Способ диагностики деструктивных бациллярных форм туберкулеза легких

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в фтизиопульмонологии для ранней диагностики инфильтративных (бациллярных) форм туберкулеза легких. Способ включает исследование биологического материала инструментальными методами исследования. При этом в плазме крови исследуют содержание микроэлементов меди, цинка и железа. При повышении содержания меди более чем на 60%, содержания цинка более чем на 120% и содержания железа более чем на 25% от физиологической нормы диагностируют бациллярную форму туберкулеза легких при физиологической норме, равной содержанию меди 0,9±0,1 мкг/мл, содержанию цинка 0,7±0,1 мкг/мл и содержанию железа 1,1±0,1 мкг/мл. Изобретение позволяет повысить точность диагностики, обеспечивает раннюю диагностику и проведение скрининг-диагностики, упрощение способа и сокращение времени исследования. 2 пр., 2 табл., 3 ил.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к (диагностике) исследованию физических и химических свойств биологических материалов, и может быть использовано в фтизиопульмонологии для ранней диагностики инфильтративных (бациллярных) форм туберкулеза легких.

Туберкулез продолжает оставаться глобальной медико-биологической и социально-экономической проблемой. Туберкулез легких вносит основной вклад в заболеваемость и смертность от инфекционных заболеваний, оставаясь одной из десяти ведущих причин смерти в мире. Отдельные положительные тенденции, отмечаемые в ряде стран, в том числе и в России, не снижают остроты ситуации (Стерликов С.А. Эффективность лечения пациентов с мультирезистентным туберкулезом в Российской Федерации и пути ее повышения // Здравоохранение Российской Федерации, 2014. - Т. 58, №5. С. 26-29). По оценке ВОЗ, в 2015 году в мире 10,4 миллиона человек заболели туберкулезом и более 1,8 миллиона человек умерло от этой болезни (Равильоне М.К., Коробицын А.А. Ликвидация туберкулеза - новая стратегия ВОЗ в эру целей устойчивого развития, вклад Российской Федерации // Туберкулез и болезни легких, 2016. - Т. 94, №11. - С. 7-15).

Закрытые формы туберкулеза не являются заразными, однако, ранняя форма туберкулеза легких может переходить в инфильтративную и/или кавернозную формы, при которых пациент становится потенциально эпидемиологически опасным для окружающих, фактически превращаясь в активный туберкулезный очаг. Слюна человека при открытых формах туберкулеза легких содержит микобактерии туберкулеза (МБТ), которые при кашле, чихании или разговоре попадают в воздух, являясь источником инфекционной опасности. Особую угрозу туберкулез представляет для людей, страдающих иммунодефицитом, и детей. Обнаружение наиболее опасных источников туберкулезной инфекции, а именно больных туберкулезом легких, в мокроте которых микобактерии определяются методом простой бактериоскопии, является главным компонентом борьбы с туберкулезом. Лечение таких пациентов делает их безопасными для окружающих, благодаря чему разрывается цепочка передачи инфекции. Лица, контактирующие с больными с положительным результатом бактериоскопии мазков мокроты, подвержены гораздо более высокому риску заражения и последующего заболевания туберкулезом, чем лица, контактирующие с больными, у которых МБТ в мокроте обнаруживаются только методом посева (Rieder H.L. Epidemiologic basis of tuberculosis control. Paris, International Union Against Tuberculosis and Lung Disease, 1999. - 162 c.) В связи с тем, что признаки инфильтративной формы туберкулеза легких, находящейся на раннем этапе, часто отсутствуют, определить ее достаточно сложно, что в большинстве случаев становится причиной несвоевременного лечения болезни. Из-за недостаточной чувствительности и специфичности лабораторных методов исследования у некоторых больных открытой формой туберкулеза МБТ в мокроте обнаружить не удается. То есть являясь официально незаразными, они представляют серьезную опасность для окружающих.

Таким образом, раннее выявление деструктивных бациллярных форм туберкулеза легких - важный фактор снижения заболеваемости населения и предотвращения эпидемиологического распространения данного заболевания.

Известен способ дифференциальной диагностики деструктивных форм туберкулеза легких, заключающийся в выполнении рентгенологического исследования (флюорография и рентгенография) (Розенштраух Л.С., Виннер М.Г. Дифференциальная рентгенодиагностика заболеваний органов дыхания и средостения: Руководство для врачей: в 2 т. - Т. 1. - М.: Медицина 1991. - 352 с.).

