Сульфонамидсодержащие связывающие системы для лекарственных конъюгатов

Группа изобретений относится к области фармацевтики и медицины, а именно к конъюгату, имеющему структуру (I):

, где: (L) представляет собой линкер; (Т) представляет собой антитело или фрагмент антитела, которые специфично связываются с антигеном, присутствующим на опухолевой клетке; m равно целому числу от 1 до 10 и (Р) имеет структуру (VI) или (XId):

,

и (L)-(T) имеет структуру (III):

,

где каждый АА независимо представляет собой аминокислоту; х равно целому числу от 0 до 25 и (L') представляет собой необязательно остаток линкера (L). Также группа изобретений относится к фармацевтической композиции, содержащей указанный конъюгат, к применению конъюгата для получения лекарственного средства для лечения рака у млекопитающего и к способу лечения рака у млекопитающего, включающий введение эффективного количества конъюгата. 4 н. и 23 з.п. ф-лы, 17 ил., 3 табл., 33 пр.

 

Перекрестная ссылка на родственные заявки

Данная заявка заявляет приоритет под 35 U.S.С. §119(e) по предварительной заявке на патент США №61/921242, поданной 27 декабря, 2013 года, и по предварительной заявке на патент США №62/051899, поданной 17 сентября, 2014 года, которые включены в настоящий документ во всей своей полноте посредством отсылки.

Область техники

Изобретение относиться к связывающим системам для высвобождения полезных соединений прикрепленных к направляющему фрагменту, и способам их использования.

Уровень техники

Остовы для доставки находят множество применений в биологических, химических и медицинских областях. Например, доставка лекарственных средств и других агентов к целевым клеткам или тканям для лечения рака или других заболеваний была предметом тщательного исследования в течение многих лет. Большинство агентов вводимых в настоящее время пациенту парентерально не являются целевыми, приводя к системной доставке агента в клетки и ткани тела, где это не является необходимым, и часто нежелательным. Это может привести к неблагоприятным побочным эффектам препарата, и часто ограничивает дозу препарата (например, химиотерапевтического (противоопухолевого)), которую можно вводить. Несмотря на то, что пероральное введение лекарственных средств считается удобным и экономичным видом введения, оно имеет такие же недостатки в неспецифической токсичности к нецелевым клеткам, после того как лекарственное средство адсорбировано в системный кровоток. Дальнейшие осложнения включают проблемы с пероральной биодоступностью и пребыванием лекарственного средства в желудочно-кишечном тракте, что приводит к дополнительному воздействию лекарственного средства на желудочно-кишечный тракт и, следовательно, к риску токсичности по отношению к желудочно-кишечному тракту.

Соответственно, главной целью является разработка способов специфической доставки агентов в клетки и ткани. Преимущества такого лечения включают в себя исключение общих физиологических эффектов ненадлежащей доставки таких агентов в другие клетки и ткани. Использование конъюгатов антител и лекарственных средств для целевой доставки цитотоксичных или анти-митотических агентов (например, лекарственных средств убивающих или ингибирующих клетки опухоли при лечении рака) может позволить нацелено доставлять фрагмент лекарственного средства к опухолям и накопление в опухолевых клетках и опухолевом окружении. Напротив, системное введение неконъюгированных лекарственных средств может привести к неприемлемым уровням токсичности для нормальных клеток, а также для опухолевых клеток, которые должны быть устранены.

Связывание лекарственных препаратов с антителами или нацеливающими фрагментами для образования конъюгатов, которые способны высвобождать свободное лекарственное средство, включает рассмотрение разных факторов, включая тип и расположение химической группы для связывания лекарственного препарата, механизм высвобождения лекарственного средства (например, через расщепляемую связь), структурные элементы, обеспечивающие высвобождение лекарственного средства (например, распознавание последовательности ферментом и расщепляемую связь), и любые другие структурные модификации обусловленные высвобождением лекарственного средства. Что требуется, так это связывание и специфическое высвобождение лекарственного средства, которые не сказываются негативно на активности лекарственного средства. В некоторых случаях, химическая модификация интересующего лекарственного препарата может быть желательной для эффективного конъюгирования и доставки лекарственного препарата.

В медицинской области, необходимы конъюгаты лекарственных средств, которые могут высвобождать сильнодействующие анти-митотические и цитотоксические соединения селективно в желаемых целевых местах. Настоящие описание удовлетворяет этим потребностям и предлагает дополнительные преимущества.

Сущности изобретения

Вкратце, настоящие описание направленно на композиции содержащие полезное соединение, связанное с направляющим фрагментом в конъюгате, и соответствующим способам их изготовления и применения. В одном варианте реализации изобретения изобретение предлагает конъюгаты, которые являются ферментативно расщепляемыми и способными высвобождать полезное соединение из направляющего фрагмента при ферментативном расщеплении. В одном варианте реализации изобретения направляющий фрагмент представляет собой антитело. В одном варианте реализации изобретения полезное соединение представляет собой биологически активное соединение. В одном варианте реализации изобретения полезное соединение представляет собой цитотоксическое или цитостатическое лекарственное средство. В одном варианте реализации изобретения полезное соединение представляет собой вводящий метку фрагмент.

Соответственно, в одном варианте реализации изобретение предлагает композиции, имеющие следующую структуру:

где (P) представляет собой полезное соединение, (L) представляет собой линкер, (T) представляет собой направляющий фрагмент, и m равно целому числу от 1 до 10. В некоторых вариантах реализации изобретения m равно 1.

В одном варианте реализации изобретения (P) связанно с (T) через (L), как показано в следующей структуре:

где:

R выбран из группы, содержащей необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероарил, -COR²⁷, -CSR²⁷, -OR²⁷- и -NHR²⁷-, где каждый R²⁷ представляет собой независимо, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил, и необязательно замещенный гетероарил,

P³ представляет собой (P) или часть (P),

L³ представляет собой (L) или часть (L), и (T) представляет собой направляющий фрагмент.

В предпочтительном варианте реализации изобретения R выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила.

Как раскрыто в данном документе, в одном варианте реализации изобретения N-ацилсульфонамид-содержащие конъюгаты могут быть синтезированы таким образом, что N-ацилсульфонамидный фрагмент ковалентно связан с химической группой, (R), которая содержит атом азота, образующий пептидную связь (связывающая пептидная связь (JPB)) с карбонильной группой аминокислоты, которая формирует часть линкера (L). В одном варианте реализации изобретения JPB представляет собой ферментативно расщепляемую связь. Фрагменты, похожие на N-ацилсульфонамиды, такие как N-ацилсульфамиды (в силу характера (R)), могут быть также использованы.

Соответственно, в некоторых вариантах реализации изобретения предложено соединение формулы (I), где (P) связана с (T) через (L), как показано в следующей структуре:

где -L³-(T) имеет следующую структуру:

где P³ представляет собой остаток полезного соединения (P), и -NH- группа, связанная с Rʺ, образует пептидную связь, называемую в данном документе связывающей пептидной связью (JPB), с (AA)¹ в формуле (III),

где Rʺ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероарила, -COR²⁷-, -CSR²⁷-, -OR²⁷- и -NHR²⁷- где каждый R²⁷ представляет собой, независимо, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил, и необязательно замещенный гетероарил, где каждая AA независимо представляет собой аминокислоту, где x равно целому числу от 0 до 25, где (L') представляет собой остаток (при его наличии) линкера (L), где (T) представляет собой направляющий фрагмент. В одном варианте реализации изобретения (AA)¹-(AA)_x вместе взятые содержат последовательность аминокислот, способную облегчить ферментативное расщепление JPB.

В одном варианте реализации изобретения множество полезных фрагментов (P) прикреплены к единственному линкерному фрагменту (L).

В некоторых вариантах реализации изобретения -Rʺ-NH- в формуле (XXVI) выбрана из группы, состоящей из:

В некоторых вариантах реализации изобретения -Rʺ-NH- в формуле (XXVI) выбрана из группы, состоящей из:

В одном варианте реализации изобретения расщепление соединения формулы (I) приводит к соединению формулы (IV):

где P' соответствует P³ в формуле (XXVI).

В одном варианте реализации изобретения расщепление соединения формулы (I) приводит к соединению формулы (XIX)

где P' соответствует P³ в формуле (XXVI).

В одном варианте реализации изобретения расщепление JPB приводит к соединению формулы (V):

где P' соответствует P³ в формуле (XXVI).

В одном варианте реализации изобретения изобретение предлагает способ получения композиции имеющей структуру (I). Композиции, имеющие структуру (I) могут быть получены с использованием широкого спектра синтетических путей и широкого спектра реагентов. Например, N-ацилсульфонамидный фрагмент и R группа формулы (XXVI) могут присутствовать в одном и том же реагенте или разных реагентах. N-Ацилсульфонамидный фрагмент может присутствовать в одном реагенте или может быть образован двумя реагентами на стадии реакции соединения. JPB может быть целой в пределах реагента или может быть образована двумя реагентами на стадии реакции связывания. JPB может быть целой в пределах одного реагента, который также содержит последовательность аминокислот, облегчающую ферментативное расщепление JPB, или аминокислотная последовательность, облегчающая ферментативное расщепление, может быть образована, и привнесена вместе с JPB, с помощью нескольких реагентов на стадии реакции сочетания. Следует отметить, что в комбинации с группой "R", соединения формул (I), (II) (III), (XXI), и (XXVI) могут быть подобными N-ацилсульфонамидам (например, сульфамамиды).

В другом варианте реализации изобретения предложенная фармацевтическая композиция содержит композицию, имеющую структуру (I), или стереоизомер, фармацевтически приемлемую соль или его пролекарство, и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.

В другом варианте реализации изобретения предложен метод использования композиции имеющей структуру (I) в терапии. В частности, настоящее описание предлагает способ лечения рака у млекопитающих, включающий введение млекопитающему, которое нуждается в этом, эффективного количества композиции имеющей структуру (I) или фармацевтической композиции, содержащей композицию имеющую структуру (I), и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.

В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает способ ингибирования роста опухоли у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, которое нуждается в этом, эффективного количества композиции имеющей структуру (I) или фармацевтической композиции, содержащей композицию имеющую структуру (I), и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.

В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает способ уничтожения раковых клеток in vitro с использованием композиции имеющей структуру (I). В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает способ уничтожения раковых клеток in vivo у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, которое нуждается в этом, эффективного количества композиции имеющей структуру (I) или фармацевтической композиции, включающей композицию имеющую структуру (I), и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.

Эти и другие аспекты описания будут очевидно раскрыты при ссылке на последующее подробное описание.

Краткое описание чертежей

Фигура 1 иллюстрирует графическое изображение данных цитотоксичности для Соединения A по отношению к трем клеточным линиям (НСС1954, NCI-N87, и Jurkat).

Фигура 2 иллюстрирует графическое изображение данных цитотоксичности для Соединения B по отношению к трем клеточным линиям (НСС1954, NCI-N87, и Jurkat).

Фигура 3 иллюстрирует графическое изображение данных цитотоксичности для Соединения C по отношению к трем клеточным линиям (НСС1954, NCI-N87, и Jurkat).

Фигура 4 иллюстрирует графическое изображение данных цитотоксичности для Соединения D по отношению к трем клеточным линиям (НСС1954, NCI-N87, и Jurkat).

Фигура 5 иллюстрирует графическое изображение данных цитотоксичности для Соединения E по отношению к трем клеточным линиям (НСС1954, NCI-N87, и Jurkat).

Фигура 6 иллюстрирует графическое изображение данных цитотоксичности для Соединения F по отношению к двум клеточным линиям (НСС1954 и NCI-N87).

Фигура 7 иллюстрирует графическое изображение данных цитотоксичности для Соединения G по отношению к трем клеточным линиям (НСС1954, NCI-N87, и Jurkat).

Фигура 8 иллюстрирует графическое изображение данных цитотоксичности для Соединения Н по отношению к трем клеточным линиям (НСС1954, NCI-N87, и Jurkat).

Фигура 9 иллюстрирует графическое изображение данных цитотоксичности для Соединения I по отношению к трем клеточным линиям (НСС1954, NCI-N87, и Jurkat).

Фигура 10 иллюстрирует графическое изображение данных цитотоксичности для Соединения J по отношению к двум клеточным линиям (НСС1954 и NCI-N87).

Фигура 11 иллюстрирует графическое изображение данных цитотоксичности для Соединения K по отношению к трем клеточным линиям [НСС1954 (рак молочной железы человека), NCI-N87 (рак желудка человека), и Jurkat (клеточный T лейкоз человека)].

Фигура 12 иллюстрирует массу тел NSG мышей с привитыми NCI-N87 раковыми клетками и подвергшимся на 22 день однократной BB инъекции одного из: носителя, T-DM1, Т-Соединения I или Т-Соединения K с концентрацией 12 мг/кг, n=10.

Фигура 13 иллюстрирует объемы опухоли NSG мышей с привитыми NCI-N87 раковыми клетками и подвергшимися на 22 день однократной BB инъекции одного из: носителя, Т-DM1, Т-Соединения I или Т-Соединения K в дозе 12 мг/кг, n=10.

Фигура 14 иллюстрирует выживание NSG мышей с привитыми NCI-N87 раковыми клетками и подвергшимися на 22 день однократной BB инъекции одного из: носителя, T-DM1, T-I, либо Т-K в дозе 12 мг/кг, n=10.

Фигура 15 иллюстрирует массу тел изучаемых мышей, представленный как процентное изменение базовой линии (27 день), для NSG мышей с привитыми NCI-N87 раковыми клетками (с матригелем) и подвергшимися на 27 день, однократной BB инъекции одного из: носителя, Трастузумаба (Т), T-DM1, Т-Соединения Е в дозе 1, 3, 7 или 12 мг/кг. Данные приведены как средние значения (+/-SEM) n=6 (Veh и Т), n=7 (T-DM1 3 мг/кг), и n=8 для всех остальных групп.

Фигура 16 иллюстрирует объемы опухолей изучаемых мышей после однократной дозы ADC, Трастузумаба, или носителя.

Фигура 17 иллюстрирует время рецидива опухоли (2-кратное увеличение в объеме по сравнению с днем лечения) NCI N87 объемы опухолей (с матригелем) у NSG мыши подвергшейся на 27 день, одноразовой BB инъекции носителя, Трастузумаба (Т), T-DM1, или Т-Соединения E в дозе 1, 3, 7 или 12 мг/кг. Данные представлены в виде средних значений (+/SEM) n=6 (Veh и Т), n=7 (T-DM1 3 мг/кг), и n=8. ***P<0,001.

Подробное описание

В последующем описании, некоторые конкретные детали изложены для обеспечения полного понимания различных вариантов реализации изобретения. Однако специалист в данной области техники поймет, что описание может использоваться без данных деталей.

Если из контекста не следует иное, в настоящем описании и формуле изобретения, слово "включать" и его вариации, такие как, "включает" и "включающий" должны интерпретироваться в открытом, широком смысле, то есть, как "включая, но не ограничиваясь".

Ссылка по всему писанию на "один вариант реализации изобретения" или "вариант реализации изобретения" означает, что конкретный признак, структура или характеристика описанные в связи с вариантом реализации изобретения включены, по меньшей мере, в один из вариантов реализации данного изобретения. Таким образом, появление фраз "в одном варианте реализации изобретения" или "в варианте реализации изобретения" в различных местах по всей этой спецификации не обязательно все они относятся к одному варианту реализации изобретения. Кроме того, конкретные особенности, структуры, или характеристики могут быть объединены любым подходящим способом в одном или более вариантах реализации изобретения.

Если не указано иное, следующие термины и фразы, используемые в данном документе, имеют следующие значения. В случае торговых наименований, используемых в данном документе, заявители намерены самостоятельно включать торговое наименование лекарственной формы, лекарственного препарата генерика, и активного фармацевтического ингредиента(ов) торгового наименования продукта.

Термин "антитело", как он используется в данном документе, используется в широком смысле и конкретно охватывает интактные моноклональные антитела, поликлональные антитела, мультиспецифические антитела (например, биспецифические антитела) образованные из, по меньшей мере, двух интактных антител, и фрагменты антител, при условии, что они проявляют желаемую биологическую активность. Термин "антитело" относится к полноразмерной иммуноглобулиновой молекуле или функционально активному фрагменту полноразмерной иммуноглобулиновой молекуле, т.е., молекулы, которая содержит сайт связывания антигена, который иммуноспецифично связывает интересующую мишень или его часть. Иммуноглобулины, описанные в данном документе, могут быть любого типа (например, IgG, IgE, IgM, IgD, и IgA), класса (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2) или субкласса иммуноглобулиновой молекулы. Иммуноглобулины могут быть получены из любых источников. В одном аспекте изобретения иммуноглобулины происходят из человека, мыши, или кролика. В другом аспекте изобретения, антитела являются поликлональными, моноклональными, мульти-специфическими (например, биспецифическими), человеческими, гуманизированными или химерными антителами, линейными, моноцепочечными антителами, диателами, максителами, минителами, Fv, Fab фрагментами, F(ab') фрагментами, F(ab')2 фрагментами, фрагменты, полученные экспресированием библиотеки Fab, анти-идиотические (anti-id) антитела, CDR's, и эпитоп-связывающие фрагменты любого из вышеперечисленных антител, которые иммуноспецифически связывают антиген мишень.

Термин "моноклональное антитело", как он используется в данном документе, относится к антителу, полученному из популяции по существу гомогенных антител, т.е., отдельные антитела составляющие популяцию являются идентичными, за исключением возможных природных мутаций, которые могут присутствовать в незначительных количествах. Моноклональные антитела включают "химерные" антитела в которых часть тяжелой и/или легкой цепи является идентичной или гомологичной соответствующей последовательности в антителах, полученных из конкретного вида или принадлежащих к конкретному классу антител или субклассу, в то время как остаток цепи(ей) является идентичным или гомологичным соответствующим последовательностям в антителах производных из других видов или принадлежащих к другому классу или субклассу антител, а также фрагменты таких антител (см, например, Пат США №4,816,567; и Morrison et al., 1984, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-6855). Моноклональные антитела, также включают гуманизированные антитела, и могут содержать полностью константный человеческий участок и CDRs из нечеловеческого источника.

"Интактное антитело", является антителом, которое включает антиген-связывающий вариабельный участок, так же как и легкоцепочечный константный домен (CL) и тяжелоцепочечные константные домены, C_H1, C_H2 и C_H3. Константные домены могут быть доменами с естественной константной последовательностью (например, человеческими нативными константными доменами) или их вариантами аминокислотной последовательности.

Интактное антитело может иметь одну или более "эффекторных функций", которые относятся к биологическим активностям относящимся к Fc региону (нативной последовательности Fc региона или аминокислотной последовательности варианта Fc региона) антитела. Примеры эффекторных функций антител включают C1q связывание; комплементзависимую цитотоксичность (CDC; Fc рецепторное связывание; антитело-зависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность (ADCC); фагоцитоз; сниженная регуляция рецепторов поверхности клетки (например, В клеточный рецептор; BCR), и т.д. В некоторых вариантах реализации изобретения у антитела отсутствует эффекторная функция.

"Фрагменты антител" включают часть интактного антитела, предпочтительно содержащего его антиген-связывающую или вариабельную область. Примеры фрагментов антител включают Fab, Fab', F(ab')₂, и Fv фрагменты; диатела; линейные антитела; моноцепочечные молекулы антител; макситела; минитела; и мультиспецифические антитела образованные из фрагмента(ов) антител.

"Изолированное антитело" является таким, которое было идентифицировано и отделено и/или извлечено из компонента его природного окружения. Загрязняющие компоненты его природного окружения являются материалами, которые будут мешать диагностическому или терапевтическому использованию антитела, и могут включать ферменты, гормоны, и другие белковые или небелковые растворенные вещества. В некоторых вариантах реализации изобретения антитело будет очищено (1) до более чем 95% по массе антитела, как определенно по методу Лоури, и наиболее предпочтительно более чем 99% по массе, (2) до степени достаточной для получения по меньшей мере 15 остатков N-концевой или внутренней аминокислотной последовательности при использовании секвенатора с вращающейся чашей, или (3) до гомогенности по SDS-PAGE при восстановительных и не-восстановительных условиях с использованием Coomassie blue или, предпочтительно, окрашивания серебром. Изолированное антитело включает антитело in situ в рекомбинантных клетках, так как, по меньшей мере, один компонент природного окружения антитела не будет присутствовать. Обычно, однако, изолированное антитело будет получено с по меньшей мере одним этапом очистки.

Антитело "которое связывает" интересующий антиген является способным связывать этот антиген с достаточной аффиностью, такой что антитело используется для мечения клеток, экспрессирующих антиген.

Полипептид с "нативной последовательностью", является полипептидом который имеет такую же аминокислотную последовательность, что и пептид, полученный из природных источников. Такие полипетиды с нативной последовательностью могут быть изолированными из природных источников или могут быть получены рекомбинантным или синтетическим путем. Таким образом, полипептид с нативной последовательностью может иметь аминокислотную последовательность полипептида человека натурального происхождения, полипетида мыши, или полипетида любого другого млекопитающего.

Термин "аминокислота" или "остаток", как он используется в данном документе, включает любую из двадцати природных аминокислот, D-форму любой из природных аминокислот, неприродные аминокислоты, и их производные, аналоги, или миметики. Любая аминокислота, включая природные аминокислоты, может быть приобретена коммерчески или получена любыми способами известными в данной области техники. Примеры неприродных аминокислот включают цитрулин ("Cit"), норлейцин ("Nle"), норвалин ("Nva"), β-Аланин, L- или D-нафталанин, онитин ("Orn"), гомоаргинин (homoArg) и другие хорошо известные в пептидной науке, включая описанные в М. Bodanzsky, "Principles of Peptide Synthesis," 1st and 2nd revised ed., Springer-Verlag, New York, N.Y., 1984 и 1993, и Stewart and Young, "Solid Phase Peptide Synthesis," 2nd ed., Pierce Chemical Co., Rockford, 111., 1984, обе из которых включены в данный документ посредством ссылки. Распространенные аминокислоты могут быть названы либо их полным названием, стандартным однобуквенным обозначением, или стандартным трехбуквенным обозначением, например: A, Ala, аланин; C, Cys, цистеин; D, Asp, аспарагиновая кислота; Е, Glu, глутаминовая кислота; F, Phe, фенилаланин; G, Gly, глицин; Н, His, гистидин; I, Ile изолейцин; K, Lys, лизин; L, Leu, лейцин; М, Met, метионин; N, Asn, аспарагин; P, Pro, пролин; Q, Gin, глютамин; R, Arg, аргинин; S, Ser, серии; Т, Thr, треонин; V, Val, валин; W, Trp, триптофан; X, Hyp, гидроксипролин; Y, Tyr, тирозин. Любая и все аминокислоты в композиции в данном документе могут быть природными, синтетическими, и их производными или миметиками. Когда остаток аминокислоты содержит один или более хиральных центров, любой D, L, мезо, трео или эритро (при необходимости) рацематы или их смеси, входят в объем данного изобретения. Термины "внутриклеточно расщеплен" и "внутриклеточное расщепление" относятся к процессам или реакциям композиции изобретения внутри клетки. В одном варианте реализации изобретения связывающая пептидная связь (JPB), связывающая полезное соединение (Р) с линкером (L), разрывается, высвобождая полезное соединение (Р) из направляющего фрагмента (Т) внутри клетки. Как описывается в данном документе, в одном варианте реализации изобретения освобожденное полезное соединение (Р) может быть соединением имеющим структуру выбранную из формулы (IV) и формулы (V) и формулы (XIX). Также могут быть использованы другие линкеры известные в данной области техники. Линкеры могут быть, например, расщепляемые ферментативно или химически, или неразщепляемые. В одном варианте реализации изобретения полезное соединение может быть освобождено посредством деградации или протеолиза (Т) и/или (L).

Термины "внеклеточно расщепленный" или "внеклеточное расщепление" относятся к процессам или реакциям композиции изобретения вне клетки. В одном варианте реализации изобретения связывающая пептидная связь (JPB) связывающая полезное соединение (Р) с линкером (L) разрывается, высвобождая полезное соединение (Р) из направляющего фрагмента (Т) снаружи клетки. Как описывается в данном документе, в одном варианте реализации изобретения освобожденное полезное соединение (Р) является соединением имеющим структуру, выбранную из формулы (IV), (V) и (XIX). Соответственно, в одном варианте реализации изобретения изобретение предлагает композиции, имеющие следующую структуру:

где (Р) полезное соединение, (L) отсутствует или представляет собой линкер, (Т) представляет собой направляющий фрагмент, и m равно целому числу от 1 до 10. В некоторых вариантах реализации изобретения m равно 1.

В одном варианте реализации изобретения (Р) связанно с (Т) через (L), как показано в следующей структуре:

где:

R выбран из группы содержащей необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероарил, -COR²⁷-, -CSR²⁷-, -OR²⁷- и -NHR²⁷- где каждый R²⁷ представляет собой, независимо, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил, и необязательно замещенный гетероарил;

P³ представляет собой (P) или часть (P);

L³ представляет собой (L) или часть (L); и

(Т) представляет собой направляющий фрагмент.

В одном варианте реализации изобретения (P)-(L) имеет следующую структуру (II):

где:

R выбран из группы содержащей необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероарил, -COR²⁷-, -CSR²⁷-, -OR²⁷- и -NHR²⁷- где каждый R²⁷ представляет собой, независимо, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил, и необязательно замещенный гетероарил, или R отсутствует,

(Р) представляет собой P³ и любую часть N-ацилсульфонамид-R связанную с P³ после расщепления; и

(L) представляет собой L³ и любую часть N-ацилсульфонамид-R связанную с L³ после расщепления.

В предпочтительном варианте реализации изобретения R выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила, или R отсутствует.

В некоторых вариантах реализации изобретения R присутствует и (L) присутствует и (L) и (Р) связанны пептидной связью.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) и L³ отсутствуют и (Р) связан с (Т) и имеет структуру Формулы (XXXI):

Самые разнообразные соединения находят применение в качестве (Р) в изобретении. Особый интерес включают антибиотики, диагностирующие средства (например, определяемые метки), противовоспалительные средства, противовирусные средства, цитотоксические средства, или противораковые лекарственные средства.

Предложены также соединения формулы (I), которые энзиматически расщепляемы и способны высвобождать полезное соединение (Р) из направляющего фрагмента (Т) во время ферментативного расщепления. В некоторых вариантах реализации изобретения полезное соединение представляет собой биологически активное соединение. В некоторых вариантах реализации изобретения полезное соединение представляет собой цитотоксическое или цитостатическое лекарственное средство.

Как описано в данном документе, N-ацилсульфонамид-содержащие расщепляемые конъюгаты могут быть синтезированы таким образом, что N-ацил сульфонамид фрагмент является ковалентно связанным с химической группой, (R), которая ковалентно связанна с атомом азота, который образует ферментативно расщепляемую пептидную связь (связывающую пептидную связь (JPB)) с карбонильной группой аминокислоты, образующей часть аминокислотной последовательности облегчающей ферментативное расщепление JPB. Фрагменты похожие на N-ацилсульфонамиды, такие как N-ацилсульфамамиды, также могут быть использованы.

В одном варианте реализации изобретение предлагает соединения Формулы I:

где (P) представляет собой биологически активное вещество, имеющее следующую структуру (XXX):

В одном варианте реализации изобретения изобретение предлагает соединения Формулы I:

где (Р) представляет собой биологически активное вещество, (L) представляет собой линкер, (Т) представляет собой направляющий фрагмент, и m равно целому числу от 1 до 10, где (Р) имеет следующую структуру XX:

и где (L)-(T) имеет следующую структуру (III):

где P⁴ остаток полезного соединения (Р) и -NH- группа связанна с R в формуле (II) образуя пептидную связь, называемую в данном документе связывающей пептидной связью (JPB), с (AA)¹ в формуле (III), где JPB ферментативно расщепляема, где R выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероарила, -COR²⁷-, -CSR²⁷-, -OR²⁷-, и -NHR²⁷- где каждый R²⁷ представляет собой, независимо, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил, и необязательно замещенный гетероарил, где каждый AA представляет собой независимо аминокислоту, где x равно целому числу от 0 до 25, где (L') остаток (при его наличии) линкера (L), где (Т) представляет собой направляющий фрагмент, и где (AA)¹-(AA)_х взятые вместе содержат аминокислотную последовательность способную облегчить ферментативное расщепление JPB.

В некоторых вариантах реализации изобретения m равно 1.

В некоторых вариантах реализации изобретения R выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила, и необязательно замещенного гетероарила.

В одном варианте реализации изобретения -R-NH- формулы XX выбраны из:

где каждый n независимо равен целому числу от 0-10.

В предпочтительном варианте реализации изобретения -R-NH- формулы XX выбран из:

В предпочтительном варианте реализации изобретения -R-NH- формулы XX выбран из:

В одном варианте реализации изобретения расщепление приводит к соединению формулы (IV):

где P' соответствует P⁴ в формуле XX.

В одном варианте реализации изобретения расщепление приводит к соединению формулы (XIX):

где P' соответствует P⁴ в формуле XX.

В одном варианте реализации изобретения расщепление JPB приводит к соединению формулы (V):

где P' соответствует P⁴ в формуле XX.

В одном варианте реализации изобретения P имеет следующую структуру (VI)

или стереоизомер, пролекарство или их фармацевтически приемлемую соль, и (L)-(T) имеет следующую структуру (III):

где:

m равно целому числу от 1 до 10;

R₁ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила, -COR₂₄-, -CSR₂₄-, -OR₂₄-, и -NHR₂₄- где каждый R₂₄ представляет собой, независимо, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил и необязательно замещенный гетероарил;

R₂ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила;

R₃ выбран из группы, состоящей из H и C_1-6 алкила;

R₄ выбран из группы, состоящей из H и C_1-6 алкила; и

R₅ выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила и -SH, и

где -NH- группа связана с R₁ в формуле (VI) образуя связывающую пептидную связь (JPB) с (AA)¹ в формуле (III), где JPB ферментативно расщепляема, где каждая AA представляет собой независимо аминокислоту, где x равно целому числу от 0 до 25, где n (L') представляет собой остаток (при его наличии) линкера (L), где (Т) представляет собой направляющий фрагмент, и где (АА)¹-(АА)_х взятые вместе содержат аминокислотную последовательность, которая облегчает ферментативное расщепление (JPB).

В предпочтительном варианте изобретения R₃ представляет собой H;

В предпочтительном варианте изобретения R₄ представляет собой метил.

В предпочтительном варианте изобретения m равно 1.

В одном варианте реализации изобретения R₁ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила.

В дополнительном варианте реализации изобретения каждый необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил и необязательно замещенный гетероарил независимо необязательно является замещенным =O, =S, -OH, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ представляет собой, независимо, алкил необязательно замещенный на галоген, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения каждый необязательно замещенный арил и необязательно замещенный гетероарил выбран независимо из группы, состоящей из необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного нафтила, необязательно замещенного антрацила, необязательно замещенного фенантрила, необязательно замещенного фурила, необязательно замещенного пирролила, необязательно замещенного тиофенила, необязательно замещенного бензофурила, необязательно замещенного бензотиофенила, необязательно замещенного хинолила, необязательно замещенного изохинолила, необязательно замещенного имидазолила, необязательно замещенного тиазолила, необязательно замещенного оксазолила, и необязательно замещенного пиридинила.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₂ выбран из одной из следующих структур (A), (B), (C), (D):

и

где:

каждый Q независимо выбран из CR₂₉ или N;

каждый Z независимо выбран из C(R₂₉)₂, NR₂₉, S, или O;

каждый R₂₉ независимо выбран из группы, состоящей из H, -OH, -R₂₈, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -R₂₈NH₂, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₂ выбран из группы, состоящей из:

где каждый R₂₉ независимо выбран из группы, состоящей из H, -OH, -R₂₈, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -R₂₈NH₂, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₂ выбран из группы, состоящей из:

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₂ представляет собой:

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₃, R₄ и R₅ каждый представляют собой метилы.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₃ представляет собой H, R₄ представляет собой метил, и R₅ представляет собой метил.

Понятно, что в любом варианте реализации изобретения соединения структуры (VI), как указано выше, и любые специфические заместители, изложенные в данном документе для R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₂₈, или R₂₉ группы в соединениях структуры (VI), как определенно в данном документе, могут независимо комбинироваться с другими вариантами реализации изобретения и/или заместителями соединений структуры (VI) образуя варианты реализации изобретения данного описания конкретно не указанные выше. Кроме того, в том случае, если список заместителей указанных для какого-либо конкретного R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₂₈, или R₂₉ в конкретном варианте реализации изобретения и/или в пункте формулы изобретения, понятно, что каждый отдельный заместитель может быть удален из отдельного варианта реализации изобретения и/или пункта формулы изобретения, и что оставшийся список заместителей будет рассматриваться в пределах объема настоящего описания.

В одном варианте реализации изобретения P имеет следующую структуру (XIV):

или стереоизомер, пролекарство или их фармацевтически приемлемую соль, и (L^a)-(T) имеет следующую структуру (III):

где:

R₆ и R₇ независимо выбраны из группы, состоящей из: H и насыщенного или ненасыщенного фрагмента имеющего линейный, разветвленный, или неароматический циклический скелет, содержащий от одного до десяти атомов углерода, и углеродные атомы необязательно замещены на: -OH, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -СНО, -COSH, или -NO₂; или R₇ и R₁₀ соединены и образуют цикл;

R₈ и R₉ независимо выбраны из группы, состоящей из: H, R', ArR'-, или R₈ и R₉ соединены, образуя цикл;

R₁₀ выбран из группы, состоящей из: H, R', ArR'-, и Ar; или R₁₀ и R₇ соединены, образуя цикл;

R₁₁ выбран из группы, состоящей из: H, R', и ArR'-;

R₁₂ и R₁₃ независимо выбраны из группы, состоящей из: H, R', и ArR'-;

R₁₄ представляет собой:

и

R₁₅ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила, -COR₂₄-, -CSR₂₄-, -OR₂₄- и -NHR₂₄- где каждый R₂₄ независимо представляет собой, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил и необязательно замещенный гетероарил;

где R' определен как насыщенный или ненасыщенный фрагмент имеющий линейный, разветвленный, или неароматический циклический скелет, содержащий от одного до десяти атомов углерода, от нуля до четырех атомов азота, от нуля до четырех атомов кислорода, и от нуля до четырех атомов серы, и атомы углерода представляют собой атомы необязательно замещенные на: =O, =S, ОН, -OR₁₆, -O₂CR₁₆, -SH, -SR₁₆, -SOCR₁₆, -NH₂, -NHR₁₆, -N(R₁₆)₂, -NHCOR₁₆, -NR₁₆COR₁₆, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₁₆, -CHO, -COR₁₆, -CONH₂, -CONHR₁₆, -CON(R₁₆)₂, -COSH, -COSR₁₆, -NO₂, -SO₃H, -SOR₁₆, -SO₂R₁₆, где R₁₆ представляет собой линейную, разветвленную или циклическую, с от одного до десяти атомами углерода насыщенную или ненасыщенную алкильную группу;

Цикл, образованный соединением R₈ и R₉ представляет собой от трех до семичленный неароматический циклический скелет в рамках определения R',

Y определен как фрагмент, выбранный из группы, состоящей из: линейной, насыщенной или ненасыщенной, от одного до шести атомов углерода алкильной группы, необязательно замещенной R', ArR'-, или X; и,

X определен как фрагмент, выбранный из группы, состоящей из: -OH, -OR', =O, =S, -O₂CR', -SH, -SR', -SOCR', -NH₂, -NHR', -N(R')₂, -NHCOR', -NRCOR', -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R', -CHO, -COR', -CONH₂, -CONHR', -CON(R')₂, -COSH, -COSR', -NO₂, -SO₃H, -SOR', и -SO₂R'; и

где -NH- группа связана с R₁₅ в формуле (XIV) образуя связывающую пептидную связь (JPB) с (AA)¹ в формуле (III), где JPB ферментативно расщепляема, где каждая AA представляет собой независимо аминокислоту, где x равно целому числу от 0 до 25, где (L') представляет собой остаток (при его наличии) линкера (L), где (Т) представляет собой направляющий фрагмент, и где (AA)¹-(АА)_х взятые вместе содержат аминокислотную последовательность, которая способна облегчать ферментативное расщепление (JPB).

В одном варианте реализации изобретения Ar представляет собой ароматический цикл выбранный из группы, состоящей из: фенил, нафтил, антрацил, пирролил.

В дополнительном варианте реализации изобретения каждый необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный аллил, необязательно замещенный гетероциклил и необязательно замещенный гетероарил представляет собой, независимо, необязательно замещенный =O, =S, -OH, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈ где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения каждый необязательно замещенный арил и необязательно замещенный гетероарил выбран, независимо, из группы состоящей из необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного нафтила, необязательно замещенного антрацила, необязательно замещенного фенантрила, необязательно замещенного фурила, необязательно замещенного пирролила, необязательно замещенного тиофенила, необязательно замещенного бензофурила, необязательно замещенного бензотиофенила, необязательно замещенного хинолила, необязательно замещенного изохинолила, необязательно замещенного имидазолила, необязательно замещенного тиазолила, необязательно замещенного оксазолила, и необязательно замещенного пиридинила.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₀ выбран из одной из следующих структур (A), (B), (C), (D):

и

где:

каждый Q независимо выбран из CR₂₉ или N;

каждый Z независимо выбран из C(R₂₉)₂, NR₂₉, S, или O;

каждый R₂₉ независимо выбран из группы, состоящей из H, -OH, -R₂₈, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -R₂₈NH₂, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₀ выбран из группы, состоящей из:

и

где каждый R₂₉ независимо выбран из группы, состоящей из H, -OH, -R₂₈; -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -R₂₈NH₂, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил, необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₀ выбран из группы, состоящей из:

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₀ представляет собой:

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₆, и R₇ каждый представляют собой метилы.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₆ представляет собой H и R₇ представляет собой метил.

В одном варианте реализации изобретения R₁₂ представляет собой разветвленный C4 алкил.

Понятно, что в любом варианте реализации изобретения соединения структуры (XIV), как указано выше в данном документе, и любые специфические заместители, изложенные в данном документе для R₆, R₇, R₈, R₉, R₁₀, R₁₁, R₁₂, R₁₃, R₁₄, R₁₅, R₁₆, R₂₈, или R₂₉ группы в соединениях структуры (XIV), как указанно выше, могут независимо комбинироваться с другими вариантами реализации изобретения и/или заместителями соединений структуры (XIV) образуя варианты реализации изобретения данного описания конкретно не указанные выше. Кроме того, в том случае, если список заместителей указанных для какого-либо конкретного R₆, R₇, R₈, R₉, R₁₀, R₁₁, R₁₂, R₁₃, R₁₄, R₁₅, R₁₆, R₂₈, или R₂₉ в конкретном варианте реализации изобретения и/или в пункте формулы изобретения, понятно, что каждый отдельный заместитель может быть удален из отдельного варианта реализации изобретения и/или пункта формулы изобретения, и что оставшийся список заместителей будет рассматриваться в пределах объема настоящего описания.

В одном варианте реализации изобретения P имеет следующую структуру (XV):

или стереоизомер, пролекарство или их фармацевтически приемлемую соль, и (L)-(T) имеет следующую структуру (III):

где:

R₁₇ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила, -COR₂₄-, -CSR₂₄-, -OR₂₄-, и -NHR₂₄-, где каждый R₂₄ независимо представляет собой необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил и необязательно замещенный гетероарил.;

R₁₈ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила;

R₁₉ выбран из группы, состоящей из H и C_1-6 алкила;

R₂₀ выбран из группы, состоящей из H и C_1-6 алкила;

R₂₁ и R₂₇ независимо выбраны из группы, состоящей из H, C_1-6 алкила и -SH, при условии что R₂₁ и R₂₇ оба не могут быть H;

R₂₂, R₂₃, R₂₄ и R₂₅ независимо выбраны из группы, состоящей из H и C_1-6 алкила, по меньшей мере один из R₂₂ и R₂₃ представляет собой H; или R₂₃ и R₂₄ образуют двойную связь, R₂₂ представляет собой H, и R₂₅ представляет собой H или C_1-6 алкил; и

R₂₆ выбран из группы, состоящей из H и C_1-6 алкила; и

где -NH- группа связанна с R₁₇ в формуле (XV) образуя связывающую пептидную связь (JPB) с (AA)¹ в формуле (III), где JPB ферментативно расщепляема, где каждая AA представляет собой независимо аминокислоту, где x равно целому числу от 0 до 25, где (L') представляет собой остаток (при его наличии) линкера (L), где (Т) представляет собой направляющий фрагмент, и где (AA)¹-(AA)_x взятые вместе содержат аминокислотную последовательность, которая способна облегчать ферментативное расщепление (JPB).

В дополнительном варианте реализации изобретения каждый необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил и необязательно замещенный гетероарил независимо представляет собой необязательно замещенный на =O, =S, -OH, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил, необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения каждый необязательно замещенный арил и необязательно замещенный гетероарил независимо выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного нафтила, необязательно замещенного антрацила, необязательно замещенного фенантрила, необязательно замещенного фурила, необязательно замещенного пирролила, необязательно замещенного тиофенила, необязательно замещенного бензофурила, необязательно замещенного бензотиофенила, необязательно замещенного хинолила, необязательно замещенного изохинолила, необязательно замещенного имидазолила, необязательно замещенного тиазолила, необязательно замещенного оксазолила, и необязательно замещенного пиридинила.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₈ выбран из одной из следующих структур (A), (B), (C), (D):

и

где:

каждый Q независимо представляет собой CR₂₉ или N;

каждый Z независимо представляет собой C(R₂₉)₂, NR₂₉, S, или O;

каждый R₂₉ независимо выбран из группы, состоящей из H, -OH, -R₂₈, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -R₂₈NH₂, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил, необязательно замещенный на галоген, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₈ выбран из группы, состоящей из:

и

где каждый R₂₉ независимо выбран из группы, состоящей из H, -OH, -R₂₈, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -R₂₈NH₂, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил, необязательно замещенный на галоген, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₈ выбран из группы, состоящей из:

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₈ представляет собой:

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₉, R₂₀, R₂₁, и R₂₇ каждый представляют собой метилы.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₉ представляет собой H, R₂₀ представляет собой метил, R₂₁ представляет собой метил, и R₂₇ представляет собой метил.

Понятно, что в любом варианте реализации изобретения соединения структуры (XV), как указано выше, и любые специфические заместители, изложенные в данном документе для R₁₇, R₁₈, R₁₉, R₂₀, R₂₁, R₂₂, R₂₃, R₂₄, R₂₅, R₂₆, R₂₇, R₂₈, или R₂₉ группы в соединениях структуры (XV), как указано выше, могут независимо комбинироваться с другими вариантами реализации изобретения и/или заместителями соединений структуры (XV) образуя варианты реализации изобретения данного описания конкретно не указанные выше.

