Биосовместимый наноматериал для лазерного восстановления целостности рассеченных биологических тканей



Биосовместимый наноматериал для лазерного восстановления целостности рассеченных биологических тканей
Биосовместимый наноматериал для лазерного восстановления целостности рассеченных биологических тканей

Владельцы патента RU 2657611:

федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский университет "Московский институт электронной техники" (RU)

Изобретение относится к области лазерной медицины и, конкретно, к восстановительной хирургии. Описан биосовместимый наноматериал для лазерного восстановления целостности рассеченных биологических тканей, содержащий водную дисперсионную основу белка альбумина, углеродные нанотрубки и медицинский краситель - индоцианин, отличающийся тем, что в качестве углеродных нанотрубок используют многослойные углеродные нанотрубки и дополнительно содержит бычий белок коллагена при следующем соотношении компонентов, мас.%: альбумин от 15 до 20, многослойные углеродные нанотрубки от 0,02 до 0,2, медицинский краситель - индоцианин от 0,005 до 0,01, бычий белок коллагена в концентрации от 0,3 до 3, дистиллированная вода - остальное. Наноматериал для лазерной сварки имеет высокую эффективность, достигнутую благодаря высокой прочности на разрыв лазерного шва, длительный срок хранения и низкую себестоимость. 1 ил., 1 табл.

 

Изобретение относится к области лазерной медицины и, конкретно, к восстановительной хирургии. Изобретение предназначено для лазерного восстановления целостности рассеченных биологических тканей, то есть для лазерной сварки.

Существующие традиционные способы восстановления целостности ткани с использованием шовных материалов, сшивающих аппаратов, скобных соединений, клеевых композиций и других средств имеют ряд недостатков [1]. Например, низкая прочность и негерметичность места соединения (шва).

Новым направлением восстановления целостности ткани является лазерная сварка. При этом используются специальные биосовместимые материалы - биоприпои, и лазерное излучение. Посредством лазерной сварки образуется прочное соединение частей биологических тканей, то есть создается так называемый лазерный шов (ЛШ). Лазерная сварка биологических тканей обладает потенциальными преимуществами в хирургии: герметичность соединения, быстрое заживление ран, малое время операционного вмешательства, малая реакция на инородные тела, низкий риск возникновения аневризма при операциях на артериях, пониженная вероятность появления фиброза или его полное отсутствие, очень малая вероятность развития стеноза.

Одним из основных и важных элементов лазерной сварки является биоприпой. В качестве биоприпоя часто используется водная дисперсия из бычьего сывороточного альбумина (БСА). В процессе лазерной сварки жидкая форма биоприпоя испаряется и в месте соединения биологических тканей образуется прочный шов из БСА.

Известно, что биоприпой для лазерной сварки на основе водной дисперсии БСА позволяет реализовать прочность на разрыв ЛШ ~ 0,05 кПа (свиная кожа) [2]. При использовании того же припоя при сварке на кишечнике собаки была достигнута прочность лазерного шва ~ 0,43 кПа [3]. Однако такие значения прочности являются неудовлетворительными, так как они на несколько порядков уступают прочности швов, полученных традиционными хирургическими методами [4].

Углеродные нанотрубки (УНТ) обладают уникальными свойствами: высокая прочность, удельная проводимость, теплопроводность, оптическая прозрачность и др.

Композиционные наноматериалы, в состав которых входят УНТ в небольшом процентном содержании (<2-3%), также приобретают показатели, которые невозможно достигнуть в других случаях. Новые или существенно улучшенные свойства приобретают наноматериалы под действием лазерного излучения. Например, формируются прочные биосовместимые наноматериалы под действием лазерного излучения на водно-белковые дисперсии, содержащие УНТ [5]. Внутри легкого (пористого) объемного наноматериала с матрицей БСА и наполнителем УНТ под действием лазерного излучения образуется каркас из углеродных нанотрубок, что является причиной существенного увеличения прочности получаемого наноматериала. В частности, наноматериал БСА/УНТ, содержащий менее 0,1 мас. % УНТ, полученный с использованием лазерных технологий и нанотехнологий, имеет прочность в несколько раз выше, чем БСА. При этом в наноматериале БСА/УНТ могут расти и размножаться клетки, что способствует регенерации биологических тканей [6].