Известный способ включает рентгенологическое исследование бронхолегочной системы и регистрацию затемнения в легочной ткани, имеющее нечеткие границы с участками просветления (распада) внутри. Способ может быть использован для диагностики и дифференциальной диагностики различных форм поражения бронхолегочной системы при туберкулезе легких (Тюрин И.Е., Нейштадт А.С., Черемисин В.М. Компьютерная томография при туберкулезе органов дыхания. Спб.: Коронапринт, 1998. - 240 с.). Имеется прямая связь между наличием деструкции (распада или каверны) и бактериовыделением. Больные с деструкцией представляют наибольшую эпидемическую опасность по причине наличия у них бактериовыделения (Фтизиатрия: национальное руководство / Под ред. М.И. Перельмана. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. - 512 с.).

Известный способ, по мнению его авторов, обеспечивает определение наличия и локализации очагов поражения бронхолегочной системы по результатам рентгенологического исследования.

Однако известный способ обладает существенными недостатками:

- при выполнении рентгенографии и флюорографии деструктивные изменения (распад) выявляются только в 40-50% случаев больных инфильтративным туберкулезом легких (Туберкулез: Руководство для врачей / Под ред. А.Г. Хоменко / М.: Медицина, 1996. - 496 с.);

- способ во многих случаях не позволяет уверенно провести дифференциальную рентгенодиагностику между туберкулезом легких и нетуберкулезными патологиями бронхолегочной системы со сходной с туберкулезом легких рентгеносемиотикой патологических изменений в легких (рак легкого и метастазы в них, гранулематоз Вегенера, грибковые поражения легких, множественные абсцессы и т.д.);

- проводимое рентгенологическое исследование среди пациентов с активным туберкулезом легких - рентгенограммы не позволяют дифференцировать больных, представляющих большую опасность заражения окружающих (бациллярные формы), от больных, не являющихся серьезным источником заражения. (Туберкулез: выявление, лечение и мониторинг по К. Томену. Вопросы и ответы / Под редакцией Т. Фридена. // Пер. с англ. - 2-е издание. 2004. - 406 с.).

За прототип предлагаемого изобретения выбран известный способ диагностики деструктивных бациллярных форм туберкулез легких, включающий лабораторное исследование биологической жидкости (Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2-х томах. - Т. II / под ред. В.В. Долгова, В.В. Меньшикова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. - 808 с.)

Известный способ осуществляют следующим образом.

В качестве биологического материала для исследования берут отделяемую при кашле мокроту или промывные воды бронхов, полученные при проведении бронхоскопии. Препарат окрашивают по методу Циля-Нильсена. Приготовленный на предметном стекле мазок фиксируют над пламенем и окрашивают карболовым фуксином, который проникает в микробную клетку через клеточную стенку, богатую липидами и восками, при одновременном воздействии нагревания и протравливающего действия фенола. Последующая обработка мазка 25%-ным раствором серной кислоты или 3%-ным солянокислым спиртом приводит к обесцвечиванию всех некислотоустойчивых элементов мазка, которые докрашивают 0,3% -ным раствором метиленового синего. Кислотоустойчивые микобактерии (КУМ), не воспринимающие обычные анилиновые красители, окрашиваются в малиново-красный цвет, другие микроорганизмы, клетки и прочие элементы - в голубой. Мазок высушивают при комнатной температуре и микроскопируют. Для исследования используют световой микроскоп с иммерсионным объективом (x90 или x100) и окуляром с 7- или 10-кратным увеличением. Исследуют 100 полей зрения, отмечая количество обнаруженных кислотоустойчивых микобактерий. При отрицательном результате просматривают еще 200 полей зрения. Результаты микроскопии оценивают полуколичественно (табл. 1).

Известный способ позволяет увеличить чувствительность и специфичность выявления бациллярных форм туберкулеза легких и получить достоверные результаты, отражающие степень инфекционной опасности больного (Туберкулез: выявление, лечение и мониторинг по К. Томену. Вопросы и ответы / Под редакцией Т. Фридена. // Пер. с англ. - 2-е издание. 2004. - 406 с.).

К недостаткам способа можно отнести его недостаточную точность, сложность и трудоемкость выполнения, Известный способ ограничен в применении из-за того, что обнаружение МВТ возможно с вероятностью 50%, если в 1 мл мокроты содержится более 5000 микробных клеток. Если в тестируемой пробе содержится менее 104 микобактерий на 1 мл, обнаружить их в мазке трудно. Отрицательный результат микроскопического исследования не исключает диагноз туберкулеза, поскольку в мокроте может содержаться мало микобактерий туберкулеза (это может быть связано с объективными факторами: формой, стадией и локализацией инфекции, или субъективными факторами: неправильным взятием материала и плохой подготовкой мазка (Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2-х томах. - Т. II/ под ред. В.В. Долгова, В.В. Меньшикова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. - 808 с.). Известный способ не может быть использован в качестве скрининг-диагностики.

