Способ получения вещества, обладающего диуретической активностью



Способ получения вещества, обладающего диуретической активностью
Способ получения вещества, обладающего диуретической активностью

Владельцы патента RU 2671408:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к способу получения средства, обладающего диуретической активностью. Способ заключается в том, что листья толокнянки обыкновенной экстрагируют 70% этиловым спиртом, осуществляя вначале две экстракции при комнатной температуре в течение 24 ч, а затем при нагревании на кипящей водяной бане в течение 30 мин; объединенное извлечение упаривают под вакуумом, смешивают с силикагелем в соотношении исходной массы сырья и сорбента 3:1 и высушивают на воздухе; высушенный порошок наносят на слой силикагеля, сформированный в виде взвеси в хлороформе, и подвергают хроматографическому разделению с использованием смесей хлороформа и этилового спирта в градиентном режиме с последующим выделением из фракций, полученных при элюировании смесью растворителей хлороформ-спирт этиловый -75:25 и 70:30, 1,3,6-тригаллоилглюкозы - вещества с диуретической активностью. Вышеописанный способ позволяет получить соединение с высокой диуретической активностью. 1 ил., 1 табл.

 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к способу получения фармацевтической субстанции растительного происхождения, обладающей диуретической активностью.

В настоящее время на фармацевтическом рынке Российской Федерации значительное количество лекарственных препаратов растительного происхождения, обладающих диуретической активностью, получают из листьев толокнянки обыкновенной [Arctostaphylos uva-ursi (L.) Spreng., сем. Вересковые - Ericaceae] и листьев брусники обыкновенной (Vaccinium vitis-idaea L., сем. Брусничные - Vacciniaceae) (1). В основном эти лекарственные препараты представлены фасованным измельченным лекарственным растительным сырьем (пачки картонные с внутренним пакетом, фильтр-пакеты и др.).

Представляется актуальным выделение веществ, обусловливающих диуретическую активность лекарственных средств растительного происхождения, для получения фармацевтических субстанций с более высокой активностью.

Считается, что диуретическое действие толокнянки обусловлено содержащимся в ней арбутином (2).

Известен способ получения стандартного образца арбутина из сухого экстракта толокнянки (3) путем двухкратной обработки водного раствора экстракта толокнянки н-бутанолом, сгущения экстракта, смешивания кубового остатка с оксидом алюминия и хроматографирования на оксиде алюминия в соотношении исходного экстракта и сорбента 1:4 при элюировании метанолом. Элюат собирают в десятикратном количестве по объему по сравнению с массой сорбента. Для кристаллизации арбутина используют смесь хлороформ-спирт 1,2:1. Для дополнительной очистки использовали активированный уголь марки ОУ-А в количестве 0,1-0,15 от массы технического арбутина к его метанольному раствору, который после добавления угля подвергают кипячению и охлаждению.

Данный способ взят за прототип изобретения.

Недостатками данного способа являются:

1) выход технического арбутина составляет 65,4%;

2) использование опасных растворителей - метанола, обладающего выраженными токсическим свойствами и хранение которого осуществляется в специально оборудованных помещениях.

В исследования на крысах показано, что арбутин вызывает достоверное увеличение диуреза с четвертого по шестой дни введения при внутрижелудочном введении крысам в дозе 5 мг/кг. При повышении дозы вещества в три раза суточное увеличение мочи увеличивалось уже с первого дня введения (4, 5).

Целью изобретения является выделение из толокнянки обыкновенной вещества, обладающего диуретической активностью.

Заявляемый способ получения вещества с диуретической активностью реализуется следующим образом: листья толокнянки обыкновенной экстрагируют 70% этиловым спиртом, осуществляя вначале две экстракции при комнатной температуре в течение 24 ч, а затем при нагревании на кипящей водяной бане в течение 30 мин; объединенное извлечение упаривают под вакуумом, смешивают с силикагелем в соотношении исходной массы сырья и сорбента 3:1 и высушивают на воздухе; высушенный порошок наносят на слой силикагеля, сформированный в виде взвеси в хлороформе и подвергают хроматографическому разделению с использованием смесей хлороформа и этилового спирта в градиентном режиме с последующим выделением из фракций, полученных при элюировании смесью растворителей хлороформ-спирт этиловый (75:25 и 70:30), 1,3,6-тригаллоилглюкозы - вещества с диуретической активностью.

