Стабильные твёрдые фармацевтические составы, содержащие 2-(2-нитро-4-трифторметилбензоил)-1,3-циклогександион

Изобретение относится к области фармации и касается стабильного твердого фармацевтического состава. Состав содержит 2-(2-нитро-4- трифторметилбензоил)-1,3-циклогександион в качестве фармацевтически активного ингредиента, прежелатинизированный крахмал и стеариновую кислоту. Изобретение обеспечивает получение улучшенных стабильных фармацевтических составов, содержащих 2-(2-нитро-4- трифторметилбензоил)-1,3-циклогександион. 9 з.п. ф-лы, 8 ил., 4 табл., 3 пр.

 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к высокостабильным лекарственным формам, содержащим соединение, склонное к разложению, особенно при повышенных температурах, и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

Более конкретно, изобретение относится к ингибитору 4-гидроксифенилпируват-диоксигеназы (HPPD) - 2-(2-нитро-4-трифторметилбензоил)-1,3-циклогександиону, также называемому нитизиноном или NTBC.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

NTBC представляет собой лекарственное средство, реализуемое на рынке компанией Swedish Orphan Biovitrum International AB под торговым наименованием Orfadin®, и используется для замедления развития симптомов наследственной тирозинемии 1 типа (НТ-1) у взрослых и детей. Это средство одобрено FDA и ЕМА в январе 2002 года и феврале 2005 года, соответственно.

Заболевание НТ-1 вызвано дефицитом конечного фермента из катаболического пути тирозина, фумарилацетоацетат-гидролазы. NTBC представляет собой конкурентный ингибитор 4-гидроксифенилпируват-диоксигеназы (HPPD) - фермента, который является предшественником фумарилацетоацетат-гидролазы. За счет подавления нормального катаболизма тирозина у пациентов с НТ-1 NTBC предотвращает накопление токсических промежуточных продуктов малеилацетоацетата и фумарилацетоацетата, которые у пациентов с НТ-1 превращаются в токсические метаболиты сукцинилацетон и сукцинилацетоацетат, первый из которых подавляет путь синтеза порфирина, что приводит к накоплению 5-аминолевулината.

Также была подтверждена эффективность NTBC при лечении других заболеваний. Неполный список приведен далее в настоящем описании.

В публикации WO2011106655 описан способ увеличения концентрации тирозина в плазме у субъекта, страдающего от кожно-глазного/глазного альбинизма, включающий введение субъекту фармацевтически приемлемой композиции, содержащей NTBC, в дозировке в диапазоне от примерно 0,1 мг/кг/день до примерно 10 мг/кг/день.

В патенте США №8354451 В2 описаны новые способы борьбы с микробными инфекциями, вызванными грибками или бактериями, путем введения субъекту терапевтически эффективного количества NTBC.

В публикации WO2010052473 описаны композиции, содержащие NTBC, и способы лечения и/или предупреждения синдрома беспокойных ног (СБН).

В Европейском патенте ЕР 1853241 В1 предложено применение NTBC для лечения нейродегенеративного заболевания, в частности болезни Паркинсона.

В Introne W.J., et al., описана эффективность нитизинона при лечении алкаптонурии (Introne W.J., et al., Molec. Genet. Metab., 2011, 103, 4, 307).

Хорошо известно, что одна из проблем, связанных с известным лекарственным составом (т.е. капсулами Orfadin®), заключается в его химической нестабильности. Действительно, даже при хранении Orfadin® в холодильнике при температуре в диапазоне от 2°С до 8°С его срок годности составляет лишь 18 месяцев. После вскрытия стабильность сохраняется только 2 месяца при температуре не более 25°С, после чего состав приходится выбрасывать. Очевидно, что такие условия хранения влияют на затраты, связанные со сбытом лекарственного средства и логистикой при доставке его пациенту. Таким образом, существует острая потребность в составах, более стабильных с точки зрения логистики и поставок, а также соблюдения пациентом схемы лечения.

