Способ моделирования вторичного иммунодефицита на мелких лабораторных животных

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования иммунодефицитного состояния, обусловленного нарушением функций клеток врожденного иммунитета. Для этого в перитонеальную полость мелких лабораторных животных вводят стерильную 1% пептонную воду в объеме 0,2 мл. Через 18 часов после введения животных размещают на 4 часа в воздушном термостате при температуре +30°С с принудительной вентиляцией, при относительной влажности воздуха 60-68%, атмосферном давлении 744-760 мм рт.ст. и содержании O2 и CO2 соответственно 20,5% и 0,10%. Способ обеспечивает адекватное воспроизведение физиологических условий нахождения организма в реальной среде при моделировании вторичного иммунодефицита, связанного с дефектом клеток врожденного иммунитета (нейтрофилов и макрофагов), контролирующих первую линию обороны организма от инфекций. 2 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к области экспериментальной и клинической медицины, а именно к фундаментальной иммунологии, и может быть использовано для создания экспериментальной модели иммунодефицитного состояния, обусловленного нарушением функций клеток врожденного иммунитета с целью изучения патогенеза заболеваний и разработки методов коррекции иммунной недостаточности.

Многие исследования в области иммунологии выполняются на животных с искусственно созданными дефектами иммунной системы. Из практики известен ряд способов снижения иммунитета, в частности снижения функциональной способности клеток врожденного иммунитета. Среди них - способ создания количественной депрессии нейтрофильных гранулоцитов в результате хирургического удаления вилочковой железы (тимэктомии). При этом депрессивный эффект обусловлен торможением дифференцировки стволовой клетки в направлении гранулоцитопоэза (Р.В. Петров, Р. М. Хаитов и др. "Влияние тимэктомии на гранулоцитопоэз", Радиобиология, 1976. - N 4, с. 560). Однако следует учитывать, что этот метод трудоемок, требует специальных навыков и аппаратуры и является достаточно длительным.

Существует способ моделирования иммунодефицита, который заключается в угнетении клеточного иммунитета экспериментальных животных путем бесконтактного воздействия на них постоянным электрическим полем 100-110 кВт/м в течение 20-22 дней с ежедневной четырехчасовой экспозицией (Авт. св. СССР N 1763459, G 09 В 23/28). К недостаткам данного способа моделирования относится длительность проведения манипуляций для достижения иммунодефицитного состояния и проявление этого состояния в дефектности функций клеток приобретенного иммунитета, а именно Т- и В-лимфоцитов.

Существуют способы моделирования иммунодефицитного состояния по системе нейтрофильных гранулоцитов, при которых внутрибрюшинно вводятся либо гепарин в дозе 100 мг/кг веса мыши, либо антипролиферативное средство - циклофосфамид в дозе 0,5 мг/кг, что позволяет добиваться максимальной депрессии количества этих клеток в периферической крови и угнетения их функций соответственно через 1 ч и через 15 ч после введения препарата (Авт. св. РФ №2107330, G09В 23/28; Авт. св. №2118850, РФ, G09В 23/28). Недостатками этих способов является моделирование дефектных функций только одного типа клеток врожденного иммунитета - нейтрофилов, а также возникновение целого ряда осложнений в ответ на введение препарата - развитие геморрагий, гипокоагуляций, приводящих к летальному исходу. Следует также учитывать индивидуальную непереносимость гепарина и появление аллергических реакций при его введении, а также алкилирующее воздействие циклофосфамида на ДНК клеток всего организма, которое выражается в его генотоксичности.

Наиболее близким к заявляемому нами техническому решению является способ моделирования дефекта макрофагов путем насыщения брюшной полости животных 0,6%-ным раствором перекиси водорода в количестве 2 мл на мышь, что позволяет провести блокаду миелопероксидазы этих клеток. При этом достигается достоверное снижение содержания активной пероксидазы перитонеальных макрофагов и их функциональной активности в отношении микобактерий лепры или туберкулеза (Авт. св. РФ №2105352, G09В 23/28). К недостаткам данного способа моделирования относится ограниченность применения модели, подходящей для узкого спектра патогенных факторов (лепры, туберкулеза). Кроме того, данная модель не соответствует физиологическим условиям нахождения организма в реальной среде и индуцируют функциональную недостаточность только одного типа клеток врожденного иммунитета - макрофагов. Этот способ принят нами в качестве прототипа.

