Препарат для лечения коров, больных маститами, и способ его приготовления

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к лечению коров, больных маститами. Препарат для лечения коров, больных маститами, включает 10% экстракт смеси прополиса и травяного сбора, в качестве экстрагента которых используется водно-пропиленгликолиевая смесь с соотношением воды и пропиленгликоля 1:1, а также следующие вещества при следующем соотношении компонентов, мас.%: арабиногалактан 20, бишофит 20, диметилсульфоксид 15. Экстрагируемая смесь прополиса и травяного сбора содержит компоненты, мас.%: прополис 15, трава шалфея 20, листья эвкалипта 20, цветки календулы 10, цветки ромашки 10, корни солодки голой 15, наземная часть лапчатки кустарниковой 10. Изобретение обеспечивает уменьшение сроков лечения животных, а также сокращение сроков утилизации молока. 1 ил., 9 табл.

 

Изобретение относится к области ветеринарии в частности для лечения коров больных маститами.

Известны препараты для лечения коров больных маститами с использованием этиотропных средств. В качестве этиотропных средств используют антибиотики, сульфаниламиды, нитрофураны, лекарственные краски. Наиболее распространенным способом лечения коров с маститом является интрацистернальное введение антимикробных препаратов в пораженную долю вымени, также возможно парэнтеральное их введение. Кратность введения препарата и курс лечения регламентируются наставлением по применению.

Выздоровление животных контролируют через 5-7 дней после завершения курса лечения. При отсутствии положительных результатов проводят повторный курс лечения препаратом, к которому чувствительна микрофлора, выделенная из пораженной маститом доли вымени (Слободяник В.И. Иммунологические аспекты физиологии и патологии молочной железы коров. / В.И. Слободяник, В.А. Париков, Н.Т. Климов [и др.] - Таганрог: Изд. центр Таганрог, гос. пед. института, 2009. - 276 с.).

При использовании этих препаратов возникает ряд отрицательных эффектов, к примеру, молоко с остаточным количеством антибиотических веществ не допустимо сдавать на молокоперерабатывающие предприятия; у микроорганизмов, циркулирующих в хозяйстве, вырабатывается резистентность к используемым препаратам антибиотиков, а значит применение их в случае лечения иных заболеваний будет недостаточно эффективным; вторичный токсический эффект от использования препаратов антибиотиков порой превышает первичный терапевтический; в современных условиях применение одного препарата антибиотика часто недостаточно эффективно и приходится применять сразу два и более их наименований одновременно; препараты антибиотиков могут вызывать лекарственную аллергию у животных и людей.

Очевидной альтернативой применения антибактериальных препаратов при терапии маститов коров является использование высокоэффективных экологически безопасных лечебных средств на основе сырья растительного, минерального и животного происхождения.

Известно при лечении субклинического мастита у коров использование отваров таких растений как эвкалипт, календула, зверобой (Попов Л.К. Лечение мастита фитопрепаратами и стресс-корректором Лигфоллом / Л.К. Попов, А.Н. Гаврин // Зоотехния. - 2008, №7, С. 26-27).

Известен препарат на основе компонентов пихты сибирской для лечения маститов у коров включающий в качестве одного из компонентов ди-метилсульфоксид (KZ 23945, 16.05.2011). Его недостатком является то, что создан он на масляной основе, которая препятствует его полному высвобождению и проникновению антибиотиков в ткани вымени. Кроме того растительные масла, входящие в состав препаратов, при длительном хранении окисляются.

Известен препарат, содержащий в качестве одного из компонентов природный минерал бишофит (RU 2417089, 27.04.2011).

Известен препарат, включающий в состав ингредиентов экстракт прополиса (RU 2102074, 20.01.1995).

Недостатком данного препарата, так же как и препаратов на основе растительного сырья является то, что все они применяются чаще всего для лечения субклинических маститов, а при лечении клинически выраженных маститов недостаточно эффективны и не обладают многосторонне направленным фармакологическим действием.

