Способ акустического неинвазивного воздействия на клетки-мишени тканей животных семейства собачьих

Изобретение относится к медицине, биотехнологии и ветеринарии и предназначено для направленного изменения проницаемости клеточных мембран. Способ включает воздействие на клеточную суспензию модулированной ультразвуковой волной с несущей частотой 0,88 МГц, диапазонами интенсивностей 0,2-0,7 Вт/см2 и частот модуляции 10-80 Гц. Время экспозиции 15-50 с при направлении действия на безъядерные клетки размера 1-9 μ. Одновременно осуществляет воздействие на ЦПМ и ядра ядросодержащих клеток размера 6,6-19,8 μ, или интенсивностью 0,05-0,7 Вт/см2, частотой модуляции 200-900 Гц в течение 15-40 с при выборе в качестве мишени 7,7-17,6 μ - клеток, содержащих ядро. Готовят мазки, окрашивают их дифференциальными красителями, проводят анализ морфологического состояния клеток. Способ позволяет расширить арсенал диагностических и экспериментальных методов. 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 4 ил.

 

Изобретение относится к медицине, биотехнологии и ветеринарии, а именно к применению акустических волн для неинвазивного воздействия с возможностью разрушения клеток-мишеней биологических тканей с целью управления процессами жизнедеятельности, пролиферативной активностью клеток/культур клеток и тканей и возможности избирательного подавления их функций. Изобретение также может быть использовано в клеточной и молекулярной биологии, представляет интерес для разработки методов экспериментальной медицины, фармакологии, диагностики злокачественных новообразований, индивидуального подбора лекарственных средств.

При воздействии акустических волн за счет сжатия в волне клеточных мембран и реализации пьезоэффекта возможен эффект изменения поверхностного заряда и функционального состояния мембран. Таким образом, мембрана может быть мишенью, на уровне которой реализуются цепи одинаковых в дальнейшем эффектов как для акустических, так и для электромагнитных волн. Клетки, находящиеся в акустической волне, по сравнению с длиной волны являются точечными. Они могут испытывать сжатие и расширение объема, достигающее 20%, что в свою очередь может уменьшить количество активных каналов за счет латеральной диффузии молекул липидного бислоя, изменить проницаемость цитоплазматической мембраны (ЦПМ), ифункциональное состояние клетки [1-10].

В настоящее время нет однозначной теории формирования частотно-зависимых ответов на акустическое воздействие. Ряд исследователей показали существенные отличия на уровне ткани в биологических эффектах непрерывных и модулированных волн различной физической природы. Причем вызываемые изменения при воздействии модулированных волн выше, а степень и выраженность в большой степени зависят от частоты модуляций. Также было показано, что модулированное электромагнитное или УЗ воздействие на некоторых частотах модуляции могут вызывать изменение ферментативной активности как в сторону активирования, так и ингибирования [3, 4].

Из уровня техники известен способ иммунокоррекции при аутоиммунном процессе (патент на изобретение RU 2098139, опубл. 10.12.1997). После премедикации осуществляют перфузию крови больного в вено-венозном варианте через срезы ксеноселезенки, предварительно активированные ультразвуком слабой интенсивности 0,3-0,4 Вт/см2 в импульсном режиме 50 имп/с, в течение 8-10 мин. Способ применяется для упрощения процесса гемоперфузии и увеличения сорбционной способности селезенки при лечении псориаза. Данный способ эффективен при проведении перфузии с объемной скоростью 75-80 мм/мин в течение 40-45 мин 2-3 сеансами с интервалом между ними в 3-5 дней в начале курса традиционной комплексной терапии.

Однако указанный способ является затратным за счет использования дорогостоящего стационарного оборудования и материала. Способ требует при его реализации работы специально обученного персонала, сложен в исполнении методики, длителен по времени, осуществим при работе УЗ аппаратуры в импульсном режиме и на срезе одного типа ткани.

Известен способ неинвазивного разрушения расположенных за костями грудной клетки биологических тканей (патент на изобретение RU 2472545 от 20.01.2013 г., Бюл. №2), выбранный в качестве ближайшего аналога. Данный способ основан на воздействии фокусированным УЗ пучком на биологическую ткань для локального разрушения клеток только в месте нахождения основного фокуса, без повреждения в побочных фокусах.