Известно, что иммунодефицитные состояния клеток врожденного иммунитета (полиморфноядерных лейкоцитов, моноцитов/макрофагов) рассматриваются как фактор риска для развития многих патологических процессов. Большинство проникающих в организм инфекционных агентов подвергаются утилизации фагоцитирующими клетками даже без заметной стимуляции других звеньев иммунитета, поскольку эти клетки наиболее чувствительны к внешним воздействиям. При развитии патологий большое прогностическое значение принадлежит сценарию развертывания воспалительного процесса, стержнем которого являются патоген-опосредованные повреждения клеточных факторов врожденного иммунитета, в дальнейшем определяющих течение и исход заболеваний.

Известно, что повышенный риск развития воспалительных процессов инфекционного генеза имеет место при резкой смене температурного фактора внешней среды, например, при межрегиональных перемещении «из зимы в лето и обратно». Кроме того, высокая температура обладает более выраженным стрессовым воздействием на защитную систему организма, инициируя таким образом иммунодефицитное состояние. В связи с этим для правильного подбора адекватных иммунокорректоров функций клеток врожденного иммунитета при воспалительных заболеваниях инфекционного генеза необходимо создание экспериментальной модели иммунодефицитного состояния с выраженной функциональной недостаточностью этих клеток.

Целью предлагаемого способа является моделирование реальных физиологических условий для индукции вторичного иммунодефицитного состояния по системе клеток врожденного иммунитета - нейтрофилов и макрофагов. Для этого необходимо решить следующие задачи: а) изучить влияние температурного фактора на функцию клеток врожденного иммунитета животных, подвергнутых воздействию высокой температуры; б) определить временной интервал, после которого развивается максимальный депрессирующий эффект высокой температуры по отношению к клеткам врожденного иммунитета этих животных; в) доказать влияние вызванного действием высокой температуры иммунодефицита на патогенез инфекционного заболевания.

Техническим результатом и преимуществом предлагаемого способа моделирования является адекватное воспроизведение физиологических условий нахождения организма в реальной среде, а также бесконтактное воздействие, которое снижает количество летальных исходов и осложнений, возникающих при использовании фармакологических веществ. Кроме того, в предлагаемом способе моделирования вторичного иммунодефицита целенаправленно создаются условия для индукции дефектов клеток врожденного иммунитета (нейтрофилов и макрофагов), контролирующих первую линию обороны организма от инфекций.

Для достижения технического результата поставленной задачи в предлагаемом способе моделирования вторичного иммунодефицита на мелких лабораторных животных, включающем создание функциональной недостаточности клеток врожденного иммунитета, согласно изобретению предварительно в перитонеальную полость каждого животного вводят стерильную 1% пептонную воду в объеме 0,2 мл и через 18 часов осуществляют нагревание животных в течение 4-х часов в воздушном термостате при температуре +30°С с принудительной вентиляцией, при относительной влажности воздуха 60-68%, атмосферном давлении 744-760 мм рт.ст., содержании O2 и CO2 соответственно 20,5% и 0,10%.

Новизна предлагаемого способа заключается в том, что после 4 часов воздействия высокой температуры выявляется максимальное угнетение метаболизма и функциональной активности клеток врожденного иммунитета - нейтрофилов и макрофагов. Животных с индуцированным вторичным иммунодефицитом используют в качестве модели для изучения патогенеза инфекционных заболеваний.

Изобретательский уровень предложения заключается в его неочевидности. Авторам изобретения неизвестно использование предлагаемого способа для моделирования вторичного иммунодефицита. При этом обеспечивается его лучшая воспроизводимость.

