Способ диагностики перипротезной инфекции суставов

Изобретение относится к медицине, в частности к травматологии и ортопедии и может быть использовано для диагностики перипротезной инфекции суставов при эндопротезировании. Сущность способа: проводят микроскопическое исследование мазка аспирата, окрашенного по Граму, и дополнительно осуществляют измерение концентрации D-лактата используя тест-систему «Д-лактам», получают испытуемый образец путем добавления к 25 мкл аспирата из эндопротезированного сустава 45 мкл ферментного микста и 80 мкл субстратного микста, контроль мутности получают путем добавления к 25 мкл аспирата из эндопротезированного сустава 45 мкл воды дистиллированной и 80 мкл субстратного микста; полученные смеси инкубируют в термостате при температуре 37°С±1°С в течение 30 минут и измеряют оптическую плотность смесей на планшетном ридере используя светофильтр 570-600 нм. Затем от оптической плотности каждого испытуемого образца отнимают разницу оптической плотности контроля мутности и пустой ячейки и для каждого испытуемого образца рассчитывают концентрацию по калибровочному графику и при значении D-лактата 1,2 ммоль/л и более диагностируют перипротезную инфекцию сустава. Предложен высокоточный способ диагностики перипротезной инфекции суставов, который позволяет быстро, в течение одного часа, выявить наличие инфекции в эндопротезированном суставе, вызванной даже труднокультивируемыми микроорганизмами, что даст возможность широко использовать заявляемый способ в отделениях травматологии, ортопедии и эндопротезирования. 1 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для диагностики перипротезной инфекции суставов при эндопротезировании.

В последнее время во всем мире значительно увеличилось количество операций эндопротезирования суставов. Ежегодный прирост таких манипуляций варьирует в пределах от 5,3% до 17%. Интенсивное развитие эндопротезирования влечет за собой и увеличение количества ревизий вследствие развития осложнений различного характера. Одним из наиболее частых является перипротезная инфекция суставов (ПИИ). Тактика ведения пациентов с перипротезной инфекцией суставов полностью отличается от таковой у пациентов с асептической нестабильностью имплантатов; соответственно, своевременный и точный диагноз инфекции имеет решающее значение. Задержка в постановке диагноза или диагностические ошибки могут привести к увеличению объема инфицированных тканей, в итоге возникает потребность в сложных хирургических операциях, иногда с рецидивами инфекционного процесса, приводящими к развитию серьезных осложнений, таких как сепсис, вплоть до летальных исходов.

Известен способ диагностики перипротезной инфекции суставов путем микроскопического исследования мазка аспирата из протезированного сустава, окрашенного по Граму, полученного путем пункции эндопротезированного сустава, с целью визуального обнаружения микроорганизмов.

Недостатком известного способа является его неточность из-за низкой выявляемости возбудителя - 45%, так как концентрация микроорганизмов в эндопротезированном суставе низкая. Faraj АА1, Omonbude OD, Godwin P. Gram staining in the diagnosis of acute septic arthritis. Acta Orthop Belg. 2002 Oct; 68 (4): 388-91.

Наиболее близким по достигаемому техническому результату (прототип), является способ диагностики перипротезной инфекции суставов путем бактериологического исследования аспирата из эндопротезированного сустава, полученного путем пункции эндопротезированного сустава. Известный способ заключается в посеве аспирата из эндопротезированного сустава на питательные среды с целью обнаружения роста микроорганизмов.

Недостатками известного способа являются: неточность диагностики из-за низкой выявляемости микроорганизмов, особенно в случаях трудно-культивируемых микроорганизмов; длительный период инкубации посевов (до 14 суток и более), что значительно удлиняет сроки постановки диагноза; трудоемкость исследования. Kordo Saeed Diagnostics in prosthetic joint infections J. Antimicrob. Chemother. (2014) 69 (suppl 1): i11-i19.doi: 10.1093/jac/dku248

Техническим результатом заявляемого способа является повышение точности диагностики перипротезной инфекции суставов за счет измерения концентрации D-лактата (бактериального метаболита) в аспирате из эндопротезированного сустава в случае инфекционного процесса.