Однако данный способ применяется в УЗ хирургии только для одновременно теплового и механического воздействий, сопровождается сильным разогревом ткани. Ограничение в применении способа акустического разрушения клеток определяется использованием высокоинтенсивного УЗ, возможностью воздействия только на один вид ткани организма человека - костную, причем на всю ткань одновременно, а не на отдельные клетки (остеобласты), генерацией локального избыточного пикового положительного давления 30-80 МПа в месте воздействия [11].

Заявленное изобретение осуществляется путем нахождения оптимальных условий ультразвукового воздействия на ткань, приводящего к избирательному изменению цитоморфологии или к разрушению клеток/клеточных структур животных семейства собачьих.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка эффективного способа неинвазивного направленного воздействия на клетки ткани животных, безопасного при реализации и не требующего дорогостоящего стационарного оборудования, специально обученного персонала и специально оборудованного помещения; осуществление способа без дополнительных технических средств и химических реагентов; минимальная затрата времени (15-60 с); полная безопасность метода для медицинского персонала и научных сотрудников при максимальном эффекте.

Целью предлагаемого изобретения является плановое неинвазивное воздействие на клетки разных типов и размеров.

Техническим результатом заявленного изобретения является: направленное изменение проницаемости/структуры цитоплазматической и/или ядерной мембраны; регулирование глубины эффекта акустического воздействия; торможение или активация транспортных систем клеток; выборочное разрушение в одной ткани ядер у клеток определенного, заранее заданного размера; направленная супрессия роста клеток, в том числе и ненормированного; нарушение аппарата межклеточного взаимодействия и клеточных контактов; регуляция активности внутриклеточных и мембран-связанных ферментов, что даст возможность проводить купирование заболеваний различной этиологии на клеточном уровне, а также индивидуально оценить репарационную систему клетки.

Заявленный технический результат осуществляется тем, что на клеточную суспензию объемом от 1,0 мл до 1,5 мл, помещенную в кювету, воздействуют модулированной ультразвуковой волной с несущей частотой 0,88 МГц, диапазонами интенсивностей 0,2-0,7 Вт/см2 и частот модуляции 10-80 Гц в течение 15-50 с при направлении действия на безъядерные клетки размера 1-9 μ, а также одновременно на ЦПМ и ядра ядросодержащих клеток размера 6,6-19,8 μ, или интенсивностью 0,05-0,7 Вт/см2, частотой модуляции 200-900 Гц в течение 15-60 с при выборе в качестве мишени 7,7-17,6 μ - клеток, содержащих ядро, с последующим приготовлением мазков, их окраской дифференциальными красителями, анализом морфологического состояния клеток.

Пробы обрабатывают в абсолютно одинаковых условиях, поддерживают постоянную температуру образцов в кюветах с проточным охлаждением, а также проводят анализ морфологического состояния клеток пробой с трипановым синим [12] и методами световой или фазово-контрастной микроскопии [13, 14].

По окраске клетки в синий цвет, началу деформации, изменению клеточного размера, состоянию и изменению проницаемости ЦПМ, по морфологическим изменениям: деформации или степени изменению структуры ядер, ядерному лизису или разрушению ядер определяют наличие и регулируют направление и глубину эффекта акустического воздействия; оценивают индивидуальную репарационную систему клетки, рост и размножение клеток-мишеней, активность внутриклеточных и мембран-связанных ферментов.

Способ эффективен и информативен при любом количестве исследуемого материала.

Заявленный способ осуществляется следующим образом.

Воздействовали ультразвуком in vitro на жидкую подвижную ткань - кровь, в которой одновременно представлены клетки разного вида, размера и возраста. Для реализации заявляемого изобретения используются любые из отечественных ультразвуковых терапевтических генераторов с излучателями, работающих на несущей частоте 0,88 МГц: УЗТ-1-01Ф; Ультразвук Т-5 и УЗТ-1.02С и др., модифицированные для работы с внешней модуляцией. Экспозиция УЗ: время от 10 с до 60 с, ISATA - средняя по пространству и времени УЗ интенсивность: 0,05 Вт/см2 - 0,7 Вт/см2. Диапазон активных частот модуляции 10-80 Гц и 200-900 Гц, модулятор Г3-112 (или любой аналогичный генератор). Объем облучаемых образцов составлял 1-1,5 мл. Мазки крови окрашивали их по методу ДИФФ-КВИК [6] и просматривали под иммерсией («Микмед-5», объектив 100х/1,25, окуляр 10х/18). Контролем служили интактные клетки тех же животных. Для определения изменения проницаемости ЦПМ использовали тест с трипановым синим [12]. О действии УЗ на клетки ткани судили по количественным и качественным морфологическим изменениям. Статистическую обработку данных вели в пакете прикладных программ «Statistica 6.0». Достоверными считали различия при р<0.05.

