Лекарственный растительный сбор
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к сбору, обладающему антидиабетическим действием. Сбор, обладающий антидиабетическим действием, содержит листья стевии и семена льна в определенном количестве, где в качестве стевии используют листья сорта Рамонская сластена, выращенного в Крыму, в качестве льна используют семена сорта Северный. Вышеописанный сбор обладает выраженным антидиабетическим действием за счет синергетического эффекта. 14 табл.
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к созданию растительного сбора, который может быть использован для профилактики сахарного диабета.
Сбор содержит листья стевии и семена льна в определенном процентном соотношении компонентов и позволяет повысить лечебную эффективность, его можно применять как самостоятельное, так и дополнительное средство наряду с другими методами лечения.
Большой интерес в теоретическом и практическом плане представляет изучение возможностей применения новых лекарственных средств, способствующих нормализации липидного и углеводного обменов, нарушенных при сердечно-сосудистых заболеваниях, сахарном диабете, метаболическом синдроме, ожирении.
Стевия является источником получения биологически активных фармакологически ценных соединений, применяемых в составе комплексной терапии для профилактики и лечения заболеваний эндокринной системы, желудочно-кишечного тракта, сердечно-сосудистой, иммунной, центральной нервной системы. Благодаря уникальному свойству не повышать уровень глюкозы в крови ее применяют лица, больные сахарным диабетом. Отмечается, что стевия стимулирует секрецию инсулина и снижает уровень глюкозы в крови. Комплексное воздействие биологически активных соединений семян льна и листьев стевии позволит использовать «Стелинол» для профилактики сахарного диабета, ожирения, гипертонии, а также в качестве антиоксидантного, иммуномодулирующего и противовоспалительного фитосредства.
В настоящее время известны антидиабетические макросборы как отечественного, так и зарубежного происхождения, включающие более 5 компонентов.
Известен антидиабетический сбор лекарственных растений, содержащий листья подорожника, траву душицы, листья крапивф, листья черники, траву астрагала, листья черемухи, траву тысячелистник, корневища чертополоха, корни топинамбура, траву медуницу, траву полыни, листья смородины черной, траву манжетки, корни родиолы, траву донника, листья мать-и-мачехи, плоды кориандра, цветки пижмы, траву иван-чая, плоды рябины, корни одуванчика, цветки бессмертника, корни калгана, цветки клевера при следующем соотношении компонентов, мас. ч.: 4:4:6:4:6:6:6:4:4:4:2:4:6:4:5:4:2:3:10:4:6:4:2:4 (патент РФ 2137491, опубл. 20.09.1999).
Известен антидиабетический сбор лекарственных растений, содержащий плоды шиповника коричного, створки фасоли обыкновенной, листья шелковицы белой, листья ореха грецкого, солому овса посевного, траву галеги лекарственной, листья смородины черной, плоды лимонника китайского, траву тимьяна ползучего, листья шалфея лекарственного, и листья крапивы двудомной (патент России 2131740, опуб. 20.06.1999). Сбор предназначен для лечения детей в возрасте 1-10 лет, больных сахарным диабетом.
Известен сбор для лечения сахарного диабета, содержащий побеги черники обыкновенной, створки фасоли обыкновенной, корни заманихи высокой, траву хвоща полевого, плоды шиповника, траву зверобоя обыкновенного, цветков ромашки аптечной (А.с. СССР N 1456156, опубл. 1989 г.).
Недостатком известных сборов является то, что они включают большое количество видов сырья лекарственных растений и терапевтический эффект от их использования для лечения легкой формы диабета недостаточно высок. Кроме того, повышается риск развития осложнений и побочных эффектов.
Наиболее близкой к предлагаемой композиции по совокупности существенных признаков и достигаемому результату является известный сбор для лечения сахарного диабета, который выбран в качестве прототипа и содержит листья подорожника, траву зверобая, траву пустырника, листья крапивы, корени лопуха, слоевища ламинарии, плоды боярышника, корни цикория, траву душицы, листья мяты перечной, семена льна, листья черники, лавровый лист, траву почечного чая в определенном соотношении (патент №2000802, опубл. 10.05.1993).
Техническим результатом настоящего изобретения является разработка фармацевтического продукта растительного происхождения, представляющего собой сбалансированную систему полиненасыщенных жирных кислот, жирорастворимых витаминов, стевиозидов как сахарозаменителя и других биологически активных соединений, обладающего повышенной, но в тоже время щадящей фармакологической активностью для профилактики сахарного диабета, а также расширение его спектра действия, в частности, снижение содержания сахара в крови.
