Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей



Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей
Средство, обладающее одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей

Владельцы патента RU 2646497:

Общество с ограниченной ответственностью "Л-ПДСК" (RU)

Изобретение относится к области фармацевтики, а именно к применению 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантена в качестве средства, обладающего адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей, и представляющего собой соединение структурной формулы (I)

Изобретение обеспечивает снижение в отношении здоровых органов и тканей негативного воздействия химио- и радиотерапии и при этом усиливает их действие на опухолевые клетки. 1 ил., 4 пр.,8 табл.

 

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и касается средства, обладающего адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей.

Радио- и химиотерапия относится к основным, широко применяемым методам лечения онкологических заболеваний, но имеют существенные недостатки, связанные с наличием у них ряда серьезных побочных эффектов, обусловленных повреждающим действием на здоровые органы и ткани.

Расширению возможностей радио- и химиотерапии может способствовать применение соединений, защищающих нормальные клетки, позволяющих снижать повреждающее действие лучевой терапии и токсичность химиопрепаратов в отношении здоровых органов и тканей. Другой подход к повышению эффективности лучевой и химиотерапии может заключаться в использовании препаратов, потенцирующих действие ионизирующего излучения и химиотерапевтических препаратов, на злокачественную опухоль. Естественно, что предпочтение должно быть отдано тем соединениям, которые обладают одновременно тем и другим действием. Радио- и химиопротекторными свойствами обладают вещества с антиоксидантными свойствами, поэтому поиск среди них соединений с адъювантным действием кажется вполне логичным и обоснованным.

Имеется патент на изобретение, из которого следует, что аскорбиновая кислота и ее соли (аскорбаты) обладают адьювантным действием при химиотерапии опухолей [Патент WO 98/41204 Pascoe, F. Ascorbic as an adjvant in the treatment of malignan yumors using chemotherapy and radiotherapy]. Существенным дополнением к описанным адьювантным и противоопухолевым свойствам аскорбиновой кислоты является ее способность стимулировать гуморальные и клеточные звенья иммунной системы в присутствии ее ингибиторов. Аскорбиновая кислота и ее фармакологически приемлемые соли стабилизируют клеточные мембраны.

Цитотоксическое действие на раковые клетки высоких доз аскорбата, введенных парентерально, подтверждено в исследованиях Chen и соавт. «Pharmacologic doses of ascorbate act as prooxidant and decrease growth of aggressive tumor xenografts in mice» [Proceeding of the National Academy of Sciences] и Yan Ma и соавт. «High-dose parenteral ascorbate enhanced chemosensitivity of ovarian cancer and reduced toxicity of chemotherapy». [Sci. Transl. Med. 5 February 2014: Vol. 6, p. 222].

Однако данные о влиянии высоких доз аскорбиновой кислоты, применяемые в онкологии, на опухолевый процесс и защиту здоровых органов и тканей от воздействия химио- и радиотерапии весьма противоречивы. В ряде исследований показано, что высокие дозы аскорбиновой кислоты оказывают повреждающее действие на здоровые органы и ткани и тем самым ухудшают состояние больных и снижают эффективность химио- и радиотерапии [Шлянкевич М. (Йельский университет, США) Больше - не всегда лучше: избыток витаминов при лечении рака. Журнал "Вместе против рака" №3, 2000 г.; Harreus U., Baumeister P., Zieger S., Matthias C. The influence of high doses of vitamin С and Zinc on Oxidative DNA Damage. Anticancer Research 25: 3197-3202 (2005)].

Задачей изобретения является расширение арсенала средств, обладающих адъюватным действием при радио- и химиотерапии опухолей. Технический результат заключается в том, что применение предлагаемого соединения в онкологии в широком диапазоне доз обеспечивает снижение в отношении здоровых органов и тканей негативного воздействия химио- и радиотерапии и при этом усиливает их действие на опухолевые клетки.

Для решения поставленной задачи и для достижения заявляемого технического результата предлагается применение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантена в качестве средства, обладающего адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей, и представляющего собой соединение структурной формулы (I)

Новым в предлагаемом изобретении является то, что в качестве адъюванта при радио- и химиотерапии онкологических заболеваний может применяться соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен. Для специалиста это свойство явным образом не вытекает из уровня техники.

Содержанием настоящего изобретения является установление способности препарата в широком диапазоне доз при совместном и одновременном применении с радио- и химиотерапии усиливать их действие. Иными словами, при совместном применении препарат не защищает опухолевые клетки, а напротив, оказывает адьювантное действие.

Известно, что соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен обладает широким спектром фармакологического действия [Патент на изобретение №2281007 от 10.08.2006]. Соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен стимулирует иммунную систему и обладает адаптогенными свойствами, что повышает его ценность при лечении онкологических заболеваний. Будучи антиоксидантом, соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен потенциально способно защищать здоровые органы и ткани при радио- и химиотерапии онкологических заболеваний. Протекторное действие 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантена может быть обусловлено не только его антиоксидантными свойствами, но и опосредованным вследствие способности молекулы препарата ингибировать дифференцировку низкодифференцированных клеток подобных стволовым [Патент на изобретение №2317074 от 16.03.2006]. Последний эффект наблюдается при предварительном введении препарата за 7 суток до действия радиации.