Кроме того, в том случае, если список заместителей указанных для какого-либо конкретного R₁₇, R₁₈, R₁₉, R₂₀, R₂₁, R₂₂, R₂₃, R₂₄, R₂₅, R₂₆, R₂₇, R₂₈, или R₂₉ в конкретном варианте реализации изобретения и/или в пункте формулы изобретения, понятно, что каждый отдельный заместитель может быть удален из отдельного варианта реализации изобретения и/или пункта формулы изобретения, и что оставшийся список заместителей будет рассматриваться в пределах объема настоящего описания.

В одном варианте реализации изобретения -R₁-NH- в структуре (VI), -R₁₅-NH- в структуре (XIV), или -R₁₇-NH- в структуре (XV) выбран из:

и

где каждый n независимо равен целому числу от 0-10.

В предпочтительном варианте изобретения, -R₁-NH- в структуре (VI), -R₁₅-NH- в структуре (XIV), или -R₁₇-NH- в структуре (XV) выбран из:

В предпочтительном варианте изобретения, -R₁-NH- в структуре (VI), -R₁₅-NH- в структуре (XIV), или -R₁₇-NH- в структуре (XV) выбран из:

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы (XI):

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R¹ выбран из: амино-C₁-C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, амино-гетероциклила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкилтио, карбоксила, карбоксамида, C₃-C₇ циклоалкила, C₃-C₇ циклоалкил-C₁-C₆ алкила, гуанидина, галогена, C₁-C₆ галогеналкила, гетероциклила, гетероциклил-C₁-C₆ алкила, гидроксила, и тио; или

R¹ представляет собой R^aR^bNCH(R^c)-;

R^a выбран из: H и C₁-C₆ алкила;

R^b представляет собой C₁-C₆ алкила; и

R^c представляет собой R^d-CH(CH₃)₂-; и

R^d выбран из: H, арила, C₃-C₇ циклоалкила, и гетероарила, каждый из которых необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₄ ацилтио, C₂-C₄ алкенила, C₁-C₄ алкила, C₁-C₄ алкиламино, C₁-C₄ алкилокси, амино, амино-C₁-C₄ алкила, галогена, C₁-C₄ галогеналкила, гидроксила, гидрокси-C₁-C₄ алкила, и тио, где C₂-C₄ алкенил, C₁-C₄ алкиламино и C₁-C₄ алкилокси представляют собой дополнительно необязательно замещенные одним заместителем, выбранным из C₁-C₄ алкиларил, гидроксил, и тио; или

R^b и R^c взятые вместе с атомами, к которым они оба присоединены, образуют гетероциклилдиил;

R² выбран из: C₂-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₄-C₇ циклоалкила, C₃-C₇ циклоалкил-C₁-C₆ алкила, гетероарила, гетероарил-C₁-C₆ алкила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителями, выбранными из: C₁-C₆ алкокси, C₁-C₆ алкоксикарбонила, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкиламино, амино, амино-C₁-C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамида, карбоксила, циано, C₁-C₆ галогенацила, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксила, нитро, тио, и тио-C₁-C₆ алкила; и

X представляет собой -C(O)NHCH(CH₂R³)-, или X отсутствует; и

R³ выбран из: арила, гетероарила, и C₃-C₇ циклоалкила, каждый необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из амино и гидроксил.

Также предложены варианты реализации изобретения реализации изобретения в которых (P) соединение Формулы XI, XIa, XIb, XIc, XId, XIe, XIf, XIg, XIh, XIi, XIj, или XIk, или его фармацевтически приемлемая соль. (P) ковалентно связанна с (L), если (L) присутствует, или с (Т), если (L) отсутствует.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIa:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: C₂-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₄-C₇ циклоалкила, C₃-C₇ циклоалкил-C₁-C₆ алкила, гетероарила, гетероарил-C₁-C₆ алкила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₆ алкокси, C₁-C₆ алкоксикарбонила, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкиламино, амино, амино-C₁-C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамид, карбоксила, циано, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксила, нитро, тио, и тио-C₁-C₆ алкила; и

R⁴ и R⁵ независимо выбраны из: H и C₁-C₆ алкила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIa:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила, 4-аминофенила, бензила, 3-меркаптопропила, 2-меркаптоэтила, 4-(меркаптометил)фенила, p-толила, 2,4,6-триметилфенила, 4-(трифторметокси)фенила, 2,4,6-триизопропилфенила, 4-трет-бутилфенила, 4-хлорфенила, 3-цианофенила, 2-нитрофенила, 4-метокси-2-нитрофенила, 4-аминокарбонил-2-нитрофенила, 4-метоксифенила, фенила, 2-фторбензила, пиперидин-1-ила, о-толила, 4-бромфенила, нафтален-2-ила, 4-метоксикарбонифенила, 2-(трифторметил)бензила, гексан-2-ила, 2-метоксиэтила, циклопентилметила, циклогексила, пиридин-3-илметила, 4-карбоксифенила, 3-аминофенила, пиридин-3-ила, тиен-2-ила, 4-гидроксифенила, 4-1-(1-аминоциклопропил)бензила, 4-1-(1-аминоциклопропил)фенила, 2-метилбензила, 4-нитробензила, 4-хлорбензила, фенэтила, 4-бромбензила, 4-цианобензила, 3-нитробензила, 4-трет-бутилбензила, 2-нитробензила, 4-нитрофенэтила, 2-хлор-3-метоксикарбонилфенила, 2-аминофенила, [1,1'-бифенил]-4-ила, 4'-амино-[1,1'-бифенил]-4-ила, 4-фторбензила, 3-(трифторметил)бензила, 3-(трифторметокси)бензила, 3,4-дихлорбензила, 2-цианобензила, 3-хлорбензила, 4-амино-2-этилфенила, 4-амино-3-(трифторметокси)фенила, 4-амино-2,3-диметилфенила, 4-амино-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-ила, 4-амино-3-метилфенила, 4-амино-3-фторфенила, 4-амино-3-этилфенила, и 4-амино-3-(трифторметил)фенила; и

R⁴ и R⁵ каждый независимо выбран из группы, состоящей из: H и метила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIb:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: C₂-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₄-C₇ циклоалкила, C₃-C₇ циклоалкил-C₁-C₆ алкила, гетероарила, гетероарил-C₁-C₆ алкила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₆ алкокси, C₁-C₆ алкоксикарбонила, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкиламиноа, амино, амино-C₁-C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамида, карбоксила, циано, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксила, нитро, тио, и тио-C₁-C₆ алкила;

R³ выбран из: арила, гетероарила, и C₃-C₇ циклоалкила, каждый необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из амино и гидроксила; и

R⁴ и R⁵ независимо выбраны из: H и C₁-C₆ алкила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIb:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила, 4-аминофенила, бензила, 3-меркаптопропил, 2-меркаптоэтил, 4-(меркаптометил)фенила, p-толила, 2,4,6-триметилфенила, 4-(трифторметокси)фенила, 2,4,6-триизопропилфенила, 4-трет-бутилфенила, 4-хлорфенила, 3-цианофенила, 2-нитрофенила, 4-метокси-2-нитрофенила, 4-аминокарбонил-2-нитрофенила, 4-метоксифенила, фенила, 2-фторбензила, пиперидин-1-ила, о-толила, 4-бромфенила, нафтален-2-ил, 4-метоксикарбонифенила, 2-(трифторметил)бензила, гексан-2-ила, 2-метоксиэтила, циклопентилметила, циклогексил, пиридин-3-илметила, 4-карбоксифенила, 3-аминофенила, пиридин-3-ила, тиен-2-ила, 4-гидроксифенила, 4-(1-аминоциклопропил)бензила, 4-(1-аминоциклопропил)фенила, 2-метилбензила, 4-нитробензила, 4-хлорбензила, фенэтила, 4-бромбензила, 4-цианобензила, 3-нитробензила, 4-трет-бутилбензила, 2-нитробензила, 4-нитрофенэтил, 2-хлор-3-метоксикарбонилфенила, 2-аминофенила, [1,1'-бифенил]-4-ила, 4'-амино-[1,1-бифенил]-4-ила, 4-фторбензила, 3-(трифторметил)бензила, (трифторметокси)бензила, 3,4-дихлорбензила, 2-цианобензила, 3-хлорбензила, 4-амино-2-этилфенила, 4-амино-3-(трифторметокси)фенила, 4-амино-2,3-диметилфенила, 4-амино-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-ила, 4-амино-3-метилфенила, 4-амино-3-фторфенила, 4-амино-3-этилфенила, и 4-амино-3-(трифторметил)фенила;

R³ выбран из: 1H-индол-3-ила, 4-аминофенила, 4-гидроксифенила, 5-гидроксипиридин-2-ила, циклогексила, и фенила; и

R⁴ и R⁵ каждый независимо выбран из группы, состоящей из: H и метила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIc:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: C₂-C₆ алкила, арила, аллил-C₁C₆ алкила, C₄-C₇ циклоалкила, C₃-C₇ циклоалкил-C₁C₆ алкила, гетероарила, гетероарил-C₁C₆ алкила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁C₆ алкокси, C₁C₆ алкоксикарбонила, C₁C₆ алкила, C₁C₆ алкиламино, амино, амино-C₁C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамида, карбоксила, циано, C₁C₆ галогеналкила, C₁C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксила, нитро, тио, и тио-C₁C₆ алкила; и

X представляет собой -C(O)NHCH(CH₂R₃)-, или X отсутствует; и

R³ выбран из: арила, гетероарила, и C₃-C₇ циклоалкила, каждый необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из амино и гидроксила; и

R⁴ и R⁵ каждый независимо выбраны из: H и C₁C₆ алкила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIc:

или его фармацевтически приемлемую соль,

где:

R₂ выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенил; 4-аминофенила, бензила, 3-меркаптопропил, 2-меркаптоэтил, 4-(меркаптометил)фенила, p-толила, 2,4,6-триметилфенила, 4-(трифторметокси)фенила, 2,4,6-триизопропилфенила, 4-трет-бутилфенила, 4-хлорфенила, 3-цианофенила, 2-нитрофенила, 4-метокси-2-нитрофенила, 4-аминокарбонил-2-нитрофенила, 4-метоксифенила, фенила, 2-фторбензила, пиперидин-1-ила, о-толила, 4-бромфенила, нафтален-2-ила, 4-метоксикарбонилфенила, 2-(трифторметил)бензила, гексан-2-ила, 2-метоксиэтила, циклопентилметила, циклогексила, пиридин-3-илметила, 4-карбоксифенила, 3-аминофенила, пиридин-3-ила, тиен-2-ила, 4-гидроксифенила, 4-1-(1-аминоциклопропил)бензила, 4-1-(1-аминоциклопропил)фенила, 2-метилбензила, 4-нитробензила, 4-хлорбензила, фенэтила, 4-бромбензила, 4-цианобензила, 3-нитробензила, 4-трет-бутилбензила, 2-нитробензила, 4-нитрофенэтил, 2-хлор-3-метоксикарбонилфенила, 2-аминофенила, [1,1'-бифенил]-4-ил, 4'-амино-[1,1-бифенил]-4-ила, 4-фторбензила, 3-(трифторметил)бензила, 3-(трифторметокси)бензила, 3,4-дихлорбензила, 2-цианобензила, 3-хлорбензила, 4-амино-2-этилфенила, 4-амино-3-(трифторметокси)фенила, 4-амино-2,3-диметилфенила, 4-амино-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-ила, 4-амино-3-метилфенила, 4-амино-3-фторфенила, 4-амино-3-этилфенила, и 4-амино-3-(трифторметил)фенила; и

X представляет собой -C(O)NHCH(CH₂R³)-, или X отсутствует; и

R³ выбран из: 1H-индол-3-ила, 4-аминофенила, 4-гидроксифенила, 5-гидроксипиридин-2-ила, циклогексила, и фенила; и

R⁴ и R⁵ каждый независимо выбран из группы, состоящей из: H и метила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XId:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: C₂-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₄-C₇ циклоалкила, C₃-C₇ циклоалкил-C₁-C₆ алкила, гетероарила, гетероарил-C₁-C₆ алкила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₆ алкокси, C₁-C₆ алкоксикарбонила, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкиламино, амино, амино-C₁-C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамида, карбоксила, циано, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксила, нитро, тио, и тио-C₁-C₆ алкила; и

R⁴ и R⁵ независимо выбраны из: H и C₁-C₆ алкила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XId:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила, 4-аминофенила, бензила, 3-меркаптопропил, 2-меркаптоэтил, 4-(меркаптометил)фенила, p-толила, 2,4,6-триметилфенила, 4-(трифторметокси)фенила, 2,4,6-триизопропилфенила, 4-трет-бутилфенила, 4-хлорфенила, 3-цианофенила, 2-нитрофенила, 4-метокси-2-нитрофенила, 4-аминокарбонил-2-нитрофенила, 4-метоксифенила, фенила, 2-фторбензилаа, пиперидин-1-ила, о-толила, 4-бромфенила, нафтален-2-ила, 4-метоксикарбонилфенилаа, 2-(трифторметил)бензилаа, гексан-2-ила, 2-метоксиэтила, циклопентилметил, циклогексила, пиридин-3-илметила, 4-карбоксифенила, 3-аминофенила, пиридин-3-ила, тиен-2-ила, 4-гидроксифенила, 4-1-(1-аминоциклопропил)бензила, 4-(1-аминоциклопропил)фенила, 2-метилбензила, 4-нитробензила, 4-хлорбензила, фенэтил, 4-бромбензила, 4-цианобензила, 3-нитробензила, 4-трет-бутилбензила, 2-нитробензила, 4-нитрофенэтил, 2-хлор-3-метоксикарбонилфенила, 2-аминофенила, [1,1'-бифенил]-4-ила, 4'-амино-[1,1'-бифенил]-4-ила, 4-фторбензила, 3-(трифторметил)бензила, 3-(трифторметокси)бензила, 3,4-дихлорбензила, 2-цианобензила, 3-хлорбензила, 4-амино-2-этилфенила, 4-амино-3-(трифторметокси)фенила, 4-амино-2,3-диметилфенила, 4-амино-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-ила, 4-амино-3-метилфенила, 4-амино-3-фторфенила, 4-амино-3-этилфенила, и 4-амино-3-(трифторметил)фенила; и

R⁴ и R⁵ каждый независимо выбран из группы, состоящей из: H и метила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIe:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: C₂-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₄-C₇ циклоалкила, C₃-C₇ циклоалкил-C₁-C₆ алкила, гетероарила, гетероарил-C₁-C₆ алкила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₆ алкокси, C₁-C₆ алкоксикарбонила, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкиламино, амино, амино-C₁-C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамида, карбоксила, циано, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксил, нитро, тио, и тио-C₁-C₆ алкила; и

R³ выбран из: арила, гетероарила, и C₃-C₇ циклоалкила, каждый необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из амино и гидроксила; и

R⁴ и R⁵ независимо выбраны из: H и C₁-C₆ алкила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIe:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила, 4-аминофенила, бензила, 3-меркаптопропила, 2-меркаптоэтил, 4-(меркаптометил)фенила, p-толила, 2,4,6-триметилфенила, 4-(трифторметокси)фенила, 2,4,6-триизопропилфенила, 4-трет-бутилфенила, 4-хлорфенила, 3-цианофенила, 2-нитрофенила, 4-метокси-2-нитрофенила, 4-аминокарбонил-2-нитрофенила, 4-метоксифенила, фенила, 2-фторбензила, пиперидин-1-ила, о-толила, 4-бромфенила, нафтален-2-ила, 4-метоксикарбонилфенила, 2-(трифторметил)бензила, гексан-2-илаа, 2-метоксиэтила, циклопентилметила, циклогексила, пиридин-3-илметила, 4-карбоксифенила, 3-аминофенила, пиридин-3-ила, тиен-2-ила, 4-гидроксифенила, 4-1-(1-аминоциклопропил)бензила, 4-1-(1-аминоциклопропил)фенила, 2-метилбензила, 4-нитробензила, 4-хлорбензила, фенэтила, 4-бромбензила, 4-цианобензила, 3-нитробензила, 4-трет-бутилбензила, 2-нитробензил, 4-нитрофенэтила, 2-хлор-3-метоксикарбонилфенила, 2-аминофенила, [1,1'-бифенил]-4-ила, 4'-амино-[1,1'-бифенил]-4-ила, 4-фторбензила, 3-(трифторметил)бензила, (трифторметокси)бензила, 3,4-дихлорбензила, 2-цианобензила, 3-хлорбензила, 4-амино-2-этилфенила, 4-амино-3-(трифторметокси)фенила, 4-амино-2,3-диметилфенила, 4-амино-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-ила, 4-амино-3-метилфенила, 4-амино-3-фторфенила, 4-амино-3-этилфенила, и 4-амино-3-(трифторметил)фенила; и

R³ выбран из: 1H-индол-3-ила, 4-аминофенила, 4-гидроксифенила, 5-гидроксипиридин-2-ила, циклогексила, и фенила; и

R⁴ и R⁵ каждый независимо выбран из группы, состоящей из: H и метила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIf:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: C₂-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₄-C₇ циклоалкила, C₃-C₇ циклоалкил-C₁-C₆ алкила, гетероарила, гетероарил-C₁-C₆ алкила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₆ алкокси, C₁-C₆ алкоксикарбонила, C₁C₆ алкила, C₁C₆ алкиламино, амино, амино-C₁C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамида, карбоксила, циано, C₁C₆ галогеналкила, C₁-C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксила, нитро, тио, и тио-C₁-C₆ алкила; и

X представляет собой -C(O)NHCH(CH₂R³)-, или X отсутствует; и

R³ выбран из: арила, гетероарила, и C₃-C₇ циклоалкила, каждый необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из амино и гидроксила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIf:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила, 4-аминофенила; и

X представляет собой -C(O)NHCH(CH₂R³)-, или X отсутствует; и

R³ выбран из: 1H-индол-3-ила, 4-аминофенила, 4-гидроксифенила, 5-гидроксипиридин-2-ила, циклогексила, и фенила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIg:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: C₂-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₄-C₇ циклоалкила, C₃-C₇ циклоалкил-C₁-C₆ алкила, гетероарила, гетероарил-C₁-C₆ алкила, и гетероциклила, каждый необязательно замещен одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₆ алкокси, C₁-C₆ алкоксикарбонила, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкиламино, амино, амино-C₁-C₆ алкила, амино-арил, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамида, карбоксила, циано, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксила, нитро, тио, и тио-C₁-C₆ алкила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIg:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила, 4-аминофенила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIh:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: C₂-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₄-C₇ циклоалкиа, C₃-C₇ циклоалкил-C₁-C₆ алкила, гетероарила, гетероарил-C₁-C₆ алкила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁-C6 алкокси, C₁-C₆ алкоксикарбонила, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкиламино, амино, амино-C₁-C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамида, карбоксила, циано, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксила, нитро, тио, и тио-C₁-C₆ алкила; и

R³ выбран из: арила, гетероарила, и C₃-C₇ циклоалкила, каждый необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из амино и гидроксила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIh:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила, 4-аминофенила; и

R³ выбран из: 1H-индол-3-ила, 4-аминофенила, 4-гидроксифенила, 5-гидроксипиридин-2-ила, циклогексила, и фенила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIi:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: C₂-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₄-C₇ циклоалкила, C₃-C₇ циклоалкил-C₁-C₆ алкила, гетероарила, гетероарил-C₁-C₆ алкила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₆ алкокси, C₁-C₆ алкоксикарбонила, C₁-C₆ алкила, C₁C₆ алкиламино, амино, амино-C₁-C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамида, карбоксила, циано, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксила, нитро, тио, и тио-C₁C₆ алкила;

X представляет собой -C(O)NHCH(CH₂R³)-, или X отсутствует; и

R³ выбран из: арила, гетероарила, и C₃-C₇ циклоалкила, каждый необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из амино и гидроксила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIi:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила, 4-аминофенила, бензила, 3-меркаптопропила, 2-меркаптоэтила, 4-(меркаптометил)фенила, p-толила, 2,4,6-триметилфенила, 4-(трифторметокси)фенила, 2,4,6-триизопропилфенила, 4-трет-бутилфенила, 4-хлорфенила, 3-цианофенила, 2-нитрофенила, 4-метокси-2-нитрофенила, 4-аминокарбонил-2-нитрофенила, 4-метоксифенила, фенила, 2-фторбензила, пиперидин-1-ила, о-толила, 4-бромфенила, нафтален-2-ила, 4-метоксикарбонилфенила, 2-(трифторметил)бензила, гексан-2-ила, 2-метоксиэтила, циклопентилметила, циклогексила, пиридин-3-илметиа, 4-карбоксифенила, 3-аминофенила, пиридин-3-ила, тиен-2-ила, 4-гидроксифенила, 4-1-(1-аминоциклопропил)бензила, 4-1-(1-аминоциклопропил)фенила, 2-метилбензила, 4-нитробензила, 4-хлорбензила, фенэтила, 4-бромбензила, 4-цианобензила, 3-нитробензила, 4-трет-бутилбензила, 2-нитробензила, 4-нитрофенэтила, 2-хлор-3-метоксикарбонилфенила, 2-аминофенила, [1,1'-бифенил]-4-ила, 4'-амино-[1,1'-бифенил]-4-ила, 4-фторбензила, 3-(трифторметил)бензила, 3-(трифторметокси)бензила, 3,4-дихлорбензила, 2-цианобензила, 3-хлорбензила, 4-амино-2-этилфенила, 4-амино-3-(трифторметокси)фенила, 4-амино-2,3-диметилфенила, 4-амино-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-ила, 4-амино-3-метилфенила, 4-амино-3-фторфенила, 4-амино-3-этилфенила, и 4-амино-3-(трифторметил)фенила;

X представляет собой -C(O)NHCH(CH₂R³)-, или X отсутствует; и

R³ выбран из: 1H-индол-3-ила, 4-аминофенила, 4-гидроксифенила, 5-гидроксипиридин-2-ила, циклогексила, и фенила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы Ij:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: C₂-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₄-C₇ циклоалкила, C₃-C₇ циклоалкил-C₁-C₆ алкила, гетероарила, гетероарил-C₁-C₆ алкила, и гетероциклила, каждый необязательно замещен одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₆ алкокси, C₁-C₆ алкокси карбонила, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкиламино, амино, амино-C₁-C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамида, карбоксила, циано, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксила, нитро, тио, и тио-C₁-C₆ алкила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы Ij:

или его фармацевтически приемлемую соль,

где:

R² выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила, 4-аминофенила, бензила, 3-меркаптопропила, 2-меркаптоэтила, 4-(меркаптометил)фенила, p-толила, 2,4,6-триметилфенила, 4-(трифторметокси)фенила, 2,4,6-триизопропилфенила, 4-трет-бутилфенила, 4-хлорфенила, 3-цианофенила, 2-нитрофенила, 4-метокси-2-нитрофенила, 4-аминокарбонил-2-нитрофенила, 4-метоксифенила, фенила, 2-фторбензила, пиперидин-1-ила, о-толила, 4-бромфенила, нафтален-2-ила, 4-метоксикарбонилфенила, 2-(трифторметил)бензила, гексан-2-ила, 2-метоксиэтила, циклопентилметила, циклогексила, пиридин-3-илметила, 4-карбоксифенила, 3-аминофенила, пиридин-3-ила, тиен-2-ила, 4-гидроксифенила, 4-1-(1-аминоциклопропил)бензила, 4-1-(1-аминоциклопропил)фенила, 2-метилбензила, 4-нитробензила, 4-хлорбензила, фенэтила, 4-бромбензила, 4-цианобензила, 3-нитробензила, 4-трет-бутилбензила, 2-нитробензила, 4-нитрофенэтила, 2-хлор-3-метоксикарбонилфенила, 2-аминофенила, [1,1'-бифенил]-4-ила, 4'-амино-[1,1'-бифенил]-4-ила, 4-фторбензила, (трифторметокси)бензила, 3,4-дихлорбензила, 2-цианобензила, 3-хлорбензила, 4-амино-2-этилфенила, 4-амино-3-(трифторметокси)фенила, 4-амино-2,3-диметилфенила, 4-амино-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-ила, 4-амино-3-метилфенила, 4-амино-3-фторфенила, 4-амино-3-этилфенила, и 4-амино-3-(трифторметил)фенила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIk:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: C₂-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₄-C₇ циклоалкила, C₃-C7 циклоалкил-C₁-C₆ алкила, гетероарила, гетероарил-C₁-C₆ алкила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₆ алкокси, C₁-C₆ алкоксикарбонила, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкиламино, амино, амино-C₁-C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамида, карбоксила, циано, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксила, нитро, тио, и тио-C₁-C₆ алкила; и

R³ выбран из: арила, гетероарила, и C₃-C₇ циклоалкила, каждый необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из амино и гидроксила.

В одном варианте реализации изобретения (P) представляет собой соединение Формулы XIk:

и его фармацевтически приемлемые соли, где:

R² выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила, 4-аминофенила, бензила, 3-меркаптопропила, 2-меркаптоэтила, 4-(меркаптометил)фенила, n-толила, 2,4,6-триметилфенила, 4-(трифторметокси)фенила, 2,4,6-триизопропилфенила, 4-трет-бутилфенила, 4-хлорфенила, 3-цианофенила, 2-нитрофенила, 4-метокси-2-нитрофенила, 4-аминокарбонил-2-нитрофенила, 4-метоксифенила, фенила, 2-фторбензила, пиперидин-1-ила, о-толила, 4-бромфенила, нафтален-2-ила, 4-метоксикарбонилфенила, 2-(трифторметил)бензила, гексан-2-ила, 2-метоксиэтила, циклопентилметила, циклогексила, пиридин-3-илметила, 4-карбоксифенила, 3-аминофенила, пиридин-3-ила, тиен-2-ила, 4-гидроксифенила, 4-1-(1-аминоциклопропил)бензила, 4-1-(1-аминоциклопропил)фенила, 2-метилбензила, 4-нитробензила, 4-хлорбензила, фенэтила, 4-бромбензила, 4-цианобензила, 3-нитробензила, 4-трет-бутилбензила, 2-нитробензила, 4-нитрофенэтила, 2-хлор-3-метоксикарбонилфенила, 2-аминофенила, [1,1'-бифенил]-4-ила, 4'-амино-[1,1'-бифенил]-4-ила, 4-фторбензила, 3-(трифторметил)бензила, 3-(трифторметокси)бензила, 3,4-дихлорбензила, 2-цианобензила, 3-хлорбензила, 4-амино-2-этилфенил, 4-амино-3-(трифторметокси)фенила, 4-амино-2,3-диметилфенила, 4-амино-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-ила, 4-амино-3-метилфенила, 4-амино-3-фторфенила, 4-амино-3-этилфенила, и 4-амино-3-(трифторметил)фенила; и

R³ выбран из: 1H-индол-3-ила, 4-аминофенила, 4-гидроксифенила, 5-гидроксипиридин-2-ила, циклогексила, и фенила.

В одном варианте реализации изобретения реализации изобретения (-R²-) в любой из Формул XI и XIa-XIk представляет собой (-Rʺ-NH-), где Rʺ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероарила, -COR²⁷-, -CSR²⁷-, -OR²⁷- и -NHR²⁷- где каждый R²⁷ независимо представляет собой необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил, и необязательно замещенный гетероарил.

В одном варианте реализации изобретения реализации изобретения (-Rʺ-NH-) связан с -(L)-(Т):

где -NH- группа связана с Rʺ образуя пептидную связь, называемую в данном документе связывающей пептидной связью (JPB) с (AA)¹ в формуле (III). AA независимо представляет собой аминокислоту, где x равно целому числу от 0 до 25, где (L') представляет собой необязательный остаток линкера (L), и (Т) представляет собой направляющий фрагмент. В одном варианте реализации изобретения реализации изобретения (AA)¹-(AA)_x вместе взятые содержат последовательность аминокислот, облегчающую ферментативное расщепление JPB.

В одном варианте реализации изобретения направляющий фрагмент представляет собой антитело. Соответственно, в одном варианте реализации изобретения предложены антитело-лекарственное средство конъюгаты (ADCs), которые содержат соединение, описанное в данном документе, или его фармацевтически приемлемую соль, или пролекарство.

В одном варианте реализации изобретения изобретение предлагает способ получения композиции имеющей Формулу II.

В другом варианте реализации изобретения предложенная фармацевтическая композиция содержит композицию Формулы II, или ее фармацевтически приемлемую соль, и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.

В другом варианте реализации изобретения предложен способ использования композиции с Формулой II в терапии. В частности, настоящее описание предлагает способ лечения рака у млекопитающих, включающий введение млекопитающему, которое нуждается, эффективного количества композиции Формулы II или фармацевтической композиция содержащей композицию Формулы II и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, или вспомогательное вещество.

В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает способ ингибирования роста опухоли у млекопитающего включающий введение млекопитающему., которое нуждается, эффективного количества композиции Формулы II или фармацевтической композиции содержащей композицию Формулы II и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.

В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает способ уничтожения раковых клеток in vitro с использованием композиции Формулы II. В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает способ уничтожения раковых клеток in vivo у млекопитающего включающий введение млекопитающему, которое нуждается, эффективного количества композиции Формулы II или фармацевтической композиции содержащей композицию Формулы II и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.

В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает способ увеличения времени жизни млекопитающих имеющих рак, включающий введение млекопитающему, которое нуждается, эффективного количества композиции Формулы II или фармацевтической композиции содержащей композицию Формулы II и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.

В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает использование композиции Формулы II, или ее фармацевтически приемлемой соли, в производстве лекарственных препаратов для лечения рака у млекопитающих.

В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает использование композиции Формулы II, в производстве лекарственных препаратов ингибирующих рост опухоли у млекопитающих.

В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает использование композиции Формулы II, в производстве лекарственных препаратов увеличивающих продолжительность жизни у млекопитающих больных раком.

В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает композицию Формулы II, или фармацевтическую композицию содержащей композицию Формулы II, для использования в способе лечения человеческого и животного тела терапией.

В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает композицию Формулы II, или фармацевтическую композицию содержащей композицию Формулы II, для использования в лечении рака у млекопитающих.

В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает композицию Формулы II, или фармацевтическую композицию содержащей композицию Формулы II, для использования в ингибировании роста опухоли у млекопитающего.

В другом варианте реализации изобретения настоящее описание предлагает композицию Формулы II, или фармацевтическую композицию содержащей композицию Формулы II, для использования в увеличении продолжительности жизни млекопитающих больных раком.

В одном варианте реализации изобретения расщепление JPB приводит к соединению формулы (IV) или соединению формулы (V):

где P' соответствует P' в формуле (II).

"амино" относится к -NH₂ заместителю.

"циано" относится к -CN заместителю.

"гидрокси" или "гидроксил" относится к -OH заместителю.

"Имино" относится к =NH заместителю.

"нитро" относится к -NO₂ заместителю.

"Оксо" относится к =O заместителю.

"Тиол" относится к -SH заместителю.

"Тиоксо" относится к =S заместителю.

"Алкил" относится к заместителю с прямой или разветвленной углеводородной цепью, состоящему исключительно из углеродных и водородных атомов, который является насыщенным или ненасыщенным (т.е. содержит одну или более двойную и/или тройную связи), имеющий от одного до двадцати пяти атомов углерода (C₁-C₂₅ алкил), желательно от одного до восьми атомов углерода (C₁-C₈ алкил) или от одного до шести атомов углерода (C₁-C₆ алкил), и который присоединен к оставшейся молекуле через одинарную связь, например, метил, этил, n-пропил, 1-метилэтил (изо-пропил), н-бутил, н-пентил, 1,1-диметилэтил (трет-бутил), 3-метилгексил, 2-метилгексил, этенил, проп-1-енил, бут-1-енил, пент-1-енил, пента-1,4-диенил, этинил, пропинил, бутинил, пентинил, гексинил, и тому подобное. Если не указано иное в спецификации, алкильная группа может быть необязательно замещенной.

"Алкилен" или "алкиленовая цепь" относится к прямой или разветвленной дивалентной углеводородной цепи связывающей оставшуюся часть молекулы с группой заместителем, состоящей лишь из атомов углерода и водорода, которая является насыщенной или ненасыщенной (т.е., содержит одну или более двойную и/или тройную связи), и имеющей от одного до двадцати пяти атомов углерода, предпочтительно от одного до двенадцати атомов углерода, например, метилен, этилен, пропилен, н-бутилен, этенилен, пропенилен, н-бутенилен, пропинилен, н-бутинилен, и тому подобное. Алкиленовая цепь соединяется с остальной частью молекулы через одинарную или двойную связь и к группе заместителю через одинарную или двойную связь. Точки связывания алкиленовой цепи к остальной части молекулы и к группе заместителю могут быть через один углерод или через два любых углерода в цепи. Если специально не указано иное в спецификации, алкиленовая цепь может быть необязательно замещенной.

"Алкокси" относится к заместителю с формулой -OR_a где R_a представляет собой алкильный заместитель, как определено выше, содержащий от одного до двадцати пяти атомов углерода, предпочтительно от одного до двенадцати. Если специально не указано иное в спецификации, алкокси группа может быть необязательно замещенной.

"Алкиламино" относится к заместителю с формулой -NHR_a или -NR_aR_a где каждый R_a независимо представляет собой алкильный заместитель, как определено выше, содержащий от одного до двадцати пяти атомов углерода, предпочтительно от одного до двенадцати. Если специально не указано иное в спецификации, алкиламино группа может быть необязательно замещенной.

"Тиоалкил" относится к заместителю с формулой -SR_a где R_a представляет собой алкильный заместитель, как определено выше, содержащий от одного до двадцати пяти атомов углерода, предпочтительно от одного до двенадцати.. Если специально не указано иное в спецификации, тиоалкил группа может быть необязательно замещенной.

"Арил" относится к заместителю - углеводородной циклической системе, содержащей водород, от 6 до 18 атомов углерода и по меньшей мере одно ароматическое кольцо. Для целей данного описания, арильный заместитель может быть моноциклической, бициклической, трициклической или тетрациклической кольцевой системой, которая может включать конденсированные или мостиковые циклические системы. Арильный заместители включают, но не ограничиваются ими, арильный заместители производные от ацеантрилена, аценафталена, ацефенантрилена, антрацена, азулена, бензола, хризена, флуорантена, флуорена, as-индацена, s-индацена, индана, индена, нафталена, феналена, фенантрена, плеадена, пирена и трифенилена. Если специально не указано иное в спецификации, термин "арил" или префикс х "ar-" (такой как в "аралкил") означает включение арильных заместителей, которые необязательно замещены.

"Аралкил" относится к заместителю с формулой -R_b-R_c где R_b представляет собой алкиленовую цепь, как определено выше, и R_c представляет собой один или более арильных заместителей как определено выше, например, бензила, дифенилметил и тому подобное. Если специально не указано иное в спецификации, аралкильная группа может быть необязательно замещенной.

"Циклоалкил" или "карбоциклическое кольцо" относится к стабильному неароматическому моноциклическому или полициклическому углеводородному заместителю, состоящему только из атомов углерода и водорода, которые могут включать конденсированные или мостиковые кольцевые системы, имеющие от трех до пятнадцати атомов углерода, предпочтительно имеющие от трех до десяти атомов углерода, и который является насыщенным или ненасыщенным и присоединен к остальной части молекулы через одинарную связь. Моноциклические заместители включают, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, и циклооктил. Полициклические заместители включают, например, адамантил, норборнил, декалин, 7,7-диметил-бицикло[2,2,1]гептанил, и тому подобное. Если специально не указано иное в спецификации, циклоалкильная группа может быть необязательно замещенной.

"Циклоалкилалкил" относится к заместителю с формулой -R_bR_d где R_d представляет собой алкиленовую цепь, как определенно выше и R_g представляет собой циклоалкильный заместитель как определено выше. Если специально не указано иное в спецификации, циклоалкилалкильная группа может быть необязательно замещенной..

"Конденсированный" относится к любой циклической структуре описанной в данном документе, которая конденсирована к уже существующей кольцевой структуре в соединениях описания. Когда конденсированное кольцо представляет собой гетероциклическое кольцо или гетероарильное кольцо, любой атом углерода в существующей кольцевой структуре, который становится частью конденсированного гетероциклического кольца или конденсированного гетероарильного кольца может быть замещен на атом азота.

"Галоген" относится к брому, хлору, фтору или йоду.

"Галогеналкил" относится к алкильному заместителю, как определено выше, который замещен одним или более атомами галогена, как определено выше, например, трифторметил, дифторметил, трихлорметил, 2,2,2-трифторэтил, 1,2-дифторэтил, 3-бром-2-фторпропил, 1,2-дибромэтил, и тому подобное. Если специально не указано иное в спецификации, галогеналкильная группа может быть необязательно замещенной.

"Гетероциклил" или "гетероциклическое кольцо" относится к стабильному от 3- до 18-членному неароматическому циклическому заместителю, который содержит от двух до двенадцати атомов углерода и от одного до 6 гетероатомов выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы. Если специально не указано иное в спецификации, гетероциклический заместитель может иметь моноциклическую, бициклическую, трициклическую или тетрациклическую кольцевую систему, которая может включать конденсированные и мостиковые системы; и атомы азота, углерода или серы в гетероциклическом заместителе могут быть необязательно окислены; атом азота может быть необязательно кватернизирован; и гетероциклический заместитель может быть частично или полностью насыщен. Пример таких гетероциклических заместителей включают, но не ограничиваются ими, диоксоланил, тиенил[1,3]дитианил, декагидроизохинолил, имидазолинил, имидазолидинил, изотиазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, октагидроиндолил, октагидроизоиндолил, 2-оксопиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролидинил, оксазолидинил, пиперидинил, пиперазинил, 4-пиперидонил, пирролидинил, пиразолидинил, хинуклидинил, тиазолидинил, тетрагидрофурил, тритианил, тетрагидропиранил, тиоморфолинил, тиаморфолинил, 1-оксо-тиоморфолинил, и 1,1-диоксо-тиоморфолинил. Если специально не указано иное в спецификации, гетероциклическая группа может быть необязательно замещенной.

"N-гетероциклил" относится к гетероциклическому заместителю, как определено выше, содержащему, по меньшей мере, один атом азота и точка соединения гетероциклического заместителя с остальной частью молекулы проходит через атом азота гетероциклического заместителя. Если специально не указано иное в спецификации, N-гетероциклическая группа может быть необязательно замещенной.

"Гетероциклилалкил" относится к заместителю с формулой -R_bR_e где R_b, алкиленова цепь, как определено выше, и R_e представляет собой гетероциклический заместитель, как определено выше, и если гетероциклил представляет собой азот-содержащий гетероциклил, гетероциклил может быть присоединен к алкильному заместителю через атом азота. Если специально не указано иное в спецификации, гетероциклилалкильная группа может быть необязательно замещенной.

"Гетероарил" относится к заместителю с от 5- до 14-членной кольцевой системой содержащей атомы водорода, от одного до трех атомов углерода, от одного до шести гетероатомов выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы, и по меньшей мере одним ароматическим кольцом. Для целей настоящего описания, гетероарильный заместитель может иметь моноциклическую, бициклическую, трициклическую или тетрациклическую кольцевую систему, которая может включать конденсированные и мостиковые системы; и атомы азота, углерода или серы в гетероциклическом заместителе могут быть необязательно окислены; атом азота может быть необязательно кватернизирован. Примеры включают, но не ограничиваются ими, азепинил, акридинил, бензимидазолил, бензотиазолил, бензиндолил, бензодиоксолил, бензофуранил, бензооксазолил, бензотиазолил, бензотиадиазолил, бензо[b][1,4]диоксепинил, 1,4-бензодиоксанил, бензонафтофуранил, бензоксазолил, бензодиоксолил, бензодиоксинил, бензопиранил, бензопиранонил, бензофуранил, бензофураноил, бензотиенил (бензотиофенил), бензотриазолил, бензо[4,6]имидазо[1,2-а]пиридинил, карбазолил, циннолинил, дибензофуранил, дибензотиофенил, фуранил, фуранонил, изотиазолил, имидазолил, индазолил, индолил, индазолил, изоиндолил, индолинил, изоиндолинил, изохинолил, индолизинил, изоксазолил, нафтиридинил, оксадиазолил, 2-оксоазепинил, оксазолил, оксиранил, 1-оксидопиридинил, 1-оксидопиримидинил, 1-оксидопиразинил, 1-оксидопиридазинил, 1-фенил-1H-пирролил, феназинил, фенотиазинил, феноксазинил, фталазинил, птеридинил, пуринил, пирролил, пиразолил, пиридинил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, хиназилинил, хиноксалинил, хинолил, хинуклидинил, изохинолил, тетрагидрохинолил, тиазолил, тиадиазолил, триазолил, тетразолил, триазинил, и тиофенил (т.е. тиенил). Если специально не указано иное в спецификации, гетероарильная группа может быть необязательно замещенной.

"N-гетероарил" относится к гетероарильному заместителю, как определено выше, содержащем по меньшей мере один атом азота и гетероарильный заместитель присоединен к остальной части молекулы через атом азота в гетероарильном заместителе. Если специально не указано иное в спецификации, N-гетероарильная группа может быть необязательно замещенной.

"Гетероарилалкил" относится к заместителю с формулой -R_bR_f где R_b, представляет собой алкиленовый радикал, как определено выше, и R_f представляет собой гетероарильный заместитель как определено выше. Если специально не указано иное в спецификации, гетероарилалкильная группа может быть необязательно замещенной.