Техническое решение достигается тем, что формируется новый лекарственный сбор, являющийся более эффективным для профилактики сахарного диабета легкой формы, Первый вариант сбора содержит сырье стевии Ребо и льна обыкновенного, в следующем соотношении компонентов, %:
Листья стевии 1
Семена льна 99
Предлагаемое соотношение входящих в сбор видов лекарственного сырья подобрано опытным путем и представляет собой наиболее целесообразное количественное сочетание компонентов. Технический результат предлагаемой композиции заключается в синергическом эффекте при совместном применении 2-х видов сырья. Результаты определения содержания основных биологически активных веществ в растительном сырье как компонентов сбора приведены в таблицах 1-7.
Таблица 1
Хозяйственно-биологические показатели и содержание биологически активных соединений в семенах льна различного происхождения, %
| Сорт | Год допуска сорта к использованию, *период нахождения в Госреестре сортов, допущенных к использованию | Регион допуска сорта к использованию,* | Содержание жира в семенах, % | Содержание олеиновой кислоты в масле, % | Содержание линолевой кислоты в масле, % | Содержание линоленовой кислоты в масле, % | Соотношение ω3: ω6: ω9 жирных кислот | урожай семян, т/га | масса 1000 семян | Слизеобразующая способность, на г воздушно- сухих семян, Δ мл | Интенсивность слизеобразования, на г воздушно- сухих семян, Δ г |
| ВНИИМК 620 | 1994 | 4,6,7,9 | 38,03 | 17,991 | 18,433 | 54,603 | 4:1:2 | 1,88 | 7,962 | 0.65 | 1.66 |
| ВНИИМК 630 | 2004 | 6 | 30,82 | 18,716 | 19,110 | 47,219 | 7:1:2 | 2,00 | 5,348 | 0.65 | 1.08 |
| Исток | 2008 | 7 | 46,52 | 17,802 | 64,400 | 2,834 | 1:16:6 | 2,41 | 5,443 | 0.63 | 1.41 |
| Кинельский 2000 | 2004 | 7 | 41,14 | 29,603 | 16,471 | 43,196 | 2,5:1:2,5 | нд | 5,444 | 0.53 | 1.98 |
| Белочка | 1994 | 2,4,7 | 34,50 | 27,987 | 14,102 | 48,026 | 3:1:2,5 | 1,30 | 4,423 | 0.59 | 1.59 |
| Алексим | 1993 | 2,3 | 31,43 | 26,012 | 14,898 | 48,679 | 3:1:2 | 1,28 | 4,262 | 0.58 | 1.86 |
| Белинка | *1985-2002 | нд | 32,05 | 20,400 | 15,800 | 51,300 | 3:1:2 | 1,36 | 3,991 | 0.67 | 1.41 |
| Небесный | 1996 | 4,6 | 42,23 | 30,529 | 16,193 | 41,554 | 2,5:1:2,5 | 1,67 | 6,212 | 0.56 | 1.93 |
| Северный | 1994 | 4,8,9,10,11 | 45,17 | 19,842 | 15,526 | 54,032 | 3,5:1:2 | 1,88 | 7,861 | 0.68 | 1.58 |
| ВНИИМК 622 | *1994-2011 | нд | 35,70 | 24,204 | 15,795 | 48,547 | 3:1:2 | 1,98 | 6,251 | 0.59 | 1.23 |
| Брестский | нд | нд | 36,64 | 17,986 | 14,777 | 55,637 | 4:1:2 | 5,234 | 0,53 | 1,64 | |
| Ручеек | 1998 | 4,6,7,8 | 49,00 | 29,315 | 14,906 | 48,861 | 4:1:2 | 1,61 | 5,131 | 0,56 | 1,56 |
| Linola + | селекционная форма | нд | 43,52 | 17,446 | 66,355 | 4,082 | 1:16:6 | 2,10 | 5,154 | 0,56 | 1,33 |
| Санлин | 2008 | 7 | 43,00 | 17,801 | 67,515 | 2,214 | 1:34:15 | 2,25 | 4,354 | 0.74 | 1.25 |
| Исилькульский | 1978 | 10 | 39,30 | 19,790 | 15,890 | 52,116 | 3:1:2 | 1,71 | 4,462 | 0.49 | 1.36 |
| Кентавр | нд | нд | 40,20 | 28,219 | 37,210 | 16,223 | 1:1:1 | 2,48 | 4,519 | 0.65 | 1.39 |
| Сокол | 1998 | 4,7,10 | 47,70 | 23,234 | 14,479 | 50,440 | 4:1:2 | 1,52 | 6,213 | 0.53 | 1.56 |
| Артикский 7 | *1948-1995 | нд | 30,46 | 29,165 | 12,383 | 47,640 | 4:1:3 | 1,66 | 5,686 | 0.57 | 1.47 |
| Карабалыкский 7 | *1979-1995 | нд | 36,15 | 18,710 | 14,641 | 54,485 | 4:1,5:1 | 1,64 | 6,894 | 0.56 | 1.33 |
| Бахмальский 1056 | *1954-1979 | нд | 38,00 | 29,238 | 14,989 | 45,242 | 3:1:2,5 | 1,66 | 6,002 | 0.52 | 1.77 |
| Пределы варьирования, Lim | 30,82-49,00 | 17,446-30,529 | 12,383-67,355 | 2,214-55,637 | 1,36-2,48 | 3,991-7,861 | 0,49-0,74 | 1,08-1,98 |
Примечание: *2 - Северо-Западный , 4 - Волго-Вятский, 6 - Северо-Кавказский, 7 - Средневолжский, 8 - Нижневолжский, 9 - Уральский, 10 - Западно-Сибирский.
