Инсектицидные белки

Изобретение относится к области биохимии, в частности к кассете экспрессии для экспрессии полипептида, токсичного для насекомых вида Diabrotica. Также раскрыты экспрессионный вектор и трансгенное растение маиса, содержащие указанную кассету экспрессии, клетка-хозяин, содержащая указанный вектор. Раскрыт способ борьбы с популяцией вредителя вида Diabrotica с помощью указанного полипептида. Изобретение обладает способностью эффективно бороться с популяцией вредителя вида Diabrotica. 6 н. и 2 з.п. ф-лы, 26 табл., 12 пр.

 

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет по предварительной заявке на патент №62/445429, поданной 12 января 2017 г. и включенной в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

[0002] Перечень последовательностей в текстовом формате ASCII, предоставленный в соответствии с § 1.821 37 C.F.R., под названием "81158_PCT_T25.txt", размером 305 килобайт, созданный 28 июня 2017 г. и поданный с помощью EFS-Web, представлен вместо бумажной копии. Данный перечень последовательностей тем самым включен посредством ссылки в описание данного документа для его раскрытия.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0003] Настоящее изобретение относится к областям белковой инженерии, молекулярной биологии растений и контроля вредителей. Более конкретно, настоящее изобретение относится к новому белку и его вариантам, характеризующимся инсектицидной активностью, нуклеиновым кислотам, экспрессия которых приводит к образованию инсектицидных белков, а также способам получения и способам применения инсектицидных белков и соответствующих нуклеиновых кислот для контроля насекомых.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0004] Насекомые-вредители являются главной причиной потерь урожая. Только в США ежегодные потери, вызванные заражением различными видами насекомых, составляют миллиарды долларов. В дополнение к потерям урожая полевых культур, насекомые-вредители также являются отрицательным фактором для плантаторов, выращивающих овощи и фрукты, специалистов по выращиванию декоративных цветов, и они являются неприятностью для садоводов и домовладельцев.

[0005] Наиболее пагубными вредителями кукурузы считаются разные виды кукурузного корневого жука. В Соединенных Штатах тремя важными видами являются Diabrotica virgifera virgifera, западный кукурузный корневой жук, D. longicornis barberi, северный кукурузный корневой жук и D. undecimpunctata howardi, южный кукурузный корневой жук. Основными вредителями кукурузы в кукурузном поясе США считаются только западный и северный кукурузные корневые жуки. Дополнительно, важным коревым жуком-вредителем кукурузы в южных штатах США является мексиканский кукурузный корневой жук Diabrotica virgifera zeae. Наиболее существенный вред растению наносят личинки кукурузного корневого жука, поскольку они питаются фактически исключительно корнями кукурузы. Это поражение выражается в увеличении полегания растений, снижении урожая зерна и растительной массы, а также в изменении содержания питательных веществ в зерне. Поедание личинками также оказывает косвенные воздействия на кукурузу тем, что в его результате в корнях открываются ходы для заражений бактериями и грибами, что приводит к заболеваниям, выражающимся в гниении корня и стебля. Взрослые особи кукурузного корневого жука активны на кукурузных полях поздним летом, когда они питаются початками, кистями нитей рыльца и пыльцой, что препятствует нормальному опылению.

[0006] Кукурузных корневых жуков контролируют, главным образом, путем усиленного применения химических пестицидов, которые проявляют активность путем подавления роста насекомых, препятствования поеданию насекомыми или их размножению, или вызывая гибель. Таким путем может быть достигнут надлежащий контроль кукурузного корневого жука, однако иногда эти химические вещества также могут воздействовать и на другие, полезные организмы. Другой проблемой, возникающей в результате широкого применения химических пестицидов, является возникновение устойчивых видов насекомых. Еще одна проблема вызвана тем фактом, что личинки кукурузного корневого жука питаются под землей, что затрудняет нанесение "спасательных" обработок инсектицидами. Поэтому в большинстве случаев нанесения инсектицидов осуществляются профилактически, во время посева. Результатом такой практики является большая нагрузка на окружающую среду. Частично эту нагрузку ослабляют за счет применения различных способов ведения фермерского хозяйства, однако существует растущая потребность в альтернативных механизмах контроля вредителей.

[0007] Биологические средства для контроля вредителей, такие как штаммы Bacillus thuringiensis (Bt), экспрессирующие пестицидные токсины, как, например, δ-эндотоксины (дельта-эндотоксины; также называемые кристаллическими токсинами или белками Cry), были применены к сельскохозяйственным культурам с удовлетворительными результатами в отношении насекомых-вредителей. δ-эндотоксины представляют собой белки, содержащиеся в кристаллической матрице, которые, как известно, обладают инсектицидной активностью при поглощении некоторыми насекомыми. Несколько нативных белков Cry из Bacillus thuringiensis или сконструированных белков Cry были экспрессированы в трансгенных сельскохозяйственных культурах и использовались в коммерческих целях для контроля определенных чешуекрылых и жесткокрылых насекомых-вредителей. Например, начиная с 2003 года в США коммерчески доступны трансгенные гибриды кукурузы, которые осуществляют контроль кукурузного корневого жука посредством экспрессии белка Cry3Bb1, Cry34Ab1/Cry35Ab1 или модифицированного белка Cry3A (mCry3A) или Cry3Ab (eCry3.1Ab).

[0008] Хотя было показано, что использование трансгенных растений, экспрессирующих белки Cry, является чрезвычайно эффективным, известны насекомые-вредители, которые теперь характеризуются устойчивостью к белкам Cry, экспрессируемым в некоторых трансгенных растениях. Следовательно, по-прежнему существует необходимость в идентификации новых и эффективных средств для контроля вредителей, которые обеспечивают экономическую выгоду фермерам и являются экологически приемлемыми. В особенности, необходимыми являются белки, которые токсичны по отношению к видам Diabrotica, главному вредителю кукурузы, способ действия которых отличается от существующих продуктов для контроля насекомых в качестве средства для ослабления развития устойчивости. Кроме того, необходима доставка средств для контроля насекомых с помощью продуктов, которые сводят к минимуму нагрузку на окружающую среду, как и с помощью трансгенных растений.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ

[0009] Ввиду этих потребностей настоящее изобретение предусматривает новые инсектицидные белки, а именно WoodsCRW и белки, которые в значительной степени идентичны WoodsCRW и его вариантам. Белки по настоящему изобретению характеризуются токсичностью по отношению к кукурузному корневому жуку (Diabrotica spp). Белки по настоящему изобретению также могут характеризоваться токсичностью по отношению к другим жесткокрылым и/или чешуекрылым. Настоящее изобретение дополнительно относится к молекулам нуклеиновой кислоты, которые кодируют WoodsCRW или его варианты, комплементарным им последовательностям или молекулам, которые в значительной степени идентичны WoodsCRW и его вариантам.

[0010] Настоящее изобретение также предусматривает векторы, содержащие такие рекомбинантные (или комплементарные им) нуклеиновые кислоты; растение или микроорганизм, которые содержат и обеспечивают экспрессию таких нуклеиновых кислот; растения, трансформированные такими нуклеиновыми кислотами, например трансгенные растения кукурузы; потомство таких растений, которое содержит нуклеиновые кислоты, стабильно встроенные и наследуемые по менделевскому принципу, и/или семена таких растений и такого потомства. Настоящее изобретение также предусматривает способы селекции для введения трансгена, содержащего молекулу нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению, в потомство растения и в различные зародышевые плазмы.

[0011] Настоящее изобретение также предусматривает композиции и составы, содержащие LachbCRW или его варианты, которые могут подавлять способность насекомых-вредителей выживать, расти и/или размножаться или ограничивать связанные с насекомыми вред или потерю урожая сельскохозяйственных культур, например применяя LachbCRW или его варианты как часть композиций или составов в отношении зараженных насекомыми зон или растений или для профилактической обработки чувствительных к насекомым зон или растений для обеспечения защиты от насекомых-вредителей.

[0012] Настоящее изобретение дополнительно относится к способу получения LachbCRW или его вариантов и к способам применения нуклеиновых кислот, например в микроорганизмах для контроля насекомых или в трансгенных растениях для обеспечения защиты от вреда, наносимого насекомыми.

[0013] Описанные в данном документе новые белки являются активными в отношении насекомых. Например, в вариантах осуществления белки по настоящему изобретению могут применяться для контроля экономически важных насекомых-вредителей, в том числе жесткокрылых насекомых, таких как западный кукурузный корневой жук (WCR), северный кукурузный корневой жук (NCR), южный кукурузный корневой жук (SCR) и/или мексиканский кукурузный корневой жук (D. virgifera zeae). Инсектицидные белки по настоящему изобретению могут применяться по отдельности или в комбинации с другими стратегиями для контроля насекомых, чтобы обеспечить повышенную эффективность контроля вредителей против тех же насекомых-вредителей и/или расширить спектр целевых насекомых с минимальным воздействием на окружающую среду.

[0014] Другие аспекты и преимущества по настоящему изобретению станут очевидными для специалистов в данной области в результате рассмотрения нижеследующего описания изобретения и неограничивающих примеров.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ В ПЕРЕЧНЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

SEQ ID NO: 1 представляет собой аминокислотную последовательность WoodsCRW.

SEQ ID NO: 2 представляет собой оптимизированную нуклеотидную последовательность WoodsCRW E. coli.

SEQ ID NO: 3 представляет собой нативную нуклеотидную последовательность WoodsCRW.

SEQ ID NO: 4 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C485S.

SEQ ID NO: 5 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C435S.

SEQ ID NO: 6 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C398S.

SEQ ID NO: 7 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C383S.

SEQ ID NO: 8 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C313S.

SEQ ID NO: 9 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW Y194W.

SEQ ID NO: 10 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW Y194F.

SEQ ID NO: 11 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C383S/C485S.

SEQ ID NO: 12 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C435S/C485S.

SEQ ID NO: 13 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C398S/C435S.

SEQ ID NO: 14 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C398S/C485S.

SEQ ID NO: 15 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C383S/C435S/C485S.

SEQ ID NO: 16 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C313S/C383S/C398S/C435S/C485S.

SEQ ID NO: 17 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW K396L.

SEQ ID NO: 18 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW K406L.

SEQ ID NO: 19 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C383A/C485A.

SEQ ID NO: 20 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C398A/C485A.

SEQ ID NO: 21 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C383L.

SEQ ID NO: 22 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C398L.

SEQ ID NO: 23 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW I77L/I83L/Y98F.

SEQ ID NO: 24 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW Y248F/I264L/Y277F.

SEQ ID NO: 25 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW Y326F/I340L/I351L.

SEQ ID NO: 26 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW I209L/Y223F/I228L.

SEQ ID NO: 27 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW I447L/Y464F/I469L.

SEQ ID NO: 28 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C435L.

SEQ ID NO: 29 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C485L.

SEQ ID NO: 30 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW I403L/I404L.

SEQ ID NO: 31 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW V399L.

SEQ ID NO: 32 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW V399F.

SEQ ID NO: 33 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C398F.

SEQ ID NO: 34 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C398Y.

SEQ ID NO: 35 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C398I.

SEQ ID NO: 36 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C398M.

SEQ ID NO: 37 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C485S.

SEQ ID NO: 38 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C435S.

SEQ ID NO: 39 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C398S.

SEQ ID NO: 40 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C383S.

SEQ ID NO: 41 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C313S.

SEQ ID NO: 42 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW Y194W.

SEQ ID NO: 43 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW Y194F.

SEQ ID NO: 44 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW K396L.

SEQ ID NO: 45 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW K406L.

SEQ ID NO: 46 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C383S/C485S.

SEQ ID NO: 47 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C435S/C485S.

SEQ ID NO: 48 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C398S/C435S.

SEQ ID NO: 49 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C398S/C485S.

SEQ ID NO: 50 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C383S/C435S/C485S.

SEQ ID NO: 51 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C313S/C383S/C398S/C435S/C485S.

SEQ ID NO: 52 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C383A/C485A.

SEQ ID NO: 53 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C398A/C485A.

SEQ ID NO: 54 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C383L.

SEQ ID NO: 55 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C398L.

SEQ ID NO: 56 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW I77L/I83L/Y98F.

SEQ ID NO: 57 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW Y248F/I264L/Y277F.

SEQ ID NO: 58 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW Y326F/I340L/I351L.

SEQ ID NO: 59 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW I209L/Y223F/I228L.

SEQ ID NO: 60 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW I447L/Y464F/I469L.

SEQ ID NO: 61 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C435L.

SEQ ID NO: 62 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C485L.

SEQ ID NO: 63 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW I403L/I404L.

SEQ ID NO: 64 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW V399L.

SEQ ID NO: 65 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW V399F.

SEQ ID NO: 66 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C398F.

SEQ ID NO: 67 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C398Y.

SEQ ID NO: 68 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C398I.

SEQ ID NO: 69 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C398M.

SEQ ID NO: 70 и 71 представляют собой аминокислотные последовательности фрагментов WoodsCRW.

SEQ ID NO: 72 представляет собой аминокислотную последовательность WoodsCRW, где "X" может быть любой аминокислотой.

SEQ ID NO: 73 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW D397-Leu-Leu-C398, содержащего два вставленных лейциновых остатка.

SEQ ID NO: 74 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C398-Leu-Leu-V399, содержащего два вставленных лейциновых остатка.

SEQ ID NO: 75 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW D397-Leu-C398-Leu, содержащего два вставленных лейциновых остатка.

SEQ ID NO: 76 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW Y436F.

SEQ ID NO: 77 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW D397-Leu-C398, содержащего один вставленный лейциновый остаток.

SEQ ID NO: 78 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C398-Leu-V399, содержащего один вставленный лейциновый остаток.

SEQ ID NO: 79 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW L382-Leu-C383, содержащего один вставленный лейциновый остаток.

SEQ ID NO: 80 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C383-Leu-Y384, содержащего один вставленный лейциновый остаток.

SEQ ID NO: 81 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW L434-Leu-C435, содержащего один вставленный лейциновый остаток.

SEQ ID NO: 82 представляет собой нуклеотидную последовательность варианта WoodsCRW C435-Leu-Y436, содержащего один вставленный лейциновый остаток.

SEQ ID NO: 83 представляет собой нуклеотидную последовательность химерной молекулы Plu1415-Woods.

SEQ ID NO: 84 представляет собой нуклеотидную последовательность химерной молекулы Woods-Plu1415.

SEQ ID NO: 85 представляет собой аминокислотную последовательность белка Plu1415.

SEQ ID NO: 86 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW D397-Leu-Leu-C398, содержащего два вставленных лейциновых остатка.

SEQ ID NO: 87 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C398-Leu-Leu-V399, содержащего два вставленных лейциновых остатка.

SEQ ID NO: 88 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW D397-Leu-C398-Leu, содержащего два вставленных лейциновых остатка.

SEQ ID NO: 89 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW Y436F.

SEQ ID NO: 90 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW D397-Leu-C398, содержащего один вставленный лейциновый остаток.

SEQ ID NO: 91 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C398-Leu-V399, содержащего один вставленный лейциновый остаток.

SEQ ID NO: 92 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW L382-Leu-C383, содержащего один вставленный лейциновый остаток.

SEQ ID NO: 93 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C383-Leu-Y384, содержащего один вставленный лейциновый остаток.

SEQ ID NO: 94 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW L434-Leu-C435, содержащего один вставленный лейциновый остаток.

SEQ ID NO: 95 представляет собой аминокислотную последовательность варианта WoodsCRW C435-Leu-Y436, содержащего один вставленный лейциновый остаток.

SEQ ID NO: 96 представляет собой аминокислотную последовательность химерной молекулы Plu1415-Woods.

SEQ ID NO: 97 представляет собой аминокислотную последовательность химерной молекулы Woods-Plu1415.

SEQ ID NO: 98 представляет собой аминокислотную последовательность белка Plu1415.

SEQ ID NO: 99 представляет собой нуклеотидную последовательность C-концевого домена β-призмы WoodsCRW (аминокислоты 347-490).

SEQ ID NO: 100 представляет собой аминокислотную последовательность C-концевого домена β-призмы WoodsCRW (аминокислоты 347-490).

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

[0015] Для ясности определенные термины, используемые в данном описании, определены и представлены как указано далее.

[0016] "Активность" инсектицидных белков по настоящему изобретению означает, что инсектицидные белки функционируют как активные при пероральном поглощении средства для контроля насекомых, характеризуются токсическим эффектом и/или способны нарушать или сдерживать поедание насекомыми, что может вызывать или не вызывать смерть насекомого. В случае если инсектицидный белок по настоящему изобретению доставляется в организм насекомого, то результатом обычно является гибель насекомого или же насекомое не поедает источник, который делает инсектицидный белок доступным для насекомого. "Пестицидной" называется токсическая биологическая активность, способная осуществлять контроль вредителя, такого как насекомое, нематода, гриб, бактерии или вирус, предпочтительно путем их уничтожения или разрушения. "Инсектицидной" называется токсическая биологическая активность, способная осуществлять контроль насекомых, предпочтительно путем их уничтожения. "Пестицидное средство" представляет собой средство, которое характеризуется пестицидной активностью. "Инсектицидное средство" представляет собой средство, которое характеризуется инсектицидной активностью.

[0017] Термин "ассоциированная с/функционально связанная" относится к двум нуклеиновым кислотам, которые связаны физически или функционально. Например, говорят, что промотор или регуляторная последовательность ДНК "ассоциированы с" последовательностью ДНК, которая кодирует РНК или белок, если эти две последовательности функционально связаны или расположены так, что регуляторная последовательность ДНК будет влиять на уровень экспрессии кодирующей или структурной последовательности ДНК.

[0018] "Кодирующая последовательность" представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, которая транскрибируется в РНК, такую как mRNA, rRNA, tRNA, snRNA, смысловая РНК или антисмысловая РНК. Предпочтительно, РНК затем транслируется в организме с продуцированием белка.

[0019] "Контролировать" насекомых означает подавлять посредством токсического эффекта способность насекомых-вредителей к выживанию, росту, поеданию и/или размножению или ограничивать связанные с насекомыми вред или потерю урожая сельскохозяйственных культур. "Контроль" насекомых может означать или может не означать уничтожение насекомых, хотя предпочтительно означает уничтожение насекомых.

[0020] "Доставлять" инсектицидный белок означает, что инсектицидный белок вступает в контакт с насекомым, что приводит к токсическому эффекту и контролю насекомого. Инсектицидный белок может быть доставлен многими известными путями, например, с помощью трансгенного растения, экспрессирующего инсектицидный белок, составленной(-ых) композиции(-й) с белком, распыляемой(-ых) композиции(-й) с белком, матрицы с приманкой или с помощью любой другой известной из уровня техники системы для доставки токсина.

[0021] "Эффективное для контроля насекомых количество" означает концентрацию инсектицидного белка, которая подавляет посредством токсического эффекта способность насекомых выживать, расти, поедать и/или размножаться или ограничивает связанные с насекомыми вред или потерю урожая сельскохозяйственных культур. "Эффективное для контроля насекомых количество" может означать или может не означать уничтожение насекомых, хотя предпочтительно оно означает уничтожение насекомых.