Направленное действие модулированного УЗ на клетки крови представителей семейства собачьих.

Безъядерные клетки размером 1-9 μ. После обработки ткани интенсивностью 0,2-0,7 Вт/см2, частотой модуляции 10-80 Гц в течение 15-50 с (табл. 1) по данным тестов с трипановым синим менялась проницаемость ЦПМ кровяных пластинок (тромбоцитов). После чего шло образование клеточных ассоциаций. В результате облучения интенсивностью 0,2-0,7 Вт/см2, частотой модуляции 10-20 Гц в течение 15-50 с менялась проницаемость ЦПМ и эритроцитов (табл. 1). На фоне общего анизоцитоза происходило образование булавовидных утолщений, формирование узоров и геометрических фигур из клеток красной крови, наложение эритроцитов крест-накрест «гантели» (см. рис. 1: Анизоцитоз. Образование геометрических фигур (а) и «гантелей» (б)). Направленное воздействие в экспериментах вначале изменяло форму эритроцитов, без внешних признаков разрушения или цитолиза, затем регистрировали формирование групп вокруг клеток и цитоцепочек. Регистрировали и появление теней клеток или гемолиз.

Ядросодержащие клетки размера 6,6-19,8 μ. После обработки образцов крови интенсивностью 0,05-0,7 Вт/см2, частотой модуляции 10-30 Гц, а также 50-100 Гц, 200-900 Гц в течение 15-60 с (табл. 2; рис. 2-4) клетки деформировались, менялся объем, а затем происходило «вспенивание» или вакуолизация цитоплазмы, менялась проницаемость или начинала разрушаться ЦПМ лейкоцитов, происходило разрыхление ядер палочкоядерных и/или юных (молодых) нейтрофилов (рис. 2).С увеличением времени воздействия до 35-50 с менялись глубина и степень изменений. Облучение ткани в зависимости от вида животного и его возраста интенсивностью диапазона 0,05-0,4 Вт/см2, частотой модуляции из интервала частот 10-50 Гц, а также 300-900 Гц от 15 до 60 секунд позволяло направленно воздействовать на ядра лейкоцитов: изменять их форму или полностью разрушать. Во всех клетках ткани собачьих происходили одинаковые эффекты: цитолиз, деструкция и агрегация клеток, вспенивание цитоплазмы сначала грануло-, а затем и агранулоцитов, разрыв ЦПМ, деформация и взрыв ядер (на рис. 3, (а) - сегментоядерный нейтрофил; (б) - вспенивание и/или вакуолизация цитоплазмы моноцита). Первые изменения мембран и ядер лейкоцитов в зависимости от вида и размера клетки регистрировались, спустя 10-13 с от начала озвучивания активными частотами. Во многих случаях цитологические изменения столь значительны, что клетки идентифицировать было сложно (рис. 4 - клетки тяжело идентифицировать из-за значительных изменений в цитоплазме и ядре).

Таким образом, в заявленном изобретении раскрыта возможность применения ультразвуковых волн для направленного неинвазивного воздействия на функциональное состояние клеток тканей животной этиологии. Отработаны режимы выборочного изменения состояния клеточных органелл и клеток крови животных семейства собачьих с целью управления процессами жизнедеятельности и избирательного подавления или активации их функций.

Список литературы

1. Олешкевич А.А. Действие непрерывного и модулированного ультразвука на клетки крови животных in vitro / V Съезд биофизиков России. Материалы докладов: в 2 т. - Ростов-на-Дону: ЮФУ - Т. 2: 2015. - С. 107.

2. Олешкевич А.А., Пашовкин Т.Н. Возможность изменения лейкограмм животных при действии непрерывного ультразвука терапевтического диапазона интенсивностей // Аграрная Россия. - №6 (2015). С 13-17.

3. Johns, LD Non-thermal effects of therapeutic ultrasound: the frequency resonance hypothesis // Journal of athletic training. - 2002. - 37(3) - P. 293-299.

