Способ прогноза летальности при гнойно-септических инфекциях в эксперименте

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается определения риска летальности при гнойно-септических инфекциях. Для этого проводят заражение кроликов путем подкожного введения взвеси бактерий P. aeruginosa и S. aureus, выделенных от больных гнойно-воспалительными процессами, в концентрации 105 микробных клеток в 1 мл. Затем определяют показатели щелочной фосфатазы (ЩФ), аланинтрансферазы (АЛТ) и мочевины. При показателе ЩФ 205-391u/L и АЛТ 53-63 u/L на 1-2 сутки после заражения прогнозируют поражение головного мозга и гибель животных на 2-4 сутки в 29-38%. При показателе ЩФ 485-652 u/L и АЛТ 36-38 u/L на 4-5 сутки прогнозируют развитие гнойно-септической инфекции и гибель животных на 9-11 день болезни в 69-84%. При показателе концентрации мочевины 1,3-1,9 u/L на 4-5 день болезни прогнозируют транслокацию E. coli с развитием гнойно-септической инфекции и гибелью животных на 7-8 день болезни в 54-66% случаев. Предложенный способ легко воспроизводим, не требует больших материальных затрат и позволяет в эксперименте на животных совершенствовать методы интенсивной терапии, направленные на предупреждение летальности при гнойно-септических инфекциях. 3 пр.

 

Способ прогноза летальности при гнойно-септических инфекциях в эксперименте

Изобретение относится к экспериментальной медицине в области патофизиологии, а именно к определению риска летальности при гнойно-септических инфекциях (ГСИ).

При гнойно-септических инфекциях отмечается высокий процент летального исхода заболеваний. По данным В.М.Гаглоева сепсис ежегодно регистрируется у 750 тыс. людей и более чем у 210 тыс. из них заболевание заканчивается летальным исходом [disserCat http://www.dissercat.com/content/nekotorye-sovremennye-osobennosti-gnoinoi-infektsii-u-detei-i-rannyaya-diagnostika-ee-septic#ixzz4Kb_NSjx4B].

У детей бактериальный сепсис заканчивается летальным исходом в 44,6% случаев, в том числе среди детей до 3-х месяцев жизни летальность составляет в 69,1% случаев [Д.А.Баранов, 2012. Медицинские диссертации http://medical-diss.com/medicina/patomorfoz-vozbuditelev-gnoyno-septicheskih-zabolevaniv-u-detev-i-optimizatsiya-lecheniva-bolnyh#ixzz4KbI93pLw]. При гнойном перитоните летальный исход наблюдается в 18,3-62,8% случаев, а в послеоперационном периоде достигает 45-92,3% [В.П. Будашеев с соавт. Факторы риска гнойно-септических инфекций при распространенном гнойном перитоните / Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра СО РАМН. - 2012. - №54. - С. 27].

Прогресс в изучении патофизиологии и генетики индивидуального ответа на септические проявления в организме изменил распространенное понимание данного синдрома, а ряд лечебных мероприятий, применяемых в последние годы с использованием лечебно-профилактических препаратов, продемонстрировал эффективность проводимого химиотерапевтического лечения, однако, проблема интенсивной терапии по-прежнему стоит довольно остро и требует дальнейшего изучения [Щитинин В.Е. с соавт. Лечение острого гематогенного остеомиелита в детском возрасте / Остеомиелиты у детей: тез. док. Рос. симп. по детской хирургии с междунар. участием. Ижевск. - 2006. - Ч. 1. - С. 283-285; Cook S.W. et al. Virulence factors of Escherichia coli isolated from female reproductive tract infections and neonatal sepsis / Infect. Dis. Obstet. Gynecol. - 2001. - Vol. 9. - №4. - P. 203-207; Suryati B.A. et al. Staphylococcus aureus bacteraemia in children: a 5-year retrospective review / J. Paediatr. Child Health. - 2002. - Vol. 38. - №3. - P. 290].

В частности, не установлен патогенетический механизм летальности в различные периоды ГСИ. Известно, что популяции микроорганизмов одного вида неоднородны и состоят из культивируемых и некультивируемых бактерий [Соколенко А.В. Некультивируемые формы бактерий: распространение в природе, индукторы некультивируемого состояния и реверсии // Современные наукоемкие технологии. - 2006. - №2 - С. 11-15; Козлов Л.Б., Диц Е.В. Роль микробных ассоциаций в инфекционной патологии человека // Фундаментальные исследования, 2013. - №9. - С. 366-370; Heim S. Et al. The viable but nonculturable state and starvation are different stress responses of Enterococcus faecalis, as determined by proteome analysis // J. Bacteriol - 2002. - Vol. 184. - №23. - P. 6739-6745]. Установлено также, что на летальность при наличии ГСИ оказывает влияние и собственная условно-патогенная микрофлора организма.

