[9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1h,2h,3h,4h,6h,7h,11bh- пиридо-[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол и связанные с ним соединения, композиции и способы

Настоящее изобретение относится к области органической химии, а именно к соединению, имеющему структурную формулу (I), включая его фармацевтически приемлемые соли:

.

В формуле (I): R¹ представляет собой а) водород; b) -Р(=O)(OR³)₂; c) -С(=O)алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰; d) -С(=O)гетероциклил, где гетероциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰; e) -С(=O)карбоциклил, где карбоциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰; f) -С(=O)N(R₃) алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰; g) -С(=O)N(R₃)карбоциклил, где карбоциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰; h) -С(=O)Оалкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰; или i) алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰; и где каждый R³ независимо представляет собой водород или алкил; каждый R¹⁰ независимо представляет собой галоген, галогеналкил, циано, нитро, -OR³⁰, -N(R³⁰)₂, -C(O)OR³⁰, -C(O)N(R³⁰)₂, -N(R³⁰)S(O)_tR³¹ (где t равно 1-2), -S(O)_tOR³⁰ (где t равно 1-2), -S(O)_pR³⁰ (где p равно 0-2) или, когда один атом несет две группы R¹⁰, такие две группы R¹⁰ могут быть взяты вместе с образованием оксо; каждый R²⁰ независимо представляет собой алкил, фенил, бензил, циклоалкил, гетероциклил или гетероарил, или, когда один атом несет две группы R²⁰, такие две группы R²⁰ могут быть взяты вместе с образованием циклоалкила, где каждая из указанной алкильной, фенильной, бензильной, циклоалкильной, гетероциклильной и гетероарильной группы необязательно замещены R¹⁰ и/или R²²; каждый R²² независимо представляет собой алкил необязательно замещенный R¹⁰; и каждый R³⁰, R³¹ и R³² независимо представляет собой водород или алкил; где алкил означает радикал с прямой или разветвленной углеводородной цепью, имеющий от 1 до 8 атомов углерода; гетероциклил означает пиперидинил, пиперазинил, пирролидинил, оксетанил, азетидинил, тетрагидропиранил, 1,3-диазинанил, 2,3-дигидро-1Н-изоиндолил, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолинил, 1,2,3,4-тетрагидрохиназолинил, 2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептанил, декагидропиперазино[1,2-а]азепинил, 3,8-диазабицикло[3.2.1]октанил, 2,5-диазабицикло[2.2.1]гептанил, [пирролидин-1-ил]оксиданил, имидазолидинил, 2,3-дигидро-1,3-бензоксазолил и морфолинил; карбоциклил означает фенил, циклопропил, циклопентил, циклогексил, бицикло[2.2.1]гептенил и бицикло[2.2.1]гептанил; циклоалкил означает циклопропил, циклопентил, циклогексил, бицикло[2.2.1]гептенил и бицикло[2.2.1]гептанил; и гетероарил означает пирролил, пиразолил и тетразолил. Также предложена фармацевтическая композиция на основе соединения формулы (I). Технический результат: предложены новые органические соединения, которые являются ингибиторами везикулярного транспортера моноаминов 2 (VMAT2) и могут быть полезны для лечения гиперкинетических расстройств. 2 н. и 20 з.п. ф-лы, 3 ил., 12 табл., 14 пр.

 

Область техники

Настоящее изобретение относится в целом к [9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанолу и соединениям, композициям и способам, связанным с ним.

Описание предшествующего уровня техники

Дисрегуляция дофаминергических систем является неотъемлемой частью нескольких расстройств центральной нервной системы (ЦНС), включая гиперкинетические двигательные расстройства и состояния, такие как шизофрения и биполярное заболевание. Транспортный белок везикулярный транспортер моноаминов (VMAT2) играет важную роль в освобождении пресинаптического дофамина и регулирует поглощение моноамина из цитоплазмы в синаптические пузырьки для хранения и высвобождения.

3-Изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]-изохинолин-2-он, также известный как тетрабеназин (TBZ), используется в качестве лекарственного средства в течение десятилетий. Тетрабеназин является сильным ингибитором обратного захвата катехоламина везикулярным транспортером моноаминов 2 (VMAT2) (IC₅₀=3,2 нM) (см., например, Scherman et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, (1983) 80:584-8) и в настоящее время используется для лечения различных гиперкинетических расстройств. Побочные эффекты, связанные с TBZ, включают седативный эффект, депрессию, акатизию и паркинсонизм. Ингибирование VMAT2 TBZ приводит к истощению моноаминов головного мозга in vivo (см., например, Pettibone et al., Eur. J. Pharmacol. (1984) 102:431-6). TBZ также ингибирует пресинаптические и постсинаптические дофаминовые рецепторы в головном мозге крысы (см., например, Login et al., (1982) Ann. Neurology 12:257-62; Reches et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. (1983) 225:515-521). Эта нецелевая активность TBZ может быть ответственной за некоторые наблюдаемые побочные действия.

TBZ, который содержит два хиральных центра и представляет собой рацемическую смесь двух стереоизомеров, быстро и интенсивно метаболизируется in vivo в его восстановленную форму, 3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2Н-пиридо[2,1-а]изохинолин-2-ол, также известный как дигидротетрабеназин (HTBZ). Предполагается, что HTBZ существует в виде четырех индивидуальных изомеров: а именно, (±)-альфа-HTBZ и (±)-бета-HTBZ. Считается, что 2R, 3R, 11bR или (+)-альфа-HTBZ являются абсолютной конфигурацией активного метаболита (см., например, Kilbourn et al., Chirality (1997), 9:59-62). Несмотря на успех в лечении гиперкинетических расстройств, тетрабеназин обладает довольно низкой и вариабельной биодоступностью. Введение тетрабеназина человеку осложняется экстенсивным метаболизмом первого прохода, и в моче наблюдается мало или не наблюдается тетрабеназин.

Несмотря на достижения, достигнутые в данной области, в уровне техники остается потребность в улучшенных ингибиторах VMAT2, включая соединения, композиции и способы, связанные с ними. Настоящее раскрытие удовлетворяет этим и другим потребностям, как очевидно из следующего раскрытия.

Краткое описание

Вкратце, в настоящей заявке представлено соединение [9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол (R¹=H) и его родственные аналоги или пролекарства, такие соединения, имеющие структуру (I):

а также стереоизомеры и их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, где R¹ имеет значение, как определено более подробно ниже.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол или его фармацевтически приемлемую соль или сольват. В более конкретном варианте осуществления соединение представляет собой хлористоводородную соль; а именно, [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол HCl.

В одном варианте осуществления представлена фармацевтическая композиция, которая содержит одно или несколько соединений структуры (I) в комбинации с фармацевтически приемлемым эксципиентом и/или разбавителем.

В одном варианте осуществления представлены способы лечения заболеваний, нарушений или состояний, которые способствуют ингибированию везикулярного транспортера моноаминов 2 (VMAT2), включая семейство гиперкинетических двигательных расстройств. Таким образом, в одном варианте осуществления предлагаются способы лечения гиперкинетического расстройства, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтически эффективного количества соединения структуры (I) или фармацевтической композиции, содержащей его. В более конкретном варианте осуществления гиперкинетическое расстройство представляет собой болезнь Хантингтона, позднюю дискинезию, синдром Туретта или тики.

Эти и другие аспекты изобретения будут очевидны со ссылкой на следующее подробное описание. С этой целью здесь приводятся различные ссылки, которые более подробно описывают некоторую дополнительную информацию, способы, соединения и/или композиции и каждая из них включена в качестве ссылки в полном объеме.

Краткое описание фигур

На фигуре 1 представлено действие репрезентативного соединения (соединения 1-1) на снижение дофамина, измеренное с использованием анализа локомоторной активности (LMA).

На фигуре 2 представлено действие репрезентативного соединения (соединения 1-1) в анализе условной реакции избегания (CAR) антипсихотической активности.

На фигуре 3 представлен вклад метаболических путей в общий метаболизм in vitro соединения 1-1 и R,R,R-DHTBZ с использованием гепатоцитов человека.

Подробное описание

Терминам, конкретно не определенным в настоящем описании, должны быть даны значения, которые будут даны им специалистом в данной области в свете раскрытия и контекста. Однако, как используется в описании, если не указано иное, термины имеют указанное значение.

В нижеследующем описании некоторые конкретные детали изложены для обеспечения полного понимания различных вариантов осуществления. Однако специалист в данной области поймет, что настоящие соединения могут быть получены и использованы без этих деталей. В других случаях хорошо известные структуры не были показаны или описаны подробно, чтобы излишне не затенять описания вариантов осуществления. Если контекст не требует иного, то в описании и формуле изобретения, которые следуют ниже, слово «содержать» и его варианты, такие как «содержит» и «содержащий», должны быть истолкованы в открытом, охватывающем смысле, то есть, как «включая, но не ограничиваясь». Кроме того, термин «содержащий» (и связанные с ним термины, такие как «содержать» или «содержит» или «имеющий» или «включающий») не предназначен для исключения того, что в других определенных вариантах осуществления, например, варианте осуществления любой композиции вещества, композиции, способа или процесса или тому подобное, описанных здесь, могут «состоять из» или «состоять в основном из» описанных признаков. Заголовки, использованные в настоящем описании, приведены только для удобства и не интерпретируют объем или значение заявленных вариантов осуществления.

Ссылка в настоящем описании на «один вариант осуществления» или «вариант осуществления» означает, что конкретная особенность, структура или характеристика, описанные в связи с вариантом осуществления, входит, по меньшей мере, в один вариант осуществления. Таким образом, появление фраз «в одном варианте осуществления» или «в варианте осуществления» в различных местах описания необязательно относится к одному и тому же варианту осуществления. Кроме того, конкретные особенности, структуры или характеристики могут быть объединены любым подходящим способом в одном или нескольких вариантах осуществления.

Кроме того, как используется в настоящем описании и прилагаемой формуле изобретения, единственные формы включают множественные референты, если содержание явно не диктует иное. Так, например, ссылка на «животное, не являющееся человеком» может относиться к одному или нескольким животным, не являющимся человеком, или к множеству таких животных, а ссылка на «клетку» или «клетку» включает ссылку на одну или несколько клеток и их эквивалентов (например, множество клеток), известных специалистам в данной области, и так далее. Когда стадии способа описаны или заявлены, и стадии описываются как происходящие в определенном порядке, описание первой стадии, происходящей (или выполняемой) «до» (то есть перед) второй стадии имеет то же значение, если переписано с указанием, что вторая стадия происходит (или выполняется) «после» первой стадии. Термин «примерно», когда речь идет о числе или диапазоне числовых значений, означает, что упомянутые число или диапазон числовых значений являются приближенными в пределах экспериментальной изменчивости (или в пределах статистической экспериментальной ошибки), и, следовательно, число или диапазоне числовых значений могут варьироваться от 1% до 15% от указанного числа или диапазона числовых значений. Следует также отметить, что термин «или» обычно используется в его смысле, включая «и/или», если содержание явно не диктует иное. Термин «по меньшей мере один», например, при упоминании по меньшей мере одного соединения или по меньшей мере одной композиции, имеет то же значение и понимание, что и термин «один или несколько».

В одном варианте осуществления, в настоящей заявке представлен [9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол (R₁=H), а также его аналоги или пролекарства, такие соединения, имеющие структуру (I):

или его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль или сольват,

где:

R¹ представляет собой а) водород;

b) -P(=O)(OR³)₂;

c) -C(=O)алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰;

d) -C(=O)гетероциклил, где гетероциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰;

e) -C(=O)карбоциклил, где карбоциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰;

f) -C(=O)N(R₃)алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰;

g) -C(=O)N(R₃)карбоциклил, где карбоциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰;

h) -C(=O)Oалкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰; или

i) алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰;

и где,

каждый R³ независимо представляет собой водород или алкил;

каждый R¹⁰ независимо представляет собой галоген, галогеналкил, циано, нитро, триметилсиланил, -OR³⁰, -SR³⁰, -OC(O)-R³⁰, -N(R³⁰)₂, -C(O)R³⁰, -C(O)OR³⁰, -C(O)N(R³⁰)₂, -N(R³⁰)C(O)OR³¹, -N(R³⁰)C(O)R³¹, -N(R³⁰)C(=NR³¹)N(R³²)₂, -N(R³⁰)S(O)_tR³¹ (где t равно 1-2), -S(O)_tOR³⁰ (где t равно 1-2), -S(O)_pR³⁰ (где p равно 0-2) или -S(O)_tN(R³⁰)₂ (где t равно 1-2), -OP(=O)(OR³⁰)₂, или когда один атом несет две группы R¹⁰, такие две группы R¹⁰ могут быть взяты вместе с образованием оксо;

каждый R²⁰ независимо представляет собой алкил, алкенил, арил, аралкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклил, гетероциклоалкил, гетероарил или гетероарилалкил или когда один атом несет две группы R²⁰, такие две группы R²⁰ могут быть взяты вместе с образованием циклоалкила, где каждая из указанной алкильной, алкенильной, арильной, аралкильной, циклоалкильной, циклоалкилалкильной, гетероциклильной, гетероциклалкильной, гетероарильной и гетероарилалкильной группы необязательно замещены R¹⁰ и/или R²²;

каждый R²² независимо представляет собой алкил, алкенил, арил, аралкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклил, гетероциклоалкил, гетероарил или гетероарилалкил, где каждая из указанной алкильной, алкенильной, арильной, аралкильной, циклоалкильной, циклоалкилалкильной, гетероциклильной, гетероциклалкильной, гетероарильной и гетероарилалкильной группы необязательно замещены R¹⁰; и

каждый R³⁰, R³¹ и R³² независимо представляет собой водород или алкил.

В отношении стереоизомеров, соединения структуры (I) имеют многочисленные хиральные (или асимметричные) центры, которые приводят к образованию энантиомеров, диастереомеров и других стереоизомерных форм, которые могут быть определены с точки зрения абсолютной стереохимии как (R)- или (S)-. Когда описанные здесь соединения содержат олефиновые двойные связи или другие центры геометрической асимметрии, и, если не указано иное, предполагается, что соединения включают как E, так и Z геометрические изомеры (например, цис- или транс-). Аналогично, если не указано иное, все возможные изомеры, а также их рацемические и оптически чистые формы, и все таутомерные формы также должны быть включены. Поэтому предполагается, что различные стереоизомеры и их смеси включают «энантиомеры», которые относятся к двум стереоизомерам, молекулы которых являются несовмещаемыми зеркальными изображениями друг друга. Таким образом, соединения могут встречаться в любой изомерной форме, включая рацематы, рацемические смеси и в виде индивидуальных энантиомеров или диастереомеров.