Эффективность Orfadin® в отношении заболеваний, для лечения которых применяют продукты на основе HPPD (например, НТ-1), была подробно описана в Европейском патенте ЕР0591275 В1. Синтез NTBC также описан в указанном патенте. Помимо подходящих фармацевтических составов, описанных в указанном патенте, авторы упоминают различные традиционные композиции, такие как таблетки, пастилки, твердые или мягкие капсулы, водные или масляные суспензии, эмульсии, диспергируемые порошки или гранулы, сиропы или эликсиры. Также описаны парентеральные составы (например, стерильный водный или масляный раствор для внутривенного, подкожного, внутримышечного или внутрисосудистого введения) или ректальные составы, такие как суппозитории. В ЕР0591275 В1 описаны 3 конкретных примера составов, два из которых представляют собой таблетки, и один имеет форму капсул. Указанные последними лекарственные формы содержали 2% активного ингредиента, 0,3% смазывающего вещества (т.е. стеарата магния), а оставшуюся часть составляла лактоза, ЕФ, используемая в качестве разбавителя. Указанные капсулы затем использовали в исследованиях in vivo.

В WO2015101794, поданной Cycle Pharmaceuticals LTD, описан состав NTBC в виде таблеток, который, как утверждается имеет повышенную стабильность по сравнению с составом Orfadin® в виде капсул. Заявители также указали, что один из основных недостатков доступного в настоящее время коммерческого продукта заключается в недостаточной термической стабильности, в частности приводящей к образованию нежелательного продукта циклизации, а именно 6-трифторметил-3,4-дигидро-2H-ксантен-1,9-диона или оксотетрагидроксантона. Заявитель также обнаружил, что смазывающий агент стеарат магния (который отсутствует в составе Orfadin®, имеющем форму капсул) способствует увеличению нестабильности NTBC. В заявке также предложено не применять в составе какие-либо ионы металлов или крахмалы. В частности, заявитель указал, что крахмал ускоряет образование нежелательного оксотетрагидроксантона в качестве циклизованной примеси. В указанной заявке на патент также предполагается, что предпочтительным составом являются таблетки. В качестве смазывающего вещества предпочтительно использовать жирные кислоты, содержащие от 20 до 22 атомов углерода, более предпочтительно, чтобы фракция жира в композиции состояла из глицерола дибегената (например, Compritol®888). Было высказано предположение, что указанный компонент совместно с лактозой может даже увеличивать стабильность состава, предотвращая образование нежелательного продукта циклизации.

В WO2012177214, поданной Swedish Orphan Biovitrum International AB, описаны пероральные жидкие суспензии нитизинона, содержащие буфер на основе лимонной кислоты в качестве стабилизатора.

В WO2013181292, поданной Biotie Therapies Inc. и в настоящее время отозванной, описаны фармацевтические составы нитизинона, которые, как утверждается, стабилизированы для долгосрочного хранения. В рамках длинного списка гипотетических стабилизаторов заявители предложили двух- и трехосновные карбоновые кислоты, которые являются предпочтительными органическими кислотами и выбраны из группы, состоящей из лимонной, виноградной, янтарной, фумаровой, яблочной, оксалилуксусной, цис-аконитовой, изолимонной и α-кетоглутаровой кислот. Были проведены исследования стабильности состава в виде таблеток, полученного способом влажного гранулирования для обеспечения однородного распределения различных ингредиентов, в условиях ускоренного состаривания. Заявители предположили, что присутствие лимонной кислоты способствовало стабилизации состава.

Тем не менее, несмотря на многочисленные попытки, до настоящего времени ни один из составов на основе NTBC не удовлетворял в полной мере стандартам стабильности и/или соблюдения пациентами схемы лечения. Таким образом, в медицине сохраняется неудовлетворенная потребность в составах, имеющих долгосрочную стабильность.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции с высокой и долгосрочной стабильностью, содержащей 2-(2-нитро-4-трифторметилбензоил)-1,3-циклогександион в качестве активного ингредиента, один стабилизатор и по меньшей мере одно вспомогательное вещество.

Не желая ограничиваться какой-либо теорией, полагают, что улучшенная стабильность состава обусловлена присутствием стеариновой кислоты.

Авторы настоящего изобретения обнаружили, что объединение нитизинона со стеариновой кислотой в качестве стабилизатора неожиданно приводит к получению фармацевтических композиций, обладающих высокой стабильностью даже при комнатной температуре в течение продолжительного периода времени.

В предпочтительном варианте реализации указанный состав содержит прежелатинизированный крахмал или лактозу в качестве вспомогательного вещества или их смесь.

