Средство для снижения функциональной активности и экспрессии гликопротеина-р



Средство для снижения функциональной активности и экспрессии гликопротеина-р
Средство для снижения функциональной активности и экспрессии гликопротеина-р

Владельцы патента RU 2649134:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова" (RU)

Изобретение относится к фармакологии и медицине, а именно к неврологии и онкологии. Предложено применение афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) в качестве средства для снижения функциональной активности и экспрессии гликопротеина-Р. Техническим результатом изобретения является расширение арсенала средств, обладающих способностью ингибировать функциональную активность и экспрессию гликопротеина-Р для повышения эффективности фармакотерапии патологий ЦНС и онкологических заболеваний лекарственными веществами-субстратами данного белка-транспортера; средств, пригодных для прогнозирования принадлежности лекарственных препаратов к субстратам мембранного белка-транспортера гликопротеина-Р, и средств, применяемых в качестве положительного контроля пониженной активности гликопротеина-Р при поиске веществ аналогичного действия. В связи с низкой токсичностью и экономической доступностью афобазола его применение с целью ингибирования гликопротеина-Р является рациональным и безопасным, позволяет повысить эффективность терапии без риска усиления токсичности и имеет дополнительные преимущества, обусловленные анксиолитическим и нейропротекторным действиями препарата. 2 табл.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, клинической фармакологии, неврологии и онкологии, и предназначено для повышения эффективности фармакотерапии заболеваний центральной нервной системы и онкологических заболеваний лекарственными веществами-субстратами гликопротеина-Р (Pgp), прогнозирования возможной принадлежности изучаемых лекарственных препаратов к субстратам мембранного белка-транспортера гликопротеина-Р, использования афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола) в качестве положительного контроля пониженной активности Pgp при поиске веществ аналогичного действия.

Гликопротеин-Р (Pgp) является мембранным белком-транспортером, который использует энергию макроэргических связей АТФ для эффлюкса из клеток, различных по химической структуре эндо- и ксенобиотиков, среди которых большое число современных лекарственных средств. Pgp экспрессируется эпителиоцитами слизистой оболочки тонкого кишечника и проксимальных канальцев нефронов, гепатоцитами и эндотелиоцитами гистогематических барьеров. Транспортер ограничивает энтеральную абсорбцию лекарственных веществ, являющихся его субстратами в кишечнике, участвует в процессах их распределения и способствует их экскреции в желчь и мочу. Таким образом, от функциональной активности данного белка-транспортера зависит фармакокинетика лекарственных веществ-субстратов Pgp, а значит эффективность и безопасность фармакотерапии [F. Montanari, G.F. Ecker. Prediction of drug-ABC-transporter interaction - Recent advances and future challenges. // Adv. Drug. Rev. - 2015. - Vol. 86. - P. 17-26; Метаболизм лекарственных средств. Научные основы персонализованной медицины: руководство для врачей / В.Г. Кукес [и др.]. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 304 с.].

Pgp кодируется генами MDR (multidrug resistance gene), которые включают у человека два гена - MDR1 и MDR2. Ген MDR1 вовлечен в механизмы развития лекарственной устойчивости [Localization of the human multiple drug resistance gene, MDR1, to 7q21.1 / D.F. Callen [et al.] // Hum Genet. - 1987. - Vol. 77. - P. 142-144]. Pgp придается основное значение в формировании множественной резистентности опухолей к химиотерапии за счет эффлюкса лекарственных веществ из опухолевых клеток.

Известно, что в настоящее время для определения локализации Pgp в организме, а также обнаружения его потенциальных субстратов в качестве ингибиторов белка-транспортера предложено значительное количество веществ, таких как, верапамил, циклоспорин, кетоконазол, тариквидар, хинидин и др. [K.K. Machavaram, J. Gundu, M.R. Yamsani. Effect of ketoconazole and rifampicin on the pharmacokinetics of ranitidine in healthy human volunteers: a possible role of P-glycoprotein // Drug Metabol. Drug Interact. - 2006. - Vol. 22, №1. - P. 47-65; E. Fox, S.E. Bates Tariquidar (XR9576): a P-glycoprotein drug efflux pump inhibitor // Expert Rev. Anticancer Ther. - 2007. - Vol. 7, №4. - P. 447-459].

Известно применение верапамила в дозе 9 мг/кг в качестве средства ингибирования функциональной активности Pgp в эксперименте на кроликах для анализа участия данного белка-транспортера в фармакокинетике омепразола [Involvement of cytochrome Р450 3А4 and P-glycoprotein in first-pass intestinal extraction of omeprazole in rabbits / H.M. Fang [et al.] // Act. Pharmacologica Sinica. - 2009. - Vol. 30. - P. 1566-1572]. Однако верапамил оказывает существенное влияние на сердечно-сосудистую систему: снижает частоту сердечных сокращений и атриовентрикулярную проводимость, обладает гипотензивным действием. Таким образом, возможность использования верапамила у людей ограничено выраженными системными эффектами, поэтому данный препарат можно использовать лишь по строгим показаниям.