Соответственно, и в более конкретном варианте осуществления, в настоящей заявке представлено соединение [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол (R¹=H), а также его аналоги или пролекарства, имеющие стереохимию, отмеченную в структуре (II):

или его фармацевтически приемлемая соль или сольват, где R¹ имеет указанные выше значения.

Как используется в описании и прилагаемой формуле изобретения, если не указано иное, следующие термины имеют указанное значение.

«Алкил» относится к радикалу с линейной или разветвленной углеводородной цепью, состоящему исключительно из атомов углерода и водорода, не содержащему ненасыщенности, имеющего от одного до двенадцати атомов углерода, от одного до восьми атомов углерода или от одного до шести атомов углерода или от одного до четырех атомов углерода, и который присоединен к остальной части молекулы при помощи одинарной связи, например, метил, этил, н-пропил, 1-метилэтил (изопропил), н-бутил, н-пентил, 1,1-диметилэтил (трет-бутил), 3-метилгексил, 2-метилгексил и тому подобное.

«Алкенил» относится к радикальной группе с линейной или разветвленной углеводородной цепью, состоящей исключительно из атомов углерода и водорода, содержащей по меньшей мере одну двойную связь, имеющей от двух до двенадцати атомов углерода, предпочтительно от двух до восьми атомов углерода и которая присоединена к остальной части молекулы при помощи одинарной связи, например, этенил, проп-1-енил, бут-1-енил, пент-1-енил, пента-1,4-диенил и тому подобное.

«Алкилен» или «алкиленовая цепь» относится к линейной или разветвленной двухвалентной углеводородной цепи, связывающей остальную часть молекулы с радикальной группой, состоящей исключительно из углерода и водорода, не содержащей ненасыщенности, и имеющей от одного до двенадцати атомов углерода или от одного до четырех атомов углерода, например, метилен, этилен, пропилен, н-бутилен и тому подобное. Алкиленовая цепь присоединена к остальной части молекулы с помощью одинарной связи и к радикальной группе с помощью одинарной связи. Точки присоединения алкиленовой цепи к остальной части молекулы и к радикальной группе могут быть через один атом углерода или любые два атома углерода в цепи.

«Карбоциклил» относится к стабильному 3-18-членному ароматическому или неароматическому кольцевому радикалу, который состоит из 3-18 атомов углерода. Если в описании конкретно не указано иное, карбоциклический радикал может быть моноциклической, бициклической, трициклической или тетрациклической кольцевой системой, которая может включать конденсированные или мостиковые кольцевые системы и может быть частично или полностью насыщенным. Неароматические карбоциклические радикалы включают циклоалкил, тогда как ароматические карбоциклические радикалы включают арил.

«Циклоалкил» относится к стабильному неароматическому моноциклическому или полициклическому углеводородному радикалу, состоящему исключительно из атомов углерода и водорода, который может включать конденсированные или мостиковые кольцевые системы, имеющие от трех до пятнадцати атомов углерода, предпочтительно имеющие от трех до десяти атомов углерода, и который является насыщенным или ненасыщенным и присоединен к остальной части молекулы с помощью одинарной связи. Моноциклические радикалы включают, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил. Полициклические радикалы включают, например, адамантил, норборнил, декалинил, 7,7-диметил-бицикло[2.2.1]гептанил и тому подобное.

«Арил» относится к углеводородной кольцевой системе, содержащей водород, от 6 до 18 атомов углерода и по меньшей мере одно ароматическое кольцо. Арильный радикал может быть моноциклической, бициклической, трициклической или тетрациклической кольцевой системой, которая может включать конденсированные или мостиковые кольцевые системы. Арильные радикалы включают, но не ограничиваются ими, арильные радикалы, полученные из ацеантрилена, аценафтилена, ацефенантрилена, антрацена, азулена, бензола, хризена, фторантена, флуорена, as-индацена, s-индацена, индана, индена, нафталина, феналена, фенантрена, плеиадена, пирена и трифенилена. В одном варианте осуществления арил представляет собой фенил или нафтил, а в другом варианте осуществления представляет собой фенил.

«Аралкил» относится к радикалу формулы -R_bR_c, где R_b представляет собой алкиленовую цепь, как определено здесь, и R_c представляет собой один или несколько арильных радикалов, как определено здесь, например, бензил, дифенилметил и тому подобное.

«Гетероциклил» относится к стабильному 3-18-членному ароматическому или неароматическому кольцевому радикалу, который состоит из двух-двенадцати атомов углерода и от одного до шести гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы. Если не указано иное конкретно в описании, гетероциклильный радикал может быть моноциклической, бициклической, трициклической или тетрациклической кольцевой системой, которая может включать конденсированные или мостиковые кольцевые системы; и атомы азота, углерода или серы в гетероциклильном радикале могут быть необязательно окислены; атом азота может быть необязательно кватернизован; и гетероциклильный радикал может быть частично или полностью насыщенным. Примеры или ароматические гетероциклильные радикалы перечислены ниже в определении гетероарилов (то есть гетероарил является подмножеством гетероциклила). Примеры неароматических гетероциклильных радикалов включают, но не ограничиваются ими, диоксоланил, тиенил[1,3]дитианил, декагидроизохинолил, имидазолинил, имидазолидинил, изотиазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, октагидроиндолил, октагидроизоиндолил, 2-оксопиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролидинил, оксазолидинил, пиперидинил, пиперазинил, 4-пиперидонил, пирролидинил, пиразолидинил, пиразолопиримидинил, хинуклидинил, тиазолидинил, тетрагидрофурил, триоксанил, тритианил, триазинанил, тетрагидропиранил, тиоморфолинил, тиаморфолинил, 1-оксотиоморфолинил и 1,1-диоксотиоморфолинил.

«Гетероциклилалкил» относится к радикалу формулы -R_bR_h, где R_b представляет собой алкиленовую цепь, как определено здесь, и R_h представляет собой гетероциклильный радикал, как определено здесь, и если гетероциклил представляет собой азотсодержащий гетероциклил, гетероциклил может быть присоединен к алкильному радикалу у атома азота.

«Гетероарил» относится к радикалу 5-14-членной кольцевой системы, содержащему атомы водорода, от одного до тринадцати атомов углерода, от одного до шести гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы, и по меньшей мере одно ароматическое кольцо. Для целей настоящего изобретения гетероарильный радикал может быть моноциклической, бициклической, трициклической или тетрациклической кольцевой системой, которая может включать конденсированные или мостиковые кольцевые системы; и атомы азота, углерода или серы в гетероарильном радикале могут быть необязательно окислены; атом азота может быть необязательно кватернизован. Примеры включают, но не ограничиваются ими, азепинил, акридинил, бензимидазолил, бензтиазолил, бензиндолил, бензодиоксолил, бензофуранил, бензооксазолил, бензотиазолил, бензотиадиазолил, бензо[b][1,4]диоксепинил, 1,4-бензодиоксанил, бензонафтофуранил, бензоксазолил, бензодиоксолил, бензодиоксинил, бензопиранил, бензопиранонил, бензофуранил, бензофуранонил, бензотиенил (бензотиофенил), бензотриазолил, бензо[4,6]имидазо[1,2-a]пиридинил, бензоксазолинонил, бензимидазолтионил, карбазолил, циннолинил, дибензофуранил, дибензотиофенил, фуранил, фуранонил, изотиазолил, имидазолил, индазолил, индолил, индазолил, изоиндолил, индолинил, изоиндолинил, изохинолил, индолизинил, изоксазолил, нафтиридинил, оксадиазолил, 2-оксоазепинил, оксазолил, оксиранил, 1-оксидопиридинил, 1-оксидопиримидинил, 1-оксидопиразинил, 1-оксидопиридазинил, 1-фенил-1Н-пирролил, феназинил, фенотиазинил, феноксазинил, фталазинил, птеридинил, птеридинонил, пуринил, пирролил, пиразолил, пиридинил, пиридинонил, пиразинил, пиримидинил, пиримидинонил, пиридазинил, пирролил, пиридо[2,3-d]пиримидинонил, хиназолинил, хиназолинонил, хиноксалинил, хиноксалинонил, хинолинил, изохинолинил, тетрагидрохинолинил, тиазолил, тиадиазолил, тиено[3,2-d]пиримидин-4-онил, тиено[2,3-d]пиримидин-4-онил, триазолил, тетразолил, триазинил и тиофенил (т.е. тиенил).

«Гетероарилалкил» относится к радикалу формулы -R_bR_i, где R_b представляет собой алкиленовую цепь, как определено здесь, и R_i представляет собой гетероарильный радикал, как определено здесь.

«Циано» относится к радикалу -CN.

«Галоген» относится к брому, хлору, фтору или йоду.

«Галогеналкил» относится к алкильному радикалу, как определено в настоящем описании, который замещен одним или несколькими радикалами галогена, как определено в настоящем описании, например, трифторметил, дифторметил, трихлорметил, 2,2,2-трифторэтил, 1-фторметил-2-фторэтил, 3-бром-2-фторпропил, 1-бромметил-2-бромэтил и тому подобное.

«Нитро» относится к радикалу -NO₂.

«Оксо» относится к заместителю =O.

«Триметилсиланил» относится к радикалу -Osi(CH₃)₃.

«Циклоалкилалкил» относится к радикалу формулы -R_bRg, где R_b представляет собой алкиленовую цепь, как определено здесь, и R_g представляет собой циклоалкильный радикал, как определено здесь.

«Конденсированный» относится к любой кольцевой системе, описанной в настоящем документе, которая конденсирована с имеющейся кольцевой структурой в соединениях по настоящему изобретению. Когда конденсированная кольцевая система представляет собой гетероциклил или гетероарил, любой атом углерода в имеющейся кольцевой структуре, которая становится частью конденсированной кольцевой системы, может быть заменен на атом азота.

«Пролекарство» означает соединение, которое может превращаться в физиологических условиях или путем сольволиза в биологически активное соединение, такое как соединение 1-1, описанное настоящем документе. Таким образом, термин «пролекарство» относится к метаболическому предшественнику соединения, описанного в настоящем документе, которое является фармацевтически приемлемым. Пролекарство может быть неактивным при введении субъекту, нуждающемуся в лечении, но превращается in vivo в активное соединение, согласно настоящему описанию. Пролекарства обычно быстро превращаются in vivo, с образованием «родительского» соединения, описанного в настоящем документе, например, путем гидролиза в крови. Пролекарственное соединение часто обеспечивает преимущества в растворимости, совместимости с тканями или замедленном высвобождении в организме млекопитающего (см., например, Bundgard, H., Design of Prodrugs (1985), pp. 7-9, 21-24 (Elsevier, Amsterdam). Обсуждение пролекарств имеется в публикации Higuchi, T., et al., ʺPro-drugs as Novel Delivery Systems,ʺ A.C.S. Symposium Series, Vol. 14, и в Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, обе из которых включены в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.

В одном варианте осуществления соединения, описанные в настоящем документе, служат пролекарством [9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]-изохинолин-2-ил]метанола (соединение 1-1); это означает, что соединение может быть превращено в физиологических условиях в соединение 1-1. В другом варианте осуществления соединения, описанные в настоящем документе, являются сами ингибиторами VMAT2 и, таким образом, активными аналогами соединения 1-1.

Соединения, описанные в настоящем документе, могут существовать в континууме твердых состояний от полностью аморфного до полностью кристаллического. Кроме того, некоторые кристаллические формы соединений, имеющих структуру формулы (I), формулы II, и субструктуры и их конкретные соединения, могут существовать в виде полиморфов. Кроме того, некоторые из соединений могут также образовывать сольваты с водой или другими органическими растворителями. Термин сольват используется в настоящем документе для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение, описанное в настоящем документе, и одну или несколько фармацевтически приемлемых молекул растворителя. Такие сольваты так же включены в объем настоящего изобретения.

Как будет понятно специалисту в данной области, любое из соединений, описанных в настоящем документе, может включать радиоактивные изотопы. Соответственно, также предполагается использование меченых изотопами соединений, идентичных описанным здесь, где один или несколько атомов заменены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе. Примеры изотопов, которые можно включить в описанные соединения, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как, но не ограничиваясь ими, ²H, ³H, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁸O, ¹⁷O, ³¹P, ³²P, ³⁵S, ¹⁸F и ³⁶Cl, соответственно. Некоторые меченые изотопом соединения, например те, в которые включены радиоактивные изотопы, такие как ³H и ¹⁴C, также полезны в анализах распределения лекарственного средства или субстрата в тканях. Изотопы водорода (³H) и углерода-14 (¹⁴C), меченные тритием, являются особенно предпочтительными с точки зрения их легкости получения и детектирования. Замена более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий (²Н), может обеспечить определенные терапевтические преимущества, являющиеся результатом более высокой метаболической стабильности, например, увеличенного периода полувыведения in vivo или пониженной требуемой дозы и, следовательно, могут быть предпочтительными в некоторых случаях. Меченые изотопами соединения обычно могут быть получены путем выполнения способов, обычно используемых в данной области.

