Способ подавления воспалительной реакции в тканях пародонта в эксперименте

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для подавления воспалительной реакции в тканях пародонта в эксперименте. Для этого в десну вводят макрофаги, поляризованные in vitro в регуляторный фенотип М2, при этом суспензия содержит 250 тыс. макрофагов в 100 мкл среды. Способ позволяет достоверно снизить коэффициент миграции лейкоцитов (КМЛ) на поверхность десны при экспериментальном ЛПС-индуцированном воспалении на фоне введения макрофагов регуляторного фенотипа М2 в десну у мышей. 1 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, клеточным биотехнологиям, и может быть использовано для эффективного ограничения воспаления в тканях пародонта с последующим применением в клинической практике.

В патогенезе пародонтита важную роль играют токсическое действие бактерий и ответная иммунная реакция. Патогенность пародонто-специфических бактерий, таких как Porphiromonas gingivalis, связана с липополисахаридом (ЛПС) мембран этих бактерий. ЛПС активирует реакции системы комплимента и воспалительную активность иммунных клеток, и прежде всего - макрофагов. Кроме того, пародонто-специфические бактерии выделяют разные токсические вещества, такие как H2S, а также гидролитические и протеолитические ферменты, включая коллагеназы. Эти ферменты разрушают ткани пародонта и благодаря этому, еще больше активируют моноциты и остеокласты (макрофаги костной ткани), которые начинают продуцировать собственные тканевые коллагеназы [1]. Это приводит к формированию порочного круга, который еще больше усиливает воспаление и повреждение окружающих тканей.

Таким образом, бактериальная инфекция и ответная чрезмерная воспалительная реакция иммунных клеток играют ключевую роль в патогенезе пародонтита. В связи с этим, разработка новых способов эффективного ограничения воспаления является одной из приоритетных задач современной стоматологии. В последние годы большое количество исследований посвящено макрофагам, а именно, эффектам их последовательной поляризации в провоспалительный (M1) и антивоспалительный (М2) фенотипы в ходе развития воспаления [2].

Макрофаги являются ключевыми элементами воспалительной реакции. Ml макрофаги продуцируют много провоспалительных цитокинов, протеаз, агрессивных форм кислорода и азота. Эти факторы обладают бактериостатическим действием, но в больших концентрациях могут способствовать деструкции тканей в зоне воспаления. М2 макрофаги продуцируют много антивоспалительных цитокинов и, в отличие от M1 фенотипа, способствуют ограничению воспаления, репарации и ремоделированию поврежденной ткани [2]. На основании многочисленных экспериментальных данных было высказано предположение о возможности разработки технологии управления воспалительной реакцией различной этиологии путем направленного воздействия на процесс поляризации макрофагов. В частности, учитывая антивоспалительный, ремоделирующий и ангиогенный эффекты М2 макрофагов, была сформулирована гипотеза о том, что сдвиг М1/М2 баланса макрофагов в сторону увеличения количества М2 макрофагов в зоне воспаления будет способствовать эффективному подавлению воспалительной реакции [3].

В настоящее время существует несколько стратегий направленного воздействия на М1/М2 баланс макрофагов [3, 4]:

- путем контролируемого высвобождения молекул, воздействующих на поляризацию макрофагов;

- путем подавления экспрессии провоспалительных и усиления экспрессии антивоспалительных генов макрофагов;

- путем использования физических и механических стимулов с целью направленной поляризации макрофагов in situ;

- путем клеточной терапии - при помощи введения макрофагов.

Наиболее близким к заявляемому является способ подавления воспалительной реакции при заживлении ран путем введения суспензии макрофагов [5, 6]. Суспензию макрофагов вводят в рану разными способами: на сухой подложке (бинт, неадгезивная сетка, мембрана и др., на влажной подложке (крем, гель, паста и др.), на твердом биоматериале, пригодном к имплантации, на гелевом биоматериале, пригодном к имплантации, который затвердевает при температуре тела и др. (US 9132154 В2 от 15.09.2015) [7]. Недостатком данного подхода является отсутствие поляризации макрофагов в М2 регуляторный фенотип.