Термин "замещенный" используемый в данном документе, означает любую из выше упомянутых групп (например, алкил, алкилен, алкокси, алкиламино, тиоалкил, арил, аралкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, галогеналкил, гетероциклил, N-гетероциклил, гетероциклилалкил, гетероарил, N-гетероарил и/или гетероарилалкил) где по меньшей мере один атом водорода замещен связью с не-водородным атомами такими как, но не ограничиваясь ими: атом галогена такой как F, Cl, Br, и I; атом кислорода в группах, таких как гидроксильные группы, алкокси группы, и эфирные группы; атом серы в группах, таких как тиольные группы, тиоалкильные группы, сульфоновые группы, сульфонильные группы, и сульфоксидные группы; атом азота в группах, таких как азиды, амины, амиды, алкиламины, диалкиламины, ариламины, алкилариламины, диатиламины, N-оксиды, имиды, и енамины; атом кремния в группах таких как триалкилсилильные группы, диалкиларилсилильные группы, алкилдиарилсилильные группы, и триарилсилильные группы; и другие гетероатомы в различных других группах. "Замещенный" также означает любую из указанных групп, в которой один или более атомов водорода замещены на связи высших порядков (например, двойную или тройную связи) с гетероатомом таким как кислород в оксо, карбонил, карбоксил, и сложноэфирная группы; и азот в группах, таких как имины, оксимы, гидразоны, и нитрилы. Например, "замещенный" включает любую из вышеуказанных групп, в которой один или более атомов водорода замещены на -NR_gR_h, -NR_gC(=O)R_h, -NR_gC(=O)NR_gR_h, -NR_gC(=O)OR_h, -NR_gC(=NR_g)NR_gR_h, -NR_gSO₂R_h, -OC(=O)NR_gR_h, -OR_g, -SR_g, -SOR_g, -SO₂R_g, -OSO₂R_g, -SO₂OR_g, =NSO₂R_g, и -SO₂NR_gR_h. "Замещенный" также означает любую и вышеперечисленных групп, в которых один или более атомов водорода заменены на -C(=O)R_g, -C(=O)OR_g, -C(=O)NR_gR_h, -CH₂SO₂R_g, -CH₂SO₂NR_gR_h. В вышеизложенном, R_g и R_h, представляют собой одновременно или по отдельности и независимо водород, алкил, алкокси, алкиламино, тиоалкил, арил, аралкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, галогеналкил, гетероциклил, N-гетероциклил, гетероциклилалкил, гетероарил, N-гетероарил и/или гетероарилалкил. "Замещенный" далее означает любую из вышеперечисленных групп, в которой один или более атомов водорода заменены связью с амино, циано, гидроксил, имино, нитро, оксо, тиоксо, галоген, алкил, алкокси, алкиламино, тиоалкил, арил, агалкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, галогеналкил, гетероциклил, N-гетероциклил, гетероциклилалкил, гетероарил, N-гетероарил и/или гетероарилалкил группой. Кроме того, каждый из вышеуказанных заместителей также может быть необязательно замещенным одним или более из вышеуказанных заместителей.

Термин "защитная группа", как он используется в данном документе, относится к лабильному химическому фрагменту, который, как известно в данной области техники, защищает реакционноспособные группы, включая без ограничений, гидроксильные и аминогруппы, от нежелательных реакций во время синтетических операций. Гидроксильная и аминогруппы, защищенные защитной группой, именуются в данном документе "защищенные гидроксильные группы" и "защищенные аминогруппы", относительно. Защищенные группы используются, как правило, избирательно и/или ортогонально для защиты групп во время реакций по другим группам и, затем, могут быть удалены для образования незащищенной группы, как она есть или использования для дальнейших реакций. Защитные группы, как известно в данной области техники, как правило, описаны в Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, New York (1999). Группы могут быть выборочно включены в соединения данного описания в качестве прекурсоров. Например, аминогруппа может быть в соединение описания в виде азидной группы, которая может быть химически преобразована в аминогруппу на нужном этапе синтеза. В целом, защищенные группы или группы присутствующие в качестве прекурсора, которые будут инертны к реакциям, которые модифицируют другие участки исходной молекулы для превращения в конечные группы на соответствующем этапе. Далее показательные защитные или прекурсорные группы обсуждаются в Agrawal, et al., Protocols for Oligonucleotide Conjugates, Eds, Humana Press; New Jersey, 1994; Vol. 26 pp. 1-72. Примеры "защищенных гидроксильных групп" включают, но не ограничиваются ими, трет-бутил, трет-бутоксиметил, метоксиметил, тетрагидропиранил, 1-этоксиэтил, 1-(2-хлорэтокси)этил, 2-триметилсилилэтил, п-хлорфенил, 2,4-динитрофенил, бензила, 2,6-дихлорбензила, дифенил-метил, п-нитробензила, трифенилметил, триметилсилил, триэтилсилил, трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил (TBDPS), трифенилсилил, бензоилформат, ацетат, хлорацетат, трихлорацетат, трифторацетат, пивалоат, бензоат, п-фенилбензоат, 9-флуоренилметил карбонат, мезилат и тозилат. Примеры "защищенных аминогрупп" включают, но не ограничиваются ими, карбаматные защитные группы, такие как триметилсилилэтоксикарбонил (Теос), 1-метил-1-(4-бифенил)-этоксикарбонил (Врос), трет-бутоксикарбонил (ВОС), аллилоксикарбонил (Alloc), 9-флуоренилметилоксикарбонил (Fmoc), и бензилоксикарбонил (Cbz); амидные защитные группы, такие как формил, ацетил, тригалогенацетил, бензоил, и нитрофенилацетил; сульфонамид-защитные группы, такие как 2-нитробензосульфонил; и имин и циклические имидные защитные группы, такие как фталимидо и дитиасукциноил.

Термин "пролекарство" предназначен, для обозначения соединения, которое может быть преобразовано в физиологических условиях или путем сольволиза в биологически активное соединение описания. Таким образом, термин "пролекарство" относится к метаболическому прекурсору соединения описания, который является фармацевтически приемлемым. Пролекарство может быть неактивным при введении субъекту, который нуждается, но преобразовано in vivo в активное соединение описания. Пролекарства обычно стремительно преобразуются in vivo, давая исходное соединение описания, например, путем гидролиза в крови. Соединение пролекарства часто дает преимущества в растворимости, тканевой совместимости или замедленном высвобождении в организме млекопитающего (см., Bundgard, Н., Design of Prodrugs (1985), pp. 7-9, 21-24 (Elsevier, Amsterdam)). Обсуждение пролекарств предоставляется в Higuchi, Т., et al., A.C.S. Symposium Series, Vol. 14, и in Bioreversible Carriers in Drug Design, Ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987.

Пролекарства соединения описания могут быть получены путем модификации функциональных групп присутствующих в соединении описания, таким образом, что модифицированные соединения расщепляются, либо в обычных манипуляциях, либо in vivo, до исходного соединения описания. Пролекарства включают соединения описания, где гидрокси, амино или меркаптогруппа связана с любой группой так, что когда соединение пролекарства данного описания введено субъекту млекопитающему, эта группа расщепляется, образуя свободную гидрокси, свободную амино или свободную меркаптогруппу, соответственно. Примеры пролекарств включают, но не ограничиваются ими, ацетат, формиат и бензоат производные спирта или амидные производные амино функциональных групп в соединениях данного описания и тому подобное.

Термин "соотношение лекарственное средство-антитело" или "DAR" предназначен для указания количества фрагментов лекарственного средства присоединенного к направляющему фрагменту, например, антителу. В некоторых вариантах реализации изобретения есть такое же количество полезного вещества (Р) и линкера (L) в [(P)-(L)] и DAR представлен значением "m" в Формуле I и может быть целым числом от 1 до 10. В других вариантах реализации изобретения линкер (L) представляет собой мультифункциональную единицу, которая связывает более чем одну молекулу полезного вещества (Р) с направляющим фрагментом (Т).

Настоящее описание также призвано охватить все фармацевтически приемлемые соединения структуры (I) являющиеся изотопно меченными, имея один или более атомов замещенных на атом, имеющий отличную атомную массу или массовое число. Примеры изотопов, которые могут быть включены в описанные соединения, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора, хлора, и йода, такие как ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹³N, ¹⁵N, ¹⁵O, ¹⁷O, ¹⁸O, ³¹P, ³²P, ³⁵S, ¹⁸F, ³⁶Cl, ¹²³I, и ¹²⁵I, соответственно. Эти радиомеченные соединения могут быть полезными для определения или измерения эффективности соединений, характеризуя, например, место или способ действия, или аффиность связывания к фармакологически важному месту действия. Некоторые изотопно меченные соединения структуры (I), например, с введенным радиоактивным изотопом, полезны в изучении распределения лекарственного средства и/или субстрата в ткани. Радиоактивные изотопы тритий, т.е. ³H, и углерод-14, т.е. ¹⁴C, особенно полезны для этой цели ввиду их простоты включения и легкости обнаружения.

Замена на более тяжелые изотопы, такие как дейтерий, т.е. ²H, может иметь определенные терапевтические преимущества, вытекающие из большей метаболической стабильности, например, увеличении периода полураспада in vivo или уменьшении необходимой дозировки, и может быть предпочтительной в некоторых обстоятельствах.

Замещение на позитронно-излучающие изотопы, такие как ¹¹C, ¹⁸F, ¹⁵O и ¹³N, может быть полезным в Позитронно эмиссионных топографических (ПЭТ) исследованиях для изучения связывания субстрата с рецептором. Изотопно-меченные соединения структуры (I) могут, как правило, быть получены по обычным методикам известным специалистам в данной области техники, или с помощью процессов аналогичных описанным в разделах Получение и Примеры, изложенных ниже, с использованием соответственного изотопно-меченного реагента в место использованного ранее не-меченного реагента.

Настоящее описание также охватывает продукты in vivo метаболизма описанных соединений. Такие продукты могут быть результатом, например, окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, эстерификации, и тому подобное, введенного соединения, в первую очередь за счет ферментативных процессов. Соответственно, настоящее описание включает соединения, полученные посредством процесса, включающего введение соединения данного описания млекопитающему в течение периода времени, достаточного для получения метаболического продукта. Некоторые продукты идентифицированы, как правило, введением радиомеченного соединения описания в определяемой дозе животному, такому как крыса, мышь, морская свинка, обезьяна или человек, обеспечивая достаточное время для метаболизма, и изолируя продукты превращения из мочи, крови или других биологических образцов.

"Стабильное соединение" и "стабильная структура" означают соединение, которое является достаточно стабильным для того, чтобы выдержать выделение до полезной степени чистоты из реакционной смеси, и разработку в эффективный терапевтический агент.

"Млекопитающее" включает человека, а также домашних животных, таких как лабораторные животные и домашние питомцы (например, коты, собаки, свиньи, крупный рогатый скот, овцы, козы, лошади, кролики), и не-домашних животных, таких как диких животных и тому подобное.

"Необязательный" или "необязательно" означает, что впоследствии описанное событие, обстоятельство может произойти или не произойти, и что описание включает случаи, когда указанное событие происходит и случаи, когда указанное событие не происходит. Например, "необязательно замещенный арил" означает, что арильный заместитель может быть или не быть замещенным, и что описание включает оба арильных заместителя, замещенный и не имеющий заместителей.

"Фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, вспомогательное вещество" включает без ограничений любой стимулятор, носитель, вспомогательное вещество, вещество предотвращающее слипание, подсластитель, разбавитель, консервант, краситель/краситель, усилитель вкуса, поверхностно-активное вещество, смачивающий агент, диспергирующий агент, суспендирующий агент, стабилизатор, изотонический агент, растворитель, или эмульгатор, который был одобрен Управлением по контролю за продуктами и лекарствами США в качестве приемлемой для использования человеком или у домашних животных.

"Фармацевтически приемлемая соль" включает соли образованные как добавлением кислот, так и добавлением оснований.

"Фармацевтически приемлемая соль присоединения кислоты" относится к солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства свободных оснований, которые не являются биологически или иным образом нежелательными, и который образованы с неорганическими кислотами, такими как, но не ограничиваясь ими, хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и подобные, и органическими кислотами, такими как, но не ограничиваясь ими, уксусная кислота, 2,2-дихлоруксусная кислота, адипиновая кислота, альгиновая кислота, аскорбиновая кислота, аспарагиновая кислота, бензолсульфокислота, бензойная кислота, 4-ацетамидобензойная кислота, камфорная кислота, камфор-10-сульфоновая кислота, каприновая кислота, капроновая кислота, каприловая кислота, угольная кислота, коричная кислота, лимонная кислота, цикламиновая кислота, додецилсерная кислота, этан-1,2-дисульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, муравьиная кислота, фумаровая кислота, галактаровая кислота, гентизиновая кислота, глюкогептоновая кислота, глюконовая кислота, глюкуроновая кислота, глутаминовая кислота, глутаровая кислота, 2-оксо-глутаровая кислота, глицерофосфорная кислота, гликолевая кислота, гиппуровая кислота, изомасляная кислота, молочная кислота, лактобионовая кислота, лауриновая кислота, малеиновая кислота, яблочная кислота, малоновая кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, муконовая кислота, нафталин-1,5-дисульфоновая кислота, нафталин-2-сульфоновая кислота, 1-гидрокси-2-нафтойная кислота, никотиновая кислота, олеиновая кислота, оротовая кислота, щавелевая кислота, пальмитиновая кислота, памоевая кислоты, пропионовой кислоты, пироглютаминовая кислота, пировиноградная кислота, салициловая кислота, 4-аминосалициловая кислота, себациновая кислота, стеариновая кислота, янтарная кислота, винная кислота, тиоциановая кислота, n-толуолсульфокислота, трифторуксусная кислота, ундециленовая кислота, и тому подобное.

"Фармацевтически приемлемая соль присоединения основания" относится к солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства свободных кислот, которые не являются биологически или иным образом нежелательными. Эти соли, получены добавлением неорганического основания или органического основания к свободной кислоте. Соли, производные неорганических оснований включают, но не ограничиваются ими, соли натрия, калия, лития, аммония, кальция, магния, железа, цинка, меди, марганца, алюминия и тому подобное. Предпочтительными неорганическими солями являются соли аммония, натрия, калия, кальция, и магния. Соли, производные органических оснований, включают, но не ограничиваются ими, соли первичны, вторичных, и третичных аминов, замещенные амины, включая природные замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные соли, такие как аммиак, изопропиламин, триметиламин, диэтиламин, триэтиламин, трипропиламин, диэтаноламин, этаноламин, деанол, 2-диметиламиноэтанол, 2-диэтиламиноэтанол, дициклогексиламин, лизин, аргинин, гистидин, кофеин, прокаин, гидрабамин, холин, бетаин, бенетамин, бензатин, этилендиамин, глюкозамин, метилглюкамин, теобромин, триэтаноламин, трометамин, пурины, пиперазин, пиперидин, N-этилпиперидин, полиаминные смолы и тому подобное. Особенно предпочтительными органическими основаниями являются изопропиламин, диэтиламин, этаноламин, триметиламин, дициклогексиламин, холин и кофеин.

Часто кристаллизация приводит к сольвату соединения описания. Как используется в данном документе, термин "сольват" относится к агрегату, содержащему одну или более молекул соединения описания с одной или более молекулами растворителя. Растворителем может быть вода, в этом случае сольват может являться гидратом. Альтернативно, растворителем может быть органический растворитель. Таким образом, соединения данного описания могут существовать в форме гидратов, включая моногидрат, дигидрат, полугидрат, сесквигидрат, тригидрат, тетрагидрат и тому подобное, а также соответствующих сольватированных формах. Соединение описания может быть настоящим сольватом, в то время как в других случаях, соединение описания может просто удерживать остаточную воду или смесь воды с некоторым остаточным растворителем.

"Фармацевтическая композиция" относится к препарату соединения описания и среде общепринятой в области техники для доставки биологически активного соединения в организм млекопитающих, например, людей. Такая среда включает все фармацевтически приемлемые носители, разбавители или вспомогательные вещества.

Неограничивающие примеры расстройств, которые могут лечиться соединениями данного документа, включают доброкачественные и злокачественные опухоли; лейкозы и лимфоидные злокачественные новообразования, в частности рак молочной железы, яичника, желудка, эндометрия, слюнной железы, легкого, почки, толстой кишки, щитовидной железы, поджелудочной железы, простаты или рак мочевого пузыря; нейрональные, глиальные, астроцитальные, гипоталамуса и других желез, макрофагальные, эпителиальные, стромальные и бластокоэлические расстройства.

"Эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" относится к такому количеству соединения описания, которое, будучи введенным млекопитающему, предпочтительно человеку, достаточно для эффективного лечения, как определено ниже, раковых или опухолевых клеток у млекопитающего, предпочтительно человека. Количество соединения описания, которое составляет "терапевтически эффективное количество", будет сильно зависеть от соединения, заболевания и его тяжести, способа введения, и возраста млекопитающего, которое поддается лечению, но может быть легко определено специалистом в данной области техники с учетом его собственных знаний и этого описания.

"Лечение" или "терапия", как они использованы в данном документе, охватывает лечение заболевания или интересующего состояния у млекопитающего, предпочтительно человека, имеющего заболевание или интересующее состояние, и включает:

(i) предотвращение заболевания или состояния у млекопитающего, в частности, когда такое млекопитающее предрасположено к состоянию, но наличие состояние еще не диагностировано;

(ii) ингибирование заболевания или состояния, т.е., остановка его развития;

(iii) облегчение заболевания или состояния, т.е., вызывая регресс заболевания или состояния; или

(iv) облегчение симптомов вызванных заболеванием или состоянием, т.е., облегчение боли без устранения заболевания или состояния.

Терапевтически эффективное количество лекарственного средства может уменьшить количество раковых клеток; уменьшить размер опухоли; замедлить (т.е. замедлить до некоторой степени и предпочтительно остановить) инфильтрацию раковых клеток в периферические органы; замедлить (т.е., замедлить до некоторой степени и предпочтительно остановить) метастазирование опухоли; замедлить, до некоторой степени, рост опухоли; и/или облегчить до некоторой степени один или более симптомов связанных с раком. В степени, в которой лекарственный препарат может предотвращать рост и/или уничтожение раковых клеток, он может быть цитостатичным и/или цитотоксичным. Соединения данного изобретения предпочтительно цитотоксичны. Для терапии рака, эффективность может, например, быть измерена путем оценки времени до прогрессирования заболевания (TTP) и/или определения скорости ответа (RR).

"Эффективное количество" лекарственного средства, когда оно относится к уничтожению раковых клеток, относится к количеству лекарственного средства достаточного, чтобы произвести уничтожающий эффект.

Солидные опухоли предусмотренные для лечения с использованием описанных соединений включают, но не ограничиваются ими: саркому, фибросаркому, миксосаркому, липосаркому, хондросаркому, остеогенную саркому, хордому, ангиосаркому, эндотелиосаркому, лимфангиосаркому, лимфангиоэндотелиосаркому, синовиому, мезотелиому, опухоль Юинга, лейомиосаркому, рабдомиосаркому, рак толстой кишки, колоректальный рак, рак почек, рак поджелудочной железы, рак костей, рак груди, рак яичников, рак простаты, рак пищевода, рак желудка (например, желудочно-кишечный рак), рак полости рта, рак носа, рак горла, плоскоклеточную карциному (например, легких), базально-клеточную карциному, аденокарциному (например, легких), карциному потовых желез, карциному сальных желез, папиллярную карциному, папиллярную аденокарциному, цистаденокарциному, медуллярную карциному, бронхогенную карциному, почечно-клеточную карциному, гепатому желчных протоков карциному, хориокарциному, семинома, эмбриональную карциному, Вильмса опухоль, рак шейки матки, рак матки, рак яичка, мелкоклеточный рак легких, рак мочевого пузыря, рак легких, немелкоклеточный рак легких, эпителиальную карциному, глиому, глиобластому, астроцитому глиобластому, медуллобластому, краниофарингиому, эпендимому, пинеалому, гемангиобластому, невриному слухового нерва, олигодендроглиому, менингиому, рак кожи, меланому, нейробластому и ретинобластому. Разновидности рака клеток крови предусмотренные для лечения с использованием описанных соединений включают, но не ограничиваются ими: острый лимфобластный лейкоз "ALL", острый лимфобластный В-клеточный лейкоз, острый лимфобластный Т-клеточный лейкоз, острый миелобластный лейкоз "AML" острый промиелоцитарный лейкоз "APL", острый монобластный лейкоз, острый эритролейкемический лейкоз, острый мегакариобластический лейкоз, острый миеломоноцитарный лейкоз, острый нелимфоцитарный лейкоз, острый недифференцированный лейкоз, хронический милоцитарный лейкоз "CML", хронический лимфолейкоз "CLL", волосатый клеточный лейкоз и множественную миелому. Острые и хронические лейкозы предусмотрены для лечения описываемыми соединениями включают, но не ограничиваются ими: лимфобластичные, миелогенные, лимфоцитарные, и миелоцитарными лейкозами. Лимфомы, предусмотрены для лечения описываемыми соединениями включают, но не ограничиваются ими: болезнь Ходжкина, неходжкинская лимфому, множественную миелому, макроглобулинемию Вальденстрема, болезнь тяжелых цепей, и истинную полицитемию. Другие виды рака предусмотрены для лечения описываемыми соединениями включают, но не ограничиваются ими: рак брюшины, гепатоцеллюлярный рак, гепатому, рак слюнных желез, рак вульвы, рак щитовидной железы, рак полового члена, анальный рак, рака головы и шеи, рак почки, острую анапластическую крупноклеточную карциному, а также кожную анапластическую карциному.

Разновидности рака, включая, но не ограничиваясь ими, опухоль, метастазы, или другие заболевания или расстройства характеризующиеся неконтролируемым или нежелательным клеточным ростом, можно лечить или предупреждать введением описанных соединений.

В других вариантах реализации изобретения предложены способы лечения или профилактики рака, включая введение пациенту, который нуждается, эффективного количества соединения описанного в данном документе в комбинации с дополнительным методом лечения. В одном варианте реализации изобретения дополнительный способ лечения включает лечение химиотерапевтическим препаратом. В одном варианте реализации изобретения химиотерапевтический препарат является таковым, устойчивость к которому при лечении рака не была выявлена. В другом варианте реализации изобретения химиотерапевтический препарат является таковым, устойчивость к которому при лечении рака была выявлена. Соединение изобретения можно вводить до, после или одновременно с химиотерапевтическим препаратом.

В одном варианте реализации изобретения дополнительным способом является радиотерапия. Соединение изобретения можно вводить до, после или одновременно с радиотерапией.

Соединения изобретения можно вводить пациенту, который прошел или будет проходить хирургическое лечение рака.

В конкретном варианте реализации изобретения соединение изобретения вводят одновременно с химиотерапевтическим препаратом или с радиотерапией. В другом конкретном варианте реализации изобретения химиотерапевтический препарат или радиотерапия вводятся до или после введения соединения изобретения, в одном аспекте по меньшей мере один, пять часов, 12 часов, день, неделю, месяц, в других аспектах несколько месяцев (например, до трех), до или после введения соединения изобретения.

Химиотерапевтический препарат может быть введен за несколько сеансов. Любой химиотерапевтический препарат или их комбинация указанные в данном документе или известные в данной области техники могут быть введены. Что касается радиации, любой протокол радиотерапии может быть использован в зависимости от типа рака, который лечится. Например, но не ограничиваясь этим, может быть введено рентгеновское излучение; в частности, высокоэнергетическое мегавольтное (излучение с энергией больше, чем 1 Мев) может быть использовано для глубоких опухолей, и электронно-лучевое и ортовольтажное рентгеновское излучение может быть использовано для рака кожи. Могут быть также введены гамма-излучающие радиоизотопы, такие как радиоизотопы радия, кобальта, и других элементов.

Кроме того, предложены способы лечения рака соединениями данного изобретения в качестве альтернативы химиотерапии или радиотерапии, где химиотерапия или радиотерапия оказались или могут оказаться слишком токсичными, например, приводя к неприемлемым или непереносимым побочным эффектам, для субъекта, поддающегося лечению. Дополнительно, предложены способы лечения рака соединениями изобретения, как альтернативы хирургическому лечению, когда хирургический метод оказался или может оказаться неприемлемым или непереносимым для субъекта поддающегося лечению.

Соединение данного изобретения может быть также использовано как in vitro, так и ex vivo, как в лечении некоторых видов рака, включая, но не ограничиваясь ими лейкозы и лимфомы, такое лечение включает трансплантацию аутологичных стволовых клеток. Это может включать многоступенчатый процесс в котором гемопоэтические аутологичные клетки животного собирают и очищают от всех раковых клеток, оставшуюся клеточную популяцию костного мозга животного уничтожают via введение эффективной дозы соединения изобретения с или без сопутствием(я) высокой дозы радиотерапии, и введение трансплантата стволовых клеток животному. В некоторых вариантах реализации изобретения эффективная доза является высокой дозой. Затем осуществляют поддерживающий уход, пока костный мозг восстанавливается и животное выздоравливает.

Способы лечения рака дополнительно включают введение пациенту, который нуждается, эффективного количества соединения изобретения и другого терапевтического препарата, который является противораковым препаратом. Соответствующие противораковые препараты включают, но не ограничиваются ими, метотрексат, таксол, L-аспарагиназа, меркаптопурин, тиогуанин, гидроксимочевина, цитарабин, циклофосфамид, ифосфамид, нитрозомочевины, цисплатин, карбоплатин, митомицин, дакарбазин, прокарбизин, топотекан, азотистые иприты, циклофосфамид, этопозид, 5-фторурацил, BCNU, иринотекан, камптотецины, блеомицин, доксорубицин, идарубицин, даунорубицин, актиномицин D, дактиномицин, пликамицин, митоксантрон, аспарагиназа, винбластин, винкристин, виндезин, винорелбин, паклитаксел и доцетаксел.

Другие примеры химиотерапевтических препаратов включают алкилирующие агенты такие как тиотепа и CYTOXAN® циклосфосфамид; алкил сульфонаты такие как бусульфан, треосульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины такие как бензодопа, карбокион, метуредопа, и уредопа; этиленимины и метилмеламины включая алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметилоломеламин; TLK 286 (TELCYTA™); ацетогенины (особенно буллатацин и буллатацинон); дельта-9-тетрагидроканнабинол (дронабинол, MARINOL®); бета-лапахон; лапахола; колхицины; бетулиновая кислота; камптотецин (включая синтетический аналог топотекан (HYCAMTIN®), СРТ-11 (иринотекан, CAMPTOSAR®), ацетилкамптотецин, скополектин, и 9-аминокамптотецин); бриостатин; каллистатин; СС-1065 (включая адозелезин, карзелезин и бизелезин синтетические аналоги); подофиллотоксин; подофиллиновая кислота; тенипозид; цииптофицины (особенно цииптофицин 1 и цииптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая синтетические аналоги, KW-2189 и СВ1-ТМ1); элеутеробин; панкратистатин; саркодиктин; спожистатин; азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, хломафазин, хлофосфомид, эстрамустин, ифосфамид, мехлорэтамин, мехлорэтамин оксид гидрохлорид, мелфалан, новембицин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, и урац иприт; триазины, такие как декарбазин, нитрозомочевины, например, кармустином, хлорозотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин, и ранимнустин; эпидодофилины, такие как этопозид, тенипозид, топотекан, 9-аминокамптотецин, камптотецин оркриснатол; бисфосфонаты, такие как клодронат; антибиотики, такие как ендииновые антибиотики (например, калихамицин, особенно калихамицин гаммаол и калихамицин омегаол (см., например, Agnew, Chem. Intl. Ed. Engl., 33:183-186 (1994)) и антрациклины, такие как аннамицин, AD 32, алкарубицин, даунорубицин, дексразоксан, DX-52-1, эпирубицин, GPX-100, идаруцибин, KRN5500, меногарил, динемицин, включая динемицин А, эсперамицин, неокарциностатиновый хромофор и родственные хромопротеиновые хромофоры эндииновых антибиотиков, аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин,блеомицины (например, А2 и В2), кактиномицин, карабицин, каминомицин, карзинофилин, хромомицин, дактиномицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцин, ADRIAMYCIN® доксорубицин (включая морфолино-доксорубицин, цианоморфолино-доксорубицин, 2-пирролино-доксорубицин, доксорубицин, и дезоксидоксорубицин), эзорубицин, марселомицин, митомицины, такие как митомицин С, микофеноловая кислота, ногаламицин, оливомицины, пепломицины, потферомицин, пуромицин, келамицин, родорубицин, стрептонигрин, Стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, зиностатин, и зорубицина; фотодинамическая терапия, такие как вертопорфирин (BPD-MA), фталоцианин, фотосенсибилизатор РС4, и деметокси-гипокреллин A (2BA-2-DMHA); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, птероптерин, и триметрексат; пуриновые аналоги, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, и тиогуанидин; пиримидиновые аналоги, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, цитозинарабинозидом, диделксиуридин, доксифлуридина, эноцитабин, и Флоксуридин; андрогены, такие как калустерон, дромостанолона пропионат, эпитиостанол, мепитиостан, и тестолактон; анти-надпочечники, такие как аминоглютетимид, митотан, и трилостан; компенсатор фолиевой кислоты, такой как фолиновая кислота (лейковорин); ацеглатон; антифолатные противоопухолевые агенты, такие как ALIMTA®, LY231514 пеметрексед, ингибиторы дигидрофолатредуктазы, такие как метотрексат и триметрексат; антиметаболиты, такие как 5-фторурацил (5-FU) и его пролекарства, такие как UFT, S-1 и капецитабином, флоксуридин, доксифлуридина и ратитрексед; и ингибиторы тимидилатсинтазы и ингибиторы глицинамид рибонуклеотид формилтрансферазы, такие как ралтитрекседа (TOMUDEX®, ТДХ); ингибиторы дигидропиримидиндегидрогеназы, такие как энилурацил; алдофосфамид гликозид; аминолевулиновая кислота; амсакрин; бестрабуцил; бисантрен; эдатраксат; дефофмин; демеколцин; диазикон; элформитин; эллиптиниум ацетат; эпотилон; этоглюцид; нитрат галлия; гидроксимочевина; лентинан; лонидаинин; мейтансиноиды, такие как маитанзин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопиданмол; нитриэрин; Пентостатин; фенамет; пирарубицин; лозоксантрон; 2-этилгидразид; прокарбазин; PSK® полисахаридный комплекс (JHS Natural Products, Eugene, Oreg.); разоксан; ризоксин; сизофиран; спирогерманиум; тенуазоновая кислота; триазиквон; 2,2',2ʺ-трихлортриэтиламин; трихотецены (особенно Т-2 токсин, верракурин А, роридин А и ангуидин); уретан; виндезина (ELDISINE®, FILDESIN®); Дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид ("Ara-С"); циклофосфамид; тиотепа; таксоиды и таксаны, например, TAXOL® паклитаксел (Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.), ABRAXANE™ Cremophor-free, альбумин содержащий препарат в виде наночастиц паклитаксела (American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, 111.), и TAXOTERE® доксетаксел (Rhone-Poulenc Rorer, Antony, France); хлоранбуцил; гемцитабин (GEMZAR®); 6-тиогуанин; меркаптопурин; платина; аналоги платины или аналоги на основе платины, такие как цисплатин, оксалиплатин и карбоплатин; винбластин (VELBAN®); этопозид (VP-16); ифосфамид; митоксантрон; винкристин (ONCOVIN®); алкалоид барвинка; винорелбина (NAVELBINE®); Велькад; REVLIMID; талидомид; IMiD3; ловастатин; верапамил; тапсигаргин; л-метил-4-фенилпиридиний, ингибиторы клеточного цикла, такие как стауроспорином; новантрон; эдатрексат; дауномицин; мтоксантрон; аминоптерин; Кселода; ибандроната; ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифторметиломитин (DMFO); аналоги витамина D3, такие как ЕВ 1089, СВ 1093 и КН 1060; ретиноиды, такие как ретиноевая кислота; их фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанных выше соединений; а также комбинации двух или более из указанных выше, такие как CHOP, аббревиатура для комбинированной терапии циклофосфамидом, доксорубицином, винкристином, и преднизолон, и FOLFOX, аббревиатура для схемы лечения с оксалиплатиной (Элоксатин™) в сочетании с 5- ФУ и лейковорином.

Антигормональные препараты, которые действуют регулируя или ингибируя действие гормонов на опухоли такие как антиэстрогены и селективные модуляторы эстрогеновых рецепторов (SERMs), включая, например, тамоксифен (включая NOLVADEX® тамоксифен), ралоксифен, мегастрол, дролоксифен, 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, кеоксифен, LY117018, онапристон, и FARESTON® торемифен; ингибиторы ароматазы, которые ингибируют энзим ароматазу, который регулирует выработку эстрогена в надрочечниках, такие как, например, 4(5)-имидазолы, аминоглютетимидин, MEGASE® мегестрол ацетат, AROMASIN® екземестан, форместан, фадрозол, RIVISOR® ворозол, FEMARA® летрозол, и ARIMTDEX® анастрозол; и антиандрогены такие как флютамид, бикалутамид, нилютамид, бикалюьамид, леупролид, и гозерелин; также как и троксацитабин (1,3-диоксолановый нуклеозидный аналог цитозина); антисмысловые олигонуклеотиды, особенно те, которые ингибируют экспрессию генов в сигнальных путях, вовлеченных в пролиферацию абберантных клеток, таких как, например, PKC-alpha, Raf, H-Ras, и рецептор эпидермального фактора роста (EGF-R); вакцины такие как генно терапевтические вакцины, например, ALLOVECTIN® вакцина, LEUVECTIN® вакцина, и VAXID® вакцина; PROLEUKIN® rIL-2; LURTOTECAN® ингибитор топоизомеразы 1; ABARELIX® rmRH; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из вышеперечисленных соединений.

Соединения описания, или их фармацевтически приемлемые соли могут содержать один или более асимметрических центров и могут, таким образом, привести к энантиомерам, диастеремерам, и другим стереомерным формам, которые могут быть определены в терминах абсолютной стереохимии, как (R)- или (S)- или, как (D)- или (L)- для аминокислот. Настоящее описание включает все такие возможные изомеры, также как и их рацемические и оптически чистые формы. Оптически активные (+) и (-), (R)- и (S)-, или (D)- и (L)- изомеры могут быть получены с использованием хиральных синтонов или хиральных реагентов, или разделением с использованием обычных техник, например, хроматографии и фракционной кристаллизации. Обычные методы для получения/выделения индивидуальных энантиомеров включают хиральный синтез из подходящего оптически активного прекурсора или разделение рацемата (или рацемата соли производного) используя, например, хиральную жидкостную хроматографию высокого давления (ВЭЖХ). Когда соединения, описанные в данном документе содержат олефиновую двойную связь или другие центры геометрической асимметрии, и если не указанно иное, предполагается, что соединения включают оба E и Z геометрических изомера. Также включены все таутомерные формы.

"Стереоизомер" относится к соединению, состоящему из тех же атомов связанных теми же связями, но имеющему различные трехмерные структуры, которые не являются взаимосвязанными. Настоящее описание предусматривает различные стереоизомеры и их смеси, и включает "энантиомеры", которые относятся к двум стереоизомерам молекулы, которые не являются совместимыми зеркальными отражениями друг друга.

"Таутомер" относится к переносу протона от одного атома молекулы к другому атому этой же молекулы. Настоящее описание включает таутомеры любого из упомянутых соединений.

Направляющий фрагмент (Т)

Направляющий фрагмент (Т) испытуемых композиций включает в пределах своего объема любую единицу (Т), связанную или реактивно ассоциированную или комплексованную с рецептором, антигеном или другим восприимчивым фрагментом, ассоциированным с данной целевой клеточной популяцией. Направляющий фрагмент (Т) представляет собой молекулу, которая связывается с, комплексует с, или реагирует с целевым фрагментом клеточной популяции. Примеры направляющих фрагментов включают соединения способные связываться с естественно встречающимися молекулами присутствующими на поверхности интересующих клеток, а также с фрагментами их пептидов, полученных из них. Такие направляющие фрагменты могут иметь или нет биологическую активность сами по себе (например, цитокины, которые имеют биологическую активность). Примеры направляющих молекул включают антитела, лиганды рецепторов поверхности клетки, лиганды производные из нечеловеческих клеток, включая бактериальные и патогенные производные лигандов. Широкий спектр соответствующих направляющих фрагментов известен в данной области техники. Например, см. W02013117705.

В одном аспекте, направляющий фрагмент (Т) действует для доставки полезного вещества (Р), которое может быть лекарством (D), к конкретной целевой клеточной популяции с которого реагирует направляющий фрагмент (Т). Такие направляющие фрагменты включают, но не ограничиваются ими, белки с большой молекулярной массой, такие как, например, полноразмерные антитела, фрагменты антител, белки с меньшей молекулярной массой, полипептиды или пептиды, лектины, гликопротеины, цитокины, не-пептиды, витамины, транспортирующие питательные вещества молекулы (такие как, но не ограничиваясь ими, трансферрин), или любая другая связывающаяся с клеткой молекула или вещество, ее фрагмент или ее пептидное производное или пептид основанный на ней.

Направляющий фрагмент (Т) может образовывать связь с линкером (L) via гетероатом направляющего фрагмента (Т). Гетероатомы, которые могут присутствовать в направляющем фрагменте (Т) включают серу (в одном варианте реализации изобретения из сульфгидрильной группы (Т)), кислород (в одном варианте реализации изобретения из гидроксильной группы (Т)) и азот (в одном варианте реализации изобретения из первичной или вторичной аминогруппы (Т)). Эти гетероатомы могут присутствовать в направляющий фрагмент (Т) в его естественной форме, например антителе естественного происхождения, или могут быть введены в направляющий фрагмент (Т), например, via химическую модификацию или рекомбинантным путем.

В одном варианте реализации изобретения направляющий фрагмент (Т) имеет сульфгидрильную группу, связанную с линкером (L) via атом серы сульфгидрильной группы. В другом варианте реализации изобретения направляющий фрагмент (Т) имеет один или более остатков лизина, которые могут быть химически модифицированы для введения одной или более сульфгидрильных групп. Направляющий фрагмент (Т) связывается с линкером (L) via сульфгидрильную группу. Реагенты, которые могут быть использованы для модификации лизинов включают, но не ограничиваются ими, N-сукцимидил S-ацетилтиоацетат (SATA) и 2-иминотиолан гидрохлорид (Реагент Траута). В предпочтительном варианте изобретения, множество (L) связывают с (Т).

В другом варианте реализации изобретения (b)может иметь одну или более карбогидратную группы, которые могут быть химически модифицированы и иметь один или более сульфгидрильные группы. Направляющий фрагмент (Т) связывается с линкером (L) via атом серы сульфгидрильной группы. В другом варианте реализации изобретения (Т) может иметь одну или более карбогидратных групп, которые могут быть окислены приводя к альдегидной группе (--CHO) (см., например, Laguzza et al., 1989, J. Med. Chem. 32(3):548-55). Соответствующий альдегид может образовывать связь с реакционным сайтом части линкера (L). Реакционные сайты, могут реагировать с карбонильной группой направляющего фрагмента (Т) включая, но, не ограничиваясь ими, гидразин и гидроксиламин. Другие методики модификации протеинов для крепления или ассоциирования линкера описаны в (L) Coligan et al., Current Protocols in Protein Science, vol. 2, John Wiley & Sons (2002), включенной в данный документ во всей своей полноте посредством ссылки.

Направляющий фрагмент (Т) может включать, например, белок, полипетид, или пептид, включая, но не ограничиваясь, трасферрин, эпидермальные факторы роста ("EGF"), бомбезин, гастрин, гастрин-релизинг пептид, тромбоцитарный фактор роста, IL-2, IL-6, трансформирующий фактор роста ("TGF"), такой как TGF-α или TGF-β, фактор роста коровьей оспы ("VGF"), инсулин и инсулиноподобный факторы роста I и II, лектины и апопротеин из низкоплотностного липопротеина.

Направляющий фрагмент (Т) может также включать антитело, такое как поликлональные антитела или моноклональные антитела. Антитело может быть направлено к определенной антигенной детерминанте, включая, например, раковый клеточный антиген, вирусный антиген, микробный антиген, белок, пептид, углевод, химической детерминанте, нуклеиновой кислоте, или их фрагментов. Способы получения поликлональных антител известны в данной области техники. Моноклональные антитела ((mAb) к интересующему антигену могут быть получены с помощью любого метода, известного в данной области техники. Они включают, но неограничиваются ими, технику гибридомы, первоначально описанную Kohler and Milstein (1975, Nature 256, 495-497), технику гибридомы В клеток человека (Kozbor et al., 1983, Immunology Today 4:72), и EBV-гибридомную технику (Cole et al., 1985, Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc., pp. 77-96). Метод отбора лимфоцитарных антител (SLAM) (Babcook, J.S., et al., A novel strategy for generating monoclonal antibodies from single, isolated lymphocytes producing antibodies of defined specificities. Proc Natl Acad Sci USA, 1996. 93 (15): p. 7843-8) and (McLean GR, Olsen OA, Watt IN, Rathanaswami P, Leslie KB, Babcook JS, Schrader JW. Recognition of human cytomegalovirus by human primary immunoglobulins identifies an innate foundation to an adaptive immune response; J Immunol. 2005 Apr 15; 174(8):4768-78). Такие антитела могут относиться к любому классу иммуноглобулинов, включая IgG, IgM, IgE, IgA, и IgD и любой их подкласс. Гибридомное производство, используемое в данном изобретении mAbs может производиться in vitro или in vivo.

Моноклональное антитело может быть, например, моноклональным антителом человека, гуманизированным моноклональным антителом, фрагментом антитела, или химерным антителом (например, антителом мыши и человека). Моноклональные антитела человека могут быть получены с помощью любого из многочисленных методов, известных в данной области техники (например, Teng et al., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80:7308-7312; Kozbor et al., 1983, Immunology Today 4:72-79; и Olsson et al., 1982, Meth. Enzymol. 92:3-16; also see, Huse et al., 1989, Science 246:1275-1281 and McLean et al. J Immunol. 2005 Apr 15; 174(8):4768-78).

Антитело может также быть биспецифичным антителом. Методы получения биспецифичных антител известны в данной области техники. Традиционное получение полноразмерных биспецифичних антител основывается на коэкспрессии двух иммуноглобулиновых пар тяжелая-легкая цепь, где две цепи имеют различные специфичности (см., например, Milstein et al., 1983, Nature 305:537-539; International Publication No. WO 93/08829, Traunecker et al., 1991, EMBO J. 10:3655-3659).

Согласно другому подходу, вариабельные домены антитела с желаемыми специфичностями связывания (антитело-антиген объединяющие сайты) слиты в константные последовательности домена иммуноглобулина. Слияние предпочтительно с тяжелой цепью константного домена иммуноглобулина, содержащей, по меньшей мере часть петли, C_H2, и C_H3 регионов. Предпочтительно, чтобы первый константный участок тяжелой цепи (C_H1) содержал сайт необходимый для связывания легкой цепи, присутствующий, по крайней мере, в одном из слияний. Нуклеиновые кислоты с последовательностями, кодирующими слияния тяжелый цепей иммуноглобулина, и, при желании, легкие цепи иммуноглобулина, вводят в отдельные векторы экспрессии, и совместно трансфицируют в подходящий организм хозяина. Это обеспечивает гибкость в корректировке взаимных пропорций трех полипептидных фрагментов в вариантах, когда неравные соотношения трех полипептидных цепей, используемых в конструкции, обеспечивают оптимальные выходы. Однако, возможно ввести кодирующие последовательности для двух или всех трех полипетидных цепей в один экспрессирующий вектор, когда экспрессия по меньшей мере двух полипептидных цепей в равных соотношениях приводит к высоким выходам или когда соотношения не имеют особого значения.