В одном варианте осуществления R¹ структур (I) и (II) представляет собой водород и соединение имеет структуру (III) или (IV):

В одном варианте осуществления R¹ структур (I) и (II) представляет собой -C(=O)-R², где R² представляет собой алкил, гетероциклил или карбоциклил, и каждый из указанных алкила, гетероциклила или карбоциклила необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰, как определено выше, и соединение имеет структуру (V) или (VI):

В одном варианте осуществления, R₁ структуры (I) и (II) представляет собой -C(=O)-O-R₂, где R² представляет собой алкил и указанный алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰, как определено выше, и соединение имеет структуру (VI) или (VII):

В одном варианте осуществления R¹ структур (I) и (II) представляет собой -C(=O)N(R³)R², где R² представляет собой алкил, гетероциклил или карбоциклил, и каждый из указанных алкила, гетероциклила или карбоциклила необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰, как определено выше, и соединение имеет структуру (VIII) или (IX):

В одном варианте осуществления R¹ структуры (I) и (II) представляет собой алкил, где указанный алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰, как определено выше, и соединение имеет структуру (X) или (XI):

В одном варианте осуществления R¹ структуры (I) и (II) представляет собой -P(=O)(OR³)₂, и соединение имеет структуру формулы (XII) или (XIII):

В некоторых вариантах осуществления соединений, имеющих структуры (I)-(XIII), где алкил, гетероциклил или карбоциклил таких структур необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰. Необязательная замена в этом смысле означает, что алкильная, гетероциклильная или карбоциклильная группа либо (i) не замещена R¹⁰ или R²⁰, либо (ii) замещена одним или обоими R¹⁰ и R²⁰. При замещении одним или обоими R¹⁰ и R²⁰, такие заместители могут присутствовать по отдельности (т.е. один заместитель R¹⁰ или R²⁰) или несколько (т.е. более одного заместителя R¹⁰, более одного заместителя R²⁰ или комбинация одного или нескольких заместителей R¹⁰ и одного или нескольких заместителей R²⁰). Общее количество заместителей R¹⁰ и/или R²⁰ может варьироваться от нуля (т.е. когда алкил, гетероциклил или карбоциклил является незамещенным) до 10 (т.е. когда алкил, гетероциклил или карбоциклил замещены). При замещении общее количество заместителей R¹⁰ и R²⁰ обычно находится в пределах от 1 до 10, или от 1 до 8, или от 1 до 6, или от 1 до 4, или от 1 до 2. В тех вариантах осуществления, в которых алкил, гетероциклил или карбоциклил замещен R²⁰, такой заместитель R²⁰ может быть необязательно замещен R¹⁰ и/или R²², как определено выше в контексте R¹⁰ и/или R²⁰. Кроме того, в случае R²², такой заместитель R²² может быть необязательно замещен R¹⁰, также как определено в контексте R¹⁰ выше.

В одном варианте осуществления R¹ представляет собой -C(=O)алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰. Типичные группы «OR¹» этого варианта осуществления обозначены «A» в таблице 1.

В одном варианте осуществления R¹ представляет собой -C(=O)гетероциклил, где гетероциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰. Типичные группы «OR¹» этого варианта осуществления обозначены «B» в таблице 1.

В одном варианте осуществления R¹ представляет собой -C(=O)карбоциклил, где карбоциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰. Типичные группы «OR¹» этого варианта осуществления обозначены «C» в таблице 1.

В одном варианте осуществления R¹ представляет собой -C(=O)N(R₃)алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰. Типичные группы «OR¹» этого варианта осуществления обозначены «D» в таблице 1.

В одном варианте осуществления R¹ представляет собой -C(=O)N(R₃)карбоцикл, где карбоцикл необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰. Типичные группы «OR¹» этого варианта осуществления обозначены «E» в таблице 1.

В одном варианте осуществления R¹ представляет собой -P(=O)(OR³)₂ и типичные группы «OR¹» этого варианта осуществления обозначены «F» в таблице 1.

В одном варианте осуществления R¹ представляет собой -C(=O)Oалкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰. Типичные группы «OR¹» этого варианта осуществления обозначены «G» в таблице 1.

В одном варианте осуществления R¹ представляет собой алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰. Типичные группы «OR¹» этого варианта осуществления обозначены «H» в таблице 1.

Следует отметить, что некоторые соединения, перечисленные в таблице 1, могут быть охарактеризованы более чем одним классом. Например, соединение 5-5 идентифицируется как соединение «D», указывая, что R¹ представляет собой -C(=O)N(R₃)алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰ (в этом случае две группы R²⁰ взяты вместе для образования циклопропила). Однако соединение 5-5 можно также классифицировать как соединение «Е», указывая, что R¹ представляет собой -C(=O)N(R₃)карбоцикл, где карбоцикл необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰. Таким образом, приведенные ниже классификации не предназначены для исключения какого-либо конкретного соединения от попадания в несколько классов.

Кроме того, в таблице 1 (а также в таблицах 2-8 ниже) одновалентный кислород («О») обозначает точку присоединения заместителя «OR₁» к структуре (I) и не является компонентом группы R¹. Следует также отметить, что в целях сокращения, некоторые атомы азота изображены без их сопутствующих атомов водорода, как например, одновалентный «-N» вместо «-NH₂» и двухвалентный «-N-» вместо «-NH-». Специалист в данной области будет радиально распознавать и оценивать значение таких сокращенных обозначений.

Таблица 1

Типичные группы R¹

Соед.	O-R1
2-1		A
2-2		A
2-3		A
2-4		A
2-5		A
2-6		B
2-7		A
2-8		A
2-9		A
2-10		A
2-11		B
2-12		B
2-13		A
2-14		A
2-15		A
2-16		A
2-17		A
2-18		B
2-19		A
2-20		C
2-21		B
2-22		B
2-23		A
2-24		A
2-25		B
2-26		B
2-27		B
2-28		A
2-29		A
2-30		A
2-31		B
2-32		A
2-33		A
2-34		A
2-35		A
2-36		A
2-37		B
2-38		C
2-39		A
3-1		A
3-2		A
3-3		A
3-4		C
3-5		C
3-6		C
3-7		A
3-8		A
3-9		A
3-10		A
3-11		A
3-12		A
3-13		A
4-1		B
4-2		A
4-3		B
4-4		B
4-5		B
4-6		B
4-7		B
4-8		B
4-9		A
4-10		A
4-11		B
4-12		A
4-13		B
4-14		A
4-15		B
4-16		A
4-17		A
4-18		C
4-19		A
4-20		B
4-21		B
4-22		B
4-23		A
4-24		A
4-25		C
4-26		B
4-27		B
4-28		A
4-29		B
4-30		A
4-31		A
4-32		B
4-33		A
4-34		A
4-35		B
4-36		A
4-37		A
4-38		A
5-1		D
5-2		D
5-3		D
5-4		B
5-5		D
5-6		B
5-7		B
5-8		B
5-9		E
5-10		D
5-11		D
5-12		B
5-13		B
5-14		B
5-15		B
5-16		D
5-17		D
5-18		B
5-19		D
5-20		D
5-21		B
5-22		D
5-23		D
5-24		B
5-25		D
5-26		D
5-27		B
5-28		D
5-29		D
5-30		D
5-31		B
5-32		D
5-33		D
5-34		D
5-35		E
5-36		D
5-37		B
5-38		D
5-39		D
5-40		E
5-41		E
5-42		D
5-43		B
5-44		B
5-45		D
5-46		D
5-47		D
5-48		B
5-49		B
5-50		B
5-51		D
5-52		B
5-53		B
5-54		B
5-55		D
5-56		D
5-57		D
6-1		B
6-2		B
6-3		B
6-4		B
6-5		B
6-6		B
6-7		B
6-8		B
6-9		B
6-10		B
6-11		B
6-12		B
6-13		B
6-14		B
7-1		F
8-1		G
9-1		H
9-2		H
9-3		H
9-4		H
9-5		H
9-6		H
9-7		H
9-8		H
9-9		H
10-1		H
10-2		H
10-3		H
10-4		H
10-5		H
10-6		H
10-7		H

Соединения, описанные в настоящем описании, могут быть получены известными способами органического синтеза, включая способы, описанные ниже в схемах и более подробно в Примерах.

Cхема реакции 1

Спирт а конденсируют с кислотой с использованием гидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (EDCI) и диметиламинопиридина (DMAP) в метиленхлориде с получением сложного эфира с. Альтернативно, сложный эфир с может быть получен путем обработки спирта а хлорангидридом.

Хлорформиатное промежуточное соединение b может быть получено обработкой спирта a фосгеном или трифосгеном. Обработка b спиртом в присутствии основания, такого как DMAP, приводит к образованию карбонатного продукта c. Альтернативно, карбонат c может быть получен непосредственно путем обработки спирта a пирокарбонатом при катализе DMAP.

Карбамат с может быть получен путем обработки спирта а карбамоилхлоридом в метиленхлориде в присутствии основания.

Фосфонат с образуется путем обработки спирта а хлорфосфонатом и пиридином в метиленхлориде. Фосфоновую кислоту с можно получить удалением бензильных групп из фосфоната с палладием на угле в атмосфере водорода. Альтернативно, фосфоновую кислоту c можно получить непосредственно с POCl₃ в воде.

Cхема реакции 2

Спирт a конденсируют с BOC-защищенной аминокислотой с использованием гидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (EDCI) и диметиламинопиридина (DMAP) в диметилформамиде и метиленхлориде с последующим снятием защиты BOC-функциональностью, например, раствором трифторуксусной кислоты/метиленхлорида 50/50 с получением d. Альтернативно, спирт а может быть конденсирован с CBZ-защищенной аминокислотой с использованием DCC (1,3-дициклогексилкарбодиимида) с последующим снятием защиты CBZ-функциональностью путем гидрирования в соответствующих условиях.

Соединения, описанные в настоящем описании, могут обычно использоваться в виде свободной кислоты или свободного основания. Альтернативно, соединения могут быть использованы в форме кислотно-аддитивных солей или основно-аддитивных солей. Кислотно-аддитивные соли свободных аминосоединений могут быть получены способами, хорошо известными в данной области, и могут быть образованы из органических и неорганических кислот. Подходящие органические кислоты включают малеиновую, фумаровую, бензойную, аскорбиновую, янтарную, метансульфоновую, уксусную, трифторуксусную, щавелевую, пропионовую, винную, салициловую, лимонную, глюконовую, молочную, миндальную, коричную, аспарагиновую, стеариновую, пальмитиновую, гликолевую, глутаминовую и бензолсульфоновую кислоты. Подходящие неорганические кислоты включают хлористоводородную, бромистоводородную, серную, фосфорную и азотную кислоты. Основно-аддитивные соли включают те соли, которые образуются с карбоксилат-анионом, и включают соли, образованные с органическими и неорганическими катионами, такие как соли, выбранные из солей щелочных и щелочноземельных металлов (например, лития, натрия, калия, магния, бария и кальция), а также аммониевым ионом и его замещенными производными (например, дибензиламмоний, бензиламмоний, 2-гидроксиэтиламмоний и тому подобные). Таким образом, «фармацевтически приемлемая соль» предназначена для охвата любых и всех приемлемых солевых форм.

Как правило, соединения, используемые в описанных здесь реакциях, могут быть получены в соответствии с методами органического синтеза, известными специалистам в данной области, начиная с коммерчески доступных химических веществ и/или из соединений, описанных в химической литературе. «Коммерчески доступные химические препараты» могут быть получены из стандартных коммерческих источников, включая Acros Organics (Pittsburgh PA), Aldrich Chemical (Milwaukee WI, включая Sigma Chemical и Fluka), Apin Chemicals Ltd. (Milton Park UK), Avocado Research (Lancashire U.K.), BDH Inc. (Toronto, Canada), Bionet (Cornwall, U.K.), Chemservice Inc. (West Chester PA), Crescent Chemical Co. (Hauppauge NY), Eastman Organic Chemicals, Eastman Kodak Company (Rochester NY), Fisher Scientific Co. (Pittsburgh PA), Fisons Chemicals (Leicestershire UK), Frontier Scientific (Logan UT), ICN Biomedicals, Inc. (Costa Mesa CA), Key Organics (Cornwall U.K.), Lancaster Synthesis (Windham NH), Maybridge Chemical Co. Ltd. (Cornwall U.K.), Parish Chemical Co. (Orem UT), Pfaltz & Bauer, Inc. (Waterbury CN), Polyorganix (Houston TX), Pierce Chemical Co. (Rockford IL), Riedel de Haen AG (Hanover, Germany), Spectrum Quality Product, Inc. (New Brunswick, NJ), TCI America (Portland OR), Trans World Chemicals, Inc. (Rockville MD), и Wako Chemicals USA, Inc. (Richmond VA).

Способы, известные специалисту в данной области техники, могут быть определены с помощью различной справочной литературы и баз данных. Подходящая справочная литература и трактат, где подробно описывается синтез реагентов, подходящих в получении соединений по настоящему изобретению, или предоставляются ссылки на статьи, которые описывают получение, включают, например, ʺSynthetic Organic Chemistry,ʺ John Wiley & Sons, Inc., New York; S. R. Sandler et al., ʺOrganic Functional Group Preparations,ʺ 2nd Ed., Academic Press, New York, 1983; H. O. House, ʺModern Synthetic Reactionsʺ, 2nd Ed., W. A. Benjamin, Inc. Menlo Park, Calif. 1972; T. L. Gilchrist, ʺHeterocyclic Chemistryʺ, 2nd Ed., John Wiley & Sons, New York, 1992; J. March, ʺAdvanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure,ʺ 4th Ed., Wiley-Interscience, New York, 1992. Дополнительные подходящие справочники и трактат, в которых подробно описывается синтез реагентов, подходящих при получении соединений по настоящему изобретению, или предоставляются ссылки на статьи, описывающие получение, включают, например, Fuhrhop, J. and Penzlin G. ʺOrganic Synthesis: Concepts, Methods, Starting Materialsʺ, Second, Revised and Enlarged Edition (1994) John Wiley & Sons ISBN: 3-527-29074-5; Hoffman, R.V. ʺOrganic Chemistry, An Intermediate Textʺ (1996) Oxford University Press, ISBN 0-19-509618-5; Larock, R. C. ʺComprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparationsʺ 2nd Edition (1999) Wiley-VCH, ISBN: 0-471-19031-4; March, J. ʺAdvanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structureʺ 4th Edition (1992) John Wiley & Sons, ISBN: 0-471-60180-2; Otera, J. (editor) ʺModern Carbonyl Chemistryʺ (2000) Wiley-VCH, ISBN: 3-527-29871-1; Patai, S. ʺPatai's 1992 Guide to the Chemistry of Functional Groupsʺ (1992) Interscience ISBN: 0-471-93022-9; Quin, L.D. et al. ʺA Guide to Organophosphorus Chemistryʺ (2000) Wiley-Interscience, ISBN: 0-471-31824-8; Solomons, T. W. G. ʺOrganic Chemistryʺ 7th Edition (2000) John Wiley & Sons, ISBN: 0-471-19095-0; Stowell, J.C., ʺIntermediate Organic Chemistryʺ 2nd Edition (1993) Wiley-Interscience, ISBN: 0-471-57456-2; ʺIndustrial Organic Chemicals: Starting Materials and Intermediates: An Ullmann's Encyclopediaʺ (1999) John Wiley & Sons, ISBN: 3-527-29645-X, в 8 томах; ʺOrganic Reactionsʺ (1942-2000) John Wiley & Sons, в более чем 55 томах; и ʺChemistry of Functional Groupsʺ John Wiley & Sons, в 73 томах.