Жирнокислотный состав масел низколиноленовых сортов льна имеет оптимальное соотношение ω-6 и ω-3 жирных кислот, так как согласно рекомендациям Института питания РАМН соотношение полиненасыщенных жирных кислот ω-6:ω-3 для здорового питания составляет (5-10):1, а при некоторых заболеваниях для лечебного питания (3-5):1. В жирнокислотном составе масла семян льна традиционного сорта линум-типа ВНИИМК 630 соотношение линолевая ω-6 кислота : линоленовая ω-3 кислота составляет 1:6, а в сорте Исток 16:1, что практически соответствует вышеуказанным рекомендациям и является физиологически оптимальным для человеческого организма.
Таблица 2
Хозяйственно-биологические показатели стевии различного происхождения, %
| Сорт, регион произрастания | Регион допуска сорта к использованию | Урожайность зеленой массы, ц/га | Урожайность высушенной травы, ц/га | Обливственность, % | Урожайность высушенныхх листьев, ц/га | Содержание стевиозида, % |
| Рамонская сластена (Воронеж) | Все регионы РФ | 50,8-58,8 | 8,96-12,96 | 50,0-64,0 | 5,2-7,3 | 14,0 |
| Рамонская сластена (Пенза) | Все регионы РФ | 75,0-110,0 | 17,50-27,50 | 35,0-55,0 | 3,5-5,5 | 13,5 |
| Услада (Воронеж) | Все регионы РФ | 92,3-137,9 | 18,46-27,58 | 68,3-72,3 | 18,4-20,4 | 10,1 |
| Услада (Пенза) | Все регионы РФ | 90,0-150,0 | 22,50-40,00 | 45,0-80,0 | 4,5-8,0 | 9,9 |
| София (Воронеж) | Все регионы РФ | 73,5-77,0 | 14,70-15,40 | 50,1-60,1 | 7,5-9,5 | 15,6 |
| София (Пенза) | Все регионы РФ | 85,0-140,0 | 20,00-35,00 | 40,0-70,0 | 4,0-7,0 | 14,8 |
| Пределы варьирования, Lim | Все регионы РФ | 50,8-150,0 | 8,96-40,00 | 35,5-80,0 | 3,5-20,4 | 9,9-14,8 |
Таблица 3
Содержание биологически активных соединений в сырье стевии различного происхождения, % (средние значения)
| Сорт, регион произрастания | Гликозиды | Флавоноиды | Фенилпропаноиды | Каротиноиды | Тритерпеновые сапонины | Органические кислоты |
| Образец из Парагвая | 17,33 | 2,49 | 5,34 | 5,27 | 4,01 | 5,15 |
| Образец из Индии | 17,14 | 1,94 | 4,29 | 4,41 | 3,95 | 4,76 |
| Рамонская сластена (Крым) | 21,10 | 2,72 | 6,39 | 7,15 | 3,35 | 5,38 |
| Рамонская сластена (Краснодар) | 17,92 | 3,17 | 6,82 | 4,56 | 4,64 | 5,18 |
| Рамонская сластена (Пенза) | 14,74 | 2,89 | 6,69 | 4,33 | 2,51 | 4,49 |
| Рамонская сластена (Тверь) | 14,39 | 2,48 | 6,41 | 5,46 | 3,45 | 3,81 |
| София (Пенза) | 14,64 | 2,62 | 6,40 | 5,40 | 3,50 | 4,07 |
| Пределы варьирования, Lim | 14,39-21,10 | 1,94-3,17 | 4,29-6,82 | 4,33-7,15 | 2,51-4,64 | 3,81-5,38 |
Таблица 4
Содержание незаменимых аминокислот в листьях стевии, %*
| Сорт, регион произрастания | Лизин | Фенилаланин | Лейцин + Изолейцин | Метионин | Валин | Треонин | Сумма незаменимых аминокислот |
| Образец из Парагвая | 0,58 | 0,52 | 0,61 | 0,13 | 0,54 | 0,55 | 2,93 |
| Образец из Индии | 0,57 | 0,58 | 0,75 | 0,16 | 0,66 | 0,67 | 3,39 |
| Рамонская сластена (Крым) | 0,58 | 0,68 | 0,85 | 0,11 | 0,76 | 0,77 | 3,75 |
| Рамонская сластена (Краснодар) | 0,44 | 0,42 | 0,51 | 0,14 | 0,44 | 0,45 | 2,40 |
| Рамонская сластена (Пенза) | 0,43 | 0,41 | 0,48 | 0,19 | 0,82 | 0,85 | 3,18 |
| Рамонская сластена (Тверь) | 0,60 | 0,45 | 0,58 | 0,09 | 0,78 | 0,80 | 3,30 |
| София (Пенза) | 0,60 | 0,67 | 0,83 | 0,12 | 0,76 | 0,74 | 3,72 |
