Способ оценки эффективности ингаляционных антибиотиков при нозокомиальной пневмонии


G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2663577:

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО НАУЧНЫХ ОРГАНИЗАЦИЙ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ НАУЧНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "ФЕДЕРАЛЬНЫЙ НАУЧНО-КЛИНИЧЕСКИЙ ЦЕНТР РЕАНИМАТОЛОГИИ И РЕАБИЛИТОЛОГИИ" (ФНКЦ РР) (RU)

Изобретение относится к способам анализа биологических материалов, а именно сыворотки крови. Способ оценки эффективности ингаляционной антибиотикотерапии нозокомиальной пневмонии заключается в том, что определяют содержание белка клеток Клара в сыворотке венозной крови за 1 час до первой ингаляции антибиотика и через 1 час после ингаляции с помощью иммуноферментного анализа, увеличение содержания белка клеток Клара по крайней мере в 1,5 раза свидетельствует об эффективности ингаляционной антибактериальной терапии. 1 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к способам анализа биологических материалов, а именно сыворотки крови. Предлагаемый способ может быть использован в клинической практике для определения эффективности ингаляционной антибактериальной терапии (АБТ) нозокомиальной пневмонии (НП) у пациентов в критических состояниях, находящихся в отделениях реаниматологии.

Актуальность

Несмотря на достижения современной реаниматологии НП остается одной из наиболее актуальных проблем. Это вторая по встречаемости нозокомиальная инфекция в отделениях реаниматологии (25-44%). НП в значительной степени увеличивает длительность пребывания пациентов в отделении реаниматологии и летальность. Для лечения НП используют около 50% антибиотиков, назначаемых в отделениях реаниматологии. Эффективная АБТ НП требует достижения антибиотиком концентрации в ткани легких, превышающей минимальную подавляющую концентрацию микроорганизма. Большинство антибиотиков при внутривенном введении крайне плохо проникают в ткань легких. Увеличение дозы антибиотика сопряжено с риском развития побочных эффектов. Разработка принципиально новых эффективных антибиотиков в настоящее время затруднена по многим причинам (научные, экономические, юридические, организационные и др.) и перспектив их создания в ближайшее время нет. Поэтому перспективным и активно развивающимся направлением АБТ НП является использование ингаляционных антибиотиков в качестве дополнения к системным. В связи с этим приобретает актуальность вопрос оценки эффективности ингаляционной АБТ с помощью специфичных молекулярных биомаркеров (БМ).

Уровень техники

В настоящее время перспективным для решения задачи диагностики и мониторинга эффективности лечения НП является использование молекулярных БМ. БМ позволяют в минимальные сроки и наименее инвазивно получить информацию о состоянии пациента.

В качестве потенциальных БМ НП обсуждаются прокальцитонин, копептин, растворимый триггерный рецептор миелоидных клеток первого типа, С-реактивный протеин, интерлейкин-1β, ингибитор активатора плазминогена 1 типа, сурфактантные протеины и др. (Josefson P., Stralin K., Ohlin A., Ennefors Т., Dragsten В., Andersson L., Fredlung Н., Moiling P., Olcen P. Evaluation of a commercial multiplex PCR test (SeptiFast) in the etiological diagnosis of community-onset bloodstream infections. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2011. - т.30. - №9. - C.1127-1134).

Множество других известных БМ - ангиопоэтин-связанный протеин 4 (US 2015368331), соотношение экспрессии белков FAIM3 и PLAC8 (WO 2016198684), цитокины интерлейкин-2 (ИЛ-2), ИЛ-7, ИЛ-23, ИЛ-27, ИЛ-10, интерферон-гамма и фактор некроза опухоли альфа (US 2015197808) абсолютно неспецифичны для воспалительного процесса на территории легких, а также сложны для оценки эффективности НП (реактивы дорогостоящие и малодоступны в клинической практике). Поэтому актуальной остается проблема поиска новых чувствительных и специфичных молекулярных БМ при НП.