Известно использование тариквидара для селективного ингибирования функциональной активности Pgp в гематоэнцефалическом барьере. Указанное вещество применялось на культурах клеток с повышенной экспрессией генов MDR1 (человеческого) и mdrla (мышиного) [(R)-[(11)C] verapamil is selectively transported by murine and human P-glycoprotein at the blood-brain barrier, and not by MRP1 and BCRP / K. Romermann [et al.] // Nucl Med Biol. - 2013. - Vol. 40, №7. - P. 873-878], кодирующих данный белок-транспортер и на крысах wistar Unilever в дозе 15 мг/кг с последующей оценкой проницаемости гематоэнцефалического барьера для субстратов белка-транспортера методом позитронно-эмиссионной томографии [Tariquidar-induced P-glycoprotein inhibition at the rat blood-brain barrier studied with (R)-11C-verapamil and PET / J.P. Bankstahl [et al.] // J. Nucl. Med. - 2008. - Vol. 49. - P. 1328-1335]. Однако тариквидар является дорогостоящим веществом зарубежного производства, не зарегистрированным в качестве лекарственного средства в Российской Федерации, что не позволяет применять его на людях для повышения эффективности фармакотерапии заболеваний головного мозга препаратами-субстратами Pgp.

Известно применение циклоспорина в качестве средства для ингибирования функциональной активности Pgp, например, при оценке распределения, фармакокинетики и метаболизма его субстрата глибенкламида [Effects of Selected ОАТР and/or ABC Transporter Inhibitors on the Brain and Whole-Body Distribution of Glyburide / N. Tournier [et al.] // AAPS J. - 2013. - Vol. 15, №4. - P. 1082-1090]. В другом исследовании, выполненном на ВИЧ-инфицированных взрослых добровольцах было установлено, что циклоспорин в дозе 4 мг/кг ингибирует Pgp Т-лимфоцитов крови [Oral cyclosporin A inhibits CD4 Т cell P-glycoprotein activity in HIV-infected adults initiating treatment with nucleoside reverse transcriptase inhibitors / T. Hulgan [et al.] // J. Clin. Pharmacol. - 2009. - Vol. 65, №11 - P. 1081-1088], a в дозе 16 мг/кг/день в комплексной терапии антрациклин резистентной миелогенной лейкемии увеличивает продолжительность ремиссии [Benefit of cyclosporine (CsA) modulation of anthracycline resistance in high-risk AML: A Southwest Oncology Group study / A.F. List [et al.] // Blood. - 1998. - Vol. 92 (1). - P. 312а]. Однако циклоспорин является иммуносупрессором, при использовании в терапевтической дозе характеризуется значительной аллергенностью и токсичностью: нежелательным действием на желудочно-кишечный тракт, печень, почки, систему кроветворения, поэтому не может рекомендоваться в качестве ингибитора Pgp [Cyclosporine Nephrotoxicity / By Emmanuel [et al.] // Bennett Seminars in Nephrology. - 2003. - Vol. 23, №5. - Р. 465-476].

Применение кетоконазола в дозе 400 мг один раз в день в течение 4 дней на здоровых добровольцах также может вызывать состояние ингибирования функциональной активности Pgp [Inhibitory effect of ketoconazole on the pharmacokinetics of a multireceptor tyrosine kinase inhibitor BMS-690514 in healthy participants: assessing the mechanism of the interaction with physiologically-based pharmacokinetic simulations / Z. Yang [et al.] // J. Clin Pharmacol. - 2013. - Vol. 53, №2. - Р. 217-227]. Однако значительная гепатотоксичность кетокойазола [Human arylacetamide deacetylase hydrolyzes ketoconazole to trigger hepatocellular toxicity / T. Fukami [et al.] // Biochem Pharmacol. - 2016. - Vol. 116. - P. 153-161] ограничивает применение препарата в качестве ингибитора Pgp.

Продемонстрировано использование синтетического прогестина - линестренола (14-дневный курс перорального введения в дозе 110 мкг/кг однократно в сутки) с целью ингибирования функциональной активности Pgp [Пат. 2553362 Рос. Федерация, G09B 23/28. Способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-Р линестренолом в эксперименте / А.А. Котлярова, Е.Н. Якушева, РязГМУ им. акад. И.П. Павлова. - №2014100531 /15; заявл. 09.01.2014; опубл. 10.06.15, Бюл. №16]. Однако данное вещество является пролекарством гормонального вещества норэтистерона, связывающегося с рецепторами прогестерона. Таким образом, данный препарат может вызывать побочные эффекты, связанные с его гормональным действием.

Способность афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) ингибировать активность Pgp в настоящий момент в научной литературе не описана. Афобазол (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) - это оригинальный отечественный селективный анксиолитик с нейропротекторной активностью, предотвращающий стресс-индуцированное падение связывания в бензодиазепиновом участке ГАМКА-рецепторного комплекса, одобренный для клинического применения в РФ в 2005 году. Препарат не обладает характерными для бензодиаземинов гипноседативным, амнестическим и миорелаксантным эффектами, однако по анксиолитическим свойствам им не уступает [С.Б. Середенин, М.В. Воронин. Фармакология нового анксиолитика афобазола. // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2009. - Т. 72, №1. - С. 3-11].

Продемонстрировано отсутствие кумуляции афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) в связи с особенностями химического строения и тканевой доступности. Поэтому данный препарат может назначаться несколько раз в день в течение длительного времени [Фармакокинетическая оценка пролонгированной лекарственной формы афобазола в сравнении с таблетками препарата, выпускаемыми промышленностью / П.О. Бочков [и др.] // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2013. - Т. 76, №11. - С. 33-35].