Конкретные и аналогичные реагенты также могут быть идентифицированы с помощью индексов известных химических веществ, полученных Chemical Abstract Service Американского химического общества, которые доступны в большинстве публичных и университетских библиотек, а также через онлайн-базы данных (the American Chemical Society, Washington, D.C., можно связаться для получения более подробной информации). Химические вещества, которые являются известными, но коммерчески не доступными, в каталогах, могут быть получены в специализированных лабораториях химического синтеза, где многие стандартные лаборатории химических реагентов (например, перечисленные выше) предоставляют услуги синтеза под заказ. Ссылочный материал для получения и отбора фармацевтических солей настоящего раскрытия предствляет собой P. H. Stahl & C. G. Wermuth ʺHandbook of Pharmaceutical Salts,ʺ Verlag Helvetica Chimica Acta, Zurich, 2002.

Как упомянуто выше, соединения, описанные в настоящем документе, и их соли, могут уменьшать подачу моноаминов в центральную нервную систему путем ингибирования транспортера моноаминов человека изоформы 2 (VMAT2). По существу, эти соединения и их соли могут иметь полезность в широком диапазоне терапевтических применений и могут быть использованы для лечения множества заболеваний, которые вызваны или связаны с ингибированием транспортера моноамина человека изоформы 2. Эти расстройства включают гиперкинетические расстройства, шизофрению и биполярное расстройство.

В одном варианте осуществления заболевания, которые могут быть подвергнуты лечению соединениями, описанными в настоящем документе, включают, но не ограничиваются ими, лечение гиперкинетических расстройств, таких как болезнь Хантингтона, поздняя дискинезия, синдром Туретта и тики.

В другом варианте осуществления соединения, описанные в настоящем документе, и их соли, могут гидролизоваться в организме млекопитающего до соединений, которые могут ингибировать транспортер моноаминов человека изоформы 2. Как таковые, эти соединения и их соли могут иметь дополнительную полезность в изменении свойств in vivo метаболита у млекопитающих, таких как максимальная концентрация или продолжительность действия.

Соединения, описанные в настоящем документе, такие как [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол (также называемые в настоящем документе соединением 1-1) могут с меньшей вероятностью проявлять фармакокинетическую вариабельность. Эта уменьшенная вариабельность может быть связана с уменьшением взаимодействия с метаболическим путем, связанным с CYP2D6. Без ограничения теорией, такие соединения, таким образом, могут обладать меньшим потенциалом для межлекарственного взаимодействия (DDI), связанного с механизмом CYP2D6.

В другом варианте осуществления раскрыты фармацевтические композиции, содержащие один или несколько ингибиторов обратного захвата моноамина (то есть ингибиторы VMAT2). Для осуществления введения соединения, описанные в настоящем документе, могут быть составлены в виде фармацевтических композиций. Фармацевтические композиции содержат ингибитор обратного захвата моноамина, описанный в настоящем документе, и фармацевтически приемлемый эксципиент, носитель и/или разбавитель. Ингибитор VMAT2 присутствует в композиции в количестве, которое эффективно для лечения конкретного нарушения, то есть в количестве, достаточном для уменьшения подачи моноаминов в центральную нервную систему и предпочтительно с приемлемой токсичностью для пациента. Специалисты в данной области могут легко определить соответствующие концентрации и дозы.

Как понятно специалисту в области медицины, термины «лечить» и «лечение» относятся к лечению заболевания, нарушения или состояния субъекта (т.е. пациента) (см., например, Stedman's Medical Dictionary). Термины «лечение» и «лечить» охватывают как превентивное, то есть профилактическое, так и терапевтическое, то есть радикальное и/или паллиативное лечение. Таким образом, термины «лечение» и «лечить» включают терапевтическое лечение пациентов, с уже развитым заболеванием, в частности, в явном виде. Терапевтическое лечение может быть симптоматическим лечением с целью облегчения симптомов конкретного показания или каузальной терапией с целью устранения или частичного устранения причин заболевания или остановки или замедления прогрессирования заболевания. Таким образом, композиции и способы, описанные в настоящем документе, могут быть использованы, например, в качестве терапевтического лечения в течение определенного периода времени, а также для хронической терапии. Кроме того, термины «лечение» и «лечить» включают профилактическое лечение, то есть лечение пациентов с риском развития заболевания, упомянутого выше, таким образом снижая риск.

Субъект, нуждающийся в композициях и способах, описанных в настоящем документе, включает субъекта, который был диагностирован специалистом в области медицины и психиатрии с гиперкинетическим расстройством (например, поздней дискинезией). Субъектом (пациентом), подлежащим лечению, может быть млекопитающее, включая человека или примата, отличного от человека. Млекопитающее может быть домашним животным, таким как кошка или собака.

Терапевтический и/или профилактический эффект включает, например, улучшение клинического исхода, терапевтическое лечение, и профилактические или превентивные меры, где целью является предотвращение или замедление или задержка (уменьшение) нежелательного физиологического изменения или нарушения или предотвращение или замедление или задержка (уменьшение) развития или тяжести такого нарушения. Профилактическое введение композиции в настоящем описании можно начать при первом лечении лекарственными средствами, блокирующими дофаминовый рецептор, такими как нейролептики. Как было сказано в настоящем описании, благоприятные или желаемые клинические результаты лечения субъекта включают, но ими не ограничиваются, снижение, уменьшение или облегчение симптомов, которые возникают или связаны с заболеванием, состоянием или расстройством, подлежащим лечению; уменьшение возникновения симптомов; улучшение качества жизни; более длительное состояние без заболевания (т.е. снижение вероятности или склонности субъекта к появлению симптомов, на основании которых производится диагностика заболевания); уменьшение степени заболевания; стабилизированное (то есть не ухудшающееся) состояние заболевания; задержка или замедление прогрессирования заболевания; улучшение или временное облегчение болезненного состояния; и ремиссию (или частичная или полная) или обнаруживаемую или необнаруживаемую; и/или общую выживаемость. «Лечение» также может означать продление выживаемости по сравнению с ожидаемой выживаемостью, если пациент не получал лечение. Субъекты, нуждающиеся в лечении, включают тех, кто уже имеет состояние или расстройство, а также субъекты, предрасположенные иметь или с риском развития заболевания, состояния или расстройства (например, ПД или других состояний или расстройств, описанных в настоящем документе), и тех, у которых заболевание, состояние или расстройство должны быть предотвращены (т.е. уменьшение вероятности возникновения заболевания, расстройства или состояния). Терапевтически эффективное количество одного из соединений, описанных в настоящем документе, в количестве соединения, которое обеспечивает статистически или клинически значимый терапевтический и/или профилактический эффект субъекту, получавшему лечение.

Способы определения эффективности терапевтического средства для лечения гиперкинетического расстройства обычно практикуются специалистом в области медицины и клинической области. В качестве примера, субъект с гиперкинетическим расстройством может быть диагностирован, контролироваться и оцениваться по шкале оценки аномальных непроизвольных движений (AIMS). AIMS представляет собой структурированное неврологическое исследование, разработанное в 1976 году и широко применяемое при оценке нарушений движения. Оно состоит из семи различных оценок регионарных непроизвольных движений тела, которые оценивают по шкале от нуля до четырех, при этом нуль оценивается как отсутствует, а четыре оценивается как сильно выраженный.

Характеристика любого из соединений, имеющих структуру формулы (I), (II), включая любые их субструктуры и конкретные соединения, может быть определена с использованием способов, описанных в настоящем документе, и в данной области. Например, снижение дофамина может быть определено с использованием анализа локомоторной активности (LMA). Другая модель животного in vivo включает тест условной реакции избегания (CAR), которая, как было показано, является эффективной и надежной доклинической моделью для оценки антипсихотической активности соединений.

Настоящее изобретение дополнительно предусматривает фармацевтические композиции, содержащие любое одно из соединений, описанных в настоящем документе (соединение формулы I, формулы II и включая все субструктуры и конкретные соединения, описанные в настоящем документе), и фармацевтически приемлемый эксципиент для использования в способах лечения неврологических расстройств и заболеваний, таких как гиперкинетические расстройства.

Фармацевтически приемлемые носители и/или разбавители хорошо известны специалистам в данной области. Для композиций, полученных в виде жидких растворов, приемлемые носители и/или разбавители включают физиологический раствор и стерильную воду и могут необязательно включать антиоксиданты, буферы, бактериостатические средства и другие обычные добавки. Композиции также могут быть составлены в виде пилюль, капсул, гранул или таблеток, которые содержат, помимо ингибитора VMAT2, разбавители, диспергирующие и поверхностно-активные вещества, связующие вещества и лубриканты. Специалист в данной области может дополнительно сформулировать ингибитор VMAT2 соответствующим образом и в соответствии с принятыми методами, такими как описанные в Remington's Pharmaceutical Sciences, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA 1990.

Фармацевтические композиции, предлагаемые в настоящей заявке, могут быть составлены в виде лекарственных форм с немедленным или модифицированным высвобождением, включая формы с отсроченным, замедленным, прерывистым, контролируемым, направленным и программируемым высвобождением. Фармацевтические композиции также могут быть получены в виде суспензии, твердого вещества, полутвердого вещества или тиксотропной жидкости для введения в качестве имплантируемого депо.

В другом варианте осуществления в настоящей заявке предлагается способ лечения расстройств центральной или периферической нервной системы. Такие способы включают введение соединения, описанного в настоящем документе, теплокровному животному (например, человеку) в количестве, достаточном для лечения этого состояния. В этом контексте «лечение» включает профилактическое введение. Такие способы включают системное введение ингибитора VMAT2, описанного в настоящем документе, предпочтительно в форме фармацевтической композиции, как описано выше. Как используется в настоящем описании, системное введение включает пероральные и парентеральные способы введения. Для перорального введения подходящие фармацевтические композиции включают порошки, гранулы, пилюли, таблетки и капсулы, а также жидкости, сиропы, суспензии и эмульсии. Эти композиции могут также включать ароматизаторы, консерванты, суспендирующие, сгущающие и эмульгирующие агенты и другие фармацевтически приемлемые добавки. Для парентерального введения соединения, описанные в настоящем документе, могут быть получены в водных растворах для инъекций, которые могут содержать в дополнение к ингибитору VMAT2 буферы, антиоксиданты, бактериостатические средства и другие добавки, обычно используемые в таких растворах.

ПРИМЕРЫ

Аналитический метод - ультравысокоэффективная жидкостная хроматография (UPLC-МС)

Платформа: Agilent 1260 серии UPLC: оснащенная автодозатором, УФ детектор (220 нM и 254 нM), термостат колонки, МС детектор (электрораспыление);

Колонка: Waters XBridge BEH C18 XP, 2,5 микрон, 3×50 мм;

Подвижная фаза: A=вода, 0,025% TFA; B=ацетонитрил, 0,025% TFA;

Скорость потока: 1,5 мл/мин;

Градиент: 10% B/90% A до 90% B/10% A в течение 1,5 мин, затем удерживание 0,3 мин, возвращение к начальным условиям в течение 0,5 мин; общее время работы 2,5 мин;

В целях сокращения некоторые атомы азота и/или атомы кислорода изображены в следующих примерах без их сопутствующих атомов водорода, как например, одновалентный «-N» вместо «-NH₂» и «-O» вместо «-OH», и двухвалентный «-N-» вместо «-NH-». Специалист в данной области будет радиально распознавать и оценивать значение таких сокращенных обозначений.

Пример 1

Синтез [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол соль HCl

Стадия 1A: (3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-карбонитрил ( 1a )

В 3-литровую трехгорлую круглодонную колбу загружали DMSO (1,1 л) и TOSMIC (104 г, 532,5 ммоль, 1,3 экв.). К этой смеси загружали KO-t-Bu (119,5 г, 1,065 моль) сразу при температуре окружающей среды (22°C). Наблюдали экзотермию и температура смеси повышалась до 39°C. Затем суспензию тетрабеназина (130 г, 410 ммоль) в DMSO (500 мл) медленно добавляли в реакционную смесь в течение 25 мин (наблюдалась небольшая экзотермия). К этой смеси добавляли EtOH (10,5 мл) и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 3 ч. Анализ ЖХ-МС смеси показал присутствие 1a и исходного материала при отношении ~4:1. Смесь выливали в холодную воду (9 л). Смесь затем экстрагировали EtAOc (4 л). Водный слой экстрагировали EtOAc (2 л). Объединенные органические вещества промывали насыщенным солевым раствором (2 л), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток растворяли в ацетоне (200 мл) и загружали на колонку с силикагелем (2 кг силикагеля, заполненного гексанами). Колонку элюировали сначала гексаном (2,5 л), а затем 5-20% ацетона в гексане. Фракции, содержащие 1а и другие примеси, объединяли и концентрировали с получением оранжевого масла (72 г), которое растворяли в ацетоне (100 мл) и загружали на колонку с силикагелем (1 кг силикагеля, заполненного гексаном). Колонку элюировали сначала гексаном (1 л), затем 5% ацетона в гексане (2 л), 10% ацетона в гексане (2 л), 15% ацетона в гексане (2 л), и 20% ацетона в гексане (2 л). Фракции, содержащие >90% чистоты, объединяли и концентрировали с получением (3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-карбонитрил 1a в виде оранжевого твердого вещества (61 г, m/z 329,2 [MH⁺]). Фракции, содержащие смесь 1а и исходное вещество, собирали и концентрировали с получением 48 г вещества, которое растворяли в DMSO (50 мл) и добавляли к смеси TOSMIC (25 г) и KO-t-Bu (28,7 г) в DMSO (250 мл), как показано выше. Остаток растворяли в ацетоне (10 мл) и загружали на колонку с силикагелем (600 г силикагеля, заполненного гексаном). Колонку элюировали сначала гексаном (800 мл), а затем 5-20% ацетона в гексане. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали с получением оранжевого твердого вещества 1a (33 г).