Воспроизводимость способа моделирования вторичного иммунодефицита осуществлена в эксперименте, проведенном на 100 беспородных белых мышах весом 15-20 г, которые были разделены на 4 группы: 1-я - интактные, незараженные мыши (контроль 1, 10 шт. ), 2-я - незараженные животные, подвергнутые воздействию высокой (+30°С) температуры, (контроль 2, 30 шт. ); 3-я - животные, зараженные Y. pseudotuberculosis без температурного воздействия, 30 шт.; 4-я - опытные животные, подвергнутые воздействию высокой (+30°С) температуры и зараженные Y. pseudotuberculosis, 30 шт. За 18 часов до проведения эксперимента у животных вызывали внутрибрюшинное воспаление путем введения стерильной 1% пептонной воды в количестве 0,2 мл на мышь. Создание иммунодефицитного состояния осуществляли нагреванием животных в течение 2, 3 и 4 ч в воздушном термостате при температуре +30°С с принудительной вентиляцией при относительной влажности воздуха 60-68%, атмосферном давлении 744-760 мм рт.ст., содержании O2 и CO2 соответственно 20,5% и 0,10%. Оптимальный объем рабочей камеры воздушного термостата - 0,064 кубического метра. Измерение температуры нагреваемых животных производилось ректальным ртутным термометром с ценой деления 0,1°С. Затем у животных производили отбор клеток из перитонеального экссудата, промывая брюшную полость 5 мл холодной среды 199, содержащей 20% эмбриональной телячьей сыворотки и гепарин (5 ед./мл). Концентрацию клеток доводили до 2×106 кл/мл и разносили по 1 мл в пенициллиновые флаконы с помещенными внутрь покровными стеклами, куда вносили бактерии в соотношении 1:20, и в плоскодонные 96-луночные микропланшеты по 100 мкл на лунку. Для адгезии взвесь клеток оставляли в CO2-инкубаторе (МСО-15АС) при 37°С и 5% содержания CO2, через 40 мин монослой клеток дважды отмывали средой того же состава от неадгезированных клеток, после чего исследовали активность ферментов. Степень функциональной недостаточности клеток определяли по состоянию цитохимической ферментативной активности для составляющих элементов кислородзависимой системы: лактатдегидрогеназа (ЛДГ), цитохромоксидаза (ЦХО), миелопероксидаза (МПО), а также по внутриклеточному содержанию 5'нуклеотидазы (АМФазы) и содержанию оксида азота (NO) через 2, 3, и 4 ч после температурного воздействия на животных. Количество продуктов реакции определяли по поглощению раствора на спектрофотометре "Labsystem Multiscan RC" (Финляндия) при соответствующих для определяемых субстратов длинах волн. Результаты спектрофотометрического исследования выражали в виде индекса стимуляции (Т), который вычислялся как отношение разности между средними показателями оптической плотности растворов, содержащих продукты реакции клеток животных после воздействия температуры и клеток от интактных животных, к среднему показателю оптической плотности раствора для клеток от интактных животных, в процентах.

Также определяли фагоцитарные показатели клеток в отношении бактерий Y. Pseudotuberculosis после контакта в течение 30 и 120 мин. Помимо определения функциональной активности клеток проводили гистологическое исследование органов-мишеней (легкое, печень, селезенка) животных через 1, 2, 3, 7, 14 и 21 суток после заражения путем фиксации в 10% растворе формалина, забуференного по Лилли, затем обезвоживания в этаноле возрастающей концентрации и заливки в парафин по общепринятой методике. Гистологические срезы толщиной 3-5 мкм депарафинировали, окрашивали гематоксилином и эозином.

Изложенная сущность способа поясняется в описании двумя таблицами. Согласно результатам эксперимента установлено, что воздействие высокой температуры на экспериментальных животных (+30°С) изменяет функциональное состояние клеток врожденного иммунитета по показателям фагоцитоза (табл. 1) и активности ферментов (табл. 2).

Представленные в таблице данные демонстрируют, что наибольшее значение ИЗФ, которое отражает размножение бактерий в клетках, и вычисляется как соотношение разницы между показателями ФИ через 120 мин и ФИ через 30 мин к показателю ФИ через 30 мин, определялось в клетках животных, подвергнутых воздействию высокой температуры (+30°С) в течение 4-х часов. Фермент АМФ-аза локализуется в основном в плазматической мембране клеток и является регулятором уровня циклического аденозинмонофосфата, который обеспечивает передачу сигналов от плазмалеммы внутрь клетки. Понижение активности эктофермента плазмалеммы АМФ под воздействием высокой температуры свидетельствует о снижении этой способности для клеток врожденного иммунитета, минимальный уровень фермента наблюдался через 4 часа после температурного воздействия и у животных, подвергнутых воздействию высокой температуры и зараженных Y. pseudotuberculosis (табл. 2).

Уровень ЛДГ в клетках коррелирует с уровнем энергетического потенциала клеток, по изменению активности ЛДГ оценивают их метаболический статус. Значительное снижение индекса стимуляции для ЛДГ наблюдалось через 4 часа после воздействия температурой, что говорит о снижении защитной способности клеток в этот период. Увеличение количества ЦХО на протяжении всего эксперимента указывает на активацию перекисного окисления липидов, что сопровождается деструкцией митохондриальных мембран. Повышение активности ЦХО при воздействии высокой температуры выявлялось на протяжении всего наблюдаемого периода. При исследовании активности МПО, маркера интенсивности воспалительных процессов было установлено достоверное максимальное снижение индекса стимуляции через 4 часа воздействия высокой температуры.