Целью настоящей заявки на изобретение является установить влияние культивируемых и некультивируемых бактерий, а также условно-патогенной микрофлоры организма на частоту возникновения летальности при ГСИ в различные периоды инфекционного процесса.

Решение данной проблемы позволит установить патогенетический механизм летальности и разработать этиотропное и патогенетическое лечение, направленное на предупреждение летального исхода при ГСИ.

В патентной и периодической литературе не описан прогноз возникновения летальности в различные периоды инфекционного процесса, вызванного ГСИ.

Описан прогноз развития гнойно-септических осложнений при поражении различных органов и тканей организма. Так, предложен способ прогнозирования осложненного течения флегмон [Патент RU №2342656 от 27.12.2008. Бюл. №36]. Прогноз основан на интеграции показателей состояния макроорганизма по выраженности системного воспалительного ответа и наличия факторов патогенности у микроорганизма.

Камзалакова Н.И. с соавт. предложили прогноз развития гнойных послеоперационных осложнений на основании иммунологических данных, полученных в предоперационном периоде [Патент RU №2153674 от 27.07.2000. Бюл. №21].

На основании известных механизмов развития гнойных инфекций предложен ряд способов по предупреждению развития гнойно-воспалительных осложнений. Любарский М.С. с соавт. [Патент RU №2100976 от 10.01.1998] предложили способ лечения открытых переломов костей, направленный на уменьшение эндогенной интоксикации, подавления присутствующей микрофлоры и предупреждения присоединения вторичной инфекции.

Описаны способы лечения токсико-септических состояний [Патент RU №2144837 от 27.01.2000. Бюл. №3] и гнойно-воспалительных осложнений, обусловленных нозокомиальной инфекцией [Патент RU №2246273 от 20.02.2005. Бюл. №5].

Итак, в патентной литературе не выявлено способов прогноза летального исхода при заболеваниях ГСИ, вызванных некультивируемыми бактериями и транслокацией условно-патогенной микрофлорой организма.

В качестве прототипа выбран материал, изложенный в монографии С.П. Сахарова, Л.Б. Козлова [Сахаров С.П., Козлов Л.Б. Система диагностики инфекционных осложнений и прогнозирование исходов ожоговой болезни у детей (клинико-экспериментальные исследования): монография // Екатеринбург: Изд-во Урал. Ун-та, 2014. 252 с.]. В монографии представлены данные о влиянии культивируемых и некультивируемых бактерий, а также условно-патогенной микрофлоры организма на развитие инфекционного процесса, описаны сроки возникновения летального исхода у кроликов породы шиншилла, но не дан прогноз частоты возникновения летального исхода заболеваний у животных.

В задачу настоящего изобретения входило выявить в начальном периоде инфекции частоту возникновения летального исхода ГСИ, вызванной некультивируемыми и культивируемыми бактериями, а также транслокацией условно-патогенной микрофлоры организма на основании биохимических тестов и патогенетического механизма развития инфекционного процесса.

Технический результат - простой, не требующий больших материальных затрат и основан на прогнозировании летального исхода при ГСИ в зависимости от патогенеза заболеваний и количественных показателей щелочной фосфатазы, аланинтрансферазы и мочевины в сыворотке крови больных животных.

Технический результат предложенного нами способа прогноза летальности при гнойно-септической инфекции в эксперименте согласно изобретению включает заражение кроликов путем подкожного введения взвеси бактерий P. aeruginosa и S. aureus, выделенных от больных гнойно-воспалительными процессами, в концентрации 105 микробных клеток в 1 мл, затем определяют показатели щелочной фосфатазы (ЩФ), аланинтрансферазы (АЛТ) и мочевины и при показателе ЩФ 205-391 u/L и АЛТ 53-63 u/L на 1-2 сутки после заражения прогнозируют поражение головного мозга и гибель животных на 2-4 сутки в 29-38%, при показателе ЩФ 485-652 u/L и АЛТ 36-38 u/L на 4-5 сутки прогнозируют развитие гнойно-септической инфекции и гибель животных на 9-11 день болезни в 69-84%, а при показателе концентрации мочевины 1,3-1,9 u/L на 4-5 день болезни прогнозируют транслокацию E. coli с развитием при гнойно-септической инфекции и гибель животных на 7-8 день болезни в 54-66% случаев.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом. От больных с гнойно-воспалительными процессами выделяют культуры P. aeruginosa и S. aureus. Популяции выделенных бактерий содержат культивируемые и некультивируемые бактерии соответствующих видов.