Контроль за разделением веществ осуществляли с помощью ТСХ-анализа на пластинках «Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ» в системах хлороформ-этанол (9:1), хлороформ-этанол-вода (26:16:3), а также н-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода (4:1:2). Вещество, выделенное из фракций, полученных при элюировании смесью растворителей хлороформ-спирт этиловый 95% (75:25 и 70:30), было идентифицировано с помощью комплекса физико-химических методов (тонкослойная хроматография, УФ-спектроскопия, ЯМР-спектроскопия, масс-спектрометрия) как 1,3,6-тригаллоилглюкоза. Выход этого соединения составил 3,5% от массы воздушно-сухого сырья (или 80,0% от содержания 1,3,6-тригаллоилглюкозы в сырье).

Было проведено исследование влияния 1,3,6-тригаллоилглюкозы на выделительную функцию почек у крыс в сравнении с арбутином и отваром из листьев толокнянки (см. табл.1 в Приложении 1). Изучение диуретической активности проводили на белых беспородных крысах обоего пола массой 180-220 г. Животные содержались в виварии на обычном рационе при свободном доступе к воде. За день до опыта крысы получали внутрижелудочно водную нагрузку в объеме 3% от массы тела. В день эксперимента животным контрольной группы вводилась водная нагрузка; опытным группам при помощи внутрижелудочного зонда вводился лекарственный препарат в идентичном объеме. Отвар из листьев толокнянки вводили в дозе 100 мг/кг, водные растворы арбутина и 1,3,6-тригаллоилглюкозы - в дозе 10 мг вещества на 1 кг массы животных. В качестве препарата сравнения использовали гипотиазид (20 мг/кг). В исследовании было 5 групп животных (по 10 крыс в каждой).

Животные помещались в обменные клетки на 24 часа. По истечении 4 и 24 ч собранная моча анализировалась и подвергалась исследованию (6). Определяли экскрецию воды, регистрировали концентрацию натрия и калия, креатинина.

В результате исследования диуретической и салуретической активности получено, что отвар толокнянки в дозе 100 мкл/кг и арбутин в дозе 10 мг/кг при однократном внутрижелудочном введении за 4 и 24 ч не вызывали достоверных изменений показателей экскреторной функции почек (см. табл.1 в Приложении 1). 1,3,6-тригаллоилглюкоза при однократном внутрижелудочном введении в дозе 10 мг/кг в 4-часовом эксперименте способствовала достоверному росту диуреза (на 34% по сравнению с контрольной группой) и натрийуреза (на 37%) преимущественно за счет канальцевого компонента, за 24 ч она значительно увеличивала почечную экскрецию воды (на 75%), натрия (на 46%), калия (на 36%) и креатинина (на 38%), как за счет увеличения клубочковой фильтрации, так и за счет уменьшения канальцевой реабсорбции (см. табл.1 в Приложении 1). Полученные результаты суточного эксперимента сопоставимы с данными по влиянию на экскреторную функцию почек для гипотиазида.

Заявляемый способ иллюстрируется следующим примером.

100 г воздушно-сухих листьев толокнянки обыкновенной экстрагировали 70% этиловым спиртом, осуществляя вначале две экстракции при комнатной температуре в течение 24 ч, а затем при нагревании на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Объединенное водно-спиртовое извлечение упаривали под вакуумом до объема 50 мл, смешивали с 30 г силикагеля L 40/100 и высушивали. Высушенный порошок (сухой экстракт + силикагель) наносили на слой силикагеля (диаметр - 8 см, высота - 5 см), сформированный в виде взвеси в хлороформе. Хроматографическую колонку элюировали хлороформом и смесью хлороформ-этанол в различных соотношениях (99:1; 98:2; 97:3; 95:5; 93:7; 90:10; 85:15; 80:20; 70:30, 60:40, 50:50, 40:60, 30:70). Контроль за разделением веществ осуществляли с помощью ТСХ-анализа на пластинках «Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ» в системах хлороформ-этанол (9:1), хлороформ-этанол-вода (26:16:3), а также н-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода (4:1:2).

Из фракций (96-99), полученных при элюировании смесью растворителей хлороформ-спирт этиловый 95% (75:25 и 70:30), получали технический целевой продукт: светло-желтое аморфное вещество состава С27Н24О18 с т.пл. 165-167°C (водный спирт). Масс-спектр (ESI-MS, 180°C, m/z): М+ 659 [636+Na]+. УФ-спектр (λmax EtOH, нм): 220, 280 нм. 1Н-ЯМР-спектр (300 МГц, ДМСО-d6, δ, м.д., J/Гц): 8,80-9.35 (м, 9Н девяти фенольных ОН-групп трех молекул галловой кислоты), 6.99 (с, 2Н галловой кислоты при С-2 и С-6), 6.85 (с, 2Н галловой кислоты при С-21 и С-61), 6.78 (с, 2Н галловой кислоты при С-211 и С-611), 6.13 (д, 7 Гц, Н-1 глюкозы), 3.5-5.9 (м, 6Н глюкозы).