Задачей изобретения является повышение эффективности антивоспалительной терапии при бактериальном инфицировании тканей пародонта.

Технический результат изобретения заключается в достоверном снижении коэффициента миграции лейкоцитов (КМЛ) на поверхность десны при экспериментальном ЛПС-индуцированном воспалении на фоне введения макрофагов регуляторного фенотипа М2 в десну у мышей.

Этот результат достигается за счет того, что в десну вводят макрофаги, поляризованные in vitro в регуляторный фенотип М2, при этом суспензия содержит 250 тыс. макрофагов в 100 мкл среды.

Пародонтит является воспалительным заболеванием, поражающим окружающие зуб ткани десны (пародонт). Лечение пародонтита выполняется терапевтическими или хирургическими методами. Консервативное (терапевтическое) лечение состоит в проведении общих и местных лечебных мероприятий. При проведении местной антивоспалительной терапии лекарственные препараты применяются в виде аппликаций, ирригаций, инъекций, ванночек, лечебных повязок на десну или в пародонтальные карманы. Предложенный способ подавления воспалительной реакции в тканях пародонта является видом местной антивоспалительной терапии и поэтому осуществляется путем введения антивоспалительного препарата в десну.

Как отмечено выше, в ходе развития воспалительной реакции макрофаги последовательно поляризуются в провоспалительный (M1) и антивоспалительный (М2) фенотипы. Как следует из названия данных подтипов макрофагов, способностью к ограничению воспаления, репарации и ремоделированию поврежденной ткани обладают макрофаги регуляторного фенотипа М2. Именно поэтому современные технологии управления воспалительной реакцией различной этиологии основываются на сдвиге М1/М2 баланса макрофагов в сторону увеличения количества М2 макрофагов в зоне воспаления.

Были проведены эксперименты по выявлению эффективной концентрации М2 макрофагов в суспензии, которые показали, что при концентрации М2 макрофагов более 250 тыс.в 100 мкл среды наблюдается агрегация (склеивание) макрофагов и их перепрограммирование на M1 фенотип. Другими словами, 250 тыс. клеток в 100 мкл среды - это максимально возможная концентрация макрофагов, при которой они сохраняют М2 фенотип.

Способ осуществляется следующим образом

Макрофаги выделяют, например, из перитонеальной жидкости мышей по методике Zhang et al. [8]. Мышей наркотизируют, например, хлоралгидратом (32.5 нг/100 г массы тела, в/б). Перитонеальные макрофаги выделяют из перитонеального смыва с помощью центрифугирования при 1000 об/мин, 4 мин. Супернатант отделяют, а осадок ресуспендируют в среде RPMI-1640 с 10% сывороткой со 100 U/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина. После выделения макрофаги размещают в плоскодонные лунки 48-милуночных культуральных планшетов в среде RPMI-1640 с 10% сывороткой (FBS) со 100 U/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина при 37С и 5% СО2. Макрофаги распределяют из расчета 0.5 млн клеток на лунку в 0.5 мл среды.

Для in vitro поляризации макрофагов в М2 фенотип используют, например, «цитокиновую» биотехнологию [9]. При поляризации макрофагов в М2 фенотип с помощью «цитокиновой» модели, макрофаги культивируют в течение 36 часов в среде с нормальным содержанием сыворотки (10%) и добавлением в среду интерлейкина-4 (IL-4) 20 нг/мл.