Технический результат достигается тем, что проводят микроскопическое исследование мазка аспирата из протезированного сустава, окрашенного по Граму и дополнительно осуществляют измерение концентрации D-лактата, получают испытуемый образец путем добавления к 25 мкл аспирата из эндопротезированного сустава 45 мкл ферментного микса и 80 мкл субстратного микса, контроль мутности получают путем добавления к 25 мкл аспирата из эндопротезированного сустава 45 мкл воды дистиллированной и 80 мкл субстратного микса; полученные смеси инкубируют в термостате при температуре 37°С±1°С в течение 30 минут и измеряют оптическую плотность смесей на планшетном ридере используя светофильтр 570-600 нм, затем от оптической плотности каждого испытуемого образца отнимают разницу оптической плотности контроля мутности и пустой ячейки и для каждого испытуемого образца рассчитывают концентрацию по калибровочному графику и при значении D-лактата 1,2 ммоль/л и более диагностируют перипротезную инфекцию сустава.

Авторы предлагают высокоточный способ диагностики перипротезной инфекции суставов, который позволяет быстро, в течение одного часа, выявить наличие инфекции в эндопротезированном суставе, вызванной даже труднокультивируемыми микроорганизмами.

Осуществление способа.

Результаты исследования проиллюстрированы фигурой в виде таблицы.

В таблице даны сравнительные данные заявленного способа с известными.

Пациенту с подозрением на перипротезную инфекцию суставов в асептических условиях стандартным шприцем выполняют пункцию эндопротезированного сустава с взятием аспирата в количестве, необходимом для исследования. Аспират в шприце доставляют в лабораторию для исследования, где проводят микроскопическое исследование мазка аспирата из эндопротезированного сустава, окрашенного по Грамму, и бактериологическое исследования и дополнительно осуществляют измерение концентрации D-лактата в аспирате из эндопротезированного сустава с помощью тест-системы «D-лактам» (г. Витебск, респ. Беларусь). Применение тест-системы «D-лактам» известно в асцитической, плевральной, цереброспинальной и синовиальной жидкостях, однако не было проведено исследование с аспиратом из эндопротезированного сустава на наличие D-лактата.

Исследование выполняют в соответствие с инструкцией по применению, входящей в состав набора. Испытуемый образец получают путем добавления к 25 мкл аспирата из эндопротезированного сустава 45 мкл ферментного микса и 80 мкл субстратного микса. Контроль мутности получают путем добавления к 25 мкл аспирата из эндопротезированного сустава 45 мкл воды дистиллированной и 80 мкл субстратного. Полученные смеси инкубируют в термостате при температуре 37°С±1°С в течение 30 минут и измеряют оптическую плотность смесей на планшетном ридере используя светофильтр 570-600 нм. Затем от оптической плотности каждого испытуемого образца отнимают разницу оптической плотности контроля мутности и пустой ячейки. Для каждого испытуемого образца рассчитывают концентрацию по калибровочному графику и при значении D-лактата 1,2 ммоль/л и более диагностируют перипротезную инфекцию сустава.

Клинический пример

27.04.15 в травматологическое отделение поступил пациент Б. с признаками перипротезной инфекции суставов, № истории 814. Пациенту в асептических условиях стандартным шприцем выполнили пункцию эндопротезированного сустава с взятием аспирата из эндопротезированного сустава в количестве, необходимом для исследования. Шприц доставили в лабораторию для исследования, где было выполнено микроскопическое исследование мазка аспирата из эндопротезированного сустава, окрашенного по Грамму, и бактериологическое исследование и дополнительно, по заявленному способу, измерение концентрации D-лактата. При микроскопическом исследовании мазка аспирата из эндопротезированного сустава, окрашенного по Грамму, и бактериологическом исследовании возбудитель обнаружен не был, тогда как значение D-лактата равнялось 1,76 ммоль/л, что было расценено как положительный результат и пациенту был поставлен диагноз «Перипротезная инфекция суставов». В связи с этим пациент был направлен на ревизионное эндопротезирование с целью удалить инфицированные имплантаты. Бактериологическое исследование имплантатов, извлеченных во время операции, через 14 дней подтвердило наличие перипротезной инфекции, вызванной труднокультивируемым микроорганизмом - Propionibacterium acnes. Таким образом, выявив инфекционный процесс на ранних этапах, используя заявленный способ, очаг инфекции (имплантат) был удален на 14 дней раньше, что значительно улучшило результат лечения, не позволило развиться системному воспалению и предотвратило повторные обширные высокотравматичные оперативные вмешательства.