Для изучения строения выделенного вещества были использованы метод тонкослойной хроматографии и спектральные методы, позволяющие установить его структуру как 1,3,6-тригаллоилглюкоза. Структурная формула 1,3,6-тригаллоилглюкозы представлена на чертеже в Приложении 2.

Выход целевого продукта - 1,3,6-тригаллоиглюкозы - составил 3,5 г или 3,50% от массы воздушно-сухого сырья.

Таким образом, заявляемый способ позволяет получить из листьев толокнянки вещество - 1,3,6-тригаллоилглюкозу, которая обладает более выраженной диуретической активностью по сравнению с арбутином. Однократное внутрижелудочное ее введение крысам в 4-часовом эксперименте вызывало достоверное увеличение диуреза и натрийуреза, в 24-часовом - диуреза, натрийуреза, калийуреза и креатининуреза в отличие от арбутина, влияние которого на экскреторную функцию почек крыс не отличалось от контроля. К преимуществам способа можно отнести отсутствие необходимости в применении метанола, требующего особых правил обращения.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ

1. Государственный реестр лекарственных средств [Электронный ресурс]. Электрон. дан. 2017. Режим доступа: http://grls.rosminzdrav.ru/grls.aspx.

2. Государственная фармакопея СССР. - Одиннадцатое издание (Выпуск 1). - М.: Медицина, 1989. - Т. 2. - 399 с.

3. Нагаслаева Л.А. Разработка технологии производства экстракта толокнянки сухого и создание лекарственной формы на его основе, методы их стандартизации: автореф. дис… канд. фарм. наук: 15.00.01; 15.00.02 / Л.А. Нагаслаева; Научно-исследовательский институт фармации. - М.: Полиграфпредприятие Россельхозакадемии, 1994. - 21 с.

4. Волобой, Н.Л. Особенности мочегонной активности арбутина и гидрохинона / Н.Л. Волобой, И.В. Смирнов, А.А. Бондарев // Сибирский медицинский журнал. - 2012. Т. 27, №3. - С. 131-134.

5. Волобой, Н.Л. Сравнение мочегонной активности арбутина и гидрохинона при различных способах введения в экспериментах на крысах / Н.Л. Волобой, И.В. Смирнов, А.А. Бондарев // Нефрология. - 2012. - Т. 16, №4. - С. 84-87.

6. Зайцева, Е.Н. Способ получения диуреза у лабораторных животных / Е.Н. Зайцева // Патент России на изобретение №2494703. - 2013. - Бюл. №28. - 11 с.

Способ получения вещества, обладающего диуретической активностью, отличающийся тем, что листья толокнянки обыкновенной экстрагируют 70% этиловым спиртом, осуществляя вначале две экстракции при комнатной температуре в течение 24 ч, а затем при нагревании на кипящей водяной бане в течение 30 мин; объединенное извлечение упаривают под вакуумом, смешивают с силикагелем в соотношении исходной массы сырья и сорбента 3:1 и высушивают на воздухе; высушенный порошок наносят на слой силикагеля, сформированный в виде взвеси в хлороформе, и подвергают хроматографическому разделению с использованием смесей хлороформа и этилового спирта в градиентном режиме с последующим выделением из фракций, полученных при элюировании смесью растворителей хлороформ-спирт этиловый (75:25 и 70:30), 1,3,6-тригаллоилглюкозы - вещества с диуретической активностью.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству, обладающему антимикотическим действием. Средство, обладающее антимикотическим действием, содержащее компоненты, извлеченные экстракцией из воздушно-высушенных цветков трехреберника продырявленного в соотношении сырье:экстрагент - 1:10, с использованием в качестве экстрагента водно-спиртового раствора с концентрацией этанола 70-95% путем экстрагирования с обратным холодильником.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего антигипоксической активностью. Способ получения средства, обладающего антигипоксической активностью, для этого измельченный растительный материал, состоящий из серпухи васильковой травы, девясила высокого корневищ с корнями, эхинацеи пурпурной травы, шиповника плодов, бадана толстолистного листьев черных, взятые в определенном соотношении, экстрагируют трехкратно при определенных условиях, далее объединенные водно-спиртовые извлечения фильтруют, упаривают, очищают сепарированием, доупаривают, затем высушивают в вакуум-сушильном аппарате.