Предметом предлагаемого изобретения является средство, обладающее помимо ряда полезных фармакологических свойств одновременно протекторным действием в отношении здоровых органов и тканей и оказывающим адьювантный эффект при радио- и химиотерапии. При этом особое значение имеет выявление у изучаемого соединения по сравнению с аналогами антиоксидантного и прооксидантного действия. В связи с этим антиоксидантные и проксидантные свойства соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в сравнении с существующими аналогами оценены в системе Фентона.

Сущность изобретения поясняется примерами конкретного выполнения и чертежом. На фиг. 1 представлено влияние дозы соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен на объем опухоли при лечении Цисплатином.

Пример 1. Нами были исследованы в системе Фентона антиоксидантные и проксидантные свойства аскорбиновой кислоты и Тролокса, который по своей химической структуре относится к водорастворимой форме витамина Е и широко используется в работах многих авторов в качестве стандарта при исследовании антиоксидатных свойств различных соединений. Однако данные ряда исследований, а также наши данные (табл. 1) показали наличие у Тролокса не только антиоксидантных, но и прооксидантных свойств. Другой часто используемый стандарт для оценки антиоксидантных свойств, а именно аскорбиновая кислота, оказался достаточно сильным прооксидантом (табл. 1). Приведенные в таблице 1 данные свидетельствуют о том, что в системе Фентона происходит генерация гидроксильного радикала ОН*. Соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен на 60-75% ингибирует генерацию гидроксильного радикала, что дает основание сделать вывод о наличии у этого препарата антирадикальной и антиоксидантной активности. Анализ концентрационной зависимости способности соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен ингибировать генерацию радикала ОН* показал, что эта активность остается постоянной при изменении концентрации препарата от 0,106 до 0,0106 мМ, что может быть связано с низкой растворимостью препарата в этих концентрациях.

Примечание * достоверное отличие от контроля (р<0,05)

Таким образом, в проведенных экспериментах у соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен не обнаружено наличие проксидантных свойств, что, наряду с высокой его антиоксидантной активностью, свидетельствует о перспективности использования этого препарата в качестве лечебно-профилактического лекарственного средства.

Поскольку адьювантное действие не связано с образованием свободных радикалов, препарат не обладает прооксидантным эффектом и его протекторное действие в отношении здоровых органов и тканей должно проявляться в полной мере за счет антиоксидантных свойств препарата.

Пример 2. Проведены исследования адъювантного эффекта соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантена при химиотерапии опухолей. Целью исследований было изучение адъювантных свойств соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в различных дозах и схемах введения и при его совместном действии с химиотерапевтическим препаратом по противоопухолевой и антиметастатической активности.

Исследования включали изучение противоопухолевых и антиметастатических свойств соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантена в различных дозах вместе с традиционным химиопрепаратом Цисплатин.

В эксперименте были использованы 80 мышей-самцов F1(CBA×C57Bl/6) - по 15-20 в каждой группе. В заднюю лапку животных была имплантирована меланома В-16, в количестве 0,75×106 клеток (объем суспензии 0,2 мл). Клетки мышиной меланомы В-16, приспособленная к выращиванию в монослое (банк клеток ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина) культивировали в среде RPMI-1640 с добавлением антибиотиков (пенициллин-стрептомицин по 100 ЕД/мл), 10% эмбриональной телячьей (10% по объему) сыворотки при температуре +37°С в атмосфере, содержащей 5% СО2 [Культура животных клеток. Методы / Д. Конки и и др. / Под ред. Р. Фрешни. - М.: Мир, 1989. - 333 с]. В качестве культуральной посуды использовали стерильные матрацы площадью 75 см3 (Corning, Nunc). Пересев культуры проводился 3 раза в неделю.

Оба препарата вводились 3 раза; суммарные дозы и все экспериментальные группы указаны в таблице 2. Сроки введения обоих препаратов: 7, 11 и 15 сутки после имплантации. Химиотерапевтический препарат Цисплатин вводили внутрибрюшинно в дозе 3 мг/кг в 0,2 мл. Указанная доза была выбрана исходя из общепринятых в терапии злокачественных новообразований схем: коэффициент перехода от однократной дозы к дробному введению - 1,5. Исследуемое соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен вводиться per os (0,2 мл) в дозах: 5, 25 и 100 мг/кг. Контрольная группа получала 0,2 мл воды.

Противоопухолевое действие оценивалось по изменению объема опухоли, измерение которого проводилось на 7, 15 и 20 дни эксперимента. Объем новообразования оценивали по формуле эллипсоида (1) [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под общ. ред. Р.У. Хабриева. - М.: ОАО Издательство Медицина, 2005, с. 647].

В качестве дополнительного критерия служила выживаемость животных (оценивается на протяжении всего эксперимента).

где d1, d2, d3 - взаимно перпендикулярные размеры опухоли.

Антиметастатическая эффективность оценивалась по количеству метастазов в легких, которое определялось через 2 недели после начала введения препарата (20 день после имплантации). Для этого у декапитированных под наркозом животных извлекали легкие и переносили в жидкость Буэна. Подсчет метастазов производился визуально.

Статистическую обработку проводили с применением следующих подходов и критериев: однофакторного дисперсионного анализа, критерия Стьюдента (в том числе для выборок с различной вариацией), Уилкоксона, Колмогорова-Смирнова, а также χ2 и точного критерия Фишера для таблиц сопряженности. Парное сравнение групп проводили по критериям Тьюки и Стьюдента, с поправками Бонферрони, Хольма, Хочберга и др. Все расчеты проводили с помощь статистического пакета R (версия 2.15.0) в соответствии с современными руководствами по биологической статистике [Гланц С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц; пер. с англ. Ю.А. Данилова. - М.: Практика, 1998. - 459 с.].