В более предпочтительном варианте реализации указанный состав имеет форму твердых желатиновых капсул.

Если эффективность стеариновой кислоты в качестве смазывающего вещества в лекарственных составах была известна уже давно, то возможность ее использования в качестве стабилизатора нитизинона ранее никогда не отмечалась или не предполагалась. Кроме того, в противоположность сведениям, известным из уровня техники, крахмал в качестве разбавителя не препятствует сохранности нитизинона, если стеариновая кислота также содержится в фармацевтической композиции.

В одном предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения прежелатинизированный крахмал применяют в качестве разбавителя и стеариновую кислоту в качестве стабилизатора.

В другом предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения лактозу применяют в качестве разбавителя и стеариновую кислоту в качестве стабилизатора.

В дополнительном предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения смесь лактозы и прежелатинизированного крахмала применяют в качестве разбавителя и стеариновую кислоту в качестве стабилизатора. В указанном составе отношение прежелатинизированный крахмал/лактоза предпочтительно находится в диапазоне от 5/95 до 95/5.

В еще одном предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения процентное содержание, масс./масс., каждого ингредиента составляет: от 2 до 5%, от 93 до 97% и от 0,5 до 5%, где указанные значения процентного содержания относятся к нитизинону, разбавителю (т.е. прежелатинизированному крахмалу или лактозе) и стеариновой кислоте, соответственно.

В более предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения стеариновая кислота содержится в концентрации до 1% (масс./масс.)±10%.

В еще более предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения процентное содержание, масс./масс., каждого ингредиента составляет: 3,57%, 95,34% и 1,09%, где указанные значения процентного содержания относятся к нитизинону, разбавителю (т.е. прежелатинизированному крахмалу или лактозе) и стеариновой кислоте, соответственно.

В еще более предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения фармацевтические составы, предложенные в настоящем изобретении, могут иметь четыре различные дозировки, если рассматривать количество активного ингредиента нитизинона, где указанные дозировки составляют 2 мг, 5 мг, 10 мг и 20 мг.

Фармацевтический состав согласно настоящему изобретению благодаря своим свойствам ингибирования 4-гидроксифенилпируват-диоксигеназы является подходящим лекарственным средством для лечения нарушений, при которых указанное ингибирование приводит к улучшению состояния здоровья пациента. В частности, можно проводить лечение пациентов, страдающих от НТ-1 или от кожно-глазного/глазного альбинизма или микробных инфекций, вызванных грибками или бактериями, или синдрома беспокойных ног или нейродегенеративного заболевания, в частности болезни Паркинсона.

В предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения фармацевтический состав предназначен для лечения пациентов, страдающих от НТ-1.

В общем случае фармацевтический состав согласно настоящему изобретению вводят в «терапевтически эффективном количестве». Фактически вводимое количество фармацевтического состава, как правило, определяется лечащим врачом с учетом важных факторов, включая состояние, подвергающееся лечению, возможный сопутствующий прием пациентом какого-либо другого лекарственного средства, возраст, пол, массу тела и ответ индивидуального пациента, тяжесть симптомов пациента и т.д.

В общем случае эффективная доза составляет от 0,5 мг/кг/день до 2 мг/кг/день, предпочтительно от 1 мг/кг/день до 1,5 мг/кг/день. Указанная дневная доза может быть разделена на две равные дозы и приниматься два раза в день примерно в одно время каждый день.

В предпочтительном варианте реализации дневная доза разделена на две равные дозы.

Дозу можно регулировать в соответствии с отслеживаемым уровнем сукцинилацетона и альфа-фетопротеинов в моче и параметрами исследования функции печени.

Следует понимать, что пациенты с НТ-1 должны принимать рацион с ограниченным содержанием тирозина и фенилаланина во время лечения фармацевтическим составом согласно настоящему изобретению.

Выражение «% масс./масс.» относится к процентному содержанию вещества в фармацевтическом составе в пересчете на массу (т.е. 1 г/100 г эквивалентно 1% масс./масс.).

Выражение «примерно в одно время» означает ±30 минут до или после обычного времени введения.

Выражения «высокая стабильность» и/или «продолжительная стабильность» означают, что химическая сохранность активного ингредиента составляет по меньшей мере 95% после хранения лекарственной формы в течение одного месяца при 25°С и 60% отн. вл.