Изобретение относится к способу переработки природного мумиесодержащего сырья, а именно к способу получения пропиленгликолевого экстракта мумие. Способ получения пропиленгликолевого экстракта мумие, включающий экстракцию очищенного мумиесодержащего сырья экстрагентом, представляющим собой пропиленгликоль или смесь пропиленгликоля с водой, при определенных условиях, с последующей фильтрацией экстракта.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения вещества, обладающего антибактериальной и противогрибковой активностью.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения меланиновых веществ, получаемых из отходов маслоэкстракционного производства - лузги подсолнечника.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой способ выделения биологически активных проантоцианидинов, характеризующийся тем, что измельченные листья голубики (Vaccinium uliginosum) экстрагируют метанолом в течение 3-х часов при температуре 30-35°С, упаривают спиртовой раствор до 1/10 первоначального объема, разбавляют 4-кратным количеством воды и экстрагируют последовательно хлороформом, эфиром и этилацетатом, после чего полученный водный раствор упаривают и хроматографируют на колонке с силикагелем с размером частиц 0,040-0,063 мм, используя в качестве элюента смесь хлористого метилена с метанолом, взятых в соотношении 1:1, и выделяют биологически активную фракцию с Rf 0,29.
Изобретение относится к производству сухих экстрактов из растительного сырья, обладающих высокой пищевой ценностью и высокой биологической активностью, предназначенных для использования в пищевой, фармацевтической, косметической и других отраслях промышленности.
Изобретение относится к производству сухих экстрактов из растительного сырья, обладающих высокой пищевой ценностью и высокой биологической активностью, предназначенных для использования в пищевой, фармацевтической, косметической и других отраслях промышленности.

Изобретение относится к фармацевтической, косметической и пищевой промышленности и касается способа переработки морских водорослей. Способ переработки морских бурых водорослей, включающий дробление сырья, гомогенизацию смеси сырья в растворе с последующим извлечением водорастворимых биологически активных веществ за счет фильтрации и сушки, при этом сырье предварительно промывают водой, насыщенной озоном, гомогенизацию сырья проводят в растворе, представляющем собой воду с хлористым кальцием в концентрации его в растворе от 0,25 до 1%, дополнительное измельчение дробленых водорослей проводят в смеси сырья в растворе при оборотах роторно-пульсационного гомогенизатора, составляющих от 10 до 50% максимальных оборотов двигателя, при этом в ходе предварительной гомогенизации осуществляют порционную загрузку в гомогенизатор в пределах от 10 до 30% от общего количества смеси, после завершения загрузки и предварительной гомогенизации увеличивают частоту вращения роторно-пульсационного гомогенизатора и гомогенизируют смесь до 5 часов при температуре смеси не выше 75°С, при этом после стадии гомогенизации проводят криодеструкцию гомогената при температуре от минус 18 до минус 20 градусов в течение 20-48 часов, для чего гомогенат размещают в емкости от 0,5 до 10 л, после криодеструкции замороженный гомогенат оттаивают, после расслоения гомогената отделяют жидкость от осадка, осадок фильтруют под давлением и полученную жидкость смешивают с жидкостью, полученной на предыдущей стадии, жидкую фазу концентрируют на мембранной ячейке, удаляют хлористый кальций, осадок и жидкость сушат.

Изобретение относится к полипептидам, которые действуют как модуляторы активности комплемента, фармацевтическим композициям, содержащим указанные полипептиды, и к способам применения таких модуляторов в качестве терапевтических средств, для лечения связанных с комплементом заболеваний, например, таких как воспалительное заболевание, рана, повреждение.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению формулы (I) или к его фармацевтически приемлемой соли, где R1 выбран из группы, состоящей из циано, галогена и метила; R2 выбран из группы, состоящей из водорода и галогена; R3 выбран из группы, состоящей из галогена и метила; R4 выбран из группы, состоящей из водорода и галогена; R5 и R6 независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и С1-С6-алкила; R7 и R8 независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и С1-С4-алкила; R9 выбран из группы, состоящей из C1-С6-алкила и C1-С6-алкокси; и X выбран из связи СН2 и О.