Подобная закономерность была обнаружена при выявлении показателей активности указанных ферментов в клетках животных, зараженных бактериями. Причем у животных, предварительно до инфицирования подвергнутых тепловому воздействию, индекс стимуляции значительно отличался от показателей активности ферментов клеток животных, зараженных бактериями. При гистологическом исследовании органов после воздействия высокой температуры в течение 4 часов у животных на фоне выраженного геморрагического компонента патологического процесса и слабой клеточной воспалительной реакции отмечалось истощение органов иммунной системы (делимфатизация), что указывало на развитие иммунодефицита. Также у таких животных после заражения обнаружены более тяжелые проявления псевдотуберкулезной инфекции с увеличением показателей летальности в 2,6 раза, по сравнению с животными без теплового стресса, а в органах-мишенях - легком, печени и селезенке, отмечалось резкое нарушение гемоциркуляции в сочетании со значительными деструктивными изменениями, характерными для генерализованной инфекции.

Таким образом, экспериментальные данные показывают, что воздействие высокой температуры (+30°С) может служить способом моделирования иммунодефицитного состояния по системе клеток врожденного иммунитета. Временной интервал, в течение которого развивается максимальный депрессирующий эффект по отношению к клеткам врожденного иммунитета - 4 часа непрерывного температурного воздействия. Именно в этот период значительно снижается киллинговый потенциал фагоцитов и в случае инфицирования утяжеляется течение инфекционного заболевания.

Пример

Мыши весом 20 г вводят однократно внутрибрюшнно стерильную 1% пептонную воду в количестве 0,2 мл. Через 18 часов мышь размещают в воздушном термостате при температуре +30°С с принудительной вентиляцией при относительной влажности воздуха 64%, атмосферном давлении 756 мм рт.ст., содержании O2 - 20,5% и СО2 - 0,10%. Оптимальный объем рабочей камеры воздушного термостата - 0,064 кубического метра.

Через 4 часа нахождения в термостате мышь использована как модель иммунодефицитного состояния клеток врожденного иммунитета (нейтрофилов и макрофагов), т.к. в этот момент у нее отмечалась максимальная депрессия функций этих клеток.

Способ обеспечивает адекватное воспроизведение физиологических условий нахождения организма в реальной среде с целью индукции вторичного иммунодефицитного состояния организма. Преимуществом данного способа моделирования является бесконтактное воздействие, которое снижает количество летальных исходов и осложнений, возникающих при использовании фармакологических веществ. Кроме того, в предлагаемом способе моделирования вторичного иммунодефицита целенаправленно создаются условия для индукции дефектов клеток врожденного иммунитета (нейтрофилов и макрофагов), контролирующих первую линию обороны организма от инфекций.

Источники информации

1. Влияние тимэктомии на гранулоцитопоэз. Петров Р.В., Хаитов P.M. и др. Радиобиология, 1976. - №4, с. 560;

2. Авт. св. СССР №1763459, G09В 23/28;

3. Авт. св. РФ №2107330, G09В 23/28;

4. Авт. св. РФ №2118850, G09В 23/28;

5. Авт. св. РФ №2105352, G09В 23/28.

Способ моделирования вторичного иммунодефицита на мелких лабораторных животных, включающий создание функциональной недостаточности клеток врожденного иммунитета, отличающийся тем, что предварительно в перитонеальную полость каждого животного вводят стерильную 1% пептонную воду в объеме 0,2 мл и через 18 ч осуществляют нагревание животных в течение 4 ч в воздушном термостате при температуре +30°С с принудительной вентиляцией, при относительной влажности воздуха 60-68%, атмосферном давлении 744-760 мм рт.ст., содержании O2 и CO2 соответственно 20,5% и 0,10%.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для снижения гепатоцитолиза в условиях временного выключения печени из кровообращения.

Изобретение относится к области медицины, а именно к морфологии, иммуногистохимии, экспериментальной травматологии и ортопедии. Для оценки заживления переломов трубчатых костей крыс в эксперименте на разных сроках репаративного процесса используют цифровую микрофотографию иммуногистохимического препарата зоны периостальной и интермедиарной костной мозоли.

