Способ получения безвирусного посадочного материала картофеля ценных сортов

Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения безвирусного посадочного материала картофеля ценных сортов, заключающийся в том, что проводят прививку поделенных на части микро- и мини-клубней картофеля ценного сорта после предварительного обеззараживания, подсушивания и удаления с клубня-няньки картофеля обычного сорта всех глазков, проводят прививку на клубень-няньку путем прижатия фрагментов микро- и мини-клубней к местам удаленных глазков с последующим подсушиванием, обеззараживанием среза вокруг прививки и дальнейшим культивированием в условиях in vivo. Изобретение позволяет увеличить сроки хранения с последующим образованием жизнеспособных побегов в 3-5 раз по сравнению с контролем. 3 ил., 2 табл.

.

раз сорт Невский. Биомасса мини-клубней картофеля ценных сортов Жуковский и Невский, которые были привиты на сорт Майами-(клубень-нянька) по сравнению с контролем - (мини-клубни без прививки на клубень-няньку) по изобретению увеличились примерно в 2-3 раза - для сорта Жуковский и в 2-3 раза для сорта Невский. При этом сырая биомасса самих мини и микроклубней привитых на клубень няньку не усохлась, как обычно, а в среднем в два раза увеличилась.

2 таблицы, 3 фигуры.

Однозвенная формула изобретения.

 

Область применения

Изобретение относится к области биологии, в частности к сельскохозяйственной биотехнологии, картофелеводству, семеноводству картофеля, а именно к способу эффективного ускоренного размножения семенного картофеля, и может быть использован в сельском хозяйстве.

Уровень техники

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту является давно известный способ прививки картофеля глазком, изложенный в книге И.Е. Глущенко «Вегетативная гибридизация растений» (ОГИЗ-СЕЛЬХОЗГИЗ Государственное издательство сельскохозяйственной литературы, Москва, 1948).

В этом издании описана разработанная в 1938 г. особая техника прививки картофеля и ее результаты. Цилиндрической трубкой диаметром в 1 сантиметр вырезался глазок у сорта картофеля Оденвальдский синий. Этой же трубкой просверливался клубень белоклубневого сорта картофеля Эпикур, и в отверстие вставлялась «свеча» с глазком картофеля сорта Оденвальдский синий. На подвое - картофеле сорта Эпикур все собственные глазки были удалены. В дальнейшем такие клубни помещались в вазоны с промытым песком. Цель опыта сводилась к тому, чтобы заставить привитой глазок синеклубневого картофеля питаться веществами бело-клубневого.

Недостатком этого способа являлось то, что срастание подвоя и свечи с глазком происходило довольно трудно, длительно и составляло всего около 8%.

Известен способ микроклонального размножения картофеля (Патент RU 2181942, 2002 г.). Этот способ включает культивирование оздоровленных растений картофеля in vitro путем черенкования на питательную среду, содержащую макро- и микроэлементы по прописи Мурасиге-Скуга, с добавлением 30 г/л сахарозы, 5 мл/л Fe-хелата, 3 мг/л глицерина, 1 мг/л индолилуксусной кислоты (ИУК), 7 г/л агар-агара, витамины по Уайту и дополнительно содержащую 0,5-1,0 мг/л коричной кислоты с последующей высадкой полученных регенерантов в грунт для последующего получения микроклубней.

Недостатком этого способа является то, что он не предусматривает возможности длительного хранения микроклубней (не более 3-4 месяцев), особенно имеющих незначительные размеры, что приводит к утрате ценного дорогостоящего семенного материала.

Известен еще один способ размножения оздоровленных растений картофеля (RU 2329639). В этом способе растения картофеля размножают in vitro путем микрочеренкования на питательную среду, содержащую макро- и микроэлементы по прописи Мурасиге-Скуга, Fe-хелат, агар-агар, витамины по Уайту и сахарозу, получение растений-регенерантов и высадку растений-регенерантов в грунт, в питательную среду дополнительно вводят 3 мг/л глицина, 1000-2000 мг/л активированного угля и 1-2 мг/л аскорбиновой кислоты.

Недостатками данного способа являются низкая скорость роста растений при использовании системы роста in vitro и, как следствие, небольшой выход растений-регенерантов и микроклубней из одного исходного растения. Кроме того, снижается приживаемость растений, выращенных на питательной среде in vitro при пересадке в грунт.