[0022] "Кассета экспрессии", используемая в данном документе, означает последовательность нуклеиновой кислоты, способную направлять экспрессию конкретной нуклеотидной последовательности в соответствующую клетку-хозяина, содержащую промотор, функционально связанный с представляющей интерес нуклеотидной последовательностью, которая функционально связана с сигналами терминации. Она также обычно содержит последовательности, необходимые для правильной трансляции нуклеотидной последовательности. По меньшей мере один из компонентов кассеты экспрессии, содержащей представляющую интереснуклеотидную последовательность, может быть гетерологичным по отношению к по меньшей мере одному из других ее компонентов. Кассета экспрессии может также представлять собой последовательность, которая встречается в природе, но была получена в рекомбинантной форме, применимой для гетерологичной экспрессии. Однако, как правило, кассета экспрессии является гетерологичной по отношению к хозяину, т.е. конкретная последовательность нуклеиновой кислоты в кассете экспрессии не встречается в клетке-хозяине в природе, и ее необходимо было ввести в клетку-хозяина или предка клетки-хозяина с помощью события трансформации. Экспрессия нуклеотидной последовательности в кассете экспрессии может находиться под контролем конститутивного промотора или индуцируемого промотора, который инициирует транскрипцию только тогда, когда клетка-хозяин подвергается воздействию некоторого определенного внешнего стимула. В случае многоклеточного организма, такого как растение, промотор также может быть специфичным по отношению к конкретной ткани, или органу, или стадии развития.

[0023] Кассета экспрессии, содержащая представляющую интерес нуклеотидную последовательность, может быть химерной, что означает, что по меньшей мере один из ее компонентов является гетерологичным по отношению к по меньшей мере одному из ее остальных компонентов. Кассета экспрессии также может представлять собой таковую, которая содержит нативный промотор, управляющий ее нативным геном, однако она была получена в рекомбинантной форме, применимой для гетерологичной экспрессии. Такое использование кассеты экспрессии обеспечивает то, что она является не встречающейся в природе в клетке, в которую была введена.

[0024] Кассета экспрессии также необязательно может содержать участок терминации транскрипциии/или трансляции (т.е. участок терминации), функционирующий в растениях. Разнообразные терминаторы транскрипции доступны для применения в кассетах экспрессии, и они отвечают за терминацию транскрипции за пределами представляющей интерес гетерологичной нуклеотидной последовательности и правильное полиаденилирование mRNA. Участок терминации может быть нативным по отношению к участку инициации транскрипции, может быть нативным по отношению к функционально связанной представляющей интерес нуклеотидной последовательности, может быть нативным по отношению к растению-хозяину или может быть получен из другого источника (т.е. быть чужеродным или гетерологичным по отношению к промотору, представляющей интерес нуклеотидной последовательности, растению-хозяину или любой их комбинации). Соответствующие терминаторы транскрипции включают без ограничения терминатор 35S CaMV, терминатор гена tml, терминатор гена нопалинсинтазы и/или терминатор гена rbcs-E9 гороха. Они могут применяться как у однодольных, так и у двудольных растений. В дополнение, может применяться нативный терминатор транскрипции кодирующей последовательности. В контексте настоящего изобретения может применяться любой доступный терминатор, о котором известно, что он функционирует в растениях.

[0025] Термин "экспрессия" в случае использования со ссылкой на полинуклеотид, такой как ген, ORF или ее часть или трансген в растениях, относится к процессу преобразования генетической информации, кодируемой геном, в РНК (например, mRNA, rRNA, tRNA или snRNA) посредством "транскрипции" гена (т.е. за счет ферментативного действия РНК-полимеразы), и в белок, если это применимо (например, если ген кодирует белок), посредством "трансляции" mRNA. Экспрессия гена может регулироваться на многих стадиях в ходе этого процесса. Например, в случае антисмысловых конструкций или конструкций dsRNA соответственно, экспрессия может относиться к транскрипции только антисмысловой РНК или только dsRNA. В вариантах осуществления "экспрессия" относится к транскрипции и стабильному накоплению смысловой (mRNA) или функциональной РНК. "Экспрессия" может также относиться к продуцированию белка.

[0026] "Ген" представляет собой определенный участок, который локализован внутри генома и содержит кодирующую последовательность нуклеиновой кислоты и, как правило, также содержит другие, в первую очередь регуляторные, нуклеиновые кислоты, ответственные за контроль экспрессии, иными словами транскрипции и трансляции, кодирующей части. Ген может также содержать другие 5'- и 3'-нетранслируемые последовательности и последовательности терминации. Дополнительными элементами, которые могут присутствовать, являются, например, интроны. Регуляторная последовательность нуклеиновой кислоты гена в норме может не быть функционально связанной с ассоциированной последовательностью нуклеиновой кислоты, как это встречается в природе, и в таком случае ген будет химерным геном.

[0027] "Представляющий интерес ген" относится к любой молекуле нуклеиновой кислоты, которая, в случае переноса в растение, придает растению требуемый признак, такой как устойчивость к антибиотикам, устойчивость к вирусам, устойчивость к насекомым, устойчивость к заболеваниям или устойчивость к другим вредителям, переносимость гербицидов, переносимость абиотического стресса, мужская стерильность, модифицированный метаболизм жирных кислот, модифицированный метаболизм углеводов, улучшенная пищевая ценность, улучшенные характеристики при промышленном способе или измененная репродуктивная способность. "Представляющий интерес ген" также может являться таким, который переносят в растения для получения коммерчески ценных ферментов или метаболитов в растении.

[0028] "Гетерологичная" последовательность нуклеиновой кислоты или молекула нуклеиновой кислоты представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты или молекулу нуклеиновой кислоты, которая в природе не ассоциирована с клеткой-хозяином, в которую ее вводят, в том числе не встречающиеся в природе множественные копии встречающейся в природе последовательности нуклеиновой кислоты. Гетерологичная последовательность нуклеиновой кислоты или молекула нуклеиновой кислоты может содержать химерную последовательность, такую как химерная кассета экспрессии, где промотор и кодирующих участок получены из нескольких исходных организмов. Последовательность промотора может представлять собой последовательность конститутивного промотора, последовательность тканеспецифичного промотора, последовательность химически индуцируемого промотора, последовательность индуцируемого повреждением промотора, последовательность индуцируемого стрессом промотора или последовательность специфичного для стадии развития промотора.

[0029] "Гомологичная" последовательность нуклеиновой кислоты представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, в природных условиях связанную с клеткой-хозяином, в которую ее вводят.

[0030] "Гомологичная рекомбинация" представляет собой взаимный обмен фрагментами нуклеиновой кислоты между гомологичными молекулами нуклеиновой кислоты.

[0031] "Идентичность" или "процентная идентичность" относится к степени сходства между двумя последовательностями нуклеиновых кислот или последовательностями белка. При сравнении последовательностей одна последовательность обычно выступает в качестве эталонной последовательности, с которой сравнивают тестируемые последовательности. При использовании алгоритма сравнения последовательностей тестируемую и эталонную последовательности вводят в компьютер, при необходимости задают координаты подпоследовательности, и задают программные параметры алгоритма сравнения последовательностей. Затем с помощью алгоритма сравнения последовательностей на основе заданных программных параметров вычисляют процентную идентичность последовательностей для тестируемой(-ых) последовательности(-ей) относительно эталонной последовательности. Фраза "в значительной степени идентичные" в контексте двух последовательностей нуклеиновых кислот или двух аминокислотных последовательностей относится к двум или более последовательностям или подпоследовательностям, которые характеризуются по меньшей мере приблизительно 50% идентичностью по нуклеотидам или аминокислотным остаткам при сравнении и выравнивании для максимального соответствия, что определяют с применением одного из следующих алгоритмов сравнения последовательностей или путем визуального осмотра. В определенных вариантах осуществления в значительной степени идентичные последовательности характеризуются по меньшей приблизительно 60%, или по меньшей мере приблизительно 70%, или по меньшей мере приблизительно 80%, или по меньшей мере приблизительно 85% или даже по меньшей мере приблизительно 90% или 95% идентичностью по нуклеотидам или аминокислотным остаткам. В определенных вариантах осуществления значительная степень идентичности существует на протяжении участка последовательностей, длина которого составляет по меньшей мере приблизительно 50 остатков, или на протяжении участка, состоящего из по меньшей мере приблизительно 100 остатков, или последовательности в значительной степени идентичны на протяжении по меньшей мере приблизительно 150 остатков. В дополнительных вариантах осуществления последовательности являются в значительной степени идентичными, когда они идентичны на протяжении всей длины кодирующих участков.

[0032] Оптимальное выравнивание последовательностей для сравнения можно проводить, например, с помощью алгоритма поиска локальной гомологии из Smith & Waterman, Adv. Appl. Math. 2: 482 (1981), с помощью алгоритма выравнивания областей гомологии из Needleman & Wunsch, J. Mol. Biol. 48: 443 (1970), с помощью способа поиска сходства из Pearson & Lipman, Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 85: 2444 (1988), с помощью программной реализации данных алгоритмов (GAP, BESTFIT, FASTA и TFASTA из Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Мадисон, Висконсин) или с помощью визуального осмотра (см. в общем Ausubel et al., ниже).

[0033] Одним примером алгоритма, который подходит для определения процента идентичности последовательностей и сходства последовательностей, является алгоритм BLAST, который описан в Altschul et al., J. Mol. Biol. 215. 403-410 (1990). Программное обеспечение для осуществления анализов BLAST находится в открытом доступе благодаря Национальному центру биотехнологической информации (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/). Данный алгоритм предусматривает вначале идентификацию пар последовательностей с высоким показателем сходства (HSP) путем идентификации коротких "слов" длиной W в запрашиваемой последовательности, которые либо совпадают, либо удовлетворяют некоторому положительному пороговому показателю T при выравнивании со "словом" такой же длины в последовательности из базы данных. Т называется пороговым значением показателя соседнего "слова" (Altschul et al., 1990). Эти первоначальные совпадения соседних "слов" выступают в качестве затравки, чтобы инициировать поиски для обнаружения более длинных HSP, содержащих их. Совпадения "слов" затем продлеваются в обоих направлениях вдоль каждой последовательности до тех пор, пока может увеличиваться совокупный показатель выравнивания. В случае нуклеотидных последовательностей совокупные показатели рассчитывают с применением параметров M (балл- вознаграждение, начисляемый за пару совпадающих остатков; всегда >0) и N (штрафной балл, начисляемый за несовпадающие остатки; всегда <0). В случае аминокислотных последовательностей для расчета совокупного показателя применяют матрицу замен. Продление совпадений "слов" в каждом направлении прекращается, когда совокупный показатель выравнивания снижается на величину X от своего максимального достигнутого значения, при этом совокупный показатель падает до нуля или ниже вследствие накопления одного или нескольких выравниваний остатков с отрицательными показателями, или при достижении конца одной из последовательностей. Параметры W, T и X алгоритма BLAST определяют чувствительность и скорость выравнивания. В программе BLASTN (для нуклеотидных последовательностей) по умолчанию используется длина "слова" (W), составляющая 11, ожидаемое значение (Е), составляющее 10, пороговое значение, составляющее 100, М=5, N= -4 и сравнение по обеим нитям. В случае аминокислотных последовательностей программа BLASTP использует по умолчанию длину "слова" (W), составляющую 3, ожидаемое значение (Е), составляющее 10, а также матрицу замен BLOSUM62 (см. Henikoff & Henikoff, Proc. Natl. Acad. Sci USA 89: 10915 (1989)).

[0034] В дополнение к расчету процента идентичности последовательностей алгоритм BLAST также выполняет статистический анализ сходства между двумя последовательностями (см., например, Karlin & Altschul, Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 90: 5873-5787 (1993)). Одной мерой сходства, предоставляемой алгоритмом BLAST, является наименьшая суммарная вероятность (P(N)), которая является показателем того, что совпадения между двумя нуклеотидными или аминокислотными последовательностями будут возникать случайным образом. Например, считается, что тестируемая последовательность нуклеиновой кислоты сходна с эталонной последовательностью, если наименьшая суммарная вероятность при сравнении тестируемой последовательности нуклеиновой кислоты с эталонной последовательностью нуклеиновой кислоты составляет менее приблизительно 0,1, более предпочтительно менее приблизительно 0,01 и наиболее предпочтительно менее приблизительно 0,001.

[0035] Другой широко применяемой и признанной компьютерной программой для осуществления выравниваний последовательностей является CLUSTALW v1.6 (Thompson, et al. Nuc. Acids Res., 22: 4673-4680, 1994). Число совпадающих оснований или аминокислот делят на общее число оснований или аминокислот и умножают на 100 с получением процента идентичности. Например, если бы две последовательности из 580 пар оснований имели 145 совпавших оснований, то они были бы идентичны на 25 процентов. Если две сравниваемые последовательности имеют разную длину, то число совпадений делят на более короткую из двух длин. Например, если в белках из 200 и 400 аминокислот было 100 совпадавших аминокислот, то они идентичны на 50 процентов с учетом более короткой последовательности. Если длина более короткой последовательность составляет менее 150 оснований или 50 аминокислот, то число совпадений делят на 150 (в случае нуклеиновых оснований) или 50 (в случае аминокислот), и умножают на 100 с получением процента идентичности.

[0036] Другим показателем того, что две нуклеиновые кислоты являются в значительной степени идентичными, служит то, что эти две молекулы гибридизируются друг с другом в жестких условиях. Фраза "гибридизируется специфически с" относится к связыванию, образованию дуплекса или гибридизации молекулы только с определенной нуклеотидной последовательностью в жестких условиях, когда такая последовательность присутствует в сложной смеси (например, общих клеточных) ДНК или РНК. "В значительной степени связывается" относится к комплементарной гибридизации между нуклеиновой кислотой-зондом и целевой нуклеиновой кислотой и охватывает незначительные несовпадения, которые могут быть исправлены за счет снижения жесткости среды для гибридизации, чтобы добиться необходимого выявления целевой последовательности нуклеиновой кислоты.

[0037] "Жесткие условия гибридизации" и "жесткие условия отмывки при гибридизации" в контексте экспериментов с гибридизацией нуклеиновых кислот, таких как саузерн- и нозерн-гибридизации, зависят от последовательности и отличаются при разных параметрах окружающей среды. Более длинные последовательности специфично гибридизируются при более высоких температурах. Подробное руководство по гибридизации нуклеиновых кислот можно найти в Tijssen (1993) Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology-Hybridization with Nucleic Acid Probes part I chapter 2 "Overview of principles of hybridization and the strategy of nucleic acid probe assays" Elsevier, New York. Как правило, условия гибридизации и отмывки высокой жесткости выбирают так, чтобы температура была приблизительно на 5°C ниже точки плавления (Tm) для конкретной последовательности при определенных ионной силе и значении рН. Как правило, при "жестких условиях" зонд будет гибридизироваться со своей целевой последовательностью, но ни с какими другими последовательностями.

[0038] Значение Tm представляет собой температуру (при определенных ионной силе и значении pH), при которой 50% целевой последовательности гибридизируется с точно совпадающим зондом. Для очень жестких условий выбирают температуру, равную Tm для конкретного зонда. Примером жестких условий гибридизации для гибридизации комплементарных нуклеиновых кислот, которые имеют более чем 100 комплементарных остатков на фильтре в саузерн- или нозерн-блоте, является 50% формамид с 1 мг гепарина при 42°C, причем гибридизация проводится в течение ночи. Примером условий отмывки высокой жесткости является 0,1 5М NaCl при 72°C в течение приблизительно 15 минут. Примером жестких условий отмывки является отмывка с помощью 0,2x SSC при 65°C в течение 15 минут (см. Sambrook, ниже, в отношении описания буфера SSC). Часто с целью избавления от фонового сигнала зонда отмывке в условиях высокой жесткости предшествует отмывка в условиях низкой жесткости. Примерными условиями отмывки средней жесткости для дуплекса, например с более чем 100 нуклеотидами, являются 1x SSC при 45°C в течение 15 минут. Примерными условиями отмывки низкой жесткости для дуплекса, например с более чем 100 нуклеотидами, являются 4-6x SSC при 40°C в течение 15 минут. Для коротких зондов (например, длиной от приблизительно 10 до 50 нуклеотидов) жесткие условия обычно предусматривают концентрации солей, составляющие менее чем приблизительно 1,0 М ионов Na, как правило концентрацию, составляющую приблизительно 0,01-1,0 М ионов Na (или других солей), при рН 7,0-8,3, а также температуру, как правило, составляющую по меньшей мере приблизительно 30°C. Жесткие условия также могут быть достигнуты с добавлением дестабилизирующих средств, таких как формамид. В целом, соотношение сигнал-шум, в 2 (или более) раза превышающее наблюдаемое для несвязанного зонда при конкретном гибридизационном анализе, указывает на выявление специфической гибридизации. Нуклеиновые кислоты, которые не гибридизируются друг с другом в жестких условиях, все еще являются в значительной степени идентичными, если белки, которые они кодируют, в значительной степени идентичны. Например, это происходит в том случае, когда копию нуклеиновой кислоты создают с применением максимальной вырожденности кодонов, допускаемой генетическим кодом.

[0039] Примеры наборов условий гибридизации/отмывки, которые можно применять для клонирования гомологичных нуклеотидных последовательностей, которые в значительной степени идентичны эталонным нуклеотидным последовательностям по настоящему изобретению, являются следующими: эталонная нуклеотидная последовательность предпочтительно гибридизируется с эталонной нуклеотидной последовательностью в 7% додецилсульфате натрия (SDS), 0,5 M NaPO₄, 1 мМ EDTA при 50°C с отмывкой в 2X SSC, 0,1% SDS при 50°C, более желательно в 7% додецилсульфате натрия (SDS), 0,5 M NaPO₄, 1 мМ EDTA при 50°C с отмывкой в 1X SSC, 0,1% SDS при 50°C, еще более желательно в 7% додецилсульфате натрия (SDS), 0,5 M NaPO₄, 1 мМ EDTA при 50°C с отмывкой в 0,5X SSC, 0,1% SDS при 50°C, предпочтительно в 7% додецилсульфате натрия (SDS), 0,5 M NaPO₄, 1 мМ EDTA при 50°C с отмывкой в 0,1X SSC, 0,1% SDS при 50°C, более предпочтительно в 7% додецилсульфате натрия (SDS), 0,5 M NaPO₄, 1 мМ EDTA при 50°C с отмывкой в 0,1X SSC, 0,1% SDS при 65°C.

[0040] Дополнительным свидетельством того, что две нуклеиновые кислоты или два белка являются в значительной степени идентичными, является то, что белок, кодируемый первой нуклеиновой кислотой, является иммунологически перекрестно реактивным с белком, закодированным второй нуклеиновой кислотой, или специфически связывается с ним. Таким образом, как правило, белок является в значительной степени идентичным второму белку, например, если два белка отличаются только консервативными заменами.

[0041] Последовательность нуклеиновой кислоты является "изокодонной с" эталонной последовательностью нуклеиновой кислоты, когда последовательность нуклеиновой кислоты кодирует полипептид, имеющий такую же аминокислотную последовательность, что и полипептид, кодируемый эталонной последовательностью нуклеиновой кислоты.

[0042] "Выделенная" молекула нуклеиновой кислоты или выделенный токсин, рукой человека, представляют собой молекулу нуклеиновой кислоты или токсин, которые существуют независимо от своей природной среды, а следовательно не является природным продуктом. Выделенные молекула нуклеиновой кислоты или токсин могут существовать в очищенной форме или могут существовать в неприродной среде, например, без ограничения, такой как рекомбинантная микробная клетка, растительная клетка, растительная ткань или растение.

[0043] "Молекула нуклеиновой кислоты" или "последовательность нуклеиновой кислоты" представляет собой сегмент одно- или двухнитевой ДНК или РНК, который может быть выделен из любого источника. В контексте настоящего изобретения молекула нуклеиновой кислоты обычно представляет собой сегмент ДНК. В некоторых вариантах осуществления молекулы нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению представляют собой выделенные молекулы нуклеиновой кислоты.

[0044] Термины "белок", "пептид" и "полипептид" используются в данном документе взаимозаменяемо.