Для снятия макрофагов со дна культуральной лунки используют, например, трипсин [10]. Из лунок с макрофагами удаляют старую среду и затем добавляют по 1 мл 0.25% раствора трипсина с 0.03% ЭДТА. Плашки инкубируют при 37°С в течение 3 мин. Затем плашки встряхивают. Дальше в каждую лунку добавляют по 1 мл среды и плашку встряхивают. Далее жидкость из лунки сливают в пробирку и добавляют в лунку 1 мл среды, еще раз встряхивают и сливают жидкость в ту же пробирку. Пробирки центрифугируют в течение 5 мин при 1000 оборотах в минуту. После этого надосадочную жидкость удаляют из пробирки, а к осадку макрофагов добавляют 1 мл среды и осадок пипетируют до получения гомогенной суспензии макрофагов. С помощью среды RPMI-1640 доводят концентрацию макрофагов до 1 млн клеток/1 мл среды (Раствор А). Из раствора А готовят суспензию 250 тысяч макрофагов в 100 мкл PBS (Раствор Б). Суспензию макрофагов вводят в ткани пародонта, например, путем инъекции. Количество введенных макрофагов должно быть 250 тыс. в 100 мкл PBS.

Пример

Экспериментальные животные. Работа была проведена на 3-х месячных мышах самцах линии C57BL/6J весом 22-24 г. Мыши были получены в питомнике животных «Андреевка».

ЛПС-индуцированное воспаление. Воспалительный компонент пародонтита воспроизводили с помощью ЛПС, выделенного от Porphiromonas gingivalis (Sigma, США) [11]. Животных наркотизировали эфиром и вкалывали ЛПС в дозе 40 мкг справа в верхнюю челюсть между первым и вторым малярами. Для контроля слева в верхнюю челюсть между первым и вторым малярами вкалывали PBS (физиологический раствор). Через 96 часов оценивали локальное воспаление с помощью функционального маркера - миграции лейкоцитов на поверхность десны [12]. Для этого мышь наркотизировали эфиром. Ватным тампоном брали мазок с десны и наносили на стекло. Дальше стекло помещали в закрепитель (спирт) на 5 минут и после высушивали. Затем стекло помещали в краситель Романовского-Гимзе на 30 мин. После окрашивания препарат промывали и высушивали. Подсчитывали количество лейкоцитов и эпителиальных клеток в 5 разных полях зрения. КМЛ выражали как отношение лейкоцитов к числу эпителиальных клеток.

Выделение и культивирование макрофагов. Макрофаги выделяли из перитонеальной жидкости мышей по методике Zhang et al. [8]. Мышей наркотизировали хлоралгидратом (32.5 нг/100 г массы тела, в/б). Перитонеальные макрофаги выделяли из перитонеального смыва с помощью центрифугирования при 1000 об/мин, 4 мин. Супернатант отделяли, а осадок ресуспендировали в среде RPMI-1640 с 10% сывороткой с 100 U/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина. После выделения, макрофаги размещали в плоскодонные лунки 48-ми луночных культуральных планшетов в среде RPMI-1640 с 10% сывороткой (FBS) со 100 U/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина при 37°С и 5% СО2. Макрофаги распределяли из расчета 0.5 млн. клеток на лунку в 0.5 мл среды.

Поляризация макрофагов в регуляторные фенотипы M1 и М2. Д ля in vitro репрограммирования макрофагов была использована «цитокиновая» биотехнология [9]. При репрограммировании макрофагов с помощью «цитокиновой» модели, макрофаги культивировали в течение 36 часов в среде с нормальным содержанием сыворотки (10%) и добавлением в среду 20 нг/мл IFN-γ для получения M1 фенотипа или интерлейкина-4 (IL-4) 20 нг/мл для получения М2 фенотипа. Нерепрограммированные макрофаги имели М0 фенотип, они культивировались 36 часов в нормальных условиях 10% сыворотки без добавления репрограммирующих факторов (IL-4 или IFN-γ).

Были сформированы 3 группы макрофагов:

- группа «М0» - макрофаги, которые культивировались в стандартных условиях с 10% FBS в течение 36 часов. Макрофаги этой группы использовали в качестве контроля.

- группа «М1-цит» - макрофаги, которые культивировались 36 часов при 10% FBS с добавлением IFN-γ в концентрации 20 нг/мл.

- группа «М2-цит» - макрофаги, которые культивировались 36 часов при 10% FBS с добавлением IL-4 в концентрации 20 нг/мл.