Существует еще способ размножения посадочного материала (Патент RU 2206976). Этот способ включает высадку ростковых черенков (кусочки клубней с глазками) в кюветы на влажную фильтровальную бумагу, укоренение их с получением рассады. Перед проращиванием кусочки клубней с глазками обрабатывают 1%-ным раствором антибактериального и/или нематодно-бактериального препарата, при этом в качестве питательного раствора используют 1-3%-ный раствор минеральных удобрений, 0,01-0,05%-ный раствор микроэлементов и 1%-ный раствор биоудобрений.

Недостатком этого способа является использование пробирочной культуры и многоэтапных пересадок, что при пересадках ведет к дополнительным пестицидным и другим обработкам посадочного материала и ведет к дополнительным затратам.

Задача изобретения

Задачей предложенного изобретения является разработка способа сохранения микро- и мини-клубней, в том числе размером до 0,4 см при предотвращении их высыхания, увеличение эффективности использования микроклубней до 0,8 см, а также увеличение количества посадочного материала картофеля ценных сортов.

Решение задачи

Поставленная задача решается тем, что разработан способ получения безвирусного посадочного материала картофеля ценных сортов, заключающийся в том, что проводят прививку поделенных на части микро- и мини-клубней картофеля ценного сорта на клубень-«няньку» картофеля обычного сорта прижатием микро- и мини-клубней к местам удаленных глазков с последующим подсушиванием и дезинфекцией среза вокруг прививки и дальнейшим культивированием в условиях in vivo.

Новизной настоящего изобретения является использование прививки картофеля в совокупности с культивированием in vivo при делении мини- и микроклубней для получения безвирусного посадочного материала картофеля ценных сортов, что ведет к минимизации потерь ценного посадочного материала и увеличению выхода побеговой части для дальнейшей репродукции клубней.

Сущностью изобретения является совокупность заявленных признаков, ведущих к увеличению сроков хранения микро- и мини-клубней и прироста биомассы побеговой части, а также общего количества безвирусного посадочного материала картофеля ценных сортов.

Перечень иллюстративных материалов

Таблица 1 - Эффективность использования прививки на клубень-няньку.

Таблица 2 - Сроки хранения микро и мини-клубней, способных к образованию жизнеспособных побегов без и после прививки на клубень-няньку.

Фиг. 1. Изображение подготовки микро- и мини-клубней к прививке.

Фиг 2. Схема деления микро- и мини-клубней и прививки на клубень-няньку.

Фиг. 3. Растение картофеля сорта «Невский» из микроклубня после выращивания в течение 20 дней в грунте: А - с прививкой на клубень-няньку, В - без прививки на клубень-няньку.

Реализация изобретения

Клубни-няньки картофеля мелкого (40-80 г) и среднего (от 80-140 г) размера предварительно оцененные на предмет отсутствия механических повреждений, инфицирования вирусами и другими патогенами, обеззараживают и тщательно просушивают после подсушивания с клубня-няньки удаляют все глазки острым скальпелем или бритвой (фиг. 1). Перед прививкой производим обновление среза на 1,5-2 мм. Плоскость среза должна быть ровной, без неровностей, зазубрин и изгибов. Прививаемые клубеньки или их части плотно прижимают пальцем к горизонтальной или вертикальной плоскости среза клубня-«няньки» (фиг. 2). На один клубень может быть привит один или несколько микро- или мини-клубней и/или их фрагментов (фиг. 1). Через 3-4 часа привитые клубни можно перемещают для хранения при комнатной температуре и пониженной влажности воздуха, так как при повышенной влажности может происходить инфицирование поверхности срезов сапрофитной или патогенной микрофлорой.

Через месяц или позднее привитые клубни с ростками помещают в субстрат в условия in vivo для последующего культивирования и получения растений картофеля для следующей репродукции клубней (фиг. 3).

Результаты изобретения

Как следует из таблицы 1, сроки хранения посадочного материала с последующим образованием жизнеспособных побегов на примере сортов Жуковский и Невский привиты на сорт Майами (клубень-нянька) по изобретению увеличились в 5 раз - сорт Жуковский и в 3 раза - сорт Невский, в сравнении с контролем (непривитыми микроклубнями) при хранении до 2-х лет. Как следует из таблицы 2 и фиг. 3, ростовые показатели (прирост сырой биомассы наземных проростков) микроклубней картофеля ценных сортов Жуковский и Невский, привитых на сорт Майами (клубень-нянька), по сравнению с контролем - (мини- и микроклубни без прививки на клубень-няньку) по изобретению значительно превосходят примерно в 8-9 раз - сорт Жуковский и в 7-8 раз сорт Невский. Биомасса мини-клубней картофеля ценных сортов Жуковский и Невский, которые были привиты на сорт Майами (клубень-нянька), по сравнению с контролем - (мини-клубни без прививки на клубень-няньку) по изобретению увеличились примерно в 2-3 раза - для сорта Жуковский и в 2-3 раза для сорта Невский. При этом сырая биомасса самих мини- и микроклубней, привитых на клубень-няньку, не усыхалась, как обычно, а в среднем в два раза увеличилась.