| Пределы варьирования, Lim | 0,43-0,60 | 0,41-0,68 | 0,48-0,85 | 0,09-0,49 | 0,44-2,28 | 0,085-0,77 | 2,40-3,75 |
Примечание: *массовая доля аминокислоты в пробе, %
Таблица 5
Химический состав листьев стевии, %
| Сорт, регион произрастания | Жирное масло | Клетчатка | Белок |
| Рамонская сластена (Крым) | 4,90 | 17,00 | 17,32 |
| Рамонская сластена (Краснодар) | 4,88 | 15,36 | 19,05 |
| Рамонская сластена (Пенза) | 3,07 | 26,53 | 18,44 |
| Пределы варьирования, Lim | 3,07-4.90 | 15,36-26,53 | 17,32-19,05 |
Таблица 6
Содержание экстрактивных веществ в стевии листьях
| Образцы сырья | Экстрактивные вещества, % | |
| Измельченное сырье | Порошкованное сырье | |
| Парагвай | 45,62±0,11 | 46,71±0,11 |
| Индия | 52,62±0,12 | 54,02±0,09 |
| Рамонская сластена (Тверь) | 45,12±0,06 | 47,71±0,10 |
| Рамонская сластена (Крым) | 50,64±0,10 | 52,01±0,11 |
| Рамонская сластена (Краснодар) | 45,61±0,11 | 46,22±0,10 |
| Рамонская сластена (Пенза) | 41,32±0,04 | 42,92±0,13 |
Таблица 7
Числовые показатели стевии листьев, %
| № п/п | Компоненты | Пределы варьирования, Lim |
| 1 | Влажность, % | 5,98-7,15 |
| 2 | Зола общая, % | 7,14-12,71 |
| 3 | Зола, не растворимая в 10% HCl, % | 4,06-6,32 |
| 4 | Частицы, не проходящие сквозь сито с отверстиями диаметром 5 мм | 3,99-4,87 |
| 5 | Частицы, проходящие сквозь сито с отверстиями диаметром 0,18 мм | 3,07-3,30 |
| 6 | Органической примеси, % | 1,55-2,55 |
| 7 | Минеральной примеси, % | 0,20-0,37 |
Таким образом, лучшим сортам стевии по комплексу полезных признаков и свойств, включая содержание суммы дитерпеновых гликозидов является: Рамонская сластена (Крым) - 21,10%, а лучшим сортом льна по комплексу полезных признаков и свойств, включая содержание слизеобразующих полисахаридов - Северный - 26,4 %.
Числовые показатели растительного сбора «Стелинол»: экстрактивных веществ, извлекаемых водой, не менее 20,0%; золы общей не более 8,0%; влажность не более 13,0%; частиц, не проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 5 мм, не более 12,0%; частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 0,5 мм, не более 6,0%; органической примеси не более 3%, минеральной примеси не более 2,0%.
Таблица 8
Химический состав растительного сбора «Стелинол», % (средние значения)
| Образец (1:99) | Белок | Фосфор | Клетчатка | Жирное масло | Слизеобразующие полисахариды | Дитерпеновые гликозиды |
| «Стелинол» на основе льна Исток | 22,56 | 0,56 | 8,76 | 46,21 | 15,12 | 0,16 |
| «Стелинол» на основе льна Северный | 20,77 | 0,57 | 9,06 | 48,22 | 24,90 | 0,15 |
| «Стелинол» на основе льна Исток и Северный в соотношении 1:1 | 21,91 | 0,50 | 10,07 | 46,18 | 22,80 | 0,16 |
Впервые в качестве лекарственного растительного сырья (ЛРС) для разработки нового растительного сбора используется сочетание листьев стевии и семян льна.
Подбор компонентов, оптимизация состава растительного сбора проводили с учетом правил составления композиции лечебно-профилактического действия. Растительный сбор «Стелинол» на основе семян льна и листьев стевии характеризуется оптимальным для человеческого организма соотношением омега-3 и омега-6 жирных кислот, незаменимых аминокислот, флавоноидов и стевиозидов.