Например, биспецифичные антитела могут иметь гибридную тяжелую цепь иммуноглобулина с первой специфичностью связывания на одной цепи, и гибридную пару тяжелая-легкая цепь (предоставляющую вторую специфичность связывания) на другой цепи. Эта асимметричная структура облегчает выделение целевого соединение от нежелательных комбинаций иммуноглобулиновых цепей, а присутствие легкой цепи иммуноглобулина только в одной половине биспецифичной молекулы обеспечивает легкий путь для разделения (WO 94/04690) который включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Для получения дополнительной информации для получения биспецифичных антител, см., например, Suresh et al., 1986, Methods in Enzymology 121:210; Rodrigues et al., 1993, J. Immunology 151:6954-6961; Carter et al., 1992, Bio/Technology 10:163-167; Carter et al., 1995, J. Hematotherapy 4:463-470; Merchant et al., 1998, Nature Biotechnology 16:677-681. Используя такие методы, биспецифические антитела могут быть получены для использования в лечении или предотвращении заболевания, как определено в данном документе.

Бифункциональные антитела также описаны в Европейской патентной публикации №. EPA 0105360. Как указано в данной ссылке, гибридные или бифункциональные антитела могут быть модифицированы биологически, то есть, методами слияния клеток, или химически, особенно с помощью кросс-сшивающих агентов или реагентов образующих дисульфидные мостики, и могут содержать антитела полностью или их фрагменты. Методы получения таких гибридных антител описаны, например, в международной публикации WO 83/03679, и Европейской патентной публикации №. EPA 0217577, обе включены в данный документ во всей своей полноте посредством ссылки.

Антитело также может быть функционально активным фрагментом, производным или аналогом антитела, которое иммуноспецифично связывается с целевым антигеном (например, раковый антиген, вирусный антиген, микробный антиген, или другие антитела, связывающиеся с клеткой или матриксом). В этом плане, "функционально активный" означает, что фрагмент, производное или аналог способен распознать тот же антиген, что распознается антителом, частью которого является фрагмент, производное или аналог. В частности, в примерном варианте антигенность идиотипа иммуноглобулиновой молекулы может быть повышена за счет исключения структуры и CDR последовательностей, которые являются C-концевой CDR последовательностью, которая специфически распознает антиген. Чтобы определить, какие CDR последовательности связывают антиген, синтетические пептиды, содержащие CDR последовательности могут использоваться в пробах связывания с антигеном, с помощью любого метода определения связывания известного в данной области техники (см., BIA анализ) (см., например, Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, National Institute of Health, Bethesda, Md.; Kabat et al., 1980, J. Immunology 125(3):961-969).

Другие полезные антитела включают фрагменты антител, такие как, но не ограничиваясь ими, F(ab')₂ фрагменты, Fab фрагменты, Fab', Fv фрагменты и димеры тяжелых и легких цепей антител, или любой их минимальный фрагмент такой как Fvs или одноцепочечные антитела (SCAs) (например, как описано в U.S. №4946778; Bird, 1988, Science 242:423-42; Huston et al., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; и Ward et al., 1989, Nature 334:544-54).

Рекомбинантные антитела, такие как химерные или гуманизированные моноклональные антитела, включают обе, человеческую и не-человеческую части, которые могут получены с использованием стандартных методов рекомбинантной ДНК, также могут быть использованы. (См., например, U.S. №4,816,567; и U.S. №4,816,397.) Гуманизированные антитела представляют собой молекулы антител из не-человеческого источника имеющие один или более комплементарных определяющих участка (CDRs) из нечеловеческого источника и структурный участок из человеческой иммуноглобулиновой молекулы. (См., например, U.S. №5,585,089.) Химерные и гуманизированные моноклональные антитела могут быть получены методами рекомбинатной ДНК известными в данной области техники, например с использованием методов описанных в международной публикации № WO 87/02671; Европейская патентная публикация №0184187; Европейская патентная публикация №0171496; Европейская патентная публикация №0173494; Международная публикация № WO 86/01533; U.S. №.4,816,567; Европейская патентная публикация №.012023; Better et al., 1988, Science 240:1041-1043; Liu et al., 1987, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:3439-3443; Liu et al., 1987, J. Immunol. 139:3521-3526; Sun et al., 1987, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:214-218; Nishimura et al., 1987, Cancer. Res. 47:999-1005; Wood et al., 1985, Nature 314:446-449; Shaw et al., 1988, J. Natl. Cancer Inst. 80:1553-1559; Morrison, 1985, Science 229:1202-1207; Oi et al., 1986, BioTechniques 4:214; U.S. Pat. №.5,225,539; Jones et al., 1986, Nature 321:552-525; Verhoeyan et al., 1988, Science 239:1534; и Beidler et al., 1988, J. Immunol. 141:4053-4060.

Могут использоваться полностью человеческие антитела. Человеческие антитела могут быть получены, например, с использование трангенных мышей, которые способны экспрессировать эндогенные иммуноглобулиновые генны тяжелых и легких цепей, но которые могут экспрессировать гены тяжелых и легких цепей человека. Трансгенные мыши, иммунизированные в нормальном режиме выбранным антигеном, например, всем или частью полипептида изобретения. Моноклональные антитела, направленные против антигена могут быть получены с использованием обычной гибридомной технологии. Трансгены иммуноглобулина человека введенные трансгенной мыши реорганизуются во время дифференциирования В клеток и последовательно меняют класс и мутируют соматически. Таким образом, используя такую технику, можно изготовить терапевтически полезные антитела IgG, IgA, IgM и IgE. Для общих сведений о технологии получения антител человека, см. Lonberg and Huszar (1995, Int. Rev. Immunol. 13:65-93). Для подробного описания этой технологии получения антител человека и моноклональных антител человека и для методик получения таких антител, см., например, U.S. №№.5,625,126; 5,633,425; 5,569,825; 5,661,016; и 5,545,806.

Антитела человека, которые распознают выбранный эпитоп, также могут быть получены с использованием метода именуемого "направленный отбор". При таком подходе выбранное нечеловеческое моноклональное антитело, например, антитело мыши, используется для выбора полностью человеческого антитела распознающего тот же эпитоп. (См., например, Jespers et al., 1994, Biotechnology 12:899-903.) Антитела человека могут также быть получены с использованием разнообразным методов, известных в данной области техники, включая библиотеки фаговых дисплеев. (см., например, Hoogenboom and Winter, 1991, J. Mol. Biol. 227:381; Marks et al., 1991, J. Mol. Biol. 222:581; Quan and Carter, 2002, "The rise of monoclonal antibodies as therapeutics," in Anti-IgE and Allergic Disease, Jardieu, P.M. and Fick Jr., R.B, eds., Marcel Dekker, New York, N.Y., Chapter 20, pp. 427-469).

В других вариантах реализации изобретения антитело представляет собой гибридный белок иммуноглобулина, или его функционально активный фрагмент. Например, антитело может быть слито via ковалентную связь (например, пептидную связь) либо на N-конце или на C-конце аминокислотной последовательности другого белка (либо его части, такой как, по меньшей мере, 10, 20 или 50 аминокислотных остатков протеина), который не является антителом.

Антитела также включают аналоги и производные, который либо модифицированы, т.е., путем ковалентного присоединения любой другой молекулы, при условии, что такое ковалентное присоединение позволяет антителу сохранить его иммуноспецифическое связывание с антигеном. Например, но, не ограничиваясь этим, производные и аналоги антител включают те, которые были модифицированы, например, путем гликозилирования, ацетилирования, пегилирования, фосфорилирования, амидирования, дериватизации известными защитными/блокирующими группами, протеолитическим расщеплением, связыванием с клеточным антителом или другим белком, и т.д. Любая из множества химических модификаций может быть осуществлена с помощью известных методов, включая, но, не ограничиваясь ими, специфическое химическое расщепление, ацетилирование, формилирование, метаболический синтез в присутствии туникамицина, и т.д. Кроме того, аналог или производное, может содержать одну или более неприродных аминокислот.

Антитела могут иметь модификации (например, замещения, делеции или добавления) в аминокислотных остатках, которые взаимодействуют с Fc рецепторами. В частности, антитела включают антитела имеющие модификации в аминокислотных остатках, идентифицированных как таких, которые участвуют во взаимодействии между анти-Fc доменом и FcRn рецептором (см., например, международную публикацию № WO 97/34631, которая включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.). Иммуноспецифичные антитела для целевого антигена могут быть получены коммерчески, или из другого источника, или получены методом известным специалисту в данной области техники, например, химическим синтезом или методами рекомбинантной экспрессии. Нуклеотидная последовательность, кодирующая антитела иммуноспецифичные к раковым антигенам может быть получена, например, из базы GenBank или аналогичной базы данных, литературной публикации, или рутинным клонированием и секвенированием.

Примеры антител доступных для лечения рака включают, но не ограничиваются ими гуманизированное анти HER2 моноклональное антитело, HERCEPTIN® (трастузумаб; Genentech); RITUXAN® (ритуксимаб; Genentech), который представляет собой химерное анти CD20 моноклональное антитело для лечения больных с неходжкинской лимфомой; OvaRex (AltaRex Corporation, MA), которое представляет собой мышиное антитело, для лечения рака яичников; Panorex (Glaxo Wellcome, NC), которое представляет собой мышиный IgG2a антитела для лечения колоректального рака; Cetuximab Erbitux (Imclone Systems Inc., Нью-Йорк), который представляет собой химерные антитела анти-EGFR IgG, для лечения эпидермального фактора роста позитивных видов рака, таких как рак головы и шеи; Vitaxin (Medlmmune, Inc., MD), который представляет собой гуманизированное антитело для лечения саркомы; Campath I/H (Leukosite, MA), который представляет собой гуманизированное антитело IgG1 для лечения хронического лимфолейкоза (ХЛЛ); Smart MI95 (Protein Design Labs, Inc., CA), который является гуманизированным анти-CD33 антитела IgG для лечения острого миелоидного лейкоза (ОМЛ); LymphoCide (Immunomedics, Inc., Нью-Джерси), который является гуманизированным анти-CD22 IgG антитела для лечения неходжкинской лимфомы; Smart ID (Protein Design Labs, Inc., CA), который является гуманизированным анти-HLA-DR антитела для лечения неходжкинской лимфомы; Oncolym (Techniclone, Inc., CA), который является радиоактивным изотопом мышиным анти-HLA-DR10 антитела для лечения неходжкинской лимфомы; Allomune (BioTransplant, CA), который является гуманизированным анти-CD2 мАт для лечения болезни Ходжкина или неходжкинской лимфомы; Avastin (Genentech, Inc., CA), которое представляет собой гуманизированное антитело, анти-VEGF- для лечения легких и колоректального рака; Epratuzamab (Immunomedics, Inc., Нью-Джерси и Amgen, CA), который является анти-CD22 антитела для лечения неходжкинской лимфомы; и CEAcide (Immunomedics, штат Нью-Джерси), который является гуманизированным анти-СЕА антитела для лечения колоректального рака.

Другие антитела полезные при лечении рака включают, но не ограничиваются ими, антитела против следующих антигенов (примеры типов рака указаны в скобках): СА125 (рак яичников), СА15-3 (карциномы), СА19-9 (карциномы), L6 (карциномы), Lewis Y (карциномы), Lewis X (карциномы), альфа фетопротеин (карциномы), СА 242 (колоректальный рак), плацентарная щелочная фосфатаза (карциномы), простатический специфический мембранный антиген (простатапростатическая кислая фосфатаза (рак простаты), эпидермальный фактор роста (карциномы), MAGE-1 (карциномы), MAGE-2 (карциномы), MAGE-3 (карциномы), MAGE-4 (карциномы), антитрансфериновый рецептор (карциномы), р97 (меланома), MUC1-KLH (рак молочной железы), CEA (колоректальный рак), gp100 (меланома), MARTI (меланома), специфический антиген простаты (PSA) (рак простаты), IL-2 рецептор (Т-клеточная лейкемия и лимфомы), CD20 (не ходжкинская лимфома), CD52 (лейкоз), CD33 (лейкоз), CD22 (лимфома), хорионический гонадотропин человека (карцинома), CD38 (множественная миелома), CD40 (лимфома), муцин (карциномы), Р21 (карциномы), MPG (меланомы), и Neu онкогенный продукт (карциномы). Некоторые специфические, полезные антитела включают, но не ограничиваются ими, BR96 mAb (Trail et al., 1993, Science 261:212-215), BR64 (Trail et al., 1997, Cancer Research 57:100-105), mAbs против CD40 антигена, такого как S2C6 mAb (Francisco et al., 2000, Cancer Res. 60:3225-3231) и их химерные и гуманнизированые варианты, МКА против cD33 антигена; mabs против EphA2 антигена; mAbs против CD70 антигена, такого как 1F6 mAb и 2F2 mAb и их химерные и гуманизированные варианты, и mAbs против CD30 антигена, такого как АС10 (Bowen et al., 1993, J. Immunol. 151:5896-5906; Wahl et al., 2002, Cancer Res. 62(13):3736-42) и их химерные и гуманнизированые варианты. Много других интернализированных антител, которые связываются с антигенами ассоциированными с раком могут быть использованы и изучены (см., например, Franke et al., 2000, Cancer Biother. Radiopharm. 15:459 76; Murray, 2000, Semin. Oncol. 27:64 70; Breitling et al., Recombinant Antibodies, John Wiley, and Sons, New York, 1998).

Антитело также может быть антителом, которое связывается с антигеном, присутствующим в целевой клетке или целевой популяции клеток. Например, трансмембранные полипептиды и другие маркеры могут специально экспрессироваться на поверхности одной или более целевой клетке конкретного вида(ов) (например, раковой клетке) по сравнению с одной или более нормальной клеткой (например, нераковой клетке(ах)). Часто, такие маркеры обильнее экспрессируются на поверхности целевых клеток, или проявляют большую иммуногенность, по сравнению с теми, что находятся на поверхности нормальных клеток. Выявление таких антигенных полипептидов на клеточной поверхности привело к способности специфически выявлять клетки для уничтожения via антитело-основанных терапий. Таким образом, в некоторых вариантах реализации изобретения антитела включают, но не ограничиваются ими, антитело против опухолеассоциированных антигенов (ТАА). Такие опухолеассоциированные антигены известны в данной области техники, и могут быть получены для использования в генерации антител с использованием способов и информации, хорошо известных в данной области техники.

См. также EP 2552957, WO/2012/116453, WO/2012/032080. См. также Zybody™, http://www.zyngenia.com/technology.html. См. также технологию только-тяжелоцепочечных антител человека, http://www.crescendobiologics.com/. См. также WO 2010001251, основаная на дрожжах антитело человека-основанная на дрожжах платформа http://www.adimab.com/science-and-technology/technology-overview/, mAbLogix™ платформа http://www.dna.com/technology, моноклональная исследовательская платформа http://www.igenica.com/technology/, WO 2009/157771, EP 2560993, WO 2013004842, WO 2012166560.

Линкерный фрагмент (L)

Рассматриваемые композиции дополнительно включают линкерный фрагмент (L). Как с полезным веществом (Р), линкерный фрагмент (L) характеризуется исходя из собранного конъюгата изобретения. Соответственно, линкер (L), как он характеризуется в данном документе, не обязательно, но может соответствовать конкретному реактанту используемому в синтезе конъюгата. Компоненты линкера (L) могут быть введены большим количеством реагентов.

В одном варианте реализации изобретения линкерный фрагмент (L) представляет собой бифункциональное соединение, которое может быть использовано для связывания полезного вещества (Р) и направляющего фрагмента (Т) образуя соединение конъюгат, (Т)-(L)-(P). Такие конъюгаты позволяют селективно доставлять лекарственное средство к целевым молекулам (например, клеткам опухоли). В некоторых вариантах реализации изобретения фрагменты линкера включают дивалентные заместители, такие как алкилдиил, арилдиил, гетероарилдиил, фрагменты, такие как: -(CR₂)_nO(CR₂)_n-, повторяющиеся единицы алкилокси (например, полиэтиленокси, ПЕГ, полиметиленокси) и алкиламино (например, полиэтиленамино, Jeffamine™); и эфиры дикислот и амиды включая: сукцинат, сукцинамид, дигликолят, малонат и капроамид. Соединения, описанные в данном документе, могут быть получены с использованием линкерного фрагмента имеющего реактивный сайт для связывания с полезным веществом и направляющим фрагментом.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) имеет реактивный сайт, который имеет электрофильную группу, которая реагирует с нуклеофильной группой присутствующей в (Т). Полезные нуклеофильные группы (Т) включают, но не ограничиваются ими сульфгидрильную, гидроксильную и аминогруппы. Гетероатом нуклеофильной группы (Т) реагирует с электрофильной группой (L) и образует ковалентную связь с (L). Полезные электрофильные группы, включают, но не ограничиваются ими, малеимидную и галогенацетамидную группы. Нуклеофильная группа (Т) обеспечивает удобный сайт связывания с (L).

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) имеет реактивный сайт, который имеет нуклеофильную группу, которая реагирует электрофильной группой присутствующей в направляющем фрагменте. Полезные электрофильные группы для направляющего фрагмента включают, но не ограничиваются ими, альдегидную и кетонную карбонильную группы. Гетероатом нуклеофильной группы (L) может реагировать с электрофильной группой направляющего фрагмента и образовывать ковалентную связь с направляющим фрагментом. Полезные нуклеофильные группы в (L) включают, но не ограничиваются ими, гидразид, оксим, амино, гидразин, тиосемикарбазон, гидразинкарбоксилат, и арилгидразид. Электрофильная группа в направляющем фрагменте обеспечивает удобный сайт для присоединения (L).

Функциональные группы карбоновой кислоты и хлороформатные функциональные группы являются также полезными реактивными сайтами для (L), потому что они могут реагировать, например, с аминогруппой P¹ образуя амидную связь. Также полезны как реактивные сайты карбонатные функциональные группы в (L), такие как, но, не ограничиваясь, p-нитрофенил карбонат, который реагирует, например, с аминогруппой P¹ образуя карбаматную связь.

Понятно, что любые линкерные фрагменты, описанные в предшествующем уровне техники, и особенно, те которые изучены в контексте использования доставки лекарственных средств, могут использоваться в текущем изобретении. Без ограничения объема предыдущего изобретения, в одном варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2012/113847. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 8,288,352. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 5,028,697. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 5,006,652. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 5,094,849. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 5,053,394. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 5,122,368. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 5,387,578. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент описанный U.S. 5,547,667. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 5,622,929. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 5,708,146. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 6,468,522. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 6,103,236. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 6,638,509. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 6,214,345. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 6,759,509. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2007/103288. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2008/083312. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2003/068144. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2004/016801. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2009/134976. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2009/134952. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2009/134977. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2002/08180. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2004/043493. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2007/018431. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2003/026577. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2005/077090. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2005/082023. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2007/011968. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2007/038658. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2007/059404. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2006/110476. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2005/112919. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в WO 2008/103693. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 6,756,037. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 7,087,229. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 7,122,189. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 7,332,164. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 5,556,623. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 5,643,573. В другом варианте реализации изобретения (L) содержит линкерный фрагмент, описанный в U.S. 5,665,358. Линкеры (L) содержащие саморасщепляющийся компонент также могут быть использованы. Например, см. U.S. №6,214,345. Примером саморасщепляющегося компонента является p-аминобензилкарбамоил (PABC). В изобретении могут быть использованы коммерчески доступные линкеры. Например, коммерчески доступный расщепляемый линкер сульфосукцинимидил 6-[3'(2-пиридилдитио)-пропионамидо] гексаноат (сульфо-LC-SPDP: Thermo Pierce Cat# 21650) и нерасщепляемый линкер сукцинимидил 4-[N-малеинимидометил]циклогексан-1-карбоксилат (SMCC: Thermo Pierce Cat# 22360) могут быть использованы, как показано в данном документе. См., также, WO 2012171020, WO 2010138719, ассортимент коммерчески доступных линкеров, например, у Concortis http://www.concortis.com/home. См. также Kim et al., Bioconjugate Chemistry, 21 (8): 1513-1519 AUG 2010. См. также EP 2326349. См. также химические линкеры на основе клик-химии без меди., Angew. Chem. Int. Ed., 2010, 49, p. 9422-9425, ChemBioChem, 2011, 12, p. 1309-1312, http://www.synafflx.com/technology/.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает: SPDP, SMCC, vcPABC, MCvcPABC, MTvc, ADvc, малеинимид, NHS, биотин, стрептавидин, NeutrAvidin, гликозид, или их комбинацию.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает SPDP.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает SMCC.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает vcPABC.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает MCvcPABC.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает MTvc.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает ADvc.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает малеимид.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает NHS.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает биотин.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает стрептавидин.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает NeutrAvidin.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) включает гликозид.

В некоторых вариантах реализации изобретения (L) отсутствует.

В одном варианте реализации изобретения линкер (L) представляет собой бифункциональную единицу, которая связывает полезное соединение (Р) с направляющим фрагментом (Т) образуя конюъгированную композицию, [(P)-(L)]_m-(T), которая может быть ферментативно расщеплена по связывающей пептидной связи (JPB) между (Р) и (L), чтобы высвободить (Р). Такие конъгаты позволяют селективно доставлять полезное соединение (Р) к целевым клеткам (например, клеткам опухоли). В другом варианте реализации изобретения линкер (L) представляет собой бифункциональную единицу, которая связывает полезное соединение (Р) с направляющим фрагментом (Т) образуя конюъгированную композицию, [(P)-(L)]_m-(T), которая может быть ферментативно расщеплена между (Р) и (L), чтобы высвободить (Р).

Некоторые линкеры (L) способны связываться с несколькими полезными веществами (Р) и направляющим фрагментом (Т). Таким образом, в некоторых вариантах реализации изобретения линкер (L) представляет собой мультифункциональную единицу, которая связывает более, чем одно полезное соединение (Р) к одному направляющему фрагменту (Т) образуя конъюгат [(P)-(L)]_m-(Т). Кроме того, возможно, что полезные соединения (Р) могут быть мультимеризованны и связаны с линкером (L). Соответственно, следует понимать, что в определенных вариантах реализации изобретения [(P)-(L)] содержат большее число (Р), чем (L). В определенных вариантах реализации изобретения присутствует такое же число единиц полезного вещества (Р) и линкера (L) в [(P)-(L)]. В одном варианте реализации изобретения Формулы I, изобретение предоставляет композиции имеющие структуру Формулы (la):

где о целое число от 1 до 1000. В одном варианте реализации изобретения о целое число от 1 до 100. В другом варианте реализации изобретения о целое число от 1 до 50. В другом варианте реализации изобретения о целое число от 1 до 20. В другом варианте реализации изобретения о целое число от 1 до 10.

В некоторых вариантах реализации изобретения линкер (L) и направляющий фрагмент (Т) взятые вместе имеют следующую структуру (III):

где карбонил (AA)¹ образует пептидную связь, именуемую в данном документе связывающей петидной связью (JPB), с -NH- группой связанной с (R) в структуре (II), где JPB является ферментативно расщепляемой, где каждый AA независимо являет собою аминокислоту, где x целое число от 0 до 25, где (L') остаток (при его наличии) линкера (L), где (Т) представляет собою направляющий фрагмент, и где (AA)¹-(АА)_x содержит аминокислотную последовательность способную облегчить ферментативное расщепление JPB.

Аминокислотная единица (AA)¹-(AA)_х включает в себя распознаваемую последовательность, которая обеспечивает расщепление связывающей пептидной связи (JPB), высвобождая полезное соединение (Р) из направляющего фрагмента (Т). Может быть использована любая последовательность способная обеспечить такое ферментативное расщепление. Такие последовательности включают, но не ограничиваются ими, применяемые последовательности, описанные в US 6,214,345. Например, в настоящем изобретении могут быть использованы аминокислотные последовательности известные в данной области техники для непосредственного расщепления пептидной связи, связывающей PABC саморасщепляющуюся единицу непосредственно с аминокислотной последовательностью. Дополнительные аминокислотные последовательности полезные в настоящем изобретении могут быть легко определены экспериментально специалистом в данной области техники. В определенных вариантах реализации изобретения аминокислотная единица, (AA)¹-(AA)_x позволяет расщеплять JPB с помощью протеазы, тем самым способствуя освобождению полезного вещества (Р) из конъюгата под воздействием таких протеаз. В определенных вариантах реализации изобретения это относится к внутриклеточным протеазам, таким как лизосомальные ферменты. В еще дополнительных вариантах реализации изобретения это включает внеклеточные протеазы.

Иллюстративно, аминокислотные единицы (AA)¹-(AA)_х включают, но не ограничиваются ими, дипептид, трипептид, тетрапептид, и/или пентапептид. Иллюстративно, дипептиды включают: Val-Cit, Ala-Phe, Phe-Lys, Val-Ala, Val-Lys(Ac), Phe-Lys(Ac), или Me-Val-Cit. Примечательно, что хотя правила наименования для пептидов и белков - это список аминокислотной последовательности от N-конца до С-конца, конфигурация JPB такова, что (AA)¹ представляет собой C-концевую аминокислоту в (AA)¹-(AA)_x аминокислотной последовательности. Соответственно, в варианте, где аминокислотная последовательность облегчает ферментативное расщепление JPB был валин-цитрулин, (AA)¹ в формуле (III) будет цитрулин и карбонильная группа цитрулина будет образовывать JPB с -NH- группой связанной с (R) в структуре (II). В некоторых вариантах реализации изобретения дополнительные аминокислоты связанны с валин-цитрулином через N-конец валина и, соответственно, "х" для (АА)_х равно целому числу больше чем один.

Иллюстративно трипептиды включают: Gly-Val-Cit, Pro-Pro-Pro, D-Ala-Phe-Lys, (D)-Val-Leu-Lys, Gly-Gly-Arg, и Ala-Ala-Asn. Для наглядности и ясности, когда трипептид представляет собой (gly-val-cit), (AA)¹ формулы (III) является цитрулин. Аминокислотная единица может содержать аминокислотные остатки, которые встречаются в природе, а также редковстречающиеся и неприродные аминокислотные аналоги, такие как цитрулин. Для использования в данном изобретении включаются D-аминокислоты. Аминокислотные единицы могут быть синтезированы и оптимизированы в их селективности к ферментативному расщеплению особым ферментом, например, опухоль-ассоциированной протеазой, катепсином B, C и D, или плазминовой протеазой.

Иллюстративно тетрапептиды включают: Lys-Ser-Gly-Arg, Gly-Phe-Leu-Gly, Leu-Ser-Gly-Arg, Ala-Leu-Ala-Leu, Gly-Gly-Gly-Arg-Arg, Gly-Lys-Ala-Phe-Arg-Arg, и HomoGly-Arg-Ser-Arg-Gly

Иллюстративно, аминокислотные последовательности для использования в линкерах данного изобретения включают аминокислотные последовательности с Phe-Lys, Val-Lys, Ala-Lys, Val-Cit, Phe-Cit, Leu-Cit, Ile-Cit, Trp-Cit, Phe-Arg. Эти последовательности были использованы для высвобождения доксорубицина. См., например, Таблицу 1, Dubowchik, Firestone et al. Bioconjugate Chem. 2002, 13, 855-869 и ссылки содержащиеся в ней. Другой пример аминокислотной последовательности для использования в линкерах настоящего изобретения является Pro-Pro (см., например, Gianolio et al. Cancer Chemother Pharmacol 2012 70, 439-449). См., также Firestone et al., US 6,214,345 для аминокислотных последовательностей полезных в настоящем изобретении. См., также Miao et al., WO 2013/173392 для аминокислотных последовательностей полезных в настоящем изобретении, включая, но, не ограничиваясь ими, аминокислотные последовательности содержащие неприродные аминокислоты. См., например, Dubowchik et al., Bioorganic & Med. Chem. Letters 8:3341-3346, 1998. См., также Burke et al., Bioorganic & Med. Chem. Letters 19:2650-2653, 2009. See also Jeffrey et al., Bioorganic & Med. Chem. Letters 16:358-362, 2006. Специалист в данной облаете техники по достоинству оценит то, что дополнительные аминокислоты могут быть включены в линкер (L) к N-концевой части аминокислотной последовательности, которая облегчает ферментативное расщепление JPB.

В одном примере, JPB расщепляется протеазой связанной с заболеванием. В другом примере, JPB расщепляется сверхрегулируемой протеазой или протеазой связанной с раком в целом. В еще другом примере, JPB расщепляется протеазой вырабатываемой связанными с раком клетками. В другом примере, JPB расщепляется сверхрегулируемым ферментом или ферментом связанным со специфическим видом рака.

В некоторых вариантах реализации изобретения остаток линкера (L') включает расширительный фрагмент (S) между аминокислотной единицей, (AA)¹-(AA)_x и направляющим фрагментом (Т) как показано на следующих структурах (VII) или (VIII):

где карбонил (AA)¹ образует пептидную связь, именуемую в данном документе связывающей пептидной связью (JPB), с -NH- группой связанной с (R) в структуре (II), где JPB является ферментативно расщепляемой, где каждый AA независимо аминокислота, где x целое число от 0 до 25, где Lʺ остаток линкера (при его наличии) (L'), где (S) представляет собой расширительный фрагмент, где (Т) представляет собой направляющий фрагмент, и где (AA)¹-(AA)_х содержит аминокислотные последовательности способные облегчить ферментативное расщепление JPB.

В конкретных вариантах реализации изобретения, этот расширительный фрагмент такой, как описано в US 7,964,566 и US 6,214,345.

Фрагмент с полезным веществом (Р)

Как и в случае линкерного фрагмента (L), полезное соединение (Р) характеризуется с точки зрения собранного конъюгата изобретения. Соответственно, полезное соединение (Р), как характеризуется в данном документе, не обязательно, но может соответствовать конкретному реагенту используемому в синтезе конъюгата. Компоненты полезного вещества (Р) могут быть обеспечены большим числом реагентов.

Различные соединения могут быть использованы для сборки желаемых компонентов полезного вещества (Р) изобретения. Любое соединение, которое функционализировано амидной группой (как в формуле (IV) или как соединение содержащее N-ацил сульфонамидную-(R)-NH₂ группу (как в формуле (V)) может быть доставлено к целевой клетке или ткани используя настоящие технологии конъюгирования. Любые предшествующие соединения, которые могут быть использованы (непосредственно, или после соответствующей модификации) для получения амидов формулы (IV) или N-ацил сульфонамид-(R)-NH₂ соединения формулы (V) находят применение в изобретении. Особенно предпочтительными являются амид содержащие лекарственные средства, лекарственные средства, содержащие карбоксильные группы, которые имеют активные амидные производные, лекарственные средства, содержащие карбоксильные группы, и лекарственные средства имеющие формулу (V). Путь синтеза и специфические реагенты используемые для получения конъюгатов формулы (I) не ограничены. Включенные в объем биологически активных соединений в качестве полезных соединений (Р) являются прекурсорами, которые могут быть активированны in vivo.

В одном варианте реализации изобретения конъюгаты формулы (I) могут быть использованы для доставки биологически активных соединений формулы (IV) или (V). Подходящие полезные соединения (Р), которые могут преимущественно доставлены композициями изобретения к целевым локациям включают, например, антибиотики, диагностирующие агенты (например, детектируемые метки), противовоспалительные препараты, противовирусные препараты, цитотоксические препараты, и противораковые лекарственные вещества. Другие подходящие полезные вещества (Р) включают диагностические агенты известные в данной области техники, включая использование одной или более детектируемых меток из широкого спектра существующих. Детектируемые метки могут быть радиоактивным изотопом, как ¹²⁵I, ферментами, флуоресцентными реагентами или группами такими как флуоресцеин, тетраметилродамин, цианиновые красители, красители Alexa или BODIPY красители, хемилюминесцентные реагенты или группы, или электрохимические материалы. Детектируемая метка может быть также частью специфической связывающей пары известной в данной области техники. Другие походящие детектируемые метки будут очевидными для специалиста в данной области техники.

В одном варианте реализации изобретения соединения формулы (IV) и (V) проявляют цитотоксичную или цитостатичную активность. Настоящее изобретение предоставляет композиции и способы для доставки биологически активных соединений формул (IV) или (V) в интересующие клетки.

В одном варианте реализации изобретения (Р) представляет собой лекарственное средство, соединение (D). В одном варианте реализации изобретения (D) представляет собой соединение, имеющее следующую структуру (XVIII):

или стереоизомер, пролекарство или его фармацевтически приемлемую соль, где:

R₁ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероарила, -COR₂₄-, -CSR₂₄- -OR₂₄- и -NHR₂₄- где каждый R₂₄ независимо представляет собой необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил и необязательно замещенный гетероарил;

R₂ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила;

R₃ выбран из группы, состоящей из H и C_1-6 алкила;

R₄ выбран из группы, состоящей из H и C_1-6 алкила; и

R₅ выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила и -SH.

В одном варианте реализации изобретения R₁ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила.

В дополнительном варианте реализации изобретения каждый необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил и необязательно замещенный гетероарил независимо представляет собой необязательно замещенный на =O, =S, -OH, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил, необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения каждый необязательно замещенный арил и необязательно замещенный гетероарил выбран, независимо, из группы состоящей из необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного нафтила, необязательно замещенного антрацила, необязательно замещенного фенантрила, необязательно замещенного фурила, необязательно замещенного пирролила, необязательно замещенного тиофенила, необязательно замещенного бензофурила, необязательно замещенного бензотиофенила, необязательно замещенного хинолила, необязательно замещенного изохинолила, необязательно замещенного имидазолила, необязательно замещенного тиазолила, необязательно замещенного оксазолила, и необязательно замещенного пиридинила.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R2 выбран из одной из следующих структур (A), (B), (C), (D):

и

(D) где:

каждый Q независимо представляет собой CR₂₉ или N;

каждый Z независимо представляет собой C(R₂₉)₂, NR₂₉, S, или O;

каждый R₂₉ независимо выбран из группы, состоящей из H, -OH, -R₂₈-OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -R₂₈NH₂, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил, необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₂ выбран из группы, состоящей из:

и

где каждый R₂₉ независимо выбран из группы, состоящей из H, -ОН, -R₂₈, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -R₂₈NH₂, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил, необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₂ выбран из группы, состоящей из:

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₂ представляет собой:

В одном варианте реализации изобретения R₂ выбран из группы, состоящей из:

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₃, R₄ и R₅ каждый представляют собой метилы.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₃ представляет собой H, R₄ представляет собой метил, и R₅ представляет собой метил.

Понятно, что в любом варианте соединений структуры (XVIII), как указано выше, и любые специфические заместители, изложенные в данном документе для R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₂₈, или R₂₉ групп в соединениях структуры (XVIII), как изложено в данном документе, могут быть независимо скомбинированы с другими вариантами реализации изобретения и/или заместителями соединений структуры (XVIII) образуя варианты реализации изобретения настоящего описания, конкретно не указанные выше. Кроме того, в том случае, если список заместителей указанных для какого-либо конкретного R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₂₈, или R₂₉ в конкретном варианте реализации изобретения и/или в пункте формулы изобретения, понятно, что каждый отдельный заместитель может быть удален из отдельного варианта реализации изобретения и/или пункта формулы изобретения, и что оставшийся список заместителей будет расматриваться в пределах объема настоящего описания.

В другом варианте реализации изобретения (D) представляет собой соединение, имеющее следующую структуру (XVI):

или стереоизомер, пролекарство или их фармацевтически приемлемую соль, где:

R₆ и R₇ независимо выбраны из группы, состоящей из: H и насыщенного или ненасыщенного фрагмента имеющего линейный, разветвленный, или не-ароматический циклический скелет, содержащий от одного до десяти атомов углерода, и карбоновые атомы необязательно замещены: -OH, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -СНО, -COSH, или -NO₂; или R₇ и R₁₀ являются конденсированными и образуют кольцо;

R₈ и R₉ независимо выбраны из группы, состоящей из: H, R', ArR'-, или R₈ и R₉ соединены образуя цикл;

R₁₀ выбран из группы, состоящей из: H, R', ArR'-, и Ar;

или R₁₀ и R₇ являются конденсированными и образуют кольцо;

R₁₁ выбран из группы, состоящей из: H, R', и ArR'-;

R₁₂ and R₁₃ независимо выбраны из группы, состоящей из: H, R', и ArR'-; и

R₄₀ представляет собой:

где:

R₁₅ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила, -COR₂₄-, -CSR₂₄-, -OR₂₄-, и -NHR₂₄-, где каждый R₂₄ независимо представляет собой необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил или необязательно замещенный гетероарил;

R' определяется как насыщенный или ненасыщенный фрагмент имеющий линейный, разветвленный, или неароматический циклический скелет, содержащий от одного до десяти атомов углерода, от нуля до четырех атомов азота, от нуля до четырех атомов кислорода, и от нуля до четырех атомов серы, и атомы углерода необязательно замещенны на: =O, =S, OH, -OR₁₆, -O₂CR₁₆, -SH, -SR₁₆, -SOCR₁₆, -NH₂, -NHR₁₆, -N(R₁₆)₂, -NHCOR₁₆, -NR₁₆COR₁₆, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₁₆, -CHO, -COR₁₆, -CONH₂, -CONHR₁₆, -CON(R₁₆)₂, -COSH, -COSR₁₆, -NO₂, -SO₃H, -SOR₁₆, -SO₂R₁₆, где R₁₆ представляет собой линейную, разветвленную или циклическую, с от одного до десяти атомов углерода, насыщенную или ненасыщенную алкильную группы;

Цикл, образованный соединением R₈ и R₉ представляет собой от трех до семичленный неароматический циклический скелет в рамках определения R',

Y определяется как фрагмент, выбранный из группы содержащей: линейную, насыщенную или ненасыщенную, с от одного до шести атомами углерода, алкильную группу, необязательно замещенную R', ArR'-, или X; и

X определяется как фрагмент выбранный из группы, состоящей из: -OH, -OR', =O, =S, -O₂CR', -SH, -SR', -SOCR', -NH₂, -NHR', -N(R')₂, -NHCOR', -NRCOR', -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R -CHO, -COR', -CONH₂, -CONHR', -CON(R')₂, -COSH, -COSR', -NO₂, -SO₃H, -SOR', и -SO₂R'.

В одном варианте реализации изобретения R₁₅ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила.

В одном варианте реализации изобретения Ar представляет собой ароматический цикл выбранный из группы, состоящей из: фенил, нафтил, антрацил, пирролил.

В дополнительном варианте реализации изобретения каждый необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил и необязательно замещенный гетероарил независимо представляет собой необязательно замещенный на =O, =S, -OH, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈ где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил, необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения каждый необязательно замещенный арил и необязательно замещенный гетероарил выбран, независимо, из группы состоящей из необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного нафтила, необязательно замещенного антрацила, необязательно замещенного фенантрила, необязательно замещенного фурила, необязательно замещенного пирролила, необязательно замещенного тиофенила, необязательно замещенного бензофурила, необязательно замещенного бензотиофенила, необязательно замещенного хинолила, необязательно замещенного изохинолила, необязательно замещенного имидазолила, необязательно замещенного тиазолила, необязательно замещенного оксазолила, и необязательно замещенного пиридинила.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₀ выбран из одной из следующих структур (A), (B), (C), (D):

и

где:

каждый Q независимо представляет собой CR₂₉ или N;

каждый Z независимо представляет собой C(R₂₉)₂, NR₂₉, S, или O;

каждый R₂₉ независимо выбран из группы, состоящей из H, -OH, -R₂₈-OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -R₂₈NH₂, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил, необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₀ выбран из группы, состоящей из: и

где каждый R₂₉ независимо выбран из группы, состоящей из H, -OH, -R₂₈, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -R₂₈NH₂, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил, необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₀ выбран из группы, состоящей из:

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₀ представляет собой:

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₆ и R₇ каждый представляют собой метилы.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₆ представляет собой H и R₇ представляет собой метил.

В одном варианте реализации изобретения R₁₂ представляет собой С4 разветвленный алкил.

Понятно, что в любом варианте реализации изобретения соединения структуры (XVI), как изложено в данном документе, и любые специфические заместители, изложенные в данном документе для R₆, R₇, R₈, R7, R₁₀, R₁₁, R₁₂, R₁₃, R₁₄, R₁₅, R₁₆, R₂₈, или R₂₉ группы в соединениях структуры (XVI), как определенно в данном документе, могут независимо комбинироваться с другими вариантами реализации изобретения и/или заместителями соединений структуры (XVI) образуя варианты реализации изобретения данного описания конкретно не указанные выше. Кроме того, в том случае, если список заместителей указанных для какого-либо конкретного R₆, R₇, R₈, R₉, R₁₀, R₁₁, R₁₂, R₁₃, R₁₄, R₁₅, R₁₆, R₂₈, или R₂₉ в конкретном варианте реализации изобретения и/или в пункте формулы изобретения, понятно, что каждый отдельный заместитель может быть удален из отдельного варианта реализации изобретения и/или пункта формулы изобретения, и что оставшийся список заместителей будет рассматриваться в пределах объема настоящего описания.

