. Латыпов. - Казань: 2015. - С. 10-18.

3. Акбаев М.Ш. Паразитология и инвазионные болезни животных: учебник для вузов, по спец. "Ветеринария" / М.Ш. Акбаев, А.А. Водянов, Ф.И. Василевич и др. (ред. М.Ш. Акбаев). - 2-е изд, испр. и доп. - М.: КолосС, 2002. - 64 с.

4. Плохинский И.А. Биометрия / И.А. Плохинский. - М.: МГУ, 1970. - 360 с.

Способ диагностики паразитозов птиц, заключающийся в том, что берут пробу фекалий весом 1-2 г, помещают в копрологический стакан, заливают 10 мл дистиллированной воды, размешивают, доливают 20-30 мл воды, процеживают через металлическое сито в чистый стакан, дают взвеси отстояться в течение 5 мин, верхнюю часть сливают, оставшуюся часть переливают в центрифужную пробирку объемом 13 мл, центрифугируют в течение 3 мин при 1500 g, после сливают жидкость до осадка на дне пробирки, к осадку добавляют флотационную жидкость, состоящую из насыщенного раствора хлористого цинка - 1750 г на 1 л, и насыщенного раствора сахара - 1333 г на 1 л, взятых в соотношении 1,5:1 соответственно, размешивают и центрифугируют 3 мин при 1500 g, после чего микроскопируют поверхностную пленку.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к методам экспериментального моделирования патологических процессов, протекающих в мочевой системе. Предлагаемый способ моделирования процесса образования оксалатного мочевого камня основан на выращивании камня в искусственно созданной модельной среде мочи человека, при этом для приготовления раствора используют: CaCl2⋅2H2O - 7 ммоль/л, MgSO4⋅7H2O - 4 ммоль/л, NH4Cl - 8 ммоль/л, K2SO4 - 6 ммоль/л, (NH4)2C2O4⋅H2O - 2÷4 ммоль/л, (NH4)3PO4 - 10 ммоль/л, K2CO3 - 7 ммоль/л, KCl - 24 ммоль/л, NaCl - 140 ммоль/л, и дистиллированную воду.

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к диагностике. Для оценки риска рака желудочно-кишечного тракта создают в базе данных множество классификаторов в соответствии с множеством соответствующих результатов проведенных ранее анализов крови у множества подвергнутых анализу индивидуумов.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу комплексной диагностики состояния зубов при воздействии компьютерного излучения. Способ комплексной диагностики состояния зубов при воздействии компьютерного излучения, заключающийся в том, что проводят диагностику слюны по форме микрокристаллов и при наличии деформации формы кристаллов ротовой жидкости у обследуемого пациента проводят дополнительные исследования состояния эмали зубов, при котором на эмаль зуба наносят электролит в виде 10% раствора хлорида кальция в контролируемые точки, проводят измерение силы тока с помощью двух электродов, первый пассивный из которых располагают в полость рта и обеспечивают контакт с мягкими тканями, второй активный электрод погружают в электролит, снимают показания и при значении тока 0-0,2 мкА диагностируют интактную минерализованную эмаль, при значении тока 0,3-3,8 мкА диагностируют предкариозное состояние эмали, при значении тока 3,9-7,9 мкА диагностируют начальный кариес, при значении тока 8,0-27,7 мкА диагностируют поверхностный кариес, при значении тока 27,8-50,0 мкА диагностируют средний кариес, при значении тока более 50,0 мкА диагностируют глубокий кариес.

Изобретение относится к области медицины, в частности к стоматологии, медицинской микробиологии. Способ прогнозирования негативных последствий в полости рта при ортодонтическом лечении зубочелюстных аномалий несъемной техникой, включающий инструментальное и микробиологическое обследование, отличающийся тем, что у пациентов перед установкой несъемной техники после оценки индексных показателей стоматологического статуса проводят забор биоматериала зубной бляшки и устанавливают количественное содержание оральных стрептококков S.

Изобретение относится к области анализа материалов путем определения их физических свойств и может быть использовано в микробиологии, а также в биотехнологическом производстве.
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и описывает способ диагностики дисбиоза влагалища путем исследования вагинальной жидкости. Способ характеризуется тем, что производится смыв содержимого верхней трети влагалища физиологическим раствором и исследуется методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием на состав моносахаридов и при содержании во влагалищной жидкости глюкопиранозы 0,1543-0,3850 мг/мл, D-глюкозы 0,1232-0,6818 мг/мл, D-галактопиранозы 0,0723-0,2571 мг/мл, D-маннопиранозы 0,2432-0,4186 мг/мл диагностируется дисбиоз влагалища на этапе доклинических проявлений у женщин репродуктивного возраста.