Задачей предлагаемого изобретения является создание способа диагностики, который лишен недостатков прототипа.

Технический результат предлагаемого изобретения заключается в повышении точности диагностики, обеспечении ранней диагностики и проведении скрининг-диагностики, упрощении способа и сокращении времени исследования.

Технический результат достигается тем, что в известном способе диагностики деструктивных бациллярных форм туберкулеза легких, включающем исследование биологического материала инструментальными методами исследования, в плазме крови исследуют содержание микроэлементов меди, цинка и железа и при повышении содержания меди более чем на 60%, содержания цинка более чем на 120% и содержания железа более чем на 25% от физиологической нормы диагностируют деструктивную бациллярную форму туберкулеза легких, при физиологической норме содержание меди равное 0,9±0,1 мкг/мл, содержание цинка равное 0,7±0,1 мкг/мл и содержание железа равное 1,1±0,1 мкг/мл.

Предлагаемое изобретение отвечает критерию новизна, так как при проведении патентно-информационных исследований не выявлены источники научно-технической и патентной литературы, которые бы порочили новизну изобретения.

Новизна предлагаемого способа заключается в том, что в плазме крови исследуют содержание микроэлементов меди, цинка и железа и при повышении содержания меди более чем на 60%, содержания цинка более чем 120% и содержания железы более чем на 25% от физиологической нормы диагностируют деструктивную бациллярную (открытую) форму туберкулеза легких, при физиологической норме содержания меди равном 0,9±0,1 мкг/мл, содержания цинка равном 0,7±0,1 мкг/мл и содержания железа равном 1,1±0,1 мкг/мл.

По современным представлениям (Новицкий В.В., Стрелис А.К., Уразова О.И., Шилько Т.А., Есимова И.Е., Воронкова О.В., Синицына В.А., Филинюк О.В., Иванова Е.В., Баранова О.В., Ткаченко С.Б. Макро- и микроэлементы мононуклеаров крови у больных туберкулезом легких // Микроэлементы в медицине. 2006. 7 (2): 33-38) увеличение концентрации меди при туберкулезе легких носит компенсаторный характер, что связано с ее противомикробным действием (Идз М. 1995. Все о витаминах и микроэлементах. - М.: Практика. - 382 с.). Также медь необходима для синтеза различных производных соединительной ткани (поскольку участвует в работе медьзависимого фермента лизилоксидазы, катализирующего превращения в коллагене аминогрупп лизильных остатков в альдегидные группы, стабилизирующие фибриллы коллагена), чем, возможно, объяснить активацию склеротических процессов в легочной ткани при туберкулезе легких. Медь входит в состав церулоплазмина, который является одним из активных ферментов антиоксидантной защиты, эндогенным модулятором воспалительных процессов. Помимо этого, медь (равно как и Zn2+) входит в состав субъединиц супероксиддисмутазы, ингибирующей свободно-радикальные процессы в клетках (Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс. - М.: Наука, 2004. - 343 с.).

Цинк участвует в процессах синтеза и репарации ДНК, регенерации тканей, иммуногенезе, функционировании эндокринной системы и т.д. Является конкурентным антагонистом кальция и магния, способствует эндонуклеазной активности и предупреждает апоптоз (Скальный А.В. Цинк и здоровье человека. - Оренбург: РИК ГОУОГУ, 2003. - 80 с.). Цинк входит с состав карбоангидразы, катализирующей гидратацию двуокиси углерода. Фермент необходим для поддержания кислотно-щелочного гомеостаза, дыхания, кальцификации, резорбции костей. Карбоангидраза с помощью гликозилфосфатидилинозитола прикреплена к мембране легочных капилляров. Имеются сведения о способности Zn2+ индуцировать экспрессию в лимфоцитах белков-иммунофиллинов, реализующих защиту клеток от токсических воздействий и служащих иммуногенами Т-лимфоцитов (Кудрин А.В., Скальный А.В. Микроэлементы в онкологии. Часть 2. Микроэлементы и противоопухолевый иммунитет// Микроэлементы в медицине. 2001. Т. 2, №2. С. 31-39). Показана роль цинка в потенцировании клеточного и гуморального иммунитета, направленного против бактерий, вирусов и опухолевых клеток. Цинк стимулирует внутритимусное развитие Т-лимфоцитов, дифференцировку В-лимфоцитов в иммуноглобулин-секретирующие клетки посредством Zn2+-зависимых фингер-белков созревание CD4 и CD8 лимфоцитов в культуре, экспрессию молекул главного комплекса гистосовместимости на макрофагах. Он регулирует антителогенез, повышает активность фагоцитоза (Costanzo L., Pique М.Е., Christianson D.W. Crystal structure of human arginase I complexed with thiosemicarbazide reveals an unusual thiocarbonly u-sulfide ligand in the binuclear manganese cluster // J. Am. Chem. Soc. 2007. V. 129, №20. P. 6388-6389), стимулирует высвобождение интерлейкина-2 и гамма-интерферона. Повышение концентрации цинка в плазме крови при туберкулезе легких можно объяснить включением защитных механизмов, предотвращающих свободно-радикальное повреждение клеток, поскольку цинк, так же, как и медь, входит в состав Zn-Cu-супероксиддисмутазы. Цинк активирует высвобождение фактора некроза опухоли, обладающего цитотоксическим, цитостатическим действием и способностью активировать некроз (Locksley R.M., Killeen N., Lenardo M.J. The TNF and TNF receptor superfamilies: integrating mammalian biology // Cell. 2001. V. 104, №4. P. 487-501).