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохирургии, и может быть использовано при микрохирургической реконструкции спинного мозга. Для этого при моделировании у животного частичного повреждения спинного мозга путем гемосекции используют гидрогель ММ-гель-Р.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции микроциркуляторных нарушений в плаценте. Способ включает воспроизведение ADMA-подобной модели гестоза у лабораторных беременных крыс линии Wistar ежедневным внутрибрюшинным введением с 14 по 20 день беременности ингибитора NO- синтазы L-NAME в дозе 25 мг/кг/сутки.
Изобретение относится к медицине, в частности к фармакологии и офтальмологии, и может быть использовано для профилактики ишемических состояний сетчатки в эксперименте.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и офтальмологии, и может быть использовано для профилактики ишемической нейропатии зрительного нерва.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной кардиофармакологии, и может быть использовано в комплексной оценке активности фармакологических средств на изолированном сердце крысы.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и неврологии, и может быть использовано для профилактики ишемических состояний головного мозга.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть применимо для моделирования реконструкции передней крестообразной связки коленного сустава. Измеряют диаметр полученного трансплантата, сложенного вдвое.
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к патофизиологии, и может быть использовано для прогноза развития патогенетического процесса по культивируемому и некультивируемому типу при инфекционных заболеваниях.
Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к сосудистой хирургии. В гидравлическую систему сосудистого тренажера через канюлю шприца вводят вискоэластик, с последующим формированием анастомозов по типу «край в край, край в бок». Способ позволяет предотвратить трупную деформацию сосудистой системы, повысить тургор тканей, создать наиболее приближенную к нормальной морфологии сосудистую систему, что позволит приобрести хирургические навыки студентам-хирургам, максимально приближенные к реальным операционным условиям.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования эмпиемы плевры. Для этого нелинейной белой крысе однократно под ингаляционным наркозом в плевральную полость вводят препарат блеомицин в дозе 15,0 мг/кг в 1,0 мл физиологического раствора, результат оценивают на 10-е сутки после инъекции. Способ обеспечивает получение III стадии эмпиемы плевры, что позволяет проводить доклиническую апробацию лекарственных средств и других методов для лечения этой стадии заболевания. 3пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для создания модели нарушения кровотока по магистральным артериям. Способ включает выделение магистральной артерии и наложение на нее лигатур. Для этого из пропиленовой сетки выкраивают лоскут длиной от 3-4 см до 7-8 см, шириной 2/3 диаметра выделенной артерии, которым затем оборачивают артерию. После этого на равных промежутках друг от друга накладывают четыре лигатуры поверх лоскута, которые затягивают и моделируют нарушение кровотока от полного прекращения до минимального нарушения в зависимости от силы натягивания лигатур. Способ обеспечивает равномерное сужение магистральной артерии на протяжении, стабильность фиксации, возможность моделирования разной степени нарушения кровотока магистральных артерий. 1 ил., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, и касается профилактики кровотечений, вызванных применением варфарина до хирургического вмешательства. Для этого кроликам-самцам породы шиншилла за один час до операции вводят раствор, содержащий фибрин-мономер в концентрации 11 мг/мл и мочевину в концентрации 150 мг/мл. При этом доза фибрин-мономера составляет 0,25 мг/кг. Способ обладает высокой эффективностью, так как не только снижает объем кровопотери, но и безопасен при использовании. 2 ил.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, и может быть использовано с целью профилактики кровотечения на фоне применения двойной антитромбоцитарной терапии до хирургического вмешательства. Для этого кроликам-самцам породы шиншилла за один час до операции вводят раствор, содержащий фибрин-мономер в концентрации 11 мг/мл и мочевину в концентрации 150 мг/мл. При этом доза фибрин-мономера составляет 0,25 мг/кг. Способ обладает высокой эффективностью, так как не только снижает объем кровопотери, но и безопасен при применении. 2 ил.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к торакальной хирургии и касается моделирования спонтанного разрыва пищевода. Способ включает проведение шейной медиастинотомии, проникновение в клетчатку заднего средостения, мобилизацию пищевода по окружности в верхнем и нижнем направлении, установку в просвет пищевода трубки, соединение ее с манометром, осуществление лапаротомии, создание избыточного давление в пищеводе. При этом пищевод пересекают в поперечном направлении на расстоянии 2-3 см от пищеводно-глоточного перехода, а трубку в просвет пищевода вводят через полученное отверстие по направлению к желудку. Производят циркулярную мобилизацию желудка. После чего от кардиальной розетки вниз на 3-5 см параллельно малой кривизне сшивают стенки желудка с образованием туннеля, переднюю стенку которого затем рассекают на 1,5-2,0 см в продольном направлении. Вводят в просвете туннеля до дистального конца пищевода вторую трубку, наружным диаметром, равным внутреннему диаметру пищевода. Герметизируют полученные соединения. Избыточное давление в пищеводе создают подачей жидкости через эту трубку в объеме 150-200 мл под давлением 0,8-1 бар. Способ позволяет создать модель, приемлемую для изучения изменений в тканях пищевода, а также для возможности обучения владением специальных медицинских инструментов и шовного материала для устранения дефекта пищевода. 3 пр. 3 ил.