Результаты исследований по изменению объема опухоли при введении в различных дозах соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен и традиционного химиопрепарата Цисплатин изображены на фиг 1.

Статистическая обработка результатов проводилось с использованием дисперсионного анализа и критерия Стьюдента. Первичный дисперсионный анализ показал статистически значимое отличие контрольной группы от всех других исследуемых групп (Р<0,01). Прямое сравнение групп с различными дозами соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен с группой Цисплатин показало, что достоверное отличие наблюдается при дозе 300 мг/кг (Р<0,02). Таким образом, введение соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен снижает рост опухоли, по сравнению с интактными и животными, получавшими химиотерапевтический препарат Цисплатин. Достоверное снижение объема при этом наблюдается после введение данного препарата в суммарной дозе 300 мг/кг. В некоторых случаях введение соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен приводило не только к задержке роста опухоли (за исключением случаев, связанных с серьезным повреждением кожных покровов), но, в одном из случаев, и к полной регрессии новообразования.

Другим, кроме объема опухоли, критерием служило количество метастазов в легких. Средние значение и разброс данных для каждой группы представлены в таблице 3. Дисперсионный анализ показал достоверное отличие групп между собой (Р<0,0001). Последующее применение теста Тьюки позволило установить, что 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в суммарных дозах: 75 и 300 мг/кг достоверно снижает количество метастазов, по сравнению как с контрольными группами (1 и 2), так и с группой, где изучаемое соединение вводилось животным в меньшей дозе.

* Достоверное отличие от групп 1, 2 и 3 при Р<0,01.

Следует также отметить, что применение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантена в суммарных дозах 75 и 300 мг/кг обеспечило у части животных полное отсутствие метастазов в легких, что не было отмечено для изучаемого соединения в суммарной дозе 15 мг/кг и при введении только Цисплатина.

Анализ влияния введения исследуемого соединения на количество погибших и выживших животных за период опыта показал значительные отличия. Введение соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантена в суммарной дозе 300 мг/кг приводило к существенному снижению погибших мышей при увеличении количества выживших животных (таблица 4).

Таким образом, анализ полученных данных показал, что введение препаратов в обеих схемах (только химиопрепарат и совместное его введение с 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантеном в различных дозах) достоверно снижает объем опухоли уже через две недели после начала введения. Показано, что введение соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен снижает рост опухоли по сравнению с интактными и животными, получавшими химиотерапевтический препарат Цисплатин. Достоверное снижение объема при этом наблюдается после введение изучаемого соединения в суммарной дозе 300 мг/кг. Показано, что 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в суммарных дозах: 75 и 300 мг/кг достоверно снижает количество метастазов по сравнению как с контрольными группами (1 и 2), так и с группой, где изучаемое соединение вводилось животным в меньшей дозе.

Пример 3. Исследован адъювантный эффект соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в различных дозах по ингибированию роста и метастазирования перевитой опухоли легочной карциномы Льюис при локальном облучении в дозе 15 Гр и без облучения.

В исследованиях использовано 200 мышей-самок (CBA×C57Bl/6)F1, с массой тела 20-22 г., содержавшихся в стандартных условиях и на стандартном рационе на основе брикетированных кормов. Исследуемое соединение растворяли в 1% крахмальном геле и мышам вводили зондом внутрижелудочно с учетом массы тела животных. Группы животных, вводимые дозы и схемы введения препаратов приведены в таблице 5.

Приготовление и подсчет суспензии опухолевых клеток легочной карциномы Льюис и их перевивка осуществлялась подкожно в количестве примерно 1,6⋅106 в 0,1 мл (140 шт.). Формировали равноценные группы по размеру опухоли с возможной выбраковкой животных, с учетом групповых и индивидуальных меток.

На 10-е сутки роста опухоли осуществляли локальное облучение опухолевого узла в индивидуальных контейнерах из оргстекла γ-лучами 60Со на установке «Луч-1» (Россия), однократно в дозе 15 Гр. Измерение объема опухолевого узла мышей и подсчет его индекса роста проводили на 7, 14 и 21 сутки. Умерщвление мышей-опухоленосителей осуществляли на 14 сутки и 21 сутки.

Кроме того, в крови подопытных животных определяли содержание ретикулоцитов. При определении содержания в крови ретикулоцитов 20 мкл крови помещали в пробирку с 3,98 мл раствора В.Н. Петерса. Подсчет ретикулоцитов осуществляли при помощи оптической микроскопии (Olympus «СХ21», Филиппины).

Определение индекса роста опухолевого узла (ИР)

ИР=Vn/Vo (Vn - 14-e или 21-е сутки после перевивки клеток карциномы Льюис, Vo-замер опухолевого узла на 7 сутки роста опухоли).

Размер опухоли определяли: высотыширинудлину (мм3).

Подсчет количества метастазов на легком

Мышей умерщвляли дислокацией шейных позвонков. Извлекали легкие и фиксировали их в растворе Буэна, представляющем собой смесь насыщенного водного раствора пикриновой кислоты, формалина и ледяной уксусной кислоты в соотношении 15:5:1, а затем подсчитывали число макроскопически видимых на поверхности легкого метастазов.