В лабораторных условия была проведена оценка эффективности измерение концентрации D-лактата в аспирате из эндопротезированного сустава в сравнении с бактериологическим исследованием и микроскопическим исследование мазка аспирата из эндопротезированного сустава, окрашенного по Граму. Чувствительность заявленного способа составила 97%, специфичность - 94%, что указывает на высокую точность.

Как видно из таблицы количество подтвержденных случаев перипротезной инфекции суставов по заявляемому способу при измерении концентрации D-лактата в аспирате из эндопротезированного сустава составляет 97%, то есть выше чем при бактериологическом исследовании (прототипе) - 75% и микроскопическом исследовании мазка аспирата из эндопротезированного сустава, окрашенного по Граму - 53%. Кроме того у 8 пациентов инфекционный процесс удалось выявить только используя заявленный способ, заключающийся в дополнительном измерение концентрации D-лактата в аспирате из эндопротезированного сустава в сравнении с бактериологическим исследованием и у 16 пациентов в сравнении с микроскопическим исследованием. Это позволило изменить тактику ведения таких пациентов на ранних этапах, использовать антибиотикотерапию и достичь излечения. Так же это позволило избежать повторных высокотравматичных обширных оперативных ревизионных вмешательств, ведущих к инвалидизации больного. Отсутствие обнаружения инфекции у таких пациентов грозит развитием серьезных осложнений, таких как сепсис, вплоть до летальных исходов.

Заявляемый способ позволяет проводить точную диагностику перипротезной инфекции суставов, так как быстро, в течение одного часа выявляет случаи перипротезной инфекции суставов, даже вызванных труднокультивируемыми микроорганизмами и обеспечивает доступность диагностики перипротезной инфекции суставов, что даст возможность широко использовать заявляемый способ в отделениях травматологии, ортопедии и эндопротезирования.

Способ диагностики перипротезной инфекции суставов путем бактериологического исследования аспирата, полученного путем пункции из эндопротезированного сустава, отличающийся тем, что проводят микроскопическое исследование мазка аспирата, окрашенного по Граму, и дополнительно осуществляют измерение концентрации D-лактата используя тест-систему «Д-лактам», получают испытуемый образец путем добавления к 25 мкл аспирата из эндопротезированного сустава 45 мкл ферментного микста и 80 мкл субстратного микста, контроль мутности получают путем добавления к 25 мкл аспирата из эндопротезированного сустава 45 мкл воды дистиллированной и 80 мкл субстратного микста; полученные смеси инкубируют в термостате при температуре 37°С±1°С в течение 30 минут и измеряют оптическую плотность смесей на планшетном ридере используя светофильтр 570-600 нм, затем от оптической плотности каждого испытуемого образца отнимают разницу оптической плотности контроля мутности и пустой ячейки и для каждого испытуемого образца рассчитывают концентрацию по калибровочному графику и при значении D-лактата 1,2 ммоль/л и более диагностируют перипротезную инфекцию сустава.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области молекулярной биологии и медицинской генетики. Предложен способ прогнозирования развития криоглобулинемического васкулита у больных хроническим гепатитом С (ХГС).

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству и гинекологии, и предназначено для диагностики хронического эндометрита (ХЭ) в среднюю стадию фазы секреции.