Наиболее близким по своей технической сущности является противомаститный препарат «ПФП» содержит диоксидин, пробиотик Лактимет, экстракт прополиса, экстракт травяного сбора (толокнянки, зверобоя), нипагин, карбоксиметилцеллюлозу натрия. Предназначен для лечения коров, больных субклиническим и серозно-катаральным клиническим маститом в лактационный период. (Ивашкевич О.П. Эффективность препаратов на основе диоксидина и ветеринарно-санитарная оценка продукции животноводства и их применения / О.П. Ивашкевич // Уч. записки Витебской ордена «Знак почета» гос. академии вет. медицины. - Витебск, 2015. - Т. 51, вып. 1. - Ч. 1. - С. 45-47).

Недостатком данного препарата является то, что возникает необходимость браковки молока в период и после лечения в течение 72 часов по причине выделения диоксидина с молоком.

Задачей решаемой настоящим изобретением является создание препарата и технологии его приготовления, содержащего несколько активно действующих веществ из разных классовых соединений взаимно дополняющих и усиливающих терапевтическое действие друг друга, а также расширение ассортимента экологически безопасных препаратов.

Настоящая задача решается тем, что препарат для лечения коров больных маститами, включающий экстракт прополиса и экстракт травяного сбора, дополнительно содержит арабиногалактан, бишофит, диметилсульфоксид, а в качестве экстрагента смеси прополиса и травяного сбора - водно-пропиленгликолиевую смесь в соотношении воды и пропиленгликоля 1:1, при следующем соотношении компонентов, мас. %:

Арабиногалактан	20
Бишофит	20
Диметилсульфоксид	15
10% - водно-пропиленгликолиевый экстракт
смеси прополиса и травяного сбора	остальное,

где смесь прополиса и травяного сбора содержит прополис, траву шалфея, листья эвкалипта, цветки календулы, цветки ромашки, корни солодки голой и наземную часть лапчатки кустарниковой при следующем соотношении компонентов, мас. %:

Прополис

15

Трава шалфея

20

Листья эвкалипта	20
Цветки календулы	10
Цветки ромашки	10
Корни солодки голой	15
Наземная часть лапчатки кустарниковой	10

Техническая сущность настоящего изобретения заключается в том, что в него введен арабиногалактан, совокупность свойств которого позволяет использовать его как матрицу для комплексных препаратов и в то же время как активно действующий компонент.

В качестве оптимальной основы, которая сочетала бы в себе хорошие реологические свойства и универсального экстрагента для прополиса, лекарственных растений, а так же как растворителя арабиногалактана использована водно-пропиленгликолиевая смесь, которая обуславливает содержание в экстрактах как водно, так и жирорастворимых биологически активных веществ и при этом обладает низким раздражающим действием.

Арабиногалактан представляет собой полисахарид растительного происхождения, его получают из древесины лиственницы, обладает высокой биологической активностью (иммуномодулирующая, пребиотическая, гиполипидемическая, митогенная, антимутагенная, гепатопротекторная, гастропротекторная, мембранотропность и др.). Он характеризуется также комплексом других чрезвычайно ценных свойств (низкая токсичность, хорошая растворимость в холодной воде, уникально низкая вязкость концентрированных водных растворов). Совокупность этих свойств позволяет использовать арабиногалактан как матрицу для комплексных препаратов и в то же время как активно действующий компонент данных препаратов.

Минерал бишофит представляет собой гексагидрат магния хлорида формулы MgCl₂×6H₂O, его месторождения обнаружены на обширных площадях Прикаспийской впадины и Приволжской моноклинали на глубинах 1000-2000 м. Препараты из бишофита обладают местным эффектом и оказывают противовоспалительное, антимикробное и фунгистатическое действие разной степени выраженности, нормализуют микроциркуляцию и обмен веществ.

Диметилсульфоксид или же ДМСО - лекарственное средство, обладающее противовоспалительным, обезболивающим действием. Препарат оказывает антисептический, а также фибринолитический эффект.

Диметилсульфоксид проникает через кожный покров и слизистые, он способствует повышению проницаемости других ЛС. ДМСО входит в класс малотоксичных лекарственных средств.

Выведения препарата производится почками в виде диметилсульфона или же диметилсульфата. Может также выделяться с воздухом, что выдыхается.

При определении соотношения компонентов в препарате исходили из того, что каждый из компонентов влияет на многочисленные звенья воспалительного синдрома, обеспечивая в разной степени, антимикробную и противовоспалительную активность препарата. При этом основное действие (противомикробная и противовоспалительная активность) препарата достигается включением в его состав прополиса, бишофита, травы шалфея, листьев эвкалипта и цветков календулы, цветков ромашки, корней солодки голой, наземной части лапчатки кустарниковой.