Стадия 1B: (3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-карбоновая кислота ( 1b )

В реактор под давлением емкостью 1 галлон загружали суспензию 1а (94 г, 286 ммоль) в метаноле (940 мл) и NaOH (343 г, 8,6 моль) в воде (940 мл). Эту смесь перемешивали при 120°C (внутренняя температура) в течение 67 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и переносили в круглодонную колбу. Смесь концентрировали в роторном вакуумном испарителе до ~1 л. Затем значение рН смеси доводили до 7, используя водную 6н. HCl при охлаждении. Смесь экстрагировали DCM (2×3 л и 1×2 л). Объединенные органические вещества сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением темного остатка (88 г). Темный остаток помещали в ацетонитрил (500 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Смесь фильтровали и твердое вещество промывали ацетонитрилом (50 мл). Твердое вещество сушили в вакууме в течение 2 ч с получением светло-коричневого твердого вещества (42 г, 49%). Это твердое вещество объединяли с фильтратом и концентрировали до остатка. Остаток растворяли в DCM (150 мл) и загружали на колонку с силикагелем, заполненную DCM. Колонку элюировали 0-25% метанола в DCM. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали с получением (3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-карбоновой кислоты 1b в виде бледно-коричневого твердого вещества (71 г, выход 71%, чистота 92%, m/z 348,2 [MH⁺]).

Стадия 1C: (2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол ( 1-1 )

В круглодонную колбу емкостью 3 л загружали 1b (73,5 г, 211,5 ммоль) и THF (1,48 л). Эту смесь перемешивали и охлаждали до 10°C (внутренняя температура). К этой смеси добавляли 1 M LAH в THF (423 мл, 423 ммоль) медленно в течение 20 мин, сохраняя температуру ниже 20°C. Охлаждающую баню удаляли и смесь нагревали до комнатной температуры. Смесь нагревали до 55°C и перемешивали в течение 30 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры и затем до 10°C. Медленно добавляли EtOAc (30 мл) для гашения непрореагировавшего LAH, затем этанол (30 мл). Затем к этой смеси добавляли воду (150 мл). Затем смесь концентрировали для удаления большинства органических растворителей. Затем смесь разбавляли водой (700 мл) и DCM (1 л). Суспензию фильтровали через слой целита. Осадок на фильтре промывали DCM (2×500 мл). Объединенные фильтраты помещали в делительную воронку и слои разделяли. Водный слой экстрагировали DCM (1 л). Объединенные органические вещества сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением темного остатка. Остаток хроматографировали на колонке с силикагелем, используя 0-10% метанола в DCM в качестве элюента. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали с получением пенистого оранжевого остатка. К этому остатку добавляли гексан (100 мл) и концентрировали при пониженном давлении при 45°С в течение 2 ч с получением [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанола 1-1 в виде бледно-коричневого твердого вещества (51 г, 72%, 95% чистоты ВЭЖХ на 220 нм, m/z 334,2 [MH⁺]). Этот материал можно дополнительно очистить хроматографией на силикагеле, используя 0-10% метанола в DCM или этилацетате в качестве элюента.

Стадия 1D: [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол соль HCl ( 1-1 HCl )

В 2 л круглодонную колбу загружали 1-1 (43 г, 129 ммоль) и диэтиловый эфир (860 мл). Эту смесь перемешивали и охлаждали до 15°C (внутренняя температура). К этой смеси медленно добавляли 2 M HCl в диэтиловом эфире (97 мл, 193 ммоль) в течение 15 мин. Образовался белый осадок. Охлаждающую баню удаляли и смесь нагревали до комнатной температуры. Смесь затем перемешивали в течение 45 мин. Смесь фильтровали и отфильтрованное твердое вещество промывали диэтиловым эфиром (100 мл), MTBE (100 мл) и затем гексаном (100 мл). Затем твердое вещество сушили в вакуумной печи при 40°C в течение 18 часов. [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол соль HCl 1-1 HCl Выделяли в виде не совсем белого твердого вещества (44,7 г, выход 94%, m/z 334,2 [MH⁺]).

Пример 2

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-карбамоилпропаноат

Стадия 2A:

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол соль HCl (20,0 мг, 0,054 ммоль) и 3-карбамоилпропановую кислоту (7,6 г, 0,065 ммоль) растворяли в DCM (0,7 мл) затем N,N-диметилпиридин-4-амине (7,9 мг, 0,065 ммоль), N,N'-дициклогексилметандиимине (13,0 мг, 0,065 ммоль) и триметиламине (0,037 мл, 0,27 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Неочищенную реакционную смесь разбавляли 0,3 мл MeOH и очищали с помощью ВЭЖХ, получая [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-карбамоилпропаноат 2-1 (m/z 433,1 [MH⁺]).

В таблице 2 ниже представлены наблюдаемые (Набл.) отношения m/z иона других соединений, которые были получены в соответствии со способом, описанным в этом примере.

Таблица 2

Соед.	-O-R1	Название	Расч. масса	Набл. масса
2-1		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-карбамоилпропаноат	432,26	433,1
2-2		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(морфолин-4-ил)пропаноат	474,31	475,2
2-3		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидрохиназолин-3-ил)пропаноат	549,28	550,2
2-4		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(диметилкарбамоил)пропаноат	460,29	461,1
2-5		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-этансульфонамидопропаноат	496,26	497,2
2-6		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (3R)-1- бензилпирролидин-3-карбоксилат	520,33	521,2
2-7		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(диметиламино)пропаноат	432,3	433,2
2-8		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-[(2R,6S)-2,6-диметилморфолин-4-ил]ацетат	488,33	489,3
2-9		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-карбамоилацетат	418,25	419,1
2-10		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-(1-метилпирролидин-3-ил)ацетат	458,31	459,3
2-11		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (3R)-1-бензилпиперидин-3-карбоксилат	534,35	535,3
2-12		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 1-метилпиперидин-3-карбоксилат	458,31	4459,3
2-13		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(1H-1,2,3,4-тетразол-1-ил)пропаноат	457,27	458,1
2-14		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-нитропропаноат	434,24	435,1
2-15		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропаноат	487,34	488,3
2-16		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(пропан-2-сульфонамидо)пропаноат	510,28	511,2
2-17		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2,2-диметилпропаноат	417,29	418,31
2-18		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-метилоксетан-3-карбоксилат	431,27	432,32
2-19		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(пиперидин-1-ил)пропаноат	472,33	473,2
2-20		[(3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил бензоат	437,26	438,28
2-21		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 1-бензилазетидин-3-карбоксилат	506,31	507,2
2-22		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил оксан-4-карбоксилат	445,28	446,33
2-23		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(3-метил-1H-пиразол-1-ил)пропаноат	469,29	470,2
2-24		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-гидрокси-2-метилпропаноат	419,27	420,24
2-25		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 1-метилпиперидин-4-карбоксилат	458,31	459,2
2-26		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (3S)-1-бензилпирролидин-3-карбоксилат	520,33	521,2
2-27		[3-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)-2,2,5,5-тетраметилпирролидин-1-ил]оксиданил	501,33	502,2
2-28		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-метил-3-(1H-пиррол-1-ил)бутаноат	482,31	483,2
2-29		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(5-метил-1H-пиразол-1-ил)пропаноат	469,29	470,2
2-30		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-(2,5-диоксоимидазолидин-4-ил)ацетат	473,25	474,1
2-31		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (4S)-2,6-диоксо-1,3-диазинан-4-карбоксилат	473,25	474,3
2-32		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(диэтиламино)пропаноат	460,33	461,1
2-33		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-[(4S)-2,5-диоксоимидазолидин-4-ил]ацетат	473,25	474,1
2-34		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил гексаноат	431,3	432,35
2-35		2-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-2-оксоэтан-1-сульфоновая кислота	455,2	456,16
2-36		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 4-(диметиламино)бутаноат	446,31	447,1
2-37		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 1-метансульфонилпиперидин-3-карбоксилат	522,28	523,2
2-38		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2,2,3,3-тетраметилциклопропан-1-карбоксилат	457,32	458,38
2-39		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(2-оксо-2,3-дигидро-1,3-бензоксазол-3-ил)пропаноат	522,27	523,2

Пример 3

5-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-3,3-диметил-5-оксопентановая кислота

Стадия 3A:

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол соль HCl (9,2 мг, 0,025 ммоль), 4,4-диметилоксан-2,6-дион (3,6 мг, 0,025 ммоль), N,N-диметилпиридин-4-амин (1,0 мг, 0,008 ммоль) и этилбис(пропан-2-ил)амин (0,018 мл, 0,10 ммоль) объединяли в 0,7 мл DCM и нагревали до 50°C в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли 0,4 мл ацетонитрила и очищали с помощью ВЭЖХ с получением 5-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-3,3-диметил-5-оксопентановой кислоты 3-1 (m/z 476,1 [MH⁺]).

В таблице 3 ниже представлено наблюдаемое (Набл.) отношение m/z иона других соединений, которые были получены в соответствии со способом, описанным в этом примере.

Таблица 3

Соед.	-O-R1	Название	Расч. масса	Набл. масса
3-1		5-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-3,3-диметил-5-оксопентановая кислота	475,29	476,1
3-2		3-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-3-оксопропановая кислота	419,23	420,1
3-3		5-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-3-метил-5-оксопентановая кислота	461,28	462,2
3-4		2-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)циклопропан-1-карбоновая кислота	445,25	446,1
3-5		2-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)циклогексан-1-карбоновая кислота	487,29	488,2
3-6		2-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)циклогексан-1-карбоновая кислота	487,29	488,2
3-7		4-{[(3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота	461,28	462,13
3-8		5-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-5-оксопентановая кислота	447,26	448,2
3-9		2-[1-(2-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-2-оксоэтил)циклопентил]уксусная кислота	501,31	502,2
3-10		6-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-6-оксогексановая кислота	461,28	462,2
3-11		4-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-3,3-диметил-4-оксобутановая кислота	461,28	462,22
3-12		5-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-2,2-диметил-5-оксопентановая кислота	475,29	476,15
3-13		4-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-4-оксобутановая кислота	433,25	434,18

Пример 4

Синтез [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил пиперидин-4-карбоксилата

Стадия 4A:

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол соль HCl (9,2 мг, 0,025 ммоль), 1-[(трет-бутокси)карбонил]пиперидин-4-карбоновую кислоту (7,8 мг, 0,034 ммоль), N,N'-дициклогексилметандиимин (6,2 мг, 0,03 ммоль), N,N-диметилпиридин-4-амин (3,0 мг, 0,025 ммоль) и этилбис(пропан-2-ил)амин (0,02 мл, 0,1 ммоль) объединяли в DCM (1 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали, концентрировали и повторно растворяли в DCM (1 мл). Затем добавляли TFA (0,050 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение одного часа. Реакционную смесь концентрировали и повторно растворяли в MeOH (1 мл) и очищали с помощью ВЭЖХ с получением [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метила пиперидин-4-карбоксилата 4-1 (m/z 445,2 [MH⁺]).

В таблице 4 ниже представлены наблюдаемые (Набл.) отношения m/z иона других соединений, которые были получены в соответствии со способом, описанным в этом примере.

Таблица 4

Соед.	-O-R1	Название	Расч. масса	Набл. масса
4-1		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил пиперидин-4-карбоксилат	444,3	445,2
4-2		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2S)-2-амино-3-фенилпропаноат	480,3	481,3
4-3		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (3S)-морфолин-3-карбоксилат	446,28	447,2
4-4		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (1R,2R)-2-аминоциклогексан-1-карбоксилат	458,31	459,2
4-5		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (3R)-морфолин-3-карбоксилат	446,28	447,1
4-6		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2,3-дигидро-1H-изоиндол-1-карбоксилат	478,28	479,3
4-7		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (3S)-пирролидин-3-карбоксилат	430,28	431,2
4-8		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил пирролидин-3-карбоксилат	430,28	431,2
4-9		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-[1-(аминометил)циклогексил]ацетат	486,35	487,2
4-10		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-(пиперидин-3-ил)ацетат	458,31	459,2
4-11		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-аминоциклопентан-1-карбоксилат	444,3	445,1
4-12		[(3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2S)-2-амино-3-метилбутаноат	432,3	433,3
4-13		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (3S)-пиперидин-3-карбоксилат	444,3	445,1
4-14		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-(1-аминоциклогексил)ацетат	472,33	473,3
4-15		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-метилпиперидин-4-карбоксилат	458,31	459,3
4-16		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-(пирролидин-3-ил)ацетат	444,3	445,3
4-17		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-амино-4-метилпентаноат	446,31	447,3
4-18		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 4-(аминометил)бензоат	466,28	467,3
4-19		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-амино-2-(2-метоксифенил)ацетат	496,29	497,3
4-20		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил пиперидин-3-карбоксилат	444,3	445,1
4-21		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-1-карбоксилат	492,3	493,3
4-22		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 4-метоксипиперидин-4-карбоксилат	474,31	475,2
4-23		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-[(2R)-пирролидин-2-ил]ацетат	444,3	445,1
4-24		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-аминопропаноат	404,27	405,2
4-25		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (1S,2S)-2-аминоциклогексан-1-карбоксилат	458,31	459,2
4-26		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (3R)-пирролидин-3-карбоксилат	430,28	431,2
4-27		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил морфолин-2-карбоксилат	446,28	447,1
4-28		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-(пирролидин-2-ил)ацетат	444,3	445,1
4-29		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (3R)-пиперидин-3-карбоксилат	444,3	445,1
4-30		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2R)-2-амино-2-[4-(трифторметил)фенил]ацетат	534,27	535,3
4-31		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 4-аминобутаноат	418,28	419,2
4-32		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил морфолин-3-карбоксилат	446,28	447,2
4-33		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2S)-2-амино-2-фенилацетат	466,28	467,3
4-34		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-(пиперидин-2-ил)ацетат	458,31	459,2
4-35		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 4-метилпиперидин-4-карбоксилат	458,31	459,2
4-36		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-[(2S)-пирролидин-2-ил]ацетат	444,3	445,1
4-37		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-(пиперазин-1-ил)пропаноат	473,33	474,3
4-38		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-[(3R)-пирролидин-3-ил]ацетат	444,3	445,3

Пример 5

3-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]пропановая кислота

Стадия 5A:

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол соль HCl (300 мг, 0,81 ммоль) и 4-нитрофенилхлорформиат (246 мг, 1,22 ммоль) растворяли в DCM и охлаждали до 0°C. Затем добавляли этилбис(пропан-2-ил)амин (0,54 мл, 3,25 ммоль), нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Неочищенную реакционную смесь затем концентрировали и очищали колоночной хроматографией (0%-100% EtOAc в гексане) с получением [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 4-нитрофенилкарбоната 5a (360 мг, 0,722 ммоль) в виде бледно-желтой пены с выходом 89% (m/z 499,2 [MH⁺]).