Наиболее близким к заявляемому по совокупности существенных признаков является способ оценки эффективности ингаляционной АБТ НП, вызванной грамотрицательной флорой, включающий контроль общего эндотоксина грамотрицательных бактерий в сыворотке артериальной крови больного методом активированных частиц до начала ингаляционной АБТ и через 1 ч после первой ингаляции антибиотиком. Согласно данному способу регистрация повышения уровня эндотоксина в 2 раза и более от исходного свидетельствует о бактерицидном действии антибиотика и эффективности проводимой АБТ (RU 2456614). Принят в качестве прототипа. Данный способ оценки эффективности ингаляционной АБТ не лишен недостатков:

- из описания способа неясно, почему при проведении эффективной ингаляционной АБТ уровень эндотоксина повышается, а не снижается;

- известный способ позволяет проводить оценку АБТ исключительно грамотрицательных инфекций;

- авторы известного способа производят забор артериальной крови, что сопряжено с большей частотой осложнений и нецелесообразно;

- методика измерения содержания эндотоксина в крови (метод активированных частиц) не является широко доступной в клинической практике.

Заявляемое изобретение направлено на решение задачи оценки эффективности ингаляционных антибиотиков при НП.

Использование в клинической практике заявляемого способа позволяет достичь нескольких технических (лечебных) результатов:

- универсальность используемого БМ - белок клеток Клара (БКК);

- специфичность используемого молекулярного БМ - БКК для воспалительного процесса на территории легких, так как БКК синтезируется в клетках Клара, расположенных в терминальных бронхиолах;

- доступность методики измерения (реактивы для иммуноферментного анализа и методика его проведения имеются в распоряжении большинства клиник, реактивы для оценки содержания БКК коммерчески доступны в отличие от реактивов для оценки содержания биологически активных веществ, описанных в аналогах).

Указанные технические (лечебные) результаты при осуществлении изобретения достигаются за счет того, что также как в известном способе оценку эффективности ингаляционных антибиотиков при НП осуществляют путем контроля содержания биологически активных веществ в сыворотке крови до начала АБТ и после первой ингаляции антибиотика.

Особенность заявляемого способа заключается в том, что определяют содержание БКК в сыворотке венозной крови за 1 час до первой ингаляции антибиотика и через 1 час после ингаляции с помощью иммуноферментного анализа. Увеличение содержания БКК по крайней мере в 1,5 раза свидетельствует об эффективности ингаляционной АБТ.

Раскрытие сущности изобретения

Молекулярные БМ перспективны для диагностики и мониторинга эффективности лечения НП, так как позволяют в минимальные сроки и наименее инвазивно получить информацию о состоянии пациента. Для того чтобы вещество было использовано в качестве БМ, должно быть соблюдено несколько условий:

- простота забора материала и методики измерения,

- повторяемость результатов измерения,

- обоснованность использования данного вещества с позиции патофизиологии,

- корреляция с наличием заболевания, его стадией или степенью тяжести.

Любой БМ должен использоваться только в сочетании с клинической оценкой состояния пациента, а не изолированно. В качестве кандидатных БМ при НП рассматривают прокальцитонин, копептин, растворимый триггерный рецептор миелоидных клеток первого типа, С-реактивный протеин, интерлейкин-1β, ингибитор активатора плазминогена 1 типа, сурфактантные протеины и др. Ни один из используемых в настоящее время БМ НП не является специфичным для патологического процесса в легких. Поэтому актуально изучение новых специфических для патологического процесса в легких молекулярных БМ НП, в частности БКК.