Железо важно не только для обеспечения организма кислородом (гемоглобин, миоглобин), но и для функционирования дыхательной цепи и синтеза АТФ (цитохромы a, b, с), процессов детоксикации токсикантов (цитохром Р450), но и играет роль в иммунных реакциях. Так, железо необходимо для активации нейтрофилов и реализации их функции, являясь компонентом пероксидгенерирующих и нитроксидгенерирующих ферментов, а также интегральным компонентом миелопероксидазы (Oppenheimer S.J. Iron and Its Relation to Immunity and Infectious Disease // J. Nutr. 2001. №131. P. 616-635; Beard J.L. Iron biology in immune function, muscle metabolism and neuronal functioning // J. Nutr. 2001. №131. P. 568-580; Ahluwalia N., Sun J., Krause D., Mastro A.; Handte G. Immune function is impaired in irondeficient, homebound, older women // Am. J. Clin. Nutr. 2004. №79. P. 516-521). Железо участвует в регуляции продукции цитокинов, синтезе белка лимфоцитами (Новикова И.А. Железо и иммунный ответ // Проблемы здоровья и экологии. 2011. №4 (30). 42-48). Все группы простейших, грибов, бактерий (кроме непатогенных лактобацилл и Borrelia burgdorfery) нуждаются в железе для своей жизнедеятельности (Bhaskaram P. Micronutrient malnutrition, infection, and immunity: An overview // Nutr Rev. 2002. №60. P40-45). Связывание железа трансферрином и ферритином вызывает снижение роста бактерий (Kumar V., Choudhry V.P. Iron Deficiency and infection // Indian J Pediatr. 2010. V.77., №7. P.789-793). Увеличение концентрации железа при деструктивных формах туберкулеза легких, вероятно, носит компенсаторный характер, способствуя инактивации токсичных перекисных соединений, так как железо входит в состав каталазы и пероксидазы.

Известно, что уровень микроэлементов в плазме крови существенно меняется при различных заболеваниях (Оберлис Д., Харланд Б., Скальный А. Биологическая роль макро- и микроэлементов у человека и животных. - СПб.: Наука, 2008. - 544 с.). Однако в научно-медицинской литературе авторами предлагаемого изобретения не обнаружено сведений о возможности ранней диагностики деструктивных бациллярных форм туберкулеза легких с помощью анализа уровня микроэлементов в плазме крови, что позволяет сделать вывод о соответствии предлагаемого изобретения критерию «изобретательский уровень».

Предлагаемое изобретение обеспечивает при использовании следующий технический эффект:

- высокая точность диагностического исследования;

- обеспечение ранней диагностики;

- обеспечение возможности скрининг-диагностики;

- значительное снижение времени для осуществления диагностического исследования;

- увеличение эпидемиологической безопасности проводимого анализа, поскольку в способе, взятом за прототип, в качестве биологических материалов используют отделяемую при кашле мокроту или образцы легочной ткани, полученные при проведении бронхоскопии, содержащие микобактерий туберкулеза, работа с которыми является потенциально опасной для здоровья персонала медицинской лаборатории;

- снижение трудоемкости проводимого диагностического исследования.

Технический результат подтвержден проведенными клинико-лабораторными испытаниями.

Предлагаемый способ поясняется графическим материалом

На фиг. 1 изображена диаграмма уровня меди (M±m) в плазме крови больных разными формами туберкулеза легких. Контрольная группа - практически здоровые люди, соответствующие по полу и возрасту:

* - различия с показателями контрольной группы достоверны (р<0,05);

- различия с показателями между группами достоверны (р<0,05).

На фиг. 2 изображена диаграмма уровня цинка и железа (М±m) в плазме крови больных разными формами туберкулеза легких. Контрольная группа - практически здоровые люди, соответствующие по полу и возрасту:

*- различия с показателями контрольной группы достоверны (р<0,05);

- различия с показателями между группами достоверны (р<0,05).