Также водная дисперсия композитного наноматериала БСА/УНТ может служить в качестве биоприпоя для лазерной сварки биологических тканей. В биоприпое БСА/УНТ под действием лазерного излучения образуется нанотрубочный каркас в белковой матрице, подобно образованию такого же каркаса в массивном композитном наноматериале БСА/УНТ. Следовательно, полученный ЛШ имеет такие же прочностные свойства, как массивный композитный наноматериал БСА/УНТ. При лазерной сварке биоприпой в составе из БСА и многослойных УНТ (МУНТ), то есть биоприпой из БСА/МУНТ позволяет получить ЛШ с очень высокими значениями абсолютной (~1 МПа) и относительной прочностей (25-30%) в режиме in vitro [5].

Известен биоприпой, используемый в способе лазерной сварки биологических тканей, содержащий различные белки, в том числе БСА, выступающие в роли связующего вещества, а также наполнители из МУНТ и поверхностно-активные вещества [7]. Лазерная сварка с использованием предложенной водной дисперсии биоприпоя БСА/МУНТ требует высокой мощности излучения (десятки Ватт) и процесс сварки занимает длительное время (несколько минут).

Наиболее близким к предлагаемому изобретению находится биоприпой, содержащий водную дисперсионную основу белка альбумина (бычий сывороточный альбумин, БСА), однослойные углеродные нанотрубки (ОУНТ) и медицинский краситель-индоцианин зеленый (ИЦЗ), при следующем соотношении компонентов: альбумин - 20-25 мас. %, однослойные углеродные нанотрубки - 0,02÷0,05 мас. %, индоцианин зеленый - 0,01 мас. %, дистиллированная вода - остальное [8]. Предложенный биоприпой содержит ОУНТ, которые после приготовления (в течение нескольких часов) быстро агрегируются в виде жгутов или агломератов, которые частично деконтируются. Следовательно, водная дисперсия композитного наноматериала БСА/ОУНТ/ИЦЗ становится более прозрачной для лазерного излучения (неэффективно поглощается лазерное излучение), поэтому требуется увеличивать суммарную поглощенную энергию излучения и время процесса лазерной сварки.

Задача предлагаемого изобретения состоит в увеличении прочности соединения рассеченных биологических тканей, увеличении времени хранения наноматериала, а также уменьшения его себестоимости.

Указанная техническая задача решается тем, что в состав биосовместимого наноматериала, содержащего водную дисперсионную основу - белок альбумин, углеродные нанотрубки, медицинский краситель - индоцианин зеленый, дополнительно входит бычий белок коллаген в концентрации в диапазоне от 0,3 до 3 мас. %. Сущность предлагаемого изобретения состоит в том, что при лазерной сварке под воздействием лазерного излучения на биоприпой, происходит образование прочной конструкции (нанокомпозитного материала) лазерного шва при испарении жидкостной составляющей материала. Одновременно формируется каркас из углеродных нанотрубок в наноструктурированной белковой матрице. Добавление в состав белка коллагена вместе с другими компонентами увеличивает прочность лазерного шва и уменьшает себестоимость биоприпоя, а добавление МУНТ увеличивает его срок хранения.

Сформированный нанокомпозитный каркас представляет собой аналог естественной биологической матрицы, в которой могут обеспечиваться условия самоорганизации клеточного материала восстанавливаемой биологической ткани.

Лазерная сварка рассеченных биологических тканей с помощью предложенного изобретения осуществляется путем пошагового перемещения пучка лазерного излучения вдоль поверхности биологической ткани, предварительно обработанной биоприпоем из предложенного наноматериала, или пошагового перемещения предварительно обработанной биологической ткани перпендикулярно направлению пучка лазерного излучения.

Рассмотрим пример приготовления биоприпоя и проведения лазерной сварки. Первая стадия заключается в следующем:

- К дистиллированной воде добавляют МУНТ в концентрации 0,02-0,2 мас. %. Далее полученный раствор перемешивают с помощью магнитной мешалки в течение 15-30 мин.

- Полученный раствор помещают в ультразвуковой гомогенизатор при мощности от 25 до 33 Вт, температуре ≤60°С и времени гомогенизирования от 30 до 90 мин.

- В гомогенизированный водный раствор МУНТ порционно добавляют БСА в расчете концентрации 15-20 мас. %.