Применение афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) не сопровождается гипноседативными эффектами (проявляются лишь в дозах, превышающих ED50 для анксиолитического действия более чем в 40 раз). У препарата не выявлены миорелаксантные свойства и отрицательное влияние на показатели внимания и памяти, к нему не формируется лекарственная зависимость и не развивается синдром отмены. Это позволяет отнести афобазол (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) к безопасным безрецептурным средствам [А.С. Аведисова. Афобазол - безопасный препарат для лечения тревоги в общей практике. // Русский медицинский журнал. - 2006. - Т. 14, №22. - С. 1-3].

Целью изобретения является поиск средств, обладающих способностью ингибировать функциональную активность и экспрессию Pgp.

Поставленная задача достигается тем, что в качестве ингибитора Pgp выбран безопасный и экономически доступный лекарственный препарат афобазол (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид).

Для решения поставленной задачи нами выполнено исследование на 17 половозрелых кроликах-самцах породы Шиншилла средней массой 3500-4300 г в соответствии с правилами лабораторной практики (приказ МЗ РФ №199н от 1 апреля 2016 г.).

Животные были разделены на 2 серии: в первой серии (n=7) исследовали влияние афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) на функциональную активность Pgp, во второй (n=10) оценивали влияние тестируемого средства на экспрессию транспортера в печени, почках, тонком кишечнике и головном мозге животных.

В качестве маркерного субстрата Pgp использовали фексофенадин, который не подвергается метаболизму в организме и выводится печенью (90%) и почками данным белком-транспортером. Первая серия животных получала фексофенадин (таблетки, покрытые оболочкой Телфаст, 180 мг, Aventis Pharma, Италия) однократно внутрижелудочно (в/ж) в дозе 67,5 мг/кг [Функциональная активность гликопротеина-Р при экспериментальных манипуляциях. / Е.Н. Якушева [и др.] // Рос. мед.-биол. вестн. им. акад. И.П. Павлова. - 2014. - №2. - С. 74-77] до и после 14-дневного введения им препарата афобазол (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) (таблетки Афобазол, 10 мг, ОАО «Фармстандарт-Лексредства», Россия) в дозе 3,8 мг/кг массы в виде 10%-ной суспензии на воде, очищенной 3 раза в день (в/ж) [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Р.У. Хабриев; под общ. ред. чл.-кор. РАМН проф. Р.У. Хабриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: ОАО Издательство «Медицина», 2005. - С. 48-51]. Следует отметить, что последнее введение афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) осуществлялось за 1 час до введения маркерного субстрата для возможности выявления непосредственного воздействия препарата на молекулу Pgp, но исключения взаимодействия веществ в ЖКТ. Затем забирали у кроликов кровь из краевой вены уха в объеме 5 мл в гепаринизированные пробирки, 10 мин центрифугировали при 3000 об/мин для получения плазмы. В плазме крови определяли концентрацию фексофенадина методом ВЭЖХ на хроматографической системе «Stayer» по методике, описанной ранее [Функциональная активность гликопротеина-Р при экспериментальных манипуляциях. / Е.Н. Якушева [и др.] // Рос. мед.-биол. вестн. им. акад. И.П. Павлова. - 2014. - №2. - С. 74-77].

Животные второй серии были разделены на 2 группы по 5 кроликов в каждой. Первая группа представляла собой интактных животных, которые подвергались эвтаназии методом воздушной эмболии, после чего у них для анализа забирали образцы печени и тонкой кишки и фиксировали ткани в 10%-ном растворе нейтрального формалина. Второй группе животных вводили афобазол (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) в дозе 3,8 мг/кг (в/ж) 14-дневным курсом, затем у них также забирались органы для иммуногистохимического исследования.

Гистологический материал подвергался стандартной обработке: обезвоживание в растворах этанола возрастающей концентрации, просветление ксилолом и помещение в парафин. Перед реакцией иммунного окрашивания производили демаскировку антигенов тканей посредством нагревания на водяной бане в 10 мМ цитратном буфере (pH 6,0), блокировали эндогенную пероксидазу 3% раствором пероксида водорода. Затем инкубировали срезы с первичными антителами к Pgp (ABCBl antibody-middle region, Aviva Systems Biology, США) в разведении 1:100 по стандартной методике. Для иммунного окрашивания использовали полимерную систему детекции с пероксидазной меткой («Ventana», США). Ядра клеток докрашивали гематоксилином.