В качестве экспериментальной модели берут кроликов породы «шиншилла» мужского пола массой 2230-2295 грамм. Смесь бактерий P. aeruginosa и S. aureus вводят кроликам подкожно в левое бедро с концентрацией 105 микробных клеток в 1 мл.

На 1 -2 сутки после заражения, а также на 4-5 сутки, у кроликов берут кровь и определяют наличие в сыворотках крови концентрацию щелочной фосфатазы, АЛТ и мочевины. При показателе щелочной фосфотазы на 1-2 сутки болезни кроликов 205-391 u/L и АЛТ 53-63 u/L прогнозируют поражение головного мозга с гибелью животных на 2-4 сутки в 29-38% случаев. При показателях щелочной фосфатазы 495-652 u/L и АЛТ 36-38 u/L на 4-5 сутки прогнозируют развитие гнойно-септической инфекции с гибелью животных на 9-11 день в 69-84% случаев. При показателе концентрации мочевины 1,3-1,9 u/L на 4-5 день болезни кроликов прогнозируют транслокацию E. coli с развитием ГСИ с летальным исходом на 7-8 день болезни у 54-66% животных.

Примеры практического использования предлагаемого способа

Пример 1. В качестве экспериментальной модели взят кролик породы «шиншилла» мужского пола массой 2240 грамм. Смесь бактерий P. aeruginosa и S. aureus ввели кролику подкожно в левое бедро с концентрацией 105 микробных клеток в 1 мл.

На 1-е сутки после заражения у кролика взяли кровь и провели биохимическое исследование сыворотки крови. Показатель щелочной фосфатазы на 1-е сутки болезни кролика составил 260 u/L и АЛТ 58 u/L. Прогнозировано поражение головного мозга на 2 сутки. Кролик погиб на 3 сутки. При вскрытии животного подтверждено поражение головного мозга на основании гистологических и микробиологических исследований.

Пример 2. В качестве экспериментальной модели взят кролик породы «шиншилла» мужского пола массой 2256 грамм. Смесь бактерий P. aeruginosa и S. aureus ввели кролику подкожно в левое бедро с концентрацией 105 микробных клеток в 1 мл. На 4-е сутки после заражения у кролика взяли кровь из ушной вены для биохимических исследований.

Показатель щелочной фосфатазы на 4-е сутки в сыворотке крови кролика составил 523 u/L и АЛТ 37 u/L. Прогнозировано развитие гнойно-септической инфекции с гибелью животных с 9 дня болезни. Животное погибло на 9 день болезни. При вскрытии животного на основании гистологических и микробиологических исследований установлено наличие гнойно-септической инфекции с поражением внутренних органов.

Пример 3. В качестве экспериментальной модели взят кролик породы «шиншилла» мужского пола массой 2282 грамма. Смесь бактерий P. aeruginosa и S. aureus ввели кролику подкожно в левое бедро с концентрацией 105 микробных клеток в 1 мл.

На 4-е сутки после заражения у кролика взяли кровь для биохимических исследований. На 4-е сутки концентрация мочевины в сыворотке составила 1,4 u/L. У животного прогнозирована транслокация E. coli из кишечника животного и развитие ГСИ на 7 день болезни. Животное погибло на 7 день заболевания.

При вскрытии кролика на основании гистологических и микробиологических исследований отмечена транслокация кишечной палочки из кишечника животного и развитие гнойно-септической инфекции с поражением внутренних органов.

Экспериментальные исследования на кроликах проведены в виварии ФГБОУ ВПО «Государственного аграрного университета Северного Зауралья». Микробиологические исследования проведены на базе микробиологической лаборатории Тюменского филиала ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии по железнодорожному транспорту», а биохимические исследования - на автоматическом биохимическом анализаторе BS 200 (Mindray) с использованием коммерческих наборов реактивов на базе ФБУН ТНИИКИП Роспотребнадзора. Всего в эксперименте находилось 53 кролика породы «шиншилла».