О химическом составе используемых растений известно, что в предложенном составе растительного сырья содержатся: флавоноиды (рутин, кверцетин, авикулярин, гиперозид, югланин и др.), витамины, каротиноиды, тритерпеноиды, дубильные вещества, эфирные масла (хамазулен), органические кислоты, кумарины, соединения кремниевой кислоты, фенолгликозид, арбутин и другие, биологически активные вещества.

Приготовления препарата проводили следующим образом (фиг.1).

Прополис, очищали от механических примесей, затем его измельченный на кусочки размером не более 20 мм замораживали в морозильнике бытового холодильника до температуры - 10°С в течение не менее 3 ч для полного его промораживания и измельчали на мельнице типа М-8М до порошкообразного состояния с частицами не более 2-4 мм. Прополис, раздробленный на фракции 2-4 мм, имеет большую поверхность для экстрагирования, что увеличивает извлечение БАВ, таких как флавоноиды, фитоциды, ненасыщенные жирные кислоты (деценовые), смолы, эфирные масла и другие. Лекарственные растения: траву шалфея, листья эвкалипта, цветки календулы, цветки ромашки, корни солодки голой и надземную часть лапчатки кустарниковой (каждые в отдельности) измельчали на мельнице МПР-2 до частиц размером не более 2-4 мм, смешивали с прополисом в соотношении компонентов, мас. %: прополис - 15, трава шалфея - 20, листья эвкалипта - 20, цветки календулы - 10, цветки ромашки - 10, корни солодки голой - 15, наземная часть лапчатки кустарниковой - 10.

Затем прополисо-травяную смесь помещали в ультразвуковую установку «УЗВ-5,7/1 ТТЦ» и заливали водно-пропиленгликолевой смесью (соотношение воды и пропиленгликоля 1:1) в массовом соотношении 1:10. Полученную смесь в течение 3,0 часов обрабатывали в режиме кавитации. Обработку вели при рабочих параметрах установки (потребляемая мощность 460 Вт., частота ультразвуковых колебаний 35 кГц и ультразвуковой мощность 200 Вт.), с постепенным повышением температуры до 55°С, без доступа света. Далее в раствор при работающем ультразвуке добавляли бишофит в количестве 20% от количества экстрагента и затем вносили арабиногалактан в количестве 20% от массы экстрагента. После полного растворения арабиногалактана полученную смесь охлаждали и фильтровали путем центрифугирования при 3000 тысячах оборотах в минуту, в течение 10 минут. После чего вносили диметилсульфоксид в количестве 15% от массы готового препарата. Полученный водно-пропиленгликолевый экстракт, который после добавления арабиногалактана приобретает гелеобразную консистенцию, расфасовывали в чистую сухую без постороннего запаха посуду.

Полученный комплексный экологически безопасный противомаститный препарат представляет собой однородную массу, гелеобразной консистенции, светло коричневого цвета, с характерным запахом прополиса и лекарственных растений.

Исследования проводились в период 2016 года, в лаборатории ветеринарии Федерального государственного бюджетного научного учреждения Алтайский научно-исследовательский институт животноводства и ветеринарии, научно-образовательном комплексе Сибирское отделение Российской академии наук - Алтайский государственный медицинский университет и Федеральном государственном унитарном предприятии Племенной завод «Комсомольское» Павловского района Алтайского края.

Объектом исследования служили опытные образцы предлагаемого противомаститного препарата в форме геля.

В доклинических исследованиях использовали 40 мышей нелинейных белых беспородных массой 18-22 г, 20 крыс линии Wistar массой тела 200-250 и 5 коров массой 500-550 кг 3-4 лактации, черно-пестрой породы.

Для оценки органолептических свойств, препарата субъективно определяли внешний вид, запах, консистенцию.

Термостабильность изучали при нагревании 10,0 грамм экспериментального образца препарата в хорошо закрытой пробирке в термостате при 37±1°С в течение суток (24 часа) и при замораживании навески препарата в пробирке до - 20°С и последующем постепенном оттаивании при комнатной температуре.