Клетки Клара представляют собой безреснитчатые, не продуцирующие слизь клетки, расположенные в терминальных бронхиолах. В легких человека они составляют 15-20% эпителиоцитов. Клетки Клара секретируют ряд биологически активных веществ, которые участвуют в защите и репарации бронхиолярного эпителия, деградации слизи, регуляции воспаления, детоксикации ксенобиотиков

Установлено, что содержание БКК в плазме крови снижено при хронических заболеваниях легких вследствие деструкции клеток Клара, но значительно повышено при острых заболеваниях легких. Учитывая биологическую функцию клеток Клара и БКК, повышение содержания БКК в плазме крови больных в критических состояниях связано, вероятно, с активацией местной иммунной системы легких, пролиферацией клеток Клара, а также усилением синтеза БКК. Синтез данного БМ увеличивается при снижении бактериальной нагрузки.

Авторами заявляемого изобретения установлено, что БКК является чувствительным и специфичным диагностическим молекулярным БМ наличия Pseudomonas aeruginosa при НП у больных абдоминальной хирургической инфекцией (содержание БКК≤17,5 нг/мл, диагностический диапазон 4,5-15,2 нг/мл, чувствительность 92,7%, специфичность 72,0%, площадь под кривой 0,84; 95% доверительный интервал 0,713-0,926; р=0,0001) (Мороз В.В. Белок клеток Клара (Club Cell Protein) - новый диагностический кандидатный молекулярный биомаркер при нозокомиальной пневмонии. / Мороз В.В., Голубев A.M., Кузовлев А.Н., Шабанов А.К., Писарев В.М. // Общая реаниматология. 2014. - т.10. - №6. - С.6-14).

Полученные авторами данные по информативности БКК для диагностики НП у абдоминальных хирургических больных представляют значительную научную новизну и имеют практическое значение. В доступной авторам литературе не было найдено информации об аналогичных клинических исследованиях для указанной категории пациентов.

Заявленное изобретение основано на оценке степени повышения содержания биологически активного вещества в крови, которое отражает степень биологической активности клеток Клара при проведении ингаляционной АБТ.

Использование БКК в качестве молекулярного БМ обладает рядом преимуществ по сравнению с другими молекулярными БМ НП:

- возможность определения эффективности ингаляционных антибиотиков при НП независимо от природы возбудителя заболевания (универсальность используемого БМ);

- специфичность используемого молекулярного БМ для территории легких за счет включенности БКК в патогенез НП;

- доступность методики измерения (реактивы для иммуноферментного анализа и методика его проведения широко доступны в большинстве клиник)

Способ осуществляют следующим образом.

Для исследования содержания БКК производят забор 8 мл венозной крови в стандартные пробирки с этилендиаминтетраацетатом, кровь центрифугируют в течение 10 мин со скоростью 2000 об/мин, сыворотку крови в количестве 3-4 мл отделяют. Определение содержания БКК выполняют иммуноферментным методом в соответствии с рекомендациями производителя с помощью набора Human Clara Cell Protein ELISA, RD191022200, BioVendor, США). Продолжительность исследования составляет 15-20 мин.

Клинический пример

Пациент А., 1965 г.р., находился в отделении реаниматологии с диагнозом: Основной: спонтанный разрыв пищевода.

Осложнения: Гнойно-некротический медиастинит. Двусторонняя эмпиема плевры. Тяжелый сепсис. Двусторонняя полисегментарная НП. Острый респираторный дистресс синдром. ДН-3. Распространенный серозный перитонит. Тотальное нагноение торакотомной раны. Геморрагическая гастропатия. Рецидивирующее кровотечение из эрозий желудка. Кровопотеря тяжелой степени. Рецидивирующее кровотечение из правой плевральной полости и средостения. Постгеморрагическая анемия.

Проводилось лечение НП несколькими режимами АБТ. В связи с неэффективностью проводимой системной АБТ карбапенемами и ванкомицином (отсутствие положительной динамики клинических признаков острой дыхательной недостаточности и лабораторных показателей) было принято решение о смене режима АБТ: к базовому режиму (имипенем 0,5 г 4 р/сут, ванкомицин 1000 мг 2 р/сут) был добавлен ингаляционный тобрамицином 300 мг 2 р/сут. Ингаляционная АБТ проводилась в течение 5 сут. Клинически и лабораторно на фоне лечения ингаляционным тобрамицином была отмечена положительная динамика.