Способ получения безвирусного посадочного материала картофеля ценных сортов, заключающийся в том, что проводят прививку поделенными на части микро- и мини-клубней картофеля ценного сорта после предварительного обеззараживания, подсушивания и удаления с клубня-няньки картофеля обычного сорта всех глазков, проводят прививку на клубень-няньку путем прижатия фрагментов микро- и мини-клубней к местам удаленных глазков с последующим подсушиванием, обеззараживанием среза вокруг прививки и дальнейшим культивированием в условиях in vivo.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области биохимии, в частности к конструкции рекомбинантной ДНК для супрессии экспрессии кодирующей белок последовательности. Также раскрыты трансгенное растение, содержащие указанную конструкцию, семя указанного трансгенного растения, часть указанного трансгенного растения.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения трансгенной клетки растения. При этом способ включает трансформацию клетки растения донорной молекулой нуклеиновой кислоты, которая встраивается в геномный локус, выбранный из группы, состоящей из FAD2, FAD3 и IPK1, с использованием сайт-специфической нуклеазы.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к выделенному полипептиду, обладающему фунгицидной активностью против грибковых патогенов Fusarium virguliforme, Fusarium oxysporum, Fusarium graminearum, Colletotrichum graminicola и Exserohilum turcicum и инсектицидной активностью против насекомого, выбранного из западного кукурузного жука, соевой совки и бобовой гусеницы, композиции, его содержащей, а также к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, его кодирующей.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к рекомбинантной молекуле полинуклеотида, предназначенной для снижения уровня гена фитохрома PHYA1. Также раскрыты шпилечный конструкт нуклеиновой кислоты, рекомбинантный бинарный вектор, клетка-хозяин, включающая указанный конструкт, трансгенный хлопчатник, трансгенная клетка хлопчатника, трансгенное семя трансгенного растения, часть растения.

Изобретение относится к биотехнологии. Описана интерферирующая рибонуклеиновая кислота (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, который является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень (i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую SEQ ID NO 122, 131, 144, 145, 178, 179 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей по меньшей мере на 85% идентична SEQ ID NO 122, 131, 144, 145, 178, 179 или комплементарной ей последовательности, или (ii) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую SEQ ID NО 122, 131, 144, 145, 178, 179 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична последовательности, представленной в SEQ ID NО 122, 131, 144, 145, 178, 179, или (iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой SEQ ID NО 122, 131, 144, 145, 178, 179.