Стадия 5B:

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 4-нитрофенилкарбонат (12 мг, 0,025 ммоль), 3-аминопропановую кислоту (3,0 мг, 0,030 ммоль) и этилбис(пропан-2-ил)амин (0,017 мл, 0,10 ммоль) растворяли в DMF (0,5 мл) и нагревали до 50°C в течение ночи. Неочищенную реакционную смесь затем разбавляли MeOH (0,5 мл) и очищали с помощью ВЭЖХ с получением 3-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]пропановой кислоты 5-1 (m/z 449,1 [MH⁺]).

В таблице 5 ниже представлены наблюдаемые (Набл.) отношения m/z иона других соединений, которые были получены в соответствии со способом, описанным в этом примере.

Таблица 5

Соед.	-O-R1	Название	Расч. масса	Набл. масса
5-1		3-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]пропановая кислота	448,26	449,1
5-2		(3S)-3-{[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]метил}-5-метилгексановая кислота	518,34	519,2
5-3		4-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]бутановая кислота	462,27	463,1
5-4		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-[(диметиламино)метил]морфолин-4-карбоксилат	503,34	504,2
5-5		1-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]циклопропан-1-карбоновая кислота	460,26	461
5-6		2-[4-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)морфолин-2-ил]уксусная кислота	504,28	505,2
5-7		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 4-метилпиперазин-1-карбоксилат	459,31	460,13
5-8		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3-оксопиперазин-1-карбоксилат	459,27	459,3
5-9		(1R,2S,3R,4S)-3-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-карбоновая кислота	512,29	513,2
5-10		4-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]-3-гидроксибутановая кислота	478,27	479,1
5-11		3-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]-2-гидроксипропановая кислота	464,25	465,1
5-12		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2,2,4-триметилпиперазин-1-карбоксилат	487,34
5-13		1-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)азетидин-2-карбоновая кислота	460,26	461,1
5-14		1-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)пиперидин-3-карбоновая кислота	488,29	489,1
5-15		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 4-метансульфонилпиперазин-1-карбоксилат	523,27	524,15
5-16		2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)(метил)амино]-2-метилпропановая кислота	476,29
5-17		(2R)-2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)(метил)амино]пропановая кислота	462,27	463,1
5-18		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 4-циклогексилпиперазин-1-карбоксилат	527,37	528,25
5-19		(3R)-3-{[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]метил}-5-метилгексановая кислота	518,34	519,25
5-20		(2S)-2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]-4-метилпентановая кислота	490,3	491,2
5-21		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2-метил-3-оксопиперазин-1-карбоксилат	473,29	474,2
5-22		3-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]-3-метилбутановая кислота	476,29	477,1
5-23		1-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]циклогексан-1-карбоновая кислота	502,3	503,2
5-24		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (1S,4S)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-карбоксилат	458,28	459,2
5-25		4-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)(метил)амино]бутановая кислота	476,29	477,1
5-26		3-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]бутановая кислота	462,27	463,15
5-27		1-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)азетидин-3-карбоновая кислота	460,26	461,0
5-28		2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)(метил)амино]пропановая кислота	462,27	463,2
5-29		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил N,N-диметилкарбамат	404,27	405,32
5-30		2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]уксусная кислота	434,24	435,1
5-31		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 4-(пропан-2-ил)пиперазин-1-карбоксилат	487,34	488,2
5-32		2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)(метил)амино]-3-метилбутановая кислота	490,3	491,2
5-33		(2S)-2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)(метил)амино]пропановая кислота	462,27	463,1
5-34		2-(1-{[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]метил}циклогексил)уксусная кислота	530,34	531,2
5-35		(1R,2R)-2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]циклогексан-1-карбоновая кислота	502,3	503,2
5-36		4-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]-3,3-диметилбутановая кислота	490,3	491,2
5-37		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2R)-2-метилморфолин-4-карбоксилат	460,29	461,1
5-38		3-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]-2,2-диметилпропановая кислота	476,29	477,1
5-39		1-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]циклопентан-1-карбоновая кислота	488,29	489,3
5-40		3-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]бицикло[2.2.1]гептан-2-карбоновая кислота	514,3	515,2
5-41		2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]циклогексан-1-карбоновая кислота	502,3	503,2
5-42		2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)(метил)амино]уксусная кислота	448,26	449,1
5-43		1-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)-4-(диметиламино)пиперидин-4-карбоновая кислота	531,33	532,3
5-44		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2S)-2-метилморфолин-4-карбоксилат	460,29	461,1
5-45		(2R)-2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]пропановая кислота	448,26	449,1
5-46		2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)(метил)амино]-4-метилпентановая кислота	504,32	505,2
5-47		(2S)-2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]пропановая кислота	448,26	449,1
5-48		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил декагидропиперазино[1,2-a]азепин-2-карбоксилат	513,36	514,2
5-49		1-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)пирролидин-3-карбоновая кислота	474,27	475,2
5-50		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2R)-2,4-диметилпиперазин-1-карбоксилат	473,33	474,2
5-51		2-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]-2-метилпропановая кислота	462,27	463,2
5-52		1-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)пиперидин-4-карбоновая кислота	488,29	489,2
5-53		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2R,6S)-2,6-диметилморфолин-4-карбоксилат	474,31	475,2
5-54		(3R)-1-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)пиперидин-3-карбоновая кислота	488,29	489,2
5-55		3-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)(метил)амино]пропановая кислота	462,27	463,2
5-56		(2S)-4-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]-2-гидроксибутановая кислота	478,27	479,1
5-57		3-[({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)амино]-2-метилпропановая кислота	462,27	463,2

Пример 6

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил пиперазин-1-карбоксилат

Стадия 6A:

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 4-нитрофенилкарбонат 5a (12 мг, 0,025 ммоль), трет-бутил пиперазин-1-карбоксилат (6,0 мг, 0,030 ммоль) и этилбис(пропан-2-ил)амин (0,017 мл, 0,10 ммоль) растворяли в DCM (0,5 мл) и перемешивали в течение ночи. Затем, добавляли TFA (0,050 мл) и перемешивали в течение 4 часов. Неочищенные реакционные смеси затем разбавляли MeOH (0,5 мл) и очищали с помощью ВЭЖХ с получением [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил пиперазин-1-карбоксилата 6-1 (m/z 446,2 [MH⁺]).

В таблице 6 ниже представлены наблюдаемые (Набл.) отношения m/z иона других соединений, которые были получены в соответствии со способом, описанным в этом примере.

Таблица 6

Соед.	-O-R1	Название	Расч. масса	Набл. масса
6-1		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил пиперазин-1-карбоксилат	445,29	446,2
6-2		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2R,5S)-2,5-диметилпиперазин-1-карбоксилат	473,33	474,2
6-3		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2R)-2-метилпиперазин-1-карбоксилат	459,31	460,2
6-4		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-3-карбоксилат	471,31	472,2
6-5		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2S)-2-метилпиперазин-1-карбоксилат	459,31	460,2
6-6		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-карбоксилат	473,33	474,3
6-7		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2R)-2-(гидроксиметил)пиперазин-1-карбоксилат	475,3	476,1
6-8		(2R)-4-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}карбонил)пиперазин-2-карбоновая кислота	489,28	490,2
6-9		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (3S)-3-цианопиперазин-1-карбоксилат	470,29	471,2
6-10		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (1S,4S)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилат	457,29	458,2
6-11		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 3,5-диметилпиперазин-1-карбоксилат	473,33	474,2
6-12		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (2R,6S)-2,6-диметилпиперазин-1-карбоксилат	473,33
6-13		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил (3R)-3-метилпиперазин-1-карбоксилат	459,31	460,1
6-14		[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил 2,5-диметилпиперазин-1-карбоксилат	473,33	474,2

Пример 7

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил диэтилфосфат

Стадия 7A:

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол соль HCl (100 мг, 0,27 ммоль) и диэтилхлорфосфонат (140 мг, 0,81 ммоль) растворяли в DCM (2 мл), затем добавляли этилбис(пропан-2-ил)амин (0,18 мл, 1,1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Неочищенную реакционную смесь разбавляли DCM (10 мл), промывали насыщ. NH₄Cl (5 мл), затем насыщ. NaHCO₃ (5 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенную смесь очищали колоночной хроматографией (0%-5% MeOH в DCM) с получением [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил диэтилфосфата 7-1 (69,0 мг, 0,15 ммоль) с выходом 56%. Затем соль HCl получали с использованием 1 н HCl в эфире (0,16 мл, 0,16 ммоль) (m/z 470,8[MH⁺]).

Пример 8

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил пропан-2-ил карбонат

Стадия 8A:

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол соль HCl (150 мг, 0,41 ммоль) растворяли в пиридине (12 мл) и охлаждали до -50°C. Затем, добавляли по каплям пропан-2-ил хлорформиат (1M) (8,1 мл, 8,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение трех часов. Неочищенную реакционную смесь разбавляли EtOAc (50 мл), промывали насыщ. NH₄Cl (20 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенную реакционную смесь очищали колоночной хроматографией (0%-5% MeOH в DCM) с получением [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил пропан-2-ил карбоната (100 мг, 0,24 ммоль) с выходом 59% (m/z 420,3 [MH⁺]).

Пример 9

(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-2-(метоксиметил)-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин

Стадия 9A:

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол соль HCl (15 мг, 0,041 ммоль) растворяли в безводном DMF (0,5 мл) и добавляли NaH (32 мг, 0,82 ммоль) и нагревали до 80°C. Смесь охлаждали до 0°C и добавляли MeI (0,003 мл, 0,041 ммоль) и перемешивали в течение 1 часа. Реакцию гасили насыщ. NH₄Cl (0,5 мл) и экстрагировали EtOAc (10 мл), неочищенную реакционную смесь концентрировали, повторно растворяли в MeOH (1 мл) и очищали с помощью ВЭЖХ (m/z 348,1 [MH⁺]) с получением (2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-2-(метоксиметил)-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолина 9-1.

В таблице 7 ниже представлены наблюдаемые (Набл.) отношения m/z иона других соединений, которые были получены в соответствии со способом, описанным в этом примере.

Таблица 7

Соед.	-O-R1	Название	Расч. масса	Набл. масса
9-1		(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-2-(метоксиметил)-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин	347,25	348,1
9-2		(2R,3S,11bR)-2-[(2-фторэтокси)метил]-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин	379,25	380,2
9-3		2-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-1-(4-фторфенил)этан-1-он	469,26	470,15
9-4		(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-2-[(²H3)метоксиметил]-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин	350,26	351,3
9-5		(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-2-[(метоксиметокси)метил]-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин	377,26	378,3
9-6		(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-2-[(2,2,2-трифторэтокси)метил]-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин	415,23	416,2
9-7		(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-2-[(3,3,3-трифторпропокси)метил]-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин	429,25	430,4
9-8		(2R,3S,11bR)-2-(этоксиметил)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин	361,26	362,1
9-9		(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-2-[(2-метилпропокси)метил]-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин	389,29	390,2

Пример 10

Бензил 4-(2-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-2-оксоэтил)пиперидин-1-карбоксилат

Стадия 10A:

[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол соль HCl (250 мг, 0,68 ммоль) растворяли в DCM (5 мл) и добавляли 2-{1-[(бензилокси)карбонил]пиперидин-4-ил}уксусную кислоту (244 мг, 0,88 ммоль), DCC (181 мг, 0,88 ммоль), DMAP (83 мг, 0,68 ммоль) и TEA (0,38 мл, 2,7 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Неочищенную реакционную смесь разбавляли DCM (10 мл) и экстрагировали из насыщ. NH₄Cl (7 мл), сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенную смесь очищали колоночной хроматографией (0%-5% MeOH в DCM) с получением бензил 4-(2-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-2-оксоэтил)пиперидин-1-карбоксилата 10a (270 мг, 0,46 ммоль) с выходом 67%.

Стадия 10B:

Бензил 4-(2-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}-2-оксоэтил)пиперидин-1-карбоксилат 10a (220 мг, 0,37 ммоль) растворяли в DCM (10 мл) и нагревали до 60°C. Затем добавляли Et₃SiH (0,29 мл, 1,86 ммоль), затем InBr₃ (394 мг, 1,11 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение одного часа. Реакционную смесь концентрировали и повторно растворяли в DMF (5 мл), фильтровали и очищали с помощью ВЭЖХ с получением 4-(2-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}этил)пиперидина 10-1 (m/z 445,5 [MH⁺]).

В таблице 8 ниже представлены наблюдаемые (Набл.) отношения m/z иона других соединений, которые были получены в соответствии со способом, описанным в этом примере.

Таблица 8

Соед.	-O-R1	Название	Расч. масса	Набл. масса
10-1		4-(2-{[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}этил)пиперидин	444,34	445,5
10-2		(3R)-3-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}метил)пирролидин	416,3	417,4
10-3		2-[(гексилокси)метил]-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин	417,32	418,4
10-4		(2S)-2-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}метил)пирролидин	416,3	417,4
10-5		4-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}метил)пиперидин	430,32	431,3
10-6		3-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}метил)пирролидин	416,3	417,4
10-7		(2R)-2-({[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метокси}метил)пирролидин	416,3	417,4

Пример 9

Индуцированное ингибитором Vmat2 снижение двигательной активности

Действие 1-1 HCl на снижение дофамина измеряли с использованием анализа локомоторной активности (LMA). По истечении времени предварительной обработки 60 минут самцов крыс Sprague-Dawley (200-250 г) помещали в прозрачную клетку, окруженную датчиками фотоэлемента (San Diego Instruments). Локомоторную активность крысы определяется прерываниями в пучках фотоэлементов и активность определяли как количество прерываний луча за 30 мин. Данные анализировали однофакторным дисперсионным анализом (ANOVA; SigmaStat version 3.0.1, SPSS, Chicago, IL), и затем проводили тест Стьюдента-Ньюмана-Кейлса по полученным результатам для достоверности. Результаты этого анализа показаны на фигуре 1.