4. Пашовкина M.С., Пашовкин Т.H. Изменение относительной активности холинэстеразы при действии модулированного сверхвысокочастотного электромагнитного излучения в опытах in vitro. - Радиационная биология. Радиоэкология, 2011, том 51, №3, С. 1-5.

5. Олешкевич А.А., Пашовкин Т.Н. Возможность изменения лейкограмм животных при действии непрерывного ультразвука терапевтического диапазона интенсивностей // Аграрная Россия. - №6 (2015). С 13-17.

6. Способ диагностики наличия заболевания у животных по изменению лейкограммы после ультразвукового воздействия / Олешкевич А.А., Пашовкин Т.Н. Российская Федерация, МПК G01N 33/49 №2574881.

7. Oleshkevich, АА. Studies of frequency-dependent changes under modulated ultrasound exposure on cells in suspension // International Journal of BioMedicine. N.-Y.: "Int. Medical Research and Development Corporation". - V. 4, Issue 1, March 2015. - P. 30-34.

8. Олешкевич А.А., Пашовкин Т.H. Количественный анализ действия модулированного ультразвука на некоторые клетки тканей животных // Ветеринария, зоотехния и биотехнология. - 2014 - №5. - С. 27-33.

9. Олешкевич А. А., Василевич Ф. И. Направленное действие модулированного ультразвука на клетки крови собак при смешанной инвазии // РВЖ. МДЖ. - 2015 - №5 - С. 19-22.

10. Олешкевич А.А., Кутликова И.В. Влияние ультразвука на лимфоциты и сегментоядерные нейтрофилы // Научное обозрение. - 2015. - №13. - С. 145-150.

11. Хохлова В.А., Сапожников О.А., Гаврилов Л.Р. и др. Способ неинвазивного разрушения расположенных за костями грудной клетки биологических тканей. - RU 2472545 от 20.01.201, Бюл. №2.

12. Скибо Ю.В., Абрамова З.И. Методы исследования программируемой клеточной гибели. Казань, 2011. - 61 с.

13. Бурмистров Е.Н. Шанс Био: лабораторная диагностика. - М.: Капиталпринт 2006. - 154 с.

14. Кудрявцев А.А. Клиническая гематология животных. М.: Колос, 1974. - 399 с.

1. Способ оценки индивидуальной репарационной системы клетки тканей животных семейства собачьих, включающий воздействие на клеточную суспензию модулированной ультразвуковой волной с несущей частотой 0,88 МГц, диапазонами интенсивностей 0,2-0,7 Вт/см2 и частот модуляции 10-80 Гц в течение 15-50 с при направлении действия на безъядерные клетки размера 1-9 μ, а также одновременно на ЦПМ и ядра ядросодержащих клеток размера 6,6-19,8 μ, или интенсивностью 0,05-0,7 Вт/см2, частотой модуляции 200-900 Гц в течение 15-40 с при выборе в качестве мишени 7,7-17,6 μ-клеток, содержащих ядро, с последующим приготовлением мазков, их окраской трипановым синим и анализом морфологического состояния клеток по окраске клетки в синий цвет, началу деформации, изменению клеточного размера или объема цитоплазмы, состоянию и изменению проницаемости ЦПМ.

2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что для воздействия используется клеточная суспензия объемом от 1,0 мл до 1,5 мл.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к ветеринарной гельминтологии и предназначено для диагностических исследований фекалий рогатого скота на наличие круглых гельминтов в личиночной стадии развития и их идентификации.

Изобретение относится к медицине, а именно к психиатрии, и представляет собой способ прогнозирования коморбидного тревожного расстройства у больных рекуррентным депрессивным расстройством, характеризующийся тем, что в крови больных определяют содержание гормона кортизола и нейростероида дегидроэпиандростерона сульфата (ДГЭАС), а также фагоцитарную активность лейкоцитов, и при концентрации кортизола выше 850 нмоль/л, значении соотношения ДГЭАС/кортизол ниже 3,5 и значении фагоцитарного индекса ниже 55% прогнозируют коморбидное тревожное расстройство у больных рекуррентным депрессивным расстройством.