[0045] Используемое в данном документе выражение "кодон-оптимизированная" последовательность означает нуклеотидную последовательность рекомбинантного, трансгенного или синтетического полинуклеотида, в котором кодоны выбраны так, чтобы отражать склонность к определенным кодонам, которая может наблюдаться в клетке-хозяине. Это выполняется таким образом, чтобы сохранить аминокислотную последовательность полипептида, кодируемого кодон-оптимизированным полинуклеотидом. В некоторых вариантах осуществления нуклеотидная последовательность рекомбинантной ДНК-конструкции содержит последовательность, которая была кодон-оптимизирована для клетки (например, клетки животного, растения или гриба), в которой конструкция будет экспрессироваться. Например, в конструкции, которая будет экспрессироваться в растительной клетке, могут быть кодон-оптимизированы для экспрессии в растении вся последовательность или ее части (например, первый элемент для супрессии гена или элемент для экспрессии гена). См., например, патент США № 6121014, включенный в данный документ посредством ссылки.

[0046] "Растение" представляет собой любое растение на любой стадии развития, в частности семенное растение.

[0047] "Растительная клетка" представляет собой структурную и физиологическую единицу растения, содержащую протопласт и клеточную стенку. Растительная клетка может быть в виде выделенной одиночной клетки или культивируемой клетки или в качестве части более высокоорганизованной единицы, такой как, например, растительная ткань, орган растения или целое растение.

[0048] "Культура растительных клеток" означает культуры единиц растения, таких как, например, протопласты, клетки в клеточной культуре, клетки в растительных тканях, пыльца, пыльцевые трубки, семязачатки, зародышевые мешки, зиготы и зародыши на различных стадиях развития.

[0049] "Растительный материал" относится к листьям, стеблям, корням, цветкам или частям цветков, плодам, пыльце, яйцеклеткам, зиготам, семенам, черенкам, клеточным или тканевым культурам, или к любой другой части или продукту растения.

[0050] "Орган растения" представляет собой отдельную и визуально структурированную и дифференцированную часть растения, такую как корень, стебель, лист, цветочная почка или зародыш.

[0051] "Растительная ткань", применяемая в данном документе, означает группу растительных клеток, организованных в структурную и функциональную единицу. Включена любая ткань растения in planta или в культуре. Данный термин включает без ограничения целые растения, органы растений, семена растений, тканевую культуру и любые группы растительных клеток, организованных в структурные и/или функциональные единицы. Использование данного термина в сочетании с любым специфическим типом растительной ткани, приведенным выше или иным образом охваченным данным определением, или без такового, не предназначено для исключения любого другого типа растительной ткани.

[0052] "Промотор" представляет собой нетранслируемую последовательность ДНК выше кодирующей области, которая содержит сайт связывания для РНК-полимеразы и инициирует транскрипцию ДНК. Промоторный участок может также содержать другие элементы, которые выступают в качестве регуляторов экспрессии генов.

[0053] "Регуляторные элементы" относятся к последовательностям, вовлеченным в контроль экспрессии нуклеотидной последовательности. Регуляторные элементы предусматривают промотор, функционально связанный с представляющей интерес нуклеотидной последовательностью, и сигналы терминации. Как правило, они охватывают также последовательности, необходимые для надлежащей трансляции нуклеотидной последовательности.

[0054] "Трансформация" представляет собой процесс введения гетерологичной нуклеиновой кислоты в клетку- или организм-хозяин. В конкретных вариантах осуществления "трансформация" означает стабильную интеграцию молекулы ДНК в геном (ядерный или пластиды) представляющего интерес организма.

[0055] "Трансформированный/трансгенный/рекомбинантный" относится к организму-хозяину, такому как бактерия или растение, в который была введена гетерологичная молекула нуклеиновой кислоты. Молекулу нуклеиновой кислоты можно стабильно интегрировать в геном хозяина, или же молекула нуклеиновой кислоты также может присутствовать в виде внехромосомной молекулы. Такая внехромосомная молекула может быть автореплицирующейся. Подразумевается, что трансформированные клетки, ткани или растения охватывают не только конечный продукт процесса трансформации, но также и их трансгенное потомство. "Нетрансформированный", "нетрансгенный" или "нерекомбинантный" хозяин относится к организму дикого типа, например бактерии или растению, которые не содержат гетерологичную молекулу нуклеиновой кислоты.

[0056] Нуклеотиды обозначены по их основаниям с помощью следующих стандартных сокращений: аденин (A), цитозин (C), тимин (T) и гуанин (G). Аналогичным образом, аминокислоты обозначены с помощью следующих стандартных сокращений: аланин (Ala; A), аргинин (Arg; R), аспарагин (Asn; N), аспарагиновая кислота (Asp; D), цистеин (Cys; С), глутамин (Gln; Q), глутаминовая кислота (Glu; E), глицин (Gly; G), гистидин (His; H), изолейцин (Ile; 1), лейцин (Leu; L), лизин (Lys; K), метионин (Met; М), фенилаланин (Phe; F), пролин (Pro; P), серин (Ser; S), треонин (Thr; T), триптофан (Trp; W), тирозин (Tyr; Y) и валин (Val; V).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

[0057] Настоящее изобретение относится к новым инсектицидным белкам, которые характеризуются активностью против жесткокрылых, например Diabrotica virgifera virgifera (западного кукурузного корневого жука; WCR), Diabrotica barberi (северного кукурузного корневого жука; NCR) и/или Diabrotica undecimpunctata howardi (южного кукурузного корневого жука; SCR) и/или других видов Diabrotica, в том числе Diabrotica virgifera zeae (мексиканского кукурузного корневого жука), и/или колорадского жука. В вариантах осуществления новый инсектицидный белок по настоящему изобретению может обладать активностью в отношении видов чешуекрылых. Настоящее изобретение также относится к нуклеиновым кислотам, экспрессия которых приводит к образованию инсектицидных белков по настоящему изобретению, а также к получению и применению инсектицидных белков для контроля насекомых-вредителей. В вариантах осуществления экспрессия нуклеиновых кислот приводит к образованию инсектицидных белков, которые могут применяться для контроля жесткокрылых насекомых, таких как западный, северный и/или южный кукурузный корневой жук, в частности в случае экспрессии в трансгенном растении, таком как трансгенное растение кукурузы.

[0058] Настоящее изобретение дополнительно охватывает молекулу нуклеиновой кислоты, содержащую нуклеотидную последовательность, которая кодирует инсектицидный белок по настоящему изобретению. Нуклеотидная последовательность может быть оптимизирована для экспрессии в бактериях, таких как Escherichia coli, или для экспрессии в растении, таком как Zea mays. Нуклеотидная последовательность, оптимизированная для экспрессии в гетерологичном организме, таком как виды бактерий, отличные от тех, из которых она получена, или растение, не встречается в природе. В одном аспекте данного варианта осуществления молекула нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность под SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4-36, SEQ ID NO: 73-83 и/или SEQ ID NO: 99. В частности, иллюстративные рекомендации в отношении способов получения молекул нуклеиновой кислоты, которые кодируют инсектицидные белки по настоящему изобретению, могут быть найдены в примерах данной заявки. Специалистам в данной области будет понятно, что в иллюстративных способах получения инсектицидных белков, охватываемых настоящим изобретением, могут быть сделаны модификации.

[0059] Специалисту в данной области будет понятно, что трансген для коммерческого применения, такой как молекула нуклеиновой кислоты, которая содержит любую из SEQ ID NO: 2-36, SEQ ID NO: 73-83 или SEQ ID NO: 99, может характеризоваться относительно незначительными модификациями по отношению к последовательности нуклеиновой кислоты для соответствия требованиям государственных регулятивных норм. Такие модификации не будут влиять на функцию полученной молекулы, которая будет в значительной степени идентичной SEQ ID NO: 2-36, SEQ ID NO: 73-83 и/или SEQ ID NO: 99. Специалисту в данной области будет понятно, что модифицированная молекула нуклеиновой кислоты будет фактически такой же, как и исходная молекула, и охвачена настоящим изобретением.

[0060] Настоящее изобретение также охватывает молекулу нуклеиновой кислоты, которая содержит (a) нуклеотидную последовательность любой из SEQ ID NO: 2-36, SEQ ID NO: 73-83 или SEQ ID NO: 99; (b) нуклеотидную последовательность, которая представляет собой последовательность, на по меньшей мере 45% идентичную, на по меньшей мере 50% идентичную, на по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или на 100% идентичную любой из нуклеотидных последовательностей под SEQ ID NO: 2-36, SEQ ID NO: 73-83 или SEQ ID NO: 99; (c) нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид, при этом аминокислотная последовательность полипептида содержит SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69 или SEQ ID NO: 86-96 и характеризуется активностью в отношении контроля насекомых; (d) нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид, при этом аминокислотная последовательность полипептида на по меньшей мере 45% идентична, по меньшей мере 50% идентична, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или на 100% идентична любой из аминокислотных последовательностей под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-72, SEQ ID NO: 86-96 или SEQ ID NO: 100; или (e) нуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности из любого из (a) - (d), приведенных выше.

[0061] Настоящее изобретение дополнительно охватывает кассету экспрессии, содержащую промотор, функционально связанный с гетерологичной нуклеотидной последовательностью, которая содержит: (a) нуклеотидную последовательность под любым из SEQ ID NO: 2-36, SEQ ID NO: 73-83 или SEQ ID NO: 99; (b) нуклеотидную последовательность, которая на по меньшей мере 45% идентична, на по меньшей мере 50% идентична, на по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или на 100% идентична нуклеотидной последовательности под любым из SEQ ID NO: 2-36, SEQ ID NO: 73-83 или SEQ ID NO: 99; (c) нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид, при этом аминокислотная последовательность полипептида содержит SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-72, SEQ ID NO: 86-96 или SEQ ID NO: 100 и характеризуется активностью в отношении контроля насекомых; (d) нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид, при этом аминокислотная последовательность полипептида на по меньшей мере 45% идентична, по меньшей мере 50% идентична, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или на 100% идентична аминокислотной последовательности под любым из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-72, SEQ ID NO: 86-96 или SEQ ID NO: 100; или (e) нуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности из любого из (a) - (d), приведенных выше. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение охватывает кассету экспрессии, содержащую гетерологичную молекулу нуклеиновой кислоты, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, при этом аминокислотная последовательность полипептида на по меньшей мере 93% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 67 или SEQ ID NO: 86-91. Кассета экспрессии содержит промотор, функционально связанный с гетерологичной нуклеотидной последовательностью и не встречающийся в природе.

[0062] В некоторых вариантах осуществления гетерологичная молекула нуклеиновой кислоты в кассете экспрессии содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, при этом аминокислотная последовательность полипептида представляет собой аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 72, и при этом аминокислотный остаток "X" может быть любым аминокислотным остатком. В некоторых вариантах осуществления гетерологичная молекула нуклеиновой кислоты в кассете экспрессии содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, на по меньшей мере 93% идентичный аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 100.

[0063] Настоящее изобретение также охватывает рекомбинантные векторы или конструкции, которые также могут называться векторами или конструкциями, содержащими кассеты экспрессии и/или молекулы нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению. В таких векторах нуклеиновые кислоты предпочтительно находятся в кассетах экспрессии, содержащих регуляторные элементы для экспрессии нуклеотидных молекул в клетке-хозяине, способной экспрессировать нуклеотидные молекулы. Такие регуляторные элементы обычно содержат промотор и сигналы терминации и, предпочтительно, также содержат элементы, дающие возможность выполнять эффективную трансляцию полипептидов, кодируемых нуклеиновыми кислотами по настоящему изобретению. Векторы, содержащие нуклеиновые кислоты, могут быть способны к репликации в конкретных клетках-хозяевах, предпочтительно как внехромосомные молекулы, и таким образом используются для амплификации нуклеиновых кислот по настоящему изобретению в клетках-хозяевах. Настоящее изобретение также охватывает клетку-хозяина, которая содержит кассету экспрессии или молекулу нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению. В одном варианте осуществления клетками-хозяева для таких векторов являются микроорганизмы, такие как бактерии, в частности Bacillus thuringiensis или E. coli, или такие как грибы, как, например, дрожжи. В другом варианте осуществления клетки-хозяева для таких рекомбинантных векторов представляют собой эндофиты или эпифиты. В еще одном варианте осуществления такие векторы являются вирусными векторами и применяются для репликации нуклеотидных последовательностей в конкретных клетках-хозяевах, например в клетках насекомых или растительных клетках. Рекомбинантные векторы также используются для трансформации нуклеотидных молекул по настоящему изобретению в клетки-хозяева, вследствие чего нуклеотидные молекулы стабильно интегрируются в ДНК трансгенного хозяина. В одном варианте осуществления трансгенным хозяином является растение, например однодольное растение, такое как растение кукурузы или растение пшеницы. В вариантах осуществления трансгенное растение-хозяин представляет собой двудольное растение, такое как растение сои или растение хлопка.

[0064] В другом варианте осуществления по меньшей мере одна из нуклеиновых кислот по настоящему изобретению вводится в соответствующую кассету экспрессии, содержащую промотор и сигнал терминации. Экспрессия нуклеиновой кислоты может быть конститутивной, или может применяться индуцибельный промотор, отвечающий на различные типы стимулов для инициации транскрипции. В другом варианте осуществления клетка, в которой экспрессируется инсектицидный белок по настоящему изобретению, представляет собой микроорганизм, такой как вирус, бактерии или гриб. Еще в одном варианте осуществления вирус, такой как бакуловирус, содержит в своем геноме нуклеиновую кислоту по настоящему изобретению и экспрессирует большие количества соответствующего инсектицидного белка после заражения соответствующих эукариотических клеток, которые пригодны для репликации вируса и экспрессии нуклеиновой кислоты. Полученный таким образом инсектицидный белок применяется в качестве инсектицидного средства. В качестве альтернативы, бакуловирусы, сконструированные с возможностью содержания нуклеиновой кислоты, применяются для инфицирования насекомых in vivo, и они уничтожают их либо посредством экспрессии инсектицидного токсина, либо посредством комбинации вирусной инфекции и экспрессии инсектицидного токсина. В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение также охватывает способ получения полипептид с инсектицидной активностью, включающий культивирование клетки-хозяина в условиях, при которых экспрессируется молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид.

[0065] Бактериальные клетки также являются клетками-хозяевами для экспрессии нуклеиновых кислот по настоящему изобретению. В одном варианте осуществления применяются непатогенные симбиотические бактерии, способные жить и размножаться в растительных тканях, так называемые эндофиты, или непатогенные симбиотические бактерии, способные колонизировать филлосферу или ризосферу, так называемые эпифиты. Такие бактерии включают бактерий родов Agrobacterium, Alcaligenes, Azospirillum, Azotobacter, Bacillus, Clavibacter, Enterobacter, Erwinia, Flavobacter, Klebsiella, Pseudomonas, Rhizobium, Serratia, Streptomyces и Xanthomonas. Симбиотические грибы, такие как Trichoderma и Gliocladium, также являются возможными хозяевами для экспрессии нуклеиновых кислот по настоящему изобретению для той же цели.

[0066] Методики для этих генетических манипуляций являются специальными для различных доступных хозяев и известны из уровня техники. Например, векторы экспрессии pKK223-3 и pKK223-2 могут использоваться для экспрессии гетерологичных генов в E. coli либо в транскрипционном, либо трансляционном слиянии под действием промотора tac или trc. Для экспрессии оперонов, кодирующих несколько ORF, самой простой процедурой является введение оперона в вектор, такой как pKK223-3, в виде транскрипционного слияния, что дает возможность применять когнатный сайт связывания рибосом гетерологичных генов. Методики для сверхэкспрессии у грамположительных видов, таких как Bacillus, также известны из уровня техники и могут использоваться в контексте настоящего изобретения (Quax et al. в: Industrial Microorganisms: Basic and Applied Molecular Genetics, Eds. Baltz et al., American Society for Microbiology, Washington (1993)). Альтернативные системы сверхэкспрессии основаны, например, на дрожжевых векторах и включают использование Pichia, Saccharomyces и Kluyveromyces (Sreekrishna, в: Industrial microorganisms: basic and applied molecular genetics, Baltz, Hegeman, и Skatrud eds., American Society for Microbiology, Washington (1993); Dequin & Barre, Biotechnology L2:173-177 (1994); van den Berg et al, Biotechnology 8:135-139 (1990)).

[0067] Некоторые инсектицидные белки уже экспрессировали в растениях, и семена таких растений ежегодно продаются фермерам для применения в контроле различных насекомых-вредителей. Такие самозащищенные инсектицидные продукты рассматриваются и регистрируются различными регулирующими органами, включая, например, Агентство по охране окружающей среды США (EPA).

[0068] Воздействие при поступлении с пищей является основным путем, за счет которого люди могут подвергаться воздействию инсектицидных белков, экспрессируемых трансгенными растениями. Острая пероральная токсичность для млекопитающих и перевариваемость белка являются конечными точками оценки риска для здоровья человека, определяемыми EPA. Дополнительным научным доказательством безопасности инсектицидных белков является то, что они, как было показано, быстро расщепляются in vitro под действием искусственного желудочного сока. Например, результаты семи анализов in vitro, проведенных с иллюстративными белками Cry1, Cry2 и Cry3, показали, что белки быстро расщепляются, как правило, в течение 30 секунд. Эти результаты подтверждают более широкий вывод о том, что члены этих групп белков Cry (которые обладают значительной идентичностью аминокислотных последовательностей), вероятно, быстро расщепляются после поедания человеком. Подобные тесты проводят для каждого трансгенного белка, экспрессируемого в растениях. Другая область рассмотрения охватывает определение того, могут ли инсектицидные белки вызывать аллергическую реакцию. Продемонстрированное быстрое расщепление трансгенного инсектицидного белка in vitro должно сводить к минимуму возможность такого явления. Для сравнения, пищевые аллергены обычно не подвергаются распадению в in vitro модели желудочно- кишечного тракта, тогда как обычные белки пищи, для которых не показана аллергенность, быстро расщепляются в искусственном желудочном соке (Metcalfe et al., 1996).

[0069] С помощью анализа с использованием искусственного желудочного сока (SGF) измеряют in vitro перевариваемость тестируемого белка в строго контролируемых условиях, характерных для верхних отделов пищеварительного тракта млекопитающих. Например, полученный в бактериях тестируемый белок Cry (в концентрации 0,5-5 мг/мл) подвергали воздействию фермента пепсина (из слизистой оболочки желудка свиньи, растворенного в 2 мг/мл NaCl, pH 1,2) в соотношении 10 единиц активности пепсина/мкг тестируемого белка в течение периода времени, составляющего один час, при 37°C. Образцы отбирали в моменты времени 1, 2, 5, 10, 30 и 60 минут, и сразу же блокировали путем добавления предварительно нагретого (95°C - 2 минуты) стоп-буфера (65% 0,5 M бикарбоната натрия, pH 11, 35% трициновый загрузочный буфер) для немедленной инактивации пепсина, и снова нагревали в течение дополнительных 5 минут. После завершения анализа образцы, взятые в определенные моменты времени, и контроли (только тестируемый белок, только пепсин) исследовали с помощью SDS-PAGE в 10-20% трис-трициновом геле (при этом пептиды были визуально различимы вплоть до 1 кДа) для отслеживания кинетических особенностей и уровня переваривания, осуществляемого пепсином. Если тестируемый белок или значительный полипептидный фрагмент тестируемого белка является визуально различимым, например, в моменты времени 5 и/или 10 минут, то он является неперевариваемым или не полностью перевариваемым в анализе с использованием SGF иможет быть качественно оценен как "нет" или "неперевариваемый". Если тестируемый белок и любой значительный полипептидный фрагмент не является визуально различимым, например, в момент времени 5 минут, то он является перевариваемым в анализе с использованием SGF и может быть качественно оценен как "да" или "перевариваемый".