Предлагаемый сбор «Стелинол» используют в виде брикета и технология его приготовления заключается в следующем. Сначала готовят настой из листьев стевии в соотношении 1:50. Для этого 1,0 высушенных порошкованных листьев стевии заливают 50 мл воды и нагревают на водяной бане при температуре 60°C при частом помешивании 25 минут, затем добавляют 50,0 цельных семян льна и упаривают в течение 15 минут при температуре 60°C. Приготовленный сбор высушивают при температуре 60°C, в течение 6 часов 30 минут.
Было проведено сравнительное изучение лечебно-профилактического действия разработанного сбора при метаболическом синдроме.
Исследование проводилось на 74 нелинейных белых крысах массой 180-350 г, содержавшихся в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и пище. Все манипуляции с животными осуществлялись в соответствии с Правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей и были одобрены локальным этическим комитетом.
Для проведения исследования крысы были поделены на 4 группы. Животные 1-ой группы (N=18) получали стандартный рацион в течение всего эксперимента (45 суток) и являлись интактными. Крысам 2-ой группы (N=18, контроль) моделировали метаболический синдром аллоксаном, 137 мг/кг, однократно в/брюшинно после предварительной 24-часовой депривации пищи при сохранном доступе к воде. Животным 3-ой (N=18) , 4-ой (N=18) групп проводилась фитотерапевтическая коррекция углеводного обмена растительным сбором «Стелинол»: крысам 3-й группы «Стелинол» вводили с 1 суток и далее на протяжении всего эксперимента; крысам 4-ой группы «Стелинол» использовался, начиная с 21-ых суток от начала формирования экспериментального метаболического синдрома и до окончания эксперимента.
В условиях моделирования метаболического синдрома оценивали влияние растительного сбора "Стелинол" на среднюю продолжительность жизни крыс, на психоэмоциональный фон, выносливость и выживаемость крыс. Проводили исследование двигательной активности и эмоциональности крыс с экспериментальным метаболическим синдромом в тесте «Открытое поле». Согласно методическим рекомендациям, нами использовалась круглая камера (1×1 м) из темного пластика с нижней стенкой, расчерченной на квадраты (10×10 см), с боковыми стенками высотой 50 см. Освещение проводилось с помощью лампы мощностью 75 Вт, находившейся на высоте 1,5 м над центром поля. В нижней части боковых стенок имеются отверстия диаметром 0,8 см, предназначенные для изучения норковых реакций. В ходе 3-минутного теста на основе визуального наблюдения регистрировались следующие показатели: количество пересеченных сторон квадратов камеры (в центре арены и на периферии), вставание на задние лапы (обычные и пристеночные стойки), норковые реакции, количество и продолжительность эпизодов чистки шерсти (груминга), число эпизодов дефекации во время теста, число и продолжительность эпизодов замирания. После каждого 3-минутного теста животное возвращалось в клетку, камеру тщательно мыли.
Повышение горизонтальной и вертикальной активности расценивалось как показатель увеличения стрессоустойчивости животных в новых для них условиях, которые воссоздает тест «Открытое поле». Количество эпизодов груминга, дефекации и замирания, а также длительность эпизодов замирания расценивались как показатели эмоционального состояния крыс: возрастание данных показателей интерпретировались как увеличение тревожности и беспокойства, снижение - как показатель анксиолитического воздействия исследуемого растительного сбора.
Было проведено исследование выносливости крыс с метаболическим синдромом в тесте «Принудительное плавание». Первое плавание проводили с целью случайного выбора животных по выносливости. Каждое животное по одному помещали в цилиндр с водой, диаметром 18 см, высотой 40 см, т.е. достаточного размера для того, чтобы крысы могли свободно плавать. Температура воды поддерживалось в пределах 29-30 градусов. Животные плавали до утомления, о котором свидетельствовало погружение животного. В этот момент животное быстро извлекалось из воды и в течение двух минут обсушивалось сухим полотенцем. Выносливость крыс определялось длительностью времени плавания.
Для оценки влияния растительного сбора "Стелинол" на состояние углеводного обмена у животных с метаболическим синдромом в динамике использовали пероральный глюкозотолерантный тест с последующим определением в крови уровня глюкозы.
Выживаемость животных, получающих «Стелинол», как с момента формирования метаболического синдрома, так и спустя 21 сутки, была выше таковой в группе контроля. Оценка влияния растительного сбора "Стелинол" на выживаемость крыс в условиях моделирования метаболического синдрома представлена в таблице 9.
Таблица 9
Выживаемость крыс с экспериментальным метаболическим синдромом
| Группы | Группа №1 (интактная) | Группа №5 (контроль) | Группа №6 («Стелинол» с 1-го дня формирования метаболического синдрома) | Группа №7 («Стелинол» с 21-го дня формирования метаболического синдрома) |
| Количество выживших экспериментальных животных | 18 | 6 | 9 | 12 |
| % выживаемости | 100 | 33,3 | 50 | 66,7 |
В ходе эксперимента отмечена гибель животных во всех группах с экспериментальным метаболическим синдромом, при этом в группе контроля и среди крыс, получавших «Стелинол» с 1-ых суток формирования метаболического синдрома, летальность составила 66,7% и 50%, а среди животных, получавших «Стелинол» с 21 суток эксперимента, погибло 33,3% крыс. Таким образом, выживаемость животных, получавших «Стелинол», с 1-го дня формирования метаболического синдрома, была в 1,5 раза выше таковой в группе контроля, и в 2 раза выше у животных, получавших «Стелинол» с 21-го дня формирования метаболического синдрома.