Для проведения биофармацевтических испытаний invitro был использован метод диффузии в желатиновый гель. С этой целью готовили 100 мл 2%-го раствора желатина на стандартном растворителе (вода очищенная) с добавлением индикатора - 3%-й раствор железа хлорида (III) в количестве 1 мл. Горячий раствор разливали в чашки Петри и охлаждали. В сформировавшемся геле через 24 часа полым металлическим цилиндром с диаметром 8 мм вырезали лунки. В образовавшиеся лунки вносили по 0,2 гр. испытуемых образцов лекарственной формы. Степень высвобождения препарата из лекарственной формы оценивали по диаметру окрашенной зоны через 24 часа.

С целью определения острой токсичности предлагаемый препарата были сформированы 4 группы белых мышей массой 21-24 г по 8 голов в каждой. Первой опытной группе лабораторных животных внутрижелудочно, вводилась готовая лекарственная форма препарата в дозе 15 мл, второй опытной группе - в дозе 30 мл, а третьей группе - в дозе 45 мл, на кг, массы тела. Животным контрольной группе мышей вводили эквиобъемное количество физиологического раствора. Клиническую картину «острого» отравления фиксировали после введения исследуемого препарата в различных дозах в течение суток. Длительность наблюдения за животными составляла 14 дней. В течение исследования регистрировали интегральные показатели здоровья животных: внешнее состояние, прирост массы тела (еженедельно). По завершении эксперимента отдельных животных (по 5 голов с каждой группы) подвергали эвтаназии путем декапитации и проводили диагностическое вскрытие с целью изучения макроскопического состояния внутренних органов. Взвешивание живой массы животных и внутренних органов проводили на электронных весах. Расчет массовых коэффициентов производили по формуле: МК = Масса органа (г) / масса тела (г)*100%.

Исследование местно-раздражающее действие предлагаемого препарата на паренхиму вымени изучали по методике Л.П. Маланина (1988). В качестве показателя возможного раздражающего действия препарата определяли содержание соматических клеток в молоке, увеличение количества которых свидетельствует о воспалительной реакции в молочной железе. О действии препарата на ткани молочной железы судили по наличию местной воспалительной реакции, изменению содержания соматических клеток в молоке в сроки: перед введением и через 3, 6, 12, 24 и 48 часа после введения препарата. Содержание соматических клеток в молоке определяли на вискозиметрическом анализаторе «Соматос» (Россия) (ГОСТ 54077-2010). Одновременно проводили оценку раздражающего действия тестируемого препарата путем клинического осмотра молочной железы всех подопытных животных.

Противовоспалительную активность исследовали на модели острого воспаления после недельного введения экспериментального препарата в виде аппликаций. Исследования проводили на 20 крысах линии Wistar обоего пола массой тела 200-250 г, которые были разделены на 2 группы по 10 особей в каждой. Животные контрольной группы на протяжении 7 дней получали эквиобъемное количество воды очищенной. Последнее нанесение экспериментального препарата осуществлялось за 1 ч до инъецирования флогистика. Острое экссудативное воспаление индуцировали субплантарным введением 0,1 мл раствора каррагенина 1%. Клинический осмотр каждого животного проводился ежедневно однократно. Выполняли подробный осмотр животного в клетке содержания и в руках.

Измерение объема правой задней конечности проводили с помощью цифрового плетизмометра «DigitalPletismometerLE7500» фирмы Pan-labHARVARDapparatus, после курса экспериментального препарата до введения, а также через 60, 120 и 240 мин после инъекции флогистика.

На основании данных среднего прироста объема конечности животных рассчитывали степень противовоспалительной активности (X) по формуле

Vк - средний прирост объема конечности в контроле, см³;

Vo - средний прирост объема конечности в опыте, см³.

Жаропонижающем действии препарата определяли по его способности снижать температуру поверхности тела крысы. Температура кожи измерялась электронным термометром (A&D medical, Япония) на поверхности правой задней конечности.

Далее проводили исследования стабильности образцов комплексного препарата. Были определены их термо- и коллоидная стабильность, параметры позволяющие прогнозировать устойчивость в процессе производства и хранения при изменении температурных параметров и механическом воздействии.

Коллоидную стабильность или устойчивость препарата к расслоению определяли центрифугированием. Устойчивой считали систему, которая при центрифугировании в течение 10 мин при скорости 4000 об/мин не расслаивалась. Результаты представлены в таблице 1.