Микропрепарат фотографировали с помощью цифровой камеры «ЛОМО ТС-500» (Россия) при увеличении в 400 раз. В каждом гистологическом препарате оценивали 10 репрезентативных участков (10 фотографий). В дальнейшем изображения анализировали с помощью медицинской программы для анализа и обработки цифровых изображений ImageJ (США). С помощью плагина Colour Deconvolution, имеющего встроенную схему для анализа окраски «гематоксилин + диаминобензидин», изображение разделяли на синий и коричневый цвет. Интенсивность окраски «диаминобензидина» на фотографиях кишечника оценивали с использованием модуля «гистограмма» в диапазоне от 0 (черное) до 255 (белое), а затем переводили полученные значения в «+»: где 255 - «+», а 0 - «+++» [Ингибирование активированных звездчатых клеток лизиноприлом для предупреждения фиброза поджелудочной железы в модели хронического алкогольного панкреатита / М.Е. Ничитайло [и др.] // Клiн. xip - 2012. - №7. - С. 52-56; Quantitative Immunohistochemical Analysis Reveals Association between Sodium Iodide Symporter and Estrogen Receptor Expression in Breast Cancer / R. Malhotra [et al.] // PLoS ONE. - 2013. - Vol. 8 (1). - P. 1-9]. В печени определяли относительную площадь мембран, экспрессирующих Pgp, которую рассчитывалась автоматически как: площадь мембран, экспрессирующих Pgp (pix2)/общая площадь поля зрения (pix2).

Фармакокинетические параметры фексофенадина рассчитывали модельно-независимым методом вручную.

Полученные результаты обрабатывали с помощью программы «StatSoft Statistica 7.0». Наличие достоверных различий между значениями Тmax фексофенадина оценивали с помощью критерия Вилкоксона, а полученные результаты представлены в виде медианы, нижнего и верхнего квартилей (Med, lq, uq). Статистическую значимость различий между фармакокинетическими параметрами, за исключением Тmax, оценивали исходя из представления о лог-нормальном распределении данных. Сравнение изучаемых фармакокинетических параметров проводили с применением дисперсионного анализа повторных измерений (ANOVA) после их логарифмирования. Статистически значимыми принимали различия при значении p<0,05. Дополнительно рассчитывали двухсторонний 90%-й доверительный интервал отношения геометрических средних значений фармакокинетических параметров на фоне введения афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) к параметрам интактных животных. Согласно рекомендациям U.S. Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research значимыми считаются различия между фармакокинетическими параметрами, если двухсторонний 90%-й доверительный интервал их отношения находится вне диапазона 0,8-1,25 (80-125%). Полученные результаты представлены в таблицах в виде среднего геометрического и его 95% доверительного интервала.

Для сравнения показателей, характеризующих экспрессию гликопротеина-Р, использовали критерий Манна-Уитни. Полученные результаты представлены в виде медианы, нижнего и верхнего квартилей (Med, lq, uq).

Введение кроликам-самцам афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) курсом 14 дней приводило к следующей динамике основных фармакокинетических параметров фексофенадина (табл. 1).

Было выявлено, что на фоне курсового введения животным афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) происходило увеличение AUC0-t, в 2,05 раза (90%-й ДИ 1,14; 5,06, р=0,053), AUC0-∞, в 2,32 раза (90%-й ДИ 1,3; 6,07, p=0,04) и снижение общего клиренса в 0,43 раза (90%-й ДИ 0,16; 0,76, p=0,04). Cmax фексофенадина, коэффициент абсорбции и Tmax достоверно от показателей интактных животных не отличались.

Курсовое введение кроликам афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) приводило к снижению экспрессии Pgp в печени на 23,2% (р=0,032) по сравнению с показателями интактных животных. В тонком кишечнике экспрессия транспортера статистически значимо не изменялась (см. табл. 2).

Изменение фармакокинетических параметров фексофенадина отражает динамику функциональной активности Pgp, в связи с тем, что всасывание, распределение и экскреция данного препарата контролируется преимущественно данным белком-транспортером [Design of Fexofenadine Prodrugs Based on Tissue-Specific Esterase Activity and Their Dissimilar Recognition by P-Glycoprotein / K. Ohura [et al.] // J. Pharm. Sci. -2015. - Vol. 104, №9. - P. 3076-3083].

Обнаруженная динамика фармакокинетики фексофенадина после курсового введения кроликам афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) свидетельствует о том, что содержание маркерного субстрата в плазме крови животных повысилось, а его экскреции замедлилась, что является доказательством ингибирования функциональной активности Pgp. Причем снижение функциональной активности транспортера коррелировало с ингибированием его экспрессии в печени.

В проведенном исследовании изучено влияние афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) на функциональную активность Pgp. Достоверное повышение значений AUC0-24, AUC0-∞, а также снижение значений Сl фексофенадина могут служить доказательством ингибирующего влияния афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) на функциональную активность белка-транспортера Pgp на уровне целостного организма.

Показанная способность афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) снижать функциональную активность и экспрессию Pgp позволяет применять его для ингибирования Pgp в гематоэнцефалическом барьере и опухолевой ткани для повышения проникновения лекарственных веществ-субстратов транспортера в головной мозг и клетки опухоли для более эффективной фармакотерапии заболеваний центральной нервной системы и онкологических болезней, а также использовать афобазол (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) в качестве положительного контроля пониженной функциональной активности белка-транспортера при поиске веществ аналогичного действия и для прогнозирования потенциальных субстратов Pgp при изучении лекарственных веществ на этапе доклинических исследований.

Применение афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) в качестве средства для снижения функциональной активности и экспрессии гликопротеина-Р.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к фармацевтической композиции и способам ее применения для борьбы с отсутствием аппетита у животных, страдающих отсутствием аппетита или другими болезнями или нарушениями, которые вызывают потерю веса.