[0070] Настоящее изобретение также охватывает полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 45% идентичную, по меньшей мере 50% идентичную, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% идентичную или на 100% идентичную любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-72, SEQ ID NO: 86-96 или SEQ ID NO: 100 и дополнительно содержащую введенный сайт расщепления протеазой. Введенный сайт расщепления протеазой не встречается в природе и вводится в полипептидную последовательность в результате мутации по типу замены или в результате мутации по типу вставки или делеции. Введенный сайт расщепления протеазой может быть введен путем вставки по меньшей мере одного лейцинового остатка в полипептидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-72, SEQ ID NO: 86-96 или SEQ ID NO: 100. Введенная мутация может дестабилизировать полипептид таким образом, что протеаза может получать доступ к сайту расщепления, к которому она ранее не имела доступ вследствие плотной и/или стабильной укладки белка или стерического несоответствия. Введенный сайт расщепления протеазой может представлять собой введенную мутацию в полипептидной последовательности, которая распознается протеазой, такой как химотрипсин, трипсин или пепсин, в качестве сайта протеолитического расщепления. В некоторых вариантах осуществления введенный сайт расщепления протеазой может изменять существующий сайт расщепления протеазой таким образом, что он распознается другой протеазой. Сайты расщепления протеазой для химотрипсина, трипсина и пепсина широко известны из уровня техники. Химотрипсин преимущественно расщепляет пептидные амидные связи, в которых с карбоксильной стороны от амидной связи (в положении P1) расположена крупная гидрофобная аминокислота (тирозин, триптофан и фенилаланин). Трипсин расщепляет пептидные цепи главным образом с карбоксильной стороны аминокислот лизина или аргинина, за исключением случаев, когда после какой-либо из них расположен пролин. Пепсин является наиболее эффективным при расщеплении пептидных связей между гидрофобными и предпочтительно ароматическими аминокислотами, такими как фенилаланин, триптофан и тирозин. Эти сайты расщепления являются преимущественными сайтами расщепления и не включают в себя все сайты расщепления, распознаваемые химотрипсином, трипсином или пепсином, и, кроме того, не включают в себя все сайты расщепления для всех протеаз.

[0071] Примером полипептида, сконструированного таким образом, что он содержит введенный сайт расщепления протеазой, является вариант WoodsCRW C398L(SEQ ID NO: 55). В результате данной мутации по типу замены мотив изменяется с "NKDCVS" на "NKDLVS". Данный введенный сайт расщепления протеазой может распознаваться пепсином и/или химотрипсином и отсутствует в последовательности белка WoodsCRW дикого типа. В некоторых вариантах осуществления введенный сайт расщепления протеазой может находиться в сайте мутации или рядом с ним, например, в остатках 388-408 полипептида. Широко известно из уровня техники, что цистеиновые остатки в белках часто ковалентно связаны с другими цистеиновыми остатками с образованием дисульфидных связей. Дисульфидные связи играют важную роль в укладке и стабильности некоторых белков. Следовательно, вариант WoodsCRW C398L может иметь измененную или менее стабильную третичную структуру по сравнению с WoodsCRW дикого типа. В некоторых вариантах осуществления введенный сайт расщепления протеазой может быть расположен дистально относительно введенной мутации. Например, введенная мутация C398L может "ослаблять" трехмерную укладку полипептида WoodsCRW, тем самым делая сайт расщепления протеазой, который ранее был недоступным (и, следовательно, не расщеплялся), доступным для протеазы. Это приводит к тому, что в результате введения мутации вводится сайт расщепления протеазой, который не существовал в неизмененном полипептиде. В некоторых вариантах осуществления введенная мутация и/или введенный сайт расщепления протеазой расположены среди аминокислотных остатков 1-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенная мутация и/или введенный сайт расщепления протеазой расположены среди аминокислотных остатков 100-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенная мутация и/или введенный сайт расщепления протеазой расположены среди аминокислотных остатков 190-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенная мутация и/или введенный сайт расщепления протеазой расположены среди аминокислотных остатков 190-310 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенная мутация и/или введенный сайт расщепления протеазой расположены среди аминокислотных остатков 190-210 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В других вариантах осуществления введенная мутация расположена среди аминокислотных остатков 300-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенная мутация и/или введенный сайт расщепления протеазой расположены среди аминокислотных остатков 300-400 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96.

[0072] Введенный сайт расщепления протеазой может изменять специфичность к протеазе в этом сайте, например, он может изменять сайт протеолитического расщепления трипсином на сайт протеолитического расщепления химотрипсином. Например, в варианте WoodsCRW K406L (SEQ ID NO: 45) сайт расщепления трипсином может изменяться на сайт расщепления химотрипсином или пепсином. В некоторых вариантах осуществления введенный сайт расщепления протеазой расположен среди аминокислотных остатков 1-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенный сайт расщепления протеазой расположен среди аминокислотных остатков 100-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенный сайт расщепления протеазой расположен среди аминокислотных остатков 190-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенный сайт расщепления протеазой расположен среди аминокислотных остатков 190-400 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенный сайт расщепления протеазой расположен среди аминокислотных остатков 190-310 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенный сайт расщепления протеазой расположен среди аминокислотных остатков 190-210 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В других вариантах осуществления введенный сайт расщепления протеазой расположен среди аминокислотных остатков 300-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенный сайт расщепления протеазой расположен среди аминокислотных остатков 300-400 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительном варианте осуществления введенный сайт расщепления протеазой, который изменяет специфичность к протеазе, может быть расположен между соответствующими аминокислотными остатками 313-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69 или SEQ ID NO: 86-96.

[0073] Настоящее изобретение также охватывает полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 45% идентичную, по меньшей мере 50% идентичную, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% идентичную или на 100% идентичную любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69 или SEQ ID NO: 86-96 и дополнительно содержащую введенную мутацию, которая улучшает перевариваемость в анализе с использованием SGF по сравнению с полипептидом, содержащим аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 1. Мутация может представлять собой мутацию по типу замены, вставку или делецию. Мутация может представлять собой вставку по меньшей мере одного лейцинового остатка.

[0074] Настоящее изобретение также включает способ улучшения перевариваемости полипептида, на по меньшей мере 45% идентичного, по меньшей мере 50% идентичного, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% идентичного или на 100% идентичного любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69 или SEQ ID NO: 86-96, включающий введение по меньшей мере одной мутации в аминокислотную последовательность полипептида. В вариантах осуществления эта введенная мутация улучшает перевариваемость полипептида в анализе с использованием SGF. Мутация может улучшать перевариваемость благодаря введению сайта расщепления протеазой. В других вариантах осуществления мутация может улучшать перевариваемость благодаря изменению специфичности к протеазе в этом сайте. Например, таким образом то, что могло быть сайтом для химотрипсина или трипсина, подвергается мутации с образованием сайта для пепсина. В других вариантах осуществления мутация может дестабилизировать белок таким образом, что сайт становится доступным для расщепления протеазой. Сайт, становящийся доступным для протеазы, может располагаться дистально относительно введенной мутации. В предпочтительных вариантах осуществления мутация не изменяет или не изменяет значительно активность или инсектицидную активность полипептида. В некоторых вариантах осуществления полипептид с введенной мутацией обладает по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% от инсектицидной активности WoodsCRW. Данный способ пояснен в примерах в настоящем описании, где, например, было обнаружено, что варианты WoodsCRW C398L, C398Y и D397-Leu-Leu-C398 обладают улучшенной перевариваемостью в анализе с использованием SGF. Они также сохраняли очень высокую инсектицидную активность.

[0075] В некоторых вариантах осуществления способа, описанного выше, введенная(введенные)мутация(мутации)может(могут)быть расположена(расположены) среди аминокислотных остатков 1-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенная(введенные) мутация(мутации) может(могут) быть расположена(расположены) среди аминокислотных остатков 100-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенная(введенные) мутация(мутации) может(могут) быть расположена(расположены) среди аминокислотных остатков 190-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенная(введенные) мутация(мутации) может(могут) быть расположена(расположены) среди аминокислотных остатков 190-400 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенная(введенные) мутация(мутации) может(могут) быть расположена(расположены) среди аминокислотных остатков 190-310 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенная(введенные) мутация(мутации) может(могут) быть расположена(расположены) среди аминокислотных остатков 190-210 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В других вариантах осуществления введенная(введенные) мутация(мутации) может(могут) быть расположена(расположены) среди аминокислотных остатков 300-490 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительных вариантах осуществления введенная(введенные) мутация(мутации) может(могут) быть расположена(расположены) среди аминокислотных остатков 300-400 в любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-69, SEQ ID NO: 72 или SEQ ID NO: 86-96. В дополнительном варианте осуществления введенная(введенные) мутация(мутации) может(могут) быть расположена(расположены) в соответствующих аминокислотных остатках 313-490 в любой из SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 37-69. В других вариантах осуществления мутация(мутации) может(могут) быть введена(введены) в отношении аминокислотных остатков 313-490 в SEQ ID NO: 1.

[0076] В других вариантах осуществления мутация может быть введена в отношении C398 в SEQ ID NO: 1 или проксимально относительно него. В дополнительных вариантах осуществления мутация может представлять собой C398L, C398I, C398V, C398G, C398A, C398F, C398M, C398S, C398W или C398Y. В других вариантах осуществления мутация может представлять собой вставку или делецию аминокислотного остатка, такую как, например, вставка по меньшей мере одного лейцинового остатка. Данный(данные) остаток(остатки) может(могут) быть прилегающим(прилегающими) к C398 или соседним(соседними) по отношению к нему в SEQ ID NO: 1, как, например, в вариантах WoodsCRW D397-Leu-C398, D397-Leu-Leu-C398, C398-Leu-V399, C398-Leu-Leu-V399 или D397-Leu-C398-L, для всех из которых было обнаружено, что они обладают улучшенной перевариваемостью в анализе с использованием SGF. Они также сохраняли очень высокую инсектицидную активность (см. примеры). Лейциновые остатки также могут быть вставлены проксимально относительно C398, где "проксимально" может означать на расстоянии по меньшей мере 1, по меньшей мере 2, по меньшей мере 4, по меньшей мере 6, по меньшей мере 8, по меньшей мере 10 или по меньшей мере 20 аминокислот от C398.

[0077] Инсектицидные белки по настоящему изобретению характеризуются активностью в отношении контроля насекомых при тестировании против насекомых- вредителей в биоанализах. В одном варианте осуществления инсектицидные белки по настоящему изобретению активны против жесткокрылых и/или чешуекрылых насекомых. Специалисту в данной области будет понятно, что белок по настоящему изобретению может характеризоваться другим диапазоном инсектицидной активности по сравнению с другими белками по настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления мутантный вариант WoodsCRW может характеризоваться инсектицидной активностью в отношении более широкого диапазона насекомых- вредителей, как, например, в отношении большего количества видов жесткокрылых или чешуекрылых, по сравнению с другими вариантами WoodsCRW. В других вариантах осуществления вариант WoodsCRW может характеризоваться инсектицидной активностью в отношении видов чешуекрылых, но не в отношении видов жесткокрылых. В некоторых вариантах осуществления вариант WoodsCRW может характеризоваться более широким диапазоном инсектицидной активности в отношении видов жесткокрылых или чешуекрылых по сравнению с немодифицированным WoodsCRW (SEQ ID NO: 1).

[0078] Насекомые в отряде Lepidoptera включают без ограничения любое известное в настоящее время или идентифицированное позже насекомое, которое классифицируется как чешуекрылое, в том числе те виды насекомых, которые относятся к подотрядам Zeugloptera, Glossata и Heterobathmiina и любым их комбинациям. Иллюстративные чешуекрылые насекомые включают без ограничения Ostrinia spp., такой как O. nubilalis (огневка кукурузная); Plutella spp., такой как P. xylostella (капустная моль); Spodoptera spp., такой как S. frugiperda (совка травяная), S. ornithogalli (желтополосая совка), S. praefica (западная желтополосая совка), S. eridania (южная совка) и S. exigua (совка малая); Agrotis spp., такой как A. ipsilon (совка- ипсилон), A. segetum (озимая совка обыкновенная), A. gladiaria (озимая совка рода Agrotis) и A. orthogonia (совка прямоугольная); Striacosta spp., такой как S. albicosta (западная бобовая совка); Helicoverpa spp., такой как H. zea (совка кукурузная), H. punctigera (совка хлопковая австралийская), S. littoralis (совка хлопчатника египетского) и H. armigera (совка хлопковая); Heliothis spp., такой как H. virescens (табачная листовертка); Diatraea spp., такой как D. grandiosella (огневка кукурузная юго-западная) и D. saccharalis (точильщик стеблей сахарного тростника); Trichoplusia spp., такой как T. ni (совка капустная); Sesamia spp., такой как S. nonagroides (мотылек кукурузный средиземноморский); Pectinophora spp., такой как P. gossypiella (розовый коробочный червь); Cochylis spp., такой как C. hospes (полосатая подсолнечная моль); Manduca spp., такой как M. sexta (табачный бражник) и M. quinquemaculata (бражник пятиточечный); Elasmopalpus spp., такой как E. lignosellus (точильщик стеблей кукурузы малый); Pseudoplusia spp., такой как P. includens (соевая совка); Anticarsia spp., такой как A. gemmatalis (совка бархатных бобов); Plathypena spp., такой как P. scabra (совка клеверная); Pieris spp., такой как P. brassicae (белянка капустная), Papaipema spp., такой как P. nebris (точильщик Papaipema nebris); Pseudaletia spp., такой как P. unipuncta (совка луговая обыкновенная); Peridroma spp., такой как P. saucia (совка маргаритковая); Keiferia spp., такой как K. lycopersicella (томатная острица); Artogeia spp., такой как A. rapae (белянка репная); Phthorimaea spp., такой как P.operculella (картофельная моль); Crymodes spp., такой как C. devastator (стеклянница); Feltia spp., такой как F. ducens (гусеница совки Feltia subgothica), и любую комбинацию вышеуказанных. В одном аспекте данного варианта осуществления инсектицидные белки по настоящему изобретению активны против совки-ипсилон, огневки сахарного тростника и/или огневки кукурузной юго-западной.

[0079] Насекомые в отряде Coleoptera включают без ограничения любое жесткокрылое насекомое, известное в настоящее время или идентифицированное позже, в том числе насекомых из подотрядов Archostemata, Myxophaga, Adephaga и Polyphaga, а также любой их комбинации.

[0080] В одном аспекте данного варианта осуществления инсектицидные белки по настоящему изобретению активны против Diabrotica spp. Diabrotica представляет собой род жуков отряда Coleoptera, обычно называемый "кукурузными корневыми жуками" или "огуречными жуками". Типичные виды Diabrotica включают без ограничения Diabrotica barberi (северного кукурузного корневого жука), D. virgifera virgifera (западного кукурузного корневого жука), D. undecimpunctata howardii (южного кукурузного корневого жука), D. balteata (жука-блошку окаймленного), D. undecimpunctata undecimpunctata (жука-блошку одиннадцатиточечную), D. significata (3-точечного листоеда), D. speciosa (диабротику особую), D. virgifera zeae (мексиканского кукурузного корневого жука), D. beniensis, D. cristata, D. curviplustalata, D. dissimilis, D. elegantula, D. emorsitans, D. graminea, D. hispanloe, D. lemniscata, D. linsleyi, D. milleri, D. nummularis, D. occlusal, D. porrecea, D. scutellata, D. tibialis, D. trifasciata и D. viridula и любую их комбинацию.

[0081] Другие неограничивающие примеры жесткокрылых насекомых-вредителей в соответствии с настоящим изобретением включают Leptinotarsa spp., такой как L. decemlineata (колорадский жук); Chrysomela spp., такой как C. scripta (листоед тополевый); Hypothenemus spp., такой как H. hampei (жук кофейный); Sitophilus spp., такой как S. zeamais (маисовый долгоносик); Epitrix spp., такой как E. hirtipennis (жук-блошка шершавая) и E. cucumeris (блошка картофельная); Phyllotreta spp., такой как P. cruciferae (блошка крестоцветная) и P. pusilla (западная черная блошка); Anthonomus spp., такой как A. eugenii (перечный долгоносик); Hemicrepidus spp., такой как H. memnonius (проволочники); Melanotus spp., такой как M. communis (проволочник); Ceutorhychus spp., такой как C. assimilis (рапсовый семенной скрытнохоботник); Phyllotreta spp., такой как P. cruciferae (блошка крестоцветная); Aeolus spp., такой как A. mellillus (проволочник); Aeolus spp., такой как A. mancus (пшеничный проволочник); Horistonotus spp., такой как H. uhlerii (песчаный проволочник); Sphenophorus spp., такой как S. maidis (долгоносик маисовый), S. zeae (долгоносик тимофеечный), S. parvulus (мятликовый долгоносик) и S. callosus (долгоносик клубеньковый эспарцетовый); Phyllophaga spp. (личинки хрущей); Chaetocnema spp., такой как C. pulicaria (блошка стеблевая хлебная); Popillia spp., такой как P. japonica (японский жук); Epilachna spp., такой как E. varivestis (мексиканский бобовый жук); Cerotoma spp., такой как C. trifurcate (жук-листоед); Epicauta spp., такой как E. pestifera и E. lemniscata (шпанские мушки), и любую комбинацию вышеуказанных.

[0082] Инсектицидные белки по настоящему изобретению также могут быть активными против полужесткокрылых, двукрылых, Lygus spp. и/или других колющих и сосущих насекомых, например из отряда Orthoptera или Thysanoptera. Насекомые в отряде Diptera включают без ограничения любое двукрылое насекомое, известное в настоящее время или идентифицированное позже, в том числе без ограничения Liriomyza spp., такой как L. trifolii (листовой минер) и L. sativae (листовой минер овощей); Scrobipalpula spp., такой как S. absoluta (листовой минер томатов); Delia spp., такой как D. platura (личинка мухи ростковой), D. brassicae (личинка мухи капустной весенней) и D. radicum (муха капустная весенняя); Psilia spp., такой как P. rosae (муха морковная); Tetanops spp., такой как T. myopaeformis (личинка тли свекловичной), и любую комбинацию вышеуказанных.

[0083] Насекомые в отряде Orthoptera включают без ограничения любое известное в настоящее время или идентифицированное позже прямокрылое насекомое, в том числе без ограничения Melanoplus spp., такой как M. differentialis (кобылка отличительная), M. femurrubrum (краснобедрая кобылка), M. bivittatus (кобылка двухполосая) и любую их комбинацию.

[0084] Насекомые в отряде Thysanoptera включают без ограничения любое известное в настоящее время или идентифицированное позже бахромчатокрылое насекомое, в том числе без ограничения Frankliniella spp., такой как F. occidentalis (западный цветочный трипс) и F. fusca (табачный трипс); и Thrips spp., такой как T. tabaci(трипс луковый), T. palmi (пальмовый трипс), и любую комбинацию вышеуказанных.

[0085] Инсектицидные белки по настоящему изобретению также могут быть активными против нематод. Используемый в данном документе термин "нематода" охватывает любой известный в настоящее время или идентифицированный позже организм, который классифицирован в царстве животных, тип нематоды, в том числе без ограничения нематоды в пределах класса Adenophorea (в том числе, например, отряды Enoplida, Isolaimida, Mononchida, Dorylaimida, Trichocephalida, Mermithida, Muspiceida, Araeolaimida, Chromadorida, Desmoscolecida, Desmodorida и Monhysterida) и/или класса Secernentea (в том числе, например, отряды Rhabdita, Strongylida, Ascaridida, Spirurida, Camallanida, Diplogasterida, Tylenchida и Aphelenchida).