Результаты исследования двигательной активности с экспериментальным метаболическим синдромом в тесте «Открытое поле» представлены в таблице 10.
Таблица 10
Динамика двигательной активности крыс с экспериментальным метаболическим синдромом в тесте «Открытое поле», (M±m)
| Период | 1 минута | 2 минута | 3 минута | ||||||
| Группы | Горизонтальная активность (кол-во пересеченных клеток) | Вертикальная активность | Горизонтальная активность (кол-во пересеченных клеток) |
Вертикальная активность | Горизонтальная активность (кол-во пересеченных клеток) | Вертикальная активность | |||
| Стойки обычные | Стойки пристеночные | Стойки обычные | Стойки пристеночные | Стойки обычные | Стойки пристеночные | ||||
| Группа №1(интактная) | 23,0±2,6 | 0 | 3,0±1,0 | 16,0±3,6 | 3,0±0,0 | 3,0±0,0 | 16,3±6,8 | 1,0±0,0 | 2,3±1,5 |
| Группа №2 (контроль) | 18,7±4,7 | 0 | 2,0±0,0 | 19,0±3,6 | 3,0±0,0 | 3,7±3,1 | 17,7±7,4 | 1,5±0,7 | 3,0±1,73 |
| Группа №3 («Стелинол» с 1-ых суток эксперимента) | 22,0±8,0 | 0 | 4,0±2,6 | 8,3±7,5 | 0*# | 1,7±1,2 | 4,7±2,4*# | 0*# | 3,0±0,0 |
| Группа №4 («Стелинол» с 21-ых суток эксперимента) | 20,0±3,6 | 0 | 4,7±1,2* | 13,3±5,7 | 1,0±0,0*#& | 4,7±2,5 | 14,3±4,7 | 2,0±0,0#& | 3,0±0,0 |
Примечание: * - статистически значимое (Рк<0,05) отличие от группы контроля; # - статистически значимое (Ри˂0,05) отличие от интактной группы; & - статистически значимое (Рс˂0,05) различие между группами, получающими «Стелинол».
В ходе проведения теста «Открытое поле» выявлено статистически значимое по сравнению с группой контроля и интактными животными уменьшение количества стоек на второй и третьей минутах у животных, получавших «Стелинол» с 1-ых суток и с 21-ых суток эксперимента, а также уменьшение количества пересеченных клеток у крыс группы №3 на 3-й минуте. Полученные результаты можно трактовать как косвенные доказательства уменьшения тревожности крыс при попадании в новые условия. Изменение динамики двигательной активности у исследуемых животных объясняется адаптацией к условиям «открытого поля» в последующие сутки, что сопровождается уменьшением возбудимости. Это, в свою очередь, сопровождается снижением психогенной напряженности, что и выражалось в повышении частоты груминга. Как правило, появление данной реакции свидетельствует о комфортном состоянии животного, низком уровне тревожности и устойчивости к условиям стресса.
Для более детального изучения эмоционального фона крыс были определены следующие показатели: груминг, эпизоды выхода в центр и дефекции, а также заглядывание в отверстия (показатель любознательности). Результаты исследования эмоциональности крыс с экспериментальным метаболическим синдромом в тесте «Открытое поле» представлены в таблице 11.
Таблица 11
Показатели эмоционального фона крыс с экспериментальным метаболическим синдромом в тесте «Открытое поле», (M±m)
| Период | 1 минута | 2 минута | 3 минута | |||||||||
| Группа Движения |
Груминг | Отверстия | Выход в центр | Дефекация | Груминг | Отверстия | Выход в центр | Дефекация | Груминг | Отверстия | Выход в центр | Дефекация |
| Группа №1(интактная) | 2±0 | 1±0 | 0 | 0 | 2±0 | 2±0 | 1±0 | 0 | 2±0 | 1±0 | 0 | 0 |
| Группа №2 (контроль) | 0 | 0 | 0 | 0 | 1,5±0,70 | 0 | 1±0 | 0 | 1,3±0,6 | 1,5±0,7 | 1±0 | 0 |
| Группа №3 («Стелинол» с 1-ых суток эксперимента) | 3±0* | 2±0* | 0 | 0 | 2±0 | 1±0* | 0* | 0 | 3±0* | 0* | 0 | 1±0 |
| Группа №4 («Стелинол» с 21-ых суток эксперимента) | 1±0* | 0* | 0 | 0 | 1±0 | 2±1,4* | 0* | 0 | 2,3±1,6 | 0* | 0 | 1±0 |
Примечание: * - статистически значимое (Рк<0,05) отличие от группы контроля; # - статистически значимое (Ри˂0,05) отличие от интактной группы; & - статистически значимое (Рс˂0,05) различие между группами, получающими «Стелинол».