Пример 10

Анализ условной реакции избегания антипсихотической активности

Было показано, что тест условной реакции избегания (CAR) является эффективной и надежной доклинической моделью для оценки антипсихотической активности соединений. В парадигме CAR крысу тренировали в двухкамерной челночной камере реагировать на условный раздражитель (слуховой) с помощью отрицательного подкрепления. Если животное не перемещалось в другую камеру при представлении слухового раздражителя, применяли легкое электроболевое раздражение лап на стороне, где находилась крыса. Крысу обучали избегать мягкого электроболевого раздражения лап с помощью перехода в другую камеру после инициирования слухового сигнала, называемая условная реакция избегания. Переход в другую камеру во время применения удара называется реакция избегания. Если крыса не может переместиться в другую камеру даже после применения электроболевого раздражения лап, у крысы, как полагают, отсутствует реакция избегания. Многочисленные исследования показали, что типичные и атипичные антипсихотические препараты избирательно подавляют CAR, что делает его идеальным анализом для выявления потенциальных антипсихотических соединений (см., например, Wadenberg et al., Biobehav. Rev. (1999) 23: 851-62).

Самцов крыс Wistar тренировали каждый день в течение 3-4 недель. На тренировочной сессии крыс помещали в двухстороннюю челночную камеру для CAR, и проводили тренировочный период из 20 практических испытаний. Испытание состояло из 10-секундного воспроизведения белого шума 80 дБ, за которым следовало скремблированное электроболевое раздражение лап 0,6 мА, длительностью до 20 секунд. Интервал между практическими испытаниями составлял от 20 до 60 секунд. Крыса научилась избегать шока, перемещаясь из одного отсека в другой, когда подавали условный раздражитель (условная реакция избегания). Крысу считали достаточно обученной, если она избегала удара при подаче условного раздражителя, по меньшей мере, 19 раз из 20 испытаний. Крыс, которые не прошли эти критерии, не использовали.

В день исследования обученным животным давали привыкнуть к помещению для исследований в течение 30 минут до начала исследования. Затем им давали дозу соединения 1-1 HCl и помещали в двухстороннюю челночную камеру для CAR. В тесте для каждой крысы было проведено 20 испытаний. В каждом испытании применяли условный раздражитель (10-секундное воспроизведение белого шума 80 дБ), за которым следовало электроболевое раздражение лап (скремблированное электроболевое раздражение лап 0,6 мА, продолжающееся до 20 секунд). Если животное переместилось в другую камеру при предоставлении условного раздражителя, это оценивали как условная реакция избегания. Если оно переместилось при предоставлении электроболевого раздражения лап, это оценивали как избегание. Если крыса не смогла передвигаться при предоставлении электроболевого раздражения лап, это оценивали как отсутствие избегания. Эффективность антипсихотического средства проявляется в увеличении количества избегания. Данные анализировали с помощью дисперсионного анализа (ANOVA), а затем с помощью апостериорных сравнений с критерием Бонферрони, когда это необходимо. Эффект считается значимым, если p <0,05. Выбросы, определенные как два стандартных отклонения выше или ниже среднего, были обнаружены и удалены из всего анализа. Результаты показаны на фигуре 2 и представлены как среднее ± SEM (стандартная ошибка среднего) для количества избеганий.

Пример 11

Способы определения Vmat2 ингибирующей активности соединения

Ниже приведены примеры способов определения способности соединения ингибировать VMAT2. Способ основан на описанном ранее (см., например, Near, (1986), Mol. Pharmacol. 30: 252-57; Teng, et al., J. Neurochem. 71, 258-65, 1998). Гомогенаты тромбоцитов человека или переднего мозга крысы Sprague-Dawley получали гомогенизацией, а затем промывали центрифугированием, как описано ранее (см., например, Hoare et al., (2003) Peptides 24:1881-97). В общем объеме 0,2 мл в 96-луночных планшетах с низким связыванием (Corning # 3605) двенадцать концентраций соединения 1-1 и R,R,R-DHTBZ конкурируют против 6 нМ ³H-дигидротетрабензина (American Radiolabeled Chemicals, Kd 2,6 нM) на гомогенате переднего мозга крысы (100 мкг мембранного белка на лунку) или гомогенате тромбоцитов человека (50 мкг мембранного белка на лунку) в VMAT2 связующем буфере (фосфатно-солевой буферный раствор Дульбекко, 1 мМ EDTA, pH 7,4). После инкубации при 25°С в течение двух часов связанный радиолиганд быстро собирали путем фильтрации на GF/B стекловолоконных фильтрах с использованием сборщика клеток Unifilter-96 (PerkinElmer). Фильтровальные пластины предварительно обрабатывали в течение 10 минут 0,1% полиэтиленимином и после сбора фильтровальные пластины промывали 800 мкл VMAT2-связующего буфера. Связанный радиолиганд определяли количественно сцинтилляционным вычислением с использованием Topcount NXT (PerkinElmer). Результаты исследований конкурентного связывания представлены ниже в таблице 9 и таблице 10.

Таблица 9 Аффинность VMAT2 переднего мозга крысы в анализе конкурентного связывания
Соединение	pKi (н)	Ki (нM)
Соединение 1-1	8,6±0,1 (2)	2,6
R,R,R-DHTBZ	8,7±0,2 (6)	1,9

Таблица 10 Аффинность VMAT2 тромбоцитов человека в анализе конкурентного связывания
Соединение	pKi (н)	Ki (нM)
Соединение 1-1	8,3±0,1 (2)	5,2
R,R,R-DHTBZ	8,6±0,3 (3)	2,6

Ki человека для соединений, перечисленных в таблице 11, определяли с использованием немного усовершенствованного способа, показанного ниже (см. данные в колонке под заголовком «Ki нM»). В общем объеме 0,15 мл в 96-луночных планшетах с низким связыванием (Corning #3605), двенадцать концентраций соединения 1-1 и R,R,R-DHTBZ конкурируют против 10 нМ ³H- дигидротетрабенезина (American Radiolabeled Chemicals, Kd 2,6 нM) на гомогенате переднего мозга крысы (100 мкг мембранного белка на лунку) или гомогенате тромбоцита человека (15 мкг мембранного белка на лунку) в VMAT2 связующем буфере (фосфатно-солевой буферный раствор Дульбекко, 1 мМ EDTA, pH 7,4). После инкубации при 25°С в течение 90 минут, связанный радиолиганд быстро собирали путем фильтрации на GF/B стекловолоконных фильтрах с использованием сборщика клеток Unifilter-96 Harvester (PerkinElmer). Фильтровальные пластины предварительно обрабатывали 0,1% полиэтиленимином и оставляли сушить в течение ночи, и после сбора фильтровальные пластины промывали 800 мкл VMAT2-связующего буфера. Связанный радиолиганд определяли количественно сцинтилляционным вычислением с использованием Topcount NXT (PerkinElmer). В таблице 11 соединения, имеющие значение K_i менее 10 нМ, идентифицируют как «+++», соединения, имеющие значение K_i от 10 нМ до 500 нМ, идентифицируют как «++», и соединения, имеющие значение K_i, превышающие более 500 нМ идентифицируют как «+» (NT=не испытывали).

Таблица 11

Данные активности для репрезентативных соединений

Соед. No	Ki нM	Человек (% макс. биодост.)	Крыса (% макс. биодост.)
2-1	+++	++	+
2-2	+++	+++	+++
2-3	+++	+++	+++
2-4	+++	+++	++
2-5	+++	+++	++
2-6	+++	+++	+++
2-7	+++	++	++
2-8	+++	+++	++
2-9	+++	++	+
2-10	+++	+	++
2-11	+++	+++	+++
2-12	+++	++	++
2-13	+++	++	++
2-14	+++	+++	++
2-15	+++	++	++
2-16	+++	+++	+++
2-17	++	+++	+++
2-18	+++	+++	+++
2-19	+++	NT	NT
2-20	NT	+++	+++
2-21	+++	+++	+++
2-22	+++	+++	+++
2-23	+++	+++	+++
2-24	++	+++	+++
2-25	+++	NT	+
2-26	+++	+++	+++
2-27	++	+++	++
2-28	++	+++	+++
2-29	++	+++	+++
2-30	+++	++	+
2-31	+++	++	++
2-32	+++	++	++
2-33	++	NT	NT
2-34	+++	+++	+++
2-35	+	+	+
2-36	+++	++	++
2-37	++	+++	+++
2-38	++	+++	+++
2-39	+++	+++	+++
3-1	+	NT	+
3-2	+++	+++	+++
3-3	++	+	+
3-4	++	+	+
3-5	++	NT	NT
3-6	++	+	+
3-7	++	+	+
3-8	++	+	+
3-9	++	+	+
3-10	+	+	+++
3-11	+	+	+
3-12	++	+	+
3-13	++	+	+
4-1	+++	+	+
4-2	+++	+++	+++
4-3	++	+++	++
4-4	+++	++	++
4-5	NT	NT	NT
4-6	++	+++	+++
4-7	+++	+	++
4-8	+++	+	+
4-9	NT	NT	NT
4-10	+++	+	+
4-11	++	NT	NT
4-12	+++	+++	++
4-13	+++	+	NT
4-14	+++	++	++
4-15	+++	+	+
4-16	+++	+	+
4-17	+++	++	++
4-18	++	++	++
4-19	++	NT	NT
4-20	+++	NT	NT
4-21	++	NT	NT
4-22	+++	NT	+
4-23	+++	++	+
4-24	+++	NT	NT
4-25	++	++	+
4-26	+++	+	NT
4-27	+++	+++	++
4-28	+++	+	+
4-29	+++	+	+
4-30	++	NT	NT
4-31	+++	+	+
4-32	++	+++	++
4-33	++	++	++
4-34	+++	NT	NT
4-35	+++	NT	NT
4-36	+++	+	++
4-37	+++	++	++
4-38	+++	+	+
5-1	+++	+	+
5-2	NT	NT	NT
5-3	+	+	+
5-4	+++	+	+
5-5	++	+	+
5-6	+	+	+
5-7	+	++	++
5-8	NT	NT	NT
5-9	+	+	+
5-10	NT	NT	+
5-11	++	+	+
5-12	NT	NT	NT
5-13	NT	NT	NT
5-14	+	+	+
5-15	++	+++	+
5-16	NT	NT	NT
5-17	++	+	+
5-18	+++	+++	++
5-19	++	+	+
5-20	++	+	+
5-21	+++	++	+
5-22	NT	NT	NT
5-23	++	+	+
5-24	+++	++	+
5-25	+	+	+
5-26	+	+	+
5-27	+	+	+
5-28	+	+	+
5-29	++	++	++
5-30	+	+	+
5-31	+++	+++	++
5-32	+++	+	+
5-33	NT	NT	NT
5-34	++	+	+
5-35	++	NT	NT
5-36	NT	NT	NT
5-37	+++	++	++
5-38	NT	NT	NT
5-39	++	+	+
5-40	++	+	+
5-41	++	+	+
5-42	++	+	+
5-43	+	+	+
5-44	+++	+++	++
5-45	+	NT	NT
5-46	+	+	+
5-47	++	+	+
5-48	+++	+++	+++
5-49	++	+	NT
5-50	+++	+++	++
5-51	NT	NT	NT
5-52	+	+	+
5-53	++	++	++
5-54	+	+	+
5-55	NT	NT	NT
5-56	++	+	+
5-57	+	+	+
6-1	+++	+	+
6-2	+++	++	+
6-3	NT	+	+
6-4	+++	+	+
6-5	+++	+	+
6-6	+++	+	+
6-7	+++	+	+
6-8	++	+	+
6-9	+++	++	++
6-10	+++	+	+
6-11	+++	+	+
6-12	NT	NT	NT
6-13	+++	+	+
6-14	+++	++	++
7-1	++	+++	+++
8-1	++	+++	+++
9-1	+++	NT	NT
9-2	NT	NT	NT
9-3	+	NT	NT
9-4	+++	NT	NT
9-5	+++	NT	NT
9-6	NT	NT	NT
9-7	NT	NT	NT
9-8	+++	NT	NT
9-9	NT	NT	NT
10-1	+++	NT	++
10-2	+++	+	++
10-3	++	+++	++
10-4	+++	+++	+++
10-5	++	NT	NT
10-6	+++	+	++
10-7	+++	+++	++

Ниже приведен другой способ, который обычно может быть выполнен для определения способности соединения ингибировать VMAT2. Следующий способ основан на ранее описанном способе (см. Teng, et al., J. Neurochem. 71, 258-65, 1998).

Получение стриарных везикул крыс: Стриаты крыс от трех крыс объединяли и гомогенизировали в 0,32 М сахарозе. Затем гомогенат центрифугировали при 2000×g в течение 10 минут при 4°C и полученный супернатант центрифугировали при 10000×g в течение 30 минут при 4°C. Полученный осадок, содержащий обогащенную фракцию синаптосом (2 мл), подвергали осмотическому шоку добавлением 7 мл дистиллированной H₂O, и после этого суспензию гомогенизировали. Осмолярность восстанавливали добавлением 0,9 мл 0,25 М HEPES и 0,9 мл 1,0 М нейтрального буфера дикалиевой соли L-(+)-винной кислоты (pH 7,5) с последующим 20 минутным центрифугированием (20000×g при 4°C). Супернатант затем центрифугировали в течение 60 минут (55000×g при 4°C) и полученный супернатант центрифугировали в течение 45 минут (100000×g при 4°C). Полученный осадок ресуспендировали в 25 мМ HEPES, 100 мM дикалиевой соли L-(+)-винной кислоты, 5 мM MgCl₂, 10 мM NaCl, 0,05 мM EGTA, рН 7,5 до концентрации белка 1-2 мг/мл и хранили при -80°C в течение 3 недель без заметной потери связывающей активности. Непосредственно перед использованием конечный осадок ресуспендировали в связующем буфере (25 мМ HEPES, 100 мМ дикалиевой соли L-(+)-винной кислоты, 5 мМ MgCl₂, 10 мМ NaCl, 0,05 мМ EGTA, 0,1 мМ EDTA, 1,7 мM аскорбиновая кислота, pH 7,4).