Изобретение относится к медицине, оздоровлению, способствующему избавлению от различных болезней. Проводят закисление внутренней среды последовательно по этапам: «очищение желудочно-кишечного тракта» (ЖКТ), «очищение печени и желчного пузыря», «очищение почек».
Изобретение относится к медицине, а именно к урологии и физиотерапии, и может быть использовано для профилактики рубцово-склеротических осложнений после оперативного лечения на верхних мочевых путях.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения лекарственного средства на основе пептидов предстательной железы для лечения заболеваний мочеполовой системы мужчин.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новому производному бензоазепина формулы (I) или к его фармакологически приемлемой соли, где R1 представляет собой гидроксильную группу, низшую алкоксигруппу или , где А отсутствует или представляет собой низшую алкиленовую группу, которая может быть замещена низшей алкильной группой; R6 представляет собой атом водорода или низшую алкильную группу; R7 представляет собой атом водорода, гидроксильную группу, пятичленную ароматическую гетероциклическую группу, содержащую 3 гетероатома, выбранных из азота и кислорода, которая может быть замещена низшей алкильной группой, пятичленную неароматическую гетероциклическую группу, содержащую один атом азота, которая может быть замещена оксогруппой, или карбамоильную группу, которая может быть замещена низшей алкильной группой; R2 представляет собой атом водорода или низшую алкильную группу; R3 представляет собой низшую алкильную группу, которая может быть замещена 1-3 атомами фтора, или атом галогена; R4 представляет собой низшую алкоксигруппу, которая может быть замещена 1-3 атомами галогена, пятичленную ароматическую моноциклическую гетероциклическую группу или пятичленную неароматическую моноциклическую гетероциклическую группу (при условии, что каждая из этих гетероциклических групп содержит один атом азота, два атома азота, или один атом азота и один атом кислорода в кольце, и может содержать низшую алкильную группу); и R5 представляет собой атом водорода, низшую алкильную группу или атом галогена.

Изобретение относится к соединению формулы I: или его фармацевтически приемлемые соль или оптический изомер, где в формуле I: n выбран из 1-7, R1 обозначает С3-С7 гидрокарбил, который может быть незамещенным или необязательно замещенным галогеном, алкокси, алкоксикарбонилом, гетероциклилом или арилом; R2 обозначает арил или гетероарил, содержащий один или более гетероатомов, выбранных из N, О или S, который может быть незамещенным или необязательно замещенным одним или более заместителями из галогена, фенила, -OR6, -SR6, -NR6R7, -NHCOR6, -CONR6R7, -CN, -NO2, -COOR6, -CF3 или линейного или разветвленного С1-С4 гидрокарбила, R6 и R7 могут обозначать атом водорода или линейный или разветвленный С1-С4 гидрокарбил; R3 обозначает гидроксил, галоген, алкокси или ацилокси, при этом алкокси или ацилокси могут быть незамещенными или необязательно замещенными галогеном, гидроксилом, алкокси, гидрокарбилом, алкоксигидрокарбилом, гетероциклилом или арилом; R4 и R5 могут быть или могут отсутствовать, и, независимо, могут означать, без ограничения, заместитель, такой как галоген, гидроксил, алкокси, гидрокарбил, алкоксигидрокарбил, гетероциклил или арил, когда эти радикалы содержатся.

Изобретение относится к соединению общей формулы (I), обладающему высокой антагонистической активностью по отношению к S1P2 человека, и может применяться для приготовления лекарственного средства для лечения заболевания, опосредованного S1P2, такого как заболевание, обусловленное сужением сосудов, фиброз и респираторное заболевание.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композиции для профилактики заболеваний мочевыводящих путей. Композиция для профилактики заболеваний мочевыводящих путей, содержащая экстракт плодов клюквы крупноплодной (Vaccinium macrocarpon), экстракт листьев толокнянки обыкновенной (Arctostaphylos uva-ursi), аскорбиновую кислоту, взятые в определенном количестве.

Изобретение относится к медицине, а именно урологии. Вводят катетер в уретру.

Изобретение относится к фармацевтической композиции, а именно к капсуле для лечения нарушений, ассоциированных с инфекцией Helicobacter pylori (H. pylori).

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к способу получения средства, обладающего диуретической активностью. Способ заключается в том, что листья толокнянки обыкновенной экстрагируют 70 этиловым спиртом, осуществляя вначале две экстракции при комнатной температуре в течение 24 ч, а затем при нагревании на кипящей водяной бане в течение 30 мин; объединенное извлечение упаривают под вакуумом, смешивают с силикагелем в соотношении исходной массы сырья и сорбента 3:1 и высушивают на воздухе; высушенный порошок наносят на слой силикагеля, сформированный в виде взвеси в хлороформе, и подвергают хроматографическому разделению с использованием смесей хлороформа и этилового спирта в градиентном режиме с последующим выделением из фракций, полученных при элюировании смесью растворителей хлороформ-спирт этиловый -75:25 и 70:30, 1,3,6-тригаллоилглюкозы - вещества с диуретической активностью. Вышеописанный способ позволяет получить соединение с высокой диуретической активностью. 1 ил., 1 табл.

Наверх