Производные 2-аминопиразина в качестве ингибиторов csf-1r киназы

Изобретение относится к соединению, представляющему собой аминокислоту или сложный эфир аминокислоты формулы (I), или его фармацевтически приемлемой соли, которые обладают ингибирующей активностью в отношении CSF-1R киназы. В формуле (I) кольцо А представляет собой фенильную группу; R¹ и R² независимо представляют собой атом водорода, атом галогена или незамещенный С_1-4 алкил; n равно 1; X представляет собой NH; V представляет собой -N=, W представляет собой -C(Z)=; Z представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора или незамещенный C_1-3 алкил; кольцо В представляет собой 1,4-фениленовую, 1,3-фениленовую или пиридинильную группу; [Линкер] представляет собой группу -(CH₂)_m-X¹-(Alk¹)_x-Y¹, где m равно 0, 1, 2 или 3; x равен 0 или 1; Alk¹ представляет собой незамещенную С_1-3 алкиленовую группу; X¹ и Y¹ независимо представляют собой связь, -О-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃; R представляет собой группу формулы (X) или (Y), в которых R⁸ представляет собой группу -СООН или сложноэфирную группу формулы -(C=O)OR¹⁴, где R¹⁴ представляет собой R¹⁵R¹⁶R¹⁷C-, где любой R¹⁵ представляет собой атом водорода или С_1-3алкил-(Z¹)_а-[(С₁-С₃)алкил]_b-, где а и b независимо равны 0 или 1, Z¹ представляет собой -О-, -S- или -NH-, R¹⁶ и R¹⁷ независимо представляют собой атом водорода или С_1-3 алкил- либо R¹⁵ и R¹⁶, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3-7-членное циклоалкильное кольцо; и R¹⁷ представляет собой атом водорода; где (i) R⁹ и R¹⁰ представляют собой боковые цепи природных аминокислот, (ii) один из R⁹ и R¹⁰ представляет собой атом водорода или незамещенный С_1-4 алкил, а другой представляет собой незамещенную C_1-6 алкильную группу или C_1-6 алкильную группу, замещенную С_1-4 алкоксигруппой, либо (iii) R⁹ и R¹⁰, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют насыщенное спиро-циклобутильное кольцо; R¹¹ представляет собой атом водорода или незамещенную С_1-2 алкильную группу; кольцо D представляет собой 5-7-членную насыщенную гетероциклильную группу, имеющую по меньшей мере один атом азота в кольце. Изобретение относится также к фармацевтической композиции, способу лечения или предупреждения заболеваний или расстройств, опосредованных CSF-1R киназой, а также к применению указанных соединений для получения лекарственного средства, используемого при лечении таких заболеваний. 4 н. и 14 з.п. ф-лы, 59 пр.

 

Изобретение относится к серии соединений, представляющих собой сложные эфиры аминокислот и сложные эфиры циклических аминокислот, к содержащим их композициям, к способам их получения и к их применению в медицине в качестве ингибиторов CSF-1R для лечения заболеваний и расстройств, опосредованных CSF-1R киназой. Такие заболевания и расстройства включают клеточно-пролиферативное заболевание, такое как рак и псориаз, полиглутаминовое заболевание, такое как болезнь Гентингтона, нейродегенеративное заболевание, такое как болезнь Альцгеймера, аутоиммунное заболевание, такое как ревматоидный артрит, диабет, гематологическое заболевание, воспалительное заболевание, сердечно-сосудистое заболевание, атеросклероз и воспалительное осложнение инфекции.

Предшествующий уровень техники

Рецептор колониестимулирующего фактора-1 (FMS, также известный как CSF-1R) представляет собой гомодимерную рецепторную тирозинкиназу класса III для колониестимулирующего фактора-1 (CSF-1; от англ. "colony-stimulating factor", или макрофагальный колониестимулирующий фактор, M-CSF, от англ. "macrophage colony-stimulating factor"), кодируемую протоонкогеном FMS, на которой сосредоточены недавние обзоры [Nat. Rev. Immunol. 2008, 8, 533]. CSF-1 регулирует выживание, пролиферацию, дифференцировку и функцию макрофагальной линии клеток, включающей моноциты, тканевые макрофаги, дендритные клетки, микроглию и остеокласты [Trends Cell Biol. 2004, 14, 628-638]. Эти мононуклеарные фагоциты действуют в качестве защиты против внедряющихся патогенов посредством поддержания тканевого гомеостаза. CSF-1 существует в 3 основных изоформах, а именно секретируемого гликопротеина и секретируемого протеогликана, где обе эти изоформы циркулируют во всем организме, и белка клеточной поверхности, вовлеченного в локальную регуляцию клеток-мишеней.

Рецепторные тирозинкиназы класса III (RTK; от англ. "receptor tyrosine kinases"), включающие c-FMS, c-Kit, Flt-3 и PDGFR, характеризуются внеклеточным лиганд-связывающим доменом, единственным трансмембранным доменом (ТМ; от англ. "transmembrane domain"), околомембранным доменом (JM; от англ. "juxtamembrane domain"), двумя внутриклеточными киназными доменами (TK1 и TK2), разделенными доменом вставки киназы (ΚΙ; от англ. "kinase insert"), и С-концевым доменом.

Связывание CSF-1 с внеклеточным доменом FMS стабилизирует димеризацию рецептора, индуцирует транс-аутофосфорилирование внутриклеточного домена FMS и активирует передачу нисходящих цитоплазматических сигналов, которая приводит к дифференциации и активации клеток макрофагальной линии.

Низкомолекулярные ингибиторы активного центра FMS блокируют аутофосфорилирование рецептора, и вследствие этого блокируют сигналы, контролирующие выживание, экспрессию, пролиферацию и дифференцировку макрофагов. Данные о связи количеств макрофагов с несколькими заболеваниями, включающими рак и воспалительное заболевание, привели к значительным усилиям по разработке низкомолекулярных ингибиторов FMS. В исследованиях высокие уровни макрофагов в тканях-мишенях коррелируют с тяжестью заболевания при ревматоидном артрите (PA) [Ann. Rheum. Dis. 2005, 64, 834-838] и иммунном нефрите [Nephrol. Dial. Transplant. 2001, 16, 1638-1647] и со слабой выживаемостью и прогрессированием опухоли [J. Clin. Oncol. 2005, 23, 953-964. Cancer Res. 2006, 66, 605-612] при некоторых раках. Следовательно, регуляция количеств макрофагов может играть ключевую роль в функции CSF-1.

Колониестимулирующие факторы (CSF) представляют собой группу факторов роста гемопоэтических клеток, включающую M-CSF и гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (G-CSF; от англ. "granulocyte colony-stimulating factor"), где оба эти фактора обладают относительной специфичностью для линии, и гранулоцитарно-макрофагальный CSF (GM-CSF; от англ. "granulocyte/macrophage CSF"), функционирующий на ранних стадиях клеточной линии посредством регулирования предшественников гемопоэза [1]. Недавно идентифицированный новый лиганд для FMS интерлейкин-34 (ИЛ-34), функционирующий как специфичный и независимый лиганд FMS, стимулирует FMS-зависимое фосфорилирование киназы-1 и -2 (ERK1/2), регулируемой внеклеточным сигналом, и способствует образованию колониеобразующих единиц макрофагов (CFU-M; от англ. "colony-forming unit-macrophage") в культурах костного мозга человека [Science 2008, 320, 807-811].

FMS играет критическую роль в биохимическом пути CSF-1 и оказался перспективной мишенью для регулирования уровней макрофагов при многочисленных заболеваниях, включающих рак, воспаление и аутоиммунитет. Следовательно, идентификация новых селективных низкомолекулярных антагонистов CSF-1 стала центром значительных усилий конкурирующих исследователей.

За счет регуляции развития и активации мононуклеарных фагоцитов CSF-1 играет ключевую роль во врожденном иммунном ответе на вирусные, бактериальные и грибковые инфекции и повышает эффективность вакцинации. CSF-1 также вовлечен в стимуляцию и пролонгирование воспаления при некоторых заболеваниях. Ранее свидетельство о том, что истощение CSF-1 обладает терапевтической пользой при аутоиммунных и воспалительных заболеваниях, наблюдали в модели коллаген-индуцированного артрита (КИА) на мышах. Мыши с дефицитом по CSF-1 обладали устойчивостью к развитию артрита, несмотря на нормальный иммунный ответ на коллаген типа II [23]. Действительно, продемонстрирована сильная корреляция повышенных уровней CSF-1, подобных уровням, обнаруживаемым в синовиальной жидкости пациентов с РА, с тяжестью заболевания при таких состояниях, как РА и иммунный нефрит. В этом также принимают участие провоспалительные цитокины, представляющие собой интерлейкин-1β (ИЛ-1β) и фактор некроза опухоли альфа (TNF-α; от англ. "tumor necrosis factor"), стимулирующие продуцирование этих синовиальных макрофагов. В модели КИА показана эффективность и моноклональных антител, и низкомолекулярных ингибиторов CSF-1 при снижении количеств макрофагов в суставах и замедлении общего прогрессирования заболевания.

Краткое изложение сущности изобретения

В настоящем изобретении предложен новый класс ингибиторов CSF-1R, обладающих фармацевтической пользой при лечении заболеваний и расстройств, опосредованных CSF-1R киназой, таких как рак, аутоиммунные и воспалительные заболевания. Ингибиторы по изобретению характеризуются тем, что они имеют мотив альфа-аминокислоты или мотив сложного эфира альфа-аминослоты, являющийся субстратом внутриклеточной карбоксиэстеразы (также называемый в данном описании "эстеразным мотивом"), ковалентном связанный с исходной молекулярной матрицей. Гидрофобный эстеразный мотив дает молекуле возможность проходить через клеточную стенку, и, следовательно, дает возможность гидролиза сложного эфира с высвобождением исходной кислоты за счет внутриклеточной карбоксиэстеразной активности. Поскольку кислота является заряженной, она нелегко транспортируется из клетки, в которой она, таким образом, накапливается, повышая внутриклеточную концентрацию активного ингибитора CSF-1R. Это приводит к увеличению эффективности и продолжительности действия по сравнению с исходной матрицей ингибитора CSF-1R.

Соответственно, в настоящем изобретении предложено соединение, представляющее собой аминокислоту или сложный эфир аминокислоты формулы (I), или его соль, Ν-оксид, гидрат или сольват:

где:

кольцо А представляет собой C_6-12 арильное, 5- - 12-членное гетероциклильное или С_3-7 карбоциклильное кольцо;

R¹ и R² независимо представляют собой атом водорода, атом галогена или незамещенную группу, выбранную из следующих групп: С_1-4 алкила, С_2-4 алкенила, С_1-4 алкокси, С_2-4 алкенилокси, С_1-4 галогеналкила, С_2-4 галогеналкенила, С_1-4 галогеналкокси, С_2-4 галогеналкенилокси, гидроксила, -SR³, циано, нитро, С_1-4 гидроксиалкила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный С_1-2 алкил;

n равно 0 или 1;

X представляет собой ΝΗ или О;

V и W независимо представляют собой -Ν= или -C(Z)=;

Ζ являются одинаковыми или разными, и каждый представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора, атом брома, атом йода, циано, незамещенный С_1-3фторалкил или незамещенный С_1-3алкил;

кольцо В представляет собой C_6-12 арильное, 5- - 12-членное гетероциклильное или С_3-7 карбоциклильное кольцо;

[Линкер] представляет собой группу формулы -(CH₂)_m-X¹-L¹-Y¹-, где:

- m равно 0, 1, 2 или 3;

- X¹ представляет собой связь, -О-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)-, -С(=O)O-, -OC(=O)-, -S(=O)₂-; -NR⁵C(=O)-, -C(=O)NR⁵-, -NR⁵C(=O)NR⁶-, -NR⁵S(=O)₂- или -S(=O)₂NR⁵-, где R⁵ и R⁶ независимо представляют собой атом водорода или C_1-6 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный C_1-4 алкил или -С(=O)СН₃;

- L¹ представляет собой двухвалентный радикал формулы -(Alk¹)_x-(Q)_y-(Het)_w-(Alk²)_z- или -(Alk¹)_x-(Het)_w-(Q)_y-(Alk²)_z-, где

- x, y, w и z независимо равны 0 или 1;

- Q представляет собой двухвалентное С_6-12 арильное, 5- - 12-членное гетероциклильное или С_3-7 карбоциклильное кольцо;

- Het представляет собой -О-, -S- или -NR⁷-, где R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный C_1-4 алкил или -С(=O)СН₃;

- Alk¹ и Alk² независимо представляют собой двухвалентные С_3-7 циклоалкильные радикалы, либо прямоцепочечные или разветвленные C_1-6 алкиленовые, С_2-6 алкениленовые или С_2-6 алкиниленовые радикалы;

- Y¹ представляет собой связь, -О-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)-, -С(=O)O-, -OC(=O)-, -S(=O)₂-, -NR⁵C(=O)-, -C(=O)NR⁵-, -NR⁵C(=O)NR⁶-, -NR⁵S(=O)₂- или -S(=O)₂NR⁵-, где R⁵ и R⁶ независимо представляют собой атом водорода или C_1-6 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный C_1-4 алкил или -С(=O)СН₃;

- R представляет собой группу формулы (X) или (Y):

в которых:

- R⁸ представляет собой группу -СООН или сложноэфирную группу, гидролизуемую одним или более внутриклеточных ферментов карбоксиэстераз до группы -СООН;

- R⁹ и R¹⁰ являются одинаковыми или разными, и каждый представляет собой α-заместитель природной или неприродной α-аминокислоты, либо R⁹ и R¹⁰, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3- - 6-членное насыщенное спиро-циклоалкильное или гетероциклильное кольцо;

- R¹¹ представляет собой атом водорода или C_1-4 алкильную группу;

- кольцо D представляет собой 5- - 7-членную насыщенную гетероциклильную группу, имеющую по меньшей мере один атом азота в кольце, где R⁸ и R¹¹ связаны с кольцевым атомом, соседним с кольцевым атомом азота, и где связь, показанная как пересеченная волнистой линией, может исходить от атома азота или от атома углерода в кольце D;

где, когда R представляет собой (X), [Линкер] не соединен с (X) через атом О, N или S;

и где, если не указано иное:

- любые алкильные, алкенильные и алкинильные группы и группировки в R⁵, R⁶, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, Alk¹ и Alk² являются одинаковыми или разными, и каждая является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 незамещенными заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: C_1-4 алкокси, С_2-4 алкенилокси, С_1-4 галогеналкокси, С_2-4 галогеналкенилокси, гидроксила, -SR³, циано, нитро и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил;

- любые арильные, гетероциклильные, циклоалкильные и карбоциклильные группы и группировки в кольцах А, В, Q, D, Alk¹ и Alk² и в кольце, образованном R⁹ и R¹⁰, являются одинаковыми или разными, и каждая является незамещенной или замещена 1, 2, 3 или 4 незамещенными заместителями, выбранными из атомов галогена и следующих групп: циано, нитро, C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкенилокси, C_1-4 галогеналкила, С_2-4 галогеналкенила, C_1-4 галогеналкокси, С_2-4 галогеналкенилокси, гидроксила, C_1-4 гидроксиалкила, -SR³ и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными, и каждый представляет собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил, или из заместителей формулы -COOR¹², -COR¹², -SO₂R¹², -CONR¹²R¹³, -SO₂NR¹²R¹³, -OCONR¹²R¹³, -NR¹²COR¹³, -NR¹² COOR¹³, -NR¹²SO₂R¹³, -NR¹²SO₂OR¹³ или -NR¹²CONR¹²R¹³, где R¹² и R¹³ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-4 алкил, либо R¹² и R¹³ при присоединении к одному и тому же атому азота образуют неконденсированную 5- или 6-членную гетероциклильную группу,

при условии, что соединение представляет собой не:

4-(4-{6-амино-5-[1-(2,6-дихлор-3-фтор-фенил)-этокси]-пиридин-3-ил}-пиразол-1-ил)-пирролидин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир. В соответствии с общими принципами практики химии лекарственных средств предпочтительно, чтобы соединения, к которым относится данное изобретение, имели молекулярные массы не более 600.

В настоящем изобретении также предложено соединение, как определено выше, применяемое в способе лечения организма человека или животного.

Далее в настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение, как определено выше, и один или более фармацевтически приемлемых носителей и/или эксципиентов.

В другом аспекте в настоящем изобретении предложено соединение, как определено выше, применяемое при лечении заболевания или расстройства, опосредованного CSF-1R киназой. В изобретении также предложено применение соединения, как определено выше, при получении лекарственного средства, применяемого при лечении или предупреждении заболевания или расстройства, опосредованного CSF-1R киназой.

Далее в изобретении предложен способ лечения или предупреждения заболевания или расстройства, опосредованного CSF-1R киназой, у субъекта, включающий введение данному субъекту эффективного количества соединения, как определено выше.

Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения

Терминология

Алкильные, алкенильные и алкинильные группы и группировки в R⁵, R⁶, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, Alk¹ и Alk² являются незамещенными или замещены 1, 2 или 3, предпочтительно 1 или 2, незамещенными заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: C_1-4 алкокси, С_2-4 алкенилокси, C_1-4 галогеналкокси, С_2-4 галогеналкенилокси, гидроксил, -SR³, циано, нитро и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил. Более предпочтительно заместители представляют собой атом галогена, группы C_1-4 алкокси, гидроксил и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил.

Когда описанные выше алкильные, алкиленовые, алкениленовые и алкиниленовые группировки замещены двумя или тремя заместителями, предпочтительно, чтобы не более двух заместителей были выбраны из гидроксила, циано и нитро. Более предпочтительно не более чем один заместитель выбран из гидроксила, циано и нитро.

Как используют в данном описании, C_1-6 алкильная группа или группировка представляет собой нормальную или разветвленную алкильную группу или группировку, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, например, С_1-4 алкильную группу или группировку, содержащую от 1 до 4 атомов углерода. Примеры С_1-4 алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил и трет-бутил. Во избежание сомнений, где в группе присутствуют две алкильные группировки, эти алкильные группировки могут быть одинаковыми или разными.

Как используют в данном описании, С_2-6 алкенильная группа или группировка представляет собой нормальную или разветвленную алкенильную группу или группировку, имеющую по меньшей мере одну двойную связь либо Е, либо Ζ стереохимии, где это применимо, и содержащую от 2 до 6 атомов углерода, например, С_2-4 алкенильную группу или группировку, содержащую от 2 до 4 атомов углерода, такую как -СН=СН₂ или -СН₂-СН=СН₂, -СН₂-СН₂-СН=СН₂, -СН₂-СН=СН-СН₃, -СН=С(СН₃)-СН₃ и -СН₂-С(СН₃)=СН₂. Во избежание сомнений, где в группе присутствуют две алкенильные группировки, они могут быть одинаковыми или разными.

Как используют в данном описании, С_1-6 алкиленовая группа или группировка представляет собой нормальную или разветвленную алкиленовую группу или группировку, например, С_1-4 алкиленовую группу или группировку. Примеры включают метилен, н-этилен, н-пропилен, а также группы и группировки -С(СН₃)₂-.

Как используют в данном описании, С_2-6 алкениленовая группа или группировка представляет собой нормальную или разветвленную алкениленовую группу или группировку, например, С_2-4 алкениленовую группу или группировку. Примеры включают -СН=СН-, -СН=СН-СН₂-, -СН₂-СН=СН- и -СН=СН-СН=СН-.

Как используют в данном описании, С_2-6 алкиниленовая группа или группировка представляет собой нормальную или разветвленную алкиниленовую группу или группировку, например, С_2-4 алкиниленовую группу или группировку. Примеры включают -С≡С-, -С≡С-СН₂- и -СН₂-С≡С-.

Как используют в данном описании, атом галогена представляет собой атом хлора, фтора, брома или йода.

Как используют в данном описании, С_1-4 алкоксигруппа или С_2-4 алкенилоксигруппа в характерном случае представляет собой С_1-4 алкильную группу или С_2-4 алкенильную группу соответственно, присоединенную к атому кислорода.

Галогеналкильная, галогеналкенильная, галогеналкокси или галогеналкенилокси группа в характерном случае представляет собой алкильную, алкенильную, алкокси или алкенилокси группу соответственно, замещенную одним или более атомов галогена. В характерном случае она замещена 1, 2 или 3 атомами галогена. Предпочтительные галогеналкильные и галогеналкоксигруппы включают пергалогеналкильные и пергалогеналкоксигруппы, такие как -СХ₃ и -ОСХ₃, где X представляет собой атом галогена, например, атом хлора или фтора. Фторалкильная группа в характерном случае представляет собой алкильную группу, замещенную одним или более атомов фтора. В характерном случае она замещена 1, 2 или 3 атомами фтора.

Как используют в данном описании, С_1-4 гидроксиалкильная группа представляет собой С_1-4 алкильную группу, замещенную одной или более гидроксигрупп. В характерном случае она замещена одной, двумя или тремя гидроксигруппами. Предпочтительно она замещена одной гидроксигруппой.

Как используют в данном описании, С_6-12 арильная группа или группировка представляет собой моноциклическое, 6- - 12-членное ароматическое углеводородное кольцо, имеющее от 6 до 12 атомов углерода, например, фенил или нафтил. Фенил является предпочтительным.

Как используют в данном описании, неограниченный термин "гетероарил" относится к моно-, би- или трициклическому ароматическому радикалу, содержащему один или более, например 1, 2, 3 или 4, в частности. 1 или 2, гетероатома, выбранные из S, N и О, и включает радикалы, имеющие два таких моноциклических кольца, или одно такое моноциклическое кольцо и одно моноциклическое арильное кольцо, которые непосредственно связаны ковалентной связью. Иллюстративными примерами таких радикалов являются следующие радикалы: тиенил, бензтиенил, фурил, бензфурил, пирролил, имидазолил, бензимидазолил, тиазолил, бензтиазолил, изотиазолил, бензизотиазолил, пиразолил, оксазолил, бензоксазолил, изоксазолил, бензизоксазолил, изотиазолил, триазолил, бензтриазолил, тиадиазолил, оксадиазолил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, триазинил, индолил и индазолил, в частности, пиразол.

Как используют в данном описании, неограниченный термин "гетероциклил" или "гетероциклический" включает "гетероарил", как определено выше, и в его неароматическом значении относится к насыщенному или ненасыщенному моно-, би- или трициклическому неароматическому радикалу, содержащему один или более, например, 1, 2, 3 или 4, в частности, 1 или 2, гетероатома, выбранные из S, N и О, и к группам, состоящим из моноциклического неароматического радикала, содержащего один или более таких гетероатомов, который ковалентно связан с другим таким радикалом или с моноциклическим карбоциклическим радикалом. Иллюстративными примерами таких радикалов являются следующие радикалы: пирролил, фуранил, тиенил, пиперидинил, имидазолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, тиадиазолил, пиразолил, пиридинил, пирролидинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, морфолинил, пиперазинил, индолил, бензфуранил, пиранил, изоксазолил, бензимидазолил, метилендиоксифенил, этилендиоксифенил, группы малеимидо и сукцинимидо, в частности, пиперидинил, пиперазинил и пиразолил.

Как используют в данном описании, С_3-7 карбоциклическая группа или группировка представляет собой неароматическое насыщенное или ненасыщенное углеводородное кольцо, имеющее от 3 до 7 атомов углерода. Предпочтительно она представляет собой насыщенное или моно-ненасыщенное углеводородное кольцо (то есть циклоалкильную группировку или циклоалкенильную группировку), имеющее от 3 до 7 атомов углерода, более предпочтительно имеющее от 3 до 6 атомов углерода. Примеры включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил и их мононенасыщенные варианты. Предпочтительными примерами С_3-7 карбоциклической группы или группировок являются циклопентил и циклогексил. С_3-7 карбоциклическая группа или группировка также включает С_3-7 карбоциклические группы или группировки, описанные выше, где один или более кольцевых атомов углерода замещено группой -С(О)-. Более предпочтительно 0, 1 или 2 кольцевых атома углерода (наиболее предпочтительно 0 или 2) замещены -С(О)-. Предпочтительной такой группой является бензохинон.

Как используют в данном описании, термин "циклоалкил" относится к моноциклическому насыщенному карбоциклическому радикалу, имеющему от 3 до 8 атомов углерода, и включает, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил.

Когда арильные, гетероциклильные, циклоалкильные и карбоциклильные группы и группировки в кольцах А, В, Q и D и в кольцах, образованных Alk¹ и Alk² и образованных R⁹ и R¹⁰ замещены двумя, тремя или четырьмя заместителями, предпочтительно, чтобы не более чем два заместителя были выбраны из гидроксила, циано и нитро. Более предпочтительно не более чем один заместитель выбран из гидроксила, циано и нитро. Кроме того, когда арильные, гетероциклильные, циклоалкильные и карбоциклильные группировки замещены двумя или тремя заместителями, предпочтительно, чтобы не более чем один заместитель был выбран из -COOR¹², -COR¹², -SO₂R¹², -CONR¹²R¹³, -SO₂NR¹²R¹³, -OCONR¹²R¹³, -NR¹²COR¹³, -NR¹² COOR¹³, -NR¹²SO₂R¹³, -NR¹²SO₂OR¹³ или -NR¹²CONR¹²R¹³.

Как используют в данном описании, термин "соль" включает соли присоединения основания, присоединения кислоты и четвертичные соли. Соединения по изобретению, являющиеся кислыми, могут образовывать соли, включая фармацевтически приемлемые соли, с основаниями, такими как гидроксиды щелочных металлов, например, гидроксиды натрия и калия; гидроксиды щелочноземельных металлов, например, гидроксиды кальция, бария и магния; с органическими основаниями, например, N-метил-D-глюкамином, холином, трис(гидроксиметил)аминометаном, L-аргинином, L-лизином, Ν-этилпиперидином, дибензиламином и тому подобным. Соединения, являющиеся основными, могут образовывать соли, включая фармацевтически приемлемые соли, с неорганическими кислотами, например, с галогенводородными кислотами, такими как соляная или бромисто-водородная кислота, с серной кислотой, азотной кислотой или фосфорной кислотой и тому подобными, и с органическими кислотами, например, с уксусной, винной, янтарной, фумаровой, малеиновой, яблочной, салициловой, лимонной, метансульфоновой, пара-толуолсульфоновой, бензойной, бензолсульфоновой, глутаминовой, молочной и миндальной кислотами и тому подобными.

Ожидают, что соединения по изобретению могут быть выделены в форме гидрата или сольвата. Термин 'сольват' используют в данном изобретении для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение по изобретению и стехиометрическое количество одной или более молекул фармацевтически приемлемого растворителя, например, этанола. Термин 'гидрат' используют, когда растворитель представляет собой воду.

Соединения по изобретению, содержащие один или более действительных или потенциальных хиральных центров в связи с присутствием асимметрических атомов углерода, могут существовать в виде ряда диастереоизомеров с R- или S-стереохимией в каждом хиральном центре. Изобретение включает все такие диастереоизомеры и их смеси.

Предпочтительно кольцо А представляет собой фенильную или 5- - 6-членную гетероциклильную группу, где кольцевая группа А является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атома галогена и следующих групп: незамещенного С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, гидроксила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 галогеналкокси, С_1-4 гидроксиалкила, циано, нитро, -SR³ и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный С_1-2 алкил. Более предпочтительно кольцо А представляет собой фенильную группу, где кольцевая группа А является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, гидроксила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил. Например, кольцо А может представлять собой фенильную группу, где кольцевая группа А является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атома фтора и атома хлора.