Группа изобретений относится к автоматизированному молекулярному тестированию и методам иммуноанализа. Предложена жидкостная система для тестирования, которая содержит множество камер для тестирования, множество впускных каналов и сеть для текучей среды, которая соединяет впускные каналы с одной или более других камер.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способу генетического типирования штаммов чумного микроба (Yersinia pestis) и псевдотуберкулезного микроба (Yersinia pseudotuberculosis) с использованием набора синтетических олигонуклеотидных праймеров и фрагментного анализа флуоресцентно-меченных ДНК-ампликонов на капиллярном ДНК-анализаторе.

Изобретение относится к применению коагулирующих композиций, содержащих в основном выделенные или по меньшей мере частично очищенный активатор протромбина змеиного яда, а также к контейнерам, содержащим указанные коагулирующие композиции, и к родственным способам применения.9 н.

Изобретение относится к отбору проб, в частности к отбору и подготовке пробы клеток конъюнктивы для проведения бактериологического, вирусологического и иммунологического исследований с целью выявления этиологии воспалительных заболеваний переднего отрезка глаза.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакогенетике, клинической фармакологии, психиатрии, наркологии, и может быть использовано для подбора дозы антипсихотического лекарственного средства из группы производных бутерофенона галоперидола у пациентов с любыми нозологиями.

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и может быть использовано в качестве метода прогнозирования течения макулярного отека при окклюзии вен сетчатки.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, гинекологии, иммунологии и молекулярной биологии, и может быть использовано для оптимизации диагностики при постановке диагноза «послеродовый эндометрит».

Изобретение относится к экологии, в частности к оценке экологического состояния лугов по биохимическим показателям растительности. Для этого определяют содержание пигментов в клеточном соке растения просо куриное, а также рН клеточного сока.