- В водный раствор БСА/МУНТ добавляют коллаген в расчете концентрации 0,3-3 мас. %.

- В полученный раствор добавляют индоцианин зеленый в расчете концентрации 0,005-0,01 мас. %.

- Полученный раствор перемешивается на магнитной мешалке в течение 2-2,5 ч.

На второй стадии осуществляется нанесение биоприпоя в область рассеченной биологической ткани. Для этого используются микрошприцы или специализированная система подачи (дозирования) биоматериала. Расход биоприпоя на длину шва составляет приблизительно 1 мл/см.

На третьей стадии фиксируются края рассеченной биологической ткани на максимально близком расстоянии относительно друг друга. Для этого используются стягивающие конструкции и/или хирургические щипцы.

На четвертой стадии происходит лазерное воздействие на область рассеченной биологической ткани. Для этого используется источник лазерного излучения с длиной волны в пределах от 800 до 820 нм. Мощность лазерного излучения находится в пределах 2-3 Вт. Процесс воздействия осуществляется путем пошагового перемещения пучка лазерного излучения вдоль поверхности биологической ткани или пошагового перемещения биологической ткани перпендикулярно направлению пучка лазерного излучения. Режим генерации - непрерывный.

В таблице 1 отражены результаты измерения (in vitro) прочности на разрыв шва, полученные при лазерной сварке на примере хрящевой ткани говяжьей трахеи. Здесь приведены абсолютная прочность на разрыв и относительная прочность на разрыв, определенная как отношение прочности ЛШ к прочности цельной хрящевой ткани. Видно, что с увеличением концентрации коллагена растет прочность лазерного шва. Это вызвано тем обстоятельством, что коллаген является гораздо более прочным материалом, чем БСА, поэтому при частичной его замене на коллаген в водной дисперсии биоприпоя растет прочность лазерного шва.

Однако в биоприпое БСА/МУНТ/ИЦЗ/коллаген при концентрациях коллагена более 3 мас. % прочность ЛШ ухудшается. В самом деле, коллаген является трудно растворимым материалом в воде, и при большой его концентрации (>3 мас. %) в дисперсии образуются скопления коллагеновых волокон. Вследствие этого дисперсия теряет однородность. Гомогенизировать ее вновь с помощью ультразвукового (УЗ) диспергатора не представляется возможным, так как под действием УЗ диспергатора в дисперсии происходит денатурация белков и биоприпой теряет свое важное функциональное свойство: способствовать размножению клеток, кроме того, нарушается однородность его структуры и ухудшаются механические свойства. В БСА/МУНТ/ИЦЗ/коллаген при концентрациях ≤0,3 мас. % коллагена влияние последнего незаметно ввиду незначительного изменения суммарного состава белков: БСА+коллаген.

С ростом концентрации МУНТ и ИЦЗ в дисперсии биоприпоя коррелированно увеличивается прочность лазерного шва. Например, в случае водной дисперсии биоприпоя в составе 20 мас. % БСА/0,2 мас. % МУНТ/0,01 мас. % ИЦЗ/3 мас. % коллаген, для ЛШ реализуется абсолютная прочность на разрыв ~ 1,77 МПа, относительная прочность на разрыв ~ 52% при абсолютной прочности на разрыв ~ 3,4 МПа для сплошной хрящевой ткани говяжьей трахеи. Видно, что этот показатель выше на 30% в сравнении с относительной прочностью на разрыв лазерного шва, достигнутой в прототипе.

На фиг. 1 показана типичная картина сварного лазерного шва, полученная на сканирующем электронном микроскопе JEOL JSM-6010. Видно, что шов выглядит как однородная полоса, соединяющая две части ткани. Он является сплошными, герметично соединяет ткани и имеет ширину порядка 35-40 мкм. В некоторых случаях ширина лазерного шва достигала 80 мкм.

Таким образом, в случае добавления коллагена в биоприпои состава БСА/МУНТ/ИЦЗ при лазерной сварке увеличивается механическая прочность на разрыв лазерного шва, то есть обеспечивается высокая прочность соединения биологических тканей.