В некоторых вариантах реализации изобретения (P) представляет собой моновалентный радикал соединения Формулы (XXV):

где:

R⁵¹ выбран из: арила, C₃-C₇ циклоалкила, и гетероарила, каждый из которых необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₄ ацилтио, C₂-C₄ алкенила, C₁-C₄ алкила, C₁-C₄ алкиламино, C₁-C₄ алкокси, амино, амино-C₁-C₄ алкила, галогена, C₁-C₄ галогеналкила, гидроксила, гидрокси-C₁-C₄ алкила, и тио, где C₂-C₄ алкенила, C₁-C₄ алкиламино и C₁-C₄ алкокси дополнительно необязательно замещенны одним заместителем выбранным из C₁-C₄ алкиларила, гидроксила, и тио;

R⁵² и R⁵³ каждый независимо выбраны из: H и C₁-C₆ алкила;

R⁵⁴ выбран из группы, состоящей из C₁-C₆ алкила и тио; и

R⁵⁵ выбран из: C₁-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₃-C₇ циклоалкила, гетероарила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₆ алкокси, C₁-C₆ алкоксикарбонила, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкиламино, амино, амино-C₁-C₆ алкила, амино-арила, амино-C₃-C₇ циклоалкила, арила, карбоксамида, карбоксила, C₃-C₇ циклоалкила, циано, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ галогеналкокси, галогена, гидроксила, нитро, тио, и тио-C₁-C₆ алкила; и

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵¹ выбран из: H, арила, C₃-C₇ циклоалкила, и гетероарила, каждый из которых необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: C₁-C₄ ацилтио, C₂-C₄ алкенила, C₁-C₄ алкила, C₁-C₄ алкиламино, C₁-C₄ алкокси, амино, амино-C₁-C₄ алкила, галоген, C₁-C₄ галогеналкила, гидроксила, гидрокси-C₁-C₄ алкила, и тио, где C₂-C₄ алкенила, C₁-C₄ алкиламино и C₁-C₄ алкокси дополнительно необязательно замещенны одним заместителем, выбранным из и-толила, гидроксила, и тио.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵¹ выбран из: H, арила, C₃-C₇ циклоалкила, и гетероарила, каждый из которых необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: (2-гидроксиэтил)амино, (2-меркаптоэтил)амино, 2-(ацетилтио)этокси, 2-аминоэтокси, 2-гидроксиэтокси, 2-меркаптоэтокси, 3-метокси, 4-метилстирила, амино, аминометила, хлора, фтора, гидроксила, гидроксиметила, метила, тио, трифторметила.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵¹ выбран из: H, циклогексила, 1H-индол-3-ила, фенила, и тиен-2-ила каждый из которых необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: (2-гидроксиэтил)амино, (2-меркаптоэтил)амино, 2-(ацетилтио)этокси, 2-аминоэтокси, 2-гидроксиэтокси, 2-меркаптоэтокси, 3-метокси, 4-метилстирила, амино, аминометила, хлора, фтора, гидроксила, гидроксиметила, метила, тио, и трифторметила.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵¹ выбран из: H, 1H-индол-3-ила, 1-метил-1H-индол-3-ила, 2-метоксифенила, 3-((2-гидроксиэтил)амино)фенила, 3-((2-меркаптоэтил)амино)фенила, 3-(2-(ацетилтио)этокси)фенила, 3-(2-гидроксиэтокси)фенила, 3-(2-меркаптоэтокси)фенила, 3-(4-метилстирил)фенила, 3-(аминометил)фенила, 3-(гидроксиметил)фенила, 3-гидроксифенила, 3,5-дифторфенила, 3,5-диметилфенила, 3-аминофенила, 3-хлорфенила, 3-меркаптофенила, 3-метоксифенила, 3-трифторметилфенила, 4-((2-гидроксиэтил)амино)фенила, 4-((2-меркаптоэтил)амино)фенила, 4-(2-(ацетилтио)этокси)фенила, 4-(2-аминоэтокси)фенила, 4-(2-гидроксиэтокси)фенила, 4-(2-меркаптоэтокси)фенила, 4-(аминометил)фенила, 4-(гидроксиметил)фенила, 4-аминофенила, 4-гидроксифенила, 4-меркаптофенила, 4-метоксифенила, циклогексила, тиен-2-ила, м-толила, и фенила.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵¹ выбран из: H, 1H-индол-3-ила, 1-метил-1H-индол-3-ила, 2-метоксифенила, 3-((2-гидроксиэтил)амино)фенила, 3-((2-меркаптоэтил)амино)фенила, 3-(2-гидроксиэтокси)фенила, 3-(2-меркаптоэтокси)фенила, 3,5-дифторфенила, 3,5-диметилфенила, 3-хлорфенила, 3-меркаптофенила, 3-метоксифенила, 3-трифторметилфенила, 4-((2-гидроксиэтил)амино)фенила, 4-((2-меркаптоэтил)амино)фенила, 4-4-(2-гидроксиэтокси)фенила, 4-(2-меркаптоэтокси)фенила, 4-меркаптофенила, 4-5 метоксифенила, циклогексила, тиен-2-ила, м-толила, и фенила.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵¹ представляет собой фенил.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵² представляет собой H.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵² представляет собой метил.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵³ представляет собой метил.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵⁴ представляет собой метил.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵⁵ выбран из: C₁-C₆ алкила, арила, арил-C₁-C₆ алкила, C₃-C₇ циклоалкила, гетероарила, и гетероциклила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: 1-аминоциклопропила, 4-аминофенила, амино, аминометила, брома, трет-бутипа, карбоксамида, карбоксила, хлора, циано, циклопентила, этила, фтора, гидрокси, изопропила, метокси, метила, нитро, фенила, пиридин-3-ила, тио, тиометила, трифторметокси, и трифторметила.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵⁵ выбран из: 5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-ила, бензилаа, циклогексила, этила, гексан-2-ила, метила, нафтален-2-ила, пиперидин-1-ила, фенила, пропила, пиридин-3-ила, и тиен-2-ила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: 1-аминоциклопропила, 4-аминофенила, амино, аминометила, брома, трет-бутияа, карбоксамида, карбоксила, хлора, циано, циклопентила, этила, фтора, гидрокси, изопропила, метокси, метила, нитро, фенила, пиридин-3-ила, тио, тиометила, трифторметокси, и трифторметила.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵⁵ выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила, 4-аминофенила, бензила, 3-меркаптопропила, 2-меркаптоэтила, 4-(меркаптометил)фенила, p-толила, метила, 2,4,6-триметилфенила, 4-(трифторметокси)фенила, 2,4,6-триизопропилфенила, 4-трет-бутилфенила, 4-хлорфенила, 3-цианофенила, 2-нитрофенила, 4-метокси-2-нитрофенила, 4-аминокарбонил-2-нитрофенила, 4-метоксифенила, 4-аминофенила, фенила, 2-фторбензила, пиперидин-1-ила, о-толила, 4-бромфенила, нафтален-2-ила, 4-метоксикарбонилфенила, 2-(трифторметил)бензила, гексан-2-ила, 2-метоксиэтила, циклопентилметила, циклогексила, пиридин-3-илметила, 4-карбоксифенила, 3-аминофенила, пиридин-3-ила, тиен-2-ила, 4-гидроксифенила, 4-(1-аминоциклопропил)бензила, 4-(1-аминоциклопропил)фенила, 2-метилбензила, 4-нитробензила, 4-хлорбензила, фенэтила, 4-бромбензила, 4-цианобензила, 3-нитробензила, 4-трет-бутил бензила, 2-нитробензила, 4-нитрофенэтила, 2-хлор-3-метоксикарбонилфенила, 2-аминофенила, [1,1'-бифенил]-4-ила, 4'-амино-[1,1'-бифенил]-4-ила, 4-фторбензила, 3-(трифторметил)бензила, 3-(трифторметокси)бензила, 3,4-дихлорбензила, 2-цианобензила, 3-хлорбензила, 4-амино-2-этилфенила, 4-амино-3-(трифторметокси)фенила, 4-амино-2,3-диметилфенила, 4-амино-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-ила, 4-амино-3-метилфенила, 4-амино-3-фторфенила, 4-амино-3-этилфенила, и 4-амино-3-(трифторметил)фенила.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵⁵ выбран из: арила и арил-C₁-C₆ алкила, каждый необязательно замещенный одним или более заместителей выбранных из: амино и амино-C₁-C₆ алкила.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵⁵ выбран из: 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенил, 4-аминофенил, и бензила.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵⁵ представляет собой 4-аминобензил.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵⁵ представляет собой 4-(аминометил)бензил.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵⁵ представляет собой 4-(аминометил)фенил.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵⁵ представляет собой 4-аминофенил.

В некоторых вариантах реализации изобретения R⁵⁵ представляет собой бензила.

В некоторых вариантах реализации изобретения P представляет собой моновалентный радикал соединения, описанный в международной заявке № PCT/US14/29463 или U.S. №14/213,504.

В другом варианте реализации изобретения (D) имеет следующую структуру (XVII);

или стереоизомер, пролекарство или его фармацевтически приемлемую соль; где:

R₁₇ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного аллила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероарила, -COR₂₄-, -CSR₂₄-, -OR₂₄-, и -NHR₂₄-, где каждый R₂₄ независимо представляет собой необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил или необязательно замещенный гетероарил;

R₁₈ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила;

R₁₉ выбран из группы, состоящей из H и C_1-6 алкила;

R₂₀ выбран из группы, состоящей из H и C_1-6 алкила;

R₂₁ и R₂₇ независимо выбраны из группы, состоящей из H, C_1-6 алкила и -SH, при условии, что R₂₁ и R₂₇ оба не могут быть H;

R₂₂, R₂₃, R₂₄ и R₂₅ представляют собой независимо H и C_1-6 алкил, по меньшей мере один из R₂₂ и R₂₃ представляет собой H; или R₂₃ и R₂₄ образуют двойную связь, R₂₂ представляет собой H, и R₂₅ представляет собой H или C_1-6 алкил; и

R₂₆ выбран из группы, состоящей из H и C_1-6 алкила.

В одном варианте реализации изобретения R₁₇ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного аллила, необязательно замещенного гетероциклила, и необязательно замещенного гетероарила.

В дополнителльном варианте реализации изобретения каждый необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный аллил, необязательно замещенный гетероциклил и необязательно замещенный гетероарил независимо представляет собой необязательно замещенный на =O, =S, -OH, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈ где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения каждый необязательно замещенный арил и необязательно замещенный гетероарил выбран, независимо, из группы сосостоящей из необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного нафтила, необязательно замещенного антрацила, необязательно замещенного фенантрила, необязательно замещенного фурила, необязательно замещенного пирролила, необязательно замещенного тиофенила, необязательно замещенного бензофурила, необязательно замещенного бензотиофенила, необязательно замещенного хинолила, необязательно замещенного изохинолила, необязательно замещенного имидазолила, необязательно замещенного тиазолила, необязательно замещенного оксазолила, и необязательно замещенного пиридинила.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₈ выбран из одной из следующих структур (A), (B), (C), (D):

и

где:

каждый Q независимо представляет собой CR₂₉ или N;

каждый Z независимо представляет собой C(R₂₉)₂, NR₂₉, S, или O;

каждый R₂₉ независимо выбран из группы, состоящей из H, -OH, -R₂₈-OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -R₂₈NH₂, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₈ выбран из группы, состоящей из: и

где каждый R₂₉ независимо выбран из группы, состоящей из H, -OH, -R₂₈, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -R₂₈NH₂, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, где каждый R₂₈ независимо представляет собой алкил, необязательно замещенный галогеном, -OH или -SH.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₈ выбран из группы, состоящей из:

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₈ представляет собой:

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₉, R₂₀, R₂₁, и R₂₇ каждый представляют собой метилы.

В другом дополнительном варианте реализации изобретения R₁₉ представляет собой H, R₂₀ представляет собой метил, R₂₁ представляет собой метил, и R₂₇ представляет собой метил.

Понятно, что в любом варианте реализации изобретения соединения структуры (XVII), как изложено в данном документе, и любые специфические заместители, изложенные в данном документе для R₁₇, R₁₈, R₁₉, R₂₀, R₂₁, R₂₂, R₂₃, R₂₄, R₂₅, R₂₆, R₂₇, R₂₈, или R₂₉ группы в соединениях структуры (XVII), как указано выше, могут независимо комбинироваться с другими вариантами реализации изобретения и/или заместителями соединений структуры (XVII) образуя варианты реализации изобретения данного описания конкретно не указанные выше. Кроме того, в том случае, если список заместителей указанных для какого-либо конкретного R₁₈, R₁₉, R₂₀, R₂₁, R₂₂, R₂₃, R₂₄, R₂₅, R₂₆, R₂₇, R₂₈, или R₂₉ в конкретном варианте реализации изобретения и/или в пункте формулы изобретения, понятно, что каждый отдельный заместитель может быть удален из отдельного варианта реализации изобретения и/или пункта формулы изобретения, и что оставшийся список заместителей будет расматриваться в пределах объема настоящего описания.

В некоторых вариантах реализации изобретения (P) представляет собой цитотоксическое соединение.

В некоторых вариантах реализации изобретения (P) представляет собой пептидный токсин, нарушающий микротубулы.

В некоторых вариантах реализации изобретения (P) представляет собой гемиастерлин или его аналог.

В некоторых вариантах реализации изобретения (P) представляет собой тубулузин или его аналог.

В некоторых вариантах реализации изобретения (P) представляет собой ауристатин или его аналог.

В некоторых вариантах реализации изобретения (P) представляет собой цитотоксическое соединение, например, соединение описанное в U.S. 7579323; WO 2004/026293; U.S. 8,129,407; US 2014/0227295; WO 2013/068874; US 2013/0095123; US 2013/0190243; WO 2014/126198; EP 2740493; WO 2014086942; WO 2013072813; WO 2012166559; WO 2012166560; WO 2012123423; WO 2011154359; WO 2006063707; WO 2003008378; WO 2002000263; US 2013/224,228; WO 2013/085925; WO 2014/009774; US 8,476,451; U.S. 2011/0027274; или соответствующих заявках или патентах, или Lundquist et al., Organic Letters, (3), pp. 781-783, 2001; Domling et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2006, 45, 7235-7239; Kaur et al., Biochem J., (2006), 396:235-242; Steinmetz et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2004, 43, 4888-4892; Khalil et al., ChemBioChem 2006, 7, 678-683; Peltier et al., J. AM. CHEM. SOC. 2006, 128, 16018-16019. В некоторых вариантах реализации изобретения цитотоксическое соединение представляет собой поликетид из Lithoplocamia lithistoides. Примеры поликетидов из Lithoplocamia lithistoides включают описанные Martin et al., J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 10164-10171. В некоторых вариантах реализации изобретения поликетид из Lithoplocamia lithistoides выбран из: РМ050489 и РМ060184.

В некоторых вариантах реализации изобретения конъюгаты формулы (I) получены конъгированием (Т) с (P)-(L) прекурсором, имеющим следующую структуру (XIII): (P)-(L)-(FG)

где FG представляет собой функциональную группу, которая образует ковалентную связь с одним или более атомами направляющего фрагмента (Т). В других вариантах реализации изобретения FG образует связь с гетероатомом (Т).

В конкретных вариантах реализации изобретения группа FG включает в себя малеимид. Как будет оценено специалистом в данной области техники, могут быть использованы дополнительные фрагменты и связывающие технологии, включая, но не ограничиваясь ими, трансглутаминазные последовательности, 2-бромацетамидная химия, химические процессы гликозилирования, и другие. См. например химию связывания описанную W02013173391, W02013173392, W02013173393, и США 7964566.

Для целей введения, соединения настоящего описания могут быть введены в качестве действующего вещества или могут быть сформулированны в виде фармацевтических композиций. Фармацевтические композиции настоящего описания включают соединение структуры (I) и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество. Соединение структуры (I) присутствует в композиции в количестве, которое эффективно для лечения интересующего конкретного заболевания или состояния, то есть в количестве достаточном для лечения рака или роста раковой опухоли, и желательно с приемлемой токсичностью для пациента. Активность соединений структуры (I) может быть определенна специалистом в данной области техники, например, как описано в Примерах ниже. Соответствующие концентрации и дозировки могут быть легко определенны специалистом в данной области техники.

Введение соединений описания, или их фармацевтически приемлемых солей, в чистой форме или в подходящей фармацевтической композиции, может быть осуществленно via любой принятый режим введения препаратов для подобного использования. Фармацевтические композиции настоящего описания могут быть полученны комбинированием соединения описания с соответствующим фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или наполнителем, и могут быть сформулированы в препараты в твердой, полутвердой, жидкой или газообразной формах, таких как таблетки, капсулы, порошки, гранулы, мази, растворы, суппозитории, инъекции, ингалянты, гели, микросфер, и аэрозоли. Типичные пути введения таких композиций включают, без ограничения, пероральный, местный, трансдермальный, ингаляционный, парентеральный, сублингвальный, буккальный, ректальный, вагинальный, и интраназальный пути. Термин парентеральный, как он используется в данном документе, включает подкожные, внутривенные, внутримышечные, интрастремальные инъекции или инфузионные способы. Фармацевтические композиции настоящего изобретения сформулированны таким образом, чтобы активные ингредиенты содержащиеся в них, были биодоступными после введения композиции пациенту. Композиции, которые будут вводиться субъекту или пациенту имеют форму одной или более единиц дозирования, например, таблетка может быть однодозажной единицей, и контейнер соединения описания в аэрозольной форме может содержать множество единиц дозирования. Настоящие способы получения таких единиц дозирования известны, или будут очевидны, специалисту в данной области техники; например, см. Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition (Philadelphia College of Pharmacy and Science, 2000). Вводимые композиции будут, в любом случае, содержать терапевтически эффективное количество соединения описания, или его фармацевтически приемлемой соли, для лечения интересующего заболевания или состояния в соответствии со способами данного описания.

Фармацевтическая композиция описания может быть в твердой или жидкой форме. В одном аспекте, вспомогательное вещество(ва) в виде частиц, так что композиции, например, являются в форме таблеток или порошка. Вспомогательное вещество(ва) может быть жидким, с композициями, например, в виде перорального сиропа, инъекционной жидкости, или аэрозоля, что являете полезным, например, при ингаляционном введении.

Когда фармацевтические композиции данного описания предназначенны для перорального введения, они, как правило, либо в твердой, или в жидкой форме, где полутвердые, полужидкие формы, суспензии или гели включены в данном документе в формы расматриваемые либо как твердые, либо как жидкие.

В качестве твердой композиции для перорального введения, фармацевтические композиции могут быть сформулированны в порошок, гранулу, пресованную таблетку, пилюлю, капсулу, жевательную резинку, вафлю и тому подобное. Такая твердая композиция обычно будет содержать один или более разбавителей или съедобных вспомогательных веществ. Кроме того, один или более из следующих компонентов может присутствовать: загустители, такие как карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза, микрокристаллическая целлюлоза, камедь трагаканта или желатин; вспомогательные вещества, такие как крахмал, лактоза или декстрины, разрыхлители, такие как альгиновая кислота, альгинат натрия, Примогель, кукурузный крахмал, и тому подобное; смазывающие вещества, такие как стеарат магния или Sterotex; скользящие вещества, такие как коллоидный диоксид кремния; подсластители, такие как сахароза или сахарин, ароматизаторы, такие как перечная мята, метилсалицилат или апельсиновый ароматизатор; и краситель.

Когда фармацевтическая композиция находится в форме капсулы, например, желатиновой капсулы, она может содержать, помимо материалов указанных выше, жидкий носитель, такой как полиэтиленгликоль или масло.

Фармацевтические композиции описания могут быть в форме жидкости, например, эликсира, сиропа, раствора, эмульсии или суспензии. В качестве двух примеров, жидкость может быть для перорального введения или для доставки инъекцией. Когда фармацевтические композиции описания предназначены для перорального введения, они обычно содержат, помимо настоящих соединений, один или более подсластителей, консерванты, красители или усилители вкуса В композиции предназначенные для инъекционного введения может быть включено одно или более поверхностно-активное вещество, консервант, смачивающий агент, диспергирующий агент, суспендирующий агент, буффер, стабилизатор или изотонический агент.

Жидкие фармацевтические композиции описания, будь то растворы, суспензии или тому подобные формы, могут включать один или более следующих адьювантов: стерильные разбавители, такие как вода для инъекций, солевой раствор, предпочтительно физиологический раствор, раствор Рингера, изотонический раствор хлорида натрия, фиксированные масла, такие как синтетические моно или диглицериды, которые могут служить как растворитель или суспендирующая среда, полиэтиленгликоли, глицерин, пропиленгликоль или другие растворители; антибактериальные агенты, такие как бензиловый спирт или метилпарабен; антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота или натрий бисульфит; хелатирующие агенты, такие как этилендиаминотетрауксусная кислота; буфферы, такие как ацетатный, цитратный или фосфатный и агенты для регулирования тоничности, такие как натрий хлорид или декстроза. Парентеральные препараты могут быть заключены в ампулы, одноразовые шприцы или мультидозовые виалы, сделанные из стекла или пластика. Физиологический раствор является предпочтительным адъювантом. Инъкционная фармацевтическая композиция предпочтительно является стерильной.

Жидкая фармацевтическая композиция описания предназначенная либо для парентерального, либо для перорального введения, должна содержать такое количество соединения описания, чтобы была получена подходящая дозировка.

Фармацевтические композиции описания могут быть предназначены для местного введения, в таком случае носитель может включать подходящую растворную, эмульсионную, мазевую или гелевую основу. Основа, например, может включать один или более из следующих компонентов: вазелин, ланолин, полиэтиленгликоли, пчелиный воск, минеральное масло, разбавители такие как вода или спирт, и эмульгаторы и стабилизаторы. В фармацевтической композиции для местного применения могут присутствовать загустители. Если композиция предназначена для трансдермального введения, она может содержать трансдермальный пластырь или устройство для ионофореза.

Фармацевтические композиции описания могут быть предназначены для ректального введения, в форме, например, суппозитория, который плавится в прямой кишке и высвобождает лекарственное средство. Композиции для ректального введения могут содержать маслянистую основу, в качестве подходящего неразражающего вспомогательного вещества. Такие основы включают, без ограничений, ланолин, масло какао и полиэтиленгликоль.

Фармацевтические композиции описания могут включать различные материалы, которые модифицируют физическую форму твердой или жидкой дозированной формы. Например, композиция может включать материалы, которые образуют защитное покрытие вокруг активных ингредиентов. Материалы, образующие защитное покрытие обычно инертны, и могут быть выбранными из, например, сахара, шеллака, и других энтерорастворимых покрывающих агентов. Альтернативно, активные ингредиенты могут быть заключены в желатиновую капсулу.

Фармацевтические композиции описания могут быть получены в единицах дозировки, которые могут быть введены как аэрозоль. Термин аэрозоль используется для обозначения разнообразных систем, начиная с систем с коллоидным характером и заканчивая системами в упаковках под давлением. Доставка может осуществляться за счет сжиженного или сжатого газа или с помощью подходящей насосной системы, которая дозирует активные компоненты. Аэрозоли соединений описания могут быть доставлены в виде однофазовых, бифазовых, или трифазовых систем для того чтобы доставить активный ингредиент(ты). Доставка аэрозоля включает необходимый контейнер, активаторы, клапаны, субконтейнеры, и тому подобное, которые вместе образуют комплект. Специалист в данной области техники, без излишних экспериментов может определить предпочтительные аэрозоли.

Фармацевтические композиции описания могут быть получены способами хорошо известными в фармацевтической области. Например, фармацевтические композиции предназначенные для инъекционного введения могут быть получены комбинированием вещества описания с стерильной, дистиллированной водой, образуя таким образом раствор. Поверхностно-активное вещество может быть добавлено для облегчения формирования однородного раствора или суспензии. Поверхностно-активные вещества это соединения, которые не-ковалентно взаимодействуют с соединением описания, облегчая растворение или гомогенное суспендирования соединения в водной среде для доставки.

Соединения описания, или их фармацевтически приемлемые соли, вводят в терапевтически эффективном количестве, которое будет варьироваться в зависимости от множества факторов включая активность конкретного применяемого вещества; метаболическую стабильность и продолжительность действия вещества; возраст, вес, общее состояние здоровья, пол, и диету пациента; способ и время введения; скорость выведения; комбинации лекарственного средства; тяжести конкретного расстройства или состояния; и текущей терапии субъекта.

Соединения описания, или их фармацевтически приемлемые производные, могут также вводиться одновременно, до, или после введения одного или более других терапевтических агентов. Такая комбинированная терапия включает введение одной фармацевтически дозированной формы, которая содержит соединение описания и один или более дополнительных активных агентов, а также введение соединения описания и каждый активный агент в собственной фармацевтической дозированной форме. Например, соединение описания и другой активный агент могут быть введены пациенту вместе в одной пероральной дозированной композиции, такой как таблетка или капсула, или каждый агент может быть введен в отдельных пероральных дозированных формах. В случаях, где использовано отдельное введение дозированных форм, соединения описания один или более активных агентов может быть введен в одно и тоже время, т.е. одновременно, или в разные периоды времени, т.е., последовательно; комбинированная терапия подразумевает включение всех этих схем.

Понятно, что в настоящем описании, комбинации заместителей и/или переменных в изображенных формулах допустимы только в случае, если такие изменения приводят к стабильным соединениям.

Специалистом в данной области техники будет оцененно то, что синтетические превращения описанных в данном документе функциональных групп в промежуточных соединениях могут потребовать соответствующей защиты защитными группами. Такие функциональные группы включают гидрокси, амино, меркапто и карбоксильную группы. Как описано выше, подходящие защитные группы для гидрокси группы включают триалкилсилил или диалкилсилил (например, трет-бутилдиметилсилил трет-бутилдифенилсилил или триметилсилил), тетрагидропиранил, бензил, и тому подобное, и подходящие защитные группы для амино, амидино или гуанидино включают трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил, и тому подобное. Подходящие защитные группы для меркапто-группы включают -C(O)-Rʺ (где Rʺ представляет собой алкил, арил или арилалкил), n-метоксибензил, тритил и тому подобное. Подходящие защитные группы для карбоксильной группы включают алкил, арил или арилалкил эфиры. Защитные группы могут быть добавлены или удалены в соответствии со стандартными способами, известными специалисту в данной области техники. Использование защитных групп детально описанно в Green, T.W. and P.G.M. Wutz, Protective Groups in Organic Synthesis (1999), 3rd Ed., Wiley. Как может быть замеченно специалистом в данной области техники, защитная группа может быть полимерной смолой, такой как смола Ванга, смола Ринка, или 2-хлортритил хлоридная смола.

Специалистом в данной области техники будет оценено, то, что несмотря на то что, защищенные производные соединений описания могут не обладать фармакологической активностью как таковые, они могут быть введены млекопитающему и затем метаболизироваться в теле образуя соединения описания, которые являются фармакологически активными. Такие производные могут быть описаны как "пролекарства". Все соединения пролекарства описания включены в объем настоящего описания.

Кроме того, соединения описания, которые существуют в виде свободного основания или свободной кислоты могут быть переведены в их фармацевтически приемлемые соли обработкой соответствующим неорганическим или органическим основанием или кислотой с помощью способов известных в данной области техники. Соли соединения описания могут быть переведены в их свободные основания или кислоты с помощью стандартных способов.

Следующие Примеры иллюстрируют различные способы получения соединений в соответствии с данным описанием, т.е., соединения структур (I):

где (Р) представляет собой полезное соединение, (L) представляет собой линкер, (Т) представляет собой направляющий фрагмент, и m равно целому числу от 1 до 10. В некоторых вариантах реализации изобретения m равно 1.

Специалист в данной области техники может получить эти соединения с помощью аналогичных методов или комбинированием других методов известных специалисту в данной области техники. Следует понимать, что специалист в данной области техники может получить, таким же образом, как описано ниже, другие соединения структуры (I), конкретно не показанные ниже, с использованием соответствующих исходных веществ и изменять параметры синтеза по необходимости. В общем, исходные вещества могут быть получены из коммерческих источников таких как Sigma Aldrich, Lancaster Synthesis, Inc., Maybridge, Matrix Scientific, TCI, и Fluorochem USA, etc. или синтезированны согласно источникам известным специалисту в данной области (см., например, Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, и Structure, 5th edition (Wiley, December 2000)) или получены как описано в данном документе.

Следующие примеры представлены для иллюстрации, а не для ограничения.

ОБЩИЕ МЕТОДЫ СИНТЕЗА P-L

Схема 1

Схема 1 иллюстрирует конкретный вариант реализации общей схемы синтеза комплекса Р-L. В дополнительных вариантах реализации изобретения защитная группа (PG₁) удалена из Токсина (или лекарственного средства) до аминокислотного (e.g., AA₁-AA₂) добавления. В некоторых вариантах реализации изобретения Якорь включает функциональную группу, которая образует ковалентную связь с Целью. В других вариантах реализации изобретения Якорь включает Расширительный фрагмент.

Схема 2

Схема 2 иллюстрирует конкретный вариант реализации общей схемы для конвергентного синтеза комплекса P-L, где JPB между полезным веществом и AA последовательностью образована до введения расширительного фрагмента и фрагмента якоря. Этот синтетический подход использовался для следующих соединений: Соединение A, Соединение В, Соединение С, Соединение D, Соединение Е, Соединение F, Соединение G, Соединение Н, Соединение I, Соединение J, Соединение K, Соединение KK, Соединение N, Соединение X, Соединение Z, Соединение AA, Соединение BB, Соединение CC и Соединение DD.

Схема 3

Схема 3 иллюстрирует конкретный вариант реализации общей схемы для конвергентного синтеза комплекса P-L, где JPB помещена между полезным соединением и протеолитической последовательностью, которая уже содержит функциональный расширительный фрагмент и фрагмент якоря. Этот синтетический подход использовался для следующих соединений: Соединение L, Соединение М, Соединение О, Соединение Р, Соединение Q, Соединение R, Соединение s, Соединение Т, Соединение U, Соединение V, и Соединение W.

В некоторых вариантах реализации изобретения общая схема включает в себя методики как описано ниже. Как будет понятно специалисту в данной области, все эти методики иллюстрируют определенные варианты реализации изобретения и могут быть выполнены с альтернативными растворителями, реагентами и защитными группами известными как пригодные в данной области техники.

Примеры

Общая методика 1: синтез 4-анилиносульфонамида

К перемешиваемой суспензии или раствору исходного анилина в CH₂Cl₂ (0,1 М) добавляли трифторуксусный ангидрид (1,1 экв.). Реакцию перемешивали в течение ~1 ч, после чего упаривали при пониженном давлении. Остаток дважды растворили в CHCl₃ и упаривали, получая ожидаемый трифторацетанилид с количественным выходом и ожидаемыми аналитическими результатами.

Трифторацетанилид (~8 ммоль) растворяли в CHCl₃ (10 мл). И добавляли при перемешивании хлорсульфоновую кислоту (3 экв.). Полученный раствор нагревали до 70°C в течение 1 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и добавляли тионилхлорид (2 экв.) при перемешивании. Полученную двухфазную смесь повторно нагревали до 70°C в течение 15 минут. Реакционную смесь затем дважды разбавляли CHCl₃ и упаривали in vacuo, для удаления избытка кислот.

Полученную фенилхлорсульфоновую кислоту растворили в 1,4-диоксане (~10 мл) и полученный раствор добавляли по каплям в концентрированный водный раствор аммиака (10 мл) при 0°C и при интенсивном перемешивании. Реакцию останавливали добавлением 1М лимонной кислоты и доводили до pH=3. В большинстве случаев сульфонамид выпадал в осадок и его фильтровали из водной фазы; в тех случаях, когда продукт не выпадал, реакцию разбавляли этилацетатом (~100 мл), переносили в делительную воронку и органические фазы промывали водным насыщенным раствором хлорида натрия, перед тем как сушить над MgSO₄ и сконцентрировать, получая желаемый 4-трифторацетанилид замещенные сульфонамиды.

Общая методика 2: Введение трифторацетильной защиты

К перемешиваемой суспензии амина в 1,4-диоксане добавляли трифторуксусный ангидрид (1,1 эквивалентов). Реакционная смесь переходила из суспензии в раствор и обратно в суспензию. Ход реакции наблюдали по ТСХ и/или ВЭЖХ-МС для завершения. После того, как исходное вещество прореагировало, реакцию разбавили гексанами или диэтиловым эфиром, профильтровали на воронке Бюхнера и полученное твердое вещество высушили при пониженном давлении, получая чистый трифторацетамид.

Общая методика 3: DCC/DMAP опосредованное получение N-ацилсульфонамида

К перемешиваемому раствору кислоты в дихлорметане добавляли раствор сульфонамида (1,3 эквивалента, в дихлорметане, N,N-диметилформамиде, или их смеси, при необходимости). Затем добавляли дициклогесилкарбодиимид (1,2 эквивалента) и следом за ним N,N-диметиламинопиридин (1,2 эквивалента). Ход реакции наблюдали по ВЭЖХ-МС (обычно 16 ч) и избыток би-продуктов осаждали добавлением диэтилового эфира. Твердое вещество фильтровали и промывали смесью диэтиловый эфир / дихлорметан 1:1. Объединенные органические слои упаривали, и остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле, получая желаемый N-ацилсульфонамид.

Общая методика 4 - Альтернативный вариант - Ацилбензотриазол опосредованное получение N-ацилсульфонамида.

Эта методика была адаптирована из аналогичной методики, описанной в ARKIVOC 2004 (xii), 14-22.

Общая методика 5: Гидролиз трифторацетамидной группы.

К раствору трифторацетамид содержащего фрагмента в 1,4-диоксане или метаноле добавляли гидроксид лития (10 эквивалентов) и воду (10% об.). Реакцию перемешивали при комнатной температуре или необязательно нагревали до 50°C. Ход реакции наблюдали по ВЭЖХ-МС. По окончании реакции, летучие вещества удалили при пониженном давлении, и водный слой нейтрализовали водным раствором лимонной кислоты 5% масс./об. или 1 М соляной кислоты. Полученный водный раствор последовательно промывали дихлорметаном или этилацетатом, и органические фазы объединяли, сушили над MgSO₄, фильтровали и упаривали. Продукт реакции использовали либо «без очистки», либо очищали хроматографией на силикагеле при необходимости.

Общая методика 6: HATU опосредованное образование пептидной связи

К перемешиваемому раствору карбоновой кислоты в минимальном количестве дихлорметана или N,N-диметилформамида, или их смеси, при 0°C добавляли HATU (1,05-1,2 эквивалента) и либо N,N-диизопропилэтиламин (2-4 эквивалента) или 2,4,6-коллидин (2-4 эквивалента). Перемешивание продолжали в течение короткого индукционного периода (5-20 минут), после чего к реакции добавляли раствор амина в дихлорметане. Реакции позволяли нагреться до комнатной температуры и следили за ходом реакции по ВЭЖХ-МС. По окончании реакции, летучие вещества удаляли при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле или обратнофазовой ВЭЖХ. получая амид надлежащей чистоты.

Общая методика 7: EDCI/Cu(II) опосредованное образование пептидной связи.

К перемешиваемому раствору карбоновой кислоты в минимальном количестве 30% N,N-диметилформамида в дихлорметане добавляли 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (0,95 экв.), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (1,0 экв.), амин (0,33 экв.) и сухой хлорид меди(II) (1,0 экв.) в последовательности, с краткой паузой между каждым последующим реагентом. Перемешивание продолжали при комнатной температуре, и ход реакции отслеживали по ВЭЖХ-МС. По окончании реакции, летучие вещества удаляли при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле или обратнофазовой ВЭЖХ получая амид надлежащей чистоты

Общая методика 8: удаление Fmoc группы

Fmoc-защищенное соединение растворяли в 20% растворе пиперидина в N,N-диметилформамиде. Ход реакции наблюдали по ВЭЖХ-МС. После окончания реакции, летучие вещества удаляли при пониженном давлении, получая остаток, который либо очищали с помощью хроматографии на силикагеле, либо непосредственно использовали в следующей стадии.

Общая методика 9: N-ацилилирование аминов с использованием NHS-активированных эфиров.

К раствору амина в минимальном количестве N,N-диметилформамида добавляли соответствующий N-гидроксисукцинимид содержащий эфир (1,5 эквивалента). Ход реакции наблюдали по ВЭЖХ-МС (обычно ~16 ч), после чего все летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали либо с помощью хроматографии на силикагеле, либо обратнофазовой ВЭЖХ, получая желаемый амидный продукт.

Общая методика 10: удаление Boc группы.

К раствору Вос-защищенного соединения в дихлорметане добавляли 10% об./об. трифторуксусную кислоту. Ход реакции наблюдали по ВЭЖХ-МС. После окончания реакции, все летучие соединения удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали либо обратнофазовой ВЭЖХ, хроматографией на силикагеле, либо осаждением из холодной смеси метанол/дихлорметан/диэтиловый эфир.

Общая методика 11: Гидролиз сложного эфира.

К раствору сложного эфира, содержащего соединение в 1,4-диоксане или метаноле добавляли гидроксид лития (10 эквивалентов) и воду (10% об./об.). Реакцию перемешивали при комнатной температуре или необязательно нагревали до 50°C. Ход реакции наблюдали по ВЭЖХ-МС. По окончании реакции, летучие вещества удалили при пониженном давлении, и водный слой доводили до нужного pH при необходимости и последовательно промывали дихлорметаном или этилацетатом. Органические фазы объединяли, сушили над MgSO₄, фильтровали и упаривали. Продукт реакции использовали либо «без очистки», либо очищали хроматографией на силикагеле при необходимости.

ОБЩИЕ РЕАГЕНТЫ:

Соединений 1: Fmoc-Phe-Lys(Boc)-OH: (S)-2-((S)-2-(((9H-флуорен-9-ил)метокси)карбониламино)-3-фенилпропанамидо)-6-(трет-бутоксикарбониламино)гексановая кислота; Fmoc-фенилаланин-Лизин(Boc)-OH

Данное соединение получали согласно Walker et al., Bioorganic Med Chem Lett, 2004, 14, 4323-4327. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,28 (д, J=6,7 Гц, 1H), 7,89 (д, J=7,6 Гц, 2H), 6,71-7,57 (м, 2Н), 7,41 (тд, J=7,6, 3,8 Гц, 2Н), 7,33 (т, J=7,5 Гц, 2Н), 7,30-7,23 (м, 4Н), 7,19 (т, J=7,3 Гц, 1H), 6,79 (т, J=5,6 Гц, 1H), 4,37-4,24 (м, 1H), 4,24-4,07 (м, 5Н), 3,02 (дд, J=13,8, 3,5 Гц, 1H), 2,95-2,83 (м, 2Н), 2,83-2,71 (м, 1Н), 1,82-1,68 (м, 1Н), 1,68-1,51 (м, 1H), 1,46-1,22 (м, 13Н). m/z расчт. для C₃₅H₄₁N₃O₇=615,29. Найдено [М+Н]⁺=616,27, [М-Вос+2Н]⁺=516,16.

Соединение 2: Fmoc-Val-Lys(Boc)-OH: (S)-2-((S)-2-(((9Н-флуорен-9-ил)метокси)карбониламино)-3-метилбутанамидо)-6-(трет-бутоксикарбониламино)гексановая кислота

Данное соединение получали, основываясь на вышеупомянутой методике из М.A. Walker, et al. Bio. Org. Med. Chem. Lett. 2004, 14, 4323-4327 исходя из (S)-2,5-диоксопирролидин-1-ил-2-(((9Н-флуорен-9-ил)метокси)карбониламино)-3-метилбутаноата. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8,28 (д, J=7,8 Гц, 1Н), 7,82 (д, J=7,5 Гц, 2Н), 7,69 (т, J=7,1 Гц, 2Н), 7,41 (т, J=7,5 Гц, 2Н), 7,33 (тд, J=7,5, 1,2 Гц, 2Н), 7,20 (д, J=8,5 Гц, 1H), 4,49-4,36 (м, 3H), 4,26 (т, J=7,0 Гц, 1H), 3,97 (т, J=8,0 Гц, 1H), 3,05-2,97 (м, 2Н), 2,08 (дкв, J=13,3, 6,6 Гц, 1Н), 1,93-1,84 (м, 1Н), 1,81-1,66 (м, 1Н), 1,54-1,43 (м, 4Н), 1,40 (с, 9Н), 1,01 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,98 (д, J=6,8 Гц, 3H). m/z расчт. для C₃₁H₄₁N₃O₇=567,3 найдено [М-Вос+Н⁺]⁺=468,8.

Соединение 3: Boc-Val-Cit-OH: (S)-2-((S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентановая кислота.

Данное соединение синтезировали согласно US 2010/0233190 A1, с соответствующими спектроскопическими данными.

Соединение 4: H-Val-Cit-OH: (S)-2-((S)-2-амино-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентановая кислота.

Данное соединение получали из Boc-VC-OH согласно общей методике 10. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,69 (д, J=7,4 Гц, 1H), 8,21-7,97 (м, 3H), 4,24 (тд, J=8,2, 4,9 Гц, 1Н), 3,97 (с, OH), 3,63 (дд, J=9,2, 4,0 Гц, 1Н), 2,98 (т, J=6,8 Гц, 2Н), 2,60 (с, 1Н), 2,10 (г, J=6,8 Гц, 1Н), 1,85-1,69 (м, 1Н), 1,61 (дтд, J=14,1, 9,0, 5,6 Гц, 1H), 1,45 (дтд, J=14,7, 8,2, 7,3, 3,7 Гц, 2Н), 0,97 (дд, J=6,9, 5,0 Гц, 6Н).

Соединение 5: Fmoc-Ala(D)-Phe-Lys(Boc)-OH: (5R,8S,11S)-8-бензил-11-(4-(трет-бутоксикарбониламино)бутил)-1-(9Н-флуорен-9-ил)-5-метил-3,6,9-триоксо-2-окса-4,7,10-триазадодекан-12-овая кислота.

Данное соединение получали из Соединения 1 по общей методике 8, с последующей обработкой (R)-2,5-диоксопирролидин-1-ил 2-(((9Н-флуорен-9-ил)метокси)карбониламино)пропаноатом по общей методике 9. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 12,57 (с, 1Н), 8,20 (д, J=7,6 Гц, 1Н), 8,12 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,89 (д, J=7,5 Гц, 2Н), 6,71 (т, J=6,7 Гц, 2Н), 7,48-7,37 (м, 3H), 7,33 (т, J=7,4 Гц, 2Н), 7,30-7,13 (м, 5Н), 6,77 (т, J=5,1 Гц, 1Н), 4,59 (тд, J=10,8, 10,3, 3,5 Гц, 1H), 4,33-4,10 (м, 4Н), 4,02 (кв, J=7,1 Гц, 1H), 3,10 (дд, J=13,8, 2,8 Гц, 1H), 2,94-2,87 (м, 2Н), 2,79-2,67 (м, 1H), 1,75-1,70 (м, 1H), 1,62 (с, 1Н), 1,37 (с, 4Н), 1,36 (с, 9Н), 0,96 (д, J=7,1 Гц, 3H). m/z расчт. для C₃₁H₄₁N₃O₇=686,3 найдено [M+Na⁺]⁺=709,9.

Соединение 6: Fmoc-Phe(D)-Phe-Lys-OH: (5R,8S,11S)-5,8-дибензил-11-(4-(трет-бутоксикарбониламино)бутил)-1-(9Н-флуорен-9-ил)-3,6,9-триоксо-2-окса-4,7,10-триазадодекан-12-вая кислота.

Данное соединение получали из Соединения 1 применением общей методики 8, с последующей обработкой (R)-2,5-диоксопирролидин-1-ил 2-(((9Н-флуорен-9-ил)метокси)карбониламино)-3-фенилпропаноатом по общей методике 9. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 12,59 (с, 1Н), 8,39 (д, J=8,7 Гц, 1H), 8,31 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,88 (д, J=7,5 Гц, 2Н), 7,62 (т, J=8,2 Гц, 2Н), 7,47 (д, J=8,7 Гц, 1Н), 7,41 (т, J=7,1 Гц, 2Н), 7,35-7,10 (м, 12Н), 6,77 (т, J=5,7 Гц, 1H), 4,73-4,62 (м, 1Н), 4,28-4,03 (м, 5Н), 3,09 (дд, J=13,7, 3,8 Гц, 1H), 2,93-2,87 (м, 2Н), 2,74 (дд, J=13,7, 10,4 Гц, 1Н), 2,58 (дд, J=13,8, 3,4 Гц, 1Н), 2,48-2,35 (м, 1H), 1,84-1,68 (м, 1Н), 1,68-1,55 (м, 1H), 1,40-1,33 (м, 13Н). m/z расчт. для C₃₁H₄₁N₃O₇=762,4 найдено [M+Na⁺]⁺=785,9.