Динамика лабораторных показателей и БКК приведена в Таблице 1.

Вывод. Таким образом, данный клинический пример демонстрирует информативность БКК для оценки эффективности ингаляционной АБТ, в особенности у пациентов с комбинированными инфекционными осложнениями (в данном примере - НП и перитонит), когда динамика прокальцитонина неспецифична.

Способ оценки эффективности ингаляционной антибиотикотерапии нозокомиальной пневмонии, включающий контроль содержания биологически активных веществ в сыворотке крови до начала антибактериальной терапии и после первой ингаляции, отличающийся тем, что определяют содержание белка клеток Клара в сыворотке венозной крови за 1 час до первой ингаляции антибиотика и через 1 час после ингаляции с помощью иммуноферментного анализа, увеличение содержания белка клеток Клара по крайней мере в 1,5 раза свидетельствует об эффективности ингаляционной антибактериальной терапии.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к рентгенохирургическим методам лечения ишемической болезни сердца, и касается способа прогнозирования риска тромбоза в коронарном стенте при плановом чрезкожном коронарном вмешательстве у больных ишемической болезнью сердца.

Изобретение касается способа определения эффективности композиции в отношении ингибирования инициации трансляции, уровень ингибиторной активности которой в отношении инициации трансляции неизвестен, где способ включает: приведение клетки линии, которая имеет номер доступа РТА-13010 в Американской коллекции типовых культур (АТСС), в контакт с указанной композицией в течение периода времени и при температуре, достаточных для ингибирования пролиферации указанной клетки, приведение клетки линии, которая имеет номер доступа РТА-13011 в АТСС, в контакт с указанной композицией в течение периода времени и при температуре, достаточных для ингибирования пролиферации указанной клетки, измерение индуцированного указанной композицией уровня ингибирования пролиферации указанной клетки линии, которая имеет номер доступа РТА-13010 в АТСС, и уровня ингибирования пролиферации указанной клетки линии, которая имеет номер доступа РТА-13011 в АТСС, причем величина указанной ингибиторной активности указанной композиции в отношении процесса инициации трансляции пропорциональна уровню ингибирования пролиферации в клетке линии, которая имеет номер доступа РТА-13010 в АТСС, и сравнение уровня ингибирования пролиферации, индуцированного указанной композицией, с уровнем ингибирования пролиферации, индуцированного стандартом, имеющим известную величину указанной активности, и определение композиции как не имеющей ингибиторной активности в отношении инициации трансляции, если указанная композиция ингибирует пролиферацию указанной клетки линии, которая имеет номер доступа РТА-13011 в АТСС; при этом указанная композиция представляет собой пищевой, нутрицевтический или лекарственный продукт, при этом указанная клетка линии, которая имеет номер доступа РТА-13010 и/или РТА-13011 в АТСС, характеризуется тем, что содержит лентивирусный экспрессионный вектор, который содержит: (а) гетерологичный ген eIF2α, у которого полностью отсутствуют 3' и 5' НТО; (б) направленную на нуклеотид №1098, тимидиновый нуклеотид в 3'-НТО области эндогенного гена eIF2, миРНК №1098, которая ингибирует более 85% эндогенной экспрессии eIF2; и (в) оптимальную консенсусную последовательность Козака (GCCACCATGG).

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической биохимии и хирургии, и может быть использовано для прогнозирования развития макроангиопатий нижних конечностей у больных сахарным диабетом 2 типа.
Изобретение относится к области медицины, конкретно к кардиологии, реабилитологии, ультразвуковой диагностике и терапии, и касается способа прогнозирования риска развития неблагоприятного ремоделирования левого желудочка сердца у больных острым передним инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST в течение 6 месяцев от начала заболевания.

Изобретение относится к области биологии и может быть использовано для оценки экологического состояния окружающей среды. Для этого проводят отбор живых проб организмов, обитающих в водной среде с последующей идентификацией видового состава организмов с применением маркерных белков методом иммуноферментного анализа.