Изобретение относится к области сельского хозяйства. Способ оценки содержания свинца в органах овец при хроническом поступлении металла с рационом заключается в том, что на основании концентрации металла в периферической крови и коэффициентов перехода свинца из периферической крови в органы определяют уровни накопления металла в тканях печени, почек и селезенки овец, используя формулу КП=Соргана/Скрови, где КП - коэффициент перехода свинца из периферической крови в орган, Соргана - концентрация свинца в органе (мг/кг), Скрови - концентрация свинца в периферической крови (мг/л). 1 пр., 4 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики стадии рака шейки матки. Для этого у пациентки в плазме крови определяют уровни каталазы и глутатионредуктазы и при уровнях каталазы 1,137 мммоль/мин/л и выше и глутатионредуктазы 4,175 мкмоль/мин/л и выше заболевание относят к Ia клинической стадии, а при уровнях каталазы от 0 до 1,137 мммоль/мин/л и глутатионредуктазы от 0 до 4,175 мкмоль/мин/л заболевание относят к Ib-IIa клинической стадии по международной гинекологической классификации (FIGO). Способ позволяет достоверно уточнить раннюю стадию рака шейки матки. 8 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике в онкологии, и может быть использовано для оценки лечебного эффекта фотодинамической терапии (ФДТ) при железистых раках желудочно-кишечного тракта. До проведения ФДТ разделяют пополам один метастатический лимфоузел абдоминальной зоны лимфодиссекции и одну половину удаляют. Облучению подвергают вторую половину лимфоузла, после чего облученную половину также удаляют. Затем сравнивают процентное содержание «голых ядер» атипичных клеток в облученной и необлученной половинах лимфоузла. При превышении процентного содержания «голых ядер» в облученной половине лимфоузла по сравнению с необлученный не менее чем вдвое оценивают эффект ФДТ как положительный. Способ позволяет быстро, просто и удобно оценивать эффекты сеанса ФДТ за счет сравнения процентного содержания «голых ядер» атипичных клеток в облученной и необлученной половинах лимфоузла. 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано для диагностики синдрома послеоперационной когнитивной дисфункции (ПОКД) у женщин после экстирпации матки в периоперационном периоде. Проводят ряд исследований в предоперационном периоде исходного когнитивного статуса СР1 и рассчитывают СР1 по формуле CP1=O+CHP+FR+FW+DH+Sβ+Wc, где О - тест «ориентация», СНР - тест «наличие длительного болевого синдрома», FR - тест «узнавание фигур», FW - тест «запомнить 5 слов», DH - тест «рисования часов», Sβ - определение сывороточного протеина S100β, Wc - методика «слова на с». Проводят ряд исследований когнитивного статуса в раннем послеоперационном периоде СР2 и рассчитывают СР2 по формуле CP2=O+AP+FR+FW+DH+Sβ+Wc, где О - тест «ориентация», АР - выраженность болевого синдрома после операции, FR - тест «узнавание фигур», FW - тест «запомнить 5 слов», DH - тест «рисования часов», Sβ - определение сывороточного протеина S100P, Wc - методика «слова на с». После чего рассчитывают соотношение СР1 к СР2, и если оно меньше или равно 1, ПОКД отсутствует, если соотношение СР1 к СР2 больше 1, то диагностируют раннюю ПОКД. Способ позволяет своевременно назначить лечение и предотвратить прогрессирования когнитивных нарушений за счет определения информативных нейропсихологических и лабораторных показателей. 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано для диагностики синдрома послеоперационной когнитивной дисфункции (ПОКД) у женщин после экстирпации матки в периоперационном периоде. Проводят ряд исследований в предоперационном периоде исходного когнитивного статуса СР1 и рассчитывают СР1 по формуле CP1=O+CHP+FR+FW+DH+Sβ+Wc, где О - тест «ориентация», СНР - тест «наличие длительного болевого синдрома», FR - тест «узнавание фигур», FW - тест «запомнить 5 слов», DH - тест «рисования часов», Sβ - определение сывороточного протеина S100β, Wc - методика «слова на с». Проводят ряд исследований когнитивного статуса в раннем послеоперационном периоде СР2 и рассчитывают СР2 по формуле CP2=O+AP+FR+FW+DH+Sβ+Wc, где О - тест «ориентация», АР - выраженность болевого синдрома после операции, FR - тест «узнавание фигур», FW - тест «запомнить 5 слов», DH - тест «рисования часов», Sβ - определение сывороточного протеина S100P, Wc - методика «слова на с». После чего рассчитывают соотношение СР1 к СР2, и если оно меньше или равно 1, ПОКД отсутствует, если соотношение СР1 к СР2 больше 1, то диагностируют раннюю ПОКД. Способ позволяет своевременно назначить лечение и предотвратить прогрессирования когнитивных нарушений за счет определения информативных нейропсихологических и лабораторных показателей. 2 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ совместного культивирования зрелых адипоцитов с клетками крыс. Способ включает выделение зрелых адипоцитов из жировой ткани крыс, получение в монокультуре монослоя прикрепленных к вкладышу адипоцитов, формирование слоя клеток крыс на дне сосуда, заполнение питательной средой всего объема данного сосуда и размещение вкладыша с монослоем адипоцитов поверх его. Изобретение обеспечивает однотипную локализацию адипоцитов в объеме культурального сосуда, а также возможность микроскопического наблюдения за состоянием всех клеточных популяций. 6 ил., 3 пр.