[0086] Нематоды включают без ограничения паразитические нематоды, такие как клубеньковые нематоды, цистообразующие нематоды и/или ранящие нематоды. Иллюстративный роды нематод в соответствии с настоящим изобретением включают без ограничения Meloidogyne (клубеньковые нематоды), Heterodera (цистообразующие нематоды), Globodera (цистообразующие нематоды), Radopholus (роющие нематоды), Rotylenchulus (почковидные нематоды), Pratylenchus (ранящие нематоды), Aphelenchoides (нематоды листовые), Helicotylenchus (нематоды спиральные), Hoplolaimus (ланцетообразные нематоды), Paratrichodorus (нематоды, вызывающие тупоконечность корней), Longidorus, Nacobbus (ложно-клубеньковые нематоды), Subanguina, Belonlaimus (жалящие нематоды), Criconemella, Criconemoides (кольцевые нематоды), Ditylenchus, Dolichodorus, Hemicriconemoides, Hemicycliophora, Hirschmaniella, Hypsoperine, Macroposthonia, Melinius, Punctodera, Quinisulcius, Scutellonema, Xiphinema (кинжальные нематоды), Tylenchorhynchus (карликовые нематоды), Tylenchulus, Bursaphelenchus (круглые кишечные черви) и любую их комбинацию.

[0087] Типичныепаразитические нематоды растений в соответствии с настоящим изобретением включают без ограничения Belonolaimusgracilis, Belonolaimus longicaudatus, Bursaphelenchus xylophilus (нематоду древесины хвойных пород), Criconemoides ornata, Ditylenchus destructor (нематоду корней картофеля), Ditylenchus dipsaci (стеблевую и луковичную нематоду), Globodera pallida (картофельную цистообразующую нематоду), Globodera rostochiensis (золотистую картофельную нематоду), Heterodera glycines (соевую цистообразующую нематоду), Heterodera schachtii (цистообразующую нематоду сахарной свеклы); Heterodera zeae (кукурузную цистообразующую нематоду), Heterodera avenae (цистообразующую нематоду злаковых культур), Heterodera carotae, Heterodera trifolii, Hoplolaimus columbus, Hoplolaimus galeatus, Hoplolaimus magnistylus, Longidorus breviannulatus, Meloidogyne arenaria, Meloidogyne chitwoodi, Meloidogyne hapla, Meloidogyne incognita, Meloidogyne javanica, Mesocriconema xenoplax, Nacobbus aberrans, Naccobus dorsalis, Paratrichodorus christiei, Paratrichodorus minor, Pratylenchus brachyurus, Pratylenchus crenatus, Pratylenchus hexincisus, Pratylenchus neglectus, Pratylenchus penetrans, Pratylenchus projectus, Pratylenchus scribneri, Pratylenchus tenuicaudatus, Pratylenchus thornei, Pratylenchus zeae, Punctodera chaccoensis, Quinisulcius acutus, Radopholus similis, Rotylenchulus reniformis, Tylenchorhynchus dubius, Tylenchulus semipenetrans (цитрусовую нематоду), Siphinema americanum, X. Mediterraneum и любую комбинацию вышеуказанных.

[0088] В другом варианте осуществления настоящее изобретение охватывает способполученияинсектицидногобелка,которыйявляетсяактивнымпротив насекомых, включающий: (a) получение клетки-хозяина, содержащей ген, который сам содержит кассету экспрессии и/или молекулу нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению; и (b) выращивание трансгенной клетки-хозяина таким образом, чтобы экспрессировать инсектицидный белок, который является активным против насекомых.

[0089] В еще одном дополнительном варианте осуществления изобретение охватывает способ осуществления контроля насекомых, включающий доставку насекомым эффективного для контроля насекомых количества инсектицидного белка по настоящему изобретению.

[0090] В одномварианте осуществления по меньшей мере один из инсектицидных белков по настоящему изобретению экспрессируется в высшем организме, таком как растение. В данном случае трансгенные растения экспрессируют эффективные для контроля насекомых количества инсектицидного белка для самозащиты от насекомых-вредителей. В случае если насекомое начинает поедать такое трансгенное растение, оно также поглощает экспрессированный инсектицидный белок. Это будет удерживать насекомое от дальнейшего вгрызания в растительную ткань и/или даже может причинять вред насекомому или уничтожать его. Нуклеиновая кислота по настоящему изобретению вводится в кассету экспрессии, которая затем может быть устойчиво интегрирована в геном растения. В другом варианте осуществления нуклеиновую кислоту включают в непатогенный самореплицирующийся вирус. Растения, трансформированные в соответствии с настоящим изобретением, могут быть однодольными или двудольными растениями и включают без ограничения кукурузу, пшеницу, овес, газонные травы, пастбищные травы, лен, ячмень, рожь, сладкий картофель, фасоль, горох, цикорий, салат-латук, капусту, цветную капусту, брокколи, репу, редьку, шпинат, спаржу, лук, чеснок, перец, сельдерей, тыкву крупноплодную, тыкву, коноплю, цукини, яблоню, грушевое дерево, айву, дыню, сливовое дерево, вишню, персиковое дерево, нектарин, абрикосовое дерево, клубнику, виноград, малину, ежевику, ананас, авокадо, папайю, манго, банановое дерево, сою, томат, сорго, сахарный тростник, сахарную свеклу, подсолнечник, рапс, клевер, табак, морковь, хлопчатник, люцерну, рис, картофель, баклажан, огурец, арабидопсис и древесные растения, такие как хвойные и лиственные деревья.

[0091] В другом варианте осуществления настоящее изобретение охватывает способ получения растения или части растения с повышенной устойчивостью к насекомым по сравнению с контрольными растением или частью растения, включающий: (a) введение молекулы нуклеиновой кислоты, содержащей кассету экспрессии по настоящему изобретению; и (b) выращивание части растения с получением растения, которое экспрессирует гетерологичную молекулу нуклеиновой кислоты кассеты экспрессии и которое характеризуется повышенной устойчивостью к насекомым по сравнению с контрольными растением или частью растения, которые не были трансформированы молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей кассету экспрессии. В предпочтительном варианте осуществления кассета экспрессии может кодировать полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или на 100% идентична или сходна с SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-72, SEQ ID NO: 86-96 или SEQ ID NO: 100. В предпочтительном варианте осуществления кассета экспрессии может кодировать полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 60% идентична SEQ ID NO: 4. "Повышенная" устойчивость к насекомым может быть измерена как увеличение инсектицидной активности. Повышенная устойчивость к насекомым может быть больше 0%, на по меньшей мере 1%, на по меньшей мере 2%, на по меньшей мере 3%, на по меньшей мере 4%, на по меньшей мере 5%, на по меньшей мере 10%, на по меньшей мере 15%, на по меньшей мере 20%, на по меньшей мере 25%, на по меньшей мере 30%, на по меньшей мере 40%, на по меньшей мере 50%, на по меньшей мере 60%, на по меньшей мере 70%, на по меньшей мере 80%, на по меньшей мере 90%, на по меньшей мере 100%, на по меньшей мере 125%, на по меньшей мере 150%, на по меньшей мере 200%, на по меньшей мере 300%, на по меньшей мере 400%, на по меньшей мере 500%, на по меньшей мере 600%, на по меньшей мере 700%, на по меньшей мере 800%, на по меньшей мере 900% или на по меньшей мере 1000% больше инсектицидной активности по сравнению с контрольным растением. Растение или часть растения, характеризующиеся повышенной устойчивостью к насекомым по сравнению с контрольными растением или частью растения, могут быть получены с помощью способов трансформации растения, культивирования растительной ткани или селекции. Растение или часть растения могут быть получены с помощью способов полового или бесполого размножения. Могут использоваться любые подходящие контрольные растение или часть растения, например растение с таким же или аналогичным генетическим фоном, выращенное в той же среде. В вариантах осуществления контрольные растение или часть растения имеют тот же генетический фон и растут в той же среде, что и описанное растение, однако они не содержат молекулу по настоящему изобретению, в то время как описанное растение содержит молекулу по настоящему изобретению.

[0092] В другом варианте осуществления настоящее изобретение охватывает способ повышения устойчивости к насекомым у растения или части растения по сравнению с контрольным растением или частью растения, включающий обеспечение экспрессии в растении или части растения молекулы нуклеиновой кислоты или кассеты экспрессии по настоящему изобретению, где экспрессия гетерологичной нуклеиновой кислоты кассеты экспрессии приводит к повышенной устойчивости к насекомым у растения или части растения по сравнению с контрольным растением или частью растения. В вариантах осуществления кассета экспрессии или молекула нуклеиновой кислоты содержит промотор, функционально связанный с гетерологичной молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность, которая содержит: (a) нуклеотидную последовательность под любым из SEQ ID NO: 2-36, SEQ ID NO: 73-83 или SEQ ID NO: 99; (b) нуклеотидную последовательность, которая на по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или на 100% идентична нуклеотидной последовательности под любым из SEQ ID NO: 2-36, SEQ ID NO: 73-83 или SEQ ID NO: 99; (c) нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид, при этом аминокислотная последовательность полипептида содержит SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-72, SEQ ID NO: 86-96 или SEQ ID NO: 100 и характеризуется активностью в отношении контроля насекомых; (d) нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид, при этом аминокислотная последовательность полипептида на по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или на 100% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-72, SEQ ID NO: 86-96 или SEQ ID NO: 100; или (e) нуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности из любого из (a) - (d), приведенных выше. Молекула нуклеиновой кислоты или кассета экспрессии может быть введена в растение. В некоторых вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты или кассета экспрессии может быть введена в часть растения, и при этом растение, содержащее молекулу нуклеиновой кислоты или кассету экспрессии, может быть получено из части растения.

[0093] В другом варианте осуществления настоящее изобретение охватывает способ получения растения с повышенной устойчивостью к насекомым по сравнению с контрольным растением, включающий выявление в части растения гетерологичной нуклеиновой кислоты, предусматривающей молекулу нуклеиновой кислоты или кассету экспрессии по настоящему изобретению, и получение растения из части растения, за счет чего обеспечивается получение растения с повышенной устойчивостью к насекомым по сравнению с контрольным растением. В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение охватывает способ идентификации растения или части растения, характеризующегося повышенной устойчивостью к насекомым по сравнению с контрольным растением или частью растения, включающий выявление в растении или части растения молекулы нуклеиновой кислоты или кассеты экспрессии по настоящему изобретению, за счет чего обеспечивается идентификация растения или части растения с повышенной устойчивостью к насекомым. В дополнительном варианте осуществления кассету экспрессии или ее диагностический фрагмент выявляют в продукте амплификации из образца нуклеиновой кислоты из растения или части растения. Диагностический фрагмент может представлять собой молекулу нуклеиновой кислоты длиной по меньшей мере 10 смежных нуклеотидов, которая является уникальной для кассеты экспрессии по настоящему изобретению.

[0094] В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение охватывает способ получения растения, характеризующегося повышенной устойчивостью к насекомым по сравнению с контрольным растением или частью растения, включающий скрещивание первого родительского растения со вторым родительским растением, где по меньшей мере первое родительское растение содержит в своем геноме гетерологичную нуклеиновую кислоту, которая предусматривает молекулу нуклеиновой кислоты или кассету экспрессии по настоящему изобретению, и получение поколения потомства, где поколение потомства содержит по меньшей мере одно растение, которое содержит гетерологичную нуклеиновую кислоту в своем геноме и которое проявляет повышенную устойчивость к насекомым по сравнению с контрольным растением.

[0095] В предпочтительных вариантах осуществления способы по настоящему изобретению придают повышенную устойчивость к насекомым растению или части растения против жесткокрылого и/или чешуекрылого насекомого-вредителя. Контроль насекомых как чешуекрылых, так и жесткокрылых насекомых-вредителей продемонстрирован в примерах. В дополнительных вариантах осуществления способы по настоящему изобретению придают повышенную устойчивость к насекомым растению или части растения против видов Diabrotica, в том числе Diabrotica virgifera virgifera, Diabrotica barberi, Diabrotica undecimpunctata howardi, Diabrotica virgifera zeae и/или Diabrotica speciosa, и/или родственных видов.

[0096] В предпочтительных вариантах осуществления способы по настоящему изобретению придают повышенную устойчивость к насекомым однодольному растению.

[0097] Настоящее изобретение дополнительно охватывает трансгенное растение, содержащее гетерологичную молекулу нуклеиновой кислоты или кассету экспрессии по настоящему изобретению, которая при транскрибировании и трансляции придает повышенную устойчивость к насекомым. В предпочтительных вариантах осуществления гетерологичная молекула нуклеиновой кислоты содержит последовательность, на по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичную любой из SEQ ID NO: 2-36, SEQ ID NO: 73-83 или SEQ ID NO: 99. В дополнительном варианте осуществления трансгенное растение содержит гетерологичную молекулу нуклеиновой кислоты, содержащую последовательность, на по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичную SEQ ID NO: 2-36, SEQ ID NO: 73-83 или SEQ ID NO: 99. В вариантах осуществления трансгенное растение представляет собой двудольное растение. В предпочтительных вариантах осуществления трансгенное растение представляет собой однодольное растение. В дополнительных вариантах осуществления трансгенное растение представляет собой люцерну, укроп, яблоню, абрикосовое дерево, артишок, рукколу, спаржу, авокадо, банановое дерево, бобовые, свеклу, ежевику, чернику, брокколи, брюссельскую капусту, кочанную капусту, канолу, мускусную дыню, морковь, кассаву, цветную капусту, сельдерей, вишню, кинзу, цитрусовое растение, клементин, кофейное дерево, кукурузу, хлопчатник, огурец, Дугласову пихту, баклажан, эндивий, салат эскариоль, эвкалипт, фенхель, разновидности фигового дерева, тыкву бутылочную, виноград, грейпфрут, дыню мускатную белую, хикаму, киви, салат-латук, разновидности лука порея, лимон, лайм, сосну ладанную, манговое дерево, дыню, гриб, орех, окру, лук, апельсин, декоративное растение, папайю, петрушку, горох, персиковое дерево, земляной орех, грушевое дерево, перец, хурму, сосну, ананас, плантайн, сливовое дерево, гранатовое дерево, тополь, картофель, тыкву, айву, сосну лучистую, радиккио, редис, малину, рис, рожь, сорго, южную сосну, сою, шпинат, тыкву большую столовую, клубнику, сахарную свеклу, подсолнечник, сладкий картофель, ликвидамбар, танжерин, чай, табак, томат, газонную траву, виноград культурный, арбуз, ямс или цуккини. В предпочтительных вариантах осуществления трансгенное растение представляет собой просо, просо прутьевидное, маис, сорго, пшеницу, овес, газонную траву, пастбищную траву, лен, рис, сахарный тростник, масличный рапс или ячмень.

[0098] В еще одном варианте осуществления трансгенное растение по настоящему изобретению содержит гетерологичную молекулу нуклеиновой кислоты, содержащую последовательность промотора. В еще одном варианте осуществления трансгенное растение по настоящему изобретению может содержать гетерологичную молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует по меньшей мере один дополнительный требуемый признак. Дополнительный признак может быть закодирован в той же гетерологичной молекуле нуклеиновой кислоты, что и молекула по настоящему изобретению, или он может быть закодирован во второй гетерологичной молекуле нуклеиновой кислоты. Дополнительный требуемый признак может придавать устойчивость к насекомым ко второму насекомому-вредителю, устойчивость к насекомым к тому же насекомому-вредителю, переносимость абиотического стресса, мужскую стерильность, устойчивость к гербицидам, устойчивость к бактериальным заболеваниям, устойчивость к грибковым заболеваниям, устойчивость к вирусным заболеваниям, устойчивость к нематодам, модифицированный метаболизм жирных кислот, модифицированный метаболизм углеводов, улучшенную пищевую ценность, улучшенные характеристики при промышленном способе или измененную репродуктивную способность. Дополнительный требуемый признак также может стимулировать продуцирование в растении ценного с коммерческой точки зрения фермента или метаболита.