Важными преимуществами биоприпоя, изготовленного предложенным способом, относительно известных материалов и прототипа являются [3, 4, 6, 7]:

- его матрица состоит из биологических материалов (белок альбумин, коллаген) и из наполнителей в виде многослойных углеродных нанотрубок и медицинского красителя индоцианина зеленого, и, в целом, наноматериал является биосовместимым;

- степень безопасности предложенного биоприпоя-наноматериала выше, так как в его состав входит МУНТ, а биоприпой-наноматериал, рассмотренный в прототипе, содержит ОУНТ, и его степень безопасности ниже из-за высокой активности ОУНТ;

- при составе 20 мас. % БСА/0,2 мас. % МУНТ/0,01 мас. % ИЦЗ/3 мас. % коллаген для хрящевой ткани реализуется относительная прочность лазерного шва ~ 52%, что выше достигнутой в прототипе (~30%);

- при хранении предложенного биоприпоя БСА/МУНТ/ИЦЗ/коллаген в течение одной недели при комнатной температуре (20-25°С) или в бытовом холодильнике (4°С) в течение одного месяца его свойства практически не изменяются, в то время как биоприпой, рассмотренный в прототипе, значительно теряет свои свойства при хранении при комнатной температуре более 2 ч;

- в предложенном биоприпое уменьшена доля БСА путем его замены на коллаген, а также произведена заменена ОУНТ на МУНТ, что значительно его удешевляет относительно биоприпоя, рассмотренного в прототипе, ввиду дороговизны БСА более чем на порядок в отличие от коллагена, а также ввиду дороговизны ОУНТ относительно МУНТ;

- образованный с использованием предложенного биоприпоя лазерный шов является однородным и герметичным, имеет небольшую ширину ~ 35-80 мкм, и после воссоединения (заживления) частей ткани практически не заметен.

Достоинством биоприпоя для лазерной сварки, полученного предложенным способом, является его высокая эффективность, достигнутая благодаря высокой прочности на разрыв лазерного шва, высокая степень безопасности углеродных нанотрубок, длительный срок хранения и низкая себестоимость наноматериала.

Таким образом, задача, поставленная в настоящей заявке на патент, решена. Предложен способ приготовления биоприпоя для лазерной сварки на основе биологического материала альбумина, коллагена и наполнителя из многослойных углеродных нанотрубок и медицинского красителя индоцианина зеленого. Биоприпой, представляющий собой наноматериал, является биосовместимым.

Источники информации

1. Лазеры в хирургии. Под ред. O.K. Скобелкина. М.: Медицина, 1989. - 256 с.

2. Forer В., Vasilyev Т., Brosh Т., et al. Lasers in Surgery and Medicine, vol. 9999, 1 (2005).

3. Simhon D., Halpern M., Brosh Т., and et al. Annals of surgery, vol. 245(2), 206-213 (2007).

4. Хенч Л., Джонс Д. Биоматериалы, искусственные органы и инжиниринг тканей. М.: Техносфера. 2007. - 304 с.

5. Герасименко А.Ю., Ичкитидзе Л.П., Подгаецкий В.М., Пономарева О.В., Селищев С.В. // Известия вузов. Электроника, 2010. №4. С. 33-41.

6. Bobrinetskiy I., Gerasimenko A., Ichkitidze L. et al. American Journal of Tissue Engineering and Stem Cell, 1(1), 27-38 (2014).

7. Патент РФ №2425700.

8. Заявка РФ на изобретение №2016150636, решение о выдаче патента от 21.09.2017 г. (прототип).

Биосовместимый наноматериал для лазерного восстановления целостности рассеченных биологических тканей, содержащий водную дисперсионную основу белка альбумина, углеродные нанотрубки и медицинский краситель - индоцианин, отличающийся тем, что в качестве углеродных нанотрубок используют многослойные углеродные нанотрубки и дополнительно содержит бычий белок коллагена при следующем соотношении компонентов, мас.%:

альбумин от 15 до 20
многослойные углеродные нанотрубки от 0,02 до 0,2
медицинский краситель - индоцианин от 0,005 до 0,01
бычий белок коллагена в концентрации от 0,3 до 3
дистиллированная вода остальное



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к неорганической химии и фармацевтике и представляет собой коллоидный раствор, обладающий противовирусной и противомикробной активностью, включающий наночастицы металлического серебра и ионы серебра, согласно изобретению раствор содержит смесь раствора сульфоаддукта наночастиц углерода в дистиллированной воде с концентрацией от 0,5 мг/л до 200 мг/л с раствором коллоидного серебра в деионизированной воде с концентрацией от 50 мкг/л до 5000,0 мкг/л, причем раствор сульфоаддукта наночастиц углерода составляет 2 об.% от коллоидного раствора серебра.