Изобретение относится к области медицины, а именно, к радионуклидной диагностике и может быть использовано для выявления очагов воспаления с помощью методики полиорганной сцинтиграфии.

Изобретение относится к медицине, а именно к лучевой диагностике, кардиологии, кардиохирургии, и может быть использовано для визуализации коронарных вен с использованием компьютерной томографии.

Группа изобретений касается онкологии и фармакологии. Предложено терапевтическое и/или профилактическое средство против опухоли с мутацией в RET и против метастазов опухоли, которое содержат соединение формулы (I), где R - C1-6-алкил, его соль или его сольват в качестве активного ингредиента; терапевтическое и/или профилактическое средство того же состава, используемое для пациента с мутацией в RET и против метастазов опухоли; способ идентификации рака или пациента, реагирующего на лечение соединением формулы (I).
Группа изобретений относится к области фармакологии и касается немедицинского применения питательной композиции, содержащей нуклеозидный эквивалент, который выбран из группы нуклеиновых оснований, нуклеозидов, мононуклеотидов и их физиологически приемлемых производных, которые могут быть in vivo преобразованы в нуклеозид как таковой или в нуклеотид как таковой, фосфолипид, и холин, при условии, что фосфолипид представляет собой фосфатидилхолин, и массовое соотношение содержания фосфатидилхолина к содержанию холина составляет более 0,26, для увеличения или поддержания индекса массы тела у пожилого человека, и где композицию вводят человеку в составе диеты, по существу, не увеличивающей ежедневного потребляемого человеком количества калорий.

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к ветеринарной терапии, и может быть использовано для стимуляции регенеративных процессов в организме собаки. Средство состоит из экстракта мезенхимальных стволовых клеток (МСК) и кондиционной среды, получаемой в процессе культивирования МСК, при этом средство получено с использованием следующих этапов: выделение de novo или деконсервирование культуры МСК из костного мозга или жировой ткани собаки, культивирование и накопление МСК, получение и сбор кондиционной среды, получение экстракта МСК путем замораживания-оттаивания клеточной суспензии, добавление глицина в концентрации 20 мг/мл к смеси экстракта МСК и кондиционной среды, стерилизация, розлив во флаконы, лиофильная сушка.

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к ветеринарной терапии, и может быть использовано для стимуляции регенеративных процессов в организме лошади. Средство состоит из экстракта мезенхимальных стволовых клеток (МСК) и кондиционной среды, получаемой в процессе культивирования МСК, при этом средство получено с использованием следующих этапов: выделение de novo или деконсервирование культуры МСК из костного мозга или жировой ткани лошадей, культивирование и накопление МСК, получение и сбор кондиционной среды, получение экстракта МСК путем замораживания-оттаивания клеточной суспензии, добавление глицина в концентрации 20 мг/мл к смеси экстракта МСК и кондиционной среды, стерилизация, розлив во флаконы, лиофильная сушка.

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к ветеринарной терапии, и может быть использовано для стимуляции регенеративных процессов в организме кошки. Средство состоит из экстракта мезенхимальных стволовых клеток (МСК) и кондиционной среды, получаемой в процессе культивирования МСК, при этом средство получено с использованием следующих этапов: выделение de novo или деконсервирование культуры МСК из костного мозга или жировой ткани кошки, культивирование и накопление МСК, получение и сбор кондиционной среды, получение экстракта МСК путем замораживания-оттаивания клеточной суспензии, добавление глицина в концентрации 20 мг/мл к смеси экстракта МСК и кондиционной среды, стерилизация, розлив во флаконы, лиофильная сушка.

Изобретение относится к области медицины, а именно к медицинской микробиологии и инфектологии, и предназначено для профилактики и лечения бактериальных инфекций. Применяют тритерпеноид милиацин в качестве средства для селективного влияния на биопленкообразование микроорганизмами, снижающего биопленкообразование патогенными - Salmonella typhimurium, Salmonella enteritidis и условно-патогенными - Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus бактериями и одновременно сохраняющего биопленкообразование нормофлорой - лактобактериями - Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus acidophilus и бифидобактериями - Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis.

Изобретение относится к медицин, а именно к терапии и хронобиологии, и касается профилактики и лечения полярного десинхроноза. Для этого субъекта помещают в трехмерное изолированное пространство с устойчивой внутренней хроноструктурой, не зависящей от внешней среды, на срок не менее 3 дней.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к производному бензмидазол-2-пиперазин общей формулой (I), где R - фтор; один из X, Y, Z - азот, а два других - углеводороды, либо же X, Y, Z -углеводороды; R1 - водород, метоксил, трифторметил, галоген, циан, CONR2R3 и NR2R3; R2 - водород, C1-С6-алкил; R3 - водород, C1-С6-алкил, или NR2R3 вместе образуют цикл морфолина, пирролидина.

Изобретение относится к новому производному 2,4-замещенного фенилен-1,5-диамина формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, обладающим активностью ингибитора в отношении тирозинкиназы EGFR.