Как следует из данных, представленных в таблице 3, предлагаемый препарат достаточно хорошо выдерживает как замораживание, так и нагревание в термостате. Экспериментальный образец оказался устойчивым к центрифугированию, то есть продемонстрировал высокую коллоидную стабильность.

Оценку степени высвобождения биологически активных веществ, проводили по традиционной методике диффузии в гель. Степень высвобождения препарата из лекарственной формы оценивали по диаметру окрашенной зоны. Экспериментальный образец комплексного экологически безопасного препарата обладают достаточно высокой биодоступностью, диаметр окрашенной зоны составил в среднем 15-16 мм.

Изучение острой токсичности показывает вредное действие препарата, проявляющееся после его однократного применения. В предварительных испытаниях по установлению максимальной и минимальной доз препарата было использовано 5 групп животных по 3 головы в каждой, двум из которых вводили разведенный 1:2 и 1:3 препарат, при этом клинических симптомов отравления выявлено не было.

После однократного введения препарата у мышей наблюдалось незначительное возбуждение, они начинали бегать по клетке, а затем через 2-3 минуты наступало угнетенное состояние. Животные слабо реагировали на внешние раздражители, наблюдалось некоторое понижение тактильной и болевой чувствительности. Они сидели, сгорбившись, закрыв глаза, отмечалось брюшное учащенное дыхание. Через 15-20 минут начинали медленно перемещаться по клетке, шатаясь из стороны в сторону. В течение последующих 20-30 минут у большинства мышей наблюдались манежные движения, они периодически останавливались и замирали. В первых двух опытных группах гибели животных не отмечалось. Признаки интоксикации в первой группе у 5 голов исчезли через 60 минут, они начали активно перемещаться по клетке, лазить по решетке и грызть корм. Во второй группе к этому времени двигательная активность восстановилась у 3 мышей, у 4 -наблюдалась слабая активность, одна мышь лежала, сгорбившись и закрыв глаза, активность у нее появилась через 3 часа. В третьей опытной группе наступила гибель двух мышей. При вскрытии, у одной мыши обнаружили отек стенок брюшной полости, желудок расширен газами, содержит остатки препарата и кормовые массы, слизистая оболочка гиперемирована. У другого животного выявлена гиперемия слизистой оболочки тонкого кишечника.

В таблице 2 приводятся результаты по динамике живой массы мышей на протяжении 14 суток. Исходя из приведенных данных, динамика массы лабораторных животных имеет различия между группами. В контрольной группе произошло наибольшее увеличение массы тела мышей на 13,1% (р<0,05) через неделю после введения препарата, в то время как в первой, второй и третьей опытных группах отмечался прирост животных на 11,5; 6,7 и 4,3%, соответственно. На 14-е сутки наименьшее прибавление живой массы было выявлено в третьей опытной группе на 2,1%, при этом в остальных группах динамика массы мышей составила 5,4; 4,9 и 7,6%.

По окончании опыта через 14 дней при внешнем осмотре лабораторных животных каких-либо отклонений в телосложении, деформации и отека конечностей не наблюдалось. Шерсть была ровной, гладкой, кожный покров без расчесов и изъязвлений.

Примечание: * - р<0,05

При вскрытии не было выявлено нарушений в расположении, форме и строении внутренних органов. Визуально отмечались различия по величине паренхиматозных органов (печени, селезенки) между животными контрольной и опытными группами. При этом у экспериментальных животных первой, второй и третьей опытных групп выявлено увеличение размеров селезенки в 1,44; 1,85 и 1,77 раза, величина печени была больше на 17; 4,4 и 8,1%, соответственно в сравнении с органами животных контрольной группой.

Массовый коэффициент (МК) - процентное отношение массы органа к массе тела, интегральный показатель, используемый в токсикологии для оценки состояния внутренних органов. Анализ данного показателя при токсикологических исследованиях, дает возможность обнаружения органа-мишени токсиканта, выявить признаки эндокринно-связанных эффектов. Данные по весовым коэффициентам органов мышей приведены в таблице 3.