Изобретение относится к области биотехнологии растений. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения эндемика Маньчжурского флористического района Aristolochia manshuriensis Kom., включающий вычленение апикальных и латеральных почек, стерилизацию гипохлоритом натрия (экспозиция 7-10 мин), высаживание на питательные среды MS с добавлением 0,8 мг/л 6-ВАР и 0,05 мг/л ИУК, размножение микропобегов, их последующее укоренение на среде MS, содержащей 20 мг/л сахарозы и ИМК в концентрации 3-5 мг/л, адаптацию растений-регенерантов к условиям ex vitro посредством высаживания на смесь песка, торфа и дерновой листовой земли в соотношении 1:1:1, предварительно простерилизованной при 85-90°С в течение 1-2 ч.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения иван-чая узколистного Chamaenerion angustifolium L.Holub, включающий вычленение пазушных меристем, стерилизацию эксплантов 7%-ным гипохлоритом кальция в течение 7 минут, высаживание на питательные среды MS с добавлением 6-ВАР в количестве 0,5 мг/л и MS с добавлением FeSO4⋅7H2O в количестве 30 мл/л, 6-ВАР в количестве 0,5 мг/л, IAA в количестве 0,01 мг/л, размножение микропобегов, их последующее укоренение на среде MS, дополненной 1 мг/л IBA, адаптацию растений-регенерантов к условиям ex vitro.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ отбора материнских растений Rhododendron ledebourii Pojark., продуцирующих семенное потомство с разным уровнем стабильности генетического материала, включающий сбор и проращивание семян фенотипически здоровых материнских растений Rhododendron ledebourii Pojark., приготовление из корешка каждого проростка длиной 0,5-1 см постоянно-давленного микропрепарата, анализ следующих цитогенетических показателей каждого микропрепарата: «митотическая активность» как отношение числа делящихся клеток к общему числу подсчитанных клеток (%), «уровень патологий митоза» как отношение числа клеток с нарушениями митоза к общему числу делящихся клеток (%), «спектр патологий митоза» как отношение числа клеток с нарушением деления к числу делящихся клеток с аберрациями (%), «уровень клеток с остаточными ядрышками» на стадии метафазы-телофазы митоза как отношение числа клеток с остаточными ядрышками к общему числу клеток на указанных стадиях (%), «средняя площадь поверхности одиночных ядрышек» (в мкм2); где проводят анализ не менее 19 микропрепаратов и не менее 500 клеток каждого микропрепарата, «средняя площадь поверхности одиночных ядрышек» определяется по 200 клеткам на каждом микропрепарате, полученные значения цитогенетических показателей сравнивают со значениями для мутабильной или слабомутабильной группы, причем показатель «митотическая активность» относится к мутабильной группе при значении не более 8%, «уровень патологий митоза» - при значении более 2,5%, «спектр патологий митоза» - более 50%, «уровень клеток с остаточными ядрышками» - более 8%, «площадь поверхности одиночных ядрышек» - при значении не менее 76 мкм2, в противном случае показатели относятся к слабомутабильной группе; если более 2 показателей оказались в мутабильной группе, то и проросток относят к мутабильной группе, а если 2 и менее, то к слабомутабильной; если не менее половины проростков оказались в слабомутабильной группе, уровень стабильности генетического материала материнского растения оценивается как высокий, если менее - то, как низкий.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к изолированным цис-регуляторным элементам для придания промотору индуцируемости патогеном, химерному промотору, обладающему индуцируемостью патогеном, рекомбинантному гену для экспрессии в растительной клетке после контакта с патогеном, экспрессирующим вектору для повышения устойчивости растения к патогенам, где патоген представляет собой грибок или оомицет.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к мутантному растению сорго, содержащему в своем геноме по меньшей мере один полинуклеотид, где указанный полинуклеотид кодирует полипептид, имеющий замену аланина на треонин в положении 93 большой субъединицы белка AHAS сорго, причем указанное растение имеет повышенную устойчивость к одному или более имидазолиноновым гербицидам, к его семени, а также к способу его получения и способу его идентификации.
Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения адвентивных корней вздутоплодника сибирского (Phlojodicarpus sibiricus (Steph.) K.-Pol.) в условиях in vitro, включающий стерилизацию семян вздутоплодника перекисью водорода в течение 5 мин, ополаскивание, трехкратное отмывание в течение 5 мин в дистиллированной воде, помещение стерильных семян на твердую питательную среду без гормонов, следующего состава: NH4NO3 1650,000±2,0000 мг, KNO3 1900,000±2,0000 мг, MgSO4×7H2O 370,000±1,0000 мг, KH2PO4 170,000±0,1000 мг, CaCl2×2H2O 440,000±0,5000 мг, Н3ВО3 6,200±0,0100 мг, MnSO4×4H2O 22,300±0,0200 мг, ZnSO4×7H2O 8,600±0,0100 мг, KI 0,830±0,0010 мг, Na2MoO4×2H2O 0,250±0,0010 мг, CuSO4×5H2O 0,025±0,0001 мг, CoCl2×6H2O 0,025±0,0001 мг, FeSO4×7H2O 2,785±0,001 мг, Na-ЭДТА 3,725±0,001 мг, тиамин 0,100±0,0010 мг, пиридоксин 0,100±0,0010 мг, сахароза 30000,000±100,0000 мг, вода 1000 мл, агар 5000 мг, дальнейшее помещение растений, полученных in vitro, в аналогичную питательную среду с добавлением ауксина, при этом культивирование растений проводят в темноте, при температуре 26±1°С, влажности помещения 70±5%, цикл субкультивирования составляет 4 недели, при пересеве используют 1/3 адвентивных корней, полученные адвентивные корни выращивают в течение более тридцати циклов.