Предпочтительно R¹ и R² независимо представляют собой атом водорода, атом галогена или незамещенный С_1-4 алкил; более предпочтительно атом водорода.

Предпочтительно n равно 1.

Предпочтительно X представляет собой ΝΗ.

Кольцо, содержащее V и W, может содержать суммарно 1, 2 или 3 атома азота. В одном воплощении изобретения V представляет собой -Ν=, и W представляет собой -C(Z)=. В другом воплощении изобретения V представляет собой -C(Z)=, и W представляет собой -N=. Предпочтительно V представляет собой -N=, и W представляет собой -C(Z)=; более предпочтительно -СН=.

Предпочтительно Ζ представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора или незамещенный С_1-3 алкил; более предпочтительно атом водорода.

Предпочтительно кольцо В представляет собой фенильную или 5- - 6-членную гетероциклильную группу, предпочтительно фенильную или 5- - 6-членную гетероциклильную группу, содержащую 1, 2 или 3 атома азота, например, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил или пиразолил, в частности, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил или пиразинил, где кольцевая группа В является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, гидроксила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 галогеналкокси, С_1-4 гидроксиалкила, циано, нитро, -SR³ и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный С_1-2 алкил.

Более предпочтительно кольцо В представляет собой 1,4-фениленовую группу, 1,3-фениленовую группу, 1,3-пиразолильную группу или пиридинильную группу, в частности, 1,4-фениленовую группу, 1,3-фениленовую группу или 1,3-пиразолильную группу, где кольцевая группа В является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, гидроксила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный С_1-2 алкил. Например, кольцо В может представлять собой незамещенную 1,3-пиразолильную группу или 1,4-фениленовую или 1,3-фениленовую группу, которые являются незамещенными или замещены 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атома фтора, атома хлора, метила и этила.

В характерном случае кольцо В представляет собой 1,4-фениленовую группу, 1,3-фениленовую группу или пиридильную группу, в частности, 1,4-фениленовую группу или 1,3-фениленовую группу, где кольцевая группа В является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, гидроксила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный С_1-2 алкил. Например, кольцо В может представлять собой 1,4-фениленовую или 1,3-фениленовую группу, которая является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атома фтора, атома хлора, метила и этила.

Когда В является таким, как определено в данном описании выше, X предпочтительно представляет собой NH.

[Линкер] представляет собой группу формулы -(CH₂)_m-X¹-L¹-Y¹-.

Предпочтительно m равно 0, 1 или 2.

В некоторых воплощениях изобретения X¹ может предпочтительно представлять собой связь, -О-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃. Более предпочтительно X¹ представляет собой связь или -С(=O)-.

L¹ представляет собой двухвалентный радикал формулы -(Alk¹)_x-(Q)_y-(Het)_w-(Alk²)_z- или -(Alk¹)_x-(Het)_w-(Q)_y-(Alk²)_z-.

Предпочтительно Q представляет собой фенильную или 5- - 6-членную гетероциклильную группу, которая является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, гидроксила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный С_1-2 алкил. Предпочтительно Q представляет собой незамещенный фенил, предпочтительно незамещенный 1,4-фенилен.

Предпочтительно Alk¹ и Alk² независимо представляют собой C_1-3 алкиленовую, С_2-3 алкениленовую или С_2-3 алкиниленовую группу, которая является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 незамещенными заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: С_1-2 алкокси, гидроксила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил. Более предпочтительно Alk¹ и Alk² независимо представляют собой незамещенный С_1-3 алкилен.

Предпочтительно Het представляет собой -О- или -NR⁷-, предпочтительно, где R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный метил, незамещенный этил, незамещенный изобутил или -С(=O)СН₃. Более предпочтительно Het представляет собой -O-.

В одном воплощении изобретения у и w каждое равно 1, и по меньшей мере одно из x и z равно 1, например, L¹ представляет собой -Alk¹-Het-Q- или -Q-Het-Alk²-.Предпочтительно Q представляет собой фенильную или 5- - 6-членную гетероциклильную группу, как описано выше, предпочтительно незамещенный фенил, предпочтительно незамещенный 1,4-фенилен; Alk¹ и Alk² независимо представляют собой С_1-3 алкиленовую, С_2-3 алкениленовую или С_2-3 алкиниленовую группу, как описано выше, предпочтительно незамещенный С_1-3 алкилен; и Het представляет собой -О- или -NR⁷-, как описано выше, предпочтительно -О-.

В одном предпочтительном воплощении изобретения по меньшей мере одно из x и z равно 1, у и w каждое равно 0, и Alk¹ и Alk² независимо представляют собой незамещенный C_1-3 алкилен. В другом предпочтительном воплощении изобретения х, у и z каждое равно 0.

В некоторых воплощениях изобретения Υ¹ может предпочтительно представлять собой связь, -О-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃. Более предпочтительно Y¹ представляет собой связь или -NR⁷-, где R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃, предпочтительно атом водорода, незамещенный метил, незамещенный этил, незамещенный изобутил или -С(=O)СН₃.

В одном воплощении изобретения [Линкер] представляет собой -(СН₂)_m-Х¹-(Alk¹)_x-Y₁, где m, x, Χ¹, Y¹ и Alk¹ являются такими, как определено в данном описании. Предпочтительно Alk¹ представляет собой незамещенную С_1-3 алкиленовую группу, X¹ и Y¹ независимо представляют собой связь, -O-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃. Более предпочтительно X¹ представляет собой связь или -С(=O)-, и Y¹ представляет собой связь или -NR⁷-, где R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃, предпочтительно атом водорода, незамещенный метил, незамещенный этил, незамещенный изобутил или -С(=O)СН₃. Наиболее предпочтительными группами [Линкер] являются следующие группы: -(CH₂)_v-, -C(=O)NR⁷-, -CH₂NR⁷-, -CH₂C(=O)NR⁷- и -C(=O)-, где v равно 1 или 2, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный метил, незамещенный этил, незамещенный изобутил или -С(=O)СН₃.

В одном воплощении изобретения R представляет собой группу формулы (X). Когда R представляет собой (X), [Линкер] не соединен с (X) через атом О, S или N группировки [Линкер]. Таким образом, когда R представляет собой (X), а х, у и z каждое равно 0, X¹ и Υ¹ предпочтительно независимо выбраны из связи, -С(=O)-, -ОС(=O)- и -NR⁵C(=O)-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-6 алкил; либо, когда R представляет собой (X), и по меньшей мере одно из х, у и z равно 1, Υ¹ предпочтительно выбран из связи, -С(=O)-, -ОС(=O)- и -NR⁵C(=O)-, и X¹ предпочтительно выбран из связи, -О-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃. Предпочтительно, когда R представляет собой (X), [Линкер] представляет собой -(CH₂)_m-X¹-(Alk¹)- или -(CH₂)_v-, где v равно 1 или 2, m равно 0, 1, 2 или 3; Alk¹ представляет собой незамещенную С_1-3 алкиленовую группу, и X¹ представляет собой связь, -O-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃. Наиболее предпочтительными группами [Линкер], когда R представляет собой (X), являются группы -(CH₂)_v-, где v равно 1 или 2.

В другом воплощении изобретения R представляет собой группу формулы (Y1):

где кольцо D представляет собой 5- - 7-членную насыщенную гетероциклильную группу, имеющую по меньшей мере два атома азота в кольце, где R⁸ и R¹¹ связаны с кольцевым атомом углерода, соседним с кольцевым атомом азота, и где связь, показанная как пересеченная волнистой линией, исходит от атома азота в кольце D.

Когда R представляет собой (Υ1), [Линкер] предпочтительно не соединен с (Υ1) через атом О, S или N группировки [Линкер]. Таким образом, когда R представляет собой (Υ1), и х, у и z каждое равно 0, X¹ и Υ¹ предпочтительно выбраны из связи, -С(=O)-, -OC(=O)- и -NR⁵C(=O)-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-6 алкил, либо, когда R представляет собой (Y1), и по меньшей мере одно из х, у и z равно 1, Υ¹ предпочтительно выбран из связи, -С(=O)-, -OC(=O)- и -NR⁵C(=O)-, а X¹ предпочтительно выбран из связи, -O-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил, a R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃. Предпочтительно, когда R представляет собой (Y1), [Линкер] представляет собой -(CH₂)_m-X¹-(Alk¹)_x- или -(CH₂)_v-, где v равно 1 или 2, m равно 0, 1, 2 или 3; x равно 0 или 1; Alk¹ представляет собой незамещенную С_1-3 алкиленовую группу; и X¹ представляет собой связь, -О-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃, где, когда x равно 0, X¹ представляет собой связь или С(=O). Наиболее предпочтительными группами [Линкер] являются группы -(CH₂)_v- и -С(=O)-, где v равно 1 или 2.

Предпочтительно группа формулы (Υ1) представляет собой группу формулы (Υ1'):

В другом воплощении изобретения R представляет собой группу формулы (Υ2):

где кольцо D представляет собой 5- - 7-членную насыщенную гетероциклильную группу, имеющую по меньшей мере один атом азота в кольце, где R⁸ и R¹¹ связаны с кольцевым атомом углерода, соседним с кольцевым атомом азота, и где связь, показанная как пересеченная волнистой линией, исходит от атома углерода в кольце D.

В характерном случае, когда R представляет собой Υ2, кольцо D представляет собой 5- - 7-членную насыщенную гетероциклильную группу, имеющую по меньшей мере один атом азота в кольце, где R⁸ и R¹¹ связаны с кольцевым атомом углерода, соседним с кольцевым атомом азота, и где связь, показанная как пересеченная волнистой линией, исходит от атома углерода в кольце D, при условии, что D представляет собой не пирролидинильную группу. D может, например, представлять собой пирролильную, пиперидинильную, имидазолильную, оксазолильную, изоксазолильную, тиазолильную, тиадиазолильную, пиразолильную, пиридинильную, пиридазинильную, пиримидинильную, пиразинильную, морфолинильную, пиперазинильную группу, например, пиперидинильную или пиперазинильную группу, например, пиперидинильную группу.

Когда R представляет собой (Υ2), Υ¹ в [Линкер] может предпочтительно представлять собой связь, -О-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃. Более предпочтительно Y¹ представляет собой связь или -NR⁷-, где R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃, предпочтительно атом водорода, незамещенный метил, незамещенный этил, незамещенный изобутил или -С(=O)СН₃. Когда R представляет собой (Y2), [Линкер] предпочтительно соединен с (Y2) через атом N группировки [Линкер]. Таким образом, когда R представляет собой (Y2), Y¹ предпочтительно представляет собой -NR⁷-, где R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃, предпочтительно атом водорода, незамещенный метил, незамещенный этил, незамещенный изобутил или -С(=O)СН₃.

Таким образом, когда R представляет собой (Y2), [Линкер] в характерном случае представляет собой -(CH₂)_m-X¹-(Alk¹)_x-Y¹-, где m равно 0, 1, 2 или 3; x равно 0 или 1; X¹ представляет собой связь, -O-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, предпочтительно связь или -С(=O), где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -C(=O)CH₃; Alk¹ представляет собой незамещенную C_1-3 алкиленовую группу; и Y¹ представляет собой связь или -NR⁷-, предпочтительно -NR⁷-, где R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃. Наиболее предпочтительными группами [Линкер] являются следующие группы: -C(=O)NR⁷-, -CH₂NR⁷-, -CH₂CH₂NR⁷-, NR⁷- и -CH₂C(=O)NR⁷-, где R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный метил, незамещенный этил, незамещенный изобутил или -С(=O)СН₃.

Предпочтительно группа формулы (Υ2) представляет собой группу формулы (Υ2'):

Предпочтительно в приведенных выше формулах

R⁸ представляет собой группу -СООН или сложноэфирную группу формулы -(C=O)OR¹⁴, где R¹⁴ представляет собой R¹⁵R¹⁶R¹⁷C-, где:

(i) R¹⁵ представляет собой атом водорода, атом фтора или необязательно замещенный С_1-3алкил-(Z¹)_а-[(С₁-С₃)алкил]_b- или С_2-3алкенил-(Z¹)_а-[С_1-3алкил]_b-, где а и b независимо равны 0 или 1, и Z¹ представляет собой -О-, -S- или -NR¹⁸-, где R¹⁸ представляет собой атом водорода или С_1-3 алкил; и R¹⁶ и R¹⁷ независимо представляют собой атом водорода или С_1-3 алкил-;

(ii) R¹⁵ представляет собой атом водорода или необязательно замещенный R¹⁹R²⁰N-C_1-3алкил-, где R¹⁹ представляет собой атом водорода или С_1-3алкил, и R²⁰ представляет собой атом водорода или С_1-3алкил; либо R¹⁹ и R²⁰ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенное моноциклическое гетероциклическое кольцо из 5 или 6 кольцевых атомов или бициклическую гетероциклическую кольцевую систему из 8-10 кольцевых атомов, и R¹⁶ и R¹⁷ независимо представляют собой атом водорода или С_1-3алкил-; либо

(iii) R¹⁵ и R¹⁶, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенное моноциклическое карбоциклическое кольцо из 3-7 кольцевых атомов или бициклическую карбоциклическую кольцевую систему из 8-10 кольцевых атомов, и R¹⁷ представляет собой атом водорода; либо

(iv) R¹⁵ и R¹⁶, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенное моноциклическое гетероциклическое кольцо из 3-7 кольцевых атомов, где по меньшей мере один кольцевой атом выбран из -О-, -S- или -NR¹⁸-, где R¹⁸ представляет собой атом водорода или С_1-3алкил, или бициклическую гетероциклическую кольцевую систему из 8-10 кольцевых атомов, где по меньшей мере один кольцевой атом выбран из -Ο-, -S- или -NR¹⁸-, где R¹⁸ представляет собой атом водорода или C_1-3алкил, и R¹⁷ представляет собой атом водорода.

В пределах этих классов R¹⁴ может представлять собой, например, метил, этил, н- или изопропил, н-, втор- или трет-бутил, диметилпропил, пентанил, циклопентил, метил-замещенный циклопентил, циклопентилметил, циклогексил, N-метилпиперидин-4-ил, Ν-метилпирролидин-3-ил, тетрагидрофуран-3-ил, метоксиэтил, инданил, норборнил, диметиламиноэтил или морфолиноэтил.

В одном воплощении изобретения любой R¹⁵ представляет собой атом водорода или С_1-3алкил-(Z¹)_а-[(С₁-С₃)алкил]_b-, где а и b независимо равны 0 или 1, и Z¹ представляет собой -О-, -S- или -NH-, и R¹⁶ и R¹⁷ независимо представляют собой атом водорода или C_1-3 алкил-; либо R¹⁵ и R¹⁶, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3- - 7-членное циклоалкильное кольцо, и R¹⁷ представляет собой атом водорода. Циклопентил и трет-бутил особенно предпочтительны при R¹⁴.

Предпочтительно R⁹ и R¹⁰ являются одинаковыми или разными, и каждый представляет собой боковую цепь природной аминокислоты или следующие группы:

(i) атом водорода;

(ii) C_1-6 алкильную группу;

(iii) R⁹ и R¹⁰, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3- - 6-членное насыщенное спиро-циклоалкильное кольцо;

(iv) группу -L²-В¹, в которой L² представляет собой связь или алкиленовую группу;

и В¹ представляет собой С_6-10 арильную или 5- - 10-членную гетероарильную группу; либо

(v) группу, выбранную из индол-3-илметила, -СН₂СООН, -СН₂СН₂СООН, -CH₂CONH₂, -CH₂CH₂CONH₂, -CH₂CH₂CH₂NHC(NH)NH₂, циклогексила, циклогексилметила и 1-бензилтио-1-метилэтила;

- C_1-6 алкильная группа в (ii) является незамещенной или замещена 1 или 2 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и представляют собой атом галогена, C_1-4 алкокси, C_1-2 галогеналкил, гидроксил, -COOR³, -COONR³R⁴, -SR³ и -NR³R⁴ где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил;

- C_1-6 алкиленовая группа в (iv) является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 незамещенными заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: C_1-4 алкокси, гидроксила, C_1-2 галогеналкила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил; и

- С_6-10 арильная или 5- - 10-членная гетероарильная группа в (iv) является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, гидроксила, C_1-4 галогеналкила, C_1-4 галогеналкокси, C_1-4 гидроксиалкила, циано, нитро, -SR³ и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил.

Более предпочтительно R⁹ и R¹⁰ независимо представляют собой атом водорода; C_1-6 алкильную группу, которая является незамещенной или замещена 1 или 2 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и представляют собой атом галогена, C_1-4 алкокси, гидроксил, -COOR³, -COONR³R⁴, -SR³ и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил; R⁹ и R¹⁰, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3- - 6-членное насыщенное спиро-циклоалкильное кольцо; или группу формулы -L²-В¹, где L² представляет собой связь или незамещенную C_1-4 алкиленовую группу, а В¹ представляет собой фенильную или 5- - 10-членную гетероарильную группу, которая является незамещенной или замещена одним, двумя или тремя незамещенными заместителями, которые являются одинаковыми или разными и представляют собой атомы галогена, C_1-4 алкил, C_1-2 алкокси, C_1-2 алкилтио и гидроксил. Предпочтительно (i) R⁹ и R¹⁰ представляют собой боковые цепи природных аминокислот, (ii) один из R⁹ и R¹⁰ представляет собой атом водорода или незамещенный C_1-4 алкил, а другой представляет собой незамещенную C_1-6 алкильную группу или C_1-6 алкильную группу, замещенную C_1-4 алкоксигруппой, либо (iii) R⁹ и R¹⁰, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют насыщенное спиро-циклобутильное кольцо. Предпочтителен п. (ii) или (iii).

Предпочтительно R¹¹ представляет собой атом водорода или незамещенную C_1-2 алкильную группу, предпочтительно атом водорода.

В предпочтительном воплощении изобретения предложено соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, Ν-оксид, гидрат или сольват, в котором:

- кольцо А представляет собой фенильную или 5- - 6-членную гетероциклильную группу, где кольцевая группа А является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, гидроксила, C_1-4 галогеналкила, C_1-4 галогеналкокси, C_1-4 гидроксиалкила, циано, нитро, -SR³ и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил;

- R¹ и R² каждый представляет собой атом водорода;

- n равно 1;

- X представляет собой ΝΗ;

- V представляет собой -Ν=;

- W представляет собой -C(Z)=, где Ζ представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора или незамещенный C_1-3 алкил, предпочтительно атом водорода; и

- кольцо В представляет собой фенильную или 5- - 6-членную гетероциклильную группу, где кольцевая группа В является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, гидроксила, C_1-4 галогеналкила, C_1-4 галогеналкокси, C_1-4 гидроксиалкила, циано, нитро, -SR³ и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил.

В данном воплощении изобретения группа [Линкер]-R предпочтительно соответствует одному из (а)-(с), приведенному ниже:

(a) R представляет собой группу формулы (X);

R⁸ является таким, как приведено ниже;

R⁹ и R¹⁰ представляют собой боковые цепи природных аминокислот, один из R⁹ и R¹⁰ представляет собой атом водорода или незамещенный C_1-4 алкил, а другой представляет собой незамещенную C_1-6 алкильную группу или C_1-6 алкильную группу, замещенную C_1-4 алкоксигруппой, либо R⁹ и R¹⁰, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют насыщенное спиро-циклобутильное кольцо;

R¹¹ представляет собой атом водорода или незамещенную C_1-2 алкильную группу;

[Линкер] представляет собой -(CH₂)_m-X¹-(Alk¹)- или -(CH₂)_v-, где v равно 1 или 2, m равно 0, 1, 2 или 3; Alk¹ представляет собой незамещенную C_1-3 алкиленовую группу, и X¹ представляет собой связь, -О-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или C_1-4 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный C_1-4 алкил или -С(=O)СН₃.

(b) R представляет собой группу формулы (Y1);

R⁸ является таким, как приведено ниже;

R¹¹ представляет собой атом водорода или незамещенную C_1-2 алкильную группу;

[Линкер] представляет собой -(CH₂)_m-X¹-(Alk¹)_x- или -(CH₂)_v-, где v равно 1 или 2, m равно 0, 1, 2 или 3; x равно 0 или 1; Alk¹ представляет собой незамещенную C_1-3 алкиленовую группу; и X¹ представляет собой связь, -O-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или C_1-4 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный C_1-4 алкил или -С(=O)СН₃, где, когда x равно 0, X¹ представляет собой связь или С(=O).

(c) R представляет собой группу формулы (Y2);

R⁸ является таким, как приведено ниже

R¹¹ представляет собой атом водорода или незамещенную C_1-2 алкильную группу;

[Линкер] представляет собой -(CH₂)_m-X¹-(Alk¹)_x-Y¹, где m равно 0, 1, 2 или 3; x равно 0 или 1; X¹ представляет собой связь или -С(=O); Alk¹ представляет собой незамещенную C_1-3 алкиленовую группу; и Y¹ представляет собой связь или -NR⁷-, предпочтительно -NR⁷-, где R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный C_1-4 алкил или -С(=O)СН₃.

В характерном случае в данном воплощении изобретения, когда R представляет собой Y2, кольцо D представляет собой 5- - 7-членную насыщенную гетероциклильную группу, имеющую по меньшей мере один атом азота в кольце, где R⁸ и R¹¹ связаны с кольцевым атомом углерода, соседним с кольцевым атомом азота, и где связь, показанная как пересеченная волнистой линией, исходит от атома углерода в кольце D, при условии, что D представляет собой не пирролидинильную группу. D может представлять собой, например, пирролильную, пиперидинильную, имидазолильную, оксазолильную, изоксазолильную, тиазолильную, тиадиазолильную, пиразолильную, пиридинильную, пиридазинильную, пиримидинильную, пиразинильную, морфолинильную, пиперазинильную группу, например, пиперидинильную или пиперазинильную группу, например, пиперидинильную группу.

В данном воплощении изобретения предпочтительно кольцо В представляет собой 1,4-фениленовую группу, 1,3-фениленовую группу или пиридинильную группу, в частности, 1,4-фениленовую группу или 1,3-фениленовую группу, где кольцевая группа В является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, гидроксила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил. Например, кольцо В может представлять собой 1,4-фениленовую или 1,3-фениленовую группу, которая является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атома фтора, атома хлора, метила и этила.

В каждом из описанных выше (а)-(с) R⁸ представляет собой группу -СООН или сложноэфирную группу формулы -(C=O)OR¹⁴, где R¹⁴ представляет собой R¹⁵R¹⁶R¹⁷C-, где любой R¹⁵ представляет собой атом водорода или C_1-3алкил-(Z¹)_a-[(С₁-С₃)алкил]_b-, где а и b независимо равны 0 или 1, и Z¹ представляет собой -О-, -S- или -NH-, и R¹⁶ и R¹⁷ независимо представляют собой атом водорода или C_1-3 алкил-; либо R¹⁵ и R¹⁶, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3- - 7-членное циклоалкильное кольцо, и R¹⁷ представляет собой атом водорода.

Предпочтительно группа [Линкер]-R соответствует приведенным выше (b) или (с).

Более предпочтительно в настоящем изобретении предложено соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, Ν-оксид, гидрат или сольват, в котором:

- кольцо А представляет собой фенильную группу, где кольцевая группа А является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, гидроксила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил;

- R¹ и R² каждый представляет собой атом водорода;

- n равно 1;

- X представляет собой ΝΗ;

- V представляет собой -Ν=;

- W представляет собой -С(Н)=; и

- кольцо В представляет собой 1,4-фениленовую группу, 1,3-фениленовую группу, 1,3-пиразолильную группу или пиридинильную группу, в частности, 1,4-фениленовую группу, 1,3-фениленовую группу или 1,3-пиразолильную группу, где кольцевая группа В является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, гидроксила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил.

В данном воплощении изобретения группа [Линкер]-R предпочтительно соответствует одному из (а)-(с), как приведено выше, предпочтительно (b) или (с). Более предпочтительно группа [Линкер]-R соответствует (а'), (b') или (с'), как приведено ниже:

(a') R представляет собой группу формулы (X);

R⁸ является таким, как приведено ниже;

один из R⁹ и R¹⁰ представляет собой атом водорода или незамещенный C_1-4 алкил, а другой представляет собой незамещенную C_1-6 алкильную группу;

R¹¹ представляет собой атом водорода или незамещенную C_1-2 алкильную группу;

[Линкер] представляет собой -(CH₂)_v-, где v равно 1 или 2.

(b') R представляет собой группу формулы (Υ^1');

R⁸ является таким, как приведено ниже;

[Линкер] представляет собой -(CH₂)_v- или -С(=O)-, где v равно 1 или 2.

(с') R представляет собой группу формулы (Y2);

R⁸ является таким, как приведено ниже;

[Линкер] представляет собой -C(=O)NR⁷-, -CH₂NR⁷- или -CH₂C(=O)NR⁷-, где R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный метил, незамещенный этил, незамещенный изобутил или -С(=O)СН₃.

В характерном случае в данном воплощении, когда R представляет собой Y2, кольцо D представляет собой 5- - 7-членную насыщенную гетероциклильную группу, имеющую по меньшей мере один атом азота в кольце, где R⁸ и R¹¹ связаны с кольцевым атомом углерода, соседним с кольцевым атомом азота, и где связь, показанная как пересеченная волнистой линией, исходит от атома углерода в кольце D, при условии, что D представляет собой не пирролидинильную группу. D может представлять собой, например, пирролильную, пиперидинильную, имидазолильную, оксазолильную, изоксазолильную, тиазолильную, тиадиазолильную, пиразолильную, пиридинильную, пиридазинильную, пиримидинильную, пиразинильную, морфолинильную, пиперазинильную группу, например, пиперидинильную или пиперазинильную группу, например, пиперидинильную группу.

В данном воплощении изобретения предпочтительно кольцо В представляет собой 1,4-фениленовую группу, 1,3-фениленовую группу или пиридинильную группу, в частности, 1,4-фениленовую или 1,3-фениленовую группу, где кольцевая группа В является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного алкила, C_1-4 алкокси, гидроксила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил. Например, кольцо В может представлять собой 1,4-фениленовую или 1,3-фениленовую группу, которая является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атома фтора, атома хлора, метила и этила.

В каждом из приведенных выше (а')-(с') R⁸ представляет собой группу -СООН или сложноэфирную группу формулы -(C=O)OR¹⁴, где R¹⁴ представляет собой R¹⁵R¹⁶R¹⁷C-, где любой R¹⁵ представляет собой атом водорода или C_1-3алкил-(Z¹)_а-[(С₁-С₃)алкил]_b-, где а и b независимо равны 0 или 1, и Z¹ представляет собой -О-, -S- или -NH-, и R¹⁶ и R¹⁷ независимо представляют собой атом водорода или C_1-3 алкил-; либо R¹⁵ и R¹⁶, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3- - 7-членное циклоалкильное кольцо, и R¹⁷ представляет собой атом водорода. Предпочтительно R⁸ представляет собой группу -СООН или сложноэфирную группу формулы -(C=O)OR¹⁴, где R¹⁴ представляет собой циклопентил или трет-бутил.

Предпочтительно группа [Линкер]-R соответствует приведенному выше (b') или (с').