Введение предлагаемого препарата способствовало меньшему приросту подопытных животных и увеличению весовых коэффициентов паренхиматозных органов в сравнении с животными контрольной группы, особенно весовых коэффициентов селезенки и имело доз зависимый характер.

Исследования раздражающего действия предлагаемого препарата проводили на пяти клинически здоровых коровах. Препарат вводили интрацистернально в левые доли вымени в дозе 10 мл, правые доли служили контролем (вводили 0,85% водный раствор NaCl). После введения препарата на 6, 12, 24 и 48 час учитывали состояние вымени, а также отбирали пробы молока для подсчета количества соматических клеток. Установлено, что в течение 48 часов после введения препарата, общее состояние исследуемых животных было в пределах физиологических границ. Местная температура опытных и контрольных четвертей молочной железы не была повышена; кожа вымени эластичная, безболезненная.

При исследовании проб молока на содержание соматических клеток отмечена, определенная динамика изменения уровня соматических клеток в молоке коров опытной группы. Отмечено незначительное их снижение (до 371±29,3 тыс./мл) спустя 6 часов после введения препарата, а через 12 часов после введения препарата количество соматических клеток снизилось (до 206±33,8 тыс./мл) и спустя 24 часа количество соматических клеток увеличилось до (385±48,8 тыс./мл). Восстановление первоначального уровня соматических клеток произошло через 48 часов и находилось в пределах физиологической нормы (табл. 4).

Примечание: * - р<0,05

Подсчет соматических клеток в молоке из контрольных четвертей показал, незначительные колебания соматических клеток с уменьшение их количества в первые 6 часов после введения физиологического раствора, и постепенное увеличение к 48 часам, однако данные изменения уровня соматических клеток были не достоверны.

Данные могут свидетельствовать о нормальном физиологическом колебании количества СК в молоке. Результаты опыта свидетельствуют о том, что препарат не оказывал раздражающего действия на паренхиму вымени коров.

Динамика объема пораженной конечности оценивалась онкометрическим методом. Для статистической обработки данных были использованы непараметрические методы статистики. Были рассчитаны медиана (М) и квартальный размах (QUART). Как известно, изменение объема при воспалительном процессе на фоне применения препаратов характеризует антиэксудативный эффект последних. Полученные данные приведены в таблице 5.

При оценке данных видно что, субплантарное введение каррагенина контрольной группе животных приводило к быстрому формированию отека конечности. Уже через 60 минут после инъекции флогистика объем лапы превосходил исходный уровень в среднем на 0,49 см³, что соответствует приросту объема на 42,1% (р<0,05) по сравнению с исходным показателем.

Примечание: * - р<0,05

В дальнейшем объем конечности последовательно увеличивался, достигнув максимального значения к четвертому часу наблюдения. К этому времени прирост составил 0,67 см, что соответствует увеличению объема конечности почти вдвое (р<0,05).

В условиях длительного введения исследуемый препарат ослаблял формирование отека - 35,91%.

Таким образом, в условиях профилактической аппликации исследуемого препарата животным в дозе 0,25 мл отмечено его влияние на динамику развития острого воспалительного отека, вызванного каррагенином, что свидетельствует об эффективности при остром воспалительном процессе.

Влияние препарата на локальную температуру поврежденной конечности (жаропонижающее действие)

Динамику локальной температуры поврежденной конечности проводили контактным методом, с использованием инфракрасного термометра. Данные приведены в таблице 6.

Примечание: * - р<0,05

Спустя 1 час после индукции артрита у крыс-самцов в группе Контроль наблюдалось статистически значимое увеличение локальной температуры конечности на 15%. Данный эффект сохранялся до 4-ого часа эксперимента.

Исследуемый препарат уже через 2 часа после аппликации проявил жаропонижающий эффект, что нашло отражение в статистически значимом снижении температуры поврежденной конечности на 7,8%.

Антимикробные свойства препарата проверяли методом диффузии в агар.

В качестве тест-культур использовали суточные полевые изоляты микроорганизмов, выделенные из молока больных маститом коров. Результаты проведенных исследований отражены в таблице.

Анализируя полученные результаты исследований по определению чувствительности условно-патогенной микрофлоры к предлагаемому препарату, можно отметить, что он препарат проявляет выраженную антимикробную активность в отношении изучаемых штаммов.