Соединение 7: MC-NHS: 2,5-диоксопирролидин-1-ил 6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексаноат.

К перемешиваемому раствору 6-аминокапроновой кислоты (10,0 г, 76,2 ммоль, 1,0 экв.) в уксусной кислоте (75 мл), добавляли малеиновый ангидрид (7,85 г, 80,0 ммоль, 1,05 экв.). Твердые вещества через несколько минут растворились, и потом после около 5 мин, начал выпадать белый осадок. После часа, суспензия загустела в белую густую массу. Данную массу вычерпывали на пористый фильтр и промывали толуолом и высушивали in vacuo при нагревании до удаления всех следов уксусной кислоты.

Промежуточный порошок растворяли в толуоле (250 мл), и добавляли триэтиламин (21,3 мл, 152 ммоль, 2,0 экв.), и смесь нагревали до кипения с перемешиванием и ловушкой Дина-Старка. После 5 ч кипячения с перемешиванием, смесь охлаждали и светлый слой толуола декантировали от липкого остатка в колбе. Толуол удаляли in vacuo получая триэтиламмониевую соль 6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексановой кислоты. Соль повторно растворяли в толуоле, и добавляли небольшое количество уксусной кислоты, после чего упаривали. Затем, смесь растворили в 50% растворе бикарбоната натрия, и добавляли 1 М HCl, доводя pH до 3, и получая осадок молочного цвета. Смесь экстрагировали три раза EtOAc, объединенные органические фазы высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали in vacuo получая чистый 6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексановую кислоту (3,08 г, 19%).

К перемешиваемому раствору 6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексановой кислоты (3,08 г, 14,6 ммоль, 1,0 экв.) и N-гидроксисукцинимида (1,76 г, 15,3 ммоль, 1,05 экв.) в EtOAc (30 мл) при 0°C, добавляли дициклогексилкарбодиимид (3,16 г, 15,3 ммоль, 1,05 экв.). Реакции позволили разогреться до к.т. После 20 ч, реакционную смесь фильтровали и промывали EtOAc, и фильтрат упаривали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии получая данное соединение (2,16 г, 48%) в виде светлого масла, которое медленно затвердевает в вязкое белое твердое вещество. ¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 6,71 (с, 2Н), 3,56 (т, J=12 Гц, 2Н), 2,86 (с, 4Н), 2,63 (т, J=7,4 Гц, 2Н), 1,80 (J=1,4 Гц, 2Н), 1,73-1,57 (м, 2Н), 1,50-1,35 (м, 2Н). m/z расчт. для C₁₄H₁₆N₂O₆=308,10. Найдено [M+H]⁺=309,13. Rf=0,28 (50% EtOAc/Гекс).

Соединение 8: МТ-OH: 3-(2-(2-(2-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)этокси)этокси)этокси)пропановая кислота.

Данное соединение получали согласно Wamecke, A., Kratz, F. Bioconjugate Chemistry 2003, 14, 377-387. ¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 6,74 (с, 2Н), 3,87-3,72 (м, 4Н), 3,72-3,62 (м, 10Н), 2,73-2,64 (м, 2Н). m/z расчт. для C₁₃H₂₉NO₇=301,12. Найдено [M+H]⁺=302,14,

Соединение 9: MT-NHS: 2,5-диоксопирролидин-1-ил 3-(2-(2-(2-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)этокси)этокси)этокси)пропаноат.

МТ-OH (2,6 г, 8,6 ммоль, 1,0 экв.) обрабатывали дициклогескилкарбодиимидом (1,87 г, 9,06 ммоль, 1,05 экв.), и N-гидроксисукцинимидом (1,04 г, 6,06 ммоль, 1,05 экв.) в 30 мл 5:1 EtOAc/диоксан при к.т. После 36 ч, смесь фильтровали, промывали EtOAc, и остаток очищали с помощью флэш-хроматографии получая указанное соединение (309 мг, 9,0%) в виде светлого масла, наряду с исходным веществом (1,31 г, 50% регенерировано). ¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 6,72 (с, 2Н), 3,87 (т, J=6,4 Гц, 2Н), 3,74 (т, J=5,6 Гц, 2Н), 3,70-3,58 (м, 10Н), 2,93 (т, J=6,4 Гц, 2Н), 2,86 (с, 4Н), 1,32-1,19 (м, 2Н). m/z расчт. для C₁₇H₂₂N₂O₉=398,13. Найдено [M+H]⁺=399,15, [M+Na]⁺=421,14. Rf=0,59 (10% (5% AcOH/MeOH)/10% Гекс./CH₂Cl₂).

Соединение 10: MT-Val-Cit-OH: (14R,17R)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадекан-18-овая кислота.

Данное соединение получали из H-VC-OH (0,50 г, 1,287 ммоль)) и MT-NHS (0,512 г, 1,287 ммоль) с N,N-диизопропилэтиламином (0,448 мл, 2 экв.) в диоксане (0,50 мл). После расходования исходного вещества (~16 ч, оценено по ВЭЖХ-МС), реакционную смесь упаривали in vacuo и оставшееся масло очищали с помощью препаративной ВЭЖХ-МС. Лиофилизация желаемых фракций привела к указанному соединению в виде белого порошка (0,351 г, 63%). ¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 6,76 (с, 2Н), 4,54-4,59 (м, 1Н), 4,33-4,38 (м, J=7,6 Гц, 1Н), 3,85-3,70 (м, 5Н), 3,60-3,68 (м, 10Н), 3,18-3,22 (м, 2Н), 2,55-2,62 (м, 2Н), 2,10-2,18 (м, 1H), 1,90-2,05 (м, 1H), 1,72-1,85 (м, 1H), 1,54-1,65 (м, 2Н), 0,98 (т, 7=6,6 Гц, 6Н).

Соединение 11: Boc-HTI-286-OH: (6S,9S,12S,Е)-9-трет-бутил-12-изопропил-2,2,5,11,14-пентаметил-4,7,10-триоксо-6-(2-фенилпропан-2-ил)-3-окса-5,8,11-триазапентадек-13-ен-15-овая кислота

Данное соединение получали согласно Nieman et al. J. Nat. Prod. 2003, 66, 183-199.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,57 (д, J=7,3 Гц, 2H), 7,48 (т, J=7,8 Гц, 2Н), 7,38 (т, J=7,3 Гц, 1H), 6,80 (дкв, J=9,8, 1,6 Гц, 1H), 5,08 (т, J=10,2 Гц, 1H), 4,95 (с, 1H), 4,37 (с, 1H), 3,17 (с, 3H), 2,53 (с, 3H), 2,15-2,02 (м, 1Н), 1,94 (д, J=1,5 Гц, 3H), 1,50 (с, 3H), 1,41 (с, 3H), 1,10 (с, 9Н), 0,93 (д, J=6.6 Гц, 3H), 0,92 (д, J=6,6 Гц, 3H).

C₃₂H₅₁N₃O₆ расчт для. [M+H]⁺ 574,38. найдено [M+Na]⁺ 586,42, [M+H]⁺ 574,46, [М-Вос+2Н]⁺ 474,39.

Соединение 12: Fmoc-Val-Cit-OH: (S)-2-((S)-2-(((9Н-флуорен-9-ил)метокси)карбониламино)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентановая кислота, Fmoc-Valine-Citrulline-OH

Данное соединение получали согласно Dubowchik et al., Bioconjugate Chem., 2002, 13, 855-869.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО d₆) δ 12,56 (с, 1H), 8,21 (д, J=7,3 Гц, 1H), 7,90 (д, J=7,5 Гц, 2H), 6,76 (т, J=7,0 Гц, 2H), 7,49-7,39 (м, 3H), 7,38-7,23 (м, 2Н), 5,96 (т, J=5,9 Гц, 1H), 5,40 (с, 2Н), 4,34-4,09 (м, 4Н), 3,93 (дд, J=9,1, 7,1 Гц, 1Н), 3,39 (кв, J=7,0 Гц, 3H), 2,96 (кв, J=6,5 Гц, 2Н), 1,97 (д, J=6,9 Гц, 1Н), 1,86-1,63 (м, 1H), 1,57 (дтд, J=13,9, 9,0, 5,4 Гц, 1Н), 1,41 (дгепт, J=13,2, 6,9 Гц, 2Н), 0,88 (дд, J=13,3, 6,7 Гц, 6Н).). C₂₆H₃₂N₄O₆ расчт. для. [M+H]⁺ 497,23. найдено [M+H]⁺ 497,19.

Пример 1

Соединение А: (S,E)-N-(4-(((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)метил)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение А-1: 4-(азидометил)бензолсульфонамид

К перемешиваемому раствору 4-(бромметил)бензолсульфонамида (0,50 г) в N,N-диметилформамиде (1 мл) добавляли азид натрия (0,20 г). Суспензию нагревали до 50°C на протяжении 3 часов, после чего растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток распределяли между этилацетатом и водой. Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивали над сульфатом магния, фильтровали и упаривали досуха, получая указанное соединение в виде сиропа, который затвердевает при стоянии.

¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8,06-7,91 (м, 2Н), 7,58-7,44 (м, 2Н), 4,96 (с, 2Н), 4,48 (с, 2Н).

Соединение А-2: 4-(аминометил)бензолсульфонамид

К раствору 4-(азидометил)бензолсульфонамида (0,354 г) в метаноле (10 мл) в кругло донной колбе с магнитным якорем добавляли 10% Pd/C (~0,05 г). Колбу вакуумировали при пониженном давлении и заполняли водородом. Вакуумирование и заполнение повторяли три раза, после чего суспензию перемешивали в течение ночи. После 16 ч, ТСХ анализ показал полное расходование исходного соединения. Реакцию разбавляли метанолом (40 мл), добавляли Celite®, и смесь фильтровали через стеклянный пористый фильтр. Полученный раствор упаривали досуха. ¹H ЯМР показало, что вещество достаточно чистое на этой стадии, для того чтобы его использовать без очистки.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 6,77 (м, 2Н), 7,53 (м, 2Н), 5,76 (с, 2Н), 3,76 (д, J=11,9 Гц, 2Н).

Соединение А-3: 2,2,2-трифтор-N-(4-сульфамоилбензил)ацетамид

Данное соединение синтезировали с помощью реакции 4-(аминометил)бензолсульфонамида TFAA согласно общей методике 2, с ¹H ЯМР спектром усложненным ротамерами.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 7,91-6,75 (м, 2Н), 7,55-7,31 (м, 4Н), 4,72 (м, 2Н), 4,47 (д, J=6,0 Гц, 1Н), 3,18 (с, 2Н).

Соединение А-4: трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-2,5-диметил-6-оксо-6-(4-((2,2,2-трифторацетамидо)метил)фенилсульфонамидо)гекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамат)

Данное соединение синтезировали из Boc-HTI-286-OH и Соединения А-4 согласно общей методике 3.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8,11-7,99 (м, 2Н), 7,50 (дд, J=18,3, 7,9 Гц, 4Н), 7,39-7,07 (м, 7Н), 6,43 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 5,17 (с, 1H), 4,68 (д, J=8,9 Гц, 1Н), 4,56 (с, 2Н), 3,00 (д, J=33,9 Гц, 3H), 2,88 (д, J=7,6 Гц, 3H), 2,34 (с, 2Н), 2,00 (д, J=13,6 Гц, 1Н), 1,81 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,43 (с, 13Н), 0,98-0,68 (м, 14Н). C₄₁H₅₈F₃N₅O₈S расчт. дл [M+H]⁺ 838,40; найдено [M+Na]⁺ 860,48; [M+H]⁺ 838,46; [М-Вос+2Н]⁺ 738,33.

Соединение А-5: (S,E)-N-(4-(аминометил)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-2,5-диметил-6-оксо-6-(4-((2,2,2-трифторацетамидо)метил)фенилсульфонамидо)гекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамата согласно общим методикам 5 и 10.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8,13 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 7,68 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,59-7,41 (м, 4Н), 7,37 (т, J=13 Гц, 1Н), 6,51 (дд, J=9,4, 1,7 Гц, 1H), 5,01 (т, J=9,9 Гц, 1H), 4,37 (с, 1Н), 4,24 (с, 2Н), 3,17 (с, 3H), 2,51 (с, 3H), 2,12-1,96 (м, 1Н), 1,84 (д, J=1,5 Гц, 3H), 1,47 (с, 3H), 1,37 (с, 3H), 1,07 (с, 9Н), 0,91 (м, 6Н). C₃₄H₅₁N₅O₅S расчт. для [M+H]⁺ 642,38; найдено [M+H]⁺ 642,40.

Соединение А-6: (9H-флуорен-9-ил)метил (S)-1-((S)-1-(4-(N-((S,E)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-еноил)сульфамоил)бензиламино)-1-оксо-5-уреидопентан-2-иламино)-3-метил-1-оксобутан-2-илкарбамат

Синтезирован из (S,E)-N-(4-(аминометил)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамида и Fmoc-Val-Cit-OH согласно общей методике 6 с небольшой примесью ДИПЭА и AcOH. Соединение использовано «без очистки» в следующей стадии.

C₆₀H₈₁N₉O₁₀S расчт. для [M+H]⁺ 1120,58; найдено [M+H]⁺ 1120,68.

Соединение А-7: (S,E)-N-(4-(((S)-2-((S)-2-амино-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)метил)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали исходя (9H-флуорен-9-ил)метил (S)-1-((S)-1-(4-(N-((S,E)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-еноил)сульфамоил)бензиламино)-1-оксо-5-уреидопентан-2-иламино)-3-метил-1-оксобутан-2-илкарбамата согласно общей методике 8.

Соединение A: (S,E)-N-(4-(((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)метил)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение синтезировали из Соединения А-7 и MC-NHS согласно общей методике 9, очищали с помощью препаративной ВЭЖХ и снимали защиту согласно общей методике 10.

¹H ЯМР (600 МГц, Метанол-d₄) δ 7,89 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 7,53-7,47 (м, 2Н), 7,39 (т, J=7,5 Гц, 4Н), 7,28 (т, J=7,3 Гц, 1H), 6,82 (с, 2Н), 6,67 (д, J=9,3 Гц, 1Н), 5,3 (т, J=10,0 Гц, 1H), 4,51-4,35 (м, 3H), 4,18 (д, J=7,4 Гц, 1Н), 3,65 (с, 1Н), 3,50 (т, J=7,1 Гц, 2Н), 3,31 (с, 3H), 3,20-3,01 (м, 5Н), 2,35-2,18 (м, 5Н), 2,08 (дкв, J=13,9, 6,9 Гц, 1Н), 2,02-1,91 (м, 6Н), 1,91-1,77 (м, 4Н), 1,72 (дтд, J=14,0, 9,3, 5,2 Гц, 1Н), 1,66-1,40 (м, 10Н), 1,37 (с, 3H), 1,34-1,24 (м, 3H), 1,03 (с, 9Н), 0,96 (дд, J=6.8, 4,0 Гц, 6Н), 0,91-15 0,86 (м, 3H), 0,84 (д J=6,6 Гц, 3H).

C₅₅H₈₂N₁₀O₁₁S расчт. для m/z [M+H]⁺ 1091,59; найдено [M+H]⁺ 1091,67.

Пример 2

Соединение В: (S,Е)-N-(4-(((R)-6-амино-2-((R)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-фенилпропанамидо)гексанамидо)метил)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение В-1a: трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-6-(4-(аминометил)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамат

Данное соединение получали из трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E) 2,5-диметил-6-оксо-6-(4-((2,2,2-трифторацетамидо)метил)фенилсульфонамидо)гекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамата, Соединения А-4 согласно общей методике 5.

Соединение B-1

Данное соединение получали из трет-бутил-(S)-1-((S)-1-(((S,E)-6-(4-(аминометил)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамата и Fmoc-Phe-Lys(Boc)-OH согласно общей методике 6.

C₇₄H₉₈N₈O₁₃S расчт для m/z=1338,70 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1339,86, [M+Na]⁺=1361,88, [M+K]⁺=1377,95, [М-Вос+2Н]⁺=1239,83, [M-2Boc+3H]⁺=1139,72.

Соединение В-2:

Данное соединение получали из Соединения В-1 согласно общей методике 8.

C₅₉H₈₈N₈O₁₁S расчт. для m/z=1116,63 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1116,78, [M+Na]⁺=1139,80, [М-Вос+2Н]⁺=1016,72, [M-2Boc+3H]⁺=917,64.

Соединение В-3:

Данное соединение получали из Соединения В-2 и MC-NHS согласно общей методике 9.

C₆₉H₉₉N₉O₁₄S расчт. для m/z=1309,70 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1310,89, [M+Na]⁺=1332,91, [М-Вос+2Н]⁺=1210,86, [M-2Boc+3H]⁺=1110,77.

Соединение В: (S,E)-N-(4-(((R)-6-амино-2-((R)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-фенилпропанамидо)гексанамидо)метил)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из Соединения В-3 согласно общей методике 10.

C₅₉H₈₃N₉O₁₀S расчт. для m/z=1109,60 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1110,76, [M+Na]⁺=1132,75, [(M+2H)/2]²⁺=556,11.

Пример 3

Соединение C: (S,E)-N-(4-(((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)метил)бензилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-Nr5,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение C-1a: 2,2,2-трифтор-N-(4-(сульфамоилметил)бензил)ацетамид

Данное соединение синтезировали из коммерчески доступного (4-(аминометил)фенил)метансульфонамида и TFAA используя общую методику 2.

¹H ЯМР (400 МГц, Ацетон-d₆) δ 9,05 (с, 1H), 7,48-7,40 (м, 2Н), 7,40-7,32 (м, 2Н), 6,17 (с, 1Н), 4,56 (д, J=6,1 Гц, 2Н), 4,35 (с, 2Н).

Соединение С-1:

Данное соединение синтезировали из Boc-HTI-286-OH и 2,2,2-трифтор-N-(4-(сульфамоилметил)бензил)ацетамида, Соединение C-1a, согласно общей методике 3.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,49 (д, J=1,1 Гц, 2Н), 7,41-7,27 (м, 5Н), 7,21 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 6,36 (д, J=9,4 Гц, 1Н), 5,18 (с, 1H), 4,99 (с, 2Н), 4,69 (с, 3H), 4,46 (с, 3H), 3,06-2,91 (м, 3H), 2,88 (д, J=4,7 Гц, 3H), 2,04 (д, J=1,8 Гц, 1H), 1,88 (д, J=13,5 Гц, 3H), 1,79-1,69 (м, 1Н), 1,68-1,57 (м, 1Н), 1,52 (д, J=8,2 Гц, 3H), 1,44 (с, 9Н), 1,23-1,12 (м, 1Н), 0,97 (т, J=7,4 Гц, 1H), 0,90 (д, J=6,0 Гц, 9Н), 0,80 (д, J=6,8 Гц, 3H).

C₄₂H₆₀F₃N₅O₈S расчт. для m/z=851,41 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=852,47, [M+Na]⁺=874,47, [М-Вос+2Н]⁺=752,38.

Соединение С-2:

Данное соединение получали из Соединения С-1 согласно общей методике 3.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,49 (т, J=8,0 Гц, 2Н), 7,40-7,30 (м, 4Н), 7,28 (д, J=7,9 Гц, 2Н), 7,22 (кв, J=7,9 Гц, 1H), 6,48 (д, J=9,4 Гц, 1H), 5,19 (с, 1Н), 5,7-4,94 (м, 2Н), 4,72 (с, 1Н), 4,48 (с, 2Н), 3,77 (с, 2Н), 3,05-2,82 (м, 3H), 1,92-1,82 (м, 4Н), 1,58-1,32 (м, 16Н), 0,97-0,85 (м, 12Н), 0,85-0,74 (м, 4Н).

C₄₀H₆₁N₅O₇S расчт. для m/z=755,43 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=756,46, [M+Na]⁺=778,48, [М-Вос+2Н]⁺=656,39.

Соединение С-3:

Данное соединение получали из Соединения С-2 и Fmoc-Val-Cit-OH согласно общей методике 6.

C₆₆H₉₁N₉O₁₂S расчт. для m/z=1233,65 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1234,82, [M+Na]⁺=1256,80, [М-Вос+2Н]⁺=1134,73.

Соединение С-4:

Данное соединение получали из Соединения С-3 согласно общей методике 8.

C₅₁H₈₁N₉O₁₀S расчт. для m/z=1011,58 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1012,72, [M+Na]⁺=1034,68, [М-Вос+2Н]⁺=912,66.

Соединение С-149:

Данное соединение получали из Соединения С-4 и MC-NHS согласно общей методике 9.

C₆₁H₉₂N₁₀O₁₃S расчт. для m/z=1204,66 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1205,84, [M+Na]⁺=1227,82, [М-Вос+2Н]⁺=1105,75.

Соединение С: (S,E)-N-(4-(((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)метил)бензилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид,

Данное соединение получали из Соединения С-5 согласно общей методике 10.

C₅₆H₈₄N₁₀O₁₁S расчт. для m/z=1104,60 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1105,78, [M+Na]⁺=1127,76, [(M+2H)/2]²⁺=553,60.

Пример 4

Соединение D: (S,E)-N-(4-(((R)-6-амино-2-((R)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-фенилпропанамидо)гексанамидо)метил)бензилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение D-1:

Данное соединение получали из Соединения С-2 и Fmoc-Phe-Lys(Boc)-OH согласно общей методике 6.

C₇₅H₁₀₀N₈O₁₃S расчт. для m/z=1352,71 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1353,96, [M+Na]⁺=1375,83, [М-Вос+2Н]⁺=1253,78, [М-2 Вос+Н]⁺=1153,70.

Соединение D-2:

Данное соединение получали из Соединения D-1 согласно общей методике 8.

C₆₀H₉₀N₈O₁₁S расчт. для m/z=1130,64 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1131,75, [M+Na]⁺=1153,75, [М-Вос+2Н]⁺=1031,68, [M-2Boc+3H]⁺=931,61.

Соединение D-151:

Данное соединение получали из Соединения D-2 и MC-NHS согласно общей методике 9.

C₇₀H₁₀₁N₉O₁₄S расчт. для m/z=1323,72 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1324,96, [M+Na]⁺=1346,94, [М-Вос+2Н]⁺=1224,87, [M-2Boc+3H]⁺=1124,79.

Соединение D: (S,E)-N-(4-(((R)-6-амино-2-((R)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-фенилпропанамидо)гексанамидо)метил)бензилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из Соединения D-3 согласно общей методике 10.

C₆₀H₈₅N₉O₁₀S расчт. для m/z=1123,61 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1124,75, [M+Na]⁺=1146,77, [(M+2H)/2]²⁺=563,09.

Пример 5

Соединение E: (S,E)-N-(4-((R)-2-((R)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение E-1a: 2,2,2-трифтор-N-(4-(сульфамоилметил)фенил)ацетамид

Данное соединение синтезировали из комерчески доступного (4-аминофенил)метансульфонамида и TFAA используя общую методику 2.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 11,31 (с, 1H), 6,79-7,51 (м, 2Н), 7,51-7,23 (м, 2Н), 6,85 (с, 2Н), 4,27 (с, 2Н).

Соединение Е-1:

Данное соединение синтезировали из Boc-HTI-286-OH и 2,2,2-трифтор-N-(4-(сульфамоилметил)фенил)ацетамид, Соединение Е-1a, согласно общей методике 3.

¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 8,81 (с, 1Н), 7,66-7,50 (м, 3H), 7,50-7,31 (м, 5Н), 7,23 (т, J=6,7 Гц, 1Н), 6,35 (дд, J=9,2, 1,6 Гц, 1Н), 6,22 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 5,34 (с, 1H), 5,05-4,80 (м, 3H), 4,72-4,40 (м, 2Н), 2,97-2,74 (м, 3H), 2,60 (с, 3H), 1,95 (м, 4Н), 1,68-1,35 (м, 15Н), 1,02-0,63 (м, 15Н).

C₄₁H₅₈F₃N₅O₈S расчт. для [M+H]⁺ 838,40; найдено [M+Na]⁺ 860,48; [M+H]⁺ 838,52; [М-Вос+2Н]⁺ 738,39.

Соединение Е-2:

Данное соединение получали из Соединения Е-1 согласно общей методике 5.

¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,63-7,39 (м, 2Н), 7,35 (т, J=6,7 Гц, 2Н), 7,22 (т, J=13 Гц, 1Н), 7,16-7,03 (м, 2Н), 6,73-6,54 (м, 2Н), 6,36 (дд, J=9,2, 1,6 Гц, 1Н), 6,07 (с, 1H), 5,00 (м, 2Н), 4,60 (с, 3H), 2,98-2,75 (м, 6Н), 1,97-1,71 (м, 4Н), 1,68-1,34 (м, 15Н), 0,97-0,63 (м, 15Н).

C₃₉H₅₉N₅O₇S расчт. для [M+H]⁺ 742,41; найдено [M+H]⁺ 742,47; [М-Вос+2Н]⁺ 642,40.

Соединение Е-3:

Данное соединение получали из Соединения Е-2 и Fmoc-Val-Cit-OH согласно общей методике 6.

C₆₅H₈₉N₉O₁₂S расчт. для [M+H]⁺ 1220,64; найдено [M+H]⁺ 1220,97; [М-Вос+2Н]⁺ 1120,87.

Соединение E-154:

Данное соединение получали из Соединения Е-3 согласно общей методике 8.

C₅₀H₇₉N₉O₁₀S расчт. для [M+Na]⁺ 998,57; найдено [M+H]⁺ 998,75; [М-Вос+Н]⁺ 898,69.

Соединение Е-5:

Данное соединение получали реакцией Соединения Е-4 с MC-NHS согласно общей методике 9.

C₆₀H₉₀N₁₀O₁₃S расчт. для [M+H]⁺ 1191,64; найдено [M+H]⁺ 1191,74; [М-Вос+2Н]⁺ 1091,67.

Соединение E: (S,E)-N-(4-((R)-2-((R)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из Соединения Е-5 согласно общей методике 10.

C₅₅H₈₂N₁₀O₁₁S расчт. для [M+H]⁺ 1091,59; найдено [M+H]⁺ 1091,67.

Пример 6

Соединение F: -(4-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)бензилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение F-1:

К перемешиваемому раствору Соединения Е-4 (40,0 мг, 0,040 ммоль, 1,0 экв.) в CH₂Cl₂ (0,5 мл) добавляли МТ-OH (18,1 мг, 0,060 ммоль, 1,5 экв.). Затем, триэтиламин (0,017 мл, 0,120 ммоль, 3,0 экв.), и затем добавляли реагент Мукаямы (15,4 мг, 0,060 ммоль, 1,5 экв.). После 3 ч, добавили приблизительно один эквивалент кислоты, триэтиламина, и реагента Мукаямы, и еще после 30 мин, ВЭЖХ показала израсходование исходного вещества Соединения Е-4. Реакционную смесь разбавляли 0,25 мл гексанов и помещали напрямую на флэш-хроматографию, получая указанное соединение (29,3 мг, 57%) в виде светло желтой пленки.

C₆₃H₉₆N₁₀O₁₆S расчт. для m/z=1280,67. Найдено [M+H]⁺=1281,94, [M+Na]⁺=1303,91, [М-Вос+2Н]⁺=1181,86. R_f=0,45 (10% (5% AcOH/MeOH)/10% Гекс./CH₂Cl₂).

Соединение F (S,E)-N-(4-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)бензилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали согласно общей методике 10 из Соединения F-1.

C₅₈H₈₈N₁₀O₁₄S расчт. для m/z for=1180,62. Найдено [M+H]⁺=1181,82, [(M+2H)/2]²⁺=591,60.

Пример 7

Соединение G: (S,E)-N-(4-((R)-6-амино-2-((R)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-фенилпропанамидо)гексанамидо)бензилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение G-1:

Данное соединение получали из Соединения Е-2 и Fmoc-Phe-Lys(Boc)-OH согласно общей методике 6.

C₇₄H₉₈N₈O₁₃S расчт. для m/z=1338,70 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1339,96, [M+Na]⁺=1361,92, [М-Вос+2Н]⁺=1239,85, [М-2 Вос+Н]⁺=1139,77.

Соединение G-2:

Данное соединение получали из Соединения G-1 согласно общей методике 8.

C₅₉H₈₈N₈O₁₁S расчт. для m/z=1116,63 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1117,78, [M+Na]⁺=1139,80, [М-Вос+2Н]⁺=1017,72, [М-2 Вос+Н]⁺=917,64.

Соединение G-158:

Данное соединение получали из Соединения G-2 и MC-NHS согласно общей методике 9.

C₆₉H₉₉N₉O₁₄S расчт. для m/z=1309,70 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1310,93, [M+Na]⁺=1332,89, [М-Вос+2Н]⁺=1210,84, [M-2Boc+3H]⁺=1110,76.

Соединение G: (S,E)-N-(4-((R)-6-амино-2-((R)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-фенилпропанамидо)гексанамидо)бензилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S')-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из Соединения G-3 согласно общей методике 10.

C₅₉H₈₃N₉O₁₀S расчт. для m/z=1109,60 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1110,71, [M+Na]⁺=1132,74, [(M+2H)/2]²⁺=556,18.

Пример 8

Соединение H: (S,E)-N-(4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение H-1a: 2,2,2-трифтор-N-(4-сульфамоилфенил)ацетамид

Данное соединение синтезировали из коммерчески доступного сульфаниламида и TFAA, используя общую методику 2 с практически количественным выходом.

Соединение H-1b: трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-2,5-диметил-6-оксо-6-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенилсульфонамидо)гекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамат

К перемешиваемому раствору Boc-HTI-286-OH (0,400 мг, 0,7 ммоль) и 2,2,2-трифтор-N-(4-сульфамоилфенил)ацетамид (0,244 мг, 1,3 экв.) в этилацетате (10 мл) добавляли N,N-дициклогексилкарбодиимид (0,202 мг, 1,4 экв.) и N,N-диметил-4-аминопиридин (0,119 мг, 1,4 экв.). Перемешивание продолжали в течение ночи, после чего реакцию разбавляли диэтиловым эфиром (60 мл), твердые вещества отфильтровывали, промывали диэтиловым эфиром (30 мл) и фильтрат упаривали, получая бесцветное масло. Масло очищали с помощью хроматографии на силикагеле используя 5-50% EtOAc (содержащем 5% АсОН) в гексанах на 25 г колонке Isolera™ с 25 объемами колонки. Фракции, содержащие желаемое вещество объединяли и упаривали, получая указанное соединение (0,504 г, 86%) в виде слабоокрашенной пены.

¹H ЯМР (400 МГц, Метаноле-d₄) δ 8,14-8,03 (м, 2Н), 7,98-7,83 (м, 3H), 7,47 (д, J=7,6 Гц, 2Н), 7,32 (д, J=7,6, 2Н), 7,20 (кв, J=7,4, 6,2 Гц, 2Н), 6,44 (д, J=9,1 Гц, 1H), 5,16 (с, 1Н), 4,68 (д, J=9,0 Гц, 1H), 3,08-2,95 (м, 3H), 2,87 (д, J=6,4 Гц, 3H), 2,01 (м, 6Н), 1,80 (д, J=11,7 Гц, 3H), 1,62 (д, J=6,4 Гц, 1Н), 1,52-1,36 (м, 14Н), 1,26 (м, 1Н), 0,98-0,72 (м, 15Н).

C₄₀H₅₆F₃N₅O₈S расчт. для m/z [M+H]⁺ 824,38; найдено [M+Na]⁺ 846,43; [M+H]⁺ 824,40; [М-Вос+2Н]⁺ 724,34.

Соединение Н-1c: трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-6-(4-аминофенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамат

Данное соединение получали из Соединения Н-1b согласно общей методике 5.

Соединение Н-1:

Синтезировано из трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-6-(4-аминофенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамата и Fmoc-Val-Cit-OH согласно общей методике 6.

C₆₄H₈₇N₉O₁₂S расчт. для m/z [M+H]⁺ 1206,62; найдено [M+Na]⁺ 1230,81; [M+H]⁺ 1206,73; [М-Вос+2Н]⁺ 1106,63.

Соединение Н-2: трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-6-(4-((S)-2-((S)-2-амино-3-метилбутанамидо)-S-уреидопентанамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-5 3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамат

Данное соединение получали из Соединения Н-1 согласно общей методике 8.

C₄₉H₇₇N₉O₁₀S расчт. для m/z [M+H]⁺ 984,55; найдено [M+H]⁺ 984,63; [М-Вос+2Н]⁺ 884,57.

Соединение Н-3: трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-6-(4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамат

Данное соединение получали из трет-бутил (S)-1-((S')-1-(((S,E)-6-(4-((S)-2-((-S)-2-амино-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамата и MC-NHS согласно общей методике 9.

C₅₉H₈₈N₁₀O₁₃S расчт. для m/z [M+H]⁺ 1177,63; найдено [M+Na]⁺ 1199,74; [M+H]⁺ 1177,85; [М-Вос+2Н]⁺ 1077,68.

Соединение Н: (S,E)-N-(4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S.E.)-6-(4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамата согласно общей методике 10.

C₅₄H₈₀N₁₀O₁₁S расчт. для m/z [M+H]⁺ 1077,63; найдено [M+H]⁺ 1077,68.

Пример 9

Соединение I: (S,E)-N-((4-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенил)сульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутананилидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение I-1: трет-бутил ((S)-1-(((S)-1-(((S,E)-6-(4-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)амино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил)(метил)карбамат

Данное соединение получали согласно общей методике 9 из трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-6-(4-((5)-2-((5)-2-амино-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамата (Соединение Н-2) и MT-NHS.

m/z расчт. для C₆₂H₉₄N₁₀O₁₆S=1266,66. Найдено [M+H]⁺=1267,87 [M+Na]⁺=1289,86, [М-Вос+2Н]⁺=1167,82. R_f=0,49 (10% (5% AcOH/MeOH)/CH₂Cl₂).

Соединение I: (S,E)-N-(4-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали согласно общей методике 10 из трет-бутил ((S)-1-(((S)-1-(((S,E)-6-(4-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил1-6-оксобутан-2-ил)амино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил)(метил)карбамата (Соединение 1-1).

m/z расчт. для C₅₇H₈₆N₁₀O₁₄S=1166,60. Найдено [M+H]⁺=1167,67, [(M+2H)/2]²⁺=584,57.

Пример 10

Соединение J: (S,E)-N-(4-1-(1-((R)-2-((R)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)циклопропил)бензилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение J-1a: 4-(тритилтиометил)бензонитрил

Тритилмеркаптан (1,48 г, 5,36 ммоль, 1,05 экв.) в ТГФ (5 мл) добавляли по каплям к перемешиваемой суспензии гидрида натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 214 мг, 5,36 ммоль, 1,05 экв.) в ТГФ (5 мл) в атмосфере N₂ при 0°C. После 15 мин, 4-(бромметил)бензонитрил (1,00 г, 5,10 ммоль, 1,0 экв.) в ТГФ (5 мл) добавляли и реакции позволили нагреться до к.т. После 1 ч, ТСХ показала полную конверсию исходного вещества. Реакцию гасили добавлением насыщенного водного раствора хлорида аммония, и потом некоторого количества H₂O. Смесь экстрагировали три раза диэтиловым эфиром, промывали водным насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия, и упаривали до вязкого желтого масла. Очистка с помощью флэш-хроматографии привела к указанному соединению (1,76 г, 88%) в виде светлого белого порошка.

¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,52 (д, J=8,2 Гц, 2Н), 7,47 (д, J=7,1 Гц, 6Н), 7,33 (т, J=7,5 Гц, 6Н), 7,26 (т, J=7,2 Гц, 3H), 7,19 (д, J=8,2 Гц, 2Н), 3,40 (с, 2Н). m/z расчт. для C₂₇H₂₁NS=391,14. Найдено [M+Na]⁺=414,13. R_f=0,32 (10% EtOAc/Гекс).

Соединение J-1b: 1-(4-(тритилтиометил)фенил)циклопропанамин

4-(тритилтиометил)бензонитрил (1,47 г, 3,75 ммоль, 1,0 экв.) растворили в 40 мл ТГФ, в атмосфере N₂, после чего охладили до -78°C. К этому раствору добавляли Ti(O-iPr)₄ (1,21 мл, 4,13 ммоль, 1,1 экв.), и затем этилмагний бромид добавляли по каплям (3 М, 2,75 мл, 8,26 ммоль, 2,2 экв.) в течение 5 мин. Баню с сухим льдом убрали, позволяя раствору нагреться до к.т. После 45 мин при к.т., BF₃*Et₂O (0,93 мл, 7,51 ммоль, 2,0 экв.) добавляли к очень темной реакционной смеси. После перемешивания дополнительных 2,5 ч, реакцию гасили 5 мл 2 М HCl, с последующим доведением pH до сильно основного используя около 15 мл 2 М NaOH. Некоторое количество воды добавляли к смеси, и затем экстрагировали три раза 75 мл EtOAc, промывали один раз дистиллированной водой H₂O, один раз водным насыщенным раствором хлорида натрия, высушивали над сульфатом натрия, и упаривали до светлого масла. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии, получая указанное соединение (680 мг, 36%) в виде светлого масла.

¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,49 (д, J=7,8 Гц, 6Н), 7,33 (т, J=1,1 Гц, 6Н), 7,26 (т, J=7,2 Гц, 3H), 7,20 (д, J=8,2 Гц, 2Н), 7,11 (д, J=8,2 Гц, 2Н), 3,32 (с, 2Н), 1,06 (дд, J=7,9, 5,0 Гц, 2Н), 0,95 (дд, J=7,9, 4,7 Гц, 2Н). m/z расчт. для C₂₉H₂₇NS=421,19. Найдено [M+H]⁺=422,19. R_f=0,21 (50% EtOAc/Гекс).

Соединение J-1c: 2,2,2-трифтор-N-1-(1-(4-(тритилтиометил)фенил)циклопропил)ацетамид

К перемешиваемому раствору 1-(4-(тритилтиометил)фенил)циклопропанамина (680 мг, 1,61 ммоль, 1,0 экв.) в CH₂Cl₂ добавляли трифторуксусный ангидрид (0,448 мл, 3,22 ммоль, 2,0 экв.) и триэтиламин (0,45 мл, 3,22 ммоль, 2,0 экв.). После двух часов, ТСХ и ВЭЖХ показали полную конверсию исходного вещества. Реакцию останавливали добавлением 3 мл NaHCO₃, после чего добавляли некоторое количество дистиллированной воды H₂O, и смесь экстрагировали три раза CH₂Cl₂. Объединенные органические фазы промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивали над сульфатом натрия, и упаривали в желтую пену, получая указанное соединение (715 мг, 86%) достаточно чистым для следующей стадии.

¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,48 (д, J=6,7 Гц, 6Н), 7,32 (т, J=7,6 Гц, 6Н), 7,25 (т, J=7,2 Гц, 3H), 7,19 (д, J=8,2 Гц, 2Н), 7,10 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 6,83 (с, 1H), 3,31 (с, 2Н), 1,40-1,24 (м, 4Н). m/z расчт. для C₃₁H₂₆F₃NOS=517,17. Найдено [M+Na]⁺=540,25. R_f=0,71 (50% EtOAc/Гекс).

Соединение J-1d: 2,2,2-трифтор-N-(1-(4-(меркаптометил)фенил)циклопропил)ацетамид

2,2,2-трифтор-N-(1-(4-(тритилтиометил)фенил)циклопропил)ацетамид (715 мг, 1,38 ммоль, 1,0 экв.) в 5 мл CH₂Cl₂ обрабатывали 2,5 мл ТФУ. После 1 мин, добавляли TIPSH (0,42 мл, 2,1 ммоль, 1,5 экв.), что вызвало исчезновение желтого цвета. После 30 мин, ТСХ показало окончание реакции. Смесь упаривали, и затем упарили один раз с CH₂Cl₂ и дважды с толуолом. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии получая указанное соединение (261 мг, 69%) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 15 7,35-7,23 (м, 4Н), 6,87 (с, 1H), 3,74 (д, J=7,6 Гц, 2Н), 1,77 (т, J=7,6 Гц, 1Н), 1,36 (с, 4Н). R_f=0,47 (20% EtOAc/Гекс).

Соединение J-1e: 2,2,2-трифтор-N-(1-(4-(сульфамоилметил)фенил)циклопропил)ацетамид

К перемешиваемому раствору 2,2,2-трифтор-N-1-(1-(4-(меркаптометил)фенил)циклопропил)ацетамида (220 мг, 0,799 ммоль, 1,0 экв.) в ацетонитриле добавляли дистиллированную H₂O (0,029 мл, 1,6 ммоль, 2,0 экв.), тетрабутиламмоний хлорид (110 мг, 0,40 ммоль, 0,5 экв.), и затем N-хлорсукцинамид (320 мг, 2,40 ммоль, 3,0 экв.). После 20 минут, на ТСХ не было обнаружено исходного соединения. После 90 мин, добавили концентрированный NH₄OH (0,18 мл, 3,2 ммоль, 4,0 экв.). После 10 минут, добавили 1 мл NH₄CI, и смесь экстрагировали три раза EtOAc. Объединенные органические фазы промывали дважды дистиллированной водой H₂O, один раз насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивали над сульфатом натрия, и упаривали в светлое масло. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии, получая указанное соединение (192 мг, 74%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,21 (с, 1H), 7,31 (д, J=8,2 Гц, 2Н), 7,16 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 6,85 (с, 2Н), 4,23 (с, 2Н), 1,27 (дт, J=6,1, 2,3 Гц, 4Н). R_f=0,26 (50% EtOAc/Гекс).

Соединение J-1:

Данное соединение получали согласно общей методике 3 из 2,2,2-трифтор-N-(1-(4-(сульфамоилметил)фенил)циклопропил)ацетамида (Соединение J-1e) и Boc-HTI-286-OH.

¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 8,54 (с, 1H), 7,78 (с, 1Н), 7,36 (д, J=7,1 Гц, 2Н), 7,31-7,23 (м, 2Н), 7,23-7,11 (м, 5Н), 6,33 (д, J=9,3 Гц, 1H), 6,28-6,14 (м, 1H), 5,35 (с, 1H), 4,97 (т, J=10,3 Гц, 1H), 4,84 (д, J=13,7 Гц, 1H), 4,70-4,56 (м, 1Н), 4,50 (д, J=8,9 Гц, 1H), 2,90 (с, 3H), 2.59 (с, 3H), 1,90 (с, 3H), 1,82-1,72 (м, 1H), 1,62-1,57 (м, 15 3H), 1,55 (с, 3H), 1,47 (с, 9Н), 1,45-1,34 (м, 4Н), 0,85 (д, J=6,5 Гц, 2Н), 0,82-0,67 (м, 12Н). m/z расчт. для C₄₄H₆₂F₃N₅O₈S=877,43. Найдено [M+Na]⁺=900,67. R_f=0,34 (50% (2% АсОН/EtOAc)/Гекс).

Соединение J-2:

Данное соединение получали согласно общей методике 5 в МеОН/H₂O из Соединения J-1.

¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,62-7,48 (м, 4Н), 7,35 (т, J=7,6 Гц, 2Н), 7,31-7,12 (м, 3H), 6,51 (д, J=6,8 Гц, 1Н), 6,36-6,18 (м, 1Н), 5,29 (с, 1H), 5,00-4,86 (м, 1H), 4,67 (с, 2Н), 4,60 (д, J=9,3 Гц, 1H), 3,07-2,73 (м, 6Н), 2,02-1,84 (м, 4Н), 1,68-1,51 (м, 6Н), 1,47 (с, 9Н), 1,45-1,38 (м, 2Н), 1,16 (с, 2Н), 0,89-0,81 (м, 12Н), 0,80 (д, J=6,7 Гц, 3H). m/z расчт. для C₄₂H₆₃N₅O₇S=781,44. Найдено [M+H]⁺=782,63.

Соединение J-169:

Данное соединение получали согласно общей методике 6 из Соединения J-2 и Fmoc-Val-Cit-OH.

m/z расчт. для C₆₈H₉₃N₉O₁₂S=1259,67. Найдено [M+H]⁺=1261,11, [M+Na]⁺=1283,06, [М-Вос+2Н]⁺=1160,97. R_f=0,54 (5% МеОН/(2% АсОН/EtOAc)).

Соединение J-4:

Данное соединение получали согласно общей методике 8 из Соединения J-3.

m/z расчт. для C₅₃H₈₃N₉O₁₀S=1037,60. Найдено [M+H]⁺=1038,90, [М-Вос+2Н]⁺=938,78. R_f~0,1 (25% МеОН/CH₂Cl₂).

Соединение J-5:

Данное соединение получали согласно общей методике 9 из Соединения J-4 и MC-NHS.

m/z расчт. для C₆₃H₉₄N₁₀O₁₃S=1230,67. Найдено [M+H]⁺=1232,11, [M+Na]⁺=1254,9, [М-Вос+2Н]⁺=1132,01. R_f=0,44 (10% (5% AcOH/MeOH)/CH₂Cl₂).

Соединение J: (S,E)-N-(4-(1-((R)-2-((R)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)циклопропил)бензилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали согласно общей методике 10 из Соединения J-5.

m/z расчт. для C₅₈H₈₆N₁₀O₁₁S=1130,62. Найдено [M+H]⁺=1131,95, [(M+2H)/2]²⁺=566,69.

Пример 11

Соединение K: (S,E)-N-(4-(1-((R)-2-((R)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)циклопропил)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение K-1a: 1-фенилциклопропанамин.

Данное соединение получали, как описано в Bertus, P., Szymoniak, J. J. Org. Chem., 2003, 68, 7133-7136 из бензонитрила (1,0 мл, 9,7 ммоль) получая 270 мг (21%).

¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,44-7,28 (м, 4Н), 7,27-7,15 (м, 1Н), 1,18-1,06 (м, 2Н), 1,07-0,95 (м, 2Н). R_f=0,28 (5% (5% NH₄OH/MeOH)/CH₂Cl₂).

Соединение K-1b: 2,2,2-трифтор-N-(1-фенилциклопропил)ацетамид

К перемешиваемому раствору 1-фенилциклопропанамина (270 мг, 2,03 ммоль, 1,0 экв.) в диоксане (5 мл), добавляли трифторуксусный ангидрид (0,310 мл, 2,23 ммоль, 1,1 экв.). После 5 мин, ТСХ показало полную конверсию исходного вещества. Смесь упаривали, затем один раз упарили вместе с CH₂Cl₂ и один раз с толуолом, получая указанное соединение (453 мг, 97%) в виде хлопьевидного белого порошка.

¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 7,47-7,15 (м, 5Н), 6,88 (с, 1Н), 1,65 (с, 4Н). m/z расчт. для C₁₁H₁₀F₃NO=229,07. Найдено [M+H]⁺=230,14. R_f=0,82 (5% (5% NH₄OH/MeOH)/CH₂Cl₂).

Соединение K-1c: 2,2,2-трифтор-N-(1-(4-сульфамоилфенил)циклопропил)ацетамид

К перемешиваемой хлорсульфоновой кислоте (0,78 мл, 11,8 ммоль, 6,0 экв.) при 0°C, порциями добавляли твердый 2,2,2-трифтор-N-1-(1-фенилциклопропил)ацетамид (450 мг, 1,96 ммоль, 1,0 экв.), поддерживая низкую температуру. После окончания прибавления, смесь нагревали до 50°C. После первых минут, выделение газа прекратилось, и смеси позволили охладиться. Смесь медленно добавляли в цилиндр со льдом, будучи внимательным к разбрызгиванию. Твердое вещество, которое осталось на льду, отфильтровали, это твердое вещество высушивали in vacuo и растворили в ТГФ (4 мл). Добавляли концентрированный NH₄OH (0,44 мл, 7,85 ммоль, 4,0 экв.), что окрасило раствор в зелено-черный цвет. После 2 мин, ТСХ показало полное расходование сульфонилхлоридного интермедиата. 2М HCl добавляли, пока цвет не исчез, после чего смесь экстрагировали три раза EtOAc, промывали один раз насыщенным раствором NaHCO₃, один раз насыщенным водным раствором хлорида натрия, высушивали над сульфатом натрия, и упаривали до хлопьевидного твердого вещества. Сырой остаток очищали с помощью флэш-хроматографии, получая указанное соединение (235 мг, 39%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,28 (с, 1H), 6,76 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 7,32 (д, J=8,1 Гц, 2Н), 7,31 (с, 2Н), 1,42-1,35 (м, 2Н), 1,35-1,27 (м, 2Н). m/z расчт. для C₁₁H₁₁F₃N₂O₃S=308,04. Найдено [M+H]⁺=309,07. R_f=0,27 (50% EtOAc/Гекс).

Соединение K-1d: трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-2,5-диметил-6-оксо-6-(4-(1-(2,2,2-трифторацетамидо)циклопропил)фенилсульфонамидо)гекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамат

Данное соединение получали согласно общей методике 3 из 2,2,2-трифтор-N-(1-(4-сульфамоилфенил)циклопропил)ацетамида (Соединение K-1с) и Boc-HTI-286-OH.

¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-c/) δ 8,51 (с, 1Н), 8,08 (д, J=8,6 Гц, 2Н), 7,42-7,32 (м, 2Н), 7,32-7,23 (м, 2Н), 7,23-7,10 (м, 3H), 6,46 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 6,17-6,8 (м, 1Н), 5,29 (с, 1Н), 4,97-4,76 (м, 1H), 4,56 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 2,90 (д, J=10,4 Гц, 6Н), 2,01-1,79 (м, 4Н), 1,62 (с, 3H), 1,53 (с, 3H), 1,49 (с, 4Н), 1,46 (с, 9Н), 0,86 (т, J=6,9 Гц, 3H), 0,81 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,77 (с, 9Н). m/z расчт. для C₄₃H₆₀F₃N₅O₈S=863,41. Найдено [M+H]⁺=864,56, [M+Na]⁺=886,52, [М-Вос+2Н]⁺=764,44. R_f=0,34 (50% (2% АсОН/EtOAc)/Гекс).

Соединение K-1e: трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-6-(4-(1-аминоциклопропил)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамат

Данное соединение получали согласно общей методике 5 в диоксане из соединения трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-2,5-диметил-6-оксо-6-(4-(1-(2,2,2-трифторацетамидо)циклопропил)фенилсульфонамидо)гекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамата.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,97 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 7,52 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 7,51-7,43 (м, 2Н), 7,32 (т, J=7,5 Гц, 2Н), 7,20 (т, J=8,4 Гц, 1Н), 6,55 (д, J=9,0 Гц, 1H), 5,17 (с, 1H), 5,03-4,94 (м, 1Н), 4,70 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 2,94 (с, 3H), 2,88 (с, 3H), 1,94-1,89 (м, 1Н), 1,80 (с, 3H), 1,53 (с, 3H), 1,51 (с, 3H), 1,43 (с, 9Н), 1,40-1,37 (м, 2Н), 1,36-1,32 (м, 2Н), 0,87 (д, J=6,0 Гц, 12Н), 0,82-0,76 (м, 3H). m/z расчт. для C₄₁H₆₁N₅O₇S=767,43. Найдено [M+H]⁺=768,51 [М-Вос+2Н]⁺=668,38. R_f=0,32 (10% EtOAc/Гекс).

Соединение К-1:

Данное соединение получали согласно общей методике 6 из трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-6-(4-(1-аминоциклопропил)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамата и Fmoc-Val-Cit-OH.

m/z расчт. для C₆₇H₉₁N₉O₁₂S=1245,65. Найдено [M+H]⁺=1246,89, [M+Na]⁺=1268,88, [М-Вос+2Н]⁺=1146,82. R_f=0,52 (5% МеОН/(2% АсОН/EtOAc)).

Соединение K-2: трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-6-(4-(1-((R)-2-((R)-2-амино-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)циклопропил)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамат

Данное соединение получали согласно общей методике 8 из Соединения K-1.

m/z расчт. для C₅₂H₈₁N₉O₁₀S=1023,58. Найдено [M+H]⁺=1024,72, [М-Вос+2Н]⁺=924,66.

Соединение K-3: 1-((S)-1-(((S,E)-6-(4-(1-((R)-2-((R)-2-(6-(2,S-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-S-уреидопентанамидо)циклопропил)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-иламино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамат

Данное соединение получали согласно общей методике 9 из трет-бутил (S)-1-((S)-1-(((S,E)-6-(4-(1-((R)-2-((R)-2-амино-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)циклопропил)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил-амино)-3-метил-1-оксо-3-фенилбутан-2-ил(метил)карбамата и MC-NHS.

m/z расчт. для C₆₂H₉₂N₁₀O₁₃S=1216,66. Найдено [M+H]⁺=1217,89, [M+Na]⁺=1239,94, [М-Вос+2Н]⁺=1117,82. R_f=0,39 (10% (5% AcOH/MeOH)/CH₂Cl₂).

Соединение K: (S,E)-N-(4-(1-((R)-2-((R)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)циклопропил)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали согласно общей методике 10 из Соединения K-3. m/z расчт. для C₅₇H₈₄N₁₀O₁₁S=1116,60. Найдено [M+H]+=1117,77, [(M+2H)/2]²⁺=559,56.

Пример 12

Соединение KK: (S,E)-N-(4-(1-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)циклопропил)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение KK-1: (S,E)-N-(4-(1-((S)-2-((S)-2-амино-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентансшидо)циклопропил)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение синтезировали из Соединения K-2 согласно общей методике 10. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,97-7,90 (м, 2Н), 7,59-7,51 (м, 2Н), 7,47 (дд, J=8,5, 6,9 Гц, 2Н), 7,44-7,34 (м, 3H), 6,46 (дд, J=9,4, 1,7 Гц, 1H), 5,02 (т, J=10,0 Гц, 1H), 4,93 (с, 1Н), 4,43 (дд, J=8.6, 5,8 Гц, 1H), 4,35 (с, 1Н), 3,71 (д, J=5,7 Гц, 1H), 3,23-3,09 (м, 5Н), 2,51 (с, 3H), 2,22 (дт, J=13,4, 6,7 Гц, 1Н), 2,04 (кв, J=8.8, 7,8 Гц, 1H), 1,89-1,68 (м, 4Н), 1,58 (дкв, J=14,5, 8,7, 8,3 Гц, 2Н), 1,48 (с, 4Н), 1,36 (д, J=14,3 Гц, 5Н), 1,15-0,99 (м, 16Н), 0,90 (дд, J=6.6, 3,4 Гц, 6Н). m/z расчт. для C₄₇H₇₃N₉O₈S=923,53. Найдено [M+H]⁺=924,8.

Соединение KK: (S,E)-N-(4-(1-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-топропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)циклопропил)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение синтезировали из KK-1 и MT-NHS согласно общей методике 9 перед очисткой с помощью препаративой ВЭЖХ-МС. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,99-7,91 (м, 2Н), 7,60-7,52 (м, 2Н), 7,48 (т, 6,7 Гц, 2Н), 7,44-7,31 (м, 3H), 6,84 (с, 2Н), 6,45 (дд, J=9,3, 1,7 Гц, 1H), 5,00 (т, J=10,0 Гц, 1H), 4,94 (с, 1Н), 4,35 (д, J=5,3 Гц, 2Н), 4,21 (д, J=6,9 Гц, 1H), 3,81-3,67 (м, 4Н), 3,67-3,54 (м, 10Н), 3,25-3,05 (м, 5Н), 2,64-2,47 (м, 5Н), 2,20-1,99 (м, 2Н), 1,85 (д, J=1,3 Гц, 4Н), 1,73 (дкв, J=9,5, 4,5 Гц, 1Н), 1,66-1,28 (м, 11H), 1,12-0,94 (м, 16Н), 0,90 (дд, J=6.6, 4,9 Гц, 6Н). m/z расчт. для C₆₀H₉₀N₁₀O₁₄S=1206,64. Найдено [M+H]⁺=1207,9.

Пример 13

Соединение L: (R)-N-((2Sr3S)-1-(((S,E)-6-(4-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3-метил-1-оксопентан-2-ил)-1-метилпиперидине-2-карбоксамид

Соединение L-1: (S,E)-этил 4-(трет-бутоксикарбонил(метил)амино)-2,5-диметилгекс-2-еноат, Boc-ICD-OEt

Данное соединение синтезировали из (S,E)-этил-2,5-диметил-4-(метиламино)гекс-2-ената (синтезировано согласно США 7579323 В1) и Вос-Изолейцина-ОН и используя общую методику 6. ЯМР предоставляемый для образца, обработан ТФУ для снятия Boc группы и разрешения от ротамеров в спектре. ¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 6,68 (дд, J=9,5, 1,8 Гц, 1H), 5,33 (с, OH), 4,97 (т, J=9,9 Гц, 1Н), 4,36 (д, J=4,1 Гц, 1Н), 4,25 15 (кв, J=7,1 Гц, 2Н), 3,56 (с, 1H), 2,96 (с, 3H), 2,07-1,83 (м, 5Н), 1,53 (с, 1H), 1,34 (т, J=7,1 Гц, 3H), 1,12 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,00-0,83 (м, 9Н).

Соединение L-2: (S,E)-4-((2S,3R)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-N,3-диметилпентанамидо)-2,5-диметилгекс-2-еновая кислота

Данное соединение получено из Boc-ICD-OEt используя общую методику 11. ¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 6,79 (дд, J=9,3, 1,7 Гц, 1H), 5,28 (д, J=9,7 Гц, 1Н), 5,11 (дд, J=10,6, 9,2 Гц, 1H), 4,46-4,34 (м, 1Н), 3,01 (с, 3H), 1,94 (с, J=1,5 Гц, 4Н), 1,77-1,54 (м, 2Н), 1,44 (с, 9Н), 1,14 (дт, J=15,8, 8,0 Гц, 1H), 0,97-0,81 (м, 12Н).

Соединение L-3: (S,E)-4-((2S,3S)-N,3-диметил-2-((R)-1-метилпиперидине-2-карбоксамидо)пентанамидо)-2,5-диметилгекс-2-еновая кислота

Данное соединение синтезировали из Соединения L-1 согласно общей методике 10 и приведения в контакт высвобожденного амина с D-(N-метил)-пипеколовой кислотой используя общую методику 6. В конце концов, C-концевой карбоксилат высвобожден с использованием общей методики 11 перед очисткой с помощью препаративной ВЭЖХ. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 6,77 (дд, J=9,5, 1,4 Гц, 1H), 5,04 (т, J=10,1 Гц, 1H), 4,65-4,56 (м, 1H), 3,79-3,69 (м, 1H), 3,54-3,45 (м, 1H), 3,12 (с, 3H), 3,10-3,06 (м, 1Н), 2,76 (с, 3H), 2,21-2,10 (м, 1H), 2,08-2,00 (м, 1H), 2,01-1,92 (м, 2Н), 1,90 (д, J=1,5 Гц, 3H), 1,88-1,72 (м, 3H), 1,69-1,52 (м, 2Н), 1,31-1,16 (м, 1H), 0,98-0,86 (м, 12Н). C₂₂H₃₉N₃O₄ расчт. для m/z=409,29 найдено [M+H]⁺=410,91.

Соединение L-4: (S,E)-4-((2S,3S)-2-амино-N,3-диметилпентанамидо)-2,5-диметил-N-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенилсульфонил)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из Соединения L-2 согласно общей методике 11, с последующим получением N-ацил сульфонамида с 2,2,2-трифтор-N-(4-сульфамоилфенил)ацетамидом согласно общей методике 2, с последующей общей методикой 10. ¹H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d₆) δ 8,00-7,85 (м, 2Н), 7,76 (d, J=8,8 Гц, 2Н), 6,39 (дд, J=9,2, 1,8 Гц, 1Н), 4,45-4,30 (м, 1H), 4,14 (д, J=4,1 Гц, 1Н), 2,82 (с, 3H), 2,08-1,91 (м, 1H), 1,67 (с, J=1,5 Гц, 3H), 1,41-1,35 (м, J=13,3, 7,6, 3,2 Гц, 1Н), 1,10-0,88 (м, 4Н), 0,77 (ддд, J=17,2, 9,0, 5,4 Гц, 9Н).

Соединение L-S: (R)-N-((2S,3S)-1-(((S,E)-2,5-диметил-6-оксо-6-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенилсульфонамидо)гекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3-метил-1-оксопентан-2-ил)-1-метилпиперидин-2-карбоксамид

Данное соединение получали из Соединения L-4 и N-метил-D-пипеколовой кислоты согласно общей методике 6. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 7,97 (д, 2Н), 6,77 (д, 2Н), 7,67 (д, J=8,6 Гц, OH), 6,60 (д, J=9,2 Гц, 1Н), 4,96 (т, J=9,9 Гц, 1Н), 4,61 (д, J=8,8 Гц, 1H), 3,75 (гепт, J=6,6 Гц, 1Н), 3,19-3,10 (м, 1H), 3,06 (с, 3H), 2,45 (с, 2Н), 2,39 (с, 3H), 2,01-1,88 (м, 3H), 1,84 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,78-1,54 (м, 5Н), 1,25-1,13 (м, 1H), 0,92 (с, 1Н), 0,91-0,86 (м, 8Н), 0,83 (д, J=6,6 Гц, 3H). C₃₀H₄₄F₃N₅O₆S расчт. для m/z=659,30 найдено [M+H]⁺=660,88.

Соединение L-6: (R)-N-((2S,3S)-1-(((S,E)-6-(4-аминофенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3-метил-1-оксопентан-2-ил)-1-метилпиперидин-2-карбоксамид

Данное соединение получали из Соединения L-5 согласно общей методике 5. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 6,72 (д, 2Н), 6,69 (д, 2Н), 6,42 (дд, J=9,2, 1,7 Гц, 1H), 4,61-4,55 (м, 1Н), 3,72 (дд, J=12,2, 3,2 Гц, 1Н), 3,52-3,44 (м, 1Н), 3,37 (с, 3H), 3,12 (с, 3H), 3,09-3,03 (м, 1Н), 2,71 (с, 3H), 2,20-1,92 (м, 3H), 1,84 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,80-1,72 (м, 2Н), 1,67-1,53 (м, 2Н), 1,29-1,16 (м, 1H), 0,96-0,85 (м, 12Н). C₂₈H₄₅N₅O₅S расчт. для m/z=563,31 найдено [M+H]⁺=564,93.

Соединение L: (R)-N-((2S,3S)-1-(((S,E)-6-(4-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3-метил-1-оксопентан-2-ил)-1-метилпиперидин-2-карбоксамид

Данное соединение получали из Соединения L-6 и MT-Val-Cit-OH согласно общей методике 7. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,00 (д, 2Н), 7,88 (д, 10 2Н), 6,83 (с, 2Н), 6,46 (дд, J=9,1, 1,6 Гц, 1H), 4,57 (д, J=8,3 Гц, 1Н), 4,55-4,52 (м, 1H), 4,22 (д, J=6,9 Гц, 1H), 3,80-3,73 (м, 3H), 3,73-3,66 (м, 2Н), 3,66-3,60 (м, 2Н), 3,58 (д, J=2,2 Гц, 8Н), 3,52-3,43 (м, 1Н), 3,26-3,19 (м, 1H), 3,17-3,13 (м, 2Н), 3,12 (с, 4Н), 2,71 (с, 3H), 2,61-2,55 (м, 2Н), 2,21-2,01 (м, 3H), 2,00-1,88 (м, 3H), 1,83 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,81-1,71 (м, 4Н), 1,68-1,52 (м, 4Н), 1,29-1,14 (м, 1Н), 1,01 (т, J=6,8 Гц, 6Н), 0,94-0,86 (м, 12Н). C₅₂H₈₂N₁₀O₁₄S расчт. для m/z=1102,57 найдено [M+H]⁺=1104,22

Пример 14

Соединение М: (R)-N-((S)-1-(((S,E)-6-(4-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)-1-метилпиперидин-2-карбоксамид

Соединение M-1: (S,E)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((R)-1-метилпиперидин-2-карбоксамидо)бутанамидо)гекс-2-еновая кислота

Данное соединение получали из (S,E)-этил 4-((S)-2-амино-N,3,3-триметилбутанамидо)-2,5-диметилгекс-2-еноата (синтезировано согласно US 7,579,323 В1) и D-N-метил-пипеколовой кислоты согласно общим методикам 6 и 11. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 6,60 (дд, J=9,4, 1,7 Гц, 1Н), 5,04 (т, J=10,0 Гц, 1H), 4,77 (с, 1Н), 4,62 (с, 1H), 3,30-3,23 (м, 1Н), 3,10 (с, 3H), 2,68 (т, J=12,2 Гц, 1H), 2,52 (с, 3H), 2,04 (с, 1H), 2,02-1,93 (м, 2Н), 1,90 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,88-1,79 (м, 1H), 1,77-1,62 (м, 2Н), 1,56-1,43 (м, 1H), 1,04 (с, 9Н), 0,92 (д, J=6,6 Гц, 3H), 0,85 (д, J=6,6 Гц, 3H). C₂₂H₃₉N₃O₄ расчт. для m/z=409,29 найдено [M+H]⁺=410,92.

Соединение М-2: (R)-N-((S)-1-(((S,E)-2,5-диметил-6-оксо-6-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенилсульфонамидо)гекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)-1-метилпиперидин-2-карбоксамид

Данное соединение получали из Соединения М-1 и 2,2,2-трифтор-N-(4-сульфамоилфенил)ацетамида используя общую методику 3. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,08 (д, J=8,8 Гц, 2Н), 7,92 (д, J=8,9 Гц, 2Н), 6,47 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 5,01-4,92 (м, 1H), 4,70 (с, 1H), 3,82 (д, J=12,3 Гц, 1Н), 3,53-3,43 (м, 1Н), 3,13 (с, 3H), 2,72 (с, 3H), 2,22-1,90 (м, 4Н), 1,85 (д, J=1,4 Гц, 5Н), 1,60 (м, 1H), 1,40-1,22 (м, 4Н), 1,03 (с, 9Н), 0,89 (дд, J=17,1, 6,5 Гц, 6Н). C₃₀H₄₄F₃N₅O₆S расчт. для m/z=659,76 найдено [M+H]⁺=660,95.

Соединение М-3: (R)-N-((S)-1-(((S,Е)-6-(4-аминофенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)-1-метилпиперидин-2-карбоксамид

Данное соединение получали из Соединения М-2 согласно общей методике 5. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 7,76-7,66 (м, 2Н), 6,74-6,64 (м, 2Н), 6,42 (дд, J=8,9, 1,7 Гц, 1Н), 4,94 (м, 1H), 4,70 (с, 1H), 3,82 (дд, J=12,2, 3,1 Гц, 1H), 3,54-3,42 (м, 1H), 3,13 (с, 4Н), 2,70 (с, 3H), 2,16 (д, J=14,6 Гц, 1Н), 2,11-2,01 (м, 1Н), 1,96 (д, J=12,9 Гц, 2Н), 1,89-1,51 (м, 6Н), 1,03 (с, 9Н), 0,89 (дд, J=16,3, 6,5 Гц, 6Н). C₂₈H₄₅N₅O₅S расчт. для m/z=563,31 найдено [M+H]⁺=564,93.

Соединение М: (R)-N-((S)-1-(((S,E)-6-(4-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)-1-метилпиперидин-2-карбоксамид

Данное соединение получали из Соединения М-3 и MT-Val-Cit-OH согласно общей методике 7. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,00 (д, J=8,9 Гц, 2Н), 7,88 (д, J=8,7 Гц, 2Н), 6,83 (с, 2Н), 6,46 (д, J=9,1 Гц, 1H), 4,96-4,91 (м, 1Н), 4,72-4,68 (м, 1Н), 4,58-4,51 (м, 1H), 4,22 (т, J=7,2 Гц, 1Н), 3,83-3,73 (м, 3H), 3,72-3,67 (м, 2Н), 3,65-3,61 (м, 2Н), 3,61-3,55 (м, 8Н), 3,52-3,46 (м, 1H), 3,27-3,19 (м, 1H), 3,13 (с, 3H), 3,09-3,03 (м, 1Н), 2,69 (с, 3H), 2,58 (т, J=6,0 Гц, 2Н), 2,19-2,01 (м, 4Н), 2,00-1,90 (м, 3H), 1,84 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,83-1,72 (м, 3H), 1,61 (д, J=9,0 Гц, 3H), 1,03 (с, 11Н), 1,00 (д, J=6,8 Гц, 4Н), 0,91 (д, J=6,5 Гц, 3H), 0,87 (д, J=6,6 Гц, 3H). C₅₂H₈₂N₁₀O₁₄S расчт. для m/z=1102,57 найдено [M+H]⁺=1104,30.

Пример 15

Соединение N: (R)-N-((S)-1-(((S,Е)-6-(4-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)-1-изопропилпиперидин-2-карбоксамид

Соединение N-1: (R)-N-((S)-1-(((S,E)-2,5-диметил-6-оксо-6-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенилсульфонамидо)гекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)-1-изопропилпиперидин-2-карбоксамид

Данное соединение получали из (S,E)-4-((S)-2-((R)-1-изопропилпиперидин-2-карбоксамидо)-N,3,3-триметилбутанамидо)-2,5-диметилгекс-2-еновой кислоты (получена согласно US 2012/0309938 А1) и 2,2,2-трифтор-N-(4-сульфамоилфенил)ацетамида используя общую методику 3. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8,00 (д, J=8,8 Гц, 2Н), 7,83 (д, J=8,8 Гц, 2Н), 6,56 (d, J=9,1 Гц, 1Н), 4,69 (с, 1H), 4,12 (дд, J=11,6, 3,3 Гц, 1Н), 3,95 (гепт, J=6,2 Гц, 1Н), 3,54-3,41 (м, 2Н), 3,37 (с, 3H), 3,08 (с, 3H), 3,04-2,89 (м, 1Н), 2,13 (дд, J=17,2, 6,4 Гц, 1H), 2,00-1,88 (м, 4Н), 1,84 (д, J=1,5 Гц, 4Н), 1,71-1,52 (м, 1H), 1,29 (дд, J=28,0, 6,7 Гц, 8Н), 1,17 (д, J=6,1 Гц, 6Н), 1,01 (с, 10Н), 0,86 (дд, J=28,2, 6,5 Гц, 7Н). C₃₂H₄₈F₃N₅O₆S расчт. для m/z=687,33 найдено [M+H]⁺=688,9.

Соединение N-2: (R)-N-((S)-1-(((S,E)-6-(4-аминофенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)-1-изопропилпиперидине-2-карбоксамид

Данное соединение получали из Соединения N-1 согласно общей методике 5. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,75-7,62 (м, 2Н), 6,74-6,62 (м, 2Н), 6,59-6,35 (м, 1H), 4,70 (с, 1H), 4,09 (дд, J=11,7, 3,3 Гц, 1Н), 3,52-3,38 (м, 2Н), 3,10 (с, 3H), 3,02-2,87 (м, 1H), 2,12 (д, J=11,9 Гц, 1Н), 2,06-1,73 (м, 11Н), 1,70-1,50 (м, 1Н), 1,28 (дд, J=28,8, 6,7 Гц, 6Н), 1,02 (с, 9Н), 0,87 (дд, J=27,7, 6,5 Гц, 6Н). C₃₀H₄₉N₅O₅S расчт. для m/z=591,35 найдено [M+H]+=593,0.

Соединение N-3: трет-бутил (S)-1-((S)-1-(4-(N-((S,E)-4-((S)-2-((R)-1-изопропилпиперидин-2-карбоксамидо)-N,3,3-триметилбутанамидо)-2,5-диметилгекс-2-еноил)сульфамоил)фениламино)-1-оксо-5-уреидопентан-2-иламино)-3-метил-1-оксобутан-2-илкарбамат

Данное соединение синтезировали из Соединения N-2 и Boc-Val-Cit-OH согласно общей методике 7. C₄₆P₇₇N₉O₁₀S расчт. для m/z=947,55 найдено [M+H]⁺=949,2.

Соединение N: (R)-N-((S)-1-(((S,E)-6-(4-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонамидо)-2,5-диметил-6-оксогекс-4-ен-3-ил)(метил)амино)-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)-1-изопропилпиперидин-2-карбоксамид

Данное соединение получали из Соединения N-3 и MT-NHS согласно общей методике 10 и 9 и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ-МС.

C₅₄H₈₆N₁₀O₁₄S расчт. для m/z=1130,60 найдено [M+H]⁺=1132,5.

Пример 16

Соединение O: (R)-N-(4-(N-((2Rr3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5R)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)сульфамоил)фенил)-2-((S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12-оксо-3,6,9-триокса-13-азапентадеканамидо)-5-уреидопентанамид.

Соединение O-1: трет-бутил (S)-1-(((3R,4S,5R)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенилсульфонамидо)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)(метил)амино)-3-метил-1-оксобутан-2-илкарбамат

Данное соединение синтезировали из комерчески доступного Boc-Val-Dip-Dap-OH (0,08 г, 0,14 ммоль) и 2,2,2-трифтор-N-(4-сульфамоилфенил)ацетамид (0,045 г, 1,2 экв.) используя дициклогексилкарбоилиимид (0,0347 г, 1,2 экв.), N,N-диметил-4-аминопиридин (0,0205 г, 1,2 экв.) в CH₂Cl₂/ДМФ (2 мл, 10:1, об./об.) согласно общей методике 3. Данное соединение выделяли с помощью хроматографии на силикагеле, используя 10-45% EtOAc (содержащий 2% АсОН) в гексанах более 10 объемов колонки. (0,112 г, 98%). C₃₇H₅₈F₃N₅O₁₀S расчт. для m/z=821,39 найдено [M+H]⁺=823,04.

Соединение O-2: (S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N-((3R,4S,5R)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенилсульфонамидо)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-N,3-диметилбутанамид.

Данное соединение получали обработкой Соединения O-1 (0,111 мг, 0,133 ммоль) трифторуксусной кислотой, согласно общей методике 10, с последующей активацией N,N-диметилвалина (0,029 г, 0,20 ммоль, 1,5 экв.) HATU (0,076 г, 1,5 экв.) и N,N-диизопропилэтиламина (0,093 мл, 4 экв.) в CH₂Cl₂ и введением ТФА соли образованной ранее согласно общей методике 6. Сырую реакцию упаривали досуха, растворили в минимальном количестве CH₂Cl₂ и очистили с помощью хроматографии на силикагеле (3-20% МеОН/CH₂Cl₂ более 10 объемов колонки, 25 г колонка) получив указанное соединение в виде слабоокрашенного масла (0,108 г, 97%) C₃₉H₆₃F₃N₆O₉S расчт. для m/z=848,43 найдено [M+H]⁺ 850,11.

Соединение O-3: (S)-N-((3R,4S,5R)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(4-аминофенилсульфонамидо)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамид.

Данное соединение получали согласно общей методике 5 из Соединения 0-2 (0,114 г, 0,13 ммоль) с гидроксидом лития (0,671 мл, 1М, 5 экв.) в диоксане (5,0 мл) при комнатной температуре на протяжении 16 ч. Раствор доводили до pH 7 насыщенным раствором NH₄Cl, упаривали при пониженном давлении, получая молокообразную суспензию, и экстрагировали несколько раз (3×20 мл, EtOAc). Органические фазы объединяли, высушивали над MgSO₄, фильтровали и использовали без дополнительной очистки (0,097 г, 96%). C₃₇H₆₄N₆O₈S расчт. m/z=752,45 найдено [M+H]⁺ 754,16.

Соединение О: (R)-N-(4-(N-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5R)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)сульфамоил)фенил)-2-((S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12-оксо-3,6,9-триокса-13-азапентандеканамидо)-5-уреидопентанамид.

Данное соединение синтезировали с использованием общей методики 7 из МТ-VA1-CIT-OH (0,0394 г, 0,071 ммоль, 2 экв.) и Соединения O-3 (0,030 г, 0,035 ммоль) с EDCI (0,0115 г, 2,1 экв.), гидроксибензотриазола (0,0101 г, 2,1 экв.) и хлорида меди (II) (0,010 г, 2,1 экв.) в смеси дихлорметан/ДМФ (7:1 об./об.).. После завершения реакции, реакционную смесь коцентрировали и обрабатывали метанольным раствором ТМЕДА до того как ее сконцнетрированной in vacuo. Голубой остаток растворяли в метаноле и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ, получая указанное соединение (4,65 мг) в виде рыхлого белого гигроскопичного твердого вещества, после лиофилизации содержащих продукт фракций. C₆₁H₁₀₁N₁₁O₁₇S расчт. для m/z=1291,71 найдено [M+H]⁺ 1292,89.

Пример 17

Соединение P: (S)-N-(4-((N-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5R)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)сульфамоил)метил)фенил)-2-((S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12-оксо-3,6,9-триокса-13-азапентадеканамидо)-5-уреидопентанамид.

Соединение P-1: трет-бутил (S)-1-(((3R,4S,5R)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенил)метилсульфонамидо)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)(метил)амино)-3-метил-1-оксобутан-2-илкарбамат.

Данное соединение получали из комерчески доступного Boc-Val-Dil-Dap-OH и 2,2,2-трифтор-N-(4-(сульфамоилметил)фенил)ацетамида через общую методику 3. C₃₈H₆₀F₃N₅O₁₀S расчт. для m/z=835,40 найдено [M+H]⁺=836,7.

Соединение Р-2: (S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N-((3R,4S,5R)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенил)метилсульфонамидо)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-N,3-диметилбутанамид

Данное соединение получали из Соединения Р-1 и N,N-диметилвалина согласно общей методике 6. C₄₀H₆₅F₃N₆O₉S расчт. для m/z=862,45 найдено [M+H]⁺=863,2.

Соединение Р-3: (S)-N-((3R,4S,5R)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-((4-аминофенил)метилсульфонамидо)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамид

Названное соединение получали из Соединения Р-2, следуя общей методике 5. C₃₈H₆₆N₆O₈S расчт. для m/z=766,47 найдено [M-C₇H₈O₂S+H]⁺=599,0 (Хинон метидная фрагментация и потеря 4-аминобензилсульфоната).

Соединение Р: (S)-N-(4-((N-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5R)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропаноил)сульфамоил)метил)фенил)-2-((S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12-оксо-3,6,9-триокса-13-азапентадеканамидо)-5-уреидопентанамид.

Данное соединение синтезировали, используя общую методику 5 из МТ-VA1-CIT-ОН и Соединения Р-3 и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ хроматографии. C₆₁H₁₀₁N₁₁O₁₇S расчт. для m/z=1305,73 найдено [M+H]⁺=1306,9.

Пример 18

Соединение Q: (S)-N-(4-(N-((S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5R)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноил)сульфамоил)фенил)-2-((S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12-оксо-3,6,9-триокса-13-азапентадеканамидо)-5-уреидопентанамид

Соединение Q-1: (S)-2-амино-3-фенил-N-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенилсульфонил)пропанамид

Получено из Вос-фенилаланина и 2,2,2-трифтор-N-(4-сульфамоилфенил)ацетамида согласно общим методикам 3 и 10. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 11,42 (с, 1H), 7,84 (д, J=8,7 Гц, 2Н), 7,73-7,64 (м, 1H), 7,69 (д, J=8,7 Гц, 2Н), 7,24-7,14 (м, 3H), 7,13-7,06 (м, 2Н), 3,65-3,60 (м, 1Н), 3,06 (дд, J=14,2, 5,1 Гц, 1H), 2,91 (дд, J=14,1, 7,1 Гц, 1H). C₁₇H₁₆F₃N₃O₄S расчт. для m/z=415,08 найдено [M+H]⁺=416,5.

Соединение Q-2: трет-бутил (S)-1-(((3R,4S,5R)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((S)-1-оксо-3-фенил-1-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенилсульфонамидо)пропан-2-иламино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)(метил)амино)-3-метил-1-оксобутан-2-илкарбамат.

Данное соединение синтезировали из комерчески доступного Boc-Val-Dip-Dap-ОН (0,07 г) и Соединения Q-1 используя общую методику 6. C₄₆H₆₇F₃N₆O₁₁S расчт. для m/z=968,45 найдено [M+Na]⁺=992,1.

Соединение Q-3: (S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N-((3R,4S,5R)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((S)-1-оксо-3-фенил-1-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенилсульфонамидо)пропан-2-иламино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-N,3-диметилбутанамид.

Данное соединение получали из Соединения Q-2 (110 мг) и N,N-диметил валина используя общие методики 10 и 6. C₄₈H₇₂F₃N₇O₁₀S расчт. для m/z - 995,50 найдено [M+H]⁺ 997,3.

Соединение Q-4: (S)-N-((3R,4S,5R)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-((S)-1-(4-аминофенилсульфонамидо)-1-оксо-3-фенилпропан-2-иламино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамид.

Данное соединение получали из Соединения Q-3 (100 мг) используя общую методику 5. C₄₆H₇₃N₇O₉S расчт. для m/z=899,52 найдено [M+H]⁺ 901,3.

Соединение Q: (S)-N-(4-(N-((S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5R)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноил)сульфамоил)фенил)-2-((S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12-оксо-3,6,9-триокса-13-азапентадеканамидо)-5-уреидопентанамид

Названное соединение получали из Соединения Q-4 (25 мг) и MT-Val-Cit-OH (63 мг) используя общую методику 7. C₇₀H₁₁₀N₁₂O₁₈S расчт. для m/z=1438,8 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1440,2, [(M+2H)/2]²⁺=720,5

Пример 19

Соединение R: (S)-N-(4-(N-((S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноил)сульфамоил)метилфенил)-2-((S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12-оксо-3,6,9-триокса-13-азапентадеканамидо)-5-уреидопентанамид

Соединение R-1: (S)-2-амино-3-фенил-N-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)бензилсульфонил)пропанамид

Получено из Вос-фенилаланина и 2,2,2-трифтор-N-(4-сульфамоилфенил)ацетамида согласно общим методикам 4 и 10 (S)-трет-бутил 1-оксо-3-фенил-1-(фенилметилсульфонамидо)пропан-2-илкарбамата. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 7,76-7,71 (м, 2Н), 7,58 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,36-7,21 (м, 8Н), 4,34 (д, J=13,1 Гц, 1H), 4,30 (д, J=13,1 Гц, 1H), 3,62 (дд, J=8,2, 4,6 Гц, 1H), 3,21-3,09 (м, 1Н), 2,89 (дд, J=14,3, 8,3 Гц, 1H). C₁₈H₁₈F₃N₃O₄S расчт. для m/z=429,10 найдено [M+H]⁺=430,7.

Соединение R-2: трет-бутил (S)-1-(((3R,4S,5R)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метилокси-2-метил-3-оксо-3-((S)-1-оксо-3-фенил-1-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенилметилсульфонамидо)пропан-2-иламино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)(метил)амино)-3-метил-1-оксобутан-2-илкарбамат.

Данное соединение получали из комерчески доступного Boc-Val-Dil-Dap-OH и Соединения R-1 с помощью следующей общей методики 6. C₄₇H₆₉F₃N₆O₁₁S расчт. для m/z=982,47 найдено [M+Na]⁺=1006,2.

Соединение R-3: (S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N-((3R,4S,5R)-3-метокси-1-((S)-2-((1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-((S)-1-оксо-3-фенил-1-(4-(2,2,2-трифторацетамидо)фенилметилсульфонамидо)пропан-2-иламино)пропил)пирролидин-1-ил)-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-N,3-диметилбутанамид.

Данное соединение получали из Соединения R-2 и N,N-диметилвалина согласно общим методикам 10 и 6. C₄₉H₇₄F₃N₇O₁₀S расчт. для m/z=1009,52 найдено [M+H]⁺=1011,.0.

Соединение R-4: (S)-N-((3R,4S,5R)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-((S)-1-(4-аминофенилметилсульфонамидо)-1-оксо-3-фенилпропан-2-иламино)-1-метокси-2-метил-3-оксопропил)пирролидин-1-ил)-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамид.

Соединение получали из Соединения R-3 согласно общей методике 5. C₄₇H₇₅N₇O₉S расчт. для m/z=913,53 найдено [M-C₇H₈O₂S+Na]+=768,1 (Хинон метидная фрагментация и потеря 4-аминобензилсульфоната).

Соединение R: (S)-N-(4-(N-((S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-(диметиламино)-3-метилбутанамидо)-N,3-диметилбутанамидо)-3-метокси-5-метилгептаноил)пирролидин-2-ил)-3-метокси-2-метилпропанамидо)-3-фенилпропаноил)сульфамоил)метилфенил)-2-((S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12-оксо-3,6,9-триокса-13-азапентадеканамидо)-5-уреидопентанамид

Соединение получали из Соединения R-4 и MT-Val-Cit-OH согласно общей методике 7, с последующей очисткой с помощью препаративной ВЭЖХ. m/z расчт. для C₇₁H₁₁₂N₁₂O₁₈S=1452,8 найдено [M+H⁺]⁺=1454,6.