В одном из вариантов реализации указанная химическая сохранность составляет по меньшей мере 96% после хранения лекарственной формы в течение одного месяца при 25°С и 60% отн. вл.

В другом варианте реализации указанная химическая сохранность составляет по меньшей мере 97% после хранения лекарственной формы в течение одного месяца при 25°С и 60% отн. вл.

В предпочтительном варианте реализации указанная химическая сохранность составляет по меньшей мере 98% после хранения лекарственной формы в течение одного месяца при 25°С и 60% отн. вл.

В еще одном предпочтительном варианте реализации указанная химическая сохранность составляет по меньшей мере 99% после хранения лекарственной формы в течение одного месяца при 25°С и 60% отн. вл.

В другом варианте реализации изобретения предполагается сохранение химической сохранности лекарственной формы после хранения в течение трех месяцев при 25°С и 60% отн. вл.

В указанном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 95% после хранения лекарственной формы в течение трех месяцев при 25°С и 60% отн. вл.

В предпочтительном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 96% после хранения лекарственной формы в течение трех месяцев при 25°С и 60% отн. вл.

В другом предпочтительном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 97% после хранения лекарственной формы в течение трех месяцев при 25°С и 60% отн. вл.

В еще одном предпочтительном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 98% после хранения лекарственной формы в течение трех месяцев при 25°С и 60% отн. вл.

В еще более предпочтительном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 99% после хранения лекарственной формы в течение трех месяцев при 25°С и 60% отн. вл.

В другом варианте реализации изобретения предполагается сохранение химической сохранности лекарственной формы после хранения в течение одного месяца при 40°С и 75% отн. вл.

В указанном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 95% после хранения лекарственной формы в течение одного месяца при 40°С и 75% отн. вл.

В предпочтительном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 96% после хранения лекарственной формы в течение одного месяца при 40°С и 75% отн. вл.

В другом предпочтительном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 97% после хранения лекарственной формы в течение одного месяца при 40°С и 75% отн. вл.

В еще одном предпочтительном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 98% после хранения лекарственной формы в течение одного месяца при 40°С и 75% отн. вл.

В еще более предпочтительном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 99% после хранения лекарственной формы в течение одного месяца при 40°С и 75% отн. вл.

В другом варианте реализации изобретения предполагается сохранение химической сохранности лекарственной формы после хранения в течение трех месяцев при 40°С и 75% отн. вл.

В указанном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 95% после хранения лекарственной формы в течение трех месяцев при 40°С и 75% отн. вл.

В предпочтительном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 96% после хранения лекарственной формы в течение трех месяцев при 40°С и 75% отн. вл.

В другом предпочтительном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 97% после хранения лекарственной формы в течение трех месяцев при 40°С и 75% отн. вл.

В еще одном предпочтительном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 98% после хранения лекарственной формы в течение трех месяцев при 40°С и 75% отн. вл.

В еще более предпочтительном варианте реализации химическая сохранность лекарственной формы составляет по меньшей мере 99% после хранения лекарственной формы в течение трех месяцев при 40°С и 75% отн. вл.

При хранении в условиях ускоренного состаривания были обнаружены 3 примеси, которые были химически охарактеризованы как 4-(трифторметил)салициловая кислота, 6-трифторметил-3,4-дигидро-2H-ксантен-1,9-дион и 1,3-циклогександион. Они были также обозначены как прим-1, прим-2 и прим-3. Указанные примеси были описаны ранее в WO2015101794.

Как известно, результаты исследования при 40°С и 75% отн. вл. в течение непродолжительного периода, такого как шесть месяцев, рассматривают как показатель стабильности при 25°С (т.е. при комнатной температуре) в течение более продолжительного периода времени (от пятнадцати до восемнадцати месяцев).

ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Фигура 1А: количество прим-2 согласно примерам реализации 1-3 в течение 3 месяцев в условиях ускоренного состаривания.

Фигура 1В: количество прим-2 согласно примерам реализации 4-9 в течение 3 месяцев в условиях ускоренного состаривания.

Фигура 2А: общее количество примесей согласно примерам реализации 1-3 в течение 3 месяцев в условиях ускоренного состаривания.

Фигура 2В: общее количество примесей согласно примерам реализации 4-9 в течение 3 месяцев в условиях ускоренного состаривания.