Особенно предпочтительными соединениями по изобретению являются следующие соединения:

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат;

Циклопентил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат;

Циклопентил-(2S)-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат;

Циклопентил-(2R)-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат;

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-хлорбензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат;

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-2-карбоксилат;

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(метил)амино]пиперидин-2-карбокилат;

трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-2-карбоксилат;

Циклопентил-(2R)-4-[ацетил(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат;

Циклопентил-(2R)-4-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат;

Циклопентил-1-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]циклобутанкарбоксилат;

Циклопентил-N-[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]-2-метилаланинат;

Циклопентил-(2S)-4-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат;

Циклопентил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-этилбензил)пиперазин-2-карбоксилат.

Полезность изобретения

Как указано выше, соединения, к которым относится изобретение, являются ингибиторами CSF-1R киназы, и, следовательно, применимы при лечении заболеваний. Соответственно, в настоящем изобретении предложено соединение, как определено в данном описании, применяемое в способе лечения организма человека или животного.

В частности, в настоящем изобретении предложено соединение, как определено в данном описании, применяемое при лечении заболевания или расстройства, опосредованного CSF-1R киназой, включающего клеточно-пролиферативное заболевание, такое как рак и псориаз, полиглутаминовое заболевание, такое как болезнь Гентингтона, нейродегенеративное заболевание, такое как болезнь Альцгеймера, аутоиммунное заболевание, такое как ревматоидный артрит, диабет, гематологическое заболевание, воспалительное заболевание, сердечно-сосудистое заболевание, атеросклероз и воспалительное осложнение инфекции.

В настоящем изобретении также предложен способ лечения или предупреждения заболевания или расстройства, опосредованного CSF-1R киназой, у субъекта, включающий введение этому субъекту эффективного количества соединения, как определено в данном описании, и применение соединения, как определено в данном описании, при получении лекарственного средства, применяемого при лечении или предупреждении заболевания или расстройства, опосредованного CSF-1R киназой. В частности, предложен способ лечения или предупреждения клеточно-пролиферативного заболевания, такого как рак и псориаз, полиглутаминового заболевания, такого как болезнь Гентингтона, нейродегенеративного заболевания, такого как болезнь Альцгеймера, аутоиммунного заболевания, такого как ревматоидный артрит, диабета, гематологического заболевания, воспалительного заболевания, сердечнососудистого заболевания, атеросклероза и воспалительного осложнения инфекции, посредством введения эффективного количества соединения формулы (I), как определено в данном описании. Также предложено применение соединения формулы (I), как определено в данном описании, при получении лекарственного средства, применяемого при лечении или предупреждении клеточно-пролиферативного заболевания, такого как рак и псориаз, полиглутаминового заболевания, такого как болезнь Гентингтона, нейродегенеративного заболевания, такого как болезнь Альцгеймера, аутоиммунного заболевания, такого как ревматоидный артрит, диабета, гематологического заболевания, воспалительного заболевания, сердечно-сосудистого заболевания, атеросклероза и воспалительного осложнения инфекции.

Аутоиммунное заболевание часто имеет воспалительный компонент. Такие состояния включают острую диссеминированную универсальную алопецию, ANCA-положительные заболевания (антинейтрофильные цитоплазматические антитела; от англ. "antineutrophil cytoplasmic antibody"), болезнь Бехчета, болезнь Шагаса, синдром хронического утомления, вегетативную дистонию, энцефаломиелит, анкилозирующий спондилоартрит, апластическую анемию, гнойный гидраденит, аутоиммунный гепатит, аутоиммунный оофорит, целиакию, воспалительное кишечное заболевание, болезнь Крона, сахарный диабет типа 1, синдром Фанкони, гигантоклеточный артериит, гломерулонефрит, синдром Гудпасчера, диффузный токсический зоб, синдром Гийена-Барре, болезнь Хасимото, болезнь Шенлейн-Геноха, синдром Кавасаки, системную красную волчанку, микроскопический колит, микроскопический полиартериит, смешанное заболевание соединительной ткани, рассеянный склероз, тяжелую миастению, опсо-миоклональный синдром, неврит оптического нерва, тиреоидит Орда, пузырчатку, нодозный полиаретриит, полимиалгию, ревматоидный артрит, синдром Рейтера, синдром Шегрена, височный артериит, гранулематоз Вегенера, аутоиммунную гемолитическую анемию с тепловыми антителами, интерстициальный цистит, болезнь Лайма, кольцевидную склеродермию, псориаз, саркоидоз, склеродерму, неспецифический язвенный колит и витилиго.

Другие воспалительные состояния, которые можно лечить соединениями по изобретению, включают, например, аппендицит, дерматит, дерматомиозит, эндокардит, фиброзит, гингивит, глоссит, гепатит, гнойный гидраденит, ирит, ларингит, мастит, миокардит, нефрит, отит, панкреатит, паротит, перикардит, перитонит, фарингит, плеврит, пневмонию, простатит, пиелонефрит и стоматит, отторжение трансплантата (включающее органы, такие как почки, печень, сердце, легкое, поджелудочную железу (например, инсулоциты), костный мозг, роговицу, тонкую кишку, аллотрансплантаты кожи, гомеопластические трансплантаты кожи и ксенотрансплантаты сердечных клапанов, сывороточную реакцию и болезнь трансплантат против хозяина), острый панкреатит, хронический панкреатит, острый респираторный дистресс-синдром, синдром Сезари, врожденную гиперплазию надпочечников, подострый тиреоидит, гиперкальцемию, связанную с раком, пузырчатку, буллезный герпетиформный дерматит, буллезную форму многоформной эритемы, эксфолиативный дерматит, себоррейный дерматит, сезонный или хронический аллергический ринит, бронхиальную астму, контактный дерматит, атопический дерматит, реакции гиперчувствительности к лекарственным средствам, аллергический конъюнктивит, кератит, опоясывающий герпес с поражением глаза, ирит и иридоциклит, хориоретинит, неврит зрительного нерва, симптоматический саркоидоз, химиотерапию при сверхостром или диссеминированном туберкулезе легких, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру у взрослых, вторичную тромбоцитопению у взрослых, приобретенную (аутоиммунную) гемолитическую анемию, лейкоз и лимфомы у взрослых, острый лейкоз у детей, регионарный энтерит, аутоиммунный васкулит, рассеянный склероз, хроническую обструктивную болезнь легких, отторжение трансплантата солидного органа, сепсис, первичный билиарный цирроз и первичный склерозирующий холангит.

Предпочтительные методы лечения с применением соединений по изобретению включают лечение ревматоидного артрита, псориатического артрита, диабета типа 1, астмы, воспалительного кишечного заболевания, системной красной волчанки и воспаления, сопровождающего инфекционные патологические состояния (например, сепсиса), псориаза, болезни Крона, неспецифического язвенного колита, хронической обструктивной болезни легких, рассеянного склероза, атопического дерматита и болезни трансплантат против хозяина.

Другим предпочтительным применением соединений по изобретению является применение при лечении раков.

В настоящем изобретении также предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I), как определено в данном описании, и один или более фармацевтически приемлемых носителей и/или эксципиентов.

Понятно, что конкретный уровень дозы для любого конкретного субъекта зависит от ряда факторов, включающих активность конкретного применяемого соединения, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол, режим питания, время введения, путь введения, скорость выделения, комбинацию лекарственных средств и тяжесть конкретного заболевания, подлежащего лечению. Оптимальные уровни дозы и частоту дозирования определяют с помощью клинического испытания. Тем не менее, ожидают, что характерная доза будет находиться в диапазоне приблизительно от 0,001 до 50 мг на кг массы тела.

Соединения, к которым относится изобретение, можно готовить для введения любым путем в соответствии с их фармакокинетическими свойствами. Композиции, вводимые перорально, могут находиться в форме таблеток, капсул, порошков, гранул, лепешек, жидких или гелеобразных препаратов, таких как пероральные, местные или стерильные парентеральные растворы или суспензии. Таблетки и капсулы для перорального введения могут быть представлены в виде стандартной дозируемой формы, и могут содержать традиционные эксципиенты, такие как связующие вещества, например, сироп, аравийская камедь, желатин, сорбит, трагакант или поливинилпирролидон; наполнители, например, лактоза, сахар, кукурузный крахмал, фосфат кальция, сорбит или глицин; смазывающее вещество для получения таблеток, например, стеарат магния, тальк, полиэтиленгликоль или кремнезем; разрыхлители, например, картофельный крахмал, или приемлемые увлажняющие агенты, такие как лаурилсульфат натрия. Таблетки могут быть покрыты согласно способам, хорошо известным в обычной фармацевтической практике. Пероральные жидкие препараты могут находиться в форме, например, водных или масляных суспензий, растворов, эмульсий, сиропов или эликсиров, либо могут быть представлены в виде сухого препарата для восстановления водой или другим подходящим растворителем перед применением. Такие жидкие препараты могут содержать традиционные добавки, такие как суспендирующие агенты, например, сорбит, сироп, метилцеллюлоза, глюкозный сироп, желатин, гидрогенизированные пищевые жиры; эмульгирующие агенты, например, лецитин, сорбитанмоноолеат или аравийская камедь; неводные растворители (которые могут включать пищевые масла), например, миндальное масло, фракционированное кокосовое масло, масляные сложные эфиры, такие как глицерин, пропиленгликоль или этиловый спирт; консерванты, например, метил- или пропил-пара-гидроксибензоат или сорбиновая кислота, и при желании традиционные корригенты или красящие вещества.

Для местного применения на коже лекарственное средство можно включать в препарат в виде крема, лосьона или мази. Препараты в виде крема или мази, которые можно применять для лекарственных средств, представляют собой традиционные препараты, хорошо известные в данной области техники, например, как описано в стандартных руководствах по фармацевтике, таких как Британская фармакопея.

Для местного применения путем ингаляции лекарственное средство можно включать в препарат для аэрозольной доставки, например, с помощью струйных распылителей под давлением или ультразвуковых распылителей, либо предпочтительно путем введения дозированных аэрозолей под действием пропеллента или введения микронизированных порошков без пропеллента, например, ингаляционных капсул или других систем доставки "сухого порошка". В таких ингаляционных препаратах могут присутствовать эксципиенты, такие как, например, пропелленты (например, хладон в случае дозированных аэрозолей), поверхностно-активные вещества, эмульгаторы, стабилизаторы, консерванты, корригенты и наполнители (например, лактоза в случае порошковых ингаляторов). Для целей ингаляции в продаже имеется большое число аппаратов, с помощью которых можно получать и вводить аэрозоли оптимального размера частиц, используя метод ингаляции, подходящий для субъекта. Помимо применения адаптеров (спейсеров, испарителей) и грушевидных контейнеров (например, Nebulator®, Volumatic®) и автоматических устройств, испускающих распыляемый раствор (Autohaler®), для дозированных аэрозолей, в частности, в случае порошковых ингаляторов, существует ряд технических решений (например, Diskhaler®, Rotadisk®, Turbohaler® или ингаляторы, раскрытые, например, в заявке на европейский патент ЕР 0505321).

Для местного применения для глаза лекарственное средство можно включать в препарат в виде раствора или суспензии в подходящем стерильном водном или неводном растворителе. В эти препараты можно также включать добавки, например, буферы, такие как метабисульфит натрия или динатрия эдетат; консерванты, включающие бактерицидные и фунгицидные средства, такие как ацетат или нитрат фенилртути, бензалкония хлорид или хлоргексидин, и загустители, такие как гипромеллоза.

Активный ингредиент можно также вводить парентерально в стерильной среде. В зависимости от используемого растворителя и концентрации лекарственное средство можно либо суспендировать, либо растворять в растворителе. Предпочтительно в этом растворителе можно растворять адъюванты, такие как местный анестетик, консервант и буферный агент.

Соединения по изобретению можно вводить в виде части фармацевтической комбинации, включающей соединения по изобретению и второй ингибитор. При введении в виде части фармацевтической комбинации соединения можно вводить либо одновременно, либо любым способом отдельного последовательного введения терапевтически эффективных количеств. Не имеет значения, вводят ли эти соединения в одной и той же дозируемой форме, например, одно соединение можно вводить местным путем, а другое соединение можно вводить перорально. Введение терапевтически эффективного количества комбинаций ингибиторов может обладать преимуществом перед введением одного ингибитора, состоящим в том, что комбинация может обеспечивать одно или более из следующих улучшенных свойств по сравнению с индивидуальным введением терапевтически эффективного количества соединения-компонента: i) повышенного терапевтического эффекта по сравнению с наиболее активным отдельным агентом, ii) синергетическая или высоко синергетическая активность, iii) протокол дозирования, обеспечивающий сниженный профиль побочных эффектов, iv) снижение профиля токсических эффектов, v) увеличение терапевтического окна, или vi) увеличение биодоступности одного или обоих соединений-компонентов.

Примеры подходящих фармацевтических комбинаций включают комбинацию соединений по настоящему изобретению с ингибиторами mTor, ингибиторами B-Raf, ингибиторами AKT или ингибиторами PI3 киназы.

Синтез

Для синтеза соединений (I), к которым относится настоящее изобретение, существует множество стратегий синтеза, но все они основаны на известной химии, известной специалистам в химии органического синтеза. Таким образом, соединения в соответствии с формулой (I) можно синтезировать согласно методам, описанным в стандартной литературе и хорошо известным в данной области техники. Характерными литературными источниками являются следующие документы: "Advanced organic chemistry", 4^th Edition (Wiley), J March, "Comprehensive Organic Transformation", 2^nd Edition (Wiley), R.C. Larock, "Handbook of Heterocyclic Chemistry", 2^nd Edition (Pergamon), A.R. Katritzky), обзорные статьи, которые можно найти в журналах "Synthesis", "Acc. Chem. Res.", "Chem. Rev", или первичные литературные источники, идентифицируемые стандартными поисками литературы онлайн или из вторичных источников, таких как журнал Кемикал Абстрактс ("Chemical Abstracts") или "Beilstein".

Соединения по изобретению могут быть получены с помощью ряда методов, в целом раскрытых ниже, и более конкретно в приведенных ниже Примерах. В реакциях, раскрытых ниже, может быть необходимо защитить активные функциональные группы, например, гидроксильные группы, аминогруппы и карбоксигруппы, где эти группы желательны в конечном продукте, чтобы избежать их нежелательного участия в реакциях [см., например, Greene, T.W., "Protecting Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, 1999]. Традиционные защитные группы можно использовать в сочетании со стандартной практикой. В некоторых случаях удаление защиты может происходить на последней стадии в синтезе соединения общей формулы (I), и понятно, что способы согласно изобретению, раскрытые в данном изобретении ниже, распространятся на такое удаление защитных групп.

В схемах, подробно описанных ниже, показаны общие схемы синтеза соединений формулы (I). Понятно, что соединения, указанные римскими цифрами на приведенных ниже схемах, не соответствуют римским цифрам заявленных соединений, используемым в других разделах данного описания.

Соединения общей формулы (VII) могут быть получены с помощью реакций, приведенных на схеме А, но не ограниченных ими.

Соединение формулы (II), 2-аминопиразин, имеется в продаже.

2-Аминопиразин можно преобразовать в соединение формулы (III) путем взаимодействия с бромирующим агентом, таким как Ν-бромсукцинимид (NBS; от англ. "N-bromosuccinimide"), в подходящем растворителе, таком как дихлорметан (ДХМ), при температуре 0°С.

Соединения формулы (IV) могут быть получены из соединения формулы (III) путем селективного нуклеофильного ароматического замещения посредством воздействия бензильными аминами. Эту реакцию можно проводить в подходящем растворителе, таком как н-бутанол, и в присутствии основания, такого как диизопропилэтиламин (DIPEA; от англ. "diisopropylethylamine") при микроволновом облучении при температуре 150°С.

Соединения формулы (V) могут быть получены из соединений формулы (IV) путем взаимодействия с соответствующими ароматическими бороновыми сложными эфирами или кислотами, используя условия сочетания Сузуки. Сочетания Сузуки можно проводить в присутствии катализатора, такого как дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II), основания, такого как Na₂CO₃, и в растворителе, таком как диметоксиэтан (ДМЭ) при температуре 80°С. Специалистам в данной области техники понятно, что различные замещенные гетероциклические и замещенные ароматические бороновые сложные эфиры и кислоты можно подвергать взаимодействию с соединениями формулы (IV) в условиях сочетания Сузуки, чтобы синтезировать аналоги кольца В соединений формулы (V).

Соединения формулы (VI) могут быть получены из соединений формулы (V) путем взаимодействия с основанием, таким как гидроксид лития или гидроксид натрия, в растворителе, таком как этанол, метанол или тетрагидрофуран (ТГФ) и вода при температурах в диапазоне от комнатной температуры (КТ) до температуры образования флегмы.

Соединения формулы (VI) можно обрабатывать соответствующей аминной функциональной группой и подходящим агентом сочетания, таким как 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид, в присутствии Ν-гидроксибензотриазола в апротонном растворителе, таком как Ν,Ν-диметилформамид, при комнатной температуре.

Соединения общей формулы (IX) могут быть получены с помощью реакций, приведенных на схеме В, но не ограниченных ими.

Соединения формулы (IV) можно преобразовать в соединения формулы (VIII), используя условия, описанные для получения соединений формулы (V) (Схема А).

Соединения формулы (IX) могут быть получены из соединений формулы (VIII) в условиях восстановительного аминирования соответствующим амином, используя соответствующий восстанавливающий агент, такой как триацетоксиборгидрид натрия, в подходящем растворителе, таком как дихлорэтан (ДХЭ).

На приведенных выше схемах А и В аминогруппы в соединении формулы (VI) могут быть сначала защищены соответствующим способом защиты аминогруппы, известным специалистам в данной области техники. Подходящей защитной группой для аминогруппы является, но не ограничена ими, например, ацильная группа, алканоильная группа, такая как ацетил, алкоксикарбонильная группа, такая как метоксикарбонильная, этоксикарбонильная или трет-бутоксикарбонильная группа, арилметоксикарбонильная группа, такая как бензилоксикарбонил, или ароильная группа, такая как бензоил. Затем конечной стадией реакции может быть удаление защиты аминогруппы с использованием необходимых условий удаления защиты, которые варьируют в зависимости от выбора используемой защитной группы. Так, например, ацильную группу, такую как алканоил, алкоксикарбонильную группу или ароильную группу можно удалить путем гидролиза подходящим основанием, таким как гидроксид щелочного металла, например, гидроксид лития или гидроксид натрия. Альтернативно ацильную группу, такую как трет-бутоксикарбонильная группа, можно удалить, например, путем обработки подходящей кислотой, такой как соляная, серная или трифторуксусная кислота, и арилметоксикарбонильную группу, такую как бензилоксикарбонильная группа, можно удалить, например, путем гидрогенизации над катализатором, таким как палладий на углероде.

Соединения общей формулы (X) и (XI) могут быть получены с помощью реакций, приведенных на схеме С, но не ограниченных ими.

Соединения формулы (IX), когда R=NHY2', можно преобразовать в соединения формулы (X), используя условия, описанные для получения соединений формулы (IX) (Схема В) с добавлением или без добавления кислоты, такой как уксусная кислота. Альтернативно соединения формулы (IX), где R=NHY2', можно преобразовать в соединения формулы (XI) путем образования амидной связи, путем взаимодействия с хлорангидридами в подходящем растворителе, таком как ДХМ, при температурах в диапазоне от 0°С до комнатной температуры.

Соединения общей формулы (XVI) могут быть получены с помощью реакций, приведенных на схеме D, но не ограниченных ими.

Соединения формулы (IV) можно преобразовать в соединения формулы (XII) подходящим способом удаления защиты аминогруппы, известным специалистам в данной области техники. Подходящие защитные группы (Pg) являются такими, как описано выше.

Соединения, такие как соединения формулы (XIII), могут быть получены из соединений формулы (XII), используя условия, описанные для получения соединений формулы (V) (Схема А). Соединения формулы (XIII) можно преобразовать в соединения формулы (XIV) путем окисления, используя окисляющий агент, такой как периодинан Десса-Мартина, в подходящем растворителе, таком как ДХМ. Альтернативно соединения формулы (XIV) могут быть получены непосредственно из соединений формулы (XII) путем взаимодействия с соответствующим образом замещенной бороновой кислотой или сложным эфиром, используя условия, описанные для получения соединений формулы (V) (Схема А).

Соединения формулы (XV) могут быть получены из соединений формулы (XIV) путем восстановительного аминирования, используя условия, описанные для получения соединений формулы (IX) (Схема В).

Соединения формулы (XVI) могут быть получены путем удаления защиты аминогруппы соединений формулы (XV), используя необходимые условия удаления защиты, которые варьируют в зависимости от выбора используемой защитной группы, например, используя один из способов, описанных выше.

Соединение формулы (VII), (IX) или (XVI), в котором R представляет собой Y1' или NR⁷Y^2'/NHY2' могут быть образованы путем (i) взаимодействия соединения формулы (VI), (VIII) или (XIV) согласно схемам А, В и D соответственно с функциональной аминогруппой, в которой кольцевой атом азота замещен группой R', например, трет-бутоксикарбонил, и (ii) обработки полученного в результате соединения подходящей кислотой, такой как соляная кислота или трифторуксусная кислота.

Ниже описан ряд иллюстративных примеров настоящего изобретения. Во многих случаях можно также использовать альтернативные методы. Понятно, что в приведенных ниже примерах используемые или предложенные растворители и реагенты являются неограничивающими и могут быть заменены соответствующими растворителями и реагентами, известными специалистам в данной области техники. Продукты реакции могут быть выделены способами, известными в данной области техники, такими как экстракция подходящим растворителем, осаждение из подходящего растворителя, хроматография с использованием подходящей системы растворителей, включая колоночную хроматографию на силикагеле, ВЭЖХ и тому подобное.

Соединения по изобретению можно синтезировать с помощью ряда способов, в общем описанных выше и более конкретно в приведенных ниже Примерах. Таким образом, соединения общей формулы (I) могут быть получены способами, представленными на схемах 1-30, но не ограниченными ими.

Примеры осуществления изобретения

Сокращения

Boc = трет-бутоксикарбонил

Cs₂CO₃ = карбонат цезия

ДХЭ = 1,2-дихлорэтан

ДХМ = дихлорметан

DIPEA = диизопропилэтиламин

ДМАП = диметиламинопиридин

ДМФ = диметилформамид

ДМСО = диметилсульфоксид

EDC = 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид

EtOAc = этилацетат

HCl = соляная кислота

HOBt = 1-гидроксибензотриазол

ВЭЖХ = высокоэффективная жидкостная хроматография

KOAc = ацетат калия

ЖХМС = высокоэффективная жидкостная хроматография с масс-спектрометрией

MeCN = ацетонитрил

МеОН = метанол

MgSO₄ = сульфат магния

Na₂CO₃ = карбонат натрия

NaHCO₃ = гидрокарбонат натрия

NaOH = гидроксид натрия

ЯМР = ядерно-магнитный резонанс

PdCl₂(dppf)₂ = 1,1'-Бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(II) дихлорид

Млн^-1 = миллионные доли

KT = комнатная температура

STAB = триацетоксиборгидрид натрия (от англ. "sodium triacetoxyborohydride")

ТБМЭ = трет-бутилметиловый эфир

ТГФ = тетрагидрофуран

ч = часы

мин = минуты

г = граммы

мг = миллиграммы

л = литры

мл = миллилитры

мкл = микролитры

моль = моль

ммоль = миллимоль

нас. = насыщенный

Имеющиеся в продаже реагенты и растворители (степень чистоты ВЭЖХ) использовали без дополнительной очистки. Растворители удаляли, используя роторный испаритель Бюкки. Микроволновое излучение проводили, используя микроволновой синтезатор Biotage Initiator™ Eight. Очистку соединений колоночной флэш-хроматографией проводили, используя силикагель, размер частиц 40-63 мкм (230-400 меш), полученный от фирмы Fluorochem. Автоматическую колоночную флэш-хроматографию проводили на системах Combiflash® или Companion®, оборудованных картриджами Telos, Biotage® или GraceResolv. Очистку соединений препаративной ВЭЖХ проводили на системах Gilson, используя колонку Waters XSelect С18 (5 мкм, 50×19 мм) с обращенной фазой, используя градиентный способ, описанный ниже:

Градиент 10-100% В (А = вода/0,1% муравьиная кислота, В = ацетонитрил) в течение 10 мин, скорость тока=20 мл/мин, УФ обнаружение при 254 нм. Альтернативно муравьиную кислоту можно заменить (NH₄)₂CO₃ в водном буфере.

Спектры ¹Н ЯМР снимали на спектрометре Bruker 300 МГц AV в дейтерированных растворителях. Химические сдвиги (δ) приведены в миллионных долях. Анализ с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ) проводили с помощью пластин Kieselgel 60 F₂₅₄ (Merck) и визуализировали, используя УФ свет.

Аналитическую ВЭЖХ/МС проводили на системе Agilent НР1100 LC, используя колонки Luna С18 (3 мкм, 50×4,6 мм) с обращенной фазой, градиент 5-95% В (А = вода/0,1% муравьиная кислота, В = ацетонитрил/0,1% муравьиная кислота) в течение 2,25 мин, скорость тока = 2,25 мл/мин. УФ спектры снимали при 220 и 254 нм, используя детектор G1315B DAD. Масс-спектры получали в диапазоне m/z 150-800 на детекторе LC/MSD SL G1956B. Данные интегрировали и сообщали, используя программы ChemStation и ChemStation Data Browser.

Промежуточные соединения

Промежуточное соединение 1: 5-Бром-N³-(2,6-дихлорбензил)пиразин-2,3-диамин

5-Бром-N³-(2,6-дихлорбензил)пиразин-2,3-диамин синтезировали, используя путь, представленный на схеме 1.

Стадия 1. 3, 5-Дибромпиразин-2-амин

К раствору аминопиразина (11,36 г, 0,12 моль) в ДХМ (700 мл) при 0°С добавляли порциями Ν-бромсукцинимид (44,64 г, 0,25 моль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь промывали нас. Na₂CO₃ (3×200 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме, после чего очищали колоночной хроматографией (20% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого твердого вещества (15,9 г, 53%).

ЖХМС: m/z 252/254/256 [М+Н]⁺.

Стадия 2. 5-Бром-N³-(2,6-дихлорбензил)пиразин-2,3-диамин

К раствору 3,5-дибромпиразин-2-амина (5,01 г, 19,8 ммоль) в н-бутаноле (5 мл) добавляли 2,6-дихлорбензиламин (10,47 г, 59,4 ммоль) и DIPEA (3,8 мл, 21,8 ммоль). Реакционную смесь нагревали микроволнами при 150°С в течение 4 ч. Реакционную смесь наливали на EtOAc (100 мл) и промывали водой (50 мл), соляным раствором (50 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Полученное в результате твердое вещество растирали с гептаном, а затем добавляли ДХМ (40 мл), и суспензию энергично перемешивали в течение 15 мин. Твердое вещество собирали фильтрованием с получением соединения, указанного в заголовке, в виде беловатого твердого вещества (5,14 г, 75%).

ЖХМС: m/z 347/349/381 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 7.45-7.43 (2Н, m), 7.32 (1Н, dd, J=7.2, 8.9 Гц), 7.21 (1H, s), 4.81 (2Н, s).

Промежуточное соединение 2: 5-Бром-N³-(2,6-дифторбензил)пиразин-2,3-диамин

5-Бром-N³-(2,6-дифторбензил)пиразин-2,3-диамин синтезировали аналогично Промежуточному соединению 1, используя 2,6-дифторбензиламин в качестве реагента на стадии 2 пути, представленного на схеме 1. Продукт очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в гептане (градиент 0-40%).