На фиг. 3 изображена диаграмма уровня железа (М±m) в плазме крови больных разными формами туберкулеза легких. Контрольная группа - практически здоровые люди, соответствующие по полу и возрасту:

* - различия с показателями контрольной группы достоверны (р<0,05);

- различия с показателями между группами достоверны (р<0,05).

В работе был проведен анализ уровня макро- и микроэлементов плазмы крови 23 больных, ранее не подвергавшихся противотуберкулезному лечению. Контрольную группу составили 35 практически здоровых человека), сопоставимых по полу и возрасту (табл. 2).

Анализ уровня микроэлементов осуществляют методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой на спектрометре iCAP6300Duo (Thermo Scientific, США).

Было показано, что при туберкулезе легких, сопровождающемся процессами распада, значимо возрастает содержание меди, цинка и железа в плазме крови по сравнению со здоровыми людьми, в то время как у больных очаговым туберкулезом легких такого различия не обнаружено (фиг. 1, фиг. 2, фиг. 3).

Результаты исследования свидетельствуют, что небациллярные (закрытые) формы туберкулеза легких вызывают увеличение концентрации меди в плазме крови не более чем на 30% от уровня физиологической нормы (0,9±0,1 мкг/мл), тогда как дизадаптация, развивающаяся на фоне бациллярных (открытых) форм туберкулеза легких, приводит к более значительному повышению уровня меди более 60%. При закрытых формах туберкулеза легких не наблюдается рост концентрации цинка в плазме крови, тогда как при бациллярных формах туберкулеза легких происходит увеличение уровня цинка на 120% и более от уровня физиологической нормы (0,7±0,1 мкг/мл). Концентрация железа в плазме крови при небациллярных формах туберкулеза легких возрастет не более чем на 18% от уровня физиологической нормы (1,1±0,1 мкг/мл), а при бациллярных формах туберкулеза легких концентрация железа в плазме крови выше - рост более 25% от уровня практически здоровых людей.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом

Исследование уровня микроэлементов проводят до начала терапевтических мероприятий. Забор крови у больных и практически здоровых людей проводят из локтевой вены натощак. Затем кровь центрифугируют при 3000 об/мин и отбирают 1 мл плазмы. Измерение концентрации микроэлементов производят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой на спектрометре iCAP6300Duo (Thermo Scientific, США) (Чудинов Э.Г. Атомно-эмиссионный анализ с индукционной плазмой. Итоги науки и техники. Сер. Аналитическая химия. М.: ВИНИТИ, 1990, Т. 2, 253 с.; Ю. Спектроскопия. Пер. с нем. М,. Техносфера, 2009, 528 с.). Пробоподготовку тканей осуществляют следующим образом: 0,5 мл плазмы переносят на дно пробирки из чистого кварцевого стекла, добавляют 2 мл азотной кислоты (ос. ч.) и оставляют на ночь. На следующий день приливают в каждую пробирку по 250 мкл пероксида водорода (36%). Соотношение азотная кислота: пероксид водорода составляет 8:1. При подготовке лабораторной пробы не допускается использование инструментов и оборудования, загрязняющих пробу определяемыми элементами. Далее выполняют автоклавную минерализацию тканей. Метод основан на полной минерализации пробы смесью азотной кислоты и пероксида водорода в герметично замкнутом объеме аналитического автоклава при воздействии повышенной температуры и давления. Последовательность выполнения этапов метода: пробирки с пробами помещают в реакционную емкость из термопласта. Для контрольного («холостого») определения в пробирку вносят эквивалентную смесь реактивов без добавления испытуемой пробы. Реакционную емкость с пробирками закрывают крышкой и герметизируют в металлическом корпусе автоклава. Автоклав помещают в холодный термостат, устанавливают температуру первой стадии нагрева и нагревают автоклав в соответствии с температурной программой, выдерживая на каждой стадии ступенчатого нагрева: 160°С - 1 ч, 180°С - 1 ч, 200°С - 2 ч. По окончании минерализации извлекают автоклав и помещают в устройство для охлаждения и охлаждают до комнатной температуры. Разгерметизацию автоклава и последующие операции по подготовке минерализата к анализу проводят в шкафу вытяжной и приточной вентиляциями через фильтры. Подготовка минерализата к анализу с использованием атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой осуществлялась следующим образом: в пластиковые пробирки предварительно наливают 2-3 мл бидистиллированной воды. Раствор минерализата количественно переносят в пластиковые пробирки, обмывая внутреннюю поверхность кварцевой пробирки, и доводят объем раствора минерализата бидистиллированной водой до отметки 15 мл. Элементный анализ раствора минерализата проводят на атомно-эмиссионном спектрометре с индуктивно связанной плазмой. Модель спектрометра - iCAP 6300 Duo (Thermo Scientific, США). Полученные результаты представлены в граммах биоэлемента на 1 г ткани. Метод плазменной атомно-эмиссионной спектрометрии пригоден для одновременного определения нескольких микроэлементов. Его преимущества заключаются в относительно малых матричных эффектах, широком диапазоне измерений (1:100000), высокой чувствительности и производительности.