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложены способ и система для клеточного анализа.

Изобретение относится к области химии, а именно к аналитической химии, электрохимии и биохимии, и предназначено для идентификации пептидов и выявления аминокислотных замен в их структурах.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования риска развития быстрорастущей миомы матки, заключающийся в том, что исследуют ультразвуковые параметры матки с подсчетом количества миоматозных узлов, методом краевой дегидратации менструальных выделений (МВ) определяют наличие параллельных и волокнистых структур и рассчитывают коэффициент Р: где z рассчитывают по формуле:z=b1×x1+b2×x2+b3×х3+а,где b1 - коэффициент, равный 2,172; x1 - волокнистые структуры в MB: наличие «2»; отсутствие «1»; b2 - коэффициент, равный 2,238; x2 - параллельные структуры в MB: наличие «2»; отсутствие «1»; b3 - коэффициент, равный 1,568; x3 - количество узлов; а - константа, равная –10,915; и при значении Р>0,5 дополнительно методом иммуноферментного анализа исследуют уровни лигандов APRIL и TRAIL, и при значении APRIL более 11,1 нг/мл, TRAIL менее 22,5 пг/мл прогнозируют риск развития быстрорастущей миомы матки.

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для неинвазивного мониторинга свойств биологической ткани. Последовательно проводят следующие этапы: сбора данных импеданса и вспомогательных данных от участка тела пользователя; предварительной обработки полученных данных, причем предварительная обработка заключается в фильтрации полученных данных и удалении артефактов из полученных данных импеданса путем обнаружения не относящихся к пище физиологических факторов на основе вспомогательных данных; восстановления динамики кривой глюкозы путем применения обученного алгоритма машинного обучения, оценивания гликемического индекса из динамики кривой глюкозы, предоставления пользователю результатов оценки и автоматического мониторинга привычек питания на основе упомянутых результатов оценки для определенного периода времени.

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к способу определения контаминации растворов и биологических жидкостей. Сущность способа состоит в том, что детектируют биологические объекты, включающие микроорганизмы или вирусы, с помощью наночастиц металлов, формирующихся in situ из внесенных в исследуемый объект солей соответствующих металлов, при последующем анализе динамики спектральных характеристик формирующихся наночастиц.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической онкологии для ранней диагностики инвазивного рака. Для этого выделяют или экстрагируют циркулирующие раковые клетки из биологического образца вертикальной фильтрацией через фильтр с размером пор между 3 и 100 мкм, который позволяет удерживать свободно циркулирующие опухолевые редкие клетки, но не препятствует прохождению через фильтр более мелких клеток.

Изобретение относится к биохимии. Описан способ дифференциальной и подтверждающей молекулярно-генетической диагностики врожденной аниридии и WAGR-синдрома.

В заявке описаны способы, системы и устройства контроля качества (КК) с использованием датчиков, предназначенные для применения с устройствами для проведения биологических/экологических диагностических экспресс-тестов (ДЭТ).
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии. Определяют при рождении пол ребенка, массу тела, содержание гемоглобина в периферической крови с учетом количества суток, проведенных в отделении реанимации и интенсивной терапии.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и патологической анатомии, предназначено для ранней диагностики серозных карцином яичника высокой степени злокачественности.
Изобретение относится к области ветеринарной медицины. Способ определения содержания триглицеридов в сыворотке крови коров характеризуется тем, что у пробы сыворотки крови объемом 1-3 мл измеряют динамическое поверхностное натяжение на тензиометре, работающем по принципу максимального давления в пузырьке, по полученным значениям динамического поверхностного натяжения определяют содержание триглицеридов ([Триглицериды], ммоль/л) в сыворотке крови с использованием формул регрессионно-корреляционного анализа: [Триглицериды]=-0,11σ1+0,14σ2-0,1σ3-0,09λ1+5,79, где σ1 [мН/м] - поверхностное натяжение при времени t=0,02 секунд, σ2 [мН/м] - поверхностное натяжение при времени t=1 секунда, σ3 [мН/м] - поверхностное натяжение при времени t=10 секунд, λ1 [мН/м с-1/2] - угол наклона конечного участка кривой в координатах σ/(t-1/2).