Фигура 3А: количество прим-2 согласно примерам реализации 1-3 в течение 3 месяцев в условиях долгосрочного определения стабильности.

Фигура 3В: количество прим-2 согласно примерам реализации 4-9 в течение 3 месяцев в условиях долгосрочного определения стабильности.

Фигура 4А: общее количество примесей согласно примерам реализации 1-3 в течение 3 месяцев в условиях долгосрочного определения стабильности.

Фигура 4В: общее количество примесей согласно примерам реализации 4-9 в течение 3 месяцев в условиях долгосрочного определения стабильности.

ПРИМЕРЫ

Проводили исследование девяти фармацевтических составов, таких как описано в таблице 1, согласно описанию примеров реализации 1-9.

Применяемые материалы:

Активный фармацевтический ингредиент

Нитизинон получали согласно способу, описанному в Европейском патенте ЕР 0805791 В1. Химическую чистоту (т.е. 99,95%) определяли путем ВЭЖХ при детектировании при длине волны 235 нм.

Разбавитель

Прежелатинизированный крахмал: (Starch 1500®; Colorcon, Eighenmann & Veronelli)

Моногидрат лактозы: (Lactopress® после сушки распылением; DFE Pharma)

Безводный двухосновный фосфат кальция (DI-CAFOS®, Budenheim)

Смазывающее вещество

Стеариновая кислота (стеариновая кислота 50, Carlo Erba)

Стеарат магния (из растительных источников, Ligamed MF-3-V, Peter Greven Nederland)

ПРИМЕРЫ РЕАЛИЗАЦИИ

Фармацевтические составы

Общий протокол получения предложенных для реализации фармацевтических составов описан ниже в настоящей заявке.

Низитинон (2,5 мг) и разбавитель (269,75 мг) смешивали в Turbula® при 23 об./мин в течение 3 минут. Затем добавляли смазывающее вещество (2,75 мг) и продолжали перемешивать еще минуту при такой же скорости перемешивания (т.е. 23 об./мин). В тех случаях, когда смазывающее вещество не добавляли, доводили количество разбавителя до 272,5 мг и увеличивали продолжительность стадии перемешивания до 4 минут.

Затем заполняли твердые желатиновые капсулы 2 размера с использованием полуавтоматической машины для наполнения капсул Zuma OSZ/150 275 мг смесью, содержащей 2,5 мг нитизинона, 1% (масс./масс.) смазывающего вещества (если его использовали), где оставшуюся часть составлял разбавитель.

Условия хранения

Капсулы хранили при трех различных атмосферных условиях (т.е. температуре и относительной влажности (отн.вл.)), как указано ниже.

Условие 1 (исследование стабильности в холодильнике) 5°С

Условие 2 (исследование долгосрочной стабильности) 25°С/60% отн. вл.

Условие 3 (исследование стабильности при ускоренном состаривании) 40°С/75% отн. вл.

Для полного определения профиля примесей в фармацевтических составах в различные моменты времени были разработаны соответствующие способы анализа, представленные ниже.

Фармацевтические составы согласно примерам реализации получали при помощи общего протокола, описанного выше, после выбора соответствующих ингредиентов. В исследованиях реализации определяли общее количество примесей, результаты показаны на фигурах 1А, 1В, 2А, 2В, 3А, 3В, 4А и 4В.

Способы анализа

Фаза растворителя (DP): CH₃CN/H₂O: 1/1

Колонка: Sunfire С18 5 мкм, 250 х 4,6 мм

Расход: 1 мл/мин

Объем пробы: 10 мкл

Длина волны детектора: 235 нм

Температура колонки: 35°С

Условия элюирования примесей 1 и 2 (т.е. прим-1 и прим-2)

Элюент A: CH₃CN

Элюент В: 0,02М CH₃CO₂NH₄

Градиент 1:

Цикл: 35 мин, перерыв: 11 мин

Условия элюирования примеси 3 (т.е. прим-3)

Элюент С: CF₃CN

Элюент D: 0,1% Н₃РО₄

Градиент 2:

Цикл: 25 мин, перерыв: 1 мин

Способ растворения

Исследуемый раствор

50 мг нитизинона в анализируемом составе растворяли в 2 мл CH₃CN в 50 мл мерной колбе.

Затем доводили объем полученного раствора до 50 мл путем добавления требуемого количества DP.