Статистическая обработка результатов экспериментов

Для всех полученных вариационных рядов были подсчитаны средние арифметические значения и их стандартные ошибки. Для определения значимости межгрупповых различий были использованы параметрические критерии (t - критерий Стьюдента, F - критерий Фишера) и непараметрические (Вилкоксона-Манна-Уитни, медианный критерий Кси-квадрат р<0,05, если кси-квадрат >3,84 и ранговый критерий Вардена р<0,05, если значение >1,96). Различия между группами признавали статистически значимыми при значении интеграла вероятности р, не превышающем 0,05. Статистический анализ проводился с помощью программы Origin 6.0 («MicroCal Softwares США).

Результаты проведенных свидетельствуют, что соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен проявляет адъювантные свойства по ингибированию роста и метастазирования перевитой опухоли легочной карциномы Льюис при локальном облучении в дозе 15 Гр.

Мыши-опухоленосители (контроль)

Объем опухолевого узла у мышей этой группы к 21-м суткам роста достигает 4280 мм3. Индекс роста (ИР) опухолевого узла у мышей-опухоленосителей к 14-м суткам составлял 8, а к 21-м суткам 20. Количество метастазов на поверхности легких - 33±6.

Мыши-опухоленосители + облучение 15 Гр.

ИР опухолевого узла у животных этой группы снижается до 5. То есть локальное воздействие облучения в дозе 15 Гр приводит к ингибированию роста опухоли на 35%, а к 21 суткам на 46% ИР - 10,8 (объем опухолевого узла уменьшается в 1,9 раз - 2770 мм3). Количество метастазов на поверхности легких - 41±6 (табл. 6 и 7).

Соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в дозе 5 мг/кг при самостоятельном применении и в сочетании с радиотерапией.

Соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в дозе 5 мг/кг на 14-е сутки роста опухоли способен статистически значимо ингибировать ИР на 28% (ИР - 5,8), а сочетании с облучением на 51% (ИР 4). К концу срока наблюдения (21-е сутки) зарегистрировали тенденцию к снижению роста опухолевого узла при самостоятельном применении изучаемого соединения, а при совместном с локальным облучением - ИР статистически значимо ниже (8,4), чем в группе «Контроль +15 ГР» (10,8). Следует отметить, что количество видимых метастазов на поверхности легких в этих опытных группах не отличалось от соответствующих групп контроля.

Соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в дозе 100 мг/кг при самостоятельном применении и в сочетании с радиотерапией (15 Гр)

При лечении мышей-опухоленосителей соединением 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в дозе 100 мг/кг зарегистрировали тенденцию к снижению роста опухоли (ИР на 14-е сутки роста опухоли - 6,5, а на 21-е - 16,8). В комплексе с радиотерапией отмечается наибольшее (статистически значимое) торможение роста опухоли на 14-е сутки - 52% (ИР - 3,9), а на 21-е сутки 61% (ИР - 7,9). В этой группе «соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в дозе 100 мг/кг на 3 сутки +15 Гр» отмечается не только подавление роста первичного очага опухоли, но и статистически значимое ингибирование метастазирования на 39%. На 21-е сутки количество метастазов на поверхности легких - 25, тогда как в группе «Контроль +15 Гр» - 41.

Соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен курс = 300 мг/кг (100 мг/кг на 5, 10 и 14 сутки) + 15 Гр

При данной схеме лечения мышей обнаружено не только статистически значимое замедление роста опухолевого узла на 14-е сутки на 52% (ИР - 3,9), а на 21-е на 58% (ИР - 8,4), но и статистически значимое снижение количества метастазов в легких на 32% (табл. 6 и 7).

* значимость различий (р≤0,05) по отношению к показателям группы «Контроль»;

# значимость различий (р≤0,05) по отношению к показателям группы «Контроль +15 Гр»

Р<0,05, если х2>3,84 или X>1,96

* значимость различий (р≤0,05) по отношению к показателям группы «Контроль»;

# значимость различий (р≤0,05) по отношению к показателям группы «Контроль + 15 Гр»;

Р<0.05, если x2>3,84 или X>1,96.

Таким образом, 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в изолированном применении статистически значимо увеличивает количество ретикулоцитов к 21 суткам после перевивки опухоли, что свидетельствует о наличии у данного соединения гемостимулирующих свойств в отношении эритропоэза.

Соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен оказывает влияние на снижение темпов роста легочной карциномы Льюис. При изолированном применении данного соединения наблюдается тенденция к снижению ИР опухоли, которая прослеживается как на 4, так и на 11 сутки после локального облучения (14 и 21 сутки после перевивки опухоли соответственно). При этом статистически значимое снижение ИР опухоли выявляется на 4 сутки после локального облучения (14 сутки после перевивки опухоли) при применении соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в дозе 5 мг/кг массы тела мыши. В случае применения изучаемого соединения в сочетании с локальным облучением опухоли в дозе 15 Гр, во всех исследованных случаях ИР опухоли статистически достоверно снижен по сравнению с группой, подверженной локальному облучению без применения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантена.

Соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен влияет на уровень метастазирования легочной карциномы Льюис. Применение соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в высоких дозах (100 мг/кг однократно и курс 300 мг/кг) на фоне радиотерапии статистически значимо снижает количество метастазов в легких. Примечательно, что соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен, проявляя антиоксидантные свойства при применении одновременно с локальным облучением опухоли, не приводит к снижению эффективности радиотерапии, в отличие от большинства других антиоксидантов.