Группа изобретений относится к электрохимическим сенсорам для количественного определения глюкозы. Раскрыт сенсор глюкозы, содержащий фермент глюкозооксидазу, заключенную внутри сшитого гидрофильного сополимера в контакте с поверхностью электрода, при этом сополимер имеет первые звенья мономера 2-гидроксиэтилметакрилата, вторые звенья мономера структурной формулы (V) (V),где Y представляет собой -O-; R2 представляет собой метил; и z представляет собой среднее значение, составляющее от 2 до 250; и третьи звенья производных метакрилата, содержащие гидрофильные поперечные связи формулы (IIIa) (IIIa)где w находится в диапазоне 0-10.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической онкологии для ранней диагностики инвазивного рака. Для этого выделяют или экстрагируют циркулирующие раковые клетки из биологического образца вертикальной фильтрацией через фильтр с размером пор между 3 и 100 мкм, который позволяет удерживать свободно циркулирующие опухолевые редкие клетки, но не препятствует прохождению через фильтр более мелких клеток.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для определения генетической предрасположенности к атеросклерозу, ишемической болезни сердца и инфаркту миокарда.

Изобретение относится к области медицины, в частности к медицинской генетике и сердечно-сосудистой хирургии. Предложен способ прогнозирования риска развития синдрома полиорганной недостаточности у пациентов после коронарного шунтирования.

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к диагностике. Для оценки риска рака желудочно-кишечного тракта создают в базе данных множество классификаторов в соответствии с множеством соответствующих результатов проведенных ранее анализов крови у множества подвергнутых анализу индивидуумов.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки безопасности биомедицинского клеточного продукта (БМКП). Устанавливаются контрольные количественные величины, характеризующие уровень теломеразной активности в клетках с различным туморогенным потенциалом.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для оценки безопасности биомедицинского клеточного продукта (БМКП). Устанавливаются контрольные количественные величины, характеризующие уровень теломеразной активности в клетках с различным туморогенным потенциалом.

Изобретение относится к медицине, к области лабораторной диагностики и непосредственно к диагностике эндогенной интоксикации при реперфузионном синдроме после восстановления артериального кровообращения.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования риска возникновения преэклампсии у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрально-Черноземного региона России. Проводят анализ полиморфизма ММР-1 (rs1799750). Определяют индекс массы тела до беременности. Определяют наличие преэклампсии у родственников. Определяют наличие гинекологической патологии в анамнезе. Выявляют наличие заболеваний, передающихся половым путем. Определяют систолическое и диастолическое артериальное давление до беременности. Риск развития преэклампсии проводят по заявленным формулам с определением y1 и y2. Если показатель y1 больше y2, то прогнозируют риск развития данной патологии. Способ позволяет эффективно прогнозировать риск возникновения преэклампсии за счет оценки комплекса наиболее значимых показателей. 2 ил., 2 пр.
Изобретение относится к области экологии и может быть использовано для экологического картирования, выявления неблагоприятных участков исследуемых регионов и дифференцированной оценки Cа-Sr статуса различных по площади территорий. Для этого отбирают пробы биоиндикаторов, высушивают их до постоянного веса, выделяют усредненную пробу и определяют содержание общего Sr и Са методом атомно-адсорбционной спектрометрии (ААС). Отбор проб производят во время вегетационного периода. Полученный результат сравнивают с установленными диапазонами значений соотношения Cа:Sr в воздушно-сухой массе средних укосов травянистой растительности, по принадлежности к которым определяют экологический статус территории. При значениях отношения Ca:Sr больше 400 считают статус территории относительно благоприятным, при значениях отношения 150-400 статус территории рискованным, а при значениях меньше 150 статус территории кризисным. Изобретение обеспечивает экспресс-оценку новых районов и получение репрезентативных данных об общем состоянии окружающей среды как относительно крупного (порядка 10000-50000 га и более) региона в целом, так и локального (от 100 га) агроценоза. 1 з.п. ф-лы, 3 пр.