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оптимизации прогнозирования эндометрита в послеродовом периоде. Способ прогнозирования развития послеродового эндометрита с помощью показателя детоксикационной активности альбумина (DTE) заключается в том, что определяют DTE в сыворотке крови родильниц и при значении DTE<40% делают заключение о высоком риске развития послеродового эндометрита, при значении DTE>40% делают заключение об отсутствии послеродового эндометрита.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении рака пищевода для прогнозирования развития его прогрессирования. Способ прогнозирования прогрессирования рака пищевода отличается тем, что в гомогенатах образцов ткани опухоли и визуально неизмененной ткани (перитуморальной зоне и линии резекции), взятых при операции по поводу первично выявленного рака пищевода, методом проточной цитофлюориметрии определяют процентное содержание лимфоцитов субпопуляций CD3+CD8+, T regs (CD4+CD25+CD127dim), рассчитывают коэффициенты К1=ПЗ/ОП, К2=ПЗ/ЛР и К3=ЛР/ОП, где ПЗ - перитуморальная зона, ОП - опухолевая ткань, ЛР - линия резекции, и при значениях К1 для Т regs выше 0,343, К2 для Т regs выше 2,37 и К3 для CD3+CD8+ клеток ниже 1,198 прогнозируют прогрессирование рака пищевода.
Изобретение относится к области ветеринарной медицины. Способ определения содержания холестерола в сыворотке крови коров характеризуется тем, что у пробы сыворотки крови объемом 1-3 мл измеряют динамическое поверхностное натяжение на тензиометре, работающем по принципу максимального давления в пузырьке, по полученным значениям динамического поверхностного натяжения определяют содержание холестерола ([Холестерол], ммоль/л) в сыворотке крови с использованием формул регрессионно-корреляционного анализа[Холестерол]=0,25σ1-0,22σ2-0,1λ0+0,12λ1+0,71, где σ1 [мН/м] - поверхностное натяжение при времени t=0,02 секунд, σ2 [мН/м] - поверхностное натяжение при времени t=1 секунда, λ0 [мН/м⋅с1/2] - угол наклона начального участка кривой в координатах σ/(t1/2).

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики хронической болезни почек (ХБП) у больных сахарным диабетом 2 типа, включающий общеклиническое обследование, определение уровня микро- и макроальбуминурии, содержания цистатина С в сыворотке крови и расчет скорости клубочковой фильтрации по креатинину и цистатину С (CysC), отличающийся тем, что в плазме крови определяют васкулоэндотелиальный фактор роста (VEGF-A), эндотелин-1 (ЭТ-1), в моче определяют содержание нефрина и при значениях васкулоэндотелиального фактора роста (VEGF-A) 1000-1549 пг/мл, эндотелина-1 (ЭТ-1) 1,48-2,0 фмоль/мл, нефрина 20-50 нг/мл и цистатина С (CysC) 1,02-1,05 мг/мл диагностируют доклиническую стадию ХБП у больных сахарным диабетом 2 типа. Осуществление изобретения обеспечивает повышение точности, надежности и достоверности определения доклинической стадии ХБП. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области ветеринарии и связано с разработкой копрологического метода диагностики кишечных паразитов птиц и яиц клещей. Метод заключается в том, что берут пробу фекалий весом 1-2 г, помещают в копрологический стакан, заливают 10 мл дистиллированной воды, размешивают, доливают 20-30 мл воды, процеживают через металлическое сито в чистый стакан, дают взвеси отстояться в течение 5 мин, верхнюю часть сливают, оставшуюся часть переливают в центрифужную пробирку объемом 13 мл, центрифугируют в течение 3 мин при 1500 g, после сливают жидкость до осадка на дне пробирки, к осадку добавляют флотационную жидкость, состоящую из насыщенного раствора хлористого цинка - 1750 г на 1 л, и насыщенного раствора сахара - 1333 г на 1 л, взятых в соотношении 1,5:1 соответственно, размешивают и центрифугируют 3 мин при 1500 g, после чего микроскопируют поверхностную пленку. Способ является быстрым, позволяет выявить яйца и личинки кишечных паразитов птиц, их личинок, а также яйца клещей, и обладает высокой диагностической эффективностью. 3 табл., 1 пр.

Наверх