ЖХМС: m/z 315/317 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 7.49 (1Н, s), 7.4-7.2 (1Н, m), 7.07-6.85 (2Н, m), 4.71 (2Н, d, J=1.8 Гц), 4.70-4.55 (1Н, m), 4.30 (2Н, br, s).

Промежуточное соединение 3: 5-Бром-N³-(2-хлор-6-фторбензил)пиразин-2,3-диамин

5-Бром-N³-(2-хлор-6-фторбензил)пиразин-2,3-диамин синтезировали аналогично Промежуточному соединению 1, используя 2-фтор-6-хлорбензиламин в качестве реагента на стадии 2 пути, представленного на схеме 1. Продукт очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в гептане (градиент 0-70%).

ЖХМС: m/z 331/333 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 7.6-7.47 (1Н, m), 7.42-7.17 (2Н, m), 7.15-6.95 (1Н, m), 4.78 (2Н, dd, J=1.8, 0.5 Гц), 4.63-4.95 (1Н, m), 4.06 (2Н, br, s).

Промежуточное соединение 4: Ди-трет-бутил-{5-бром-3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}имидокарбонат

Ди-трет-бутил-{5-бром-3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}имидокарбонат был получен путем, показанным на схеме 2.

Стадия 1: Ди-трет-бутил{5-бром-3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}имидодикарбонат

К раствору Промежуточного соединения 1 (3,76 г, 10,8 ммоль) в ДХЭ (60 мл) при 60°С добавляли ДМАП (0,13 г, 1,08 ммоль), а затем ди-трет-бутилдикарбонат (14,1 г, 65,0 ммоль), растворенный в ДХЭ (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 4 ч для завершения реакции. Реакционной смеси давали охладиться до КТ, после чего добавляли воду (60 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали ДХМ (2×60 мл). Объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме до оранжевого масла, которое очищали колоночной хроматографией (10% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого твердого вещества (3,98 г, 57%).

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 8.40 (1Н, s), 7.32 (1Н, m), 7.29 (1Н, s), 7.18 (1Н, dd, J=8.7, 6.9 Гц), 5.12 (2Н, s), 1.56 (18Н, s), 1.47 (9Н, s).

Промежуточное соединение 5: 3-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензальдегид

3-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензальдегид был получен путем, показанным на схеме 3 ниже.

Стадия 1. 3-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензальдегид

К раствору 3-формилфенилбороновой кислоты (5 г, 33 ммоль) в безводном ТГФ (50 мл) добавляли пинакол (4,34 г, 37 ммоль). Реакционной смеси давали перемешиваться при КТ в атмосфере азота в течение 18 ч, после чего концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток растворяли в ДХМ (150 мл) и промывали водой (3×100 мл). Органический слой высушивали над MgSO₄ и выпаривали в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого масла (7,73 г, 100%).

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 10.06 (1Н, s), 8.31 (1Н, s), 8.07 (1Н, d, J=7.4 Гц), 7.99 (1H, dt, J=1.5, 7.4 Гц), 7.54 (1Η, t, J=7.4 Гц), 1.38 (12H, s).

Промежуточное соединение 6: 4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензальдегид

4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензальдегид синтезировали аналогично Промежуточному соединению 5, используя (4-формилфенил)бороновую кислоту в качестве исходного вещества в схеме 3.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 10.06 (1Н, s), 7.97 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.87 (2Н, d, J=8.1 Гц), 1.37 (12Н, s).

Промежуточное соединение 7: 2-Этил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензальдегид

2-Этил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензальдегид синтезировали аналогично Промежуточному соединению 5, используя 3-этил-4-формилфенилбороновой кислоты в качестве исходного вещества в схеме 3.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 10.34 (1Н, s), 7.85-7.74 (3Н, m), 3.09 (2Н, q, J=7.5 Гц), 1.38 (12Н, s), 1.29 (3Н, t, J=7.5 Гц).

Промежуточное соединение 8: 2-[3-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]этанол

2-[3-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]этанол был получен путем, показанным на схеме 4 ниже.

Стадия 1: 2-[3-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]этанол

К раствору 2-(3-бромфенил)-этанола (3,0 г, 15 ммоль) в безводном ДМСО (30 мл) добавляли KOAc (4,39 г, 45 ммоль), бис(пинаколато)дибор (5,68 г, 22 ммоль) и PdCl₂(dppf)₂ (0,61 г, 0,74 ммоль), и реакционную смесь нагревали при 120°С в атмосфере азота в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до KT и добавляли EtOAc (60 мл). Реакционную смесь фильтровали через целлит®, промывая EtOAc (500 мл). Фильтрат промывали нас NaHCO₃ (150 мл), водой (150 мл), соляным раствором (150 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в гептане (градиент 0-100%), а затем колоночной хроматографией (33% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бледно-желтого масла (3,30 г, 89%).

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 7.70 (2Н, m), 7.35 (2Н, m), 3.89 (2Н, t, J=6.6 Гц), 2.90 (2Н, t, J=6.6 Гц), 1.51 (1Н, s), 1.37 (12Н, s).

Промежуточное соединение 9: 2-Метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензальдегид

2-Метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензальдегид синтезировали аналогично Промежуточному соединению 8, используя 4-бром-2-метилбензальдегид в качестве исходного вещества в схеме 4.

ЖХМС: m/z 430,2 [2М]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 10.32 (1Н, s), 7.85-7.75 (2Н, m), 7.72 (1Н, s), 2.69 (3Н, s), 1.38 (12Н, s).

Промежуточное соединение 10: Метил-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил]ацетат

Метил-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил]ацетат был получен согласно пути синтеза, показанному на схеме 5.

К раствору 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (560 мг, 2,9 ммоль) в безводном ДМФ (10 мл) добавляли Cs₂CO₃ (1,03 г, 3,16 ммоль) и метилбромацетат (0,30 мл, 3,16 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 90°С в атмосфере азота в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли EtOAc (50 мл), промывали водой (2×25 мл), соляным раствором (25 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали колоночной хроматографией (50% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бесцветного масла (360 мг, 47%).

ЖХМС: m/z 267 [М+Н]⁺.

Промежуточное соединение 11: 2-[4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил]этанол

2-[4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил]этанол синтезировали аналогично Промежуточному соединению 10, используя бромэтанол в качестве исходного вещества в пути, показанном на схеме 5. Неочищенное вещество очищали колоночной хроматографией (80-100% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бесцветного масла (528 мг, 49%).

ЖХМС: m/z 239 [М+Н]⁺.

Промежуточное соединение 12: 4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензойная кислота

4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензойную кислоту синтезировали, используя путь, представленный на схеме 6.

Стадия 1. Метил-4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоат

К раствору Промежуточного соединения 1 (3,82 г, 11,0 ммоль) в ДМЭ (75 мл) добавляли метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (4,48 г, 16,5 ммоль) и 2 н. Na₂CO₃ (13,7 мл, 27,4 ммоль), и раствор дегазировали путем барботирования азота через реакционную смесь. Добавляли дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II) (385 мг, 0,5 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 80°С в атмосфере азота в течение 18 ч. Добавляли еще 0,05 экв. дихлорбис(трифенилфосфин)палладия(II) (385 мг, 0,5 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 80°С в атмосфере азота в течение 24 ч для завершения реакции. Реакционную смесь фильтровали через целлит®, и фильтрационный кек промывали EtOAc (2×50 мл). Объединенные фильтраты промывали водой (50 мл), соляным раствором (50 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме, после чего очищали колоночной хроматографией (60% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желто-зеленого твердого вещества (3,88 г, 88%).

ЖХМС: m/z 403/405 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 8.09-8.02 (4Н, m), 7.82 (1Н, s), 7.47-7.44 (2Н, m), 7.36-7.29 (1Н, m), 5.00 (2Н, s), 3.92 (3Н, s).

Стадия 2. 4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензойная кислота

К суспензии метил-4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоата (2,31 г, 5,7 ммоль) в смеси 1:1:1 ТГФ, МеОН и воды (30 мл) добавляли моногидрат гидроксида лития (1,20 г, 28,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 20 ч для завершения реакции. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и неочищенный остаток распределяли между водой (100 мл) и EtOAc (50 мл). Водный слой отделяли и подкисляли до pH3, используя 1 н. HCl. Полученное в результате твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали в вакуумной печи при 40°С с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого твердого вещества (1,43 г, 64%).

ЖХМС: m/z 389/391 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 12.81 (1Н, br, s); 8.07-8.04 (2Н, m), 7.95-7.93 (3Н, m), 7.56-7.54 (2Н, m), 7.41 (1Н, dd, J=7.2, 8.9 Гц), 6.44 (1Н, t, J=4.1 Гц), 6.40 (2Н, br s), 4.83 (2Н, d, J=4.1 Гц).

Промежуточное соединение 13: 3-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензойная кислота

3-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензойную кислоту синтезировали аналогично Промежуточному соединению 12, используя путь, показанный на схеме 6, подвергая взаимодействию Промежуточное соединение 1 с 3-метоксикарбонилфенилбороновой кислоты пинаколовым эфиром.

ЖХМС: m/z 389/391 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 8.68-8.55 (1Н, m), 8.12-8.05 (1Н, m), 7.95-7.85 (1Н, m), 7.78 (1Н, m), 7.77-7.37 (3Н, m), 7.35-7.29 (1Н, m), 5.04 (2Н, s).

Промежуточное соединение 14: 4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензальдегид

4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензальдегид синтезировали аналогично Промежуточному соединению 12, используя стадию 1 пути, представленного на схеме 6, подвергая взаимодействию Промежуточное соединение 1 с Промежуточным соединением 6.

ЖХМС: m/z 373/375 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆,) δ млн^-1: 9.99 (1Н, s), 8.17 (2Н, d, J=8.4 Гц), 9.01 (1Н, s), 7.91 (2Н, d, J=8.4 Гц), 7.57-7.54 (2Н, m), 7.42 (1Н, dd, J=7.1, 8.6 Гц), 6.49 (3Н, br, s), 4.85 (2Н, d, J=4.1 Гц).

Промежуточное соединение 15: 4-{5-Амино-6-[(2,6-дифторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензальдегид

4-{5-Амино-6-[(2,6-дифторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензальдегид синтезировали аналогично Промежуточному соединению 12 согласно стадии 1 пути, представленного на схеме 6, подвергая взаимодействию Промежуточное соединение 2 с Промежуточным соединением 6.

ЖХМС: m/z 341 [М+Н]⁺.

Промежуточное соединение 16: 4-{5-Амино-6-[(2-хлор-6-фторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензальдегид

4-{5-Амино-6-[(2-хлор-6-фторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензальдегид синтезировали аналогично Промежуточному соединению 12 согласно стадии 1 пути, представленного на схеме 6, подвергая взаимодействию Промежуточное соединение 3 с Промежуточным соединением 6.

ЖХМС: m/z 357/359 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 10.08 (1Н, s), 8.3-7.85 (5Н, m), 4.95 (2Н, d J=1.6 Гц), 4.90-4.7 (1Н, m), 4.69-4.40 (2Н, m).

Промежуточное соединение 17: 4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-хлорбензальдегид

4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-хлорбензальдегид синтезировали аналогично Промежуточному соединению 12 согласно стадии 1 пути, представленного на схеме 6, подвергая взаимодействию Промежуточное соединение 1 и 3-хлор-4-формил фенилбороновую кислоту.

ЖХМС: m/z 407/409 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 10.51 (1Н, s), 8.12-7.94 (2Н, m), 7.9-7.8 (1Н, m), 7.48-7.0 (4Н, m), 5.03 (2Н, d, J=1.6 Гц).

Промежуточное соединение 18: 4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-метилбензальдегид

4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-метилбензальдегид синтезировали аналогично Промежуточному соединению 12 согласно стадии 1 пути, представленного на схеме 6, подвергая взаимодействию Промежуточное соединение 1 с Промежуточным соединением 9.

ЖХМС: m/z 387/389 [М+Н]⁺.

Промежуточное соединение 19: 4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-этилбензальдегид

4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-этилбензальдегид синтезировали аналогично Промежуточному соединению 12 согласно стадии 1 пути, представленного на схеме 6, подвергая взаимодействию Промежуточное соединение 1 с Промежуточным соединением 7.

ЖХМС: m/z 401/402 [М+Н]⁺.

Промежуточное соединение 20: 3-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензальдегид

3-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензальдегид синтезировали аналогично Промежуточному соединению 12, используя стадию 1 пути, представленного на схеме 6, подвергая взаимодействию Промежуточное соединение 1 с Промежуточным соединением 5.

ЖХМС: m/z 373/375 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 10.13 (1Н, s), 8.6-8.5 (1Н, m), 8.33-8.2 (1Н, m), 8.03 (1Н, m), 7.95-7.85 (1Н, m), 7.7-7.58 (1Н, m), 7.49-73 (3Н, m), 5.15-5.0 (2Н, m), 4.6-4.4 (1Н, m), 4.3-4.15 (2Н, m).

Промежуточное соединение 21: Ди-трет-бутил{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил) амино]-5-[3-(2-оксоэтил)фенил]пиразин-2-ил}имидодикарбонат

Ди-трет-бутил{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-[3-(2-оксоэтил)фенил]пиразин-2-ил}имидодикарбонат синтезировали, как показано на схеме 7 ниже.

Стадия 1: Ди-трет-бутил-{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-[3-(2-гидроксиэтил)фенил]пиразин-2-ил}имидодикарбонат

К раствору Промежуточного соединения 4 (175 мг, 0,27 ммоль) в ДМЭ (2,6 мл) добавляли Промежуточное соединение 8 (100 мг, 0,40 ммоль) и 2 н. Na₂CO₃ (0,34 мл, 0,67 ммоль). Этот раствор дегазировали путем барботирования азота через реакционную смесь. Добавляли дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II) (19 мг, 0,02 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 80°С в атмосфере азота в течение 18 ч для завершения реакции. Реакционную смесь фильтровали через целлит®, и фильтрационный кек промывали EtOAc (60 мл). Объединенные фильтраты промывали водой (2×30 мл), соляным раствором (30 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме, после чего очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в гептане (градиент 0-70%) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (192 мг, 103%).

ЖХМС: m/z 695/697/699 [M+Na]⁺.

Стадия 2: Ди-трет-бутил-{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-[3-(2-оксоэтил)фенил]пиразин-2-ил}имидодикарбонат

Ди-трет-бутил-{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-[3-(2-гидроксиэтил)фенил]пиразин-2-ил}имидодикарбонат (169 мг, 0,25 ммоль) растворяли в безводном ДХМ (4 мл) и добавляли периодинан Десса-Мартина (125 мг, 0,29 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при КТ в атмосфере азота в течение 1,5 ч. Реакционную смесь гасили нас. NaHCO₃ (2 мл) и насыщенным раствором тиосульфата натрия (2 мл), и энергично перемешивали в течение 50 мин. Водные слои отделяли и промывали ДХМ (3×10 мл). Объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бледно-желтого масла (174 мг, более 100%). Это вещество не очищали дополнительно.

ЖХМС: m/z 709/711/713 [М+Н]⁺.

Промежуточное соединение 22: 1-трет-Бутил-2-циклопентил (2R)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат синтезировали путем, показанным на схеме 8.

Стадия 1. 1-трет-Бутил-2-циклопентил (2R)-4-оксопиперидин-1,2-дикарбоксилат

(2R)-1-(трет-Бутоксикарбонил)-4-оксопиперидин-2-карбоновую кислоту (6 г, 24,7 ммоль) растворяли в ДХМ (100 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли циклопентанол (6,7 мл, 74 ммоль), EDC (7,1 г, 37 ммоль) и ДМАП (0,30 г, 2,5 ммоль). Реакционной смеси давали подогреться до КТ и перемешивали в течение 18 ч. Добавляли насыщенный раствор Na₂CO₃, и органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали ДХМ (3×30 мл), и объединенные органические слои высушивали над Na₂SO₄. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в ДХМ (градиент 0-30%), с получением соединения, указанного в заголовке (3,83 г, 97%).

ЖХМС: m/z 334 [М+Н]⁺.

Стадия 2. 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-(бензиламино)пиперидин-1,2-дикарбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-оксопиперидин-1,2-дикарбоксилат (3,82 г, 12,3 ммоль) растворяли в ДХМ (40 мл) и добавляли бензиламин (1,4 мл, 12,9 ммоль). К реакционной смеси добавляли уксусную кислоту (0,84 мл, 14,7 ммоль) и STAB (3,9 г, 18,4 ммоль), и реакционной смеси давали перемешиваться при КТ в течение 1 ч. Смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и добавляли нас. NaHCO₃ (100 мл). Водный слой экстрагировали ДХМ (2×50 мл), и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, концентрировали в вакууме и очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в ДХМ (градиент 0-35%), с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бесцветного масла (4,38 г, 84%).

ЖХМС: m/z 403,2 [М+Н]⁺.

Стадия 3. 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-(бензиламино)пиперидин-1,2-дикарбоксилат (4,38 г, 10 ммоль) растворяли в метаноле (40 мл), и загружали 10% катализатор Pd/C (1,4 г) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали под баллоном водорода в течение 72 ч для завершения реакции. Раствор фильтровали через целлит^®, и фильтраты выпаривали до сухого состояния с получением бесцветного масла (3,7 г, 100%).

ЖХМС: m/z 313[M+H]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 8.58 (2Н, br, s), 5.3-5.2 (1Н, m), 4.65-4.52 (1Н, m), 4.0-3.6 (2Н, m), 3.42-3.15 (1Н, m), 2.43-1.52 (12Н, m), 1.46 (9Н, s).

Промежуточное соединение 23: 1-трет-Бутил-2-циклопентил (2S)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2S)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат синтезировали аналогично Промежуточному соединению 22, используя (2S)-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-оксопиперидин-2-карбоновую кислоту в качестве исходного вещества в схеме 8.

ЖХМС: m/z 313[M+H]⁺.

Промежуточное соединение 24: 1-трет-Бутил 2-циклопентил (2R)-4-(метиламино)пиперидин-1,2-дикарбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-(метиламино)пиперидин-1,2-дикарбоксилат синтезировали аналогично Промежуточному соединению 22, используя метилбензиламин на стадии 2 пути, представленного на схеме 8.

ЖХМС: m/z 327 [М+Н]⁺.

Промежуточное соединение 25: Ди-трет-бутил-(2R)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат

Ди-трет-бутил-(2R)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат синтезировали аналогично описанному выше Промежуточному соединению 22, начиная с ди-трет-бутил-(2R)-4-оксопиперидин-1,2-дикарбоксилата на стадии 2 схемы 8. Синтез ди-трет-бутил-(2R)-4-оксопиперидин-1,2-дикарбоксилата показан ниже на схеме 9.

Стадия 1. Ди-трет-бутил-(2R)-4-оксопиперидин-1,2-дикарбоксилат

(2R)-1-(трет-Бутоксикарбонил)-4-оксопиперидин-2-карбоновую кислоту (10 г, 41,1 ммоль) растворяли в безводном толуоле (100 мл) и нагревали до 80°С в атмосфере азота. Затем добавляли по каплям Ν,Ν-диметилформамида ди-трет-бутилацеталь (33,4 г, 164 ммоль), и реакционной смеси давали перемешиваться при 80°С в течение 2 ч. Затем реакционную смесь охлаждали до КТ и добавляли EtOAc (150 мл) и воду (150 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (2×150 мл), и объединенные органические слои очищали колоночной флэш-хроматографией (20% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке (8,82 г, 72%).

ЖХМС: m/z 322 [M+Na]⁺.

Промежуточное соединение 26: Ди-трет-бутил-(2S)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат

Ди-трет-бутил-(2S)-4-аминопиперидин-1,2-дикарбоксилат синтезировали аналогично описанному выше Промежуточному соединению 22, начиная с ди-трет-бутил-(2S)-4-оксопиперидин-1,2-дикарбоксилата на стадии 2 схемы 8. Ди-трет-бутил-(2S)-4-оксопиперидин-1,2-дикарбоксилат синтезировали аналогично ди-трет-бутил-(2R)-4-оксопиперидин-1,2-дикарбоксилату, как показано на схеме 9.

ЖХМС: m/z 322 [M+Na]⁺,

Промежуточное соединение 27: Ди-трет-бутил-(2R)-4-(метиламино)пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Ди-трет-бутил-(2R)-4-(метиламино)пиперидин-1,2-дикарбоксилат синтезировали аналогично Промежуточному соединению 22, начиная на стадии 2 пути, представленного на схеме 8, с ди-трет-бутил-(2R)-4-оксопиперидин-1,2-дикарбоксилата, и подвергая его взаимодействию с метилбензиламином.

ЖХМС: m/z 315[M+H]⁺.

Промежуточное соединение 28: 1-трет-Бутил-2-циклопентилпиперазин-1,2-дикарбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентилпиперазин-1,2-дикарбоксилат синтезировали, используя путь, представленный на схеме 10.

Стадия 1: 4-Бензил-1-трет-бутил-2-циклопентилпиперазин-1,2,4-трикарбоксилат

4-[(Бензилокси)карбонил]-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперазин-2-карбоновую кислоту (9,96 г, 27 ммоль) растворяли в ДХМ (50 мл) и охлаждали до 0°С. Затем добавляли циклопентанол (7,4 мл, 82 ммоль), EDC (7,86 г, 41 ммоль) и ДМАП (0,33 г, 2,7 ммоль), и реакционной смеси давали подогреться до КТ, и перемешивали в течение 24 ч. Затем добавляли воду (100 мл) и ДХМ (50 мл), и слои разделяли. Водный слой повторно экстрагировали ДХМ (2×50 мл), а затем объединенные органические слои высушивали над MgSO₄ и концентрировали в вакууме. В результате очистки колоночной хроматографией (40% EtOAc/гептан) получили соединение, указанное в заголовке, в виде бесцветного масла (10,4 г, 88%).

ЖХМС: m/z 455 [M+Na]⁺.

Стадия 2. 1-трет-Бутил-2-циклопентилпиперазин-1,2-дикарбоксилат

4-Бензил-1-трет-бутил-2-циклопентилпиперазин-1,2,4-трикарбоксилат (10,4 г) растворяли в EtOAc (100 мл) и перемешивали с 10% палладием на углероде (2 г, 20% масс/масс) в атмосфере водорода при атмосферном давлении в течение 18 ч. Затем реакционную смесь фильтровали через целлит®, и растворитель удаляли в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (6,62 г, 92%).

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 5.27 (1Н, m), 4.50 (1Н, m), 3.81 (1Н, m), 3.50 (1Н, m), 2.82-3.2 (3Н, m), 2.72 (1Н, m), 1.55-1.95 (8Н, br m), 1.45 (9Н, s).

Промежуточное соединение 29: 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2S)-пиперазин-1,2-дикарбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2S)-пиперазин-1,2-дикарбоксилат синтезировали аналогично Промежуточному соединению 28, используя (2S)-4-[(бензилокси)карбонил]-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперазин-2-карбоновую кислоту в качестве исходного вещества в схеме 10.

Стадия 1. 4-Бензил-1-трет-бутил-2-циклопентил-(2S)-пиперазин-1,2,4-трикарбоксилат

(2S)-4-[(Бензилокси)карбонил]-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперазин-2-карбоновую кислоту (0,5 г, 1,37 ммоль) растворяли в диметилформамиде (7 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли циклопентанол (0,25 мл, 2,74 ммоль), EDC (0,395 г, 2,06 ммоль) и ДМАП (0,017 г, 0,14 ммоль) при перемешивании. Реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 23 ч. Реакционную смесь гасили водой (40 мл), и продукт экстрагировали в EtOAc (3×20 мл). Затем объединенные органические слои промывали водой (2×20 мл) и соляным раствором (20 мл), после чего высушивали над MgSO₄. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в гептане (градиент 0-60%), с получением соединения, указанного в заголовке (0,345 г, 58%).

ЖХМС: m/z 455 [M+Na]⁺.

Стадия 2. 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2S)-пиперазин-1,2-дикарбоксилат

4-Бензил-1-трет-бутил-2-циклопентил-(2S)-пиперазин-1,2,4-трикарбоксилат (0,35 г) растворяли в EtOAc (5 мл) и перемешивали с 10% палладием на углероде (0,069 г, 20% масс/масс) в атмосфере водорода при атмосферном давлении в течение 16,5 ч. Затем реакционную смесь фильтровали через целлит®, и растворитель удаляли в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, (0,213 г, 90%).

ЖХМС: m/z 299 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц; CD₃OD) δ млн^-1: 5.27 (1Н, br, s), 4.44-4.66 (1Н, m), 3.71-3.89 (1Н, m), 3.49 (1Н, t, J=13.0 Гц), 2.84-3.16 (3Н, m), 2.63-2.76 (1Н, m), 1.87 (2Н, br. s), 1.58-1.78 (6Н, m), 1.47 (12Н, d, J=8.7 Гц).

Промежуточное соединение 30: 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-пиперазин-1,2-дикарбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-пиперазин-1,2-дикарбоксилат синтезировали аналогично Промежуточному соединению 29, используя (2R)-4-[(бензилокси)карбонил]-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперазин-2-карбоновую кислоту в качестве исходного вещества в схеме 10.

ЖХМС: m/z 299 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц; CD₃OD) δ млн^-1: 5.27 (1Н, br, s.), 4.41-4.67 (1Н, m), 3.69-3.91 (1Н, m), 3.49 (1Н, t, J=12.6 Гц), 2.83-3.17 (3Н, m), 2.63-2.77 (1Н, m), 1.81-1.97 (2Н, m), 1.58-1.78 (6Н, m), 1.47 (12Н, d, J=8.3 Гц).

Промежуточное соединение 31: Ди-трет-бутил-пиперазин-1,2-дикарбоксилат

Ди-трет-бутил-пиперазин-1,2-дикарбоксилат синтезировали, используя путь, представленный на схеме 11.

Стадия 1. 4-Бензил-1,2-ди-трет-бутилпиперазин-1,2,4-трикарбоксилат

4-[(Бензилокси)карбонил]-1-(трет-бутоксикарбонил)пиперазин-2-карбоновую кислоту (1,0 г, 2,74 ммоль) растворяли в толуоле (10 мл) и нагревали до 80°С в атмосфере азота. Затем добавляли по каплям ДМФ ди-трет-бутилацеталь (2,6 мл, 11 ммоль), и перемешивание продолжали в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали и распределяли между EtOAc (200 мл) и водой (200 мл). Органический слой отделяли, и водный слой повторно экстрагировали EtOAc (2×100 мл). Объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, концентрировали в вакууме, и остаток очищали автоматической колоночной хроматографией (0-100% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бесцветного масла (1,08 г, 94%).

ЖХМС: m/z 443 [M+Na]⁺.

Стадия 2. Ди-трет-бутилпиперазин-1,2-дикарбоксилат

4-Бензил-1,2-ди-трет-бутилпиперазин-1,2,4-трикарбоксилат (1,08 г) растворяли в EtOAc (20 мл) и перемешивали с 10% палладием на углероде (0,22 г, 20 масс. %) в атмосфере водорода при атмосферном давлении в течение 17 ч. Затем реакционную смесь фильтровали через целлит®, и растворитель удаляли в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке (0,810 г, более 100%).