Снятие макрофагов с лунки и введение в десну. Для снятия макрофагов с дна культуральной лунки использовали трипсин [10]. Из лунок с макрофагами удаляли старую среду и затем добавляли по 1 мл 0.25% раствора трипсина с 0.03% ЭДТА. Плашки инкубировали при 37°С в течение 3 мин. Затем плашки встряхивали. Дальше в каждую лунку, добавляли по 1 мл среды и плашку встряхивали. Далее жидкость из лунки сливали в пробирку и добавляли в лунку 1 мл среды, еще раз встряхивали и сливали жидкость в ту же пробирку. Пробирки центрифугировали в течение 5 мин при 1000 оборотах в минуту. После этого надосадочную жидкость удаляли из пробирки, а к осадку макрофагов добавляли 1 мл среды и пипетировали до получения гомогенной суспензии макрофагов. С помощью среды RPMI-1640 доводили концентрацию макрофагов до 1 млн. клеток/1 мл среды (Раствор А). Из раствора А готовили суспензию 250 тысяч макрофагов в 100 мкл PBS (Раствор Б). После введения в левую десну ЛПС 40 мкг (для инициации воспаления), через 24 ч вкалывалось 250 тысяч макрофагов в 100 мкл PBS. Были сформированы 6 групп мышей по 10 мышей в каждой:

- «Контроль» - мыши, которым не вводили ни ЛПС, ни макрофаги (интактные мыши).

- «ЛПС» - мыши, которым вводили ЛПС.

- «PBS» - мыши, которым вводили PBS.

- «ЛПС+М0» - мыши, которым вводили ЛПС, а через 24 часа М0 макрофаги.

- «ЛПС+M1-цит» - мыши, которым вводили ЛПС, а через 24 часа М1-цит макрофаги.

- «ЛПС+М2-цит» - мыши, которым вводили ЛПС, а через 24 часа М2-цит макрофаги.

Статистический анализ проводили с помощью программы Statistica 8.0 (Statsoft). Данные представлены в виде средних значений полученных показателей (М) и их ошибок (±m). Вероятность ошибки р<0.05 оценивалась как значимая, р<0.01 - очень значимая и р<0.001 - максимально значимая.

Результаты оценки миграции лейкоцитов на поверхность десны в контроле, при экспериментальном пародонтите и при введении экзогенных макрофагов в зону воспаления представлены в Таблице 1.

КМЛ - отношение лейкоцитов к эпителиальным клеткам в отпечатке с десны.

Значимость различий:

а - р<0.01 между группами «контроль» и «ЛПС»,

б - р<0.01 между группами «ЛПС» и «ЛПС+М0»,

в - р<0.01 между группами «ЛПС+М1-цит» и «ЛПС+М0»,

г - р<0.01 между группами «ЛПС+М2-цит» и «ЛПС+М0».

Видно, что до введения ЛПС в десну, лейкоциты практически не обнаруживались на поверхности десны и коэффициент миграции был близок к нулю. Такая же картина наблюдалась через 96 часов в месте введения PBS (данные в таблице не представлены). Это означает, что сама процедура прокола десны и введения «носителя» не вызывают воспаления.

Через 96 часов после введения пародонто-специфического ЛПС, отмечалась миграция лейкоцитов на поверхность десны мышей с коэффициентом миграции 0.21+0.02. Этот процесс характеризует воспалительную реакцию при экспериментальном пародонтите.

Дальше данные таблицы показывают, что после введения в область воспаления перепрограммированных М0 макрофагов КМЛ увеличился. С большой вероятностью это связано с тем, что в этом случае на поверхность десны также выходят и введенные М0 макрофаги, которые под микроскопом подсчитываются так же, как лейкоциты. Другими словами, при световой микроскопии при подсчете мигрировавших лейкоцитов для определения КМЛ нет возможности различить вышедшие в область воспаления собственные лейкоциты мыши и экзогенные макрофаги, введенные в десну. Это обстоятельство делает целесообразным использовать группу «ЛПС+М0» в качестве группы сравнения при оценке эффектов M1 и М2 макрофагов. Такой подход является допустимым, поскольку во всех группах с введенными макрофагами вводилось одно и тоже количество макрофагов, и соответственно на показатель воспаления могла влиять лишь функциональная активность введенных макрофагов. КМЛ в группе «ЛПС+М0» составлял 0.53+0.04. Именно это значение мы использовали как значение сравнения при оценке про/анти-воспалительного действия M1 и М2 макрофагов, соответственно.