Для определения оптимальной терапевтической дозы препарата по принципу аналогов были сформированы три группы коров черно-пестрой породы, больных острым катаральным маститом. Больным коровам вводили интрацистернально предлагаемый препарат, в дозе 10, 15 и 20 мл, два раза в сутки, на фоне симптоматической терапии.

Использование препарата в дозе 10 мл показало наименьший лечебный эффект. Выздоровление в среднем наступало на 6,5-7,2 сутки, процент выздоровления составил 60%.

Применение препарата в дозе 15 и 20 мл показало наибольший терапевтический эффект и характеризуется сходными показателями как сроков выздоровления так и процентом выздоровевших животных (табл. 8).

В результате анализа данных по определению оптимальной терапевтической дозы, установлено, что наибольший терапевтический эффект достигнут при применения при применения препарата в дозе 15 мл при кратности введения 2 раза в сутки. Применение препарата в дозе 20 мл не показало значительного повышения лечебной эффективности и приводило к перерасходу препарата.

Результаты исследований показали, что наиболее эффективной дозой препарата, оказывающей выраженное терапевтическое действие, является доза 15 мл.

Для изучения сравнительной эффективности терапии мастита коров по принципу аналогов было сформировано две группы животных больных острым катаральным маститом: первой группе (n=15) вводили Мастомицин (содержит в качестве действующих веществ 0,015 г гентамицина сульфата, 0,020 г клиндамицина гидрохлорида и 0,05 г лидокаина гидрохлорида, в качестве вспомогательных веществ полоксамер, глицерин, спирт бензиловый, натрия гидроокись и воду дистиллированную) интрацистернальнов дозе 10 мл, 2 раза в сутки; второй группе (n=17) вводили предлагаемый препарат в дозе 15 мл, 2 раза в сутки, до выздоровления.

Терапевтическую эффективность предлагаемого препарата определяли по количеству дней лечения, срок которого устанавливали по отрицательной реакции «Кенотеста», проценту выздоровевших животных и по клиническому состоянию больных долей молочной железы.

Полученные результаты при лечении катаральной формы мастита у коров, в период лактации представлены в таблице 9.

Данные таблицы свидетельствуют о том, что в первой опытной группе, где применяли Мастомицин, произошло выздоровление у 12-ти (80,0%) и улучшение состояния у 3-х животных (20,0%). Продолжительность лечения составила в среднем 6,7 суток. При этом молоко от этих коров утилизировалось в течение трех суток, согласно инструкции по применению препарата.

В группе животных, где использовали предлагаемый препарат, произошло выздоровление у 14-ти животных (82,0%). Продолжительность лечения составила в среднем 5,8 суток. На протяжении курса лечения улучшалось общее состояние животных, уменьшались признаки воспаления, отечности и болезненности пораженных четвертей. Внешний вид секрета из вылеченных четвертей не отличался от молока здоровых коров, а исследование его на наличие мастита кенотестом дало отрицательный результат.

Таким образом, предлагаемый способ лечения острого катарального мастита с использованием предлагаемого комплексного противомаститного препарата, при интрацистернальном пути введения в дозе 15 мл, 2 раза в сутки, является более приемлемым, в сравнении в терапией мастита комплексным антибиотическим препаратом Мастомицин, что выражалось в уменьшении сроков лечения и незначительным повышением количества выздоровевших животных, а также сокращением сроков утилизации молока.

Препарат для лечения коров, больных маститами, включающий экстракт прополиса и экстракт травяного сбора, отличающийся тем, что он дополнительно содержит арабиногалактан, бишофит, диметилсульфоксид, а в качестве экстрагента смеси прополиса и травяного сбора - водно-пропиленгликолиевую смесь в соотношении воды и пропиленгликоля 1:1, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Арабиногалактан	20
Бишофит	20
Диметилсульфоксид	15
10% водно-пропиленгликолиевый экстракт
смеси прополиса и травяного сбора	остальное,

где смесь прополиса и травяного сбора содержит прополис, траву шалфея, листья эвкалипта, цветки календулы, цветки ромашки, корни солодки голой и наземную часть лапчатки кустарниковой при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Прополис	15
Трава шалфея	20
Листья эвкалипта	20
Цветки календулы	10
Цветки ромашки	10
Корни солодки голой	15
Наземная часть лапчатки кустарниковой	10