[0099] В вариантах осуществления требуемый дополнительный признак представляет собой второе пестицидное средство. Второе пестицидное средство может бытьактивным по отношению к любому вредителю растения, включающему насекомых, нематод, грибы, вирусы или бактерии. Примеры насекомых-вредителей растений включают, и не ограничиваются ими, Nilaparvata spp. (например, N. lugens (бурую рисовую цикадку)); Laodelphax spp. (например, L. striatellus (малую бурую рисовую цикадку)); Nephotettix spp. (например, N. virescens или N. cincticeps (зеленую цикадку) или N. nigropictus (рисовую цикадку)); Sogatella spp. (например, S. furcifera (цикадку белоспинную)); Blissus spp. (например, B. leucopterus leucopterus (клопа постельного)); Scotinophora spp. (например, S. vermidulate (рисового долгоносика)); Acrosternum spp. (например, A. hilare (зеленого жука-вонючку)); Parnara spp. (например, P. guttata (рисовую толстоголовку)); Chilo spp. (например, C. suppressalis (рисового полосатого стеблееда), C. auricilius (золотистого стеблееда) или C. polychrysus (черноголового стеблееда)); Chilotraea spp. (например, C. polychrysa (рисового стеблееда)); Sesamia spp. (например, S. inferens (розового рисового точильщика)); Tryporyza spp. (например, T. innotata (белого рисового точильщика) или T. incertulas (желтого рисового точильщика)); Cnaphalocrocis spp. (например, C. medinalis (листовертку рисовую)); Agromyza spp. (например, A. oryzae (листового минера) или A. parvicornis (кукурузного точкового листового минера)); Diatraea spp. (например, D. saccharalis (точильщика сахарного тростника) или D. grandiosella (огневку кукурузную юго-западную)); Narnaga spp. (например, N. aenescens (зеленую рисовую гусеницу)); Xanthodes spp. (например, X. transversa (зеленую гусеницу)); Spodoptera spp. (например, S. frugiperda (совку травяную), S. exigua (совку малую), S. littoralis (египетскую хлопковую совку) или S. praefica (гусеницу западной моли с желтыми полосками)); Mythimna spp. (например, Mythmna (Pseudaletia) seperata (гусеницу)); Helicoverpa spp. (например, H. zea (гусеницу совки хлопковой)); Colaspis spp. (например, C. brunnea (листоеда виноградного)); Lissorhoptrus spp. (например, L. oryzophilus (долгоносика рисового водяного)); Echinocnemus spp. (например, E. squamos (долгоносика растений риса)); Diclodispa spp. (например, D. armigera (рисовую шипоноску)); Oulema spp. (например, O. oryzae (листогрыза); Sitophilus spp. (например, S. oryzae (рисового долгоносика)); Pachydiplosis spp. (например, P. oryzae (рисовую галлицу)); Hydrellia spp. (например, H. griseola (малого рисового листового минера) или H. sasakii (личинку, поедающую рисовые стебли)); Chlorops spp. (например, C. oryzae (личинку, поедающую стебли)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западного кукурузного корневого жука), D. barberi (северного кукурузного корневого жука), D. undecimpunctata howardi (южного кукурузного корневого жука), D. virgifera zeae (мексиканского кукурузного корневого жука); D. balteata (жука-блошку окаймленную)); Ostrinia spp. (например, O. nubilalis (огневку кукурузную)); Agrotis spp. (например, A.ipsilon (совку-ипсилон)); Elasmopalpus spp. (например, E. lignosellus (малого точильщика кукурузного стебля)); Melanotus spp. (проволочников); Cyclocephala spp. (например, C. borealis (северного майского жука) или C. immaculata (южного майского жука)); Popillia spp. (например, P. japonica (хрущика японского)); Chaetocnema spp. (например, C. pulicaria (кукурузную жука-блошку)); Sphenophorus spp. (например, S. maidis (долгоносика маисового)); Rhopalosiphum spp. (например, R. maidis (тлю кукурузную листовую)); Anuraphis spp. (например, A. maidiradicis (тлю кукурузную корневую)); Melanoplus spp. (например, M. femurrubrum (краснобедрую кобылку) M. differentialis (кобылку отличительную) или M. sanguinipes (мигрирующую кобылку)); Hylemya spp. (например, H. platura (личинку мухи ростковой)); Anaphothrips spp. (например, A. obscrurus (трипса злакового)); Solenopsis spp. (например, S. milesta (муравья-вора)); или spp. (например, T. urticae (обыкновенного паутинного клеща), T. cinnabarinus (красного паутинного клеща); Helicoverpa spp. (например, H. zea (коробочного червя) или H. armigera (совку хлопковую)); Pectinophora spp. (например, P. gossypiella (розового коробочного червя)); Earias spp. (например, E. vittella (точечного коробочного червя хлопка)); Heliothis spp. (например, H. virescens (табачную листовертку)); Anthonomus spp. (например, A. grandis (долгоносика хлопкового)); Pseudatomoscelis spp. (например, P. seriatus (марокканскую кобылку)); Trialeurodes spp. (например, T. abutiloneus (белокрылку с полосами на крыльях), T. vaporariorum (белокрылку тепличную)); Bemisia spp. (например, B. argentifolii (белокрылку серебрянокрылую)); Aphis spp. (например, A. gossypii (тлю хлопковую)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клопа полевого) или L. hesperus (западного клопа лугового)); Euschistus spp. (например, E. conspersus (маскирующегося жука-вонючку)); Chlorochroa spp. (например, C. sayi (жука-вонючку Say)); Nezara spp. (например, N. viridula (южного зеленого жука-вонючку)); Thrips spp. (например, T. tabaci (трипса лукового)); Frankliniella spp. (например, F. fusca (трипса табачного) или F. occidentalis (западного трипса обыкновенного)); Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (жука колорадского картофельного), L. juncta (ложного картофельного жука) или L. texana (техасского ложного картофельного жука)); Lema spp. (например, L. trilineata (картофельного жука с тремя полосками)); Epitrix spp. (например, E. cucumeris (картофельную жука-блошку), E. hirtipennis (жуков-блошек) или E. tuberis (жука-блошку клубневую)); Epicauta spp. (например, E. vittata (шпанку полосатую)); Phaedon spp. (например, P. cochleariae (горчичного листогрыза)); Epilachna spp. (например, E. varivetis (мексиканского жука бобового)); Acheta spp. (например, A. domesticus (сверчка домового)); Empoasca spp. (например, E. fabae (цикадку картофельную)); Myzus spp. (например, M. persicae (тлю персиковую зеленую)); Paratrioza spp. (например, P. cockerelli (листоблошку)); Conoderus spp. (например, C. falli (южного картофельного проволочника) или C. vespertinus (табачного проволочника)); Phthorimaea spp. (например, P. operculella (личинку выемчатокрылой моли)); Macrosiphum spp. (например, M. euphorbiae (тлю картофельную обыкновенную)); Thyanta spp. (например, T. pallidovirens (красноплечего жука-вонючку)); Phthorimaea spp. (например, P. operculella (личинку выемчатокрылой моли)); Helicoverpa spp. (например, H. zea (совку томатную); Keiferia spp. (например, K. lycopersicella (острицу томатную)); Limonius spp. (проволочников); Manduca spp. (например, M. sexta (табачного бражника) или M. quinquemaculata (томатного бражника)); Liriomyza spp. (например, L. sativae, L. trifolli или L. huidobrensis (листового минера)); Drosophilla spp. (например, D. melanogaster, D. yakuba, D. pseudoobscura или D. simulans); Carabus spp. (например, C. granulatus); Chironomus spp. (например, C. tentanus); Ctenocephalides spp. (например, C. felis (блоху кошачью)); Diaprepes spp. (например, D. abbreviatus (скосаря люцернового)); Ips spp. (например, I. pini (короеда соснового)); Tribolium spp. (например, T. castaneum (хрущака малого булавоусого)); Glossina spp. (например, G. morsitans (муху цеце)); Anopheles spp. (например, A. gambiae (комара малярийного)); Helicoverpa spp. (например, H. armigera (африканскую совку хлопковую)); Acyrthosiphon spp. (например, A. pisum (тлю гороховую)); Apis spp. (например, A. melifera (медоносную пчелу)); Homalodisca spp. (например, H. coagulate (цикадку с зеркальными крыльями)); Aedes spp. (например, Ae. aegypti (желтолихорадочного комара)); Bombyx spp. (например, B. mori (шелковичного червя)); Locusta spp. (например, L. migratoria (мигрирующую саранчу)); Boophilus spp. (например, B. microplus (клеща кольчатого)); Acanthoscurria spp. (например, A. gomesiana (рыжего шоколадного птицееда)); Diploptera spp. (например, D. punctata (тихоокеанского жука-таракана)); Heliconius spp. (например, H. erato (красную бабочку-почтальона) или H. melpomene (бабочку-почтальона)); Curculio spp. (например, C. glandium (плодожила дубового)); Plutella spp. (например, P. xylostella (моль капустную)); Amblyomma spp. (например, A. variegatum (клеща кольчатого)); Anteraea spp. (например, A. yamamai (шелкопряда)) и Armigeres spp. (например, A. subalbatus).

[00100] Инсектицидные белки по настоящему изобретению могут использоваться в комбинации с другими пестицидными средствами (например, белками Cry Bt) с расширением целевого диапазона вредителей. Кроме того, применение инсектицидных белков по настоящему изобретению в комбинации с инсектицидным средством, которое характеризуется превосходным механизмом действия или целенаправленно воздействует на другой рецептор в кишечнике насекомого, характеризуется особой полезностью в отношении предупреждения появления устойчивости у насекомых и/или управления ею.

[00101] Второе пестицидное средство может представлять собой инсектицидный белок, полученный из Bacillus thuringiensis. Инсектицидный белок B. thuringiensis может представлять собой любой из нескольких инсектицидных белков, в том числе без ограничения белок Cry1, белок Cry3, белок Cry7, белок Cry8, белок Cry11, белок Cry22, белок Cry23, белок Cry36, белок Cry37, белок Cry34 вместе с белком Cry35, бинарный инсектицидный белок CryET33 и CryET34, бинарный инсектицидный белок TIC100 и TIC101, бинарный инсектицидный белок PS149B1, VIP (вегетативный инсектицидный белок, раскрытый в патентах США 5849870 и 5877012, включенных в данный документ посредством ссылки), TIC900 или родственный белок, TIC901, TIC1201, TIC407, TIC417, модифицированный белок Cry3A или гибридные белки или химеры, полученные из любых вышеуказанных инсектицидных белков. В других вариантах осуществления инсектицидный белок B. thuringiensis выбран из группы, состоящей из Cry3Bb1, Cry34Ab1 вместе с Cry35Ab1, mCry3A (патент США № 7276583, включенный в данный документ посредством ссылки), eCry3.1Ab (патент США № 8309516, включенный в данный документ посредством ссылки) и белки Vip3A, в том числе Vip3Aa (патент США № 6137033, включенный в данный документ посредством ссылки).

[00102] В других вариантах осуществления трансгенное растение по настоящему изобретению может содержать второе пестицидное средство, которое может быть получено из источников, отличных от B. thuringiensis. Второе инсектицидное средство может представлять собой средство, выбранное из группы, содержащей α-амилазу, пероксидазу, холестериноксидазу, пататин, протеазу, ингибитор протеазы, уреазу, ингибитор альфа-амилазы, порообразующий белок, хитиназу, лектин, сконструированное антитело или фрагмент антитела, инсектицидный белок Bacillus cereus, инсектицидный белок Xenorhabdus spp. (такого как X. nematophila или X. bovienii), инсектицидный белок Photorhabdus spp. (такого как P. luminescens или P. asymobiotica), инсектицидный белок Brevibacillus spp. (такого как B. laterosporous), инсектицидный белок Lysinibacillus spp. (такого как L. sphearicus), инсектицидный белок Chromobacterium spp. (такого как C. subtsugae или C. piscinae), инсектицидный белок Yersinia spp. (такого как Y. entomophaga), инсектицидный белок Paenibacillus spp. (такого как P. propylaea), инсектицидный белок Clostridium spp. (такого как C. bifermentans), Pseudomonas spp. (такого как P. fluorescens) и лигнин. В других вариантах осуществления второе средство может представлять собой по меньшей мере один инсектицидный белок, полученный из инсектицидного токсинового комплекса (Tc) из Photorhabdus, Xenorhabus, Serratia или Yersinia. В других вариантах осуществления инсектицидный белок может представлять собой ADP-рибозилтрансферазу, полученную из инсектицидных бактерий, таких как Photorhabdus ssp. В еще других вариантах осуществления инсектицидный белок может представлять собой Axmi205 или полученный из Axmi205 (патент США № 8575425 и № 9394345, каждый включен в данный документ посредством ссылки). В других вариантах осуществления инсектицидный белок может представлять собой VIP-белок, такой как VIP1 и/или VIP2, из B. cereus. В еще одних вариантах осуществления инсектицидный белок может представлять собой бинарный токсин, полученный из инсектицидных бактерий, такой как ISP1A и ISP2A из B. laterosporous или BinA и BinB из L. sphaericus. В еще одних вариантах осуществления инсектицидный белок может быть сконструированным, или может быть гибридным или химерой из любых предыдущих инсектицидных белков.

[00103] В некоторых вариантах осуществления трансгенное растение по настоящему изобретению может содержать и/или экспрессировать по меньшей мере второе пестицидное средство, которое отличается от молекул белковой природы. В некоторых вариантах осуществления второе пестицидное средство может присутствовать на поверхности растения, например, в качестве средства для местного применения. В предпочтительных вариантах осуществления второе пестицидное средство представляет собой молекулу интерферирующей РНК. Как правило, интерферирующая РНК содержит по меньшей мере фрагмент РНК, соответствующий целевому гену, спейсерную последовательность и второй фрагмент РНК, который комплементарен первому, за счет чего может образовываться двухнитевая структура РНК. РНК-интерференция (RNAi) происходит, когда организм распознает молекулы двухнитевой РНК (dsRNA) и гидролизует их. Полученные продукты гидролиза представляют собой небольшие фрагменты РНК длиной приблизительно 19-24 нуклеотидов, называемые малыми интерферирующими РНК (siRNA). Затем siRNA распространяются или разносятся по всему организму, в том числе через клеточные мембраны, где они гибридизируются с mRNA (или другими РНК) и вызывают гидролиз РНК. Интерферирующие РНК распознаются комплексом сайленсинга РНК-интерференции (RISC), в который вводится эффекторная нить (или "направляющая нить") РНК. Данная направляющая нить действует как матрица для распознавания и разрушения дуплексных последовательностей. Данный процесс повторяется каждый раз, когда siRNA гибридизируется с комплементарной ей целевой РНК, эффективно предотвращая трансляцию таких mRNA, и таким образом "сайленсингу" подвергается экспрессия специфических генов, с которых mRNA были транскрибированы. Интерферирующие РНК известны из уровня техники как применяемые для контроля насекомых (см., например, публикацию WO2013/192256, включенную в данный документ посредством ссылки). Интерферирующая РНК, предназначенная для применения в контроле насекомых, обеспечивает получение не встречающейся в природе двухнитевой РНК, которая пользуется нативными путями RNAi у насекомого длязапуска понижающей регуляции целевых генов, что может приводить к прекращению питания и/или роста и может приводить к гибели насекомого-вредителя. Молекула интерферирующей РНК может придавать устойчивость к насекомым против того же целевого вредителя, что и белок по настоящему изобретению, или может целенаправленно воздействовать на другого вредителя. Целевое насекомое-вредитель растения может питаться путем жевания, сосания или прокалывания. Интерферирующие РНК известны из уровня техники как применимые для контроля насекомых. В вариантах осуществления dsRNA, пригодная для контроля насекомых, описана в заявках на патент согласно PCT №№ PCT/US17/044825; PCT/US17/044831; PCT/US17/044832, включенных в данный документ посредством ссылки. В вариантах осуществления dsRNA, пригодная для контроля насекомых, описана в патентах США №№ 92388223, 9340797 или 8946510, включенных в данный документ посредством ссылки. В вариантах осуществления dsRNA, пригодная для контроля насекомых, описана в заявках на патент США №№ 12/868994, 13/831230, 14/207313 или 14/207318, включенных в данный документ посредством ссылки. В других вариантах осуществления интерферирующая РНК может придавать устойчивость против вредителя растений, отличного от насекомого, такого как нематода-вредитель или вирус-вредитель.

[00104] Совместная экспрессия более чем одного пестицидного средства в одном трансгенном растении может быть достигнута путем получения одиночного рекомбинантного вектора, содержащего кодирующие последовательности более чем одного пестицидного средства в так называемом молекулярном стеке, и генетического конструирования растения, которое бы содержало и экспрессировало все эти пестицидные средства в трансгенном растении. Такие молекулярные стеки также могут быть получены с применением мини-хромосом, которые описаны например в патенте США 7235716. Как альтернатива, трансгенное растение, содержащее одну нуклеиновую кислоту, кодирующую первое пестицидное средство, может быть повторно трансформировано с помощью другой нуклеиновой кислоты, кодирующей второе пестицидное средство и т. д. Как альтернатива, растение, родитель 1, может быть получено с помощью способов генной инженерии для экспрессии генов по настоящему изобретению. Второе растение, родитель 2, может быть получено с помощью способов генной инженерии для экспрессии второго пестицидного средства. Путем скрещивания родителя 1 с родителем 2 получают растения-потомки, которые экспрессируют все гены, введенные в родителей 1 и 2.

[00105] Трансгенные растения или семена, содержащие и/или экспрессирующие инсектицидный белок по настоящему изобретению, также могут быть обработаны инсектицидом или инсектицидным покрытием для семян, которые описаны в патентах США №№ 5849320 и 5876739, включенных в данный документ посредством ссылки. Если и инсектицид или инсектицидное покрытие для семян, и трансгенное растение или семя по настоящему изобретению активны против одного целевого насекомого, например жесткокрылого вредителя или целевого вредителя Diabrotica, то данная комбинация применима (i) в способе дополнительного усиления активности композиции по настоящему изобретению против целевого насекомого, а также (ii) в способе предупреждения развития устойчивости к композиции по настоящему изобретению путем обеспечения еще одного механизма действия против целевого насекомого. Таким образом, в вариантах осуществления настоящего изобретения предусматривается способ повышения контроля популяции насекомых, относящихся к чешуекрылым, предусматривающий обеспечение трансгенного растения или семени по настоящему изобретению и применение по отношению к растению или семени инсектицида или инсектицидного покрытия для семян, предназначенного для трансгенного растения или семени по настоящему изобретению.

[00106] Даже в случае, если инсектицид или инсектицидное покрытие для семян являются активными в отношении другого насекомого, инсектицид или инсектицидное покрытие для семян являются пригодными для расширения диапазона контроля насекомых, например, посредством добавления инсектицида или инсектицидного покрытия для семян, которые характеризуются активностью в отношении чешуекрылых насекомых, к трансгенному семени по настоящему изобретению, которое в некоторых вариантах осуществления характеризуется активностью в отношении жесткокрылых и некоторых чешуекрылых насекомых, при этом полученное покрытое трансгенное семя обеспечивает контроль как чешуекрылых, так и жесткокрылых насекомых-вредителей.

[00107] Примеры таких инсектицидов и/или инсектицидных покрытий для семян включают без ограничения карбамат, пиретроид, фосфорорганическое соединение, фрипрол, неоникотиноид, хлорорганическое соединение, нереистоксин или их комбинацию. В другом варианте осуществления инсектицид или инсектицидное покрытие для семян выбраны из группы, состоящей из карбофурана, карбарила, метомила, бифентрина, тефлутрина, перметрина, цифлутрина, лямбда-цигалотрина, циперметрина, дельтаметрина, хлорпирифоса, хлорэтоксифоса, диметоата, этопрофоса, малатиона, метил-паратиона, фората, тербуфоса, тебупиримифоса, фипронила, ацетамиприда, имидаклоприда, тиаклоприда, тиаметоксама, эндосульфана и их комбинации. Коммерческие продукты, содержащие такие инсектициды и инсектицидные покрытия для семян, включают без ограничения Furadan® (карбофуран), Lanate® (мезомил, метомил, месомил), Sevin® (карбарил), Talstar® (бифентрин), Force® (тефлутрин), Ammo® (киперметрин), Cymbush® (циперметрин), Delta Gold® (дельтаметрин), Karate® (лямбда-цигалотрин), Ambush® (перметрин), Pounce® (перметрин), Brigade® (бифентрин), Capture® (бифентрин), ProShield® (тефлутрин), Warrior® (лямбда-цигалотрин), Dursban® (хлорпирифос), Fortress® (хорэтоксифос), Mocap® (этопроп), Thimet® (форат), AAstar® (форат, флуцитинат), Rampart® (форат), Counter® (тербуфос), Cygon® (диметоат), Dicapthon, Regent® (фипронил),Cruiser®(тиаметоксам),Gaucho®(имидаклоприд), Prescribe® (имидаклоприд), Poncho® (клотианидин) и Aztec® (цифлутрин, тебупиримфос).

[00108] Настоящее изобретение также охватывает композицию, содержащую эффективное для контроля насекомых количество инсектицидного белка в соответствии с настоящим изобретением. В дополнительных вариантах осуществления композиция содержит подходящий сельскохозяйственный носитель и полипептид по настоящему изобретению с инсектицидной активностью. Сельскохозяйственный носитель может предусматривать вспомогательные вещества, вещества, облегающие смешивание, усиливающие средства и т. д., целесообразные для применения активного ингредиента, такого как полипептид по настоящему изобретению, в том числе полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% или 100% идентична любой из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-72, SEQ ID NO: 86-96 или SEQ ID NO: 100. Подходящие носители не должны быть фитотоксичными по отношению к ценным культурам, в частности при концентрациях, используемых для применения композиций в присутствии культур, и не должны вступать в химическую реакцию с соединениями активного ингредиента, описанного в данном документе, а именно, полипептидом по настоящему изобретению или другими ингредиентами композиции. Такие смеси могут быть разработаны для непосредственного применения по отношению к культурам или могут представлять собой концентраты или составы, которые обычно разбавляют дополнительными носителями и вспомогательными средствами перед применением. Они могут включать инертные или активные компоненты и могут представлять собой твердые вещества, такие как, например, дусты, порошки, гранулы, диспергируемые в воде гранулы или смачиваемые порошки, или жидкостями, такими как, например, эмульгируемые концентраты, растворы, эмульсии или суспензии. Подходящие сельскохозяйственные носители могут включать жидкие носители, например, воду, толуол, ксилол, лигроин, растительное масло, ацетон, метилэтилкетон, циклогексанон, трихлорэтилен, перхлорэтилен, этилацетат, амилацетат, бутилацетат, монометиловый эфир пропиленгликоля и монометиловый эфир диэтиленгликоля, метанол, этанол, изопропанол, амиловый спирт, этиленгликоль, пропиленгликоль, глицерин и т.п. Как правило, лучшим выбором в отношении носителя для разбавления концентратов является вода. Подходящие твердые носители могут включать тальк, пирофиллитовую глину, кремнезем, аттапульгитовую глину, кизельгур, мел, диатомовую землю, известь, карбонат кальция, бентонитовую глину, фуллерову землю, шелуху семян хлопчатника, пшеничную муку, соевую муку, пемзу, древесную муку, муку из скорлупы грецкого ореха, лигнин и т.п. В другом варианте осуществления полипептид по настоящему изобретению может быть инкапсулирован в синтетической матрице, такой как полимер, и нанесен на поверхность хозяина, такого как растение. Поглощение насекомым клеток-хозяев обеспечивает доставку в насекомое средств для контроля насекомых и приводит к токсическому эффекту у насекомого-вредителя.