ЖХМС: m/z 287 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц; CD₃OD) δ млн^-1: 3.72-3.96 (1Н, m), 3.46-3.66 (1Н, m), 2.98-3.22 (2Н, m), 2.91 (1Н, dd, J=12.7, 4.4 Гц), 2.55-2.83 (3Н, m), 1.40-1.55 (18Н, m).

Промежуточное соединение 32: Циклопентил-L-лейцинат

Циклопентил-L-лейцинат был получен, используя методологию, описанную ниже:

К суспензии L-лейцина (5 г, 30,5 ммоль) в циклогексане (150 мл) добавляли циклопентанол (27,5 мл, 305 ммоль) и пара-толуолсульфоновую кислоту (6,33 г, 33,3 ммоль). Реакционную смесь оборудовали ловушкой Дина-Старка и нагревали до 135°С для полного растворения. Эту температуру поддерживали в течение периода 12 ч, после которого реакция была завершена. Реакционную смесь охлаждали до КТ с осаждением белого твердого вещества. Это твердое вещество собирали фильтрованием и промывали EtOAc, после чего высушивали при пониженном давлении. Требуемый продукт был выделен в виде соли тозилат (10,88 г, 85%).

ЖХМС: m/z 200 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 1.01 (6Н, t, J=5.8 Гц), 1.54-2.03 (11Η, m), 2.39 (3Н, s), 3.96 (1Н, t, J=6.5 Гц), 5.26-5.36 (1H, m), 7.25 (2Н, d, J=7.9 Гц), 7.72 (2H, d, J=8.3 Гц).

Промежуточное соединение 33: Циклопентил-2-метилаланинат

Циклопентил-2-метилаланинат был получен, используя методологию, описанную ниже:

К колбе, содержащей 2-амино-2-метилпропионовую кислоту (50 г, 0,48 моль) в циклогексане (125 мл), циклопентанол (267 мл, 2,91 моль) и пара-толуолсульфоновую кислоту (101,5 г, 0,53 моль), присоединяли ловушку Дина-Старка, и реакционную смесь нагревали до 135°С в течение 18 ч. Добавляли дополнительную порцию пара-толуолсульфоновой кислоты (34 г, 0,18 моль) и нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч, после чего реакция была завершена. Реакционную смесь наливали на охлажденный во льду ТБМЭ (1 л), и полученное в результате твердое вещество собирали фильтрованием. Это твердое вещество энергично перемешивали в диэтиловом эфире (2 л), фильтровали и высушивали в вакуумной печи с получением требуемого продукта в виде соли тозилат(161 г, 97%).

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 8.36 (3Н, s), 7.48 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.12 (2Н, d, J=8.1 Гц), 5.18 (1Н, t, J=5.7 Гц), 2.29 (3Н, s), 1.90-1.80 (2Н, m), 1.75-1.55 (6Н, m), 1.43 (6Н, s).

Промежуточное соединение 34: Циклопентил-1-аминоциклобутанкарбоксилат

Циклопентил-1-аминоциклобутанкарбоксилат синтезировали путем, показанным на схеме 12.

Стадия 1. 1-[(трет-Бутоксикарбонил)амино]циклобутанкарбоновая кислота

К раствору 1-амино-1-циклобутанкарбоновой кислоты (2,92 г, 25,4 ммоль), NaOH (3,04 г, 76,2 ммоль), ТГФ (100 мл) и воды (100 мл) при КТ добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (8,30 г, 38,1 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч. Реакционную смесь подкисляли до рН5, используя 2 Μ HCl, и смесь экстрагировали EtOAc (2×200 мл). Объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (1,05 г, 19%).

ЖХМС: m/z 238 [М+Н]⁺.

Стадия 2. Циклопентил-1-[(трет-бутоксикарбонил)амино]циклобутанкарбоксилат

К раствору 1-[(трет-бутоксикарбонил)амино]циклобутанкарбоновой кислоты (5,2 г, 24,2 ммоль), циклопентанола (7,9 мл, 96,7 ммоль) и ДМАП (2,95 г, 24,2 ммоль) в ДХМ (100 мл) добавляли порциями EDC (5,54 г, 29,0 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (200 мл), и смесь промывали 0,5 Μ HCl (2×150 мл), нас. NaHCO₃ (2×150 мл) и соляным раствором (100 мл). Органический слой отделяли, высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в гептане (градиент 0-50%), с получением соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (4,04 г, 59%).

ЖХМС: m/z 589 [M+Na]⁺.

Стадия 3. Циклопентил-1-аминоциклобутанкарбоксилат

Циклопентил-1-[(трет-бутоксикарбонил)амино]циклобутанкарбоксилат (1,03 г, 3,63 ммоль) растворяли в 2 н. HCl в эфире (25 мл) и перемешивали при КТ в течение 24 ч. Добавляли дополнительное количество 2 н. HCl в эфире (6 мл), и реакционную смесь перемешивали еще в течение 24 ч. Растворитель концентрировали в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (739 мг, 92%).

ЖХМС: m/z 184,2 [М+Н]⁺.

Промежуточное соединение 35: Циклопентил-О-трет-бутил-L-серинат

Циклопентил-О-трет-бутил-L-серинат синтезировали путем, показанным на схеме 13.

Стадия 1. Циклопентил-N-[(бензилокси)карбонил]-O-трет-бутил-L-серинат

N-[(Бензилокси)карбонил]-O-трет-бутил-L-серин (37,4 г, 0,13 моль), циклопентанол (45,9 мл, 0,50 моль), EDC (29,1 г, 0,15 моль) и ДМАП (370 мг, 3,0 ммоль) перемешивали в ДХМ (370 мл) при КТ в течение 18 ч. Добавляли дополнительное количество циклопентанола (23 мл, 0,25 моль) и ДМАП (1,0 г, 8,2 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 6 ч, затем при 30°С в течение 16 ч. Добавляли воду (500 мл), и органический слой отделяли и концентрировали в вакууме. Полученный в результате остаток очищали флэш-хроматографией без растворителей с получением соединения, указанного в заголовке (32,4 г, 69%).

¹Н ЯМР (300 Гц, CDCl₃) δ млн^-1: 7.30-7.46 (5Н, m), 5.63 (1Н, d, J=8.7 Гц), 5.19-5.30 (1Н, m), 5.15 (2Н, s), 4.42 (1Н, dt, J=9.0, 3.2 Гц), 3.82 (1Н, dd, J=8.7, 2.8 Гц), 3.57 (1Н, dd, J=8.7, 2.8 Гц), 1.51-1.96 (8Н, m), 1.14 (9Н, s).

Стадия 2. Циклопентил-О-трет-бутил-L серинат

К раствору циклопентил-N-[(бензилокси)карбонил]-O-трет-бутил-L-серината (32,4 г, 94,4 ммоль) в EtOAc (350 мл) добавляли 10% палладий на углероде в качестве катализатора (1,7 г, 5 масс. %) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 16 ч в атмосфере водорода. Реакционную смесь фильтровали через целлит®, и фильтрационный кек промывали EtOAc. Растворитель концентрировали в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке (22,3 г, более 100%).

¹Н ЯМР (300 Гц, CDCl₃) δ млн^-1: 5.15 (1Н, m), 3.37-3.60 (3Н, m), 1.41-1.89 (10Н, m), 1.09 (9Н, s).

ПРИМЕРЫ

Пример 1: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали, используя путь, представленный на схеме 14.

Стадия 1. 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Промежуточное соединение 12 (100 мг, 0,26 ммоль) растворяли в ДМФ (5 мл) и добавляли EDC (59 мг, 0,31 ммоль) и HOBt (42 мг, 0,31 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин, после чего добавляли Промежуточное соединение 22 (96 мг, 0,31 ммоль). Реакционной смеси давали перемешиваться в течение 18 часов при КТ. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали 2 н. NaOH (20 мл), водой (2×20 мл), соляным раствором (20 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали колоночной хроматографией (80% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого твердого вещества (95 мг, 54%).

ЖХМС: m/z 683/685 [М+Н]⁺.

Стадия 2. Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (95 мг, 0,14 ммоль) растворяли в ДХМ (20 мл) и добавляли 2 Μ HCl в диэтиловом эфире (2 мл). Полученную в результате суспензию перемешивали при КТ в течение 18 часов. Растворитель удаляли в вакууме, и сырой продукт растворяли в Na₂CO₃ (20 мл), и продукт экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали соляным раствором (20 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желтого масла, которое растворяли в смеси 1:4 MeCN/вода (10 мл) и лиофилизировали с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого твердого вещества (63 мг, 78%).

ЖХМС: чистота 95%, m/z 583/585 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 8.06 (2Н, d, J=8.5 Гц), 7.88 (2Н, d, J=8.5 Гц), 7.81 (1Н, s), 7.42 (2Н, d, J=7.7 Гц), 7.35-7.29 (1Н, m), 5.26-5.21 (1Н, m), 4.15-4.04 (1Н, m), 3.50-3.45 (1Н, m), 3.24-3.18 (1Н, m), 2.76 (1Н, td, J=2.5, 12.6 Гц), 2.34 (1Н, d, J=12.2 Гц), 1.98-1.41 (11Н, m).

Пример 2: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным

Примеру 1, используя Промежуточное соединение 24 на стадии 1 пути, показанного на схеме 14.

ЖХМС: чистота 100%, m/z 597/599 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 8.04 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.92 (1Н, s), 7.46 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.39-7.36 (2Н, m), 7.25-7.19 (2Н, m), 5.23 (1Н, br s), 5.05 (2Н, d, J=5.5 Гц), 4.51 (1Η, t, J=5.4 Гц), 4.33 (2H, br s), 3.28 (1Η, br s), 2.90 (4H, br s), 1.90-1.60 (11H, m).

Пример 3: Циклопентил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)пиперазин-2-карбоксилат

Циклопентил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)пиперазин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 1, используя Промежуточное соединение 28 на стадии 1 пути, показанного на схеме 14, с очисткой препаративной ВЭЖХ.

ЖХМС: чистота 100%, m/z 569/571 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 8.03 (2Н, d, J=8.2 Гц), 7.92 (1Н, s), 7.48 (2Н, d, J=8.2 Гц), 7.38-7.35 (2Н, m), 7.22 (1Н, dd, J=7.4, 8.7 Гц), 5.24 (1Н, br s), 5.04 (2Н, d, J=5.5 Гц), 4.68 (1Н, br, s), 4.56 (2Н, br s), 3.53-3.31 (3Н, m), 3.14-3.10 (1H, m), 2.84 (1H, br s), 2.18-1.58 (10H, m).

Пример 4: трет-Бутил (2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали путем, показанным на схеме 15.

Стадия 1. Ди-трет-бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Промежуточное соединение 12 (100 мг, 0,26 ммоль) растворяли в ДМФ (5 мл) и добавляли EDC (59 мг, 0,31 ммоль) и HOBt (42 мг, 0,31 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин, после чего добавляли Промежуточное соединение 25 (96 мг, 0,31 ммоль). Реакционной смеси давали перемешиваться в течение 18 часов при КТ. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали 2 н. NaOH (20 мл), водой (2×20 мл), соляным раствором (20 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали колоночной хроматографией (80% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого масла (153 мг, 89%).

ЖХМС: m/z 671/673 [М+Н]⁺.

Стадия 2. трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Ди-трет-бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (153 мг, 0,23 ммоль) растворяли в диоксане (5 мл) и охлаждали до 0°С, после чего добавляли 4 Μ HCl в диоксане (20 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Реакционную смесь подщелачивали до рН12, используя 2 н. NaOH, и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали соляным раствором (20 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желтого твердого вещества, которое очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде беловатого твердого вещества (50 мг, 38%).

ЖХМС: чистота 98%, m/z 571/573 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 8.06 (2Н, d, J=8.5 Гц), 7.97 (1Н, s), 7.82 (2Н, d, J=8.5 Гц), 7.36-7.33 (2Н, m), 7.19 (1Н, dd, J=7.4, 8.6 Гц), 6.13 (1Н, d, J=8.1 Гц), 5.05 (2Н, d, J=5.5 Гц), 4.61 (1Н, t, J=5.5 Гц), 4.41 (2Н, br s), 4.23-4.11 (1Н, m), 3.39 (1Н, dd, J=2.7, 11.0 Гц), 3.26-3.19 (1Н, m), 2.83-2.74 (1Н, m), 2.44 (1Н, d, J=12.4 Гц), 2.07-2.01 (1Н, m), 1.47 (9Н, s), 1.45-1.36 (2Н, m).

Пример 5: трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)(метил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)(метил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 4, используя Промежуточное соединение 27 на стадии 1 пути, показанного на схеме 15.

ЖХМС: чистота 96%, m/z 585/587 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 8.04 (2Н, d, J=8.3 Гц), 7.96 (1Н, s), 7.46 (2Н, d, J=7.9 Гц), 7.38-7.36 (2Н, m), 7.22 (1Н, dd, J=7.4, 8.7 Гц), 5.05 (2Н, d, J=5.5 Гц), 4.58 (1Н, t, J=5.5 Гц), 4.38 (2Н, br s), 3.26 (2Н, br s), 2.99-2.91 (4Н, m), 2.19-1.98 (1Н, m), 1.76 (2Н, под пиком H₂O), 1.49 (9Н, s).

Пример 6: трет-Бутил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)пиперазин-2-карбоксилат

трет-Бутил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)пиперазин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 4, используя Промежуточное соединение 31 на стадии 1 пути, показанного на схеме 15.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 557/559 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 8.03 (2Н, d, J=8.2 Гц), 7.94 (1Н, s), 7.48 (2Н, d, J=8.2 Гц), 7.36-7.34 (2Н, m), 7.20 (1Н, dd, J=7.4, 8.9 Гц), 5.03 (2Н, d, J=5.3 Гц), 4.61 (1Н, t, J=5.3 Гц), 4.43 (2Н, br s), 3.44-3.37 (2Н, m), 3.33-3.26 (1Н, m), 3.12-3.08 (1Н, m), 2.81 (1Н, br s), 2.12 (2Н, br s), 1.47 (9Н, s).

Пример 7: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали, используя путь, представленный на схеме 16.

Стадия 1: 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Промежуточное соединение 14 (150 мг, 0,40 ммоль) и Промежуточное соединение 22 (138 мг, 0,44 ммоль) растворяли в ДХЭ (15 мл) и перемешивали при КТ в течение 2 ч. Добавляли STAB (170 мг, 0,80 ммоль), и реакционную смесь перемешивали еще в течение 18 ч. Реакционную смесь гасили добавлением нас. Na₂CO₃ (20 мл) и энергично перемешивали в течение 20 мин. Водный слой отделяли и дополнительно экстрагировали ДХМ (2×20 мл), и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали колоночной хроматографией (80% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде оранжевого масла (168 мг, 62%).

ЖХМС: m/z 669/671 [М+Н]⁺.

Стадия 2: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (168 мг, 0,25 ммоль) растворяли в ДХМ (20 мл) и добавляли 2 Μ HCl в диэтиловом эфире (5 мл). Смесь перемешивали при КТ в течение 18 часов. Растворитель удаляли в вакууме, и неочищенный продукт растворяли в Na₂CO₃ (20 мл), и продукт экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали соляным раствором (20 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желтого масла, которое очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде беловатого твердого вещества (83 мг, 60%).

ЖХМС: чистота 100%, m/z 569/571 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 7.95 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.72(1Η, s), 7.48-7.41 (4Н, m), 7.35-7.30 (1Н, m), 5.23-5.18 (1Н, m), 5.01 (2Н, s), 3.91 (2Н, br s), 3.18-3.14 (1Н, m), 2.81 (1Н, br s), 2.67-2.59 (1H, m), 2.31 (1H, d, J=12.2 Гц), 2.00 (1H, d, J=12.8 Гц), 1.93-1.86 (2H, m), 1.85-1.60 (6H, m), 1.39-1.21 (2H, m), (1H отсутствует; под пиком МеОН).

Пример 8: Циклопентил-(2S)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2S)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 7, используя Промежуточное соединение 23 на стадии 1 пути, показанного на схеме 16.

ЖХМС: чистота 95%, m/z 569/571 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 7.92 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.91 (1Н, s), 7.41-7.33 (4Н, m), 7.19 (1Н, dd, J=7.3, 8.7 Гц), 5.24-5.18 (1Н, m), 5.04 (2Н, d, J=5.5 Гц), 4.51 (1Н, t, J=5.3 Гц), 4.35 (2Н, br s), 3.90 (2Н, s), 3.29 (1Η, dd, J=2.8, 11.5 Гц), 3.24-3.18 (1Η, m), 2.75-2.58 (2Η, m), 2.29 (1Н, d, J=13.2 Гц), 2.06-1.56 (9Н, m), 1.33-1.20 (4Н, m).

Пример 9: Циклопентил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат

Циклопентил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 7, используя Промежуточное соединение 28 на стадии 1 пути, показанного на схеме 16.

ЖХМС: чистота 99%, m/z 555/557 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 7.96-7.91 (3Н, m), 7.39-7.32 (4Н, m), 7.17 (1Н, dd, J=7.4, 8.6 Гц), 5.21 (1Н, t, J=5.8 Гц), 5.03 (2Н, d, J=5.3 Гц), 4.57 (1Н, t, J=5.3 Гц), 4.37 (2Н, br s), 3.64-3.47 (3Н, m), 3.11-3.05 (1Н, m), 2.92-2.80 (2Н, m), 2.61-2.57 (1Н, m), 2.46 (1Н, t, J=8.9 Гц), 2.28 (1Н, t, J=8.4 Гц), 2.04 (1Н, br s), 1.90-1.81 (2Н, m), 1.72-1.57 (6Н, m).

Пример 10: Циклопентил-(2S)-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино] пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2S)-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 7, используя Промежуточное соединение 29 на стадии 1 пути, показанного на схеме 16.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 555/557/559 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.87 (2Н, d, J=7.9 Гц), 7.79 (1Н, s), 7.56 (1Н, s), 7.53 (1Н, s), 7.37-7.44 (1Н, m), 7.28 (2Н, d, J=8.1 Гц), 6.32 (1Н, t, J=3.8 Гц), 6.18 (2Н, s), 5.07 (1Н, t, J=5.7 Гц), 4.82 (2Н, d, J=3.8 Гц), 3.48-3.56 (1Н, m), 3.36-3.42 (2Н, m), 2.89-2.99 (1Н, m), 2.53-2.69 (3Н, m), 2.32-2.45 (2Н, m), 2.19-2.30 (1Н, m), 1.72-1.87 (2Н, m), 1.44-1.63 (6Н, m).

Пример 11: Циклопентил-(2R)-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 7, используя Промежуточное соединение 30 на стадии 1 пути, показанного на схеме 16.

ЖХМС: чистота 100%, m/z 555/557/559 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.86 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.78 (1Н, s), 7.49-7.56 (2Н, m), 7.35-7.44 (1Н, m), 7.28 (2Н, d, J=8.1 Гц), 6.26 (1Н, t, J=4.0 Гц), 6.08 (2Н, s), 5.09 (1Н, t, J=5.8 Гц), 4.85 (2Н, d, J=4.1 Гц), 3.36-3.58 (4Н, m), 2.92-3.03 (1Н, m), 2.60-2.75 (2Н, m), 2.42 (2Н, dd, J=10.3, 7.1 Гц), 2.22-2.33 (1Н, m), 1.73-1.90 (2Н, m), 1.43-1.68 (6Н, m).

Пример 12: Циклопентил-N-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-лейцинат

Циклопентил-N-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-лейцинат синтезировали согласно стадии 1 пути, представленного на схеме 16, используя свободное основание Промежуточного соединения 32.

ЖХМС: чистота 100%, m/z 556/558 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 7.91 (2Н, d, J=8.3 Гц), 7.71 (1Н, s), 7.47-7.44 (2Н, m), 7.38-7.29 (3Н, m), 5.22-5.16 (1Н, m), 5.01 (2Н, s), 3.81 (1Н, d, J=13.0 Гц), 3.68 (1Н, d, J=13.0 Гц), 3.28 (1Н, d, J=7.4 Гц), 1.94-1.82 (2Н, m), 1.79-1.64 (7Н, m), 1.53-1.48 (2Н, m), 0.94 (3Н, d, J=6.6 Гц), 0.89 (3Н, d, J=6.6 Гц).

Пример 13: трет-Бутил-N-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-лейцинат

трет-Бутил-N-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-лейцинат синтезировали согласно стадии 1 пути, представленного на схеме 16, используя трет-бутиловый эфир L-лейцина в качестве реагента.

ЖХМС: чистота 100%, m/z 544/546 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 7.90 (2Н, d, J=8.3 Гц), 7.69 (1Н, s), 7.45-7.43 (2Н, m), 7.38-7.27 (3Н, m), 5.00 (2Н, s), 3.80 (1Н, d, J=12.9 Гц), 3.65 (1Н, d, J=12.9 Гц), 3.20 (1Н, t, J=7.3 Гц), 1.78-1.69 (1Н, m), 1.50 (9Н, s), 1.48-1.42 (2Н, m), 0.93 (3Н, d, J=6.6 Гц), 0.88 (3Н, d, J=6.6 Гц).

Пример 14: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дифторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилата диформиат

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дифторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 7, начиная с Промежуточного соединения 15, и подвергая его взаимодействию с Промежуточным соединением 22 на стадии 1 пути, показанного на схеме 16. Соединение было выделено в виде соли формиат после препаративной ВЭЖХ.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 537 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 8.2 (2Н, s), 7.9-7.75 (2Н, m), 7.7 (1Н, s), 7.4-7.15 (3Н, m), 7.12-6.95 (2Н, m), 6.65-6.5 (1Н, m), 6.14 (2Н, s), 5.1-5.0 (1Н, m), 4.60 (2Н, m), 3.7 (2Н, m), 3,3-1.9 (5Н, m), 1.70-1.65 (3Н, m), 1.60-1.35 (6Н, m).

Пример 15: Циклопентил-N-(4-{5-амино-6-[(2,6-дифторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-лейцинат

Циклопентил-N-(4-{5-амино-6-[(2,6-дифторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-лейцинат синтезировали способом, аналогичным Примеру 7, начиная с Промежуточного соединения 15, и подвергая его взаимодействию со свободным основанием Промежуточного соединения 32 согласно стадии 1 пути, представленного на схеме 16.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 524 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.84 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.77 (1Н, s), 7.47-7.32 (1Н, m), 7.28 (2Н, d, J=8.3 Гц), 7.10 (2Н, t, J=8.0 Гц), 6.63 (1Н, t, J=5.0 Гц), 6.16 (2Н, s), 5.11 (1Н, t, J=5.8 Гц), 4.68 (2Н, d, J=4.7 Гц), 3.82-3.4 (2Н, m), 3.2-3.05 (1Н, m), 2.40-2.25 (1Н, m), 1.90-1.78 (2Н, m), 1.77-1.50 (7Н, m), 1.49-1.30 (2Н, m), 0.83 (6Н, d, J=2.2 Гц).

Пример 16: трет-Бутил-N-(4-{5-амино-6-[(2,6-дифторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-лейцинат

трет-Бутил-N-(4-{5-амино-6-[(2,6-дифторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-лейцинат синтезировали способом, аналогичным Примеру 7, начиная с Промежуточного соединения 15, и подвергая его взаимодействию с трет-бутиловым эфиром L-лейцина согласно стадии 1 пути, представленного на схеме 16.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 512 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.85 (2Н, d, J=8.3 Гц), 7.77 (1Н, s), 7.4-7.3 (1Н, m), 7.29 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.2-7.0 (2Н, m), 6.7-6.6 (1Н, m), 6.16 (2Н, s), 4.68 (2Н, d, J=4.7 Гц), 3.9-3.5 (2Н, m), 3.12-3.0 (1Н, m), 2.3-2.1 (1Н, m), 1.8-1.7 (1Н, m), 1.44 (9Н, s), 1.4-1.3 (2Н, m), 0.84 (6Н, d, J=2.2 Гц).

Пример 17: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2-хлор-6-фторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2-хлор-6-фторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 7, начиная с Промежуточного соединения 16, и подвергая его взаимодействию с Промежуточным соединением 22 на стадии 1 пути, показанного на схеме 16.

ЖХМС: m/z 553 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.83 (2Н, d, J=8.3 Гц), 7.76 (1Н, s), 7.46-7.2 (5Н, m), 6.55-6.4 (1Н, m), 6.15 (2Н, s), 5.12-5.0 (1Н, m), 4.8-4.65 (2Н, m), 3.72 (2Н, br, s), 3.2-2.86 (2Н, m), 2.6-2.3 (2Н, m), 2.1-1.9 (3Н, m), 1.85-1.70 (3Н, m), 1.65-1.45 (6Н, m), 1.15-0.91 (2Н, m).

Пример 18: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-хлорбензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-хлорбензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 7, начиная с Промежуточного соединения 17, и подвергая его взаимодействию с Промежуточным соединением 22 на стадии 1 пути, показанного на схеме 16.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 603/605 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.95-7.88 (1Н, m), 7.87-7.79 (2Н, m), 7.60-7.48 (3Н, m), 7.46-7.35 (1Н, m), 6.48-6.38 (1Н, s), 6.29 (2Н, s), 5.13-5.0 (1Н, m), 4.82 (2Н, d, J=4.3 Гц), 3.81 (2Н, s), 3.30 (1Н, m), 3.12 (1Н, m), 2.95 (1Н, m), 2.65-2.4 (2Н, m), 2.08 (2Н, m), 1.79 (3Н, m), 1.70-1.45 (6Н, m), 1.05 (2Н, m).

Пример 19: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-метилбензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-метилбензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 7, начиная с Промежуточного соединения 18, и подвергая его взаимодействию с Промежуточным соединением 22 на стадии 1 пути, показанного на схеме 16.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 583/585 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.77 (1Н, s), 7.73-7.63 (2Н, m), 7.60-7.48 (2Н, m), 7.45-7.2 (2Н, m), 6.4-6.3 (1Н, s), 6.14 (2Н, s), 5.15-5.0 (1Н, m), 4.82 (2Н, d, J=4.0 Гц), 3.70 (2Н, s), 3.45-2.9 (4Н, m), 2.6-2.32 (3Н, m), 2.34 (3Н, s), 2.1-2.0 (1Н, m), 1.90-1.75 (3Н, m), 1.74-1.40 (5Н, m,) 1.15-0.95 (2Н, m).

Пример 20: Циклопентил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-этилбензил)пиперазин-2-карбоксилат

Циклопентил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-этилбензил)пиперазин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 7, начиная с Промежуточного соединения 19, и подвергая его взаимодействию с Промежуточным соединением 28 на стадии 1 пути, показанного на схеме 16.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 583/585 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.77 (1Н, s), 7.76-7.74 (1Н, m), 7.70-7.64 (1Н, m), 7.60-7.50 (2Н, m), 7.48-7.35 (1Н, m), 7.24-7.18 (1Н, m), 6.40-6.30 (1Н, m), 6.17 (2Н, s), 5.10-5.00 (1Н, m), 4.83 (2Н, d, J=1.4 Гц), 3.50-3.40 (2Н, m), 3.39-3.25 (2Н, m под пиком воды), 2.99-2.86 (1Н, m), 2.71 (2Н, q, J=2.5 Гц), 2.65-2.40 (3Н, m под пиком ДМСО), 2.38-2.22 (2Н, m), 1.90-1.68 (2Н, m), 1.67-1.40 (6Н, m), 1.19 (3Н, t, J=2.5 Гц).