Изобретение относится к области медицины - стоматология/детская стоматология и микробиология/бактериология, и может быть использовано для определения титра кариесогенных бактерий S.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития эссенциальной гипертензии. У индивидуумов русской национальности, являющихся жителями Центрального Черноземья, осуществляют выделение ДНК из периферической венозной крови и анализ генетических маркеров матриксных металлопротеиназ.

Изобретение относится к медицине, ветеринарии, зоотехнии и биотехнологии. Способ оценки перекисного гомеостаза организма кроликов включает введение самцам и самкам кроликов антиоксидантного препарата «Окси-Нил драй» на ранних стадиях постнатального онтогенеза в одинаковых дозах по 300 мг/кг корма, подготовку биологического материала, исследования общеклинических и биохимических показателей крови, определение физиологических параметров организма в динамике пола и возраста; в качестве маркеров определены активность основных антиоксидантных ферментов и концентрации малонового диальдегида и диеновых конъюгатов в плазме крови, совокупно позволяющие судить о глубине активации перекисного окисления липидов, при этом если суммарное накопление продуктов перикисного окисления липидов превышает общую активность ферментативного звена, то организм находится в состоянии окислительного стресса, если наоборот - то в состоянии активированной компенсации.

Изобретение относится к молекулярной онкологии и представляет собой способ прогнозирования метастазов в регионарные лимфоузлы при аденокарциноме желудка, отличающийся тем, что осуществляют амплификацию фрагментов локусов В2М, NFKB1 и HER2 NFKB1 и HER2 методом ПЦР в реальном времени, рассчитывают относительную копийность генов по формуле rC=rCопухоль/rCнорма=2-ΔCt(опухоль/2-ΔCt(норма), где rC - относительная копийность гена, ΔCt - разность среднего значения сигналов флюоресценции (Ct) по трем повторам для гена мишени и среднего Ct по трем повторам для референсного гена: ΔCt=Ct(ген мишень)-Ct(B2M), осуществляют иммуногистохимическое исследование на срезах парафиновых блоков с помощью моноклональных антител к Ki67 и HER2, и при значениях rCNFKB1<0,8±0,02 и rCHER2<1,1±0,08 в комбинации с уровнем экспрессии в ядрах опухолевых клеток белка Ki67игх<35,6±6,1 и негативной экспрессией HER2игх(-) прогнозируют отсутствие метастазов, а при значениях rCNFKB1>0,9±0,01 и rCHER2>2,0±0,1 в комбинации с уровнем экспрессии в ядрах опухолевых клеток белка Ki67игх>54,2±4,9 и позитивной экспрессией HER2игх (+++) прогнозируют развитие метастазов.

Изобретение относится к молекулярной биологии, онкологии и биотехнологии. Тест-система для прогнозирования рецидивов у больных раком тела матки на основании уровня экспрессии гена ESR1 содержит контрольные смеси и смесь для ПЦР-РВ реакции, включающую 1 мМ dNTPs, 12,5 мМ MgCl2, 5-кратный ПЦР-буфер с 5-кратным красителем EvaGreen Dye, ДНК-полимеразу Thermus aquaticus в количестве 5 ед/мкл и высокоспецифичные олигонуклеотидные праймеры для генов ESR1 и АСТВ.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии. Проводят клинико-анамнестическое и лабораторно-инструментальное обследование пациента.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования метастазов в кости рака молочной железы. Способ включает лабораторное биохимическое исследование, при этом у больных раком молочной железы в плазме крови определяют концентрацию фибриногена.

Изобретение относится к медицине и касается способа прогнозирования вероятности развития болезни Альцгеймера (БА), включающего измерение в плазме крови человека энзиматической активности лейкоцитарной эластазы (ЛЭ) и функциональной активности α1-протеиназного ингибитора (α1-ПИ) и определение вероятности развития болезни Альцгеймера.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ экспресс-оценки жизнеспособности клеток в тканеинженерных конструкциях.