[00109] В дополнительных вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению может представлять собой порошок, дуст, пеллету, гранулу, жидкость для распыления, эмульсию, коллоидное вещество или раствор. Композиция по настоящему изобретению может быть получена путем обезвоживания, лиофилизации, гомогенизации, экстракции, фильтрации, центрифугирования, осаждения или концентрации культуры бактериальных клеток. Композиция по настоящему изобретению может содержать по меньшей мере 1%, приблизительно 5%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 20%, по меньшей мере 25%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 35%, по меньшей мере 40%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 97% или по меньшей мере 99% по весу полипептида по настоящему изобретению.

[00110] В вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению может содержать по меньшей мере второе пестицидное средство (например, которое может быть экспрессировано трансгенным путем в растении и/или включено в композицию), которое может являться инсектицидным, нематоцидным, фунгицидным или бактерицидным. По меньшей мере второе пестицидное средство может быть инсектицидным по отношению к тому же насекомому, что и полипептид по настоящему изобретению, или к другому насекомому. Второе пестицидное средство может представлять собой полипептид. Пестицидное средство может представлять собой интерферирующую РНК (например, dsRNA). Второе пестицидное средство может представлять собой микроорганизм, такой как бактерии, который содержит молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую пестицидное средство, и/или содержит пестицидное средство, такое как полипептид или интерферирующая РНК. Микроорганизм может быть аттенуированным, инактивированным нагреванием или лиофилизированным. Микроорганизм может быть мертвым или не способным к воспроизведению. Второе пестицидное средство может представлять собой инсектицид, например, карбофуран, карбарил, метомил, бифентрин, тефлутрин, перметрин, цифлутрин, лямбда-цигалотрин, циперметрин, дельтаметрин, хлорпирифос, хлорэтоксифос, диметоат, этопрофос, малатион, метил-паратион, форат, тербуфос, тебупиримифос, фипронил, ацетамиприд, имидаклоприд, тиаклоприд, тиаметоксам, эндосульфан, бенсултап или их комбинацию или коммерческий продукт, содержащий такие инсектициды и инсектицидное покрытие для семян, как описаны выше.

[00111] Композиция по настоящему изобретению, например композиция, содержащая полипептид по настоящему изобретению и приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель, может применяться в традиционных агротехнических способах. Приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель представляет собой состав, применимый для нанесения на растение или семя композиции, содержащей полипептид по настоящему изобретению. Например, композиции по настоящему изобретению можно смешивать с водой и/или удобрениями и можно применять в отношении требуемого места произрастания/обитания до появления всходов и/или после появления всходов любым способом, как например, с помощью распылительных баков самолетов, оросительного оборудования, распылительного оборудования непосредственного впрыскивания, ранцевых распылительных баки, бочек для купания скота, фермерского оборудования, применяемого в наземном распылении(например,штанговыераспылители,ручныераспылители)и т.п. Требуемое место произрастания/обитания может представлять собой почву, растения и т.п.

[00112] Композицию по настоящему изобретению можно применять в отношении семени или части растения для вегетативного размножения в любом физиологическом состоянии, в любое время между сбором семян и посевом семян; во время или после посева и/или после прорастания. Предпочтительно, чтобы семя или часть растения для вегетативного размножения находились в достаточно устойчивом состоянии, чтобы в процессе обработки они не подвергались повреждению или подвергались минимальному повреждению, включая физическое повреждение или биологическое повреждение. Состав может применяться по отношению к семенам или частям растения для вегетативного размножения с применением традиционных методик и устройств для нанесения покрытия, таких как методики псевдоожиженного слоя, способ вальцовой мельницы, ротостатические протравливатели семян и барабаны для нанесения покрытий.

[00113] Настоящее изобретение также включает способ контроля популяции чешуекрылых и/или жесткокрылых вредителей, включающий приведение указанной популяции в контакт с эффективным для контроля насекомых количеством полипептида по настоящему изобретению с инсектицидной активностью, где полипептид на по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или на 100% идентичен SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-72, SEQ ID NO: 86-96 или SEQ ID NO: 100. Приведение в контакт предусматривает представителей популяции вредителей, питающихся или поглощающих полипептид. Полипептид может быть введен в рацион насекомого или может экспрессироваться в растительной ткани, которую насекомое затем поглощает, или присутствовать на ней. В дополнительных вариантах осуществления осуществление контроля популяций чешуекрылых и/или жесткокрылых вредителей включает уничтожение насекомых путем приведения насекомых в контакт с эффективным для контроля насекомых количеством полипептида по настоящему изобретению.

[00114] Настоящее изобретение также предусматривает способ защиты растения от насекомого-вредителя, включающий экспрессирование в растении или растительной клетке нуклеотидной последовательности или кассеты экспрессии, которая кодирует инсектицидный полипептид по настоящему изобретению. В вариантах осуществления нуклеотидная последовательность на по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или на 100% идентична нуклеотидной последовательности под SEQ ID NO: 2-36 или кодирует полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или на 100% идентична SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 37-72, SEQ ID NO: 86-96 или SEQ ID NO: 100. В дополнительных вариантах осуществления растение или растительная клетка продуцируют инсектицидный полипептид с инсектицидной активностью против чешуекрылого и/или жесткокрылого вредителя.

[00115] Настоящее изобретение также предусматривает способ повышения урожайности у растения, включающий выращивание в поле растения или его семени, содержащих стабильно встроенную в его геном молекулу нуклеиновой кислоты кассеты экспрессии по настоящему изобретению, и где указанное поле инфицировано вредителем, против которого указанный полипептид характеризуется инсектицидной активностью.

[00116] После того как требуемая нуклеиновая кислота трансформирована в конкретный вид растения, она может распространяться в этом виде или переходить в другие сорта этого же вида с помощью традиционных технологий разведения, в особенности включая коммерчески важные сорта.

[00117] В вариантах осуществления нуклеиновая кислота по настоящему изобретению экспрессируется в трансгенных растениях, обуславливая таким образом биосинтез соответствующего инсектицидного белка в трансгенных растениях. Таким путем создаются трансгенные растения с повышенной устойчивостью к насекомым, в частности кукурузному корневому жуку. Для их экспрессии в трансгенных растениях нуклеиновые кислоты по настоящему изобретению необязательно могут быть модифицированы и оптимизированы. Хотя во многих случаях гены из микробных организмов могут экспрессироваться в растениях на высоких уровнях без модификации, в трансгенных растениях может происходить низкая экспрессия микробных нуклеиновых кислот, содержащих кодоны, которые не являются предпочтительными в растениях. Из уровня техники известно, что все организмы имеют специфические предпочтения в отношении использования кодонов, и при этом кодоны нуклеиновых кислот, описанных в настоящем изобретении, могут быть изменены в соответствии с характерными для растений предпочтениями, с сохранением в то же время кодируемых ими аминокислот. Кроме того, высокий уровень экспрессии в растениях лучше всего достигается в случае кодирующих последовательностей с содержанием GC, составляющим по меньшей мере приблизительно 35%, предпочтительно более чем приблизительно 45%, более предпочтительно более чем приблизительно 50% и наиболее предпочтительно более чем приблизительно 60%. Микробные нуклеиновые кислоты, которые характеризуются низкими содержаниями GC, могут экспрессироваться в растениях на недостаточном уровне вследствие наличия мотивов ATTTA, которые могут дестабилизировать транскрипты, и мотивов AATAAA, которые могут вызывать ненадлежащее полиаденилирование. В вариантах осуществления последовательности могут быть модифицированы, принимая во внимание конкретные предпочтения в отношении кодонов и предпочтения в отношении содержания GC однодольных или двудольных, поскольку было показано, что эти предпочтения отличаются (Murray et al. Nucl. Acids Res. 17:477-498 (1989)). Кроме того, осуществляется скрининг нуклеиновых кислот на наличие нестандартных сайтов сплайсинга, которые могут вызвать усечение транскрипта. Все изменения, которые требуется выполнить внутри нуклеиновых кислот, такие как описанные выше, могут быть выполнены с применением широко известных методик сайт-направленного мутагенеза, ПЦР и конструирования синтетических генов, например, с применением способов, описанных в опубликованных патентных заявках EP 0385962, EP 0359472 и WO 93/07278.

[00118] В одном варианте осуществления настоящего изобретения кодирующая последовательность инсектицидного белка по настоящему изобретению получена в соответствии с процедурой, раскрытой в патенте США 5625136, включенном в данный документ посредством ссылки. В этой процедуре применяют предпочтительные для маиса кодоны, т.е. один кодон, который чаще всего кодирует данную аминокислоту в маисе. Предпочтительный для маиса кодон для конкретной аминокислоты может быть получен, например, из известной генной последовательности маиса. Частота использования кодонов для маиса для 28 генов растений маиса встречается в Murray et al., Nucleic Acids Research 17:477-498 (1989), раскрытие которого включено в данный документ посредством ссылки.

[00119] Подобным образом нуклеотидные последовательности могут быть оптимизированы для экспрессии в любом растении. Понятно, что вся последовательность гена или любая ее часть могут быть оптимизированными или синтетическими. То есть также могут применяться синтетические или частично оптимизированные последовательности.

[00120] Для более эффективной инициации трансляции можно модифицировать последовательности, прилегающие к инициирующему метионину. Например, они могут быть модифицированы путем включения последовательностей, которые, как известно, являются эффективными в растениях. Joshi предложил подходящую консенсусную последовательность для растений (NAR 15:6643-6653 (1987)), а Clontech предлагает дополнительную консенсусную последовательность, являющуюся инициатором трансляции (каталог 1993/1994, стр. 210). Эти консенсусные последовательности пригодны для использования с нуклеиновыми кислотами по настоящему изобретению. В вариантах осуществления последовательности встроены в конструкции, содержащие нуклеиновые кислоты, вплоть до и включая ATG (оставляя при этом вторую аминокислоту немодифицированной) или в альтернативном варианте - вплоть до и включая GTC, следующую за ATG (с возможностью модифицирования второй аминокислоты данного трансгена).

[00121] Экспрессия нуклеиновых кислот в трансгенных растениях управляется промоторами, которые функционируют в растениях. Выбор промотора будет изменяться в зависимости от временных и пространственных требований для экспрессии, а также в зависимости от целевого вида. Таким образом, предпочтительной является экспрессия нуклеиновых кислот по настоящему изобретению в листьях, стеблях или стволах, в початках, в соцветиях (например, в шипах, метелках, косточках и т.п.), в корнях и/или саженцах. Однако, во многих случаях требуется защита от более чем одного типа насекомого-вредителя, а следовательно желательной является экспрессия в нескольких тканях. Хотя, как было показано, многие промоторы из двудольных растений функционируют у однодольных, и наоборот, в идеальном случае для экспрессии в двудольных растениях выбирают промоторы двудольных, а для экспрессии в однодольных растениях выбирают промоторы однодольных. Однако не существует каких-либо ограничений относительно происхождения выбранных промоторов; достаточно, чтобы они эффективно управляли экспрессией нуклеиновых кислот в требуемой клетке.

[00122] В одном варианте осуществления применяются промоторы с конститутивной экспрессией, в том числе актин или убиквитин, или промоторы cmp, или промоторы CaMV 35S и 19S. Нуклеиновые кислоты по настоящему изобретению также могут экспрессироваться под контролем промоторов, которые регулируются химическим путем. Предпочтительная технология для химической индукции экспрессии генов подробно изложена в опубликованной заявке EP 0332104 (Ciba-Geigy) и патенте США № 5614395. Предпочтительным промотором для химической индукции является промотор табака PR-1a.

[00123] В другом варианте осуществления может применяться категория промоторов, индуцируемых повреждением. Были описаны многочисленные промоторы, которые экспрессируются в участках ранения, а также в участках инфицирования фитопатогеном. Оптимально, такой промотор должен быть активным только локально в местах инфекции, и таким образом инсектицидные белки по настоящему изобретению накапливаются исключительно в клетках, в которых необходимо синтезировать белки для уничтожения инвазивных насекомых-вредителей. Предпочтительные промоторы этого типа включают описанные Stanford et al. Mol. Gen. Genet. 215:200-208 (1989), Xu et al. Plant Molec. Biol. 22:573-588 (1993), Logemann et al. Plant Cell 1:151-158 (1989), Rohrmeier & Lehle, Plant Molec. Biol. 22:783-792 (1993), Firek et al. Plant Molec. Biol. 22:129-142 (1993) и Warner et al. Plant J. 3:191-201 (1993).

[00124] Тканеспецифичными или предпочтительными для ткани промоторами, применимыми для экспрессии генов, кодирующих инсектицидные белки по настоящему изобретению в растениях, в частности кукурузе, являются промоторы, которые управляют экспрессией в корне, сердцевине, листе или пыльце, в частности в корне. Такие промоторы, например выделенные из PEPC или trpA, раскрыты в патенте США № 5625136, или MTL, раскрытого в патенте США № 5466785. Оба патента США включены в данный документ посредством ссылки в полном своем объеме.

[00125] Кроме того, могут применяться промоторы, функционирующие в пластидах. Неограничивающие примеры таких промоторов включают промотор 5'-UTR гена 9 бактериофага T3 и другие промоторы, раскрытые в патенте США № 7579516. Другие промоторы, пригодные в соответствии с настоящим изобретением, включают без ограничения промотор малой субъединицы S-E9 RuBP-карбоксилазы и промотор гена ингибитора трипсина Кунитца (Kti3).

[00126] В дополнительных аспектах нуклеотидные последовательности по настоящему изобретению могут быть функционально связанны с промотором, индуцируемым нанесением повреждения или индуцируемым инфицированием вредителями или патогенами (например, насекомым- или нематодой-вредителем растения). Были описаны многочисленные промоторы, которые обеспечивают экспрессию в местах повреждения и/или в участках нападения вредителей (например, в местах питания насекомых/нематод) или фитопатогенной инфекции. Оптимально, такой промотор должен быть активным только локально в участках нападения или рядом с ними, и таким образом экспрессия нуклеотидных последовательностей по настоящему изобретению будет сосредоточена на клетках, которые подвергаются внедрению в них или поеданию их. Такие промоторы включают без ограничения таковые, описанные в Stanford et al., Mol. Gen. Genet. 215:200-208 (1989), Xu et al. Plant Molec. Biol. 22:573-588 (1993), Logemann et al. Plant Cell 1:151-158 (1989), Rohrmeier and Lehle, Plant Molec. Biol. 22:783-792 (1993), Firek et al. Plant Molec. Biol. 22:129-142 (1993), Warner et al. Plant J. 3:191-201 (1993), патенте США № 5750386, патенте США № 5955646, патенте США № 6262344, патенте США № 6395963, патенте США № 6703541, патенте США № 7078589, патенте США № 7196247, патенте США № 7223901 и публикации заявки на выдачу патента США 2010043102.

[00127] В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения применяют "минимальный промотор" или "основной промотор". Минимальный промотор может привлекать и связывать комплекс РНК-полимеразы II и ее вспомогательных белков для обеспечения инициации транскрипции и элонгации. В некоторых вариантах осуществления минимальный промотор конструируют таким образом, что он содержит только нуклеотиды/нуклеотидные последовательности из выбранного промотора, которые требуются для связывания транскрипционных факторов и транскрипции представляющей интерес нуклеотидной последовательности, которая функционально связана с минимальным промотором, включая без ограничения последовательности TATA-бокса. В других вариантах осуществления в минимальном промоторе отсутствуют действующие в цис-положении последовательности, которые привлекают и связывают транскрипционные факторы, модулирующие транскрипцию (например, усиливают, подавляют, придают тканеспецифичность, придают способность к индуцированию или способность к подавлению). Как правило, минимальный промотор помещают выше (т. e. в направлении 5') нуклеотидной последовательности, подлежащей экспрессии. Следовательно, для применения в качестве минимального промотора могут быть выбраны нуклеотиды/нуклеотидные последовательности из любого промотора, применимого в соответствии с настоящим изобретением.

[00128] В описанные в настоящем изобретении кассеты экспрессии могут быть встроены многие другие последовательности. Они предусматривают последовательности, которые, как показано, усиливают экспрессию, как например, интронные последовательности (например, из Adhl и bronzel) и вирусные лидерные последовательности (например, из TMV, MCMV и AMV).

[00129] Может быть предпочтительным направлять экспрессию нуклеиновых кислот по настоящему изобретению в различные клеточные локализации в растении. В некоторых случаях может быть желательна локализация в цитозоле, тогда как в других случаях предпочтительной может быть локализация в определенной субклеточной органелле. Субклеточная локализация ферментов, кодируемых трансгеном, выполняется с помощью методик, хорошо известных из уровня техники. Как правило, ДНК, кодирующую целевой пептид из известного продукта гена, направленного на органеллу, обрабатывают и подвергают слиянию выше нуклеиновой кислоты. Большинство таких целевых последовательностей известны для хлоропласта, и было показано их функционирование в гетерологичных конструкциях. Экспрессия нуклеиновых кислот по настоящему изобретению также направлена в эндоплазматический ретикулум или в вакуоли клеток-хозяев. Методики для достижения этого хорошо известны из уровня техники.

[00130] Векторы, подходящие для трансформации растений, широко известны из уровня техники. Для опосредованной Agrobacterium трансформации пригодны бинарные векторы или векторы, несущие по меньшей мере одну T-ДНК граничную последовательность, тогда как для прямого переноса генов пригоден любой вектор, и предпочтительной может быть линейная ДНК, содержащая только представляющую интерес конструкцию. В случае прямого переноса генов может применяться трансформация с помощью одного вида ДНК или совместная трансформация (Schocher et al. Biotechnology 4:1093-1096 (1986)). Как в случае прямого переноса генов, так и в случае опосредованного Agrobacterium переноса, трансформацию обычно (но не обязательно) осуществляют с селектируемым маркером, который может обеспечивать устойчивость к антибиотику (канамицину, гигромицину или метотрексату) или гербициду (баста). Векторы трансформации растений, содержащие молекулы нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению, могут также содержать гены (например, изомеразу фосфоманнозы; PMI), обеспечивающие положительную селекцию трансгенных растений, как описано в патентах США 5767378 и 5994629, включенных в данный документ посредством ссылки. Однако, выбор селективного маркера не является определяющим для настоящего изобретения.