Пример 21: трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали путем, показанным на схеме 17.

Стадия 1. Ди-трет-бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Промежуточное соединение 14 (100 мг, 0,27 ммоль) и Промежуточное соединение 25 (89 мг, 0,29 ммоль) растворяли в ДХЭ (10 мл) и перемешивали при КТ в течение 2 ч. Добавляли STAB (114 мг, 0,29 ммоль), и реакционную смесь перемешивали еще в течение 18 ч. Реакционную смесь гасили добавлением нас. Na₂CO₃ (20 мл) и энергично перемешивали в течение 20 мин. Водный слой отделяли и дополнительно экстрагировали ДХМ (2×20 мл), и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали колоночной хроматографией (80% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде оранжевого масла (143 мг, 81%).

ЖХМС: m/z 657/659 [М+Н]⁺.

Стадия 2. трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Ди-трет-бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (143 мг, 0,22 ммоль) растворяли в диоксане (5 мл) и охлаждали до 0°С, после чего добавляли 4 Μ HCl в диоксане (20 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Реакционную смесь подщелачивали до рН12, используя 2 н. NaOH, и экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные органические слои промывали соляным раствором (20 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желтого масла, которое очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бледно-желтого твердого вещества (37 мг, 31%).

ЖХМС: чистота 100%, m/z 557/559 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 7.96-7.91 (3Н, m), 7.41-7.33 (4Н, m), 7.21-7.16 (1Н, m), 5.04 (2Н, d, J=5.5 Гц), 4.52 (1Н, t, J=5.5 Гц), 4.31 (2Н, br s), 3.90 (2Н, s), 3.25-3.17 (2Н, m), 2.72-2.57 (2Н, m), 2.30 (1Н, d, J=12.2 Гц), 1.94 (1Н, d, J=11.9 Гц), 1.73 (2Н, br, s), 1.47 (9Н, s), 1.29-1.17 (2Н, m).

Пример 22: трет-Бутил-(2S)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

трет-Бутил-(2S)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 21, используя Промежуточное соединение 26 на стадии 1 пути, показанного на схеме 17.

ЖХМС: чистота 96%, m/z 557/559 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 7.96 (2Н, d, J=8.3 Гц), 7.93 (1Н, s), 7.45-7.35 (4Н, m), 7.21 (1Н, dd, J=7.3, 8.7 Гц), 5.04 (2Н, d, J=5.5 Гц), 4.43 (1Н, t, J=5.5 Гц), 4.22 (2Н, br, s), 3.91 (2Н, s), 3.25-3.17 (2H, m), 2.75-2.58 (2H, m), 2.31 (1H, d, J=12.4 Гц), 1.96(1Η, d, J=12.4 Гц), 1.47 (9H, s), 1.35-1.21 (2H, s).

Пример 23: трет-Бутил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат

трет-Бутил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 21, используя Промежуточное соединение 31, на стадии 1 пути, показанного на схеме 17.

ЖХМС: чистота 100%, m/z 543/545 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 7.96-7.93 (3Н, m), 7.41-7.37 (4Н, m), 7.20 (1Н, dd, J=7.3, 8.7 Гц), 5.04 (2Н, d, J=5.7 Гц), 4.45 (1Н, t, J=5.5 Гц), 4.25 (2Н, br, s), 3.64 (1Н, d, J=13.2 Гц), 3.51-3.46 (2Н, m), 3.11-3.05 (1Н, m), 2.93-2.82 (2Н, m), 2.61 (1Н, d, J=11.3 Гц), 2.42 (1Н, t, J=9.1 Гц), 2.26 (1Н, t, J=8.6 Гц), 1.94 (1Н, br, s), 1.46 (9Н, s).

Пример 24: трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дифторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дифторбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 21, начиная с Промежуточного соединения 15, и подвергая его взаимодействию с Промежуточным соединением 25 на стадии 1 пути, показанного на схеме 17.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 525 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.9-7.8 (2Н, m), 7.76 (1Н, s), 7.47-7.26 (3Н, m), 7.18-7.0 (2Н, m), 6.62 (1Н, t, J=4.9 Гц), 6.14 (2Н, s), 4.68 (2Н, d, J=4.7 Гц), 3.73 (2Н, s), 3.2-2.85 (2Н, m), 2.6-2.25 (2Н, m), 2.15-2.00 (1Н, m), 1.99-1.85 (1Н, m), 1.80-1.60 (1Н, m), 1.40 (9Н, s), 1.14-0.90 (2Н, m).

Пример 25: трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-хлорбензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-хлорбензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 21, начиная с Промежуточного соединения 17, и подвергая его взаимодействию с Промежуточным соединением 25 на стадии 1 пути, показанного на схеме 17.

ЖХМС: чистота 96%, m/z 591/593 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.98-7.88 (1Н, m), 7.87-7.75 (2Н, m), 7.58-7.48 (3Н, m), 7.45-7.35 (1Н, m), 6.48-6.4 (1Н, m), 6.29 (2Н, s), 4.82 (2Н, d, J=4.0 Гц), 3.82 (2Н, s), 3.32-3.26 (1Н, m), 3.1-2.9 (2Н, m), 2.5-2.4 (2Н, m), 2.15-2.00 (1Н, m), 1.99-1.85 (2Н, m), 1.80-1.6 (1Н, m), 1.39 (9Н, s), 1.25-0.90 (2Н, m).

Пример 26: трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-метилбензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-метилбензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 21, начиная с Промежуточного соединения 18, и подвергая его взаимодействию с Промежуточным соединением 25 на стадии 1 пути, показанного на схеме 17.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 571/573 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.84-7.74 (1Н, m), 7.7-7.62 (2Н, m), 7.59-7.45 (2Н, m), 7.44-7.25 (2Н, m), 6.41-6.24 (1Н, m), 6.22-6.04 (2Н, m), 4.91-4.7 (2Н, m), 3.79-3.63 (2Н, m), 3.6-3.2 (4Н, m), 3.15-2.8 (2Н, m), 2.5-2.4 (1Н, m), 2.35 (3Н, s), 2.2-2.0 (1Н, m), 1.95-1.60 (1Н, m), 1.39 (9Н, s), 1.15-0.9 (1Н, m).

Пример 27: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали путем, показанным на схеме 18.

Стадия 1: 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Промежуточное соединение 14 (150 мг, 0,40 ммоль) и Промежуточное соединение 22 (138 мг, 0,44 ммоль) растворяли в ДХЭ (15 мл) и перемешивали при КТ в течение 2 ч. Добавляли STAB (170 мг, 0,80 ммоль), и реакционную смесь перемешивали еще в течение 18 ч. Реакционную смесь гасили добавлением нас. Na₂CO₃ (20 мл) и энергично перемешивали в течение 20 мин. Водный слой отделяли и дополнительно экстрагировали ДХМ (2×20 мл), и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали колоночной хроматографией (80% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде оранжевого масла (168 мг, 62%).

ЖХМС: m/z 669/671 [М+Н]⁺.

Стадия 2: 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

К раствору 1-трет-бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилата (168 мг, 0,28 ммоль) в безводном MeCN (4 мл) добавляли ацетальдегид (37 мг, 0,85 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при КТ в атмосфере азота в течение 10 мин с последующим добавлением уксусной кислоты (34 мг, 0,56 ммоль) и STAB (132 мг, 0,62 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа, а затем гасили добавлением нас. NaHCO₃ (10 мл). Водный слой экстрагировали ДХМ (3×20 мл), и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Продукт был получен в результате колоночной хроматографии (50% EtOAc/гептан, затем 70% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого твердого вещества (77 мг, 39%).

ЖХМС: m/z 697/698/699/700/701 [М+Н]⁺.

Стадия 3: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (77 мг, 0,11 ммоль) перемешивали в 2 Μ HCl в диэтиловом эфире (5 мл) при КТ в течение 24 часов. Растворитель удаляли в вакууме, и неочищенное вещество очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде беловатого твердого вещества (32 мг, 49%).

ЖХМС: чистота 100%, m/z 597/598/599/600 [М+Н]⁺

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.85 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.78 (1Н, s), 7.49-7.59 (2Н, m), 7.37-7.45 (1Н, m), 7.33 (2Н, d, J=8.1 Гц), 6.27-6.36 (1Н, m), 6.15 (2Н, s), 5.06 (1Н, t, J=5.7 Гц), 4.82 (2Н, d, J=3.8 Гц), 3.59 (2Н, s), 3.13 (1Н, d, J=10.9 Гц), 3.00 (1Н, d, J=12.2 Гц), 2.66 (1Н, t, J=11.7 Гц), 2.34-2.47 (2Н, m), 2.03 (11Н, br, s), 1.16-1.41 (2Н, m), 0.95 (3Н, t, J=6.9 Гц).

Пример 28: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(метил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(метил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали путем, показанным на схеме 19.

Стадия 1: 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Промежуточное соединение 14 (150 мг, 0,40 ммоль) и Промежуточное соединение 22 (138 мг, 0,44 ммоль) растворяли в ДХЭ (15 мл) и перемешивали при КТ в течение 2 ч. Добавляли STAB (170 мг, 0,80 ммоль), и реакционную смесь перемешивали еще в течение 18 ч. Реакционную смесь гасили добавлением нас. Na₂CO₃ (20 мл) и энергично перемешивали в течение 20 мин. Водный слой отделяли и дополнительно экстрагировали ДХМ (2×20 мл), и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали колоночной хроматографией (80% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде оранжевого масла (168 мг, 62%).

ЖХМС: m/z 669/671 [М+Н]⁺.

Стадия 2: 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(метил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

К раствору 1-трет-бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилата (150 мг, 0,22 ммоль) в MeCN (4 мл) добавляли 37% водный формальдегид (16,8 мкл, 0,22 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 1,5 ч с последующим добавлением STAB (71 мг, 0,34 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч с последующим дополнительным добавлением 37% водного формальдегида (8,4 мкл, 0,11 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч, а затем гасили добавлением нас. NaHCO₃ (20 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (4×20 мл), и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в гептане (градиент 0-80%), с получением соединения, указанного в заголовке, содержащего некоторые примеси, в виде желтого твердого вещества (125 мг, 83%).

ЖХМС: m/z 683/684/685 [М+Н]⁺.

Стадия 3: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(метил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(метил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (125 мг, 0,18 ммоль) перемешивали в 2 Μ HCl в диэтиловом эфире (7 мл) при КТ в течение 24 часов. Растворитель удаляли в вакууме, и неочищенное вещество очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде беловатого твердого вещества (13 мг, 12%).

ЖХМС: чистота 100%, m/z 583/585/587 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.86 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.79 (1Н, s), 7.50-7.58 (2Н, m), 7.36-7.46 (1Н, m), 7.30 (2Н, d, J=8.1 Гц), 6.28-6.35 (1Н, m), 6.17 (2Н, br, s), 5.03-5.12 (1Н, m), 4.82 (2Н, d, J=3.6 Гц), 3.56 (2Н, s), 3.10-3.20 (1Н, m), 2.96-3.08 (1Н, m), 2.54-2.66 (1Н, m), 2.33-2.45 (1Н, m), 2.12 (3Н, s), 1.90-2.07 (2Н, m), 1.74-1.88 (2Н, m), 1.46-1.71 (7Н, m), 1.19-1.44 (2Н, m).

Пример 29: Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(2-метилпропил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(2-метилпропил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали путем, показанным на схеме 20.

Стадия 1: Ди-трет-бутил-{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-(4-формилфенил)пиразин-2-ил}имидодикарбонат

К раствору Промежуточного соединения 4 (569 мг, 0,88 ммоль) в ДМЭ (5,5 мл) добавляли Промежуточное соединение 6 (305 мг, 1,3 ммоль) и 2 н. Na₂CO₃ (1,1 мл, 2,2 ммоль) и раствор дегазировали путем барботирования азота через реакционную смесь. Добавляли дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II) (62 мг, 0,088 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 80°С в атмосфере азота в течение 18 ч для завершения реакции. Реакционную смесь фильтровали через целлит®, и фильтрационный кек промывали EtOAc (100 мл). Объединенные фильтраты промывали водой (30 мл), соляным раствором (30 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме, после чего очищали колоночной хроматографией (20% - 30% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бесцветного масла (0,513 г, 87%).

ЖХМС: m/z 695/697/699 [M+Na]⁺.

Стадия 2: 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Ди-трет-бутил-{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-(4-формилфенил)пиразин-2-ил}имидодикарбонат (250 мг, 0,37 ммоль) и Промежуточное соединение 22 (128 мг, 0,41 ммоль) растворяли в ДХЭ (6 мл) и перемешивали при КТ в атмосфере азота в течение 1 ч. Добавляли STAB (157 мг, 0,74 ммоль), и реакционную смесь перемешивали еще в течение 18 ч. Реакционную смесь гасили добавлением нас. Na₂CO₃ (10 мл) и ДХМ (10 мл). Водный слой отделяли и дополнительно экстрагировали ДХМ (3×20 мл), и объединенные органические слои were высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали колоночной хроматографией (40% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде оранжевого масла (252 мг, 70%).

ЖХМС: m/z 969/970/971 [М+Н]⁺.

Стадия 3: 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(2-метилпропил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил (2R)-4-[(4-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (80 мг, 0,08 ммоль), изобутиральдегид (113 мкл, 1,20 ммоль) и уксусную кислоту (94 мкл, 1,6 ммоль) растворяли в ДХЭ (3 мл) и перемешивали при КТ в атмосфере азота в течение 1 ч. Добавляли STAB (35 мг, 0,33 ммоль), и реакционную смесь перемешивали 2,5 ч. Добавляли дополнительное количество изобутиральдегида (75 мкл, 0,8 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч, после чего добавляли дополнительное количество STAB (35 мг, 0,33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч, а затем гасили нас. NaHCO₃ (10 мл) и ДХМ (10 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали ДХМ (3×10 мл). Объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в гептане (градиент 0-30%), с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бесцветного масла (70 мг, 83%).

ЖХМС: m/z 1025/1027/1029 [М+Н]⁺.

Стадия 4: Циклопентил-(2R)-4-[ацетил(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил (2R)-4-[(4-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(2-метилпропил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (106 мг, 0,10 ммоль) перемешивали в диоксане (2 мл) и добавляли 4 Μ HCl в диоксане (3 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч до завершения. Растворитель удаляли в вакууме с получением желтого твердого вещества, которое очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде беловатого твердого вещества (16 мг, 26%).

ЖХМС: чистота 100%, m/z 625/627/629 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1 7.86 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.79 (1Н, s), 7.50-7.59 (2Н, m), 7.37-7.45 (1Н, m), 7.32 (2Н, d, J=8.1 Гц), 6.27-6.36 (1Н, m), 6.17 (2Н, s), 5.06 (1Н, t, J=5.7 Гц), 4.82 (2Н, d, J=3.8 Гц), 3.59 (2Н, s), 3.08 (1Н, d, J=9.8 Гц), 2.98 (1Н, d, J=13.6 Гц), 2.54-2.64 (1Н, m), 2.36 (1Н, t, J=10.9 Гц), 2.20 (2Н, d, J=6.8 Гц), 2.05 (1Н, br, s), 1.72-1.93 (3Н, m), 1.48-1.71 (8Н, m), 1.15-1.40 (2Н, m), 0.81 (6Н, d, J=6.4 Гц).

Пример 30: трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали путем, показанным на схеме 21.

Стадия 1. Ди-трет-бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Промежуточное соединение 14 (100 мг, 0,27 ммоль) и Промежуточное соединение 25 (89 мг, 0,29 ммоль) растворяли в ДХЭ (10 мл) и перемешивали при КТ в течение 2 ч. Добавляли STAB (114 мг, 0,29 ммоль), и реакционную смесь перемешивали еще в течение 18 ч. Реакционную смесь гасили добавлением нас. Na₂CO₃ (20 мл) и энергично перемешивали в течение 20 мин. Водный слой отделяли и дополнительно экстрагировали ДХМ (2×20 мл), и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали колоночной хроматографией (80% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде оранжевого масла (143 мг, 81%).

ЖХМС: m/z 657/659 [М+Н]⁺.

Стадия 2: Ди-трет-бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

К раствору ди-трет-бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилата (150 мг, 0,23 ммоль) в MeCN (4 мл) добавляли ацетальдегид (20 мг, 0,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при КТ в атмосфере азота в течение 25 мин, после чего добавляли уксусную кислоту (27 мг, 0,46 ммоль) и STAB (106 мг, 0,50 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин, а затем гасили добавлением нас. NaHCO₃ (10 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (3×20 мл), и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Продукт был получен в результате автоматической колоночной хроматографии, используя EtOAc в гептане (градиент 0-100%), с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого масла (83 мг, 53%).

ЖХМС: m/z 685/687/689 [М+Н]⁺.

Стадия 3: трет-Бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Ди-трет-бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (47 мг, 0,069 ммоль) растворяли в ДХМ (0,5 мл) и охлаждали до 0°С, после чего добавляли 4 Μ HCl в диоксане (2,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 часа. Реакционную смесь подщелачивали до рН14, используя 2 н. NaOH (10 мл), и экстрагировали EtOAc (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали соляным раствором (25 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желтого масла, которое очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (6 мг, 15%).

ЖХМС: чистота 97,5%, m/z 585/587/589 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.85 (2Н, d, J=8.1 Гц), 7.77 (1Н, s), 7.50-7.54 (2Н, m), 7.36-7.43 (1Н, m), 7.33 (2Н, d, J=8.3 Гц), 6.24 (1Н, t, J=4.2 Гц), 6.05 (2Н, s), 4.85 (2Н, d, J=4.3 Гц), 3.62 (2Н, s), 2.98-3.09 (2Н, m), 2.66 (1Н, t, J=11.7 Гц), 2.53 (2Н, d, J=7.2 Гц), 2.37-2.47 (1Н, m), 1.93 (1Н, d, J=12.1 Гц), 1.58-1.69 (1Н, m), 1.41 (9Н, s), 1.19-1.37 (2Н, m), 0.96 (3Н, t, J=7.0 Гц).

Пример 31: Циклопентил (2R)-4-[ацетил(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали путем, показанным на схеме 22.

Стадия 1: Ди-трет-бутил-{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-(4-формилфенил)пиразин-2-ил}имидодикарбонат

К раствору Промежуточного соединения 4 (569 мг, 0,88 ммоль) в ДМЭ (5,5 мл) добавляли Промежуточное соединение 6 (305 мг, 1,3 ммоль) и 2 н. Na₂CO₃ (1,1 мл, 2,2 ммоль), и раствор дегазировали путем барботирования азота через реакционную смесь. Добавляли дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II) (62 мг, 0,088 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 80°С в атмосфере азота в течение 18 ч для завершения реакции. Реакционную смесь фильтровали через целлит®, и фильтрационный кек промывали EtOAc (100 мл). Объединенные фильтраты промывали водой (30 мл), соляным раствором (30 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме, после чего очищали колоночной хроматографией (20% - 30% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бесцветного масла (0,513 г, 87%).

ЖХМС: m/z 695/697/699 [M+Na]⁺.

Стадия 2: 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Ди-трет-бутил-{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-(4-формилфенил)пиразин-2-ил}имидодикарбонат (250 мг, 0,37 ммоль) и Промежуточное соединение 22 (128 мг, 0,41 ммоль) растворяли в ДХЭ (6 мл) и перемешивали при КТ в атмосфере азота в течение 1 ч. Добавляли STAB (157 мг, 0,74 ммоль), и реакционную смесь перемешивали еще в течение 18 ч. Реакционную смесь гасили добавлением нас. Na₂CO₃ (10 мл) и ДХМ (10 мл). Водный слой отделяли и дополнительно экстрагировали ДХМ (3×20 мл), и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали колоночной хроматографией (40% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде оранжевого масла (252 мг, 70%).

ЖХМС: m/z 969/970/971 [М+Н]⁺.

Стадия 3: 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[ацетил(4-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (134 мг, 0,14 ммоль) растворяли в безводном ДХМ (2 мл). Добавляли триэтиламин (21 мг, 0,21 ммоль), и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Через 5 минут добавляли ацетилхлорид (16 мг, 0,27 ммоль), и реакционную смесь медленно подогревали до КТ в течение 3 ч. Добавляли дополнительное количество ацетилхлорида (8 мг, 0,10 ммоль), и реакционную смесь перемешивали еще в течение 2 ч до завершения. Добавляли нас. NaHCO₃ (10 мл), и продукт экстрагировали в ДХМ (3×20 мл). Объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в гептане (градиент 0-100%) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бесцветного масла (107 мг, 77%).

ЖХМС: m/z 911/912/913/914 [М-Вос]⁺.

Стадия 4: Циклопентил-(2R)-4-[ацетил(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[ацетил(4-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (107 мг, 0,11 ммоль) растворяли в диэтиловом эфире (0,5 мл) и добавляли 2 Μ HCl в диэтиловом эфире (10 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч до завершения. Растворитель удаляли в вакууме с получением желтого твердого вещества, которое очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде беловатого твердого вещества (18 мг).

ЖХМС: чистота 99%, m/z 611/613/615 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.72-7.95 (3Н, m), 7.48-7.56 (2Н, m), 7.34-7.44 (1Н, m), 7.16-7.27 (2Н, m), 6.25 (1Н, br, s), 6.01-6.13 (2Н, m), 4.99-5.06 (1Н, m), 4.85 (2Н, d, J=4.1 Гц), 4.56 (1.6Н, s), 4.35-4.48 (1Н, m), 3.91 (0.4Н, br, s), 3.24-3.33 (1Н, m), 2.95 (1Н, br, s), 2.19 (1Н, br, s), 1.99 (3Н, br, s), 1.68-1.81 (3Н, m), 1.33-1.66 (10Н, m).

Пример 32: Циклопентил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали путем, показанным на схеме 23 ниже.

Стадия 1. 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Промежуточное соединение 13 (100 мг, 0,26 ммоль) растворяли в ДМФ (6 мл) и добавляли Промежуточное соединение 22 (96 мг, 0,3 ммоль) с последующим добавлением HOBt (41 мг, 0,3 ммоль) и EDC (56 мг, 0,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч, а затем концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток использовали далее в неочищенном виде (170 мг).

ЖХМС: m/z 683/685 [М+Н]⁺.

Стадия 2. Циклопентил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (170 мг, 0,24 ммоль) растворяли в ДХМ (1 мл) и добавляли 2 н. HCl в диэтиловом эфире (1 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч, а затем концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого твердого вещества (50 мг).

ЖХМС: чистота 97%, m/z 583/585 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 8.43-8.3 (2Н, m), 8.09 (1Н, d, J=7.8 Гц), 7.91 (1Н, s), 7.72 (1Н, d, J=7.8 Гц), 7.65-733 (4Н, m), 6.46-6.35 (1Н, m), 6.28 (2Н, s), 5.18-5.05 (1Н, m), 4.84 (2Н, d, J=4.0 Гц), 4.05-3.83 (1Н, m), 3.5-2.4 (3Н, m), 2.2-2.0 (1Н, m), 1.95-1.2 (12Н, m).

Пример 33: трет-Бутил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

трет-Бутил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензоил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 32 выше, используя Промежуточное соединение 25 на стадии 1 схемы 23.

ЖХМС: чистота 97%, m/z 571/573 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 8.35 (2Н, m), 8.09 (1Н, d, J=7.9 Гц), 7.91 (1Н, s), 7.72 (1Н, d, J=7.9 Гц), 7.60-7.34 (4Н, m), 6.46-6.34 (1Н, m), 6.28 (2Н, s), 4.84 (2Н, d, J=4.1 Гц), 4.05-3.95 (1Н, m) 3.3-2.4 (3Н, m), 2.1-2.0 (2Н, m), 1.7-1.6 (1Н, m), 1.4 (9Н, s) 1.45-1.25 (2Н, m).

Пример 34: Циклопентил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали путем, показанным на схеме 24 ниже.

Стадия 1. 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Промежуточное соединение 20 (78 мг, 0,2 ммоль) суспендировали в ДХЭ (6 мл) и добавляли Промежуточное соединение 22 (97 мг, 0,31 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин, после чего добавляли STAB (85 мг, 0,4 ммоль). Реакционной смеси давали перемешиваться при КТ в течение 72 ч, после чего добавляли нас. NaHCO₃ (100 мл) и экстрагировали продукт ДХМ (3×30 мл). Объединенные органические слои отделяли и высушивали над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки автоматической колоночной хроматографией (EtOAc/ДХМ) получили продукт (115 мг), все же содержащий небольшое количество примесей, но использовали его на стадии 2.

ЖХМС: m/z 669/671 [М+Н]⁺.

Стадия 2. Циклопентил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (115 мг, 0,17 ммоль) растворяли в ДХМ (1 мл) и добавляли 2 н. HCl в диэтиловом эфире. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 18 ч, а затем концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде беловатого твердого вещества (29 мг).

ЖХМС: чистота 97%, m/z 569/571 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.85-7.6 (3Н, m), 7.5-7.0 (5Н, m), 6.32-6.23 (1Н, m), 6.11 (2Н, s), 5.1-4.9 (1Н, m), 4.8-4.7 (2Н, m), 3.7 (2Н, s), 3.15-2.9 (2Н, m), 2.4-2.3 (1Н, m), 2.1-1.9 (3Н, m), 1.85-1.65 (3Н, m), 1.62-1.35 (7Н, m), 1.1-0.9 (2Н, m).

Пример 35: Циклопентил-(2S)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилата диформиат

Циклопентил-(2S)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 34, используя Промежуточное соединение 22 на стадии 1 пути синтеза, показанного на схеме 24. Очистку конечного соединения проводили препаративной ВЭЖХ с получением соли диформиат соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (18,0 мг, 18%).

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1 8.23 (2Н, s), 7.90 (1Н, s), 7.85-7.78 (2Н, m), 7.58-7.5 (2Н, m), 7.48-7.2 (3Н, m), 6.39-6.3 (1Н, s), 6.20 (2Н, s), 5.15-5.0 (1Н, m), 4.83 (2Н, d, J=4.1 Гц), 3.83 (2Н, s), 3.5-2.8 (2Н, m), 2.7-2.0 (3Н, m), 1.9-1.4 (11Н, m), 1.25-1.0 (2Н, m)

ЖХМС: чистота 98%, m/z 569/571 [М+Н]⁺.

Пример 36: Циклопентил-(2S)-4-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2S)-4-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 34, используя Промежуточное соединение 29 и ДХМ в качестве растворителя на стадии 1 пути, показанного на схеме 24.

ЖХМС: чистота 93%, m/z 555/557/559 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 7.93 (1Н, s), 7.83 (1Н, d, J=7.9 Гц), 7.71 (1Н, s), 7.40-7.46 (2Н, m), 7.27-7.39 (2Н, m), 7.20-7.27 (1Н, m), 5.13-5.21 (1Н, m), 5.03 (2Н, s), 3.66-3.72 (1Н, m), 3.53-3.66 (2Н, m), 3.14-3.24 (1Н, m), 2.86-2.97 (2Н, m), 2.63-2.73 (1Н, m), 2.57 (1Н, dd, J=11.2, 8.0 Гц), 2.41-2.51 (1Н, m), 1.71-1.90 (2Н, m), 1.67 (1Н, dd, J=6.8, 2.1 Гц), 1.44-1.64 (5Н, m).