Пример 20

Соединение S: (S,E)-N-(4-((14R,17R)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)-2,3-диметилфенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение S-1: N-(2,3-диметил-4-сульфамоилфенил)-2,2,2-трифторацетамид

Синтезировано из 2,3-диметиланилина согласно общей методике 1.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 11,25 (с, 1Н), 7,79 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 7,48 (с, 2Н), 7,29 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 2,55 (с, 3H), 2,14 (с, 3H).

Соединение S-2: (S,E)-N-(4-амино-2,3-диметилфенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Синтезировано из Boc-HTI-286-OH и Соединения S-1 используя общие методики 3, 5 и 10.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,75 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 7,55 (д, J=7,9 Гц, 2Н), 7,47 (т, J=7,7 Гц, 2Н), 7,37 (т, J=6,9 Гц, 1Н), 6,63 (д, J=8,8 Гц, 1H), 6,46 (д, J=9,7 Гц, 1H), 5,00 (т, J=10,0 Гц, 1Н), 4,93 (с, 1H), 4,32 (с, 1H), 3,17 (с, 3H), 2,54 (с, 3H), 2,49 (с, 3H), 2,09 (с, 3H), 2,08-2,02 (м, 1Н), 1,87 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,47 (с, 3H), 1,37 (с, 3H), 1,07 (с, 9Н), 0,92 (дд, J=6.8, 6,5 Гц, 6Н).

C₃₅H₅₃N₅O₅S расчт. m/z=655,38 найдено [M+H]⁺=656,4.

Соединение S: (S,E)-N-(4-((14R,17R)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)-2,3-диметилфенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Синтезировано из Соединения S-2 и MT-NHS согласно общей методике 9.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8,01 (дд, J=11,0, 8,2 Гц, 2Н), 7,60-7,51 (м, 2Н), 7,47 (дд, J=8,5, 6,8 Гц, 3H), 7,41-7,31 (м, 1Н), 6,83 (с, 2Н), 6,50 (дд, J=9,5, 1,8 Гц, 1Н), 5,01 (т, J=10,0 Гц, 1Н), 4,93 (т, J=4,1 Гц, 1H), 4,60 (м, 1H), 4,36 (с, 1Н), 4,30-4,17 (м, 1H), 3,80-3,67 (м, 4Н), 3,64 (тд, J=5,5, 1,2 Гц, 2Н), 3,60 (д, J=3,2 Гц, 7Н), 15 3,29-3,13 (м, 5Н), 2,67-2,46 (м, 9Н), 2,24 (с, 3H), 2,20-1,92 (м, 4Н), 1,93-1,75 (м, 3H), 1,65 (дп, J=16,0, 7,8 Гц, 2Н), 1,43 (д, J=38,9 Гц, 6Н), 1,14-0,96 (м, 16Н), 0,92 (т, J=6,8 Гц, 6Н).

m/z расчт. для C₅₉H₉₀N₁₀O₁₄S=1194,64 найдено [M+H]⁺ 1195,51; [(М+2Н)/2]⁺ 599,09

Пример 21

Соединение Т: (S,E)-N-(4-((14R,17R)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-илсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение Т-1: 2,2,2-трифтор-N-(4-сульфамоил-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-ил)ацетамид

Синтезировано из 5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-амина согласно общей методике 1.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 11,04 (с, 1H), 7,79 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 7,46 (с, 2Н), 7,30 (д, J=8,4 Гц, 1H), 3,14 (с, 1H), 2,77 (д, J=15,4 Гц, 1Н), 2,72-2,57 (м, 4Н), 1,73 (п, J=3,3 Гц, 4Н).

Соединение Т-2: (S,E)-N-(4-амино-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-илсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Синтезировано из Boc-HTI-286-OH и Соединения Т-1 используя общие методики 3, 5 и 10.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 6,74 (д, J=8,7 Гц, 1Н), 7,55 (д, J=7,9 Гц, 2Н), 7,48 (т, J=7,6 Гц, 2Н), 7,38 (т, J=7,2 Гц, 1H), 6,60 (д, J=8,7 Гц, 1Н), 6,46 (д, J=9,2 Гц, 1H), 5,00 (т, J=10,0 Гц, 1Н), 4,95-4,91 (м, 1H), 4,36 (с, 1Н), 3,17 (с, 3H), 3,10-3,5 (м, 2Н), 2,51 (с, 3H), 2,46 (т, J=6,5 Гц, 2Н), 2,10-2,02 (м, 1Н), 1,88 (с, 3H), 1,87-1,75 (м, 4Н), 1,47 (с, 3H), 1,38 (с, 3H), 1,07 (с, 9Н), 0,92 (дд, J=7,1 Гц, 6Н).

C₃₇H₅₅N₅O₅S расчт. для m/z=681,39 найдено [M+H]⁺=682,4.

Соединение Т: (S,E)-N-(4-((14R,17R)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)-5,6,7,8-тетрагидронафттен-1-илсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Синтезировано из Соединения Т-2 и MT-NHS согласно общей методике 9.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,98 (д, J=8,7 Гц, 1Н), 7,62 (д, J=8,7 Гц, 1H), 7,59-7,51 (м, 2Н), 7,47 (дд, J=8,5, 6,8 Гц, 2Н), 7,42-7,30 (м, 1H), 6,83 (с, 2Н), 6,50 (дд, J=9,5, 1,8 Гц, 1Н), 5,01 (т, J=10,0 Гц, 1Н), 4,93 (т, J=4,1 Гц, 1Н), 4,62 (тд, J=8,1, 7,5, 5,0 Гц, 1H), 4,37 (с, 1Н), 4,29-4,18 (м, 1Н), 3,75 (т, J=6,0 Гц, 2Н), 3,72-3,67 (м, 2Н), 3,64 (тд, J=5,9, 1,5 Гц, 2Н), 3,29-3,08 (м, 7Н), 2,74 (д, J=6,0 Гц, 2Н), 2,62-2,46 (м, 5Н), 2,20-1,94 (м, 4Н), 1,91-1,75 (м, 7Н), 1,70-1,58 (м, 2Н), 1,48 (с, 3H), 1,38 (с, 3H), 1,07 (с, 9Н), 1,00 (дд, J=6.8, 3,4 Гц, 6Н), 0,92 (т, J=6,6 Гц, 6Н).

m/z расчт. для C₆₁H₉₂N₁₀O₁₄S=1220,65 найдено [M+H]⁺ 1221,48; [(М+2Н)/2]⁺ 611,39

Пример 22

Соединение U: (S,E)-N-(4-((14R,17R)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)-3-фторфенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение U-1: 2,2,2-трифтор-N-(2-фтор-4-сульфамоилфенил)ацетамид

Синтезировано из 2-фторанилина согласно общей методике 1.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 11,58 (с, 1H), 7,85-7,66 (м, 3H), 7,56 (с, 2Н).

Соединение U-2: (S,E)-N-(4-амино-3-фторфенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Синтезировано из Boc-HTI-286-OH и Соединения U-1 используя общие методики 3, 5 и 10.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,62-7,55 (м, 3H), 7,54 (с, 1Н), 7,48 (т, J=7,7 Гц, 2Н), 7,37 (т, J=13 Гц, 1Н), 6,85 (т, J=8,6 Гц, 1H), 6,45 (д, J=9,3 Гц, 1H), 4,98 (т, J=9,9 Гц, 1Н), 4,92 (с, 1H), 4,34 (с, 1H), 3,16 (с, 3H), 2,50 (с, 3H), 2,12-2,00 (м, 1Н), 1,88 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,46 (с, 3H), 1,37 (с, 3H), 1,07 (с, 9Н), 0,91 (дд, J=6,8 Гц, 6Н).

C₃₃H₄₈FN₅O₅S расчт. для m/z=645,34 [M+H]⁺=646,4

Соединение U: (S,E)-N-(4-((14R,17R)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)-3-фторфенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Синтезировано из Соединения U-2 и MT-NHS согласно общей методике 9.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8,42-8,28 (м, 1H), 7,91-7,77 (м, 2Н), 7,58-7,51 (м, 2Н), 7,47 (т, J=7,8 Гц, 2Н), 7,42-7,32 (м, 1Н), 6,84 (с, 2Н), 6,50 (дд, J=9,3, 1,8 Гц, 1Н), 5,02-4,90 (м, 2Н), 4,67 (тд, J=7,9, 7,2, 4,8 Гц, 1Н), 4,35 (с, 1H), 4,26 (т, J=7,5 Гц, 1H), 3,76 (т, J=6,1 Гц, 2Н), 3,70 (тд, J=5,5, 1,2 Гц, 2Н), 3,67-3,53 (м, 10Н), 3,28-3,06 (м, 5Н), 2,61-2,47 (м, 5Н), 2,19-2,01 (м, 2Н), 2,01-1,71 (м, 4Н), 1,61 (dt, J=15,2, 7,1 Гц, 2Н), 1,46 (с, 3H), 1,36 (с, 3H), 1,13-0,95 (м, 16Н), 0,91 (дд, J=6.6, 4,9 Гц, 6Н).

m/z расчт. для C₅₇H₈₅FN₁₀O₁₄S=1184,60 найдено [M+H]⁺ 1185,47; [(М+2Н)/2]⁺ 593,41

Пример 23

Соединение V: (S,E)-N-(4-((14R,17R)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)-2-этилфенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение V-1: N-(3-этил-4-сульфамоилфенил)-2,2,2-трифторацетамид

Синтезировано из 3-этиланилина согласно общей методике 1.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 11,48 (с, 1Н), 7,89 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,75-7,63 (м, 2Н), 7,45 (с, 2Н), 3,02 (кв, J=7,5 Гц, 2Н), 1,24 (т, J=7,4 Гц, 3H).

Соединение V-2: (S,E)-N-(4-амино-2-этилфенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Синтезировано из Boc-HTI-286-OH и Соединения V-1 используя общие методики 3, 5 и 10.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,79 (д, J=8,7 Гц, 1H), 7,55 (д, J=7,9 Гц, 2Н), 7,48 (т, J=7,6 Гц, 2Н), 7,37 (т, J=7,4 Гц, 1Н), 6,57 (д, J=2,3 Гц, 1Н), 6,54 (дд, J=8,8, 2,4 Гц, 1Н), 6,46 (д, J=9,4 Гц, 1H), 5,01 (т, J=10,0 Гц, 1Н), 4,92 (с, 1H), 4,34 (с, 1Н), 3,16 (с, 3H), 2,99-2,90 (м, 2Н), 2,50 (с, 3H), 2,11-2,00 (м, 1H), 1,87 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,47 (с, 3H), 1,38 (с, 3H), 1,22 (т, J=7,5 Гц, 3H), 1,06 (с, 9Н), 0,91 (дд, J=6,6 Гц, 6Н).

C₃₅H₅₃N₅O₅S расчт. для m/z=655,38 [M+H]⁺=656,4.

Соединение V: (S,E)-N-(4-((14R,17R)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)-2-этилфенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Синтезировано из Соединения V-2 и MT-NHS согласно общей методике 9.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8,04 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 7,77 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,67 (дд, J=8.8, 2,2 Гц, 1H), 7,54 (д, J=7,6 Гц, 2Н), 7,46 (т, J=1,1 Гц, 2Н), 7,36 (т, J=1,3 Гц, 1Н), 6,83 (с, 2Н), 6,51 (дд, J=9,5, 1,9 Гц, 1H), 5,01 (т, J=10,0 Гц, 1Н), 4,92 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 4,60-4,47 (м, 1Н), 4,37 (с, 1Н), 4,23 (д, J=6,9 Гц, 1H), 3,82-3,72 (м, 2Н), 3,69 (дд, J=6,0, 4,5 Гц, 2Н), 3,66-3,52 (м, 10Н), 3,28-3,10 (м, 5Н), 3,06 (кв, J=7,4 Гц, 2Н), 2,58 (т, J=6,0 Гц, 2Н), 2,52 (с, 3H), 2,20-1,90 (м, 3H), 1,87 (с, 3H), 1,84-1,72 (м, 1Н), 1,64-1,55 (м, 2Н), 1,47 (с, 3H), 1,37 (с, 3H), 1,26 (t, J=7,5 Гц, 3H), 1,10-0,96 (м, 15Н), 0,91 (дд, J=6.6, 4,0 Гц, 6Н).

m/z расчт. для C₅₉H₉₀N₁₀O₁₄S=1194,64 найдено [M+H]⁺ 1195,57; [(М+2Н)/2]⁺ 599,12

Пример 24

Соединение W: (S,E)-N-(4-((14R,17R)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)-3-этилфенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение W-1: N-(2-этил-4-сульфамоилфенил)-2,2,2-трифторацетамид

Синтезировано из 2-этиланилина согласно общей методике 1.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 11,21 (с, 1H), 7,80 (д, J=2,1 Гц, 1H), 7,72 (дд, J=8,2, 2,2 Гц, 1H), 7,48 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,41 (с, 2Н), 2,64 (кв, J=7,6 Гц, 2Н), 1,16 (т, J=7,5 Гц, 3H).

Соединение W-2: (S,E)-N-(4-амино-3-этилфенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Синтезировано из Boc-HTI-286-OH и Соединения W-1 используя общие методики 3, 5 и 10.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,66 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,61 (дд, J=8.6, 2,3 Гц, 1H), 7,55 (д, J=7,6 Гц, 2Н), 7,48 (т, J=6,7 Гц, 2Н), 7,37 (т, J=7,3 Гц, 1Н), 6,71 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 6,43 (дд, J=9,3, 1,7 Гц, 1Н), 4,96 (т, J=9,9 Гц, 1H), 4,92 (с, 1H), 4,35 (с, 1H), 3,16 (с, 3H), 2,54 (дд, J=7,4, 2,2 Гц, 2Н), 2,51 (с, 3H), 2,12-1,99 (м, 1H), 1,87 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,46 (с, 3H), 1,36 (с, 3H), 1,27 (т, J=7,5 Гц, 3H), 1,07 (с, 9Н), 0,91 (дд, J=6,4 Гц, 6Н)

C₃₅H₅₃N₅O₅S расчт. для m/z=655,38 [M+H]⁺=656,5.

Соединение W: (S,E)-N-(4-((14R,17R)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)-3-этилфенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Синтезировано из Соединения W-2 и MT-NHS согласно общей методике 9.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,97 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,87 (дд, J=8,5, 2,3 Гц, 1H), 7,77 (д, J=8,5 Гц, 1H), 7,59-7,51 (м, 2Н), 7,51-7,42 (м, 2Н), 7,41-7,34 (м, 1H), 6,84 (с, 2Н), 6,48 (дд, J=9,4, 1,8 Гц, 1Н), 4,98 (т, J=9,9 Гц, 1Н), 4,92 (д, J=8,4 Гц, 1H), 4,64 (тд, J=8,4, 7,6, 3,7 Гц, 1Н), 4,36 (с, 1H), 4,25 (д, J=7,0 Гц, 1H), 3,82-3,67 (м, 4Н), 3,67-3,53 (м, 10Н), 3,29-3,09 (м, 5Н), 2,77 (кв, J=7,5 Гц, 2Н), 2,62-2,46 (м, 5Н), 2,20-1,95 (м, 4Н), 1,91-1,74 (м, 4Н), 1,72-1,60 (м, 2Н), 1,47 (с, 3H), 1,37 (с, 3H), 1,27 (т, J=7,5 Гц, 3H), 1,12-0,95 (м, 16Н), 0,91 (дд, J=6.6, 4,6 Гц, 6Н).

m/z расчт. для C₅₉H₉₀N₁₀O₁₄S=1194,64 найдено [M+H]⁺ 1195,54; [(М+2Н)/2]⁺ 599,09

Пример 25

Соединение X: (S)-N-(4-(N-((S,E)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-еноил)сульфамоил)фенил)-1-((S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-метил-12-оксо-3,6,9-триокса-13-азапентадекан)пирролидин-2-карбоксамид

Синтезировано из Соединения Н-1 с и Boc-Ala-Pro-OH согласно общей методике 7, с последующим удалением Boc- согласно общей методике 10 и MT-NHS постановкой, согласно общей методике 9 перед очисткой с помощью препаративной ВЭЖХ.

¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,99 (д, J=8,9 Гц, 2Н), 7,81 (д, J=8,5 Гц, 2Н), 7,55 (д, J=7,5 Гц, 2Н), 7,48 (т, J=1,1 Гц, 2Н), 7,38 (т, J=7,3 Гц, 1H), 6,84 (с, 2Н), 6,54-6,42 (м, 1H), 5,07-4,95 (м, 2Н), 4,67 (т, J=6,8 Гц, 1Н), 4,57 (дд, J=8,4, 4,6 Гц, 1Н), 4,35 (с, 1H), 3,95-3,83 (м, 1H), 3,80-3,66 (м, 5Н), 3,61 (дд, 18,6, 4,6 Гц, 10Н), 3,16 (с, 3H), 2,58-2,42 (м, 5Н), 2,36 (d, J=18,0 Гц, 1Н), 2,23-1,98 (м, 4Н), 1,86 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,46 (с, 3H), 1,43-1,31 (м, 6Н), 1,07 (с, 10Н), 0,91 (т, J=6,3 Гц, 6Н).

m/z расчт. для C₅₉H₉₀N₁₀O₁₄S=1078,54 найдено [M+H]⁺ 1079,48; [(М+2Н)/2]⁺ 540,27

Пример 26

Соединение Z: (S,E)-N-(4-((14S,17S)-17-(4-аминобутил)-14-бензил-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-12,15-диоксо-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из Соединения Н-1 с и Fmoc-Phe-Lys(Boc)-OH согласно общей методике 7, с последующим удалением Fmoc согласно общей методике 8, ацилированием MT-NHS согласно общей методике 9 и снятием защиты согласно общей методике 10 перед очисткой с помощью препаративной ВЭЖХ. m/z расчт. для C₆₁H₈₇N₉O₁₃S=1185,6 найдено [M+H⁺]⁺=1186,6 и [(M+2H⁺)/2]²⁺=593,9.

Пример 27

Соединение AA: (S,E)-N-(4-((14S,17S)-17-(4-аминобутил)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из Соединения Н-1c и Fmoc-Val-Lys(Boc)-OH согласно общей методике 7, с последующим удалением Fmoc, согласно общей методике 8, ацилированием MT-NHS согласно общей методике 9 и снятием защиты согласно общей методике 10 перед очисткой с помощью препаративной ВЭЖХ. m/z расчт. для C₅₇H₈₇N₉O₁₃S=1137,6 найдено [M+H⁺]⁺=1138,5 и [(М+2Н⁺)/2]²⁺=569,8.

Пример 28

Соединение BB: (S,E)-N-(4-((2S,5S,8R)-2-(4-аминобутил)-5-бензил-21-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-8-метил-4,7,10-триоксо-13,16,19-триокса-3,6,9-триазагеникозанамидо)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из Соединения Н-1c и Fmoc-Ala-Phe(D)-Lys(Boc)-OH согласно общей методике 7. Полученное соединение, очищенное с помощью флэш-хроматографии, было затем применено в общей методике 8 для удаления Fmoc защитной группы, с последующей обработкой MT-NHS согласно общей методике 9 и снятию защиты согласно общей методике 10 перед очисткой с помощью препаративной ВЭЖХ. m/z расчт. для C₆₄H₉₂N₁₀O₁₄S=1256,7 найдено [M+H⁺]⁺=1258,3 и [(M+2H⁺)/2]²⁺=630,2.

Пример 29

Соединение CC: (S,E)-N-(4-((2S,5S,8R)-2-(4-аминобутил)-5,8-дибензил-21-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-4,7,10-триоксо-13,16,19-триокса-3,6,9-триазагеникозанамидо)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из Соединения Н-1 с и Fmoc-Phe-Phe(D)-Lys(Boc)-OH согласно общей методике 7, снятие Fmoc via общую методику 8, реакция с MT-NHS согласно общей методике 9 и снятие защиты согласно общей методике 10 перед очисткой с помощью препаративной ВЭЖХ. m/z расчт. для C₆₉H₉₄N₁₀O₁₄S=1332,7 найдено [M+H⁺]⁺=1334,3 и [(M+2H⁺)/2]²⁺=668,2.

Пример 30

Соединение DD: (S,E)-N-(2-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Соединение DD-1: 2,2,2-трифтор-N-(2-сульфамоилфенил)ацетамид

Данное соединение получали из 2-аминобензолсульфонамида согласно общей методике 2.

Соединение DD-2: (S,E)-N-(2-аминофенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из Соединения D-1 и Boc-HTI-286-OH согласно общим методикам 3 и 5. 1H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7,75 (дд, J=8,2, 1,5 Гц, 1H), 7,55 (д, J=7,8 Гц, 2Н), 7,48 (т, J=7,7 Гц, 2Н), 7,38 (т, J=7,4 Гц, 1H), 7,33-7,27 (м, 1Н), 6,81 (д, J=8,2 Гц, 1Н), 6,69 (т, J=7,5 Гц, 1Н), 6,49 (дд, J=9,1, 1,5 Гц, 1Н), 4,97 (т, J=10,1 Гц, 1H), 4,92 (с, 1Н), 4,35 (с, 1H), 3,17 (с, 3H), 2,51 (с, 3H), 2,07 (м, 1Н), 1,88 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,46 (с, 3H), 1,36 (с, 3H), 1,06 (с, 9Н), 0,92 (т, J=6,8 Гц, 6Н).

C₃₃H₄₉N₅O₅S расчт. для m/z=627,35 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=628,36, [M+Na]⁺=650,37, [(M+2H)/2]²⁺=314,76

Соединение DD-211:

Данное соединение получали из Соединения DD-2 и Boc-Val-Cit-OH согласно общей методике 7. C₅₄H₈₅N₉O₁₂S расчт. для m/z=1083,60 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1084,8, [M+Na]⁺=1106,7.

Соединение DD-4: (S,E)-N-(2-((S)-2-((S)-2-амино-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из Соединения DD-3 согласно общей методике 10. C₄₄H₆₉N₉O₈S расчт. для m/z=883,50 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=884,6, [M+Na]⁺=906,6, [(M+2H)/2]²⁺=442,8.

Соединение DD: (S,E)-N-(2-((14S,17S)-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-14-изопропил-12,15-диоксо-17-(3-уреидопропил)-3,6,9-триокса-13,16-диазаоктадеканамидо)фенилсульфонил)-2,5-диметил-4-((S)-N,3,3-триметил-2-((S)-3-метил-2-(метиламино)-3-фенилбутанамидо)бутанамидо)гекс-2-енамид

Данное соединение получали из Соединения DD-4 и MT-NHS согласно общей методике 9 до очистки с помощью препаративной ВЭЖХ ВЭЖХ-МС. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8,16 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,95 (дд, J=8,0, 1,6 Гц, 1Н), 7,50 (д, J=7,9 Гц, 2Н), 7,42 (дт, J=15,5, 7,8 Гц, 3H), 7,29 (т, J=7,3 Гц, 1Н), 7,19 (т, J=7,5 Гц, 1Н), 6,85 (с, 2Н), 6,62 (д, J=9,3 Гц, 1H), 4,66 (с, 1H), 4,61 (дд, J=9,1, 4,5 Гц, 1Н), 4,37 (д, J=6,9 Гц, 1Н), 3,76 (дд, J=7,5, 5,7 Гц, 2Н), 3,73-3,67 (м, 2Н), 3,67-3,56 (м, 10Н), 3,29-3,13 (м, 4Н), 3,11 (с, 3H), 2,70 (с, 6Н), 2,65-2,49 (м, 2Н), 2,22 (с, 3H), 2,11 (д, J=7,5 Гц, 2Н), 2,00 (дт, J=17,2, 6,2 Гц, 2Н), 1,86 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,66 (дт, J=14,5, 7,8 Гц, 2Н), 1,01 (д, J=13,3 Гц, 15Н), 0,87 (дд, J=21,4, 6,6 Гц, 6Н).

C₅₇H₈₆N₁₀O₁₄S расчт. для m/z=1166,60 а.е.м.; найдено [M+H]⁺=1167,8, [M+Na]⁺=1189,9, [(M+2H)/2]²⁺=584,4.

Биологические исследования

Биологический пример 1

Исследование селективного in vitro цитотоксического уничтожения HER2-положительных клеток Трастизумаб-основаных ADC:

Селективное уничтожение HER2-положительных клеточных линий таких как NCI-N87 или НСС1954 по сравнению с HER2-негативными Jurkat клетками было продемонстрировано для каждого полученного конъюгата. В Таблице 1 обобщены цитотоксические активности для ADCs образованные конъюгированием Трастузумаб с Соединениями A-DD, при испытании против клеточной линии рака желудка человека NCI-N87 и/или клеточной линии карциномы молочной железы человека НСС1954, и клеточной линии лейкоза Т-клеток человека Jurkat.

Кратко, клетки получали из АТСС и культивировали, как описано в прилагаемом к продукту листе. Клетки высевали по 25000 клеток/мл (2500 клеток/лунку) в Costar 3904 с черными стенками, и плоским дном, 96-луночные планшеты. Адгезивные клетки инкубировали одну ночь при 37°C в 5% CO₂ атмосфере, чтобы позволить клеткам прикрепиться к поверхности микротитрационной пластины, в то время как суспензия (Jurkat) клеток была плакирована непосредственно перед употреблением. ADC разбавляли непосредственно в соответствующей среде роста клеток в пять раз в зависимости от желаемой конечной концентрации. Этими ADCs затем титровали 1:3 за восемь этапов. Контроль с отсутствием тестируемого соединения (лишь среда роста) включали на каждую микротитровальную пластину в шести паралельных опытах. Полученное соединение/ADC титрования добавляли (25 микрол/лунку) в трех паралельных опытах к обоим НСС1954 и/или NCI-N87 клеткам и Jurkat клеткам. Клетки и титрования инкубировали при 37°C/5% CO₂ в течение трех ночей (Jurkat), и 3 или 5 ночей (HCC1954/NCI-N87). После инкубирования, жизнеспособность клеток измеряли с использованием реагента CellTiter-Glo® добавлением тридцати микрол приготовленого CellTiter-Glo® к каждой исследуемой лунке. Смеси инкубировали по меньшей мере двадцать минут в темноте перед измерением излучаемой люминисценции используя микропланшетный люминометр (500 мс время интегрирования). Собранные относительные люминесцентные единицы (ОЛЕ) переводили в % цитотоксичности, используя контроль, среду роста упомянутую выше (% Цитотоксичности=1-[ОЛЕ лунки/ОЛЕ среднего контроля среды). Данные (% Цитотоксичности vs. Концентрация ADC (log10[нМ])) наносили на график и анализировали с помощью методов нелинейной регрессии используя GraphPad Prism програмное обеспечение v. 5,02 получая оценки EC₅₀.

Исследование расщепления линкера катепсином в

ADCs приготовленные конъюгированием Трастузумаба были исследованы на чувствительность к расщеплению и высвобождению тохина Катепсином В (Sigma С8286). ADCs обменивались с буфером в 25 мМ NaOAc, 1 мМ EDTA, pH 5,0 используя Zeba 40 кДа MWCO вращающиеся колонки. ADC при концентрации между 1 и 3 мг/мл (по оценкам ВСА анализа с использованием стандартной кривой вызываемой Трастузумабом). В типичном эксперименте аликвоты (50 микрол; 100 микрог) каждого из ADC обрабатывали Катепсином В (~5 мг в 10 мл 20 мМ DTT, 10 мМ EDTA, 8 мМ NaOAc) или буфером без фермента и реакции инкубировали при 37°C. После двух часов, растворы фильтровали через Pall NanoSep 30 кДа MWCO центрифужные вращающиеся фильтры, и фильтрат анализировали жидкостной хроматографией - масс спектроскопией (после соответствующего разбавления), чтобы определить высвобождение малых молекул из ADC под действием Катепсина В. ОФ-ЖХМС для анализа свободного лекарства проводили на Waters Acquity Н Class UPLC, используя Acquity UPLC ВЕН C18 колонку (1,7 пм, 2,1×50 мм). Детектирование с помощью масс-спектрометрии высокого разделения достигали с использованием MicroMass Q-TOF Premier с диапазоном сканирования от 100 до 3000 m/z. Хроматография выполнялась с линейным градиентом от 98% до 40% А в течение 5,5 минут при 0,3 мл/мин (А: 0,1% муравьиная кислота в H₂O, В: 0,1% муравьиная кислота в ACN), с последующим вымыванием и повторным уравновешиванием к начальным условиям. Сбор данных и анализ выполнялся с помощью MassLynx 4,1. Качественные результаты исследования расщепления приведены в Таблице 1.

Среди тестируемых конъюгатов, следующие высвобождались катепсином В in vitro: mAb-Соединение A; mAb-Соединение С; mAb-Соединение D; mAb-Соединение I; mAb-Соединение N; mAb-Соединение О; mAb-Соединение Р; mAb-Соединение Q; mAb-Соединение R; mAb-Соединение S; mAb-Соединение Т; mAb-Соединение U; mAb-Соединение V; mAb-Соединение W; mAb-Соединение Z; mAb-Соединение ВВ.

Биологический пример 2

Исследование эффективности токсинов у мышей с привитой опухолью NCI-N87.

Самке NOD/SCID гамма (NSG) мыши (Jackson Laboratories) имплантировали подкожно в спину линию опухолевых клеток NCI-N87. NCI-N87 клетки карциномы желудка человека получали из метастаз печени хорошо дифференциированной карциномы желудка, взятых перед цитотоксической терапии. Опухоль перевивали в качестве ксенографа у атимической мыши три раза, перед тем как была создана клеточная линия.

Опухоли созданые в течение периода 25 дней, и испытуемые были сгруппированы (Таблица 2) согласно объемам опухоли таким образом, что каждая группа (n=10) имела равное распределение объемов опухоли (средний объем >170 мм³).

Тестовые образцы вводили однократно (на 22 день) внутривенно в дозах указанных в таблице исследования группы. Здоровье животных четко оценивали, используя формы послеинъекционной записи клинического наблюдения (PICOR). Массы тел (Фигура 12) и объемы опухолей (Фигура 13) измеряли каждый понедельник, среду и пятницу. Животные оставались на исследовании, пока их опухоли не достигали 800 мм³ в размере или они не требовали эвтаназии из-за достижения гуманных конечных точек.

Оцененные ADCs эффективны для уменьшения объема опухоли и задержки опухолевого роста. Все тестированные ADC значительно увеличивают количество дней до рецидива, по сравнению с носителем (Фигура 14). Т-Соединение I имело значительное увеличение уровня выживаемости по сравнению с T-DM1, но не показало никакой существенной разницы, по сравнению с Т-Соединение K. Т-Соединение K имело значительное увелиние уровня выживаемости по сравнению с T-DM1, но не показало никакой существенной разницы по сравнению с Т-Соединением I.

Биологический пример 3

Исследование эффективности токсинов у мышей с привитой опухолью NCI-N87.

Самке NOD/SCID гамма (NSG) мыши (Jackson Laboratories) имплантировали подкожно в спину линию опухолевых клеток NCI-N87. NCI-N87 клетки карциномы желудка человека получали из метастаз печени хорошо дифференциированной карциномы желудка взятых, перед цитотоксической терапии. Опухоль перевивали в качестве ксенографа у атимической мыши три раза, перед тем как была создана клеточная линия.

Опухоли созданый в течение периода 25 дней, и испытуемые были сгруппированы (Таблица 3) согласно объемам опухоли таким образом, что каждая группа (n=6-8) имела равное распределение объемов опухоли (средний объем >150 мм³).

Тестовые образцы вводили однократно (на 27 день) внутривенно в дозах указанных в таблице 3 исследования группы. Здоровье животных четко оценивали, используя формы послеинъекционной записи клинического наблюдения (PICOR). Массы тел (Фигура 15) и объемы опухолей (Фигура 16) измеряли каждый понедельник, среду и пятницу. Животные оставались на исследовании, пока их опухоли не достигали 800 мм³ в размере или они не требовали эвтаназии из-за достижения гуманных конечных точек.

Оцененные ADC эффективны для уменьшения объема опухоли и задержки опухолевого роста. Т-Соединение Е имело существенный эффект на продолжительность до рецидива при дозе 3 мг/кг, и уровня выживаемости при дозе 7 мг/к (не показано) у NCI-N87 привитой NSG мыши после однократной дозы IV. Существует прямая связь между дозой ADC и эффектом. Увеличенные дозы ADC привели к наиболее существенным эффектам на продолжительность периода до рецидива и уровень выживаемости у NCI-N87 опухоль привитой NSG мыши.

Высшая доза, 12 мг/кг, привела к наибольшему снижению объемов опухоли, времени до рецидива, и уровня выживаемости для всех ADC. Все лечения хорошо переносились исследуемыми мышами.

Все патенты США, публикации заявок на патент США, патентные заявки США, иностранные патенты, иностранные заявки и не-патентные публикации, упомянутые в данном описании, включены в данный документ путем ссылки, во всей своей полноте в части, не противоречащей настоящему описанию.

Из вышесказанного можно отметить, что, несмотря на то, что конкретные варианты реализации изобретения были описаны в данном документе в целях иллюстрации, различные модификации могут быть произведены без отклонений от сущности и объема описания. Таким образом, описание не ограничено, кроме как формулой изобретения.

Предполагается, что разные части настоящего описания могут быть скомбинированы любым подходящим образом. Например, приведенные примеры, способы, аспекты, варианты реализации изобретения или тому подобное, могут быть реализованы соответствующим образом или в сочетании с любым другим вариантом реализации изобретения, способом, примером или аспектом изобретения.

1. Конъюгат, имеющий структуру (I):

где:

(L) представляет собой линкер,

(Т) представляет собой антитело или фрагмент антитела, которые специфично связываются с антигеном, присутствующим на опухолевой клетке,

m равно целому числу от 1 до 10, и либо

(i) (Р) имеет структуру (VI):

где:

R₁ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила и необязательно замещенного арила, причем каждый необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный циклоалкил и необязательно замещенный арил, независимо, необязательно замещен галогеном, алкилом, арилом или циклоалкилом, и причем каждый арил является дополнительно необязательно замещенным алкилом или циклоалкилом;

R₂ выбран из группы, состоящей из: необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкиламино, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила, причем каждый необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкиламино, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероциклил и необязательно замещенный гетероарил, независимо, необязательно замещен =O, =S, -ОН, -OR₂₈, -O₂CR₂₈, -SH, -SR₂₈, -SOCR₂₈, -NH₂, -N₃, -NHR₂₈, -N(R₂₈)₂, -NHCOR₂₈, -NR₂₈COR₂₈, -I, -Br, -Cl, -F, -CN, -CO₂H, -CO₂R₂₈, -CHO, -COR₂₈, -CONH₂, -CONHR₂₈, -CON(R₂₈)₂, -COSH, -COSR₂₈, -NO₂, -SO₃H, -SOR₂₈ или -SO₂R₂₈, причем каждый R₂₈ представляет собой, независимо, алкил, необязательно замещенный галогеном, -ОН или -SH;

R₃ и R₄ каждый независимо представляют собой Н или С_1-6 алкил; и

R₅ представляет собой С_1-6 алкил или -SH,

и (L)-(T) имеет структуру (III):

где:

каждый АА независимо представляет собой аминокислоту;

х равно целому числу от 0 до 25; и

(L') представляет собой необязательно остаток линкера (L); и

где -NH- группа, связанная с R₁ в структуре (VI), образует связывающую пептидную связь (JPB) с (АА)¹ в структуре (III);

либо

(ii) (Р) имеет формулу XId:

где:

R² представляет собой -R''-NH-;

R'' выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила и необязательно замещенного арила, причем каждый необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный циклоалкил и необязательно замещенный арил, независимо, необязательно замещен галогеном, алкилом, арилом или циклоалкилом, и причем каждый арил дополнительно необязательно замещен алкилом или циклоалкилом, и

R⁴ и R⁵ каждый независимо выбран из: Н и метила, и

и (L)-(T) имеет структуру (III):

где:

каждый АА независимо представляет собой аминокислоту;

х равно целому числу от 0 до 25; и

(L') представляет собой необязательно остаток линкера (L); и

где -NH- группа, связанная с R'' в структуре (XId), образует связывающую пептидную связь (JPB) с (АА)¹ в структуре (III);

причем каждый алкил является прямой или разветвленной, насыщенной или ненасыщенной углеводородной цепью, имеющей от одного до двенадцати атомов углерода;

каждый циклоалкил является неароматическим моноциклическим углеводородом, имеющим от трех до десяти атомов углерода;

каждый арил представляет собой углеводородную кольцевую систему, содержащую от шести до восемнадцати атомов углерода и по меньшей мере одно ароматическое кольцо;

каждый гетероциклил представляет собой 3-18-членное неароматическое кольцо, содержащее от двух до двенадцати атомов углерода и от одного до шести гетероатомов, выбранных из N, О и S, и

каждый гетероарил представляет собой 5-14-членную кольцевую систему, содержащую от одного до тринадцати атомов углерода, от одного до шести гетероатомов, выбранных из N, О и S, и по меньшей мере одно ароматическое кольцо.

2. Конъюгат по п. 1, где (АА)¹-(АА)_x, вместе взятые, содержат аминокислотную последовательность, облегчающую расщепление JPB.

3. Конъюгат по п. 1, где (AA)¹-(AA)_x представляет собой дипептид, трипептид, тетрапептид или пентапептид.

4. Конъюгат по п. 1, где (АА)¹-(АА)_x выбран из группы, состоящей из: Val-Cit, Ala-Phe, Phe-Lys, Val-Ala, Val-Lys, Ala-Lys, Phe-Cit, Leu-Cit, Ile-Cit, Trp-Cit, Phe-Arg, Val-Lys(Ac), Phe-Lys(Ac), Me-Val-Cit, Gly-Val-Cit, Pro-Pro-Pro, D-Ala-Phe-Lys, (D)-Val-Leu-Lys, Gly-Gly-Arg, Ala-Ala-Asn, Lys-Ser-Gly-Arg, Gly-Phe-Leu-Gly, Leu-Ser-Gly-Arg, Ala-Leu-Ala-Leu, Gly-Gly-Gly-Arg-Arg, Gly-Lys-Ala-Phe-Arg-Arg и HomoGly-Arg-Ser-Arg-Gly.

5. Конъюгат по п. 1, где (AA)¹-(AA)_x выбран из группы, состоящей из: Val-Cit, Phe-Lys, Val-Lys, Ala-Pro, D-Ala-Phe-Lys и D-Phe-Phe-Lys.

6. Конъюгат по п. 1, где (L') включает расширительный фрагмент, и -(АА)¹-(АА)_x-(L')-(T) имеет одну из структур (VII) или (VIII):

где L'' представляет собой необязательно остаток линкера (L), и (S) представляет собой расширительный фрагмент.

7. Конъюгат по п. 1, где L' дополнительно включает одну или более единиц алкилокси или алкилдиил.

8. Конъюгат по п. 1, где (Р) имеет структуру (VI), и R₃, R₄ и R₅ каждый представляет собой метил.

9. Конъюгат по п. 1, где (Р) имеет структуру (VI), и R₃ представляет собой Н, R₄ представляет собой метил, и R₅ представляет собой метил.

10. Конъюгат по п. 1, где (Р) имеет структуру (VI), и -R₁-NH- выбран из группы, состоящей из:

где каждый n представляет собой независимо целое число от 0 до 10.

11. Конъюгат по п. 1, где (Р) имеет структуру (VI), и -R₁-NH- выбран из группы, состоящей из:

12. Конъюгат по п. 1, где (Р) имеет структуру (VI), и -R₁-NH- выбран из группы, состоящей из:

13. Конъюгат по п. 1, где (Р) имеет структуру (VI), и R₂ выбран из группы, состоящей из:

14. Конъюгат по п. 1, где (Р) имеет структуру (VI), и R₂ представляет собой:

15. Конъюгат по п. 1, где (Р) представляет собой моновалентный радикал соединения, выбранного из:

16. Конъюгат по п. 15, где (AA)¹-(AA)_x представляет собой дипептид, трипептид, тетрапептид или пентапептид.

17. Конъюгат по п. 15, где (АА)¹-(АА)_x выбран из группы, состоящей из: Val-Cit, Ala-Phe, Phe-Lys, Val-Ala, Val-Lys, Ala-Lys, Phe-Cit, Leu-Cit, Ile-Cit, Trp-Cit, Phe-Arg, Val-Lys(Ac), Phe-Lys(Ac), Me-Val-Cit, Gly-Val-Cit, Pro-Pro-Pro, D-Ala-Phe-Lys, (D)-Val-Leu-Lys, Gly-Gly-Arg, Ala-Ala-Asn, Lys-Ser-Gly-Arg, Gly-Phe-Leu-Gly, Leu-Ser-Gly-Arg, Ala-Leu-Ala-Leu, Gly-Gly-Gly-Arg-Arg, Gly-Lys-Ala-Phe-Arg-Arg и HomoGly-Arg-Ser-Arg-Gly.

18. Конъюгат по п. 15, где (AA)¹-(AA)_x выбран из группы, состоящей из: Val-Cit, Phe-Lys, Val-Lys, Ala-Pro, D-Ala-Phe-Lys и D-Phe-Phe-Lys.

19. Конъюгат по п. 15, где (L') включает расширительный фрагмент, и -(АА)¹-(AA)_x-(L')-(T) имеет одну из структур (VII) или (VIII):

где L'' представляет собой необязательно остаток линкера (L), и (S) представляет собой расширительный фрагмент.

20. Конъюгат по п. 15, где L' дополнительно включает одну или более единиц алкилокси или алкилдиил.

21. Конъюгат по п. 1, где (P)-(L)- представляет собой моновалентный радикал соединения, выбранного из:

22. Конъюгат по п. 1, где (Р) имеет структуру (XId), и R² выбран из 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила, 4-аминофенила, 3-аминофенила, 4-(1-аминоциклопропил)бензила, 4-(1-аминоциклопропил)фенила, 2-аминофенила, 4'-амино-[1,1'-бифенил]-4-ила, 4-амино-2-этилфенила, 4-амино-3-(трифторметокси)фенила, 4-амино-2,3-диметилфенила, 4-амино-5,6,7,8-тетрагидронафтален-1-ила, 4-амино-3-метилфенила, 4-амино-3-фторфенила, 4-амино-3-этилфенила и 4-амино-3-(трифторметил)фенила.

23. Конъюгат по п. 1, где (Р) имеет формулу (XIg):

где:

R² представляет собой -R''-NH-.

24. Конъюгат по п. 23, где R² выбран из 4-аминобензила, 4-(аминометил)бензила, 4-(аминометил)фенила и 4-аминофенила.

25. Фармацевтическая композиция, содержащая конъюгат по любому из пп. 1-24 и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество.

26. Применение конъюгата по любому из пп. 1-24 для получения лекарственного средства для лечения рака у млекопитающего.

27. Способ лечения рака у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, которое нуждается в этом, эффективного количества конъюгата по любому из пп. 1-24.