Изобретение относится к медицине. Предложен способ моделирования алкогольной кардиомиопатии, заключающийся в принудительной алкоголизации животных 10%-ным водным раствором этанола в течение 13 недель, последующем отборе животных с высоким предпочтением к алкоголю и продолжении алкоголизации до конца 24 недели от начала алкоголизации. Технический результат: к концу 24-й недели формируется дилатационная алкогольная кардиомиопатия, которая характеризуется значительным угнетением сократительной функции и статистически значимой дилатацией левого желудочка; по окончании 24-й недели алкоголизации крыс порог электрической фибрилляции желудочков сердца снижался на 47%; уровень гамма-глутамилтрансферазы в плазме крови алкоголизированных животных был в три раза выше, чем у контрольных. Таким образом, предложенная модель кардиомиопатии достаточно полно отражает ситуацию, наблюдаемую в клинике у пациентов, страдающих алкогольной кардиомиопатией, и может рассматриваться как трансляционная модель этого заболевания. 3 ил., 3 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицинским моделям и может найти широкое применение, преимущественно, в хирургической стоматологии, как для обучения медицинского персонала, так и для тестирования хирургического оборудования, например роботизированного мультифункционального лазерного хирургического комплекса для малоинвазивной терапии онкологической патологии органов и тканей головы, шеи и челюстно-лицевой области. Предлагаемая искусственная десна для имитации воздействия на биологическую ткань лазерного излучения состоит из затвердевшего 5-25% водного раствора желатина с добавлением аминоуксусной кислоты или пролина, взятых в количестве 8-10 мас.% к общему количеству раствора. Технический результат - расширение технологических возможностей изготовления искусственной десны из доступного материала для использования стоматологического фантома в малоинвазивном лазерном хирургическом оборудовании. 1 табл., 2 пр., 3 ил.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к изучению терапевтического воздействия фокусированного ультразвука на сосуды. Способ экспериментальной оценки эффективности воздействия ультразвука включает использование каудальной вены кролика. Для этого, при выполнении верхнесрединной лапаротомии, открывают доступ к каудальной вене, подводят под нее лигатуру и прошивают участок вены в продольном направлении, образуя пару параллельных каналов с сохранением кровотока, по меньшей мере, в одном из них. Технический результат изобретения состоит в том, что модель сосуда, по своим размерам сопоставимая с большой подкожной веной человека, значительно повышает достоверность исследований, а продольная прошивка вены дает возможность проведения хронических экспериментов с включенным и выключенным кровотоками на одном животном. 1 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для оценки функционального состояния периферических нервов после их микрохирургической реконструкции при травмах в эксперименте. Способ включает одностороннее моделирование травмы и микрохирургическую реконструкцию на общем малоберцовом нерве кролика. Затем проводят визуальную оценку и протоколирование посредством видеосъемки или серийной фотосъемки амплитуды разведения пальцев стопы при исследовании безусловного рефлекса приземления в ответ на смещение тела животного по вертикали вниз без опоры на конечности. При регистрации одинаковой амплитуды разведения пальцев стопы на стороне операции и на интактной контралатеральной конечности судят о полной регенерации нерва и восстановлении его функционального состояния. Простой и эффективный способ клинического контроля позволяет достоверно оценивать функциональное состояние нерва в условиях длительного эксперимента. 2 ил.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования иммунодефицитного состояния, обусловленного нарушением функций клеток врожденного иммунитета. Для этого в перитонеальную полость мелких лабораторных животных вводят стерильную 1 пептонную воду в объеме 0,2 мл. Через 18 часов после введения животных размещают на 4 часа в воздушном термостате при температуре +30°С с принудительной вентиляцией, при относительной влажности воздуха 60-68, атмосферном давлении 744-760 мм рт.ст. и содержании O2 и CO2 соответственно 20,5 и 0,10. Способ обеспечивает адекватное воспроизведение физиологических условий нахождения организма в реальной среде при моделировании вторичного иммунодефицита, связанного с дефектом клеток врожденного иммунитета, контролирующих первую линию обороны организма от инфекций. 2 табл., 1 пр.

Наверх