Наблюдалось усиление ориентировочно-исследовательской активности, тенденция к снижению уровня тревожности у животных, получавших «Стелинол» с 1-ых суток и с 21-ых суток эксперимента по сравнению с животными группы контроля. Изменения дефекации у всех экспериментальных животных были незначимы. Выраженный груминг в сочетании с высокой ориентировочно-исследовательской активностью являются поведенческими маркерами стрессоустойчивости или анксиолитического действия.
В ходе проведения теста «Принудительное плавание» выявлено статистически значимое повышение времени активного и пассивного плавания у животных получавших «Стелинол» с 21 суток эксперимента относительно аналогичных показателей группы контроля (Рк˂0,05) и животных получавших «Стелинол» с 1 суток эксперимента (Рс˂0,05). При этом не было отмечено статистически значимых различий между показателями животных получавших «Стелинол» с 21 суток эксперимента и интактными животными (Ри>0,05).
Животные, получавшие «Стелинол» с начала формирования экспериментального метаболического синдрома, не имели статистически значимых отличий по показателям теста от группы контроля (Рк>0,05).
Результаты исследования с экспериментальным метаболическим синдромом в тесте «Принудительное плавание» представлены в таблице 12.
Таблица 12
Влияние растительного сбора «Стелинол» на показатели теста «Принудительное плавание» у самок Вистар с экспериментальным метаболическим синдромом
| Группы | Активное плавание (секунды) | Пассивное плавание (секунды) | Время до погружения (секунды) |
| Группа №1 (Интактные) | 286,33±86,17 | 224,33±83,43 | 532,00±144,00 |
| Группа № 2 (Контроль) | 130,66±12,05# | 111,0±27,40# | 275,00±65,00# |
| Группа № 3 («Стелинол» с начала формирования метаболического синдрома) | 126,66±15,94# | 59,66±59,01# | 214,00±63,01# |
| Группа № 4 («Стелинол» с 21 дня формирования метаболического синдрома) | 207,33±11,59*& | 166,66±18,33*& | 379,33±49,17*& |
Примечание: * - статистически значимое отличие от группы контроля (Рк˂0,05); # - статистически значимое отличие от интактных животных (Ри˂0,05); & - статистически значимое различие между показателями крыс, получавших «Стелинол» (Рс˂0,05).
Также исследование проводилось с использованием перорального глюкозотолерантного теста и определения уровня глюкозы в крови животных. Полученные результаты представлены в таблице 13.
Таблица 13
Динамика гликемии у самцов Вистар с экспериментальным метаболическим синдромом на фоне введения Стелинола, ммоль/л (M±m)
| Группы | Группа № 1 (интактные самцы) | Группа № 2 (контроль) | Группа № 3 («Стелинол» за 10 дней до формирования метаболического синдрома) | Группа № 4 («Стелинол» с 1-го дня формирования метаболического синдрома) | Группа № 5 («Стелинол» с 20-го дня формирования метаболического синдрома |
| 1 день | 6,96±0,73 | 6,86±0,31 | 6,58±0,66 | 6,68±0,31 | 7,23±0,68 |
| 4 день | 6,63±0,84 | 16,58±1,49# | 12,76±0,77# | 13,47±1,52# | 12,81±0,62 &* |
| 8 день | 7,21±0,97 | 19,13±1,06# | 14,01±0,67# | 14,03±1,58# | 13,11±0,63 &* |
| 12 день | 7,05±0,64 | 18,94±1,20# | 12,5±0,73# | 12,60±1,03# | 12,58±0,57*& |
| 16 день | 6,75±0,68 | 13,64±1,31# | 11,56±0,64# | 11,76±1,23# | 10,21±0,77*& |
| 20 день | 5,9±0,50 | 12,65±0,65 | 9,32±1,27 | 8,22±0,50 | 7,50±0,90# |
| 24 день | 6,43±0,30 | 9,8±0,78# | 7,66±0,63* | 6,95±0,95* | 7,42±1,37 |
| 28 день | 5,88±0,56 | 9,05±0,88 | 6,75±0,45# | 5,28±1,35 | 6,41±0,90# |
| 32 день | 6,76±0,49 | 9,39±0,33# | 8,36±0,40#* | 7,82±1,00* | 7,64±0,64* |
| 36 день | 4,8±0,37 | 9,6±0,69# | 5,2±0,42* | 5,84±0,54* | 4,83±0,27* |
| 40 день | 6,28±0,54 | 9,32±0,91# | 5,42±0,99* | 6,88±1,05* | 6,71±0,86* |
| 44 день | 5,93±0,71 | 9,28±1,09# | 6,02±0,75* | 6,84±1,12* | 6,26±1,01* |
Примечание: * - статистически значимое (Рк<0,05) отличие от группы контроля;
# - статистически значимое (Ри˂0,05) отличие от интактной группы;
& - статистически значимое (Рс˂0,05) различие между группами, получающими «Стелинол».