Изобретение относится к химической промышленности и нанотехнологии. Кристаллический графит обрабатывают раствором персульфата аммония в серной кислоте, не содержащей свободной воды.

Изобретение относится к технологии формирования упорядоченных структур на поверхности твердого тела и может быть использовано для получения нитевидных кристаллов из различных материалов, пригодных для термического испарения.

Изобретение относится к медицинской технике, а именно к устройствам для генерирования аэрозолей с целью неинвазивной доставки лекарственных веществ, в частности при ингаляционных процедурах, с контролируемым зарядовым состоянием наноаэрозольных частиц.
Изобретение относится к области неорганической химии и касается способа получения модифицированных кристаллов магнетита Fe3O4, содержащих на поверхности флуоресцентный краситель, что дает возможность визуализировать и отслеживать их поведение как в живой клетке, так и в живом организме in vivo.

Изобретение относится к области полупроводниковых тонкопленочных технологий и может быть использовано в микро- и наноэлектронике, фотонике и СВЧ-электронике. Способ селективного осаждения поликристаллического алмазного покрытия на кремниевое основание включает смешивание позитивного фоторезиста с частицами алмаза и нанесение полученной смеси на поверхность кремниевого основания в виде пленки с последующим ультрафиолетовым воздействием, травление неполимеризованного фоторезиста с частицами алмаза и селективное осаждение поликристаллического алмазного покрытия методом газофазного осаждения.

Изобретение относится к области металлургии, а именно к деформационно-термической обработке сплавов титан-ниобий-тантал-цирконий с эффектом памяти формы и может быть использовано в металлургии, машиностроении и медицине, в частности при изготовлении медицинских устройств типа «стент», «Кафа-фильтр» и прочих.

Изобретение относится к области измерительной техники и касается способа регистрации электромагнитного излучения в ИК, СВЧ и терагерцовом диапазонах длин волн. Способ включает в себя направление электромагнитного излучения на чувствительный элемент приемника излучения, преобразование его в тепловую или другой вид энергии и ее регистрацию.

Способ получения наноразмерного катализатора на основе смешанного оксида железа Fe3O4 для интенсификации добычи тяжелого углеводородного сырья, который ведут при комнатной температуре и атмосферном давлении посредством смешения двух предварительно приготовленных водных растворов.

Изобретение относится к физике низкотемпературной плазмы и плазмохимии, к электротехнике и электрофизике, а именно к ускорительной технике. Способ синтеза нанодисперсного нитрида титана осуществляют путем распыления электроразрядной плазмы титана коаксиального магнитоплазменного ускорителя с титановыми электродами в камеру-реактор, заполненную газообразным азотом при атмосферном давлении, при этом синтез ведут в камере-реакторе объемом от 0,022 м3 до 0,055 м3 и от 0,057 м3 до 0,098 м3 при температуре от 0°C до 19°C и от 21°C до 40°C соответственно.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и может быть использовано для терапии рака молочной железы в виде препарата для внутривенного введения без какого-либо внешнего воздействия (нагревания, действия магнитного поля и т.д.).

Изобретение относится к областям судебной экспертизы и наноструктур, а именно, к выявлению невидимых либо слабовидимых следов пальцев рук, оставленных на различных следовоспринимающих поверхностях на основе ультрадисперсного наноматериала, при проведении идентификации личности человека.

Использование: для управления созданием нанокристаллических структур на основе распознавания их оптических спектров. Сущность изобретения заключается в том, что способ управления созданием нанокристаллических структур на основе распознавания их оптических спектров заключается в регистрации оптического спектра, генерируемого создаваемой нанокристаллической структурой, сравнении оптического спектра с эталонными спектрами и формировании по результатам сравнения сигналов управления, при этом сигналы управления формируют путем повышения или снижения концентраций компонентов, входящих в химический состав нанокристаллической структуры.

Изобретение относится к области физико-химического анализа материалов, более конкретно к определению термодинамической активности (в дальнейшем активности) компонентов в поверхностном слое наночастицы, находящейся в матрице в бинарной системе в равновесных условиях.