Раствор сравнения А

10 мг нитизинона (стандарт сравнения) и по 15 мг прим-1 и прим-2 растворяли в 2 мл CH₃CN в 100 мл мерной колбе. Затем доводили объем полученного раствора до 100 мл путем добавления требуемого количества DP. Затем 1 мл полученного таким образом раствора разбавляли до 100 мл при помощи 99 мл DP.

Раствор сравнения содержал 0,10% нитизинона и по 0,15% каждой из примесей.

Раствор сравнения В

15 мг прим-3 растворяли в 100 мл мерной колбе и доводили объем до 100 мл при помощи DP.

Затем разбавляли один миллилитр полученного таким образом раствора до 100 мл при помощи 99 мл DP.

Раствор сравнения содержал 0,15% прим-3.

Составы, содержащие двухосновный фосфат кальция в качестве разбавителя (т.е. примеры реализации 1-3), были нестабильными, так как в них быстро происходило образование циклизованной примеси даже спустя один месяц при 40°С/75% отн. вл., а также при 25°С/60% отн. вл., хоть и в меньшей степени. Этот продемонстрировано на фигурах 1А и 3А, соответственно. Следует отметить, что составы, содержащие двухосновный фосфат кальция, в меньшей степени подвержены образованию циклизованного продукта разложения в отсутствие смазывающего вещества, при наличии стеариновой кислоты был продемонстрирован даже отрицательный эффект в отношении образования оксотетрагидроксантона (см. фигуру 1А). Если изучать любые примеси, образующиеся в условиях хранения, становится очевидным, что ни один из составов согласно примерам реализации 1-3 не был эффективным, так как после хранения в течение трех месяцев при 40°С/75% отн. вл. образовывалось примерно 40-50% примесей (см. фигуру 2А), а также более 10% нитизинона разлагалось после хранения в течение 3 месяцев при 25°С/60% отн. вл. (фигура 4А).

Составы, содержащие лактозу (т.е. примеры реализации 4-6), были исключительно стабильными, даже если они дополнительно содержали стеариновую кислоту. Стеарат магния оказывал отрицательное влияние, если рассматривать образование оксотетрагидроксантона, в исследованииях ускоренного состаривания и долгосрочного определения стабильности (см. фигуры 1В и 3В, соответственно). Такую же тенденцию можно наблюдать и при изучении общего количества примесей, образующихся при хранении, независимо от используемых условий (см. фигуры 2В и 4В). Неожиданно было обнаружено, что присутствие стеариновой кислоты приводит к значительному увеличению стабильности состава нитизинона/лактозы (пример реализации 6 по сравнению с примерами реализации 4 и 5 в таблицах 1B, 2В, 3В и 4В).

Составы, содержащие прежелатинизированный крахмал (т.е. примеры реализации 7-9), были исключительно стабильными, даже если они дополнительно содержали стеариновую кислоту, образование оксотетрагидроксантона было в значительной степени ограничено. Действительно, количество оксотетрагидроксантона неожиданно уменьшалось более чем в 11 раз в экспериментах с ускоренным состариванием (пример реализации 6 по сравнению с примером реализации 5, фигура 1В). Уровень каких-либо других примесей также оставался очень низким даже в условиях ускоренного состаривания (т.е. 0,34% после хранения в течение 3 месяцев при 40°С/75% отн. вл.).

С учетом многообещающих результатов, полученных для составов согласно примерам реализации 6 и 9, были проведены дополнительные эксперименты для выявления составов, имеющих дополнительно улучшенный профиль стабильности. Для химических композиций, проиллюстрированных в примерах 1-3, полученных на основе состава согласно примеру реализации 9, был продемонстрирован исключительно высокий профиль стабильности.

Смешение

Для получения крупной партии нитизинон помещали в пакет из полиэтилена низкой плотности (ПЭНП) совместно с 25% от общего количества разбавителя и перемешивали в течение 1 минуты при 10 об./мин с получением «предварительной смеси 1». После этого в «предварительную смесь 1» добавляли еще 25% от общего количества разбавителя и снова перемешивали в тех же условиях, что и ранее, с получением «предварительной смеси 2». Полученную смесь переносили в биконический смеситель совместно с оставшимися 50% от общего количества разбавителя и затем добавляли стеариновую кислоту. Затем перемешивали всю смесь в течение 10 минут ±2 минуты.