Группа изобретений относится к медицине и может быть использована для диагностики рака путем определения профиля продукции антитела в тестируемом образце, содержащем жидкость организма субъекта-млекопитающего.

Изобретение относится к области автоматического анализа, а именно к автоматическим анализаторам кала. Полностью автоматический анализатор кала содержит: автоматический контроллер; по меньшей мере, один контейнер для образца кала; опорный элемент контейнера; разбавляющий и перемешивающий модуль для получения жидкого образца кала; модуль физического анализа; по меньшей мере один модуль химического анализа; и модуль всасывания и добавления образца для всасывания жидкого образца кала и подачи жидкого образца кала в модуль физического анализа и модуль химического анализа.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике туберкулеза. Материал для обнаружения возбудителей туберкулеза человека методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) представляет собой суспензию, полученную растворением в 0,5 мл физиологического раствора мазков мокроты, неокрашенных и окрашенных по Циль-Нильсену, содержащих возбудителей туберкулеза человека.

Изобретение относится к медицине, а именно к инструментальным способам оценки функционального состояния системы гемостаза. Способ выявления гепарина в пробах крови заключается в том, что выполняют тромбоэластографию с цельной цитратной кровью с добавлением раствора 0,2М кальция хлорида и тромбоэластографии с цельной цитратной кровью с добавлением раствора 0,2М кальция хлорида и инактиватора гепарина, а наличие в пробе крови гепарина выявляют по показателям времени от начала свертывания до образования первых волокон фибрина, мин (R), времени изменения амплитуды свертывания, его нарастания или замедления, мин (K), по показателям максимальной амплитуды (МА) и угла альфа (угол α) в пробе с инактиватором по сравнению с пробой без него, при этом в качестве инактиватора гепарина используют полибрен в конечной концентрации 15-30 мкг/мл, а наличие в пробе крови гепарина выявляют по укорочению показателей R и K и увеличению МА и угла α в пробе с цельной цитратной кровью с добавлением раствора 0,2М кальция хлорида и полибрена по сравнению с пробой с цельной цитратной кровью с добавлением раствора 0,2М кальция хлорида.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для выбора тактики проведения химиолучевой терапии после резекции рецидива злокачественной глиомы головного мозга.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа определения степени риска неблагоприятного исхода заболевания у больных раком желудка.
Изобретение относится к медицине, а именно к анестезиологии-реаниматологии, и может быть использовано для прогнозирования развития постперфузионной сердечной недостаточности (ППСН) при операциях прямой реваскуляризации миокарда с искусственным кровообращением (ИК) у взрослых пациентов. Дооперационно определяют возраст, фракцию изгнания левого желудочка и росто-весовые данные пациента. Интраоперационно после катетеризации коронарного синуса сердца производят забор пробы крови из коронарного синуса. В пробе крови определяют уровни лактат-пируватного соотношения, аланина, глутамата, глутамина, аспартата, аспарагина, лейцина, изолейцина и серина. Определяют значение f по математической формуле. В зависимости от полученного значения f прогнозируют развитие ППСН. Способ позволяет интраоперационно с высокой точностью прогнозировать развитие ППСН при операциях прямой реваскуляризации миокарда с ИК за счет учета метаболического статуса миокарда пациента, и усилить степень защиты миокарда в интра- и постперфузионном периоде. 2 пр.

Изобретение относится к способам анализа биологических материалов, а именно сыворотки крови. Способ оценки эффективности ингаляционной антибиотикотерапии нозокомиальной пневмонии заключается в том, что определяют содержание белка клеток Клара в сыворотке венозной крови за 1 час до первой ингаляции антибиотика и через 1 час после ингаляции с помощью иммуноферментного анализа, увеличение содержания белка клеток Клара по крайней мере в 1,5 раза свидетельствует об эффективности ингаляционной антибактериальной терапии. 1 табл., 1 пр.

Наверх