Полученные данные в целом свидетельствуют о наличии у 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантена радиомодифицирующих свойств, что указывает на целесообразность дальнейшей разработки данного соединения в качестве адъюванта радиотерапии. Наблюдаемое в отдаленные сроки увеличение количества ретикулоцитов свидетельствует о возможной активации эритропоэза под действием соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен.

Пример 4. Проведены исследования протекторного действия соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен по способности защищать хромосомы лимфоцитов человека от генотоксического действия ионизирующего излучения.

В in vitro экспериментах была оценена способность соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен защищать геном лимфоцитов человека от генотоксического действия ионизирующего излучения, в том числе и при облучении лимфоцитов на наиболее радиочувствительной G2 стадии клеточного цикла. Для проведения цитогенетического анализа хромосомных аберраций в лимфоцитах использовали гепаринизированную кровь, которую получали от доноров обоего пола. Эритроциты осаждали с помощью желатины, а плазму, содержащую лейкоциты, отделяли от осадка и смешивали с тремя объемами культуральной среды. Состав культуральной среды: 80% среды RPMI с глютамином, антибиотиками и 20% сыворотки крупного рогатого скота. Лимфоциты в периферической крови представляют естественно синхронизированную популяцию клеток, более 90% которых находится в состоянии покоя на стадии G0. Для стимуляции деления лимфоцитов использовали ФГА фирмы «ПАНЭКО», Россия в концентрации 10-20 мг на 1 мл культуральной среды. Культуру лимфоцитов инкубировали при 37°С в течение 48 часов в присутствии 5% СО2. Как показали специальные исследования, эти условия обеспечивали максимальное содержание в культуре лимфоцитов, находящихся на G2 стадии. За 2 часа до окончания инкубации для накопления метафазных пластинок в среду добавляли демекальцин. Через 2 часа клетки осаждали центрифугированием, гипотонизировали 0.075 М хлористым калием и фиксировали смесью ледяной уксусной кислоты и абсолютного спирта (соотношение 1:3). Цитологические препараты готовили, нанося суспензию фиксированных клеток на предметное стекло с последующим высушиванием над пламенем и окраской азур-эозином. На препаратах подсчитывали аберрации хромосомного и хроматидного типа, определяли процент метафаз с аберрациями.

Соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в конечной концентрации 0,0044% вносили в среду для культивирования за 30 минут до облучения и оставляли на 2 часа в среде с облученными на стадии G2 клетками до их фиксации. При облучении клеток на стадии G0 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен вносили в суспензию находящихся в стационарной фазе клеток за 30 минут до облучения, облучали и затем инкубировали изучаемое соединение с облученными клетками при 37°С с 5% СО2 - в течение 24 часов до фиксации клеток. В таблице 8 приведены полученные результаты цитогенетических исследований.

Результаты цитогенетического анализа показали, что дозы облучения 0,5 Гр и 1 Гр достоверно увеличивают уровень повреждения хромосом у клеток, облученных на стадий G2 клеточного цикла без и в присутствии соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен. Результаты дисперсионного анализа показали, что соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен достоверно (р=0,033) защищает геном клеток лимфоцитов человека от генотоксического действия ионизирующего излучения (табл. 8).

Примечание.x) достоверное (Р<0,05) отличие от данных, полученных при облучении без соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен;

*)достоверное (Р<0,05) отличие от данных, полученных при анализе необлученных образцов.

Защитное действие соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен в отношении тканей продемонстрировано в его способности достоверно снижать частоту образования хромосомных аберраций в лимфоцитах из периферической крови человека.

Соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен при совместном, одновременном применении с химиопрепаратами и облучением не защищает опухолевые клетки от действия излучения и химиотерапии. Этот эффект вероятно связан с цитостатическим действием соединения 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен.

Таким образом, соединение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантен можно рекомендовать в качестве средства, обладающего адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей.

Предлагаемое изобретение расширяет арсенал средств, обладающих адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей.

Применение 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантена в качестве средства, обладающего адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей, и представляющего собой соединение структурной формулы (I)



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для лечения заболевания, требующего восстановления тканей и регенерации.