Наполнение капсул

Капсулы 2 размера (для капсул с дозировкой 10 мг и 3 размера для капсул с дозировкой 2 и 5 мг) наполняли с использованием автоматической машины для наполнения капсул IN-CAP (Bonapace).

Исследование растворения

Указанное исследование проводили в сосуде, содержащем 900 мл буфера с рН 6,8, полученного из KH₂PO₄ и NaOH в деионизованной воде.

Стабильность

Для полного определения профиля примесей в фармацевтическом составе в различные моменты времени анализировали стабильность капсул с дозировкой 10 мг (т.е. пример 1).

Использовали способ анализа, приведенный ниже.

Способ анализа

Фаза растворителя (DP): CH₃CN/MeOH: 65/35

Колонка: Phenomenex Synergi 4μm™ Hydro-RP 80A 100x4,6 мм

Расход: 1,5 мл/мин

Объем пробы: 10 мкл

Длина волны детектора: 255 нм и 310 нм

Температура колонки: 30°С

Элюент A: CH₃CN

Элюент В: Ацетатный буферный раствор, рН 3

Градиент:

а: 75 об./мин; b: 50 об./мин; НО: не обнаружено;

а: 75 об./мин; b: 50 об./мин; НО: не обнаружено; НИ: не исследовали

а: 75 об./мин; b: 50 об./мин; НО: не обнаружено; НИ: не исследовали

С учетом результатов, описанных в таблицах 2-4, специалисту будет понятно, что указанный состав сохраняет высокую стабильность с течением временем независимо от условий хранения. Кроме того, уровень типичной примеси 6-трифторметил-3,4-дигидро-2Н-ксантен-1,9-диона (т.е. прим-2) составляет менее 0,05%.

1. Стабильный твердый фармацевтический состав, содержащий 2-(2-нитро-4- трифторметилбензоил)-1,3-циклогександион в качестве фармацевтически активного ингредиента, прежелатинизированный крахмал и стеариновую кислоту.

2. Стабильный твердый фармацевтический состав по п. 1, отличающийся тем, что количество стеариновой кислоты составляет от 0,5 до 5% (масс./масс.) от общего количества ингредиентов.

3. Стабильный твердый фармацевтический состав по п. 2, отличающийся тем, что количество стеариновой кислоты составляет 1% (масс./масс.) ± 10% от общего количества ингредиентов.

4. Стабильный твердый фармацевтический состав по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что химическая сохранность 2-(2-нитро-4-трифторметилбензоил)-1,3- циклогександиона составляет по меньшей мере 95% после хранения в течение трех месяцев при 25°С, более предпочтительно по меньшей мере 97% после хранения в течение трех месяцев при 25°С, еще более предпочтительно по меньшей мере 98% после хранения в течение трех месяцев при 25°С, еще более предпочтительно по меньшей мере 99% после хранения в течение трех месяцев при 25°С.

5. Стабильный твердый фармацевтический состав по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что количество основной примеси не превышает 0,20% после хранения в течение трех месяцев при 40°С/75% отн. вл.

6. Стабильный твердый фармацевтический состав по любому из пп. 1-4 в виде желатиновой капсулы, отличающийся тем, что количество 2-(2-нитро-4- трифторметилбензоил)-1,3-циклогександиона составляет 2 мг, 5 мг, 10 мг или 20 мг.

7. Стабильный твердый фармацевтический состав по п. 6, отличающийся тем, что указанная желатиновая капсула представляет собой твердую желатиновую капсулу.

8. Стабильный твердый фармацевтический состав по любому из пп. 1-7 для применения для лечения заболевания, при котором ингибирование 4-гидроксифенилпируват-диоксигеназы приводит к улучшению состояния здоровья пациента.

9. Стабильный твердый фармацевтический состав по п. 8, отличающийся тем, что указанное заболевание, подвергаемое лечению, выбрано из группы, включающей кожно- глазной/глазной альбинизм, микробные инфекции, синдром беспокойных ног, алкаптонурию и наследственную тирозинемию 1 типа.

10. Стабильный твердый фармацевтический состав по п. 9, отличающийся тем, что указанное заболевание, подвергаемое лечению, представляет собой наследственную тирозинемию 1 типа.