Настоящее изобретение относится к новым ДНК-аптамерам, способным прочно и специфически связываться с гельзолином. Кроме того, изобретение относится к применению этих аптамеров для оценки уровня гельзолина в данном образце и для очистки немеченного гельзолина и его аналогов в большом объёме. Таким образом, настоящее изобретение исключает использование разных животных или их тканей для получения белков, связывающих гельзолин, которое является намного более дорогостоящим и социально неприемлемым способом в отличие от синтеза молекулы ДНК с помощью ПЦР in vitro. Используя эту стратегию, массовое производство гельзолин-связывающего матрикса может быть осуществлено с гораздо меньшими затратами. Кроме того, аптамеры могут быть использованы для блокирования связывания гельзолина с его партнерами для связывания с целью диагностического и/или терапевтического применения. 5 н. и 2 з.п. ф-лы, 6 ил., 6 пр.

Изобретения относятся к клеткам и тестам, которые могут использоваться для идентификации модуляторов рецепторов сладкого вкуса. Предложены способ идентификации модулятора ощущения сладкого вкуса и выделенная клетка U2-OS. Клетка U2-OS включает рецептор сладкого вкуса T1R2/T1R3 или одну или более экзогенных последовательностей нуклеиновой кислоты, кодирующих рецептор сладкого вкуса T1R2/T1R3, и экзогенную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую Gα16gust25, Gα15gust25, Gα15gust44 или Gα15-i/3-5. Осуществляют контактирование клетки U2-OS с тестируемым соединением. Измеряют активность рецептора сладкого вкуса посредством определения уровня внутриклеточного вторичного мессенджера в клетке U2-OS, или посредством определения уровня внутриклеточного кальция в клетке, или посредством определения фосфорилирования ERK1/2, или посредством определения интернализации рецептора. Изменение активности рецептора сладкого вкуса указывает на то, что тестируемое соединение является модулятором ощущения сладкого вкуса. Изобретения позволяют увеличить чувствительность анализа. 3 н. и 14 з.п. ф-лы, 9 ил., 7 пр., 1 табл.

Настоящее изобретение относится к иммунологии. Предложено антитело к молекуле отталкивающего направляющего сигнала а (RGMa). Также рассмотрена фармацевтическая композиция, содержащая указанное антитело, и способ лечения, предупреждения, модуляции или снижения тяжести заболевания или расстройства, ассоциированного с дегенерацией нейритов. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в терапии нейродегенеративных заболеваний, таких как рассеянный склероз. 3 н. и 28 з.п. ф-лы, 20 ил., 4 табл., 11 пр.

Изобретение относится к области биологии и медицины. Предложен способ экстракции ДНК, пригодной для проведения количественной ПЦР в реальном времени, из сухих пятен цельной крови новорожденных, нанесенных на фильтровальную карточку для неонатального скрининга. Изобретение обеспечивает уменьшение количества исходного биологического материала, взятого для исследования, и доступность метода для ПЦР-лабораторий лечебно-профилактических учреждений. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к аналитической химии и представляет собой способ иммунохроматографического анализа. Иммунохроматографический тест основан на взаимодействии конъюгата специфические антитела-коллоидный маркер с определяемым соединением (антигеном) в ходе движения реагентов вдоль тест-полоски. В зависимости от наличия антигена происходит образование специфических комплексов, обеспечивающих окрашивание в аналитической линии теста. Интенсивность окрашивания, а также чувствительность теста напрямую зависят от времени инкубации пробы и коллоидного конъюгата. Значительные возможности по снижению предела обнаружения дает использование мелкопористых, «медленных» рабочих мембран. Сокращение скорости движения увеличивает время специфического взаимодействия и тем самым снижает предел обнаружения системы. Однако часто использование мелкопористых мембран влечет ряд негативных эффектов, особенно при анализе реальных, часто содержащих корпускулярные частицы проб. В таких случаях происходит забивание пор мембраны и полная остановка течения жидкости, а результаты тестирования признаются недействительными. Предложенный подход отличается тем, что для анализа используется крупнопористая мембрана, а для сокращения скорости движения жидкости в пробу вносятся специальные растворы для повышения вязкости раствора, что приводит к увеличению времени протекания вдоль мембраны. Техническим результатом является снижение предела обнаружения аналитической системы. 1 ил.