Предложенный способ прогноза летального исхода при ГСИ в эксперименте на животных легко воспроизводим, не требует больших материальных затрат и позволяет в эксперименте на животных апробировать новые методы лечения с учетом патогенетических изменений в организме и экстраполировать полученные экспериментальные данные на животных при лечении пациентов. Предложенная экспериментальная модель (кролики породы «шиншилла») с учетом биохимических показателей сывороток крови животных может быть использована для совершенствования методов интенсивной терапии, направленной на предупреждение летальности при ГСИ.

Способ прогноза летальности при гнойно-септических инфекциях в эксперименте, отличающийся тем, что проводят заражение кроликов путем подкожного введения взвеси бактерий P. aeruginosa и S. aureus, выделенных от больных гнойно-воспалительными процессами, в концентрации 105 микробных клеток в 1 мл, затем определяют показатели щелочной фосфатазы (ЩФ), аланинтрансферазы (АЛТ) и мочевины и при показателе ЩФ 205-391u/L и АЛТ 53-63 u/L на 1-2 сутки после заражения прогнозируют поражение головного мозга и гибель животных на 2-4 сутки в 29-38%, при показателе ЩФ 485-652 u/L и АЛТ 36-38 u/L на 4-5 сутки прогнозируют развитие гнойно-септической инфекции и гибель животных на 9-11 день болезни в 69-84%, а при показателе концентрации мочевины 1,3-1,9 u/L на 4-5 день болезни прогнозируют транслокацию E. coli с развитием гнойно-септической инфекции и гибелью животных на 7-8 день болезни в 54-66% случаев.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для создания асептического остеонекроза нижней челюсти при испытании различных способов лечения и профилактики аминобисфосфонатных остеонекрозов челюстей.

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, челюстно-лицевой хирургии, и предназначено для использования в образовательном процессе для отработки мануальных навыков по костной пластике альвеолярного отростка нижней челюсти при его атрофии.

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, челюстно-лицевой хирургии, и предназначено для использования в образовательном процессе для отработки мануальных навыков по костной пластике альвеолярного отростка нижней челюсти при его атрофии.

Изобретение относится к медицине, а именно к сердечно-сосудистой хирургии, и может быть использовано при прогнозировании клинического эффекта реваскуляризации почек у пациентов со стенозом почечных артерий и ишемической нефропатией.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для разработки различных методов оперативного лечения больных с кишечными свищами.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальным исследованиям в онкологии, и может быть использовано при воспроизведении агрессивного атипичного роста меланомы B16 у мышей.

Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, трансплантологии, и может быть использовано для лечения печеночной недостаточности в эксперименте. Для этого выделяют из костного мозга крысы-донора мононуклеарную фракцию клеток.
Изобретение относится к медицине, а именно к способам коррекции активности микробиоты кишечника при жировой дистрофии печени в эксперименте. Для этого проводят моделирование жировой дистрофии печени у крыс путем добавления в стандартный рацион питания белково-жировой смеси в соотношении 70:30 в количестве 12-15 г в течение 3-3,5 месяцев.
Изобретение относится к медицине и профессиональной педагогике и может быть использовано для оценки качества индивидуальных практических навыков обучающихся в процессе их освоения и на этапе сдачи экзамена.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для оценки функционального состояния периферических нервов после их микрохирургической реконструкции при травмах в эксперименте.

Изобретение относится к медицине и предназначено для определения исхода острого деструктивного панкреатита (ОДП). У больных с ОДП в первые сутки после постановки диагноза в нейтрофилах венозной крови больных с помощью биолюминесцентного метода определяют активности НАДФ- и НАДФН-зависимой глутаматдегидрогеназы, после чего рассчитывают соотношение активностей дегидрогеназ.

Группа изобретений относится к биотехнологии и медицине. Предложены композиция, набор и способ для обнаружения присутствия биопленки в жизнеспособных тканях.

Изобретение относится к медицине, в частности к дерматовенерологии, и представляет собой способ определения степени тяжести псориатической онихии, заключающийся в том, что ногтевые пластинки кистей обрабатывают смесью диэтиловый эфир - этанол в соотношении 1:1, состригают, измельчают, 30 мг измельченных ногтевых пластинок экстрагируют раствором, содержащим 5 мл фосфатного буфера с рН 7,4 и 1 мл 96° этилового спирта, выдерживают на кипящей водяной бане в течение 10 минут, фильтруют смесь через фильтровальную бумагу, затем проводят хемилюминесцентный анализ полученного экстракта с оцениванием интенсивности быстрой вспышки (Фmax, отн.