Связывание [³H]-дигидротетрабеназина (DHTBZ): Аликвоты суспензии везикул (0,16 мл, 15 мкг белка/мл) инкубировали с конкурирующими соединениями (в интервале от 10^-6 до 10^-12 М) и 2 нМ [³H]-дигидротетрабеназина (HTBZ, удельная активность: 20 Ci/ммоль, American Radiolabeled Chemicals, Inc.) в течение 1 часа при комнатной температуре в общем объеме 0,5 мл. Реакцию завершали быстрым фильтрованием образцов на фильтрах Whatman GF/F с использованием сборщика клеток Brandel. Неспецифическое связывание определяли с использованием 20 мкМ тетрабеназина (TBZ). Фильтры предварительно пропитывали в течение 2 часов ледяным полиэтиленимином (0,5%). После того как фильтры промывали три раза ледяным буфером, их помещали в сцинтилляционные флаконы с 10 мл сцинтилляционного коктейля. Связанную радиоактивность определяли сцинтилляционной спектрометрией.

Пример 12

Способы определения метаболических путей соединения

Для исследования различий в метаболизме соединений 1-1 и R,R,R-DHTBZ in vitro оба соединения инкубировали с гепатоцитами человека, и количество метаболитов, образованных через соответствующие пути деметилирования, окисления и глюкуронирования, определяли с помощью ЖХ-МС/МС. Предполагалось, что показания приборов для всех метаболитов приблизительно одинаковые. Для обоих соединений процент общего метаболизма in vitro в результате соответствующих путей (фракция метаболизированная, fm) рассчитывали путем деления площади пика ЖХ/MС метаболита(ов), сформированных путем данного пути, на сумму площадей пиков контролируемых метаболитов. Результаты этого анализа показали, что R,R,R-DHTBZ в основном метаболизируется деметилированием. Считается, что это деметилирование катализируется CYP2D6. В противоположность этому, соединение 1-1 в основном метаболизируется путем глюкуронизации. Фигура 3 иллюстрирует вклад метаболических путей в общий метаболизм in vitro соединения 1-1 и R,R,R-DHTBZ с использованием гепатоцитов человека.

Пример 13

Способ определения стабильности соединений в микросомах печени млекопитающих

Испытуемое соединение (1 мкМ) инкубировали с объединенными смешанными гендерными микросомами печени человека (0,5 мг/мл общего белка) и крыс SD (0,1 мг/мл общего белка) при 37°С в присутствии NADPH-генерирующей системы, содержащей 50 мМ, рН 7,4 калий-фосфатный буфер, 3 мМ хлорида магния, 1 мМ EDTA, 1 мМ NADP, 5 мМ глюкозо-6-фосфат и 1 ед./мл глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы. Все концентрации были относительно конечного объема инкубации 250 мкл. Инкубации проводили при 37°C в течение 0, 5, 10, 20, 40 и 60 минут на водяной бане и заканчивали быстрым перемешиванием с 300 мкл ледяного ацетонитрила, содержащего 0,1% муравьиную кислоту. Добавляли внутренний стандарт и белки осаждали и удаляли центрифугированием до анализа ЖХ/МС. Аликвоты полученных супернатантных фракций анализировали с помощью мониторинга ЖХ/МС в отношении уменьшения количества исходного соединения. Полученные данные отношения площади пика ко времени приспосабливали к нелинейной регрессии с использованием программного обеспечения XLfit Scientific Curve Fitting (IDBS Ltd., Surrey, UK) и период полувыведения рассчитывали по наклону. Фармакокинетические параметры прогнозировали с использованием способа, описанного Obach et al (J. Pharmcol. Exp. Ther. 1997; 283: 46.58). Вкратце, значения для собственного клиренса рассчитывали из данных периода полувыведения in vitro и затем были приведены в соответствие с представленным клиренсом, ожидаемым во всем животном (человеке или крысе). Дополнительные вычисленные значения включали расчетный клиренс и расчетную максимальную биодоступность.

В соответствии с вышеописанными способами была рассчитана прогнозируемая максимальная биодоступность (человека и крысы) для соединений, перечисленных в таблице 11 выше (см. данные в колонках под заголовками «Человек (% макс. биодост.)» «Крыса (% макс. биодост.)», соответственно). В таблице 11 соединения, имеющие прогнозируемую максимальную биодоступность менее 10%, идентифицируют как «+++», соединения, имеющие прогнозируемую максимальную биодоступность от 10 до 50%, идентифицируют как «++», и соединения, имеющие прогнозируемую максимальную биодоступность более 50% до 100% идентифицируют как «+» (NT=не испытывали).

Пример 14

Способ определения гидролитической стабильности соединений в S9 кишечника млекопитающих

Соединения, которые демонстрировали метаболическую стабильность в скрининговом анализе микросом печени человека, определяли как вычисленный собственный клиренс <20 мл/мин/кг (приблизительно >50% прогнозируемой биодоступности), были отобраны для дальнейшей оценки гидролитической стабильности в анализе in vitro S9 кишечника (крыса SD и человек). Соединения (1 мкМ) инкубировали с объединенными субклеточными препаратами S9 кишечника (0,5 мг/мл общего белка) от крыс SD и людей без добавления ингибитора протеазы фенилметилсульфонилфторида. Инкубации проводили в калий-фосфатном буфере (50 мМ). Все концентрации были относительно конечного объема инкубации 125 мкл. Инкубации проводили при 37°C в течение 0, 5, 10, 20, 40 и 60 минут на водяной бане и заканчивали быстрым перемешиванием с 150 мкл ледяного ацетонитрила, содержащего 1% муравьиную кислоту. Добавляли внутренний стандарт и белки осаждали и удаляли центрифугированием до анализа ЖХ/МС. Аликвоты полученных супернатантных фракций анализировали с помощью ЖХ/МС мониторинга за уменьшением количества испытуемого соединения и образования соединения 1-1. Результаты использовали для классификации соединений на основе их потенциала для гидролиза с образованием соединения 1-1 в анализе in vitro.

Результаты этого анализа представлены в таблице 12. С этой целью соединения, перечисленные в таблице 12, были разделены на три класса соединений на основе их способности образовывать соединение 1-1: высокая (обозначенная как «+++»); средняя (обозначенная как «++») и низкая (обозначенная как «+»).

Таблица 12

Данные активности в in vitro анализе гидролиза S9 кишечника человека

Соединение	Анализ S9
2-10	+++
2-25	+++
3-1	+
3-3	+++
3-4	++
3-6	++
3-7	+
3-8	+++
3-9	++
3-10	+++
3-11	++
3-12	+++
3-13	++
4-1	++
4-7	++
4-8	++
4-10	++
4-13	+++
4-15	+
4-16	+
4-22	++
4-26	++
4-28	++
4-29	+++
4-31	++
4-36	+++
4-38	+
5-1	+
5-3	+
5-4	+
5-5	+
5-6	+
5-9	+
5-11	++
5-14	+
5-17	+
5-19	+
5-20	++
5-23	++
5-25	+
5-26	+
5-27	+
5-28	+
5-30	+
5-32	++
5-34	+
5-39	+++
5-40	+
5-41	+
5-42	++
5-43	+
5-46	++
5-47	+
5-49	+
5-52	+
5-54	+
5-56	+
5-57	+
6-1	+
6-3	+
6-4	+
6-5	++
6-6	+
6-7	+
6-8	+
6-10	+
6-11	+
6-13	+

Описание предварительной заявки на патент США № 62/113316, поданной 6 февраля 2015 года, включено в настоящее описание в полном объеме.

Различные варианты осуществления, описанные выше, могут быть объединены для обеспечения дополнительных вариантов осуществления. Все патенты США, публикации заявок на патенты США, заявки на патенты США, иностранные патенты, заявки на иностранные патенты и непатентные публикации, указанные в настоящем описании и/или перечисленные в листе дат подачи заявок, включены в настоящее описание в качестве ссылки во всей их полноте. Аспекты вариантов осуществления могут быть изменены, при необходимости, для использования идей различных патентов, заявок и публикаций для обеспечения еще дополнительных вариантов осуществления.

Эти и другие изменения могут быть сделаны в вариантах осуществления в свете вышеописанного подробного описания. В целом, в следующей формуле изобретения используемые термины не следует истолковывать как ограничивающие формулу изобретения конкретными вариантами осуществления, раскрытыми в описании и формуле изобретения, но должны истолковываться как включающие все возможные варианты осуществления наряду с полным объемом эквивалентов, на которые распространяется право такой формулы изобретения. Соответственно, формула изобретения не ограничивается раскрытием.

1. Соединение, имеющее структуру (I):

или его фармацевтически приемлемая соль,

где:

R¹ представляет собой а) водород;

b) -Р(=O)(OR³)₂;

c) -С(=O)алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰;

d) -С(=O)гетероциклил, где гетероциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰;

e) -С(=O)карбоциклил, где карбоциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰;

f) -С(=O)N(R₃)алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰;

g) -С(=O)N(R₃)карбоциклил, где карбоциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰;

h) -С(=O)Оалкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰; или

i) алкил, где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰;

и где

каждый R³ независимо представляет собой водород или алкил;

каждый R¹⁰ независимо представляет собой галоген, галогеналкил, циано, нитро, -OR³⁰, -N(R³⁰)₂, -C(O)OR³⁰, -C(O)N(R³⁰)₂, -N(R³⁰)S(O)_tR³¹ (где t равно 1-2), -S(O)_tOR³⁰ (где t равно 1-2), -S(O)_pR³⁰ (где p равно 0-2) или, когда один атом несет две группы R¹⁰, такие две группы R¹⁰ могут быть взяты вместе с образованием оксо;

каждый R²⁰ независимо представляет собой алкил, фенил, бензил, циклоалкил, гетероциклил или гетероарил, или, когда один атом несет две группы R²⁰, такие две группы R²⁰ могут быть взяты вместе с образованием циклоалкила, где каждая из указанной алкильной, фенильной, бензильной, циклоалкильной, гетероциклильной и гетероарильной группы необязательно замещены R¹⁰ и/или R²²;

каждый R²² независимо представляет собой алкил, необязательно замещенный R¹⁰; и

каждый R³⁰, R³¹ и R³² независимо представляет собой водород или алкил;

где алкил означает радикал с прямой или разветвленной углеводородной цепью, имеющий от 1 до 8 атомов углерода;

гетероциклил означает пиперидинил, пиперазинил, пирролидинил, оксетанил, азетидинил, тетрагидропиранил, 1,3-диазинанил, 2,3-дигидро-1Н-изоиндолил, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолинил, 1,2,3,4-тетрагидрохиназолинил, 2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептанил, декагидропиперазино[1,2-а]азепинил, 3,8-диазабицикло[3.2.1]октанил, 2,5-диазабицикло[2.2.1]гептанил, [пирролидин-1-ил]оксиданил, имидазолидинил, 2,3-дигидро-1,3-бензоксазолил и морфолинил;

карбоциклил означает фенил, циклопропил, циклопентил, циклогексил, бицикло[2.2.1]гептенил и бицикло[2.2.1]гептанил;

циклоалкил означает циклопропил, циклопентил, циклогексил, бицикло[2.2.1]гептенил и бицикло[2.2.1]гептанил; и

гетероарил означает пирролил, пиразолил и тетразолил.

2. Соединение по п. 1, где R¹ представляет собой водород и соединение представляет собой [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,11bH-пиридо-[2,1-а]изохинолин-2-ил]метанол или его фармацевтически приемлемую соль.

3. Соединение по п. 2, где соединение представляет собой [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,11bH-пиридо[2,1-а]изохинолин-2-ил]метанол HCl.

4. Соединение по п. 1, где R¹ представляет собой -Р(=O)(OR₃)₂.

5. Соединение по п. 1, где R¹ представляет собой -С(=O)алкил и где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰.

6. Соединение по п. 5, где соединение выбрано из одного из следующих:

или их фармацевтически приемлемых солей.

7. Соединение по п. 6, где соединение выбрано из одного из следующих:

или их фармацевтически приемлемых солей.

8. Соединение по п. 6, где соединение представляет собой:

или его фармацевтически приемлемую соль.

9. Соединение по п. 1, где R¹ представляет собой -С(=O)гетероциклил и где гетероциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰.

10. Соединение по п. 1, где соединение выбрано из одного из следующих:

или их фармацевтически приемлемых солей.

11. Соединение по п. 1, где R¹ представляет собой -С(=O)карбоциклил и где карбоциклил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰.

12. Соединение по п. 1, где соединение выбрано из одного из следующих:

или их фармацевтически приемлемых солей.

13. Соединение по п. 1, где R¹ -С(=O)N(R³)алкил и где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰.

14. Соединение по п. 1, где соединение выбрано из одного из следующих:

или их фармацевтически приемлемых солей.

15. Соединение по п. 1, где R¹ представляет собой -С(=O)N(R₃)карбоцикл и где карбоцикл необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰.

16. Соединение по п. 1, где соединение выбрано из одного из следующих:

или их фармацевтически приемлемых солей.

17. Соединение по п. 1, где R¹ -С(=O)Оалкил и где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰.

18. Соединение по п. 1, где соединение представляет собой:

или его фармацевтически приемлемую соль.

19. Соединения по п. 1, где -R¹ представляет собой алкил и где алкил необязательно замещен R¹⁰ и/или R²⁰.

20. Соединение по п. 1, где соединение представляет собой:

или их фармацевтически приемлемую соль.

21. Соединение по любому из пп. 1-20, имеющее следующую стереохимию:

22. Фармацевтическая композиция для ингибирования везикулярного транспортера моноаминов 2 (VMAT2), содержащая соединение по любому из пп. 1-20 в комбинации с фармацевтически приемлемым эксципиентом и/или разбавителем.