Изобретение относится к области медицины, биотехнологии и генной инженерии. Предложен рекомбинантный химерный полипептид-иммуноген, включающий консервативные Т- и В-клеточные эпитопы вируса ВИЧ-1 и последовательно расположенные пептидные фрагменты белков р24, gp41, gp120, узнаваемые широконейтрализующими антителами 10e8, 2F5, VRC01.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к индуцирующему иммунитет агенту, содержащему эффективное количество по меньшей мере одного полипептида, обладающего индуцирующей иммунитет активностью, который индуцирует цитотоксические Т-клетки, способные уничтожать опухолевые клетки, экспрессирующие полипептид CAPRIN-1.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для получения вирусоподобных частиц вируса мозаики альтернантеры. Для этого вирусоподобные частицы получают in vitro из белка оболочки вируса мозаики альтернантеры (ВМАльт) в отсутствие РНК.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего иммуностимулирующим действием. Способ получения средства, обладающего иммуностимулирующим действием, из надземной части горечавки холодной путем экстрагирования растительного материала, при этом измельченный растительный материал смешивают с 70% этанолом, подвергают смесь ультразвуковой обработке, смесь фильтруют и промывают на фильтре дополнительным объемом 70% этанола, далее остаток растительного материала после этанольной экстракции смешивают с водой, подвергают смесь ультразвуковой обработке, смесь фильтруют и промывают на фильтре дополнительным объемом воды, этанольное извлечение концентрируют, водное извлечение концентрируют, сконцентрированные этанольное и водное извлечения объединяют, высушивают и измельчают при определенных условиях.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению слитых белков, ингибирующих пролиферацию раковых клеток, что может быть использовано в медицине.
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для лечения хронического эндометрита с аутоиммунными нарушениями эндометрия. Для этого в качестве патогенетического лечения хронического аутоиммунного эндометрита с 5 дня менструального цикла назначается стерильный и подогретый до температуры тела 36,6-37°C 0,02%-ный раствор гепона (2,0 мл) внутриматочно 1 раз в сутки в течение 10 дней.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для получения препарата для стимуляции иммунного ответа. Препарат включает адъювант и инактивированный антигенный материал, при этом в качестве адъюванта применяют смесь жирной (C12-C22) кислоты и N,N-диметиламинопропиламида жирной (C12-C22) кислоты в мольном соотношении 1:1, и препарат включает следующие компоненты (вес.%): смесь жирной (C12-C22) кислоты и N,N-диметиламинопропиламида жирной (C12-C22) кислоты (в мольном соотношении 1:1) - 0,01-10; водный инактивированный антигенный материал в количестве, достаточном для индукции иммунного ответа - до 100.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к аптамеру, специфически связывающемуся с фактором роста нервов (NGF), и может быть использовано в медицине как противовоспалительное или обезболивающее средство.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению модифицированных биотин-связывающих белков, и может быть использовано в медицине для индуцирования иммунного ответа против антигенного белка или пептида.

Изобретение относится к области фармацевтической промышленности, а именно к фармацевтической композиции, содержащей (a) по меньшей мере один сложный сорбитановый эфир ненасыщенной жирной кислоты, имеющий полярную головку по меньшей мере с двумя или более гидроксильными группами; (b) по меньшей мере один фосфолипид; (c) по меньшей мере один отвердитель жидких кристаллов, который свободен от способной к ионизации группы и имеет триацильную группу с 15-40 атомами углерода или углеродную кольцевую структуру в гидрофобной части; и (d) по меньшей мере один аналог GnRH в качестве фармакологически активного вещества, при этом указанная композиция существует в виде жидкой фазы в отсутствие водной текучей среды и преобразуется в жидкий кристалл в присутствии водной текучей среды.

Группа изобретений относится к области фармакологии, а именно к фотосенсибилизаторам на основе хлорина е6. Фотосенсибилизатор для лечения онкологических заболеваний содержит соль хлорина е6 с N-метил-D-глюкамином (меглумином) и L-лизином в мольных соотношениях 1:2:1 и имеет структурную формулу (I): Также раскрыт способ получения фотосенсибилизатора для лечения онкологических заболеваний, который заключается в добавлении к хлорину е6 расчетных количеств N-метил-D-глюкамина (C7H17NO5) и L-лизина (C6H14N2O2), необходимых для образования соли формулы (I), с последующей фильтрацией полученного раствора двойной соли хлорина е6.

Изобретение относится к новому гетероциклическому соединению формулы (I) или к его энантиомеру и диастереоизомеру, и к его соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, где X и Y - атом углерода или атом азота, при этом они не могут одновременно представлять собой два атома углерода или два атома азота; Het фрагмент группы - необязательно замещенное, ароматическое или неароматическое 5-7-членное кольцо, содержащее в дополнение к азоту 1-3 гетероатома, выбранных из O, S и N, при этом азот может быть замещен группой, представляющей собой атом водорода, (С1-С6)алкильную группу или группу -С(O)-O-Alk; R1 и R2 - (С1-С6)алкильная группа, или R1 и R2 с атомом азота, несущим их, образуют 4-7-членный гетероциклоалкил, который может содержать в дополнение к атому азота, другой гетероатом, выбранный из кислорода, SO2 и NR, где R представляет собой (С1-С6)алкильную группу, (С1-С6)алкилсульфонильную группу, (C1-С6)полигалогеналкильную группу или группу -С(O)-O-Alk; R3 представляет собой (C1-С6)алкильную группу, (С2-С6)алкенильную группу, (С2-С6)алкинильную группу, циклоалкильную группу, (С3-С4)циклоалкил-(С1-С6)алкильную группу или гетероарильную группу; R4 представляет собой арильную, гетероарильную, циклоалкильную или (С1-С6)алкильную группу; R5 представляет собой атом водорода; Ra, Rb, Rc и Rd независимо друг от друга представляют собой атом водорода, атом галогена, (С1-С6)алкильную группу, (С1-С6)алкоксигруппу, гидроксигруппу, (С1-С6)полигалогеналкильную группу, или трифторметоксигруппу, или заместители одной из пар (Ra,Rb), (Rb,Rc) или (Rc,Rd) вместе с атомами углерода, несущими их, образуют 5-7-членное кольцо, которое может содержать 1-2 гетероатома, выбранных из кислорода, при этом один или несколько атомов углерода кольца, определенного выше, могут быть дейтерированными; при этом "арил" означает фенильную, нафтильную, бифенильную или инденильную группу; "гетероарил" означает любую моно- или бициклическую 5-10-членную группу, имеющую по меньшей мере один ароматический фрагмент и содержащую от 1 до 2 гетероатомов, выбранных из O, S и N; "циклоалкил" означает любую моно- или бициклическую неароматическую карбоциклическую 4-9-членную группу; причем алкильные, арильные, гетероарильные, циклоалкильные и гетероциклоалкильные группы, таким образом определенные, могут быть замещены посредством 1-3 групп, выбранных из (С1-С6)алкила, необязательно замещенного гидроксигруппой или метоксигруппой, (С3-С6)спиро, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкил-S-, гидрокси, оксо (или N-оксида в соответствующих случаях), циано, NR'R'', (С1-С6)полигалогеналкила, трифторметокси, или галогена, при этом предполагается, что R' и R'' независимо друг от друга представляют собой (C1-С6)алкильную группу; причем Het фрагмент группы , определенной выше, может быть замещен группой, выбранной из гидрокси.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к выделенному антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, которые специфически связываются с белком GITR человека.