Изобретение относится к биотехнологии. Конкретно, изобретение относится к предупреждению феномена усиления токсичности глазных инстилляций при совместном применении комбинации лекарственных препаратов. Используют культуры клеток конъюнктивы, при этом осуществляют подбор оптимальных концентраций глазных препаратов путем оценки метаболитической активности культуры клеток конъюнктивы качественно через морфологическую оценку с помощью визуального контроля и количествено с помощью МТТ-теста. Оценка осуществляется при воздействии указанных глазных препаратов или их комбинаций в различных концентрациях. Оценивают продукцию цитокинов в сравнении с контролем по уровню транскрипции после 48 ч инкубирования с указанными глазными препаратами или их комбинацией в подобранной концентрации. В качестве контроля используют не обработанную культуру клеток конъюнктивы. Усиление продукции цитокинов указывает на отсутствие усиления токсичности глазных инстилляций при совместном применении лекарственных препаратов, что позволяет применять проверенную комбинацию лекарственных препаратов для лечения воспалительных заболеваний конъюнктивы и роговицы. Изобретение может быть использовано для предупреждения феномена усиления токсичности глазных инстилляций при совместном применении комбинации лекарственных препаратов. 4 з.п. ф-лы, 3 ил., 3 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для прогнозирования риска развития преэклампсии на основе комбинаций генов матриксных металлопротеиназ. Из периферической венозной крови женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России, выделяют ДНК и проводят анализ полиморфизмов генов. При выявлении сочетания аллеля С MMР-8 (rs11225395) и генотипа GG MMР-7 (rs11568818) прогнозируют низкий риск развития преэклампсии. Изобретение обеспечивает получение критериев оценки риска развития преэклампсии на основе генов матриксных металлопротеиназ. 3 ил., 3 пр.

Изобретение относится к медицине. Предложен способ моделирования алкогольной кардиомиопатии, заключающийся в принудительной алкоголизации животных 10%-ным водным раствором этанола в течение 13 недель, последующем отборе животных с высоким предпочтением к алкоголю и продолжении алкоголизации до конца 24 недели от начала алкоголизации. Технический результат: к концу 24-й недели формируется дилатационная алкогольная кардиомиопатия, которая характеризуется значительным угнетением сократительной функции и статистически значимой дилатацией левого желудочка; по окончании 24-й недели алкоголизации крыс порог электрической фибрилляции желудочков сердца снижался на 47%; уровень гамма-глутамилтрансферазы в плазме крови алкоголизированных животных был в три раза выше, чем у контрольных. Таким образом, предложенная модель кардиомиопатии достаточно полно отражает ситуацию, наблюдаемую в клинике у пациентов, страдающих алкогольной кардиомиопатией, и может рассматриваться как трансляционная модель этого заболевания. 3 ил., 3 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к травматологии и ортопедии и может быть использовано для диагностики перипротезной инфекции суставов при эндопротезировании. Сущность способа: проводят микроскопическое исследование мазка аспирата, окрашенного по Граму, и дополнительно осуществляют измерение концентрации D-лактата используя тест-систему «Д-лактам», получают испытуемый образец путем добавления к 25 мкл аспирата из эндопротезированного сустава 45 мкл ферментного микста и 80 мкл субстратного микста, контроль мутности получают путем добавления к 25 мкл аспирата из эндопротезированного сустава 45 мкл воды дистиллированной и 80 мкл субстратного микста; полученные смеси инкубируют в термостате при температуре 37°С±1°С в течение 30 минут и измеряют оптическую плотность смесей на планшетном ридере используя светофильтр 570-600 нм. Затем от оптической плотности каждого испытуемого образца отнимают разницу оптической плотности контроля мутности и пустой ячейки и для каждого испытуемого образца рассчитывают концентрацию по калибровочному графику и при значении D-лактата 1,2 ммольл и более диагностируют перипротезную инфекцию сустава. Предложен высокоточный способ диагностики перипротезной инфекции суставов, который позволяет быстро, в течение одного часа, выявить наличие инфекции в эндопротезированном суставе, вызванной даже труднокультивируемыми микроорганизмами, что даст возможность широко использовать заявляемый способ в отделениях травматологии, ортопедии и эндопротезирования. 1 табл., 1 пр.

Наверх