Использование: для нанолитографических рисунков с кристаллической структурой со сверхразвитой поверхностью. Сущность изобретения заключается в том, что путем механического воздействия зонда на кремниевую подложку формируют пространственный профиль в виде области шириной 7 мкм и глубиной 800 нм, после чего дополнительно на поверхность подложки в рамках метода гидротермального синтеза наносят эквимолярный раствор ацетата цинка Zn(O2C2H3)2, гексаметилтетрамина C6H12N4 и N-цетил-N,N,N-триметиламмоний бромид.
Изобретение относится к области нанотехнологии и пищевой промышленности. Способ получения нанокапсул экстракта хлореллы в альгинате натрия характеризуется тем, что в качестве оболочки нанокапсул используют альгинат натрия, а в качестве ядра - экстракт хлореллы, при этом экстракт хлореллы медленно добавляют в суспензию альгината натрия в петролейном эфире в присутствии 0,01 г Е472с в качестве поверхностно-активного вещества, затем перемешивают при 1000 об/мин, после чего полученную суспензию отфильтровывают и сушат при комнатной температуре, при этом массовое соотношение ядро : оболочка составляет 1:3, или 1:5, или 1:1.

Изобретение относится к химической промышленности и может быть использовано для изготовления композитных материалов. Углеродные нанотрубки и дисперсионную среду, представляющую собой вещество, имеющее угол смачивания по отношению к высокоупорядоченному пиролитическому графиту не более 120°, смешивают путём механической обработки до максимального размера агломератов углеродных нанотрубок не более 50 мкм.

Изобретение относится к области физико-химического анализа. Предложен способ определения состава поверхностного слоя двухкомпонентной наночастицы сферической формы в матрице, согласно которому с целью установления размерной зависимости состава поверхностного слоя наночастицы, сплав, содержащий наноразмерные частицы, подвергают термическому отжигу, определяют состав наночастицы и матрицы, а также средний радиус наночастицы.
Изобретение относится к области нанотехнологии, в частности к фармацевтике. Способ получения нанокапсул цианида калия характеризуется тем, что в качестве оболочки нанокапсул используется каррагинан, в качестве ядра - цианид калия, при этом цианид калия добавляют в суспензию каррагинана в этаноле в присутствии препарата Е472 с, при массовом соотношении ядро:оболочка 1:1, или 1:3, или 5:1 соответственно, при перемешивании 1200 об/мин, затем добавляют петролейный эфир, полученную суспензию нанокапсул отфильтровывают и сушат при комнатной температуре.
Изобретение относится в области нанотехнологии, ветеринарной медицине и микробиологии. Способ получения нанокапсул солей лантаноидов в альгинате натрия характеризуется тем, что в качестве оболочки нанокапсул используется альгинат натрия, а в качестве ядра - соль лантаноидов при массовом соотношении ядро:оболочка 1:3, при этом соль лантаноида добавляют в суспензию альгината натрия в бутаноле, содержащую препарат Е472 с в качестве поверхностно-активного вещества при перемешивании 1200 об/мин, далее приливают гексан, полученную суспензию отфильтровывают и сушат при комнатной температуре.
Изобретение относится к медицине, а именно к послеоперационной терапии. Проводят лапаротомию, устраняют источник перитонита, санируют брюшную полость.

Изобретение относится к области лазерной медицины и, конкретно, к восстановительной хирургии. Описан биосовместимый наноматериал для лазерного восстановления целостности рассеченных биологических тканей, содержащий водную дисперсионную основу белка альбумина, углеродные нанотрубки и медицинский краситель - индоцианин, отличающийся тем, что в качестве углеродных нанотрубок используют многослойные углеродные нанотрубки и дополнительно содержит бычий белок коллагена при следующем соотношении компонентов, мас.: альбумин от 15 до 20, многослойные углеродные нанотрубки от 0,02 до 0,2, медицинский краситель - индоцианин от 0,005 до 0,01, бычий белок коллагена в концентрации от 0,3 до 3, дистиллированная вода - остальное. Наноматериал для лазерной сварки имеет высокую эффективность, достигнутую благодаря высокой прочности на разрыв лазерного шва, длительный срок хранения и низкую себестоимость. 1 ил., 1 табл.

Наверх