При повышении содержания меди более чем на 60%, содержания цинка более чем на 120% и содержания железа более чем на 25% от физиологической нормы диагностируют бациллярную форму туберкулеза легких, при физиологической норме равной содержанию меди 0,9±0,1 мкг/мл, содержанию цинка равной 0,7±0,1 мкг/мл и содержанию железа равной 1,1±0,1 мкг/мл.

Примеры конкретного исполнения даны в виде выписок из истории болезни:

Пример 1

Пациент X., 23 лет. Поступил в клинику с подозрением на туберкулез легких. При поступлении состояние удовлетворительное, жалобы на субфебрильную температуру и отдышку при физической нагрузке. В легких при выслушивании единичные сухие хрипы. В анализе крови СОЭ = 40 мм/час, лейкоцитоз 10,6×109 л. Анализ мочи без патологии.

До начала терапевтических мероприятий определено содержание микроэлементов в плазме крови: концентрация меди = 1,5 мкг/мл, что составило 166,67% от нормальной концентрации меди в плазме крови (0,9±0,1 мкг/мл; цинка = 2,1 мкг/мл, что составило 300% от нормальной концентрации цинка в плазме крови (0,7±0,1 мкг/мл); и железа = 1,6 мкг/мл, что составило 145,46% от нормальной концентрации железа в плазме крови (1,1±0,1 мкг/мл). Таким образом, выявлено повышение уровня меди на 66,67% (более чем на 60%); цинка - на 200% (более чем на 120%) и железа - повышение на 45,46% (более чем на 25% от уровня физиологической нормы), что свидетельствует о наличии деструктивной (бациллярной) формы туберкулеза.

На обзорной рентгенограмме грудной клетки: слева в верхней доле инфильтрат (затемнение) с нечеткими контурами и просветлением в центре (распад). В мокроте методом бактериоскопии найдены микобактерии туберкулеза в количестве 100 микобактерий в 100 полях зрения.

Поставлен диагноз: инфильтративный туберкулез верхней доли левого легкого в фазе распада, МБТ+.

Пример 2

Пациент М., 37 лет. Поступил в клинику с подозрением на туберкулез легких после проведения профилактической флюорографии. Жалоб не предъявляет. При аускультации патологии не выявлено. В анализе крови СОЭ 23 мм/час, лейкоцитоз 9×109 л. Анализ мочи без патологии.

До начала терапевтических мероприятий определено содержание микроэлементов в плазме крови: концентрация меди = 0,78 мкг/мл, что составило 86,67% от нормальной концентрации меди в плазме крови (0,9±0,1 мкг/мл); цинка = 0,72 мкг/мл, что составило 102,86% от нормальной концентрации цинка в плазме крови (0,7±0,1 мкг/мл); и железа = 1,1 мкг/мл, что не отличалось от нормальной концентрации железа в плазме крови (1,1±0,1 мкг/мл). Таким образом, выявлено снижение уровня меди на 13,33% (содержание данного микроэлемента снижено, а не повышено); цинка - на 2,86% (менее чем на 120%) и нормальный уровень железа в плазме крови пациента, что свидетельствует об отсутствии деструктивной (бациллярной) формы туберкулеза.

На обзорной рентгенограмме грудной клетке справа во втором сегменте определяются полиморфные очаги с нечеткими контурами. В мокроте методами бактриоскопии и люминесцентной микроскопии микобактерий туберкулеза не выявлено.

Поставлен диагноз: очаговый туберкулез второго сегмента правого легкого в фазе инфильтрации (МБТ-). У больного ограниченный туберкулезный процесс без деструкции и без МБТ.

Способ диагностики деструктивных бациллярных форм туберкулеза легких, включающий исследование биологического материала инструментальными методами исследования и постановку диагноза, отличающийся тем, что в плазме крови исследуют содержание микроэлементов меди, цинка и железа и при повышении содержания меди более чем на 60%, содержания цинка более чем на 120% и содержания железа более чем на 25% от физиологической нормы диагностируют бациллярную форму туберкулеза легких, при физиологической норме равной содержанию меди 0,9±0,1 мкг/мл, содержанию цинка 0,7±0,1 мкг/мл и содержанию железа 1,1±0,1 мкг/мл.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к области детектирования молекулы-мишени в образце. Устройство для детектирования молекулы-мишени в образце содержит контейнер для образцов для количественного определения молекулы-мишени в образце; по меньшей мере одну первую частицу, функционализированную первой связывающей молекулой, способной к специфическому связыванию с молекулой-мишенью; поверхностную структуру, содержащую вторую связывающую молекулу, где поверхностная структура покрывает плоскую поверхность или присутствует на по меньшей мере одной второй частице.