Изобретение относится к органической и медицинской химии, а именно: к способу получения 7-замещенных 4,4-диметил-9-оксо-4,4а-дигидро-9H-ксантен-2-карбоновых кислот общей формулы I, где: R=СН3О (Ia); R=СН3 (Iб); R=Н (Iв); R=Br (Iг); R=Сl (Iд), путем взаимодействия 6-замещенных 3-(4-оксо-4Н-хромен-3-ил)акриловых кислот, где заместители имеют вышеуказанные значения, с енамином N-(2-метилпроп-1-енил)пирролидином при температуре от 20 до 80°С в течение от 0,5 до 4 часов в присутствии катализатора нитрата лантана (III) в количестве от 0 до 20 мол.

Изобретение относится к новым производным пирролопиримидина общей формулы (VIII), обладающим свойствами ингибитора клеточной пролиферации, опосредованной активностью киназ EGFR, BLK, BMX/ETK, BTK, FLT3 (D835Y), ITK, JAK1, JAK2, JAK3, TEC или TXK, которые могут быть использованы для лечения и/или профилактики расстройства пролиферации, рака или опухоли, связанной с активностью указанных киназ.

Изобретение относится к соединению, представленному следующей формулой (IA): ,в которой n равняется 0-2; A представляет собой C6-10ариленовую группу или C3-5гетероариленовую группу, содержащую один или два атома азота или один атом серы; G представляет собой одинарную связь, атом кислорода или -CH2-; E представляет собой содержащий азот неароматический C3-5гетероцикл; R1 представляет собой цианогруппу, моно-C1-6алкиламиногруппу, ди-C1-6алкиламиногруппу, C2-6алкильную группу, C1-6алкоксигруппу, необязательно замещенную 1-3 атомами галогена или одной гидроксильной группой, C1-6алкоксиC1-6алкильную группу или C1-6алкоксиC1-6алкоксигруппу; R2 представляет собой атом водорода, атом галогена, гидроксильную группу, C2-6ацильную группу, необязательно замещенную одним заместителем, выбранным из группы S, описанной ниже, C1-6алкильную группу, необязательно замещенную 1-3 атомами галогена, гидроксиC1-6алкильную группу или содержащую азот неароматическую C3-5 гетероциклическую группу; R3 представляет собой атом водорода, оксогруппу, C1-6алкильную группу или C1-6алкоксигруппу; R4 представляет собой C1-6алкильную группу; при условии, что, если E представляет собой азетидиновое кольцо, а R2 или R3 находится на атоме азота в азетидиновом кольце, то R2 или R3 не является атомом водорода; и группа S представляет собой группу, состоящую из гидроксильной группы, моно-C1-6алкиламиногруппы, ди-C1-6алкиламиногруппы, C1-6алкоксигруппы и содержащей азот неароматической C3-5 гетероциклической группы.