Макрофаги, репрограммированные на M1 фенотип с помощью «цитокиновой» технологии, достоверно увеличивали воспаление в десне по КМЛ. Напротив, макрофаги, репрограммированные на М2 фенотип с помощью «цитокиновой» технологии, достоверно снижали воспаление в десне (Таблица 1).

Полученные результаты позволяют сделать два важных вывода:

- репрограммированные на M1 фенотип макрофаги увеличивали воспаление, индуцированное пародонто-специфическим ЛПС.

- репрограммированные на М2 фенотип макрофаги снижали воспаление, индуцированное пародонто-специфическим ЛПС.

Эти выводы хорошо согласуются с представлениями, о том, что M1 фенотип проявляет выраженные провоспалительные свойства, а М2 - ограничивает воспаление и участвует в репарации и ремоделировании поврежденных тканей.

Литература

1. Hansen Н.В. Role of Matrix Metalloproteinases in human periodontal diseases. J. Periodontol. 1993. Vol. 3: pp. 474-483.

2. Martinez F.O., Sica A., Mantovani A., Locati M. Macrophage activation and polarization. Front Biosci. 2008. Vol. 1(13): pp. 453-461.

3. Alvarez M.M. et al. Delivery strategies to control inflammatory response: Modulating M1-M2 polarization in tissue engineering applications. J. Control. Release. 2016. Vol. 240: pp. 349-363.

4. Lee S. et al. Macrophage-based cell therapies: The long and winding road. J. Control. Release. 2016. Vol. 240: pp. 527-540.

5. Zuloff-Shani A. et al. Hard to heal pressure ulcers (stage III-IV): Efficacy of injected activated macrophage suspension (AMS) as compared with standard of care (SOC) treatment controlled trial. Arch. Gerontol. Geriatr. 2010. Vol. 51(3): pp. 268-272

6. Zuloff-Shani, A. et al. Macrophage suspensions prepared from a blood unit for treatment of refractory human ulcers. Transfusion and Apheresis Science. 2004. Vol. 30: pp. 163-167

7. Патент США "Activated Leukocyte Composition And Uses For Wound Healing" (русс. «Активированные лейкоциты и их использование для заживления ран»), US 9132154 В2 от 15.09.2015

8. Zhang Xia, Goncalves Ricardo, Mosser David M. The Isolation and Characterization of Murine Macrophages. Curr Protoc Immunol. 2008; CHAPTER: Unit-14.1.

9. Лямина С.В., Круглов С.В., Веденикин Т.Ю. Бородовицына О.А., Суворова И.А., Шимшелашвили Ш.Л., Малышев И.Ю. Альтернативное репрограммирование М1/М2 фенотипа перитонеальных макрофагов мышей in vitro с помощью интерферона гамма и интерлейкина 4. Клеточные технологии в биологии и медицине, 2011, №4 (декабрь), стр. 235-242.

10. Rey-Giraud F., Hafher М., Ries С.Н. In Vitro Generation of Monocyte-Derived Macrophages under Serum-Free Conditions Improves Their Tumor Promoting Functions. PLOSone. 2012; 7(8): e42656.

11. Jiang H., Chen W., Zhu G., Zhang L., Tucker В., Hao L., Feng S., Ci H., Ma J., Wang L., Stashenko P., Li Y.P. RNAi-mediated silencing of Atp6i and Atp6i haploinsufficiency prevents both bone loss and inflammation in a mouse model of periodontal disease. PLoS One. 2013. Vol. 8(4): e58599.