Изобретение относится к соединению, характеризующемуся формулой VIIb: VIIb,в которой каждый из R1 и R2 представляет собой водород; R3 представляет собой водород или С1-6алкил; каждая Q1 независимо представляет собой галоген, оксо, С1-6алкил, -RuORx, -RuSRx, =NORd, где алкильные группы необязательно замещены одним гидроксилом; Y представляет собой -(CR5R6)q-; Z представляет собой O или S; каждый W независимо представляет собой CR8 или N; W1 представляет собой N или C; W2 представляет собой N или C; W4 представляет собой N; W5 представляет собой N или CR13; R13 представляет собой водород или Q2; каждая из Q5 и Q6 независимо представляет собой водород, галоген, циано, C1-6алкил, галоген C1-6алкил, C2-6алкенил, C2-6алкинил, C3-7циклоалкил, C3-7циклоалкенил, 5-6-членный гетероарил с одним-четырьмя атомами азота, 6-членный гетероциклил с одним-двумя гетероатомами, независимо выбранными из атома азота и кислорода, 6-членный частично ненасыщенный гетероциклил с одним гетероатомом, выбранным из атома азота и кислорода, (6-членный гетероциклил с двумя гетероатомами, независимо выбранными из атома азота и кислорода)-C1-6алкил, -RuORx, -RuN(Ry)(Rz), -RuSRx, -RuC(J)Rx, -RuC(J)ORx, -RuC(J)N(Ry)(Rz), -RuC(J)C1-6алкил-N(Ry)(Rz), -RuC(J)N(Ry)ORx, -RuS(O)tRw, -RuN(Rx)C(J)Rx или -C(=NОRх)Rx, где алкильные, алкенильные, алкинильные, гетероарильные и гетероциклильные группы необязательно замещены одной-тремя группами Q8; J представляет собой O или NRx; каждый t равен 2; и q равен 0 или 1; значения остальных радикалов указаны в формуле изобретения.

Группа изобретений касается онкологии и фармакологии. Предложено терапевтическое и/или профилактическое средство против опухоли с мутацией в RET и против метастазов опухоли, которое содержат соединение формулы (I), где R - C1-6-алкил, его соль или его сольват в качестве активного ингредиента; терапевтическое и/или профилактическое средство того же состава, используемое для пациента с мутацией в RET и против метастазов опухоли; способ идентификации рака или пациента, реагирующего на лечение соединением формулы (I).

Изобретение относится к соединениям общей формулы I или к их фармацевтически приемлемым солям, в которой радикалы и символы, определены в формуле изобретения. Соединения формулы I ингибируют Btk и могут применяться для модуляции активности Btk и лечения заболеваний, ассоциированных с избыточной активностью Btk.

Изобретение относится к соединениям формулы (I) или его фармацевтически приемлемым солям в которой Rx представляет водород или C1-C3 алкил; Ry представляет C1-C3 алкил; X1 представляет N или CRx1; X2 представляет CRx2; Y1 представляет N или CRu; где Ru представляет водород; A1 представляет CR1, A2 представляет CR2, A3 представляет CR3 и A4 представляет N или CR4, при условии, что ноль, один из A1, A2, A3 и A4 является N; L1 отсутствует или означает CH2, C(O), C(H)(OH), (CH2)mO или (CH2)mN(Rz), где Rz представляет водород; G1 представляет С1-C6 алкил, С1-C6алкоксиС1-C6 алкил, G1a или -(C1-C6 алкиленил)-G1a; где каждый G1a независимо представляет фенил, 9-10-членный бициклический арил, необязательно частично ненасыщенный; 5-6-членный гетероарил с одним-двумя гетероатомами, выбранными из N; бициклический 9-10-членный гетероарил с одним-тремя гетероатомами, выбранными из N, S; 4-6-членный гетероцикл с одним-двумя гетероатомами, выбранными независимо из N, O и S; 10-членный спироциклический гетероциклил с двумя гетероатомами, выбранными из О; С3-C7циклоалкил; бициклический 7-членный циклоалкил, трициклический 10-членный циклоалкил, и каждый G1a независимо является незамещенным или замещенным 1, 2, 3 Rw.