Изобретение относится к соединению общей формулы (I) в которой R1 представляет собой H или -CH3; R2 представляет собой -R8, -Q-R8, -R9, -Q-(CH2)n-R9, -(CH2)n-R9, -(CH2)m-NH-(CH2)n-R9, -CO-NH-(CH2)n-R9, -CO-NR10-(CH2)n-R9, -(CH2)a-(Q)b-(CH2)c-(G1)d-(CH2)e-(G2)f-(CH2)g-R8, -(Q)b-(CH2)m-(G1)d-(CH2)e-R8, -Q-R10; R3 представляет собой i) -OH, -NH2, -F, -Cl, -Br, -I, -CN, -OR11, -CO-O-R11, -NR11-CO-OR12, -NHR11, -NR11R12, -CONR11R12, -O-CO-NR11R12, -O-CO-OR11, -CH3, -NR11-CO-NR12R13, -SO2NR11R12, -N=S(=O)R11R12, -SR11, -S(=O)R11, -NR11-S(=O)R12, -O-S(=O)R11, -SO2-R11, -NR11-SO2-R12, -O-SO2-R11, -SO(=NR11)-R12, -O-CO-R11, -NR11-CO-Rl2, -CF3; ii) неразветвленный или разветвленный С1-С8-алкил, С3-С8-циклоалкил; iii) 4-членный гетероциклил, содержащий один гетероатом N, 5-членный гетероциклил, содержащий один гетероатом N, 6-членный гетероциклил, содержащий один-два гетероатома N, O, 6-членный циклоалкенил, 6-членный арил, 5-членный гетероарил, содержащий один-четыре гетероатома N, S, O, 6-членный гетероарил, содержащий один гетероатом N, где все вышеуказанные циклические системы могут быть замещены 1-2 заместителями, выбранными из Z1 и Z2; Z1 и Z2, если они присоединены к одному и тому же атому углерода, могут вместе представлять собой атом =О, который образует карбонильную группу с атомом углерода, к которому присоединены Z1 и Z2; R3 вместе с R4 могут образовывать карбоциклическое или гетероциклическое 5-, 6- или 7-членное кольцо с двумя атомами углерода бензольного кольца, к которым присоединены R3 и R4, и указанное 5-, 6- или 7-членное кольцо может быть частично насыщенным или ненасыщенным и может быть замещено 1 заместителем, выбранным из Z1; R4-R7 независимо друг от друга представляют собой -H, -F, -Cl, -CH3; значения остальных радикалов указаны в формуле изобретения.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению формулы (I) или к его фармацевтически приемлемой соли, где X1 выбирают из прямой связи или -NН-; Q1 выбирают из группы, включающей C5-C7 циклоалкил, фенил, пиридил, пиразолил, пиримидинил, пиперидил, (C3-C10 циклоалкил)-C1-C6 алкил и (3-10-членный неароматический гетероциклил)-C1-C6 алкил; где Q1 необязательно замещен одним A1; X2 выбирают из -CO- и -SO2-; R11 выбирают из группы, включающей C1-C6 алкил и C3-C6 циклоалкил, которые необязательно замещены одной гидроксильной группой; R5 выбирают из группы, включающей атом галогена, C6-C10 арил, 5-10-членный гетероарил и 3-10-членный неароматический гетероциклил; где арил, гетероарил и гетероциклил необязательно замещены 1-3 заместителями A3; R2, R3 и R4 представляют собой атом водорода; A1 выбирают из группы, включающей C1-C6 алкил, -NR16R17, -OR18, 3-10-членный неароматический гетероциклил и (CD3)2N-C1-C6 алкил; где алкил и гетероциклил необязательно замещены одним A4 и где гетероциклил необязательно замещен одним C1-C6 алкилом; А3 независимо выбирают из группы, включающей атом галогена, циано, C1-C6 алкил и -OR18; R16 независимо выбирают из группы, включающей атом водорода, C1-C6 алкил и -COR20; где алкил необязательно замещен одним A4; R17 выбирают из группы, включающей атом водорода и C1-C6 алкил, который необязательно замещен одним A4; или R18 выбирают из группы, включающей атом водорода и C1-C6 алкил, где алкил необязательно замещен одним или тремя А4; R20 выбирают из группы, включающей C1-C6 алкил и 3-10-членный неароматический гетероциклил; где алкил и гетероциклил необязательно замещены одной аминогруппой; A4 независимо выбирают из группы, включающей атом галогена, -NR24R25, гидрокси и 3-10-членный неароматический гетероциклил; где гетероциклил необязательно замещен одним A5; R24 и R25 независимо выбирают из группы, включающей атом водорода и C1-C6 алкил, где алкил необязательно замещен одной гидроксигруппой; A5 выбирают из группы, включающей атом галогена, C1-C6 алкил и гидрокси; где 5-10-членный гетероарил выбирают из группы, включающей пиридил, пиразолил, пиримидинил, бензоимидазолил и пирролопиридинил; 3-10-членный неароматический гетероциклил выбирают из группы, включающей пиперидил, пиперазинил, пирролидинил и морфолинил.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для лечения рака молочной железы человека. Для этого мультивалентная антигенная композиция содержит адъювант и два или более полипептида, где два или более полипептида включают: I) полипептид, содержащий последовательность α-лактальбумина SEQ ID NO: 1, и полипептид, содержащий последовательность αS1-казеина SEQ ID NO: 2; II) полипептид, содержащий последовательность α-лактальбумина SEQ ID NO: 1, и полипептид, содержащий последовательность β-казеина SEQ ID NO: 3; или III) полипептид, содержащий последовательность α-лактальбумина SEQ ID NO: 1, и полипептид, содержащий последовательность κ-казеина SEQ ID NO: 4.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой гепатопротекторную инъекционную фармацевтическую композицию на основе силимарина и наночастиц селена, включающую силимарин, дистиллированную воду, отличающуюся тем, что дополнительно содержит наночастицы селена, восстановленные из селенистой кислоты с образованием коллоидного селена, при этом в качестве восстановителя для коллоидного селена используют цистеин, или аскорбиновую кислоту, или тиосульфат натрия, или меркаптоэтанол, кроме того, содержит в качестве стабилизатора pH гидроксид натрия, или гидроксид калия, или аргинин, кроме того, содержит стабилизатор для силимарина, в качестве которого используют янтарную, или фумаровую, или яблочную, или лимонную, или щавелевую кислоту.

Изобретение относится к области фармацевтики, а именно к применению 9-фенил-симм-октагидроселено-ксантена в качестве средства, обладающего адъювантным действием при радио- и химиотерапии опухолей, и представляющего собой соединение структурной формулы Изобретение обеспечивает снижение в отношении здоровых органов и тканей негативного воздействия химио- и радиотерапии и при этом усиливает их действие на опухолевые клетки. 1 ил., 4 пр.,8 табл.

Наверх