В ходе проведенного исследования было выявлено статистически значимое (Рк<0,05) уменьшение уровня глюкозы по сравнению с группой контроля во всех группах животных, получавших «Стелинол», при этом в третьей и четвертой группах показатели гликемии уменьшались, начиная с 24-го дня эксперимента (табл.12), а в пятой группе уровень глюкозы по сравнению с контрольной группой уменьшается с 12-го дня эксперимента. Начиная с 32-го дня, уровень глюкозы во всех группах крыс, получавших «Стелинол», не имеет статистически значимых различий с интактной группой. Полученные результаты представлены в таблице 14.
Таблица 14
Динамика гликемии у самок Вистар с экспериментальным метаболическим синдромом на фоне введения Стелинола, ммоль/л (M±m)
| Группы | Группа №1 (интактные самки) | Группа №5 (контроль) | Группа № 6 («Стелинол» с 1-го дня формирования метаболического синдрома) | Группа № 7 («Стелинол» с 21-го дня формирования метаболического синдрома) |
| 1 день | 5,18±0,81 | 7,7±1,12# | 7,53±1,41 | 7,01±0,40 |
| 4 день | 5,88±0,84 | 15,85±0,77# | 13,97±0,72# | 13,47±1,04# |
| 8 день | 6,56±0,76 | 17,95±0,63# | 14,43±1,13# | 15,4±0,81# |
| 12 день | 6,71±1,08 | 15,9±0,70# | 13,57±0,95# | 13,93±0,48# |
| 16 день | 8,95±0,93 | 15,45±0,91# | 13,62±0,85# | 13,26±1,08# |
| 20 день | 6,73±0,91 | 13,55±1,62# | 11,36±0,40#* | 11,4±0,90# |
| 24 день | 6,6±0,72 | 12,75±0,07# | 10,96±0,50#* | 10,66±0,73#* |
| 28 день | 7,11±0,55 | 11,95±0,49# | 9,33±0,58#* | 10,13±1,00#* |
| 32 день | 6,7±0,93 | 12,50±1,13# | 8,66±0,60# | 8,42±1,03* |
| 36 день | 7,65±0,97 | 12,4±1,69# | 9,0±0,1# | 8,10±0,87*& |
| 40 день | 7,35±0,89 | 10,0±0,14# | 8,80±0,14#* | 7,65±0,60*& |
| 44 день | 7,83±0,89 | 10,75±0,63# | 7,5±0,70* | 6,15±0,40#*& |
Примечание: * - статистически значимое (Рк<0,05) отличие от группы контроля;
# - статистически значимое (Ри˂0,05) отличие от интактной группы;
& - статистически значимое (Рс˂0,05) различие между группами, получающими «Стелинол».
В результате проведенного исследования было выявлено статистически значимое по сравнению с группой контроля уменьшение уровня глюкозы у животных, получавших «Стелинол» (табл. 13). У крыс, получавших «Стелинол» с момента формирования аллоксанового диабета уровень глюкозы снижался, начиная с 20-го дня; на 44 день эксперимента статистически значимых различий между крысами данной группой и интактными животными не было (табл.12). У крыс, получавших «Стелинол» с 20-го дня, уровень глюкозы статистически значимо (Рк<0,05) снижался с 24-го дня эксперимента, а с 32-го дня эксперимента крысы группы не имели статистически значимых отличий по данному показателю от интактных животных (табл.12). С 36-го дня эксперимента выявлено статистически значимое различие уровня глюкозы между животными, получавшими «Стелинол» с начала формирования метаболического синдрома, и крысами, которым «Стелинол» вводили с 20-го дня (Рс˂0,05, табл. 12). На 44 день эксперимента отмечалось статистически значимое (Ри˂0,05) уменьшение уровня глюкозы в группе по сравнению с интактными крысами (табл.12).
Следовательно, в условиях моделирования метаболического синдрома у экспериментальных животных было выявлено увеличение выносливости животных и стрессоустойчивости, снижение сахара в крови.
Сбор, обладающий антидиабетическим действием, содержащий листья стевии и семена льна в следующих соотношениях компонентов, г:
листья стевии 1,0,
семена льна 99,0,
отличающийся тем, что в качестве сырья стевии следует в сбор включать листья сорта Рамонская сластена, выращенного в Крыму, в качестве сырья льна следует в сбор включать семена сорта Северный.