12. Кузнецов E.B., Царев B.H. Микробная флора полости рта и ее роль в развитии патологических процессов. Терапевт. стоматол. Учебное пособие. - М.: МЕДпресс-информ. - 2003.

Способ подавления воспалительной реакции в тканях пародонта в эксперименте путем введения суспензии макрофагов, отличающийся тем, что в десну вводят макрофаги, поляризованные in vitro в регуляторный фенотип М2, при этом суспензия содержит 250 тыс. макрофагов в 100 мкл среды.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для реминерализации твердых тканей зубов с целью профилактики и лечения кариеса в стадии пятна, гиперестезии твердых тканей зуба.

Изобретение относится к области медицины, а именно к детской терапевтической стоматологии, и предназначено для лечения декомпенсированной формы раннего детского кариеса.

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для лечения воспалительных заболеваний пародонта в любой стадии развития. Предлагается гидрогель для лечения воспалительных заболеваний пародонта, в состав которого включены: 70% спиртовой экстракт чабреца, метилцеллюлоза в виде микрокристаллического порошка, 6% раствор ацизола, аэросил и вода высокоочищенная в следующем соотношении на 100 г спиртовой экстракт чабреца - 6,0 мл, метилцеллюлоза - 5,0 г, ацизол - 2,0 мл, аэросил - 1,2 г, вода высокоочищенная - 85,8 мл.
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для лечения травматических повреждений слизистой оболочки полости рта с помощью водного раствора.

Группа изобретений относится к области применения композиций для ухода за полостью рта для предупреждения заболеваний в ротовой полости. Предлагается применение композиции для ухода за полостью рта, содержащей карбоновую кислоту, где кислота представляет собой монометилсукцинат, для предупреждения одного или нескольких заболеваний пародонта, выбранных из группы, состоящей из гингивита, пародонтита, пери-имплантита, пери-имплантного мукозита, некротизирующего гингивита, некротизирующего пародонтита и кариеса.

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для лечения и профилактики гиперестезии дентина зубов. Для этого осуществляют подготовку поверхности дентина с помощью плазматрона путем ее 15±1 секундной обработки сфокусированным пучком холодной аргоновой плазмы с расстояния 2-5 мм от дентина.

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии. Предлагается способ лечения периодонтита у детей с несформированными верхушками корней постоянных зубов, включающий применение в первое посещение лечебного препарата в виде пасты.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и медицине, в частности к стоматологии, и представляет собой средство для лечения заболеваний пародонта и слизистой оболочки рта с репаративным эффектом, содержащее глицин, пролин и лизин, отличающееся тем, что содержит пиридоксин, хондроитин сульфат натрия, глюкозамина гидрохлорид, дистиллированную воду и глицеролаты кремния в 6-мольном избытке глицерина, причем компоненты в средстве находятся в определенном соотношении в мас.%.

Изобретение относится к способу уменьшения частоты возникновения, тяжести и/или длительности мукозита полости рта у субъекта, подвернутого воздействию повреждающей дозы облучения или химиотерапевтических агентов, включающему введение указанному субъекту эффективного количества пептида, содержащего аминокислотную последовательность длиной до 7 аминокислот, причем указанный пептид содержит аминокислотную последовательность Х1Х2Х3Р (SEQ ID NO: 56), в которой: Х1 представляет собой R; Х2 представляет собой I или V, причем Х2 может быть N-метилированным; Х3 представляет собой I или V, причем Х3 может быть N-метилированным; Р представляет собой пролин; при этом SEQ ID NO: 56 представляет собой первые четыре аминокислоты на N-конце указанного пептида, или его фармацевтической соли, сложного эфира или амида, и фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества; или пептида, содержащего аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 5, 7, 10, 14, 17, 18, 22, 23, 24, 27, 28, 31, 34, 35, 63, 64, 66-69, 72, 76, 77, 90 и 92, или его фармацевтической соли, сложного эфира или амида, и фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу уменьшения образования рубцовой ткани, который включает: местное нанесение биофотонной композиции в форме геля с вязкостью 10000-80000 сП, содержащей ксантеновый краситель и гелеобразующее средство, где гелеобразующее средство выбрано из сшитых полимеров; и освещение композиции актиническим светом.