Изобретение относится к новому гетероциклическому соединению формулы (I) или к его энантиомеру и диастереоизомеру, и к его соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, где X и Y - атом углерода или атом азота, при этом они не могут одновременно представлять собой два атома углерода или два атома азота; Het фрагмент группы - необязательно замещенное, ароматическое или неароматическое 5-7-членное кольцо, содержащее в дополнение к азоту 1-3 гетероатома, выбранных из O, S и N, при этом азот может быть замещен группой, представляющей собой атом водорода, (С1-С6)алкильную группу или группу -С(O)-O-Alk; R1 и R2 - (С1-С6)алкильная группа, или R1 и R2 с атомом азота, несущим их, образуют 4-7-членный гетероциклоалкил, который может содержать в дополнение к атому азота, другой гетероатом, выбранный из кислорода, SO2 и NR, где R представляет собой (С1-С6)алкильную группу, (С1-С6)алкилсульфонильную группу, (C1-С6)полигалогеналкильную группу или группу -С(O)-O-Alk; R3 представляет собой (C1-С6)алкильную группу, (С2-С6)алкенильную группу, (С2-С6)алкинильную группу, циклоалкильную группу, (С3-С4)циклоалкил-(С1-С6)алкильную группу или гетероарильную группу; R4 представляет собой арильную, гетероарильную, циклоалкильную или (С1-С6)алкильную группу; R5 представляет собой атом водорода; Ra, Rb, Rc и Rd независимо друг от друга представляют собой атом водорода, атом галогена, (С1-С6)алкильную группу, (С1-С6)алкоксигруппу, гидроксигруппу, (С1-С6)полигалогеналкильную группу, или трифторметоксигруппу, или заместители одной из пар (Ra,Rb), (Rb,Rc) или (Rc,Rd) вместе с атомами углерода, несущими их, образуют 5-7-членное кольцо, которое может содержать 1-2 гетероатома, выбранных из кислорода, при этом один или несколько атомов углерода кольца, определенного выше, могут быть дейтерированными; при этом "арил" означает фенильную, нафтильную, бифенильную или инденильную группу; "гетероарил" означает любую моно- или бициклическую 5-10-членную группу, имеющую по меньшей мере один ароматический фрагмент и содержащую от 1 до 2 гетероатомов, выбранных из O, S и N; "циклоалкил" означает любую моно- или бициклическую неароматическую карбоциклическую 4-9-членную группу; причем алкильные, арильные, гетероарильные, циклоалкильные и гетероциклоалкильные группы, таким образом определенные, могут быть замещены посредством 1-3 групп, выбранных из (С1-С6)алкила, необязательно замещенного гидроксигруппой или метоксигруппой, (С3-С6)спиро, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкил-S-, гидрокси, оксо (или N-оксида в соответствующих случаях), циано, NR'R'', (С1-С6)полигалогеналкила, трифторметокси, или галогена, при этом предполагается, что R' и R'' независимо друг от друга представляют собой (C1-С6)алкильную группу; причем Het фрагмент группы , определенной выше, может быть замещен группой, выбранной из гидрокси.

Изобретение относится к новому соединению 3-[3-(морфолин-4-ил)пропил]-2-[(2,2,3-триметилциклопент-3-ен-1-ил)метил]-1,3-тиазолидин-4-ону. Технический результат: получено новое соединение, обладающее противоязвенной и противовоспалительной активностью.

Изобретение относится к производному триазолопиразина, представленному химической формулой 1: в которой R1-R3 каждый независимо представляет собой водород, галоген; 6-членный гетероциклоалкил с одним гетероатомом, представляющим собой азот, незамещенный или замещенный С1-С5-алкилом, гидрокси-С1-С5-алкилом; 6-членный гетероциклоалкенил с одним гетероатомом, представляющим собой азот, незамещенный или замещенный С1-С5-алкилом, гидрокси-С1-С5-алкилом; С1-С3-алкокси, замещенный 6-членным гетероциклоалкилом с двумя гетероатомами, каждый из которых независимо представляет собой азот, кислород, который необязательно замещен С1-С5-алкилом; С1-С5-алкил, замещенный 6-членным гетероциклоалкилом с двумя гетероатомами, каждый из которых независимо представляет собой азот, кислород, который необязательно замещен С1-С5-алкилом; фенил, замещенный галогеном; С1-С5-алкилом, замещенным 6-членным гетероциклоалкилом с двумя гетероатомами, каждый из которых независимо представляет собой азот, кислород, который необязательно замещен С1-C5-алкилом; С1-С3-алкокси, замещенным 6-членным гетероциклоалкилом с двумя гетероатомами, каждый из которых независимо представляет собой азот, кислород, который необязательно замещен С1-С5-алкилом; ацетилпиперазин-С1-С5-алкилом или метилпиперазинилкарбонилом; или 5-членный гетероарил с двумя гетероатомами, представляющими собой азот, замещенный 6-членным гетероциклоалкилом с одним гетероатомом, представляющим собой азот, гидрокси-С1-С5-алкилом или С1-С5-алкилом; где по меньшей мере один из R1-R3 не является водородом; среди R4 и R5 каждый независимо представляет собой водород, 5-членный гетероарил, содержащий два гетероатома, представляющих собой азот, незамещенный или замещенный С1-С5-алкилом, или фенил, замещенный циано или галогеном; где по меньшей мере один из R4 и R5 не является водородом; и X представляет собой кислород или углерод.