Изобретение относится к области фармакологии, а именно к способу выделения и очистки лактоферрина из молочного сырья. Способ выделения и очистки лактоферрина из молочного сырья – коровьего молока, включающий одностадийную хроматографию лактоферрина из молочного сырья в колонке с сорбентом, уравновешенным натрий-фосфатным буфером, элюирование лактопероксидазы натрий-фосфатным буфером, элюирование лактоферрина в градиенте натрия хлористого, обессоливание и лиофильное высушивание.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ оценки секреторной функции малых слюнных желез (МСЖ), заключающийся в наложении на слизистую оболочку нижней губы пластинки, окрашенной метиленовым синим, с последующей стимуляцией функции МСЖ и сравнением оптической плотности пластинки до и после стимуляции, отличающийся тем, что пластинка выполнена из прозрачного материала и имеет округлую форму площадью 1 см2, проводится двукратное наложение пластинки, длительность каждого наложения пластинки составляет 5 минут, после первого наложения пластинки слизистую обрабатывают 1 мл 1% водного раствора пилокарпина гидрохлорида и ждут 15 минут, если оптическая плотность пластинки до стимуляции пилокарпином в 1,5 и более раза больше, чем после стимуляции, то секреция МСЖ не нарушена, в противном случае - при соотношении оптической плотности пластинки до и после стимуляции менее чем в 1,5 раза - устанавливается тяжелая степень ксеростомии.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогноза развития постперикардиотомного синдрома (ПКТС) у больных ишемической болезнью сердца (ИБС), перенесших аортокоронарное шунтирование, характеризующийся тем, что у пациентов через сутки после операции определяют активность аргиназы в эритроцитах и арилэстеразную активность параоксоназы (PON) в плазме крови, затем рассчитывают коэффициент К по формуле: К = аргиназа/PON, где «аргиназа» - это активность аргиназы, МЕ/(г Hb); «PON» - арилэстеразная активность параоксоназы, МЕ/(мг белка); и при значении коэффициента К, равном 0,39 и более, у пациента прогнозируют развитие ПКТС с вероятностью 67%.
Изобретение относится к области медицины, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для определения степени метаболической зрелости гетеротопических оссификатов.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для предоперационной дифференциальной диагностики первичных и вторичных злокачественных, а также доброкачественных опухолей головного мозга.

Изобретение относится к диагностике, а именно способу получения модельной системы на основе лецитина из подсолнечника для определения свободно-радикального окисления.

Изобретение относится к области медицины. Предложены способы зондирования множественных мишеней в биологическом образце, включающие использование фотоактивируемого химического обесцвечивания для обнаружения множественных мишеней в биологическом образце.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ диагностики гипоксии плода в родах, включающий определение концентрации лактата в амниотической жидкости, отличающийся тем, что образец амниотической жидкости забирают в первом периоде родов вагинальной амниотомией при раскрытии шейки матки 4-5 см посредством иглы для пункции заднего свода влагалища, определяют в амниотической жидкости концентрацию лактата энзиматическим колориметрическим методом и при концентрации лактата в амниотической жидкости менее 5,0 ммоль/л или более 9,5 ммоль/л диагностируют гипоксию плода в родах.

Изобретение относится к области аналитической химии, и касается способа определения O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-метилкарбамата и O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-(дибутиламиносульфенил)-N-метилкарбамата в биологическом материале.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложен способ получения ДНК-праймеров и зондов для определения присутствия и определения относительного количества фетальной ДНК в образце плазмы крови беременной женщины. Предложены способ и набор для определения наличия и концентрации фетальной ДНК в образце плазмы крови женщины. Предложенная группа изобретений обеспечивает эффективное обнаружение праймерных конструкций, соответствующих дифференциально метилированным регионам ДНК матери и плода. 3 н. и 14 з.п. ф-лы, 1 ил., 4 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине и касается способа определения антител к вирусам полиомиелита 1, 3 типов в сыворотке крови, где в сыворотку крови в модифицированной реакции связывания комплемента вносят убитый антиген вируса полиомиелита, содержащийся в инактивированной полиомиелитной вакцине, и гемолитическую сыворотку, исследуемые образцы выдерживают, затем проводят количественное определение оксидазных ферментов, вышедших из гемолизированных эритроцитов, используя тетраметилбензидин. И по степени лизиса эритроцитов спектрофотометрически по цветовому показателю определяют наличие антител к вирусам полиомиелита 1 и 3 типов. Изобретение обеспечивает возможность проведения способа в любом стационаре, оснащенном лабораторией ИФА; профилактику развития вспышек полиомиелита среди населения. 2 пр., 2 табл.