Пример 37: Циклопентил-(2R)-4-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 34, используя Промежуточное соединение 30 и ДХМ в качестве растворителя на стадии 1 пути, показанного на схеме 24.

ЖХМС: чистота 100%, m/z 555/557/559 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 7.92 (1Н, s), 7.82 (1Н, d, J=7.9 Гц), 7.71 (1Н, s), 7.39-7.48 (2Н, m), 7.20-7.38 (3Н, m), 5.14 (1Н, t, J=5.8 Гц), 5.02 (2Н, s), 3.50-3.67 (3Н, m), 3.05-3.15 (1Н, m), 2.77-2.92 (2Н, m), 2.58-2.68 (1Н, m), 2.33-2.53 (2Н, m), 1.71-1.89 (2Н, m), 1.47-1.70 (6Н, m).

Пример 38: Циклопентил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-лейцинат

Циклопентил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-лейцинат был получен аналогично Примеру 34, следуя стадии 1 пути, представленного на схеме 24, используя Промежуточное соединение 32.

ЖХМС: чистота 95%, m/z 556/558 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 7.91-7.80 (2Н, m), 7.81-7.78 (1Н, m), 7.6-7.05 (5Н, m), 5.22-5.10 (1Н, m), 4.96 (2Н, d, J=5.7 Гц), 4.38-4.22 (1Н, m), 4.09 (2Н, s), 3.81 (1Н, d, J=13.0 Гц), 3.61 (1Н, d, J=13.0 Гц), 3.21 (1Н, t, J=7.3 Гц), 1.9-1.3 (12Н, m), 0.83 (3Н, d, J=2.2 Гц), 0.78 (3Н, d, J=2.2 Гц).

Пример 39: трет-Бутил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-лейцинат

трет-Бутил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-лейцинат был получен аналогично Примеру 34, следуя стадии 1 пути, представленного на схеме 24, и используя трет-бутил-L-лейцинат.

ЖХМС: чистота 92%, m/z 544/546 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 8.05-7.85 (3Н, m), 7.45-7.15 (5Н, m), 5.06 (2Н, d, J=1.8 Гц), 4.5-4.4 (1Н, m), 4.19 (2Н, s), 3.92 (1Н, d, J=5.7 Гц), 3.72 (1Н, d, J=5.7 Гц), 3.3-3.2 (1Н, m), 1.9-1.8 (1Н, m), 1.7-1.45 (3Н, m), 1.58 (s, 9Н), 0.94 (3Н, d, J=2.2 Гц), 0.88 (3Н, d, J=2.2 Гц).

Пример 40: Циклопентил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-2-метилаланинат

Циклопентил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-2-метилаланинат был получен аналогично Примеру 34, следуя стадии 1 пути, представленного на схеме 24, и используя Промежуточное соединение 33 (свободное основание), с конечной очисткой препаративной ВЭЖХ.

ЖХМС: чистота 97%, m/z 528/530 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.86 (1Н, s), 7.82-7.70 (2Н, m), 7.6-7.5 (2Н, m), 7.46-7.25 (3Н, m), 6.4-6.3 (1Н, m), 6.20 (2Н, s), 5.3-5.0 (1Н, m), 4.83 (2Н, d, J=4.0 Гц), 3.60 (2Н, s), 2.39-2.15 (1Η, m), 1.94-1.4 (8Н, m), 1.25 (6H, s).

Пример 41: трет-Бутил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-2-метилаланината соль формиат

трет-Бутил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-2-метилаланинат был получен аналогично Примеру 34, следуя стадии 1 пути, представленного на схеме 24, и используя альфа-аминоизомасляной кислоты трет-бутиловый эфир, с конечной очисткой препаративной ВЭЖХ с получением соли формиат соединения, указанного в заголовке,.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 516/518 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 8.30 (1Н, br s), 7.95-7.86 (1Н, m), 7.85-7.6 (2Н, m), 7.62-7.47 (2Н, m), 7.45-7.1 (3Н, m), 6.40-6.30 (1Н, m), 6.3-6.2 (2Н, m), 4.9-4.8 (2Н, m), 3.7-3.58 (2Н, m), 3.4-3.1 (1Н, NH не виден под пиком воды), 1.42 (9Н, s), 1.23 (6H, s)

Пример 42: Циклопентил-1-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]циклобутанкарбоксилата диформиат

Циклопентил-1-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]циклобутанкарбоксилат был получен аналогично Примеру 34, следуя стадии 1 пути, представленного на схеме 18, и используя Промежуточное соединение 34 (свободное основание). Конечное соединение очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде соли диформиат.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 540/541/542 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 8.30 (2Н, br, s), 7.88 (1Н, s), 7.82-7.75 (2Н, m), 7.6-7.5 (2Н, m), 7.46-7.17 (3Н, m), 6.42-6.3 (1Н, m), 6.21 (2Н, s), 5.15-5.0 (1Н, m), 4.83 (2Н, d, J=4.1 Гц), 3.55 (2Н, s), 2.35-2.15 (2Н, m), 2.1-1.4 (13Н, m).

Пример 43: Циклопентил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-O-трет-бутил-L-серинат

Циклопентил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-O-трет-бутил-L-серинат был получен аналогично Примеру 34, следуя стадии 1 пути, представленного на схеме 24, и используя Промежуточное соединение 35 (свободное основание). Конечную очистку проводили препаративной ВЭЖХ.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 586/588 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.88 (1Н, s), 7.82-7.74 (2Н, m), 7.6-7.5 (2Н, m), 7.46-7.1 (3Н, m), 6.43-6.3 (1Н, m), 6.21 (2Н, b, s), 5.2-5.0 (1Н, m), 4.83 (2Н, d, J=1.3 Гц), 3.9-3.15 (5Н, m), 2.45-2.25 (1Н, m), 1.9-1.4 (8Н, m), 1.04 (9Н, s).

Пример 44: трет-Бутил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-O-трет-бутил-L-серинат

трет-Бутил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-О-трет-бутил-L-серинат был получен аналогично Примеру 34, следуя стадии 1 пути, представленного на схеме 24, и используя трет-бутил-O-трет-бутил-L-серината гидрохлорид. Конечную очистку проводили препаративной ВЭЖХ.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 574/576 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.89 (1Н, s), 7.84-7.72 (2Н, m), 7.62-7.47 (2Н, m), 7.45-7.12 (3Н, m), 6.42-6.3 (1Н, m), 6.21 (2Н, s), 4.9-4.77 (2Η, m), 3.83 (1Н, d, J=4.4 Гц), 3.64 (1Н, d, J=4.4 Гц), 3.55-3.0 (3Н, m), 2.42-2.2 (1Н, m), 1.39 (9Н, s), 1.05 (9Н, s)

Пример 45: трет-Бутил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-аланинат

трет-Бутил-N-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)-L-аланинат был получен аналогично Примеру 34 согласно стадии 1 пути, представленного на схеме 24, и используя трет-бутил-L-аланинат (свободное основание) в качестве аминокислоты.

ЖХМС: чистота 95%, m/z 502/504 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.89-7.82 (1Н, m), 7.81-7.7 (2Н, m), 7.59-7.48 (2Н, m), 7.46-7.1 (3Н, m), 6.4-6.3 (1Н, m), 6.20 (2Н, br, s), 4.88-4.80 (2Н, m), 3.86-3.5 (2Н, m), 3.45-3.0 (1Н, m), 2.45-2.2 (1Н, m), 1.41 (9Н, s), 1.16 (3Н, d, J=2.2 Гц).

Пример 46: трет-Бутил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

трет-Бутил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали, как показано на схеме 25.

Стадия 1. Ди-трет-бутил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Промежуточное соединение 20 (90 мг, 0,24 ммоль) суспендировали в ДХЭ (4 мл) и добавляли Промежуточное соединение 25 (108 мг, 0,36 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин, после чего добавляли STAB (101 мг, 0,48 ммоль). Реакционной смеси давали перемешиваться при КТ в течение 18 ч, после чего добавляли нас. NaHCO₃ (120 мл) и экстрагировали продукт ДХМ (2×60 мл). Объединенные органические слои отделяли и высушивали над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки автоматической колоночной хроматографией (EtOAc/ДХМ) получили продукт (130 мг, 82%).

ЖХМС: m/z 657/659 [М+Н]⁺.

Стадия 2. трет-Бутил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат

Ди-трет-бутил-(2R)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-1,2-дикарбоксилат (130 мг, 0,197 ммоль) растворяли в диоксане (3 мл) и охлаждали до 0°С, после чего добавляли по каплям 4 Μ HCl в диоксане (1 мл). В течение 6 часов при 0°С дополнительно добавляли 2,5 мл 4 Μ HCl в диоксане для завершения реакции. К реакционной смеси добавляли 2 н. NaOH (80 мл), и продукт экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Объединенные органические слои отделяли и высушивали над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде оранжевого твердого вещества (44 мг).

ЖХМС: чистота 97%, m/z 557/559 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.88 (1Н, s), 7.85-7.8 (2Н, m), 7.62-7.5 (2Н, m), 7.47-7.15 (3Н, m), 6.40-6.3 (1Н, m), 6.18 (2Н, s), 4.83 (2Н, d, J=4.1 Гц), 3.78 (2Н, s), 3.5-3.25 (2Н, m), 3.11-2.88 (1Н, m), 2.55-1.75 (5Н, m), 1.38 (9Н, s), 1.15-0.9 (2Н, m).

Пример 47: трет-Бутил-(2S)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилата диформиат

трет-Бутил-(2S)-4-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 46, используя Промежуточное соединение 26 на стадии 1 пути синтеза, показанного на схеме 25. Очистку конечного соединения проводили препаративной ВЭЖХ с получением соли диформиат соединения, указанного в заголовке, в виде белого твердого вещества (19,8 мг, 8%).

ЖХМС: чистота 96%, m/z 557/559 [М+Н]⁺

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 8.27 (2Н, br, s), 7.9 (1Н, s), 7.85-7.7 (2Н, m), 7.7-7.47 (2Н, m), 7.45-7.15 (3Н, m), 6.4-6.3 (1Н, m), 6.19 (2Н, s), 4.88-4.75 (2Н, m), 3.80 (2Н, m), 3.75-3.2 (2Н, m), 3.17-2.8 (2Н, m), 2.65-2.3 (2Н, m), 2.2-1.7 (2Н, m), 1.38 (9Н, s), 1.2-0.9 (2Н, m).

Пример 48: Циклопентил-N-[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]-2-метилаланинат

Циклопентил-N-[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]-2-метилаланинат синтезировали, как показано на схеме 26 ниже.

Стадия 1: Циклопентил-N-[2-(3-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]-2-метилаланинат

Промежуточное соединение 21 (168 мг, 0,24 ммоль) и Промежуточное соединение 33 (свободное основание) (125 мг, 0,73 ммоль) растворяли в ДХЭ (4 мл) и перемешивали при КТ в течение 10 мин в атмосфере азота. Добавляли STAB (104 мг, 0,49 ммоль), и реакционную смесь перемешивали еще в течение 18 ч. Реакционную смесь гасили добавлением нас. NaHCO₃ (15 мл). Водный слой отделяли и дополнительно экстрагировали ДХМ (3×20 мл), и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали колоночной хроматографией (50% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде оранжевого масла (64 мг, 31%).

ЖХМС: m/z 842/844/846 [М+Н]⁺.

Стадия 2: Циклопентил-N-[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]-2-метилаланинат

Циклопентил-N-[2-(3-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]-2-метилаланинат (64 мг, 0,076 ммоль) перемешивали и добавляли 2 Μ HCl в диэтиловом эфире (5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч. Добавляли 4 Μ HCl в диоксане (2 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин для завершения реакции. Растворитель удаляли в вакууме с получением желтого твердого вещества, которое очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде беловатого твердого вещества (15 мг, 36%).

ЖХМС: чистота 100%, m/z 542/544/546 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.69-7.82 (3Н, m), 7.50-7.57 (2Н, m), 7.36-7.45 (1Н, m), 7.28 (1Н, t, J=7.5 Гц), 7.07 (1Н, d, J=7.2 Гц), 6.35 (1Н, br. s), 6.19 (2Н, s), 4.98 (1Н, t, J=5.5 Гц), 4.83 (2Н, d, J=3.8 Гц), 2.60-2.77 (4Н, m), 1.91 (1Н, br, s), 1.63-1.78 (2Н, m), 1.36-1.61 (6Н, m), 1.15 (6Н, s).

Пример 49: Циклопентил-1-{[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]амино}циклобутанкарбоксилат

Циклопентил-1-{[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]лиразин-2-ил}фенил)этил]амино}циклобутанкарбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 48, используя 1,5 эквивалента Промежуточного соединения 34 на стадии 1 пути синтеза, показанного на схеме 26.

ЖХМС: чистота 100%, m/z 554/556/558 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.69-7.82 (3Н, m), 7.50-7.58 (2Н, m), 7.35-7.44 (1Н, m), 7.28 (1Н, t, J=7.6 Гц), 7.08 (1Н, d, J=7.5 Гц), 6.32-6.40 (1Н, m), 6.19 (2Н, s), 5.02 (1Н, t, J=5.8 Гц), 4.83 (2Н, d, J=4.1 Гц), 2.68-2.79 (2Н, m), 2.59 (2Н, br, s), 2.16-2.27 (2Н, m), 2.12 (1Н, br, s), 1.81-1.96 (3Н, m), 1.6-1.79 (3Н, m), 1.38-1.60 (6Н, m).

Пример 50: Циклопентил-(2R)-4-{[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]амино}пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-{[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]амино}пиперидин-2-карбоксилат синтезировали согласно пути, показанному на схеме 27.

Стадия 1. 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-{[2-(3-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]амино}пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Промежуточное соединение 21 (160 мг, 0,23 ммоль), Промежуточное соединение 22 (109 мг, 0,35 ммоль) и уксусную кислоту (99 мкл, 1,7 ммоль) растворяли в ДХЭ (4 мл) и перемешивали при КТ в атмосфере азота в течение 40 мин. Добавляли STAB (99 мг, 0,47 ммоль) и уксусную кислоту (0,2 мл, 3,5 ммоль), и реакционную смесь перемешивали еще в течение 18 ч. Реакционную смесь гасили добавлением нас. NaHCO₃ (10 мл) и ДХМ (20 мл). Водный слой отделяли и дополнительно экстрагировали ДХМ (3×10 мл), и объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в гептане (градиент 0-50%) с последующей колоночной хроматографией (40-50% EtOAc/гептан) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бесцветного масла (103 мг, 45%).

ЖХМС: m/z 983/985/987 [М+Н]⁺.

Стадия 2. Циклопентил-(2R)-4-{[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]амино}пиперидин-2-карбоксилат

К раствору 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-{[2-(3-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]амино}пиперидин-1,2-дикарбоксилата (100 мг, 0,10 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли 4 Μ HCl в диоксане (3 мл), и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 21 ч. Растворитель концентрировали в вакууме, и полученный в результате остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бледно-оранжевого масла (10 мг, 17%).

ЖХМС: чистота 95,6%, m/z 583/585/587 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО): δ млн^-1: 7.70-7.81 (3Н, m), 7.50-7.58 (2Н, m), 7.35-7.44 (1Н, m), 7.28 (1Н, t, J=7.5 Гц), 7.10 (1Н, d, J=7.5 Гц), 6.36 (1Н, t, J=4.2 Гц), 6.18 (2Н, s), 5.01-5.10 (1Н, m), 4.83 (2Н, d, J=4.1 Гц), 3.14 (1Н, dd, J=11.4, 2.5 Гц), 2.94 (1Н, dt, J=12.6, 3.2 Гц), 2.67-2.85 (4Н, m), 2.54-2.59 (1Н, m), 2.36-2.47 (1Н, m), 1.47-2.07 (12Н, m), 0.87-1.09 (2Н, m).

Пример 51: Циклопентил-(2S)-4-{[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]амино}пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2S)-4-{[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]амино}пиперидин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 50, используя Промежуточное соединение 23 на стадии 1 пути, представленного на схеме 27.

ЖХМС: чистота 94%, m/z 583/585/587 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.79 (1Н, s), 7.70-7.77 (2Н, m), 7.51-7.57 (2Н, m), 7.37-7.43 (1Н, m), 7,28 (1Н, t, J=7.6 Гц), 7.09 (1Н, d, J=7.5 Гц), 6.36 (1Н, t, J=4.2 Гц), 6.19 (2Н, s), 5.05 (1Н, t, J=6.1 Гц), 4.82 (2Н, d, J=4.1 Гц), 3.14 (1Н, dd, J=11.3, 2.1 Гц), 2.89-2.97 (1Н, m), 2.67-2.84 (4Н, m), 2.54 (1Н, br, s), 2.36-2.47 (1Н, m), 2.01 (2Н, d, J=10.9 Гц), 1.68-1.85 (3Н, m), 1.44-1.67 (7Н, m), 0.89-1.07 (2Н, m).

Пример 52: Циклопентил-4-[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]пиперазин-2-карбоксилат

Циклопентил-4-[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]пиперазин-2-карбоксилат синтезировали способом, аналогичным Примеру 50, используя Промежуточное соединение 28 на стадии 1 пути, представленного на схеме 27.

ЖХМС: чистота 97%, m/z 569/571/573 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ млн^-1: 7.70-7.81 (3Н, m), 7.49-7.57 (2Н, m), 7.35-7.44 (1Н, m), 7.27 (1Н, t, J=7.6 Гц), 7.10 (1Н, d, J=7.5 Гц), 6.33-6.40 (1Н, m), 6.20 (2Н, s), 5.02-5.11 (1Н, m), 4.83 (2Н, d, J=4.1 Гц), 3.39 (2Н, d, J=3.0 Гц), 2.86-2.98 (1Н, m), 2.67-2.81 (3Н, m), 2.52-2.67 (3Н, m), 2.32-2.47 (2Н, m), 2.16-2.31 (1Н, m), 1.70-1.85 (2Н, m), 1.43-1.68 (6Н, m).

Пример 53: Циклопентил-(2R)-4-{[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)ацетил]амино}пиперидин-2-карбоксилат

Циклопентил-(2R)-4-{[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)ацетил]амино}пиперидин-2-карбоксилат синтезировали, как показано на схеме 28.

Стадия 1: (4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)уксусная кислота

К раствору Промежуточного соединения 1 (1,34 г, 3,8 ммоль) в ДМЭ (20 мл) добавляли Промежуточное соединение 10 (956 мг, 4,2 ммоль) и 2 н. Na₂CO₃ (4,8 мл, 9,6 ммоль), и раствор дегазировали путем барботирования азота через реакционную смесь. Добавляли дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II) (270 мг, 0,4 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 90°С в атмосфере азота в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, и остаток растворяли в воде (100 мл) и промывали EtOAc (50 мл). Водный слой фильтровали и подкисляли до pH 3, используя 1 н. HCl. Полученное в результате твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали в вакуумной печи с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бежевого твердого вещества (400 мг, 26%).

ЖХМС: m/z 393/395 [М+Н]⁺.

Стадия 2: 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-{[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)ацетил]амино}пиперидин-1,2-дикарбоксилат

(4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)уксусную кислоту (100 мг, 0,26 ммоль) растворяли в ДМФ (5 мл) и добавляли EDC (59 мг, 0,31 ммоль) и HOBt (41 мг, 0,31 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин, после чего добавляли Промежуточное соединение 22 (95 мг, 0,31 ммоль). Реакционной смеси давали перемешиваться в течение 72 часов при КТ. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (25 мл) и промывали 2 н. NaOH (10 мл), водой (10 мл), соляным раствором (10 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали колоночной хроматографией (5% MeOH/EtOAc) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого масла (122 мг, 70%).

ЖХМС: m/z 687/689 [М+Н]⁺.

Стадия 3: Циклопентил-(2R)-4-{[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)ацетил]амино}пиперидин-2-карбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-{[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)ацетил]амино}пиперидин-1,2-дикарбоксилат (122 мг, 0,18 ммоль) растворяли в ДХМ (5 мл) и добавляли 2 н. HCl в диэтиловом эфире (20 мл). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч, а затем концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток распределяли между нас. Na₂CO₃ (20 мл) и EtOAc (20 мл). Органический слой отделяли и концентрировали в вакууме, после чего очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде беловатого твердого вещества (41 мг, 39%).

ЖХМС: чистота 98%, m/z 587/589 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 8.03 (1Н, s), 7.92 (1Н, s), 7.68 (1Н, s), 7.37-7.34 (2Н, m), 7.23-7.18 (1Н, m), 6.36 (1Н, d, J=7.9 Гц), 5.21-5.15 (1Н, m), 4.97 (2Н, d, J=5.5 Гц), 4.82 (2Н, s), 4.59 (1Н, t, J=5.5 Гц), 4.22 (2Н, br, s), 3.96-3.86 (1Н, m), 3.33 (1Н, dd, J=2.7, 11.4 Гц), 3.19-3.13 (1Н, m), 2.69 (1Н, td, J=2.5, 12.4 Гц), 2.27 (1Н, d, J=12.2 Гц), 1.89-1.55 (10Н+H₂O, m), 1.30-1.14 (2Н, m).

Пример 54: трет-Бутил-(2R)-4-{[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)ацетил]амино}пиперидин-2-карбоксилат

трет-Бутил-(2R)-4-{[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)ацетил]амино}пиперидин-2-карбоксилат синтезировали, как показано на схеме 29.

Стадия 1: (4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)уксусная кислота

К раствору Промежуточного соединения 1 (1,34 г, 3,8 ммоль) в ДМЭ (20 мл) добавляли Промежуточное соединение 10 (956 мг, 4,2 ммоль) и 2 н. Na₂CO₃ (4,8 мл, 9,6 ммоль), и раствор дегазировали путем барботирования азота через реакционную смесь. Добавляли дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II) (270 мг, 0,4 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 90°С в атмосфере азота в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, и остаток растворяли в воде (100 мл) и промывали EtOAc (50 мл). Водный слой фильтровали и подкисляли до pH 3, используя 1 н. HCl. Полученное в результате твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали в вакуумной печи с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бежевого твердого вещества (400 мг, 26%).

ЖХМС: m/z 393/395 [М+Н]⁺.

Стадия 2: Ди-трет-бутил-(2R)-4-{[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)ацетил]амино}пиперидин-1,2-дикарбоксилат

(4-{5-Амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)уксусная кислота (100 мг, 0,26 ммоль) растворяли в ДМФ (5 мл) и добавляли EDC (59 мг, 0,31 ммоль) и HOBt (41 мг, 0,31 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин, после чего добавляли Промежуточное соединение 25 (92 мг, 0,31 ммоль). Реакционной смеси давали перемешиваться в течение 18 часов при КТ. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (25 мл) и промывали 2 н. NaOH (10 мл), водой (10 мл), соляным раствором (10 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали колоночной хроматографией (5% MeOH/EtOAc) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого твердого вещества (150 мг, 87%).

ЖХМС: m/z 675/677 [М+Н]⁺.

Стадия 3: трет-Бутил-(2R)-4-{[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)ацетил]амино}пиперидин-2-карбоксилат

Ди-трет-бутил-(2R)-4-{[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)ацетил]амино}пиперидин-1,2-дикарбоксилат (150 мг, 0,22 ммоль) растворяли в диоксане (10 мл), и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Добавляли 4 н. HCl в диоксане (20 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч до завершения. Реакционную смесь наливали на 2 н. NaOH (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Органический слой промывали соляным раствором (25 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме, после чего очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, в виде беловатого твердого вещества (10 мг, 8%).

ЖХМС: чистота 96%, m/z 575/577 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) 8.03 (1Н, s), 7.92 (1Н, s), 7.69 (1Н, s), 7.38-7.35 (2Н, m), 7.24-7.19 (1Н, m), 6.36 (1Н, d, J=7.9 Гц), 4.98 (2Н, d, J=5.6 Гц), 4.83 (2Н, s), 4.55 (1Н, t, J=5.4 Гц), 4.18 (2Н, br s), 3.98-3.87 (1Н, m), 3.28 (1Н, dd, J=2.5, 11.3 Гц), 3.16 (1Н, d, J=12.6 Гц), 2.73-2.64 (1Н, m), 2.26 (1Н, d, J=12.1 Гц), 1.92-1.83 (2Н, m), 1.44 (9H, S), 1.29-1.12 (2Н, m).

Пример 55: Циклопентил-(2R)-4-{[2-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1H-пиразол-1-ил)этил]амино}пиперидин-2-карбоксилата диформиат

Циклопентил-(2R)-4-{[2-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)этил]амино}пиперидин-2-карбоксилат синтезировали, как показано на схеме 30.

Стадия 1. Ди-трет-бутил{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-[1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил]пиразин-2-ил}имидодикарбонат

К раствору Промежуточного соединения 4 (951 мг, 1,46 ммоль) в ДМЭ (20 мл) добавляли Промежуточное соединение 11 (524 мг, 2,20 ммоль) и 2 н. Na₂CO₃ (1,8 мл, 3,65 ммоль), и раствор дегазировали путем барботирования азота через реакционную смесь в течение 20 мин. Добавляли дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II) (270 мг, 0,4 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 80°С в атмосфере азота в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до КТ и разбавляли EtOAc (100 мл). Реакционную смесь фильтровали через целлит®, и фильтрационный кек промывали EtOAc (50 мл). Фильтрат промывали соляным раствором (100 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в гептане (градиент 10-100%) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде беловатого твердого вещества (920 мг, 93%).

ЖХМС: m/z 579/581/583 [М-Вос]⁺.

Стадия 2. Ди-трет-бутил{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-[1-(2-оксоэтил)-1Н-пиразол-4-ил]пиразин-2-ил}имидодикарбонат

К раствору ди-трет-бутил{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-[1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил]пиразин-2-ил}имидодикарбоната (900 мг, 1,32 ммоль) в ДХМ (14 мл) при 0°С добавляли периодинан Десса-Мартина (618 мг, 1,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при нагревании до КТ в атмосфере азота в течение 4 ч. Добавляли еще 0,5 экв. периодинана Десса-Мартина (300 мг), и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (30 мл), добавляли нас.раствор NaHCO₃ (50 мл) и нас.раствор тиосульфата натрия (50 мл) и энергично перемешивали в течение 1 ч. Водный слой отделяли и промывали ДХМ (100 мл). Объединенные органические слои промывали нас.раствором NaHCO₃ и нас.раствором тиосульфата натрия (смесь 1:1, 200 мл), соляным раствором (200 мл), высушивали над MgSO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения, указанного в заголовке, в виде желтого твердого вещества (830 мг, 93%). Это вещество использовали далее в неочищенном виде.

ЖХМС: m/z 577/579 [М-Вос]⁺.

Стадия 3. 1-трет-Бутил-2-циклопентил-(2R)-4-{[(4-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)ацетил]амино}пиперидин-1,2-дикарбоксилат

Ди-трет-бутил{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-[1-(2-охоэтил)-1Н-пиразол-4-ил]пиразин-2-ил}имидодикарбонат (100 мг, 0,15 ммоль), Промежуточное соединение 22 (69 мг, 0,22 ммоль) и уксусную кислоту (168 мкл, 0,94 ммоль) растворяли в ДХЭ (5 мл) и перемешивали при КТ в течение 2 ч. Добавляли STAB (93 мг, 0,44 ммоль), и реакционную смесь перемешивали еще в течение 2 ч до завершения. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (20 мл) и промывали нас. NaHCO₃ (20 мл). Водный слой отделяли и дополнительно экстрагировали ДХМ (20 мл). Объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали автоматической колоночной хроматографией, используя EtOAc в гептане (градиент 0-100%) с получением соединения, указанного в заголовке, в виде бесцветного масла (63 мг, 44%).