Группа изобретений относится к медицине и касается тест-системы для скрининга химических соединений на наличие ингибирующей активности в отношении PARP-1 на основе FRET-микроскопии единичных частиц (spFRET), представляющей собой смесь, включающую комплекс мононуклеосомы на нуклеосом-позиционирующей ДНК-матрице, меченной парой флуорофоров, формирующих донор-акцепторные пары для реализации эффекта FRET; белок PARP-1 и его субстрат - НАД+.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования исхода люминального В и трижды негативного рака молочной железы у пациенток, не получавших в неоадъювантном режиме химио- или гормонотерапию.
Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для видовой идентификации микобактерий у пациентов, инфицированных микобактериями туберкулеза.

Изобретение относится к области биофизики, а именно к медицинской физики, и описывает способ прогнозирования эффективности химиотерапии у детей, больных острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ), в частности прогнозирования рисков возникновения лекарственной резистентности при проведении химиотерапии у пациентов с ОЛЛ с помощью исследования свойств биологических жидкостей физическими методами.

Изобретение относится к медицине и касается способа определения антител к вирусам полиомиелита 1, 3 типов в сыворотке крови, где в сыворотку крови в модифицированной реакции связывания комплемента вносят убитый антиген вируса полиомиелита, содержащийся в инактивированной полиомиелитной вакцине, и гемолитическую сыворотку, исследуемые образцы выдерживают, затем проводят количественное определение оксидазных ферментов, вышедших из гемолизированных эритроцитов, используя тетраметилбензидин.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложен способ получения ДНК-праймеров и зондов для определения присутствия и определения относительного количества фетальной ДНК в образце плазмы крови беременной женщины.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в фтизиопульмонологии для ранней диагностики инфильтративных (бациллярных) форм туберкулеза легких.

Изобретение относится к области медицины и раскрывает способ определения активности перекисного окисления липидов в ногтевых пластинках живых людей. Способ включает механическое измельчение состриженных ногтевых пластинок живых людей, экстракцию раствором, содержащим фосфатный буфер (pH 7,4) и 96° этиловый спирт в соотношении 5:1 соответственно, диализ смеси, проведение хемилюминесцентного анализа получаемого экстракта, при котором определяют интенсивность быстрой вспышки (Ф max, отн. ед.), время достижения максимума кинетической кривой хемилюминесценции (Т max, с), тангенс угла подъема (tg подъема) и падения (tg спада) кинетической кривой хемилюминесценции и светосумму хемилюминесценции (S, отн. ед.), и по совокупности указанных параметров определяют наличие или отсутствие активности перекисного окисления липидов в ногтевых пластинках живых людей. Изобретение может быть использовано в дерматовенерологии, клинической фармакологии, клинической лабораторной диагностике, биофизике, биохимии для хемилюминесцентного анализа ногтевых пластинок. 3 ил.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается определения риска летальности при гнойно-септических инфекциях. Для этого проводят заражение кроликов путем подкожного введения взвеси бактерий P. aeruginosa и S. aureus, выделенных от больных гнойно-воспалительными процессами, в концентрации 105 микробных клеток в 1 мл. Затем определяют показатели щелочной фосфатазы, аланинтрансферазы и мочевины. При показателе ЩФ 205-391uL и АЛТ 53-63 uL на 1-2 сутки после заражения прогнозируют поражение головного мозга и гибель животных на 2-4 сутки в 29-38. При показателе ЩФ 485-652 uL и АЛТ 36-38 uL на 4-5 сутки прогнозируют развитие гнойно-септической инфекции и гибель животных на 9-11 день болезни в 69-84. При показателе концентрации мочевины 1,3-1,9 uL на 4-5 день болезни прогнозируют транслокацию E. coli с развитием гнойно-септической инфекции и гибелью животных на 7-8 день болезни в 54-66 случаев. Предложенный способ легко воспроизводим, не требует больших материальных затрат и позволяет в эксперименте на животных совершенствовать методы интенсивной терапии, направленные на предупреждение летальности при гнойно-септических инфекциях. 3 пр.

Наверх