Изобретение относится к области биофизики, а именно к медицинской физики, и описывает способ прогнозирования эффективности химиотерапии у детей, больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ), в частности прогнозирования рисков возникновения лекарственной резистентности при проведении химиотерапии у пациентов с ОЛЛ с помощью исследования свойств биологических жидкостей физическими методами. Флуоресцентный способ прогнозирования эффективности химиотерапии у детей, больных острым лимфобластным лейкозом, включающий забор крови до и после химиотерапии, выделение флуоресцентного макро-биомаркера эффективности химиотерапии, отличается тем, что макро-биомаркером является концентрация аденозин-трифосфата (АТФ), которую определяют автоматизировано, с помощью лазерного конфокального микроскопа, путем подсчета интенсивности флуоресценции макро-биомаркера, и при концентрации АТФ 1,04±0,14 мг/мл не наблюдается риск развития гепатотоксических эффектов в данный момент времени, при концентрации АТФ 0,8±0,112 мг/мл наступает апоптоз клеток, при концентрации АТФ 0,312±0,042 мг/мл наступает некроз клеток. 1 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для видовой идентификации микобактерий у пациентов, инфицированных микобактериями туберкулеза. Сущность способа: осуществляют взятие венозной крови в пробирку, содержащую антикоагулянт гепарин, смешивание крови с антигенным материалом микобактерий (опытная проба) и с солевым растворителем антигенного материала, идентичным по компонентному составу растворителю (контрольная проба), инкубирование и определение в пробах количества CD45+ лимфоцитов, гейтированных по морфологическим характеристикам и окрашиванию флуоресцентным красителем. По снижению количества меченых клеток в опытной пробе относительно контрольной заключают, что организм инфицирован тем видом микобактерий, чей антигенный материал использовался для инкубации с кровью в опытной пробирке. Способ позволяет установить видовую принадлежность возбудителя заболевания, подтвердить наличие инфицирования, определить эффективность вакцинации. Способ быстровыполнимый, может быть использован в качестве скринингового метода в общей лечебной сети и противотуберкулезных учреждениях для определения вида микобактерий туберкулеза человеческого вида или вакцинного штамма. В результате применения способа повышается точность исследования, возможность выполнения исследования с использованием других лекарственных форм аллергенов. 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования исхода люминального В и трижды негативного рака молочной железы у пациенток, не получавших в неоадъювантном режиме химио- или гормонотерапию. Способ включает биохимическое исследование биологического материала пациентов, определение молекулярно-биологических параметров опухоли: экспрессию рецепторов прогестерона, экспрессию рецептора HER-2/neu, также дополнительно исследуют ткань опухоли и прилежащую к опухоли условно неизмененную ткань, в которых флюориметрическим методом измеряют каспазаподобную активность протеасом. Затем определяют коэффициент каспазаподобной активности протеасом (кКАС), который рассчитывают как отношение соответствующей активности в опухолевой ткани к активности в неизмененной ткани, и при значении коэффициента каспазаподобной активности протеасом кКАС более 2,19 прогнозируют неблагоприятный исход с высокой вероятностью развития отдаленных метастазов, а при значении кКАС менее 2,19 прогнозируют благоприятный исход заболевания с низкой вероятностью развития отдаленных метастазов опухоли. Изобретение обеспечивает повышение специфичности и информативности способа прогнозирования исхода люминального В и трижды негативного рака молочной железы. 2 ил., 4 пр.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в фтизиопульмонологии для ранней диагностики инфильтративных форм туберкулеза легких. Способ включает исследование биологического материала инструментальными методами исследования. При этом в плазме крови исследуют содержание микроэлементов меди, цинка и железа. При повышении содержания меди более чем на 60, содержания цинка более чем на 120 и содержания железа более чем на 25 от физиологической нормы диагностируют бациллярную форму туберкулеза легких при физиологической норме, равной содержанию меди 0,9±0,1 мкгмл, содержанию цинка 0,7±0,1 мкгмл и содержанию железа 1,1±0,1 мкгмл. Изобретение позволяет повысить точность диагностики, обеспечивает раннюю диагностику и проведение скрининг-диагностики, упрощение способа и сокращение времени исследования. 2 пр., 2 табл., 3 ил.

Наверх