ЖХМС: m/z 973/975/977 [М+Н]⁺.

Стадия 4. Циклопентил-(2R)-4-{[2-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)этил]амино}пиперидин-2-карбоксилат

К раствору 1-трет-бутил-2-циклопентил-(2R)-4-{[(4-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)ацетил]амино}пиперидин-1,2-дикарбоксилата (63 мг, 0,065 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли 4 Μ HCl в диоксане (2 мл), и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 17 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, и полученный в результате остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением соли диформиата соединения, указанного в заголовке, в виде коричневого твердого вещества (11,1 мг, 30%).

ЖХМС чистота 96%, m/z 573/575/ 577 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 8.57 (2Н, br, s), 8.04 (1Н, s), 7.92 (1Н, s), 7.39-7.57 (3Н, m), 7.32 (1Н, s), 5.18-5.35 (1Н, m), 4.96 (2Н, s), 4.28-4.42 (2Н, m), 3.77 (1Н, d, J=11.1 Гц), 3.21-3.30 (2Н, m), 2.82-3.05 (2Н, m), 2.35-2.46 (1Н, m), 2.03-2.14 (1Н, m), 1.83-1.97 (2Н, m), 1.74 (9Н, br, s)

Пример 56: Циклопентил-(2S)-4-{[2-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)этил]амино}пиперидин-2-карбоксилата диформиат

Циклопентил-(2S)-4-{[2-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)этил]амино}пиперидин-2-карбоксилат был получен аналогично Примеру 55, используя Промежуточное соединение 23 на стадии 3 пути, представленного на схеме 30.

ЖХМС: чистота 98%, m/z 573/575/577 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 8.19-8.87 (2Н, m), 8.04 (1Н, s), 7.92 (1Н, s), 7.37-7.56 (3Н, m), 7.22-7.36 (1Н, m), 5.17-5.33 (1Н, m), 4.96 (2Н, s), 4.27-4.42 (2Н, m), 3.78 (1Н, d, J=11.5 Гц), 3.23-3.29 (2Н, m), 2.80-3.07 (2Н, m), 2.33-2.52 (1Н, m), 2.02-2.15 (1Н, m), 1.83-2.00 (2Н, m), 1.74 (9Н, d, J=3.8 Гц).

Пример 57: Циклопентил-N-[2-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)этил]-L-лейцинат

Циклопентил-N-[2-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)этил]-L-лейцинат был получен аналогично Примеру 55, используя свободное основание Промежуточного соединения 32 на стадии 3 и ДХМ в качестве растворителя на стадии 4 пути, представленного на схеме 30. Конечный продукт очищали препаративной ВЭЖХ.

ЖХМС: чистота 99%, m/z 560/562/564 [М+Н]⁺

¹Н ЯМР (300 МГц, CD₃OD) δ млн^-1: 8.06 (1Н, s), 7.90 (1Н, s), 7.40-7.52 (3Н, m), 7.34 (1Н, s), 5.10-5.20 (1Н, m), 4.95 (2Н, s), 4.26 (2Н, t, J=5.8 Гц), 3.01-3.19 (2Н, m), 2.83-2.96 (1Н, m), 1.53-1.90 (9Н, m), 1.38-1.47 (2Н, m), 0.89 (6Н, d, J=2.6 Гц).

Пример 58: трет-Бутил-N-[2-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1 Н-пиразол-1-ил)этил]-L-лейцинат

трет-Бутил-N-[2-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-1Н-пиразол-1-ил)этил]-L-лейцинат был получен аналогично Примеру 55, используя L-лейцина трет-бутилового эфира гидрохлорид на стадии 3 и ДХМ в качестве растворителя на стадии 4 пути, представленного на схеме 30. Конечный продукт очищали препаративной ВЭЖХ.

ЖХМС: чистота 95%, m/z 548/550/552 (М+Н)⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ млн^-1: 8.06 (1Н, s), 7.90 (1Н, s), 7.40-7.52 (3Н, m), 7.34 (1Н, s), 5.10-5.20 (1Н, m), 4.95 (2Н, s), 4.26 (2Н, t, J=5.8 Гц), 3.01-3.19 (2Н, m), 2.83-2.96 (1Н, m), 1.53-1.90 (9Н, m), 1.38-1.47 (2Н, m), 0.89 (6Н, d, J=2.8 Гц).

Пример 59. Циклопентил-4-[(5-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}пиридин-2-ил)метил]пиперазин-2-карбоксилат

1-трет-Бутил-2-циклопентил-4-[(5-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}пиридин-2-ил)метил]пиперазин-1,2-дикарбоксилат (0,078 г, 0,081 ммоль) перемешивали с трифторуксусной кислотой (ТФУ) (3 мл) в дихлорметане (3 мл) в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали ВЭЖХ с получением соединения, указанного в заголовке, (28 мг).

ЖХМС чистота 100%, m/z 556/558 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) 9.13 (1Н, d, J=1.7 Гц), 8.23 (1Н, dd, J=2.3, 8.1 Гц), 7.93 (1Н, s), 7.47 (1Н, d, J=8.1 Гц), 7.37-7.34 (2Н, m), 7.20 (1Н, dd, J=7.4, 8.7 Гц), 5.25-5.19 (1Н, m), 5.03 (2Н, d, J=5.5 Гц), 4.60 (1Н, t, J=5.5 Гц), 4.36 (2Н, s), 3.77 (1Н, d, J=13.9 Гц), 3.67 (1Н, d, J=13.9 Гц), 3.58 (1Н, dd, J=3.2, 8.1 Гц), 3.13-3.06 (1Н, m), 2.99-2.86 (2Н, m), 2.69-2.63 (1Н, m), 2.53-2.47 (1Н, m), 2.39-2.31 (1Н, m), 1.89-1.54 (9Н, m).

1-трет-Бутил-2-циклопентил-4-[(5-{5-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-6-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}пиридин-2-ил)метил]пиперазин-1,2-дикарбоксилат, используемый в описанном выше способе, был получен путем взаимодействия ди-трет-бутил{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дифторбензил)амино]-5-(6-формилпиридин-3-ил)пиразин-2-ил}имидодикарбоната (100 мг, 0,15 ммоль) с Промежуточным соединением 28 (49 мг, 0,16 ммоль) в ДХЭ (5 мл) при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (63 мг, 0,30 ммоль), и перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли насыщенный водный раствор Na₂CO₃ (20 мл), и энергичное перемешивание продолжали в течение 20 мин. Реакционную смесь экстрагировали дихлорметаном (3×20 мл), высушивали (MgSO₄) и концентрировали при пониженном давлении. Остаточное желтое масло очищали колоночной хроматографией (силикагель; 50% EtOAc в гептанах) с получением желаемого продукта (78 мг) в виде бесцветного масла. ЖХМС: m/z 956/958 [М+Н]⁺.

Ди-трет-бутил{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дифторбензил)амино]-5-(6-формилпиридин-3-ил)пиразин-2-ил}имидодикарбонат, используемый выше, был получен путем растворения ди-трет-бутил{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-[6-(гидроксиметил)пиридин-3-ил]пиразин-2-ил}имидодикарбонат (100 мг, 0,15 ммоль) в дихлорметане (5 мл) и добавления диоксида марганца (257 мг, 3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, а затем фильтровали через целлит®. Фильтрационный кек промывали дихлорметаном (2×10 мл), и объединенные фильтраты концентрировали при пониженном давлении с получением оранжевого масла (100 мг), которое использовали без очистки.

Ди-трет-бутил{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-[6-(гидроксиметил)пиридин-3-ил]пиразин-2-ил}имидодикарбонат, используемый выше, был получен путем перемешивания ди-трет-бутил{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-[6-({[трет-бутил(диметил)силил}окси}метил)пиридин-3-ил]пиразин-2-ил}имидодикарбоната (1,22 г, 1,5 ммоль) с тетрабутиламмония фторидом (3 мл, 3 ммоль 1 н. в ТГФ) в ТГФ (20 мл) при комнатной температуре в течение 17 ч. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали водой (2×50 мл) и соляным раствором (1×50 мл). Объединенные органические слои высушивали (MgSO₄) и концентрировали при пониженном давлении. Полученную в результате бледно-желтую пену очищали колоночной хроматографией (силикагель; 80% EtOAc в гептанах) с получением желаемого вещества (809 мг) в виде бесцветного масла, которое отвердевало до белого твердого вещества при стоянии. ЖХМС: m/z 676/678 [М+Н]⁺.

Ди-трет-бутил{3-[(трет-бутоксикарбонил)(2,6-дихлорбензил)амино]-5-[6-({[трет-бутил(диметил)силил}окси}метил)пиридин-3-ил]пиразин-2-ил}имидодикарбонат, используемый выше, был получен из Промежуточного соединения 4 (1,0 г, 1,5 ммоль) и 2-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин (0,81 г, 2,3 ммоль), который добавляли к ДМЭ (20 мл) и 1,9 мл 2 Μ Na₂CO₃, а затем полученную в результате смесь дегазировали N₂ в течение 20 мин. Дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II) (108 мг, 0,2 ммоль) добавляли к реакционной смеси, которую нагревали при 80°С в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали и разбавляли EtOAc (50 мл) и фильтровали через целлит®. Фильтрационный кек промывали EtOAc (50 мл), и объединенный фильтрат промывали соляным раствором (1×50 мл), высушивали MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 20% EtOAc в гептане) с получением желаемого вещества (1,22 г).

2-({[трет-Бутил(диметил)силил]окси}метил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин, используемый в вышеописанном способе, был получен из 5-бром-2-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)пиридина (1,8 г, 6,0 ммоль), бис(пинаколато)дибор (1,81 г, 7,1 ммоль) и PdCl₂(dppf)₂ (218 мг, 0,3 ммоль) аналогично Промежуточному соединению 8 с получением желаемого продукта (1,1 г) в виде бледно-зеленого масла. ЖХМС: m/z 268 [М+Н]⁺.

5-Бром-2-({[трет-бутил(диметил)силил]окси}метил)пиридин, используемый в описанном выше способе, был получен из 5-бром-2-гидроксиметилпиридина (2,5 г, 13 ммоль), который растворяли в ДМФ (25 мл) и добавляли имидазол (1,81 г, 27 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилхлорид (2,20 г, 15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 50 мин, а затем наливали в воду (50 мл). Эту смесь экстрагировали диэтиловым эфиром (3×50 мл), и объединенные органические слои промывали соляным раствором (1×50 мл), высушивали (MgSO₄) и концентрировали при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель; 5% EtOAc в гептанах) с получением желаемого вещества (3,75 г) в виде бесцветного масла. ЖХМС: m/z 302/304 [М+Н]⁺.

Измерение биологических активностей

Активность CSF1R (FMS) киназы

Способность соединений к ингибированию активности CSF1R (FMS) киназы измеряли в анализе, проводимом фирмой Invitrogen (Paisley, UK). В биохимическом анализе Z'-LYTE™ используют формат флуоресцентно-сопряженного ферментного анализа, основанного на дифференциальной чувствительности фосфорилированных и нефосфорилированных пептидов к протеолитическому расщеплению. Пептидный субстрат метят двумя флуорофорами, по одному на каждом конце, составляющими пару резонансного переноса энергии флуоресценции (FRET; от англ. "Fluorescence Resonance Energy Transfer"). При первичной реакции киназа переносит гамма-фосфат АТФ на отдельный остаток серина или треонина в синтетическом FRET-пептиде. При вторичной реакции сайт-специфичная протеаза распознает и расщепляет нефосфорилированные FRET-пептиды. Фосфорилирование FRET-пептидов подавляет расщепление проявляющего реагента. Расщепление прерывает FRET между донорным (то есть кумарином) и акцепторным (то есть флуоресцеином) флуорофорами на FRET-пептиде, тогда как нерасщепленные фосфорилированные FRET-пептиды поддерживают FRET. Радиометрический способ, с помощью которого вычисляют отношение (отношение испускания) испускания донора к испусканию акцептора после возбуждения донорного флуорофора при 400 нм используют для количественного определения хода реакции.

Конечная киназная реакция объема 10 мкл состоит из 0,12-12,3 нг CSF1R (FMS), 2 мкМ пептида Tyr 01 и АТФ в 50 мМ N-2-гидрокси-этилпиперазин-№2-этансульфоновой кислоте (ГЭПЭС) рН 7,5, 0,01% BRIJ-35, 10 мМ MgCl2, 1 мМ этиленгликольтетрауксусной кислоты (ЭГТА). Этот анализ проводят при концентрации АТФ, равной или близкой к Km. После 60-минутной инкубации киназной реакции при комнатной температуре добавляют 5 мкл разведения 1:256 проявляющего реагента. Аналитический планшет инкубируют в течение еще 60 минут при комнатной температуре и считывают на считывающем устройстве флуоресценции для планшетов.

Повторы точечных данных получают из серии логарифмических разведений 1/3 исходного раствора тестируемого соединения в ДМСО. Проводят девять стадий разведения самой высокой концентрации, составляющей 10 мМ, и включают чистый контроль 'без соединения'. Данные собирают и анализируют, используя программу XLfit от IDBS. Кривая доза-ответ представляет собой кривую, соответствующую модели 205 (сигмоидная модель доза-ответ). Из полученной кривой определяют и указывают концентрацию, дающую 50% ингибирование.

Стимуляция макрофагального колониестимулирующего фактора (MCSF; от англ. "Macrophage colony-stimulating factor") цельной крови человека

Цельную кровь брали путем венопункции, используя гепаринизированный вакуумный контейнер (Becton Dickinson), и разводили ее равным объемом среды для культивирования тканей RPMI1640 (Sigma). 100 мкл высевали в 96-луночные обработанные планшеты для тканевых культур с V-образными лунками. Через 2 часа после добавления ингибитора в 100 мкл среды RPMI1640 кровь стимулировали MCSF (Peprotech: #300-25-10uG) при конечной концентрации 50 нг/мл и инкубировали при 37°С в 5% CO₂ в течение 22 ч. Уровни МСР-1 измеряли в бесклеточных супернатантах с помощью сэндвич-ELISA (твердофазного иммуноферментного анализа; от англ. "enzyme-linked immunosorbent assay"), разработанного на основании набора МСР-1/CCL2 Duoset (R&D Systems #DY279). Дополнительные реагенты, необходимые для анализа ELISA, были приобретены у фирм Sigma (бычий сывороточный альбумин (БСА): А3059, 10х фосфатно-солевой буфер (ФСБ): D1408, Твин 20: Р5927), R&D Systems (красящий реагент: #DY999 и останавливающий раствор: #DY994) и Costar (96-луночные планшеты EIA: #2592). Анализы проводили, следуя инструкциям изготовителя, со следующими модификациями: Бесклеточные супернатанты разводили 30:70 в реагенте для разведения перед анализом. Все инкубации, за исключением иммобилизованного антитела, проводят при встряхивании при 550 об/мин. Между стадиями проводили 3 отмывки, и периоды инкубации представляли собой: блокирование 1,5 ч, инкубации образец/стандарт и идентифицирующее антитело 2 ч, инкубация с пероксидазой хрена (HRP; от англ. "horseraddish peroxidase") 30 мин, проявление окрашивания 20 мин.

Значения IC₅₀ распределяли в один из пяти диапазонов, как описано ниже:

Диапазон A: IC₅₀ менее 100 нМ

Диапазон В: IC₅₀ более 100 нМ, менее 300 нМ

Диапазон С: IC₅₀ более 300 нМ, менее 1000 нМ

Диапазон D: IC₅₀ более 1000 нМ, менее 5000 нМ

Диапазон Е: IC₅₀ более 5000 нМ

НТ = не тестировали

Пример	Ингибиторная активность против CSF-1	Ингибиторная активность против МСР-1
1	А	С
2	В	С
3	В	С
4	В	НТ
5	А	D
6	В	С
7	А	В
8	А	В
9	С	А
10	D	А
11	С	А
12	Е	НТ
13	D	НТ
14	В	С
15	Е	НТ
16	D	НТ
17	А	НТ
18	В	В
19	А	А
20	D	А
21	А	С
22	А	С
23	С	С
24	С	НТ
25	В	С
26	А	С
27	В	А
28	В	А
29	НТ	D
30	В	В
31	В	А
32	В	D
33	В	D
34	А	В
35	А	С
36	С	В
37	С	А
38	Е	Е
39	Е	Е
40	Е	D
41	D	НТ
42	Е	С
43	Е	Е
44	Е	Е
45	D	D
46	А	С
47	А	С
48	D	С
49	D	D
50	А	В
51	А	В
52	НТ	В
53	В	НТ
54	В	НТ
55	В	В
56	В	С
57	D	D
58	Е	Е
59	В	НТ

1. Соединение, представляющее собой аминокислоту или сложный эфир аминокислоты формулы (I), или его фармацевтически приемлемая соль:

,

где

кольцо А представляет собой фенильную группу, где кольцевая группа А является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, гидроксила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил;

R¹ и R² независимо представляют собой атом водорода, атом галогена или незамещенный С_1-4 алкил;

n равно 1;

X представляет собой NH;

V представляет собой -N= и W представляет собой -C(Z)=;

Z представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора или незамещенный C_1-3 алкил;

кольцо В представляет собой 1,4-фениленовую группу, 1,3-фениленовую группу или пиридинильную группу, где кольцевая группа В является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, гидроксила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный C_1-2 алкил;

[Линкер] представляет собой группу -(CH₂)_m-X¹-(Alk¹)_x-Y¹, где

m равно 0, 1, 2 или 3; x равен 0 или 1; Alk¹ представляет собой незамещенную С_1-3 алкиленовую группу; X¹ и Y¹ независимо представляют собой связь, -О-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃;

R представляет собой группу формулы (X) или (Y):

,

в которых

R⁸ представляет собой группу -СООН или сложноэфирную группу формулы -(C=O)OR¹⁴, где R¹⁴ представляет собой R¹⁵R¹⁶R¹⁷C-, где любой R¹⁵ представляет собой атом водорода или С_1-3алкил-(Z¹)_а-[(С₁-С₃)алкил]_b-, где а и b независимо равны 0 или 1 и Z¹ представляет собой -О-, -S- или -NH-, и R¹⁶ и R¹⁷ независимо представляют собой атом водорода или С_1-3 алкил-; либо R¹⁵ и R¹⁶, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3-7-членное циклоалкильное кольцо, и R¹⁷ представляет собой атом водорода;

где (i) R⁹ и R¹⁰ представляют собой боковые цепи природных аминокислот, (ii) один из R⁹ и R¹⁰ представляет собой атом водорода или незамещенный С_1-4 алкил, а другой представляет собой незамещенную C_1-6 алкильную группу или C_1-6 алкильную группу, замещенную С_1-4 алкоксигруппой, либо (iii) R⁹ и R¹⁰, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют насыщенное спиро-циклобутильное кольцо;

R¹¹ представляет собой атом водорода или незамещенную С_1-2 алкильную группу;

кольцо D представляет собой 5-7-членную насыщенную гетероциклильную группу, имеющую по меньшей мере один атом азота в кольце, где R⁸ и R¹¹ связаны с кольцевым атомом углерода, соседним с кольцевым атомом азота, и где связь, показанная как пересеченная волнистой линией, может исходить от атома азота или от атома углерода в кольце D;

где, когда R представляет собой (X), [Линкер] не соединен с (X) через атом О, N или S.

2. Соединение по п.1, где любой R¹⁴ представляет собой циклопентил или трет-бутил.

3. Соединение по п.1, где R представляет собой группу формулы (Y1):

,

где кольцо D представляет собой 5-7-членную насыщенную гетероциклильную группу, имеющую по меньшей мере два атома азота в кольце, где R⁸ и R¹¹ связаны с кольцевым атомом углерода, соседним с кольцевым атомом азота, и где связь, показанная как пересеченная волнистой линией, исходит от атома азота в кольце D.

4. Соединение по п.1, где R представляет собой группу формулы (Y2):

,

где кольцо D представляет собой 5-7-членную насыщенную гетероциклильную группу, имеющую по меньшей мере один атом азота в кольце, где R⁸ и R¹¹ связаны с кольцевым атомом углерода, соседним с кольцевым атомом азота, и где связь, показанная как пересеченная волнистой линией, исходит от атома углерода в кольце D.

5. Соединение по п.1, где R¹ и R² каждый представляет собой атом водорода.

6. Соединение по п.5, где Z представляет собой атом водорода.

7. Соединение по п.5, где группа [Линкер]-R представляет собой одно из (а)-(с):

(a) R представляет собой группу формулы (X);

R⁹ и R¹⁰ представляют собой боковые цепи природных аминокислот либо один из R⁹ и R¹⁰ представляет собой атом водорода или незамещенный С_1-4 алкил, а другой представляет собой незамещенную С_1-6 алкильную группу;

[Линкер] представляет собой -(CH₂)_m-X¹-(Alk¹)- или -(CH₂)_v-, где v равно 1 или 2, m равно 0, 1, 2 или 3; Alk¹ представляет собой незамещенную С_1-3 алкиленовую группу, и X¹ представляет собой связь, -О-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил, и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃;

(b) R представляет собой группу формулы (Y1), как определено в п.3; [Линкер] представляет собой -(CH₂)_m-X¹-(Alk¹)_x- или -(CH₂)_v-, где v равно 1 или 2, m равно 0, 1, 2 или 3; x равно 0 или 1; Alk¹ представляет собой незамещенную С_1-3 алкиленовую группу; и X¹ представляет собой связь, -О-, -S-, -NR⁷-, -С(=O)- или -C(=O)NR⁵-, где R⁵ представляет собой атом водорода или С_1-4 алкил и R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃, где, когда x равно 0, X¹ представляет собой связь или С(=O);

(c) R представляет собой группу формулы (Y2), как определено в п.4; [Линкер] представляет собой -(CH₂)_m-X¹-(Alk¹)_x-Y¹, где m равно 0, 1, 2 или 3; x равно 0 или 1; X¹ представляет собой связь или -С(=O); Alk¹ представляет собой незамещенную C_1-3 алкиленовую группу; и Y¹ представляет собой связь или -NR⁷-, предпочтительно -NR⁷-, где R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный С_1-4 алкил или -С(=O)СН₃.

8. Соединение по п.7, часть (с), где Y¹ представляет собой -NR⁷-.

9. Соединение по любому из пп.1-8, где

R¹ и R² каждый представляет собой атом водорода;

W представляет собой -С(Н)=; и

кольцо В представляет собой 1,4-фениленовую или 1,3-фениленовую группу, где кольцевая группа В является незамещенной или замещена 1, 2 или 3 заместителями, которые являются одинаковыми или разными и выбраны из атомов галогена и следующих групп: незамещенного С_1-4 алкила, С_1-4 алкокси, гидроксила и -NR³R⁴, где R³ и R⁴ являются одинаковыми или разными и представляют собой атом водорода или незамещенный С_1-2 алкил.

10. Соединение по п.9, где

R представляет собой группу формулы (Y1'):

,

R⁸ представляет собой группу -СООН или сложноэфирную группу формулы -(C=O)OR¹⁴, где R¹⁴ представляет собой R¹⁵R¹⁶R¹⁷C-, где любой R¹⁵ представляет собой атом водорода или С_1-3алкил-(Z¹)_а-[(С₁-С₃)алкил]_b-, где а и b независимо равны 0 или 1, и Z¹ представляет собой -О-, -S- или -NH-, и R¹⁶ и R¹⁷ независимо представляют собой атом водорода или C_1-3 алкил-; либо R¹⁵ и R¹⁶, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3-7-членное циклоалкильное кольцо, и R¹⁷ представляет собой атом водорода;

[Линкер] представляет собой -(CH₂)_v- и -С(=O)-, где v равно 1 или 2.

11. Соединение по п.9, где

R представляет собой группу формулы (Y2'):

,

R⁸ представляет собой группу -СООН или сложноэфирную группу формулы -(C=O)OR¹⁴, где R¹⁴ представляет собой R¹⁵R¹⁶R¹⁷C-, где любой R¹⁵ представляет собой атом водорода или С_1-3алкил-(Z¹)_a-[(С₁-С₃)алкил]_b-, где а и b независимо равны 0 или 1 и Z¹ представляет собой -О-, -S- или -NH-, и R¹⁶ и R¹⁷ независимо представляют собой атом водорода или С_1-3 алкил-; либо R¹⁵ и R¹⁶, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3-7-членное циклоалкильное кольцо, и R¹⁷ представляет собой атом водорода;

[Линкер] представляет собой -C(=O)NR⁷-, -CH₂NR⁷- или -CH₂C(=O)NR⁷-, где R⁷ представляет собой атом водорода, незамещенный метил, незамещенный этил, незамещенный изобутил или -С(=O)СН₃.

12. Соединение по п.1, представляющее собой:

циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат;

циклопентил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат;

циклопентил-(2S)-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат;

циклопентил-(2R)-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат;

циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-хлорбензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат;

циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-2-карбоксилат;

циклопентил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(метил)амино]пиперидин-2-карбоксилат;

трет-бутил-(2R)-4-[(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)(этил)амино]пиперидин-2-карбоксилат;

циклопентил-(2R)-4-[ацетил(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]пиперидин-2-карбоксилат;

циклопентил-(2R)-4-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат;

циклопентил-1-[(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)амино]циклобутанкарбоксилат;

циклопентил-N-[2-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}фенил)этил]-2-метилаланинат;

циклопентил-4-(4-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}-2-этилбензил)пиперазин-2-карбоксилат; или

циклопентил-(2S)-4-(3-{5-амино-6-[(2,6-дихлорбензил)амино]пиразин-2-ил}бензил)пиперазин-2-карбоксилат.

13. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении CSF-1R киназы, содержащая соединение по любому из пп.1-12 в эффективном количестве и один или более фармацевтически приемлемых носителей и/или эксципиентов.

14. Соединение по любому из пп.1-12 для применения при лечении заболевания или расстройства, опосредованного CSF-1R киназой.

15. Соединение по п.14 для применения при лечении клеточно-пролиферативного заболевания, полиглутаминового заболевания, нейродегенеративного заболевания, аутоиммунного заболевания, диабета, гематологического заболевания, воспалительного заболевания, сердечно-сосудистого заболевания, атеросклероза или воспалительного осложнения инфекции.

16. Соединение по п.15 для применения при лечении рака, ревматоидного артрита, псориатического артрита, диабета типа 1, астмы, воспалительного кишечного заболевания, системной красной волчанки, воспаления, сопутствующего инфекционным состояниям, псориаза, болезни Крона, неспецифического язвенного колита, хронической обструктивной болезни легких, рассеянного склероза, атопического дерматита или болезни трансплантат против хозяина.

17. Способ лечения или предупреждения заболевания или расстройства, опосредованного CSF-1R киназой, у субъекта, включающий введение этому субъекту эффективного количества соединения по любому из пп.1-12.

18. Применение соединения по любому из пп.1-12 для получения лекарственного средства, применяемого при лечении или предупреждении заболевания или расстройства, опосредованного CSF-1R киназой.