Изобретение относится к соединению формулы (I') (где W представляет формулу -CR11R12CR13R14-; R11 представляет атом водорода, атом фтора, С1-4 алкил или фенил; R12 представляет атом водорода, атом фтора или С1-4 алкил; при условии, что R11 и R12, вместе со смежным углеродным атомом, необязательно образуют С3-8 циклоалкан или тетрагидропиран; R13 представляет атом водорода, карбамоил, С1-4 алкил (С1-4 алкил необязательно замещен одной группой, выбранной из группы, состоящей из гидрокси, C1-3 алкокси и ди-С1-3 алкиламино), галоген-С1-4 алкил, фенил, пиридил, бензил или фенэтил; R14 представляет атом водорода, C1-4 алкил или галоген-С1-4 алкил; Y представляет одинарную связь или C1-6 алкандиил (C1-6 алкандиил необязательно замещен одной гидроксигруппой, и один из углеродных атомов в C1-6 алкандииле необязательно замещен циклоалкпропан-1,1-диилом); R2 представляет атом водорода, C1-6 алкил, С3-8 циклоалкил {С3-8 циклоалкил необязательно замещен одной или двумя группами, которые являются одинаковыми или различными и выбраны из группы, состоящей из C1-6 алкила (C1-6 алкил необязательно замещен одной группой фенила), фенила (фенил необязательно замещен одним атомом галогена), C1-6 алкокси [C1-6 алкокси необязательно замещен одной группой, выбранной из группы, состоящей из С3-8 циклоалкила, фенила (фенил необязательно замещен одной группой, выбранной из группы, состоящей из атома галогена и C1-6 алкила) и пиридила (пиридил необязательно замещен одним атомом галогена)], С3-8 циклоалкокси, фенокси (фенокси необязательно замещен одной группой, выбранной из группы, состоящей из атома галогена, C1-6 алкила, С3-8 циклоалкила и галоген-C1-6 алкила) и пиридилокси (пиридилокси необязательно замещен одной группой, выбранной из группы, состоящей из атома галогена, C1-6 алкила, С3-8 циклоалкила и галоген-С1-6 алкила)}, фенил (фенил необязательно замещен одной-тремя группами, которые являются одинаковыми или различными и которые выбирают из группы α3 заместителей), нафтил, инданил, тетрагидронафтил, пиразолил [пиразолил необязательно замещен одной или двумя группами, которые являются одинаковыми или различными и выбраны из группы, состоящей из C1-6 алкила и фенила (фенил необязательно замещен одним C1-6 алкилом)], имидазолил [имидазолил необязательно замещен одной или двумя группами, которые являются одинаковыми или различными и выбраны из группы, состоящей из C1-6 алкила и фенила], изоксазолил [изоксазолил необязательно замещен одной группой фенила (фенил необязательно замещен одним атомом галогена)], оксазолил [оксазолил необязательно замещен одной или двумя группами, которые являются одинаковыми или различными и которые выбраны из группы, состоящей из C1-6 алкила и фенила], тиазолил [тиазолил необязательно замещен одной или двумя группами, которые являются одинаковыми или различными и которые выбирают из группы, состоящей из C1-6 алкила, фенила и морфолино], пиридил (пиридил необязательно замещен одной или двумя группами, которые являются одинаковыми или различными и которые выбирают из группы α5 заместителей), пиридазинил [пиридазинил необязательно замещен одной группой C1-6 алкокси (C1-6 алкокси необязательно замещен одной группой С3-8 циклоалкила)], пиримидинил [пиримидинил необязательно замещен одной группой, выбранной из группы, состоящей из галоген-С1-6 алкила, С3-8 циклоалкила, фенила и фенокси (фенокси необязательно замещен одной группой C1-6 алкила)], пиразинил [пиразинил необязательно замещен одной группой, выбранной из группы, состоящей из C1-6 алкокси (C1-6 алкокси необязательно замещен одним С3-8 циклоалкилом), и фенокси (фенокси необязательно замещен одной группой, выбранной из группы, состоящей из атома галогена, C1-6 алкила и С3-8 циклоалкила)], бензотиофенил, хинолил, метилендиоксифенил (метилендиоксифенил необязательно замещен одним или двумя атомами фтора), азетидинил (азетидинил необязательно замещен одной группой пиримидинила), пиперидинил (пиперидинил необязательно замещен одной группой, выбранной из группы, состоящей из пиримидинила, фенил-С1-3 алкила, С3-8циклоалкил-C1-3алкилкарбонила и фенил-С1-3алкоксикарбонила) или следующую формулу (I'') -CONR5CH2-R6 (I'') [где в формуле (I'') R5 представляет атом водорода или C1-3 алкил и R6 представляет фенил (фенил необязательно замещен одной группой, выбранной из группы, состоящей из атома галогена, галоген-С1-6 алкила и фенила)], Y4 представляет С1-4 алкандиил; R3 представляет атом водорода или метил; R4 представляет -СООН или -CONHOH), обладающему превосходящим ингибирующим PHD2 эффектом.

Группа изобретений описывает применение рекомбинантного иммунорегуляторного белка ганодерма (rLZ-8) для получения лекарственного средства для лечения меланомы. На экспериментальных моделях ортотопических опухолей и метастатических опухолей на животных исследован противоопухолевый эффект rLZ-8, который показал, что rLZ-8 достоверно ингибирует рост ортотопических опухолей меланомы и образование метастазов меланомы.

Изобретение относится к фармакологии и медицине, а именно к неврологии и онкологии. Предложено применение афобазола этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) в качестве средства для снижения функциональной активности и экспрессии гликопротеина-Р. Техническим результатом изобретения является расширение арсенала средств, обладающих способностью ингибировать функциональную активность и экспрессию гликопротеина-Р для повышения эффективности фармакотерапии патологий ЦНС и онкологических заболеваний лекарственными веществами-субстратами данного белка-транспортера; средств, пригодных для прогнозирования принадлежности лекарственных препаратов к субстратам мембранного белка-транспортера гликопротеина-Р, и средств, применяемых в качестве положительного контроля пониженной активности гликопротеина-Р при поиске веществ аналогичного действия. В связи с низкой токсичностью и экономической доступностью афобазола его применение с целью ингибирования гликопротеина-Р является рациональным и безопасным, позволяет повысить эффективность терапии без риска усиления токсичности и имеет дополнительные преимущества, обусловленные анксиолитическим и нейропротекторным действиями препарата. 2 табл.

Наверх