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано при закрытии дефекта плоских и трубчатых костей. Способ приготовления пломбировочной массы для закрытия дефекта кости у крысы в эксперименте включает измельчение коралла семейства Acropridae до размера гранул не более 145 мкм, которым на две трети объема наполняют желатиновую капсулу, затем капсулу заполняют аутокровью до полного ее объема, причем стенку капсулы предварительно перфорируют отверстиями с диаметром 0,1 мм в количестве 4-х на 1 мм2, далее капсулу имплантируют под кожу крысы в области грудного отдела позвоночника на 14-ть суток, затем извлекают пломбировочную массу и применяют для закрытия дефекта кости.

Изобретение относится к области химико-фармацевтической, пищевой и косметической промышленности и касается способа получения субстанций препаратов нуклеиновых кислот иммуномодулирующего действия.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности производству гематогена. Гематоген содержит черный альбумин, носитель, компоненты для формования, корректоры вкуса и аромата, взятые в определенном соотношении, при этом черный альбумин находится в такой нативной форме, что его ИК-спектр поглощения имеет пик на 1655±2 см-1, площадь которого составляет от 35 до 80% от суммы площадей всех пиков в спектральной области от 1600 до 1700 см-1, и пик на 1628±2 см-1 с площадью от 5 до 40% от указанной суммы площадей.

Группа изобреетний относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой способ приготовления композиции, содержащей обогащенную тромбоцитами плазму и гиалуроновую кислоту, причем способ включает стадии: забора цельной крови в устройство, содержащее гиалуроновую кислоту и антикоагулянт; центрифугирования указанного устройства и сбора супернатанта, содержащего указанную гиалуроновую кислоту и обогащенную тромбоцитами плазму.
Изобретение относится к хирургии и может быть применимо для остановки кровотечения при оружейных ранениях паренхиматозных органов брюшной полости. Проводят тампонаду раны жидким гемостатическим материалом, который вводят в раневой канал через катетер, установленный во входное отверстие раненого органа на всю глубину раны; по мере заполнения раневого канала жидким гемостатическим материалом катетер подтягивают к входному отверстию и удаляют по окончании заполнения.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и биомедицины, а именно к способу получения эритроцитов, а также способу получения препарата крови. К настоящему изобретению также относятся препараты клеток для получения эритроцитов, замороженные препараты популяций клеток для получения эритроцитов и набор для получения вышеуказанных препаратов клеток.
Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологии, и может быть использовано для лечения кандидоза полости рта у лиц, использующих съемные пластиночные протезы.
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии и физиотерапии, и может быть использовано для лечения нейроретинопатии вследствие тяжелой преэклампсии.

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохирургии. После выполнения основного этапа операции под твердую мозговую оболочку (ТМО) на поверхность мозга укладывают пластину тахокомба с запасом по размеру на 0,5-1,0 см по всей форме раны, выступая за пределы размера разреза ТМО.

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии и биохимии, и предназначено для получения антимикробных пептидов. Для получения антимикробных пептидов из тромбоцитов курицы домашней осуществляют следующие сбор свежей крови кур в пластиковые контейнеры с добавлением 3,8% раствора цитрата натрия (рН 3,5).

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для подавления воспалительной реакции в тканях пародонта в эксперименте. Для этого в десну вводят макрофаги, поляризованные in vitro в регуляторный фенотип М2, при этом суспензия содержит 250 тыс. макрофагов в 100 мкл среды. Способ позволяет достоверно снизить коэффициент миграции лейкоцитов на поверхность десны при экспериментальном ЛПС-индуцированном воспалении на фоне введения макрофагов регуляторного фенотипа М2 в десну у мышей. 1 табл., 1 пр.

Наверх