Изобретение относится к области биотехнологии растений. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения эндемика Маньчжурского флористического района Aristolochia manshuriensis Kom., включающий вычленение апикальных и латеральных почек, стерилизацию гипохлоритом натрия (экспозиция 7-10 мин), высаживание на питательные среды MS с добавлением 0,8 мг/л 6-ВАР и 0,05 мг/л ИУК, размножение микропобегов, их последующее укоренение на среде MS, содержащей 20 мг/л сахарозы и ИМК в концентрации 3-5 мг/л, адаптацию растений-регенерантов к условиям ex vitro посредством высаживания на смесь песка, торфа и дерновой листовой земли в соотношении 1:1:1, предварительно простерилизованной при 85-90°С в течение 1-2 ч.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения иван-чая узколистного Chamaenerion angustifolium L.Holub, включающий вычленение пазушных меристем, стерилизацию эксплантов 7%-ным гипохлоритом кальция в течение 7 минут, высаживание на питательные среды MS с добавлением 6-ВАР в количестве 0,5 мг/л и MS с добавлением FeSO4⋅7H2O в количестве 30 мл/л, 6-ВАР в количестве 0,5 мг/л, IAA в количестве 0,01 мг/л, размножение микропобегов, их последующее укоренение на среде MS, дополненной 1 мг/л IBA, адаптацию растений-регенерантов к условиям ex vitro.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ сохранения ювенильного статуса культуры in vitro малины (Rubus idaeus), включающий перенос микрорастений малины на стадиях мультипликации или укоренения на питательные среды в условиях с пониженным уровнем освещенности и пониженной температурой, где смена освещенности и температуры происходит через 5 дней на стадии мультипликации и через 14 дней на стадии укоренения после начала очередного пассажа культивирования, при этом в качестве питательной среды на стадии мультипликации используют питательную среду MS с добавлением сахарозы 30 г/л, инозитола 100 мг/л, пиридоксина 0,1 мг/л, тиамина 0,1 мг/л, никотиновой кислоты 0,5 мг/л, 6-БАП 0,8 мг/л и зеатина 0,1 мг/л, а на стадии укоренения в качестве питательной среды используют питательную среду 1/2 QL с добавлением сахарозы 20 г/л, инозитола 100 мг/л, пиридоксина 0,1 мг/л, тиамина 0,1 мг/л, никотиновой кислоты 0,5 мг/л, индолилмасляной кислоты (ИМК) 0,1 мг/л, ИУК 0,1 мг/л, при этом уровень интенсивности освещенности снижается до 1000±200 люкс, а температура - до 4-8°С.

Изобретение относится к области биотехнологии растений и может быть использовано в питомниководстве для производства посадочного материала с помощью технологии клонального микроразмножения.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к картофелеводству. Способ включает получение оздоровленных растений картофеля для черенкования (промежуточный продукт), мини-клубней картофеля (промежуточный продукт), клубней супер – суперэлиты (промежуточный продукт), клубней суперэлиты (промежуточный продукт), клубней элиты (промежуточный продукт), клубней первой полевой репродукции (конечный продукт).

Изобретение относится к области биотехнологии растений. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения алычи in vitro, включающий культивирование микропобегов алычи на этапе мультипликации на среде QL с добавлением сахарозы 30 г/л, агар-агара 9 г/л, БАП 0,5-2 мг/л и зеатина 0,05-1 мг/л, укоренение микропобегов на половинной по макросолям среде QL с добавлением сахарозы 20 г/л, агар-агара 9 г/л, ИУК 0,1-1 мг/л и/или ИМК 0,1-1 мг/л, и/или НУК 0,1-1 мг/л, при этом этап мультипликации проводят в два пассажа по три недели каждый, причем на второй пассаж переносят целые конгломераты почек и побегов без разделения, а этап укоренения проводят в течение первых 2-7 суток в темноте, а затем - 1-2 недели на свету.
Изобретение относится к области биохимии, в частности к кукурузному продукту, содержащему семя кукурузы от растения кукурузы, несущего генотип коричневой центральной жилки 3 (bm3) в гомозиготном состоянии и генотип мучнистости-2 (fl2) в гомозиготном состоянии.

Изобретение относится к биотехнологии. Изобретение представляет собой способ, включающий индукцию микропобегов непосредственно из апикальной недифференцированной ткани вегетативных почек экспланта на агаризованной среде, содержащей минеральную основу по Мурасиге-Скуга и дополнительно включающей 0,25-2,0 мг/л БАП, 20-30 г/л сахарозы, 6 г/л агара.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к биотехнологии. Способ включает высадку микрорастений на пластиковые поддоны, покрытые лутрасилом с предварительно выполненными в нем посадочными отверстиями, путем погружения корневой системы растений в водный антисептический раствор с последующим обеспечением проточной циркуляции воды в поддоне и верхнего мелкодисперсного увлажнения растений.
Наверх