Изобретение относится к медицине. Предложен способ моделирования алкогольной кардиомиопатии, заключающийся в принудительной алкоголизации животных 10%-ным водным раствором этанола в течение 13 недель, последующем отборе животных с высоким предпочтением к алкоголю и продолжении алкоголизации до конца 24 недели от начала алкоголизации. Технический результат: к концу 24-й недели формируется дилатационная алкогольная кардиомиопатия, которая характеризуется значительным угнетением сократительной функции и статистически значимой дилатацией левого желудочка; по окончании 24-й недели алкоголизации крыс порог электрической фибрилляции желудочков сердца снижался на 47%; уровень гамма-глутамилтрансферазы в плазме крови алкоголизированных животных был в три раза выше, чем у контрольных. Таким образом, предложенная модель кардиомиопатии достаточно полно отражает ситуацию, наблюдаемую в клинике у пациентов, страдающих алкогольной кардиомиопатией, и может рассматриваться как трансляционная модель этого заболевания. 3 ил., 3 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине. Предложен способ моделирования алкогольной кардиомиопатии, заключающийся в принудительной алкоголизации животных 10%-ным водным раствором этанола в течение 13 недель, последующем отборе животных с высоким предпочтением к алкоголю и продолжении алкоголизации до конца 24 недели от начала алкоголизации. Технический результат: к концу 24-й недели формируется дилатационная алкогольная кардиомиопатия, которая характеризуется значительным угнетением сократительной функции и статистически значимой дилатацией левого желудочка; по окончании 24-й недели алкоголизации крыс порог электрической фибрилляции желудочков сердца снижался на 47%; уровень гамма-глутамилтрансферазы в плазме крови алкоголизированных животных был в три раза выше, чем у контрольных. Таким образом, предложенная модель кардиомиопатии достаточно полно отражает ситуацию, наблюдаемую в клинике у пациентов, страдающих алкогольной кардиомиопатией, и может рассматриваться как трансляционная модель этого заболевания. 3 ил., 3 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для анализа структур межклеточного вещества соединительной ткани в гистологических срезах шейки матки у животных. Для этого осуществляют забор препарата(ов). Затем проводят исследование препаратов под микроскопом. После чего фотографируют препараты с использованием одинакового освещения и увеличения микроскопа. Получают фотографии одинакового размера. При этом участки фотографии, содержащие иммунопозитивный компонент, окрашиваются в коричневый цвет и его оттенки, а иммунонегативные - окрашиваются в сине-фиолетовый и оттенки синего или серого цветов. Получают на каждой фотографии несколько иммунопозитивных участков с различной интенсивностью окрашивания вещества. После чего в программе фотошоп убирают иммунопозитивное окрашивание и распечатывают полученные образцы на цветном фотопринтере на прозрачную пленку. Далее через каждый образец пропускают световой поток фиксированной интенсивности. Часть светового потока при этом поглощается препаратом, а оставшиеся световые потоки измеряют люксметром. При этом получают минимальную величину светового потока F min с неубранными иммунопозитивными участками и максимальную величину светового потока F0 с убранными иммунопозитивными участками, для всех фотографий. Затем вычисляют среднее арифметическое значение F min и F0. После чего рассчитывают поглощение светового потока в образце F искомое. И при увеличении F искомого по сравнению с контролем делают вывод об усилении синтеза структурных белков в межклеточном веществе соединительной ткани шейки матки у животных. Изобретение позволяет проводить анализ структур межклеточного вещества соединительной ткани в гистологических срезах шейки матки у животных. 5 ил., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к ортопедической стоматологии, и может быть использовано для индивидуального подбора материала для изготовления зубопротезных конструкций в полости рта. Сущность способа заключается в том, что осуществляют измерение разности потенциалов в полости рта пациента и спектрометрическое исследование ротовой жидкости с определением концентрации ионов никеля и ионов хрома. При показателях концентрации ионов никеля не более 0,042 мкг/л, концентрации ионов хрома не более 0,0077 мкг/л, показателе разности потенциалов - не более 50 мВ, осуществляют последовательную установку и фиксацию с помощью композитного цемента пробников материала, предполагаемых для протезирования пациента, на вестибулярную поверхность зуба, не участвующего в акте жевания. Каждый пробник устанавливают на 5 дней. Затем вновь проводят измерение разности потенциалов и спектрометрическое исследование ротовой жидкости с определением концентрации ионов хрома и ионов никеля. Для протезирования выбирают тот материал, при котором показатели концентрации ионов никеля составляют не более 0,050 мкг/л, концентрации ионов хрома не более 0,009 мкг/л, показатели разности потенциалов не выше 80 мВ и жалобы пациента на жжение во рту отсутствуют. Технический результат: обеспечение возможности индивидуального подбора с высокой точностью и в достаточно короткие сроки оптимального материала для протезирования как при первичном протезировании, так и при дополнительном протезировании, при уже имеющихся металлических конструкциях в полости рта. 4 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине, биотехнологии и ветеринарии и предназначено для направленного изменения проницаемости клеточных мембран. Способ включает воздействие на клеточную суспензию модулированной ультразвуковой волной с несущей частотой 0,88 МГц, диапазонами интенсивностей 0,2-0,7 Втсм2 и частот модуляции 10-80 Гц. Время экспозиции 15-50 с при направлении действия на безъядерные клетки размера 1-9 μ. Одновременно осуществляет воздействие на ЦПМ и ядра ядросодержащих клеток размера 6,6-19,8 μ, или интенсивностью 0,05-0,7 Втсм2, частотой модуляции 200-900 Гц в течение 15-40 с при выборе в качестве мишени 7,7-17,6 μ - клеток, содержащих ядро. Готовят мазки, окрашивают их дифференциальными красителями, проводят анализ морфологического состояния клеток. Способ позволяет расширить арсенал диагностических и экспериментальных методов. 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 4 ил.

Наверх