[00131] В вариантах осуществления нуклеиновая кислота может быть трансформирована в ядерный геном. В другом варианте осуществления нуклеиновая кислота по настоящему изобретению непосредственно трансформируется в геном пластид. Большим преимуществом трансформации пластид является то, что пластиды обычно способны к экспрессии бактериальных генов без существенной оптимизации кодонов, и при этом пластиды способны к экспрессии множественных открытых рамок считывания под контролем одного промотора. Технология трансформации пластид подробно описана в патентах США №№ 5451513, 5545817 и 5545818, в заявке согласно PCT № WO 95/16783 и в McBride et al. (1994) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 91, 7301-7305. Основная методика трансформации хлоропластов предусматривает введение участков клонированной пластидной ДНК, фланкирующих селектируемый маркер, вместе с представляющим интерес геном в подходящую целевую ткань, например, с применением биолистики или трансформации протопласта (например, трансформации, опосредованной хлоридом кальция или PEG). Фланкирующие участки размером 1-1,5 т.о., называемые нацеливающими последовательностями, содействуют гомологичной рекомбинации с геномом пластид и, таким образом, обеспечивают возможность замещения или модификации специфических участков пластома. Изначально в качестве селектируемых маркеров для трансформации используются точечные мутации в 16S rRNA и генах rps12 хлоропластов, придающие устойчивость к спектиномицину и/или стрептомицину (Svab, Z., Hajdukiewicz, P., and Maliga, P. (1990) Proc. Nati. Acad. Sci. USA 87, 8526-8530; Staub, J.M., и Maliga, P. (1992) Plant Cell 4, 39-45). Это приводило к получению стабильных гомоплазмических трансформантов с частотой, составляющей приблизительно одна трансформация на 100 бомбардировок целевых листьев. Присутствие сайтов клонирования между данными маркерами обеспечило возможность создания нацеливающегося на пластиды вектора для введения чужеродных генов (Staub, J.M., and Maliga, P. (1993) EMBO J. 12, 601-606). Существенного повышения частоты трансформации достигали путем замещения рецессивных генов rRNA или r-белка, обеспечивающих устойчивость к антибиотикам, на доминантный селектируемый маркер, бактериальный ген aadA, кодирующий фермент аминогликозид-3'-аденилтрансферазу, обезвреживающий спектиномицин (Svab, Z., and Maliga, P. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90, 913-917). Ранее данный маркер успешно применялся для трансформации пластидного генома зеленой водоросли Chlamydomonas reinhardtii с высокой частотой (Goldschmidt-Clermont, M. (1991) Nucl. Acids Res. 19:4083-4089). Другие селектируемые маркеры, применимые для трансформации пластид, известны из уровня техники и включены в объем настоящего изобретения. Как правило, для достижения гомопластидного состояния требуется около 15-20 циклов клеточного деления после трансформации. Экспрессия в пластидах, при которой за счет гомологической рекомбинации гены встроены во все несколько тысяч копий кольцевого генома пластид, присутствующих в каждой растительной клетке, использует преимущество огромного числа копий в сравнении с генами, экспрессируемыми в ядре, с обеспечением уровней экспрессии, которые легко могут превышать 10% от общего количества растворимого растительного белка. В предпочтительном варианте осуществления нуклеиновую кислоту по настоящему изобретению вводят в направленный на пластиды вектор, и при этом она трансформируется в геном пластид требуемого растения-хозяина. Получают растения, гомопластические в отношении геномов пластид, содержащие нуклеиновую кислоту по настоящему изобретению, и при этом они предпочтительно способны к высокой экспрессии нуклеиновой кислоты.

ПРИМЕРЫ

[00132] Настоящее изобретение далее будет описано посредством ссылки на следующие подробные примеры. Эти примеры предоставлены только для целей иллюстрации и не предназначены для ограничения, если не указано иное. Стандартные методики с использованием рекомбинантной ДНК и молекулярного клонирования, применяемые в данном документе, хорошо известны из уровня техники и описаны J. Sambrook, et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3d Ed., Cold Spring Harbor, NY: Cold Spring Harbor Laboratory Press (2001); by T.J. Silhavy, M.L. Berman, и L.W. Enquist, Experiments with Gene Fusions, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY (1984) и Ausubel, F.M. et al., Current Protocols in Molecular Biology, New York, John Wiley and Sons Inc., (1988), Reiter, et al., Methods in Arabidopsis Research, World Scientific Press (1992), и Schultz et al., Plant Molecular Biology Manual, Kluwer Academic Publishers (1998).

Пример 1. Идентификация белка с инсектицидной активностью против западного кукурузного корневого жука

[00133] Инсектицидный белок (SEQ ID NO: 1) идентифицировали из Woodsholea maritima. Синтезировали оптимизированный вариант этого гена E. coli (SEQ ID NO: 2), и ген клонировали в вектор pET29a с образованием конструкции pET29a(Woods). Конструкцию pET29a(Woods) вводили путем трансформации в E. coli BL21* (DE3), и экспрессию белка осуществляли в бульоне Лурия-Бертани с индукцией под действием IPTG при 18°C в течение ночи. Растворимую фракцию лизатов получали из этих культур путем применения пресса Френча с последующим центрифугированием лизатов целых клеток при 20000 x g в течение тридцати минут. Надосадочную жидкость (растворимую фракцию) затем тестировали на биологическую активность по отношению к западному кукурузному корневому жуку (WCR).

[00134] Анализы биологической активности осуществляли с применением способа включения в рацион. Вкратце, лизаты E. coli BL21*(DE3) смешивали с равным объемом нагретого искусственного рациона для насекомых (Bioserv, Inc., Френчтаун, Нью-Джерси) в центрифужных пробирках объемом 1,5 мл, а затем вносили в небольшие чашки Петри. После того как смесь образца и питательной среды охлаждали и обеспечивали возможность отвердевания, в каждый планшет добавляли 12 личинок WCR. Планшеты запечатывали и выдерживали в окружающих условиях лаборатории с учетом температуры, освещения и относительной влажности. В качестве отрицательных контролей применяли лизаты культур E. coli BL21* (DE3), несущих пустой вектор pET29a. Смертность оценивали в 4-й день и 7-й день. В этой и всех последующих таблицах, в которых показана инсектицидная активность в отношении CRW, аббревиатуры в столбце "Примечания" расшифровываются следующим образом: s = небольшая личинка, sm = небольшая/средняя личинка, m = средняя личинка, mb = средняя/большая личинка, b = большая личинка, vb = очень большая личинка Как показано в таблице 1, лизат культуры, экспрессирующей pET29a(Woods), демонстрировал сильную биологическую активность против WCR. Белок W. maritima был переименован в WoodsCRW.

Таблица 1. Инсектицидная активность против западного кукурузного корневого жука
Обработка	4-й день	7-й день
Мертвых	% смертности	Мертвых	% смертности	Примечания
50 мМ KPi, 7,0, 50 мМ	10	83	12	100
BL21*/pET29a (пустой)	10	83	12	100
BL21*/pET29a (Woods)	9	75	12	100

Белок WoodsCRW в препарате на основе лизата определяли количественно с помощью Experion от Bio-Rad и анализа белков с использованием BCA и повторно тестировали в диапазоне концентраций против 12 личинок WCR в биологическом анализе с включением в рацион (таблица 2). WoodsCRW демонстрировал сильную биологическую активность по отношению к WCR в тестируемом диапазоне концентраций.

Таблица 2. Инсектицидная активность лизата WoodsCRW против WCR
WoodsCRW (мкг/мл)	4-й день	6-й день
Мертвых	% смертности	Мертвых	% смертности	Примечания
250	10	83	12	100
100	10	83	12	100
50	9	75	12	100
25	6	50	11	92	m
12,5	3	25	5	42	m
5,0	0	0	2	17	mb
2,5	2	17	4	33	m
BL21*/pET29a	0	0	0	0	b

(пустой)
50 мМ KPi, pH 7,0, 50 мМ NaCl	0	0	0	0	b

Пример 2. Очищенный WoodsCRW обладает инсектицидной активностью против западного кукурузного корневого жука

[00135] Конструкцию pET-6His-SUMO, содержащую SEQ ID NO: 2, получали для WoodsCRW. Конструкцию pET-6His-SUMO-WoodsCRW вводили путем трансформации в E. coli BL21*(DE3) для получения белка. Белок, меченный SUMO, очищали с помощью стандартных методик для белка, меченного His, и впоследствии расщепляли с помощью протеазы SUMO с высвобождением белка WoodsCRW, не содержащего метку. Расщепленный белок затем вносили в колонку HisTrapFF для FPLC, и собирали элюат из колонки. Фракции элюата анализировали на чистоту с помощью SDS-PAGE (ожидаемая MW WoodsCRW составляет 54,1 кДа). Очищенный WoodsCRW затем подвергали диализу против 1X PBS в течение ночи при 4°C и затем концентрировали до 13 мг/мл. Чистый белок затем тестировали в диапазоне концентраций против 12 личинок WCR в способе включения в рацион, описанном в примере 1. Как показано в таблице 3, WoodsCRW является очень эффективным против WCR; WoodsCRW при 6 мкг/мл вызывал 83% смертность на 6-й день.

Таблица 3. Инсектицидная активность очищенного WoodsCRW против WCR
(мкг/мл)	3-й день	6-й день
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
1x PBS	0	0		0	0	b
100	7	58	s	12	100
50	9	75	s	11	92	s
25	7	58	s	12	100
12,5	3	25	s	11	92	m
6,3	1	8	s	10	83	m
3,1	0	0	sm	3	25	mb
1,6	2	17	sm	4	33	mb

Пример 3. WoodsCRW обладает инсектицидной активностью против северного кукурузного корневого жука

[00136] WoodsCRW очищали, как в примере 2, и тестировали на эффективность против 12 личинок северного кукурузного корневого жука (NCR) в анализе с включением в рацион, осуществляемом фактически как описано в примере 1, за исключением того, что смертность оценивали в 3-й день и 7-й день. WoodsCRW тестировали в концентрациях 0,2 мг/мл и 0,1 мг/мл. Отрицательный контроль содержал только 1x PBS. Как показано в таблице 4, WoodsCRW демонстрирует инсектицидную активность против NCR.

Таблица 4. Инсектицидная активность WoodsCRW против NCR
Обработка	3-й день	7-й день
Мертвых	% смертности	Мертвых	% смертности	Примечания
1x PBS	0	0%	0	0%	b
0,2 мг/мл	4	33%	11	92%	s
0,1 мг/мл	3	25%	12	100%	s

Пример 4. WoodsCRW обладает инсектицидной активностью против западного кукурузного корневого жука, устойчивого к Cry

[00137] Чтобы определить, реализуется ли токсичность WoodsCRW посредством способа действия, не связанного с белками, родственными Cry3, WoodsCRW очищали, как в примере 2, и тестировали на эффективность против линии WCR, которая является устойчивой к токсину mCry3A (mCry3A-R), и против линии WCR, которая является устойчивой к токсину eCry3.1Ab (eCry3.1Ab-R). Анализ с добавлением питательной среды осуществляли фактически как описано в примере 1, кроме того, оценивали смертность на 4-й день и 6-й день. Очищенный WoodsCRW тестировали в двух различных концентрациях 0,2 мг/мл и 0,075 мг/мл. Отрицательный контроль содержал только 1x PBS. Также анализировали WCR, который не являлся устойчивым к mCry3A или eCry3.1Ab (sus = восприимчивый). Каждый анализ осуществляли с 12 личинками WCR. Как показано в таблице 5, WoodsCRW демонстрирует инсектицидную активность против линий WCR, устойчивых к Cry.

Таблица 5. Инсектицидная активность WoodsCRW против Cry-R WCR
Обработка	4-й день	6-й день
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
sus, 0,2 мг/мл	12	100%		12	100%
sus, 0,075 мг/мл	11	92%	1m	11	92%	1m
sus, 1x PBS	0	0%	12mb	1	8%	11mb
mCry3A-R, 0,2 мг/мл	9	75%	3m	12	100%
mCry3A-R, 0,075 мг/мл	6	50%	6m	10	83%	2m
mCry3A-R, 1x PBS	0	0%	12mb	3	25%	9mb
eCry3.1Ab-R, 0,2 мг/мл	10	83%	2sm	12	100%
eCry3.1Ab-R, 0,075 мг/мл	9	75%	3m	11	92%	1m
eCry3.1Ab-R, 1x PBS	0	0%	12mb	0	0%	12mb

Пример 5. WoodsCRW не обладает инсектицидной активностью против чешуекрылых

[00138] Лизаты бактериальных культур, экспрессирующих WoodsCRW (SEQ ID NO: 2), тестировали на биологическую активность в отношении панели чешуекрылых насекомых-вредителей с помощью биологических анализов с наслаиванием на рацион. Каждую из огневки кукурузной (ECB), совки-ипсилон (BCW), а также совки хлопковой (CEW) и совки травяной (FAW) тестировали на инсектицидную активность WoodsCRW с помощью анализа с включением в рацион, аналогичного таковому из примера 1. В каждом эксперименте тестировали 12 личинок L1 с использованием лизатов бактериальных культур BL21* (DE3), несущих ген, кодирующий WoodsCRW (SEQ ID NO: 2). Положительный контрольный образец BCW, CEW и FAW состоял из личинок, подвергнутых воздействию лизатов E. coli BL21* (DE3), экспрессирующих Vip3A (патент США № 5877012, включен в данный документ посредством ссылки). 1X PBS в отдельности и лизаты бактериальных культур BL21* (DE3), несущих пустой вектор pET29, применяли в качестве отрицательных контролей. Смертность оценивали в 7-й день. В отношении личинок, которые достигали стадии L3, обработка не оказывала значительного воздействия. Если личинки достигали только стадии L2, то возможно, что обработка вызывала подавление роста. Если личинки оставались на стадии L1 на протяжении всей обработки, то происходило подавление роста. Это также может считаться "эффективной смертностью", так как личинки не будут развиваться после стадии L1, даже если они остаются живыми. WoodsCRW не являлся активным против тестируемых чешуекрылых насекомых-вредителей в данных экспериментальных условиях (таблица 6).

Таблица 6. Инсектицидная активность WoodsCRW против чешуекрылых
Насекомое	Обработка	7-й день
Мертвых	% смертности	Примечания
CEW	BL21*/pET29a (пустой)	0	0%	12L3
CEW	BL21*/WoodsCRW	0	0%	12L3
CEW	BL21*/pET29a(Vip3A)	9	75%	3L1
CEW	50 мМ KPi, pH 7,0, 50 мМ NaCl	0	0%	12L3
ECB	BL21*/pET29a (пустой)	0	0%	12L3
ECB	BL21*/WoodsCRW	0	0%	12L3
ECB	BL21*/pET29a(Vip3A)	0	0%	12L3
ECB	50 мМ KPi, pH 7,0, 50 мМ NaCl	0	0%	12L3
BCW	BL21*/pET29a (пустой)	0	0%	12L3
BCW	BL21*/WoodsCRW	0	0%	12L3
BCW	BL21*/pET29a(Vip3A)	12	100%
BCW	50 мМ KPi, pH 7,0, 50 мМ NaCl	0	0%	12L3
FAW	BL21*/pET29a (пустой)	0	0%	2L2 10L3
FAW	BL21*/WoodsCRW	0	0%	1L2 11L3
FAW	BL21*/pET29a(Vip3A)	8	67%	4L1
FAW	50 мМ KPi, pH 7,0, 50 мМ NaCl	0	0%	12L3

L1 = 1-я личиночная стадия, L2 = 2-я личиночная стадия, L3 = 3-я личиночная стадия

Пример 6. Варианты WoodsCRW обладают инсектицидной активностью против WCR

[00139] В WoodsCRW вводили мутации, и анализировали стабильность белков и инсектицидную активность у бактериальных лизатов, содержащих мутантный вариант WoodsCRW, и/или очищенного белка, представляющего собой мутантный вариант WoodsCRW. Мутации включают изменения цистеиновых аминокислотных остатков, а также вставку лейциновых остатков, прилегающих к цистеиновым остаткам. Эти мутации вводили для определения того, можно ли разработать мутантный вариант WoodsCRW, который сохранял бы инсектицидную активность, но был бы перевариваемым в анализе с использованием искусственного желудочного сока (SGF). Такой вариант WoodsCRW может иметь коммерческое значение, например, для придания инсектицидных свойств растению посредством трансгенной экспрессии в растении.

[00140] Инсектицидную активность определяли с помощью анализов с включением в рацион, осуществляемых фактически как описано в примере 1, с использованием 12 личинок WCR в каждом экспериментальном анализе. Результаты показаны в таблицах 7-19. SEQ ID NO соответствуют аминокислотной последовательности варианта. Мутантные варианты, показанные в таблицах 14-16 и 19, содержат вставленные лейциновые остатки в заданных положениях, на что указывает "-Leu-" или "-L-". Каждый бактериальный лизат из таблицы 14 тестировали в разведениях 1:20. В таблицах 15 и 16 разведения лизатов показаны в качестве части описания обработки. В таблицах 17-19 количества используемого очищенного белка показаны в качестве части описания обработки. Большинство мутантных вариантов WoodsCRW демонстрируют инсектицидную активность. Однако, очень немногие демонстрируют перевариваемость под действием SGF.

Пример 7. Тестирование воздействия искусственного желудочного сока на препараты на основе лизатов E. coli

[00141] В данном примере описывается анализ, осуществляемый для определения перевариваемости под действием SGF. Бактериальные лизаты в 50 мМ фосфата калия, pH 7,0, 50 мМ хлорида натрия разбавляли до 3 мг/мл (концентрации общего белка) для анализа перевариваемости. Реакцию переваривания инициировали путем добавления 15 мкл лизата к 285 мкл искусственного желудочного сока [10 единиц пепсина/мкг белка или примерно 1579 единиц пепсина/мл в растворе G-Con (2 мг/мл хлорида натрия, pH 1,2)] при 37°C. Через 5 или 10 минут отбирали 100 мкл реакционной смеси лизат-SGF, и путем добавления ее к 100 мкл предварительно нагретого (95°C) останавливающего раствора, содержащего 65% трицинового загрузочного буфера (Bio-rad, 2x трициновый загрузочный буфер с 10% β-меркаптоэтанолом) и 35% 500 мМ бикарбоната натрия, pH 11,0, реакцию прекращали. Образец в нулевой момент времени (T0) получали путем добавления 5 мкл тестируемого лизата к 100 мкл предварительно нагретого (95°C) останавливающего раствора и 95 мкл искусственного желудочного сока. Все образцы нагревали при 95°C в течение 5 минут, а затем хранили на льду до проведения анализа методом SDS-PAGE. Тридцать микролитров каждой реакционной смеси загружали в 10-20% трис-трициновый гель для пептидов перед проведением стандартного гель-электрофореза белков. Трис-трициновый гель фиксировали в течение 20 минут с помощью смеси 40% метанола и 10% уксусной кислоты непосредственно после электрофореза. Гель затем окрашивали с помощью красителя для белков GelCode Blue в течение 1 часа при комнатной температуре. Спустя 1 час полиакриламидный гель обесцвечивали с помощью дистиллированной воды в течение по меньшей мере 12 часов. Качественные результаты показаны в таблицах 7-19 в столбце "SGF". Мутантные варианты WoodsCRW из таблицы 20 также тестировали на перевариваемость. "Нет" (N) означает, что интактный вариант белка WoodsCRW поддавался выявлению с помощью красителя для белков GelCode Blue после гель-электрофореза, что указывает на то, что белок не был полностью перевариваемым в анализе с использованием SGF. "Да" (Y) означает, что интактный вариант белка WoodsCRW не поддавался выявлению, что указывает на то, что вариант белка WoodsCRW был перевариваемым в анализе с использованием SGF. Если в столбце "SGF" в таблицах 7-19 не содержится ни "N", ни "Y", то это указывает на то, что белок не тестировали на перевариваемость.

Таблица 7. Инсектицидная активность мутантных вариантов WoodsCRW против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	4-й день	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/pET29 (пустой)		0	0%	mb	0	0%	b
BL21*/WoodsCRW C485S, 50 мкг/мл	28	7	58%	sm	12	100%		N
BL21*/WoodsCRW C485S, 25 мкг/мл	28	5	42%	s	12	100%		N
BL21*/WoodsCRW C435S, 50 мкг/мл	29	8	67%	s	12	100%		N
BL21*/WoodsCRW C435S, 25 мкг/мл	29	1	8%	sm	7	58%	m	N
BL21*/WoodsCRW C398S, 50 мкг/мл	30	8	67%	sm	11	92%	m	N
BL21*/WoodsCRW C398S, 25 мкг/мл	30	8	67%	sm	11	92%	m	N
BL21*/WoodsCRW C383S, 50 мкг/мл	31	7	58%	sm	10	83%	sm	N
BL21*/WoodsCRW C383S, 25 мкг/мл	31	4	33%	sm	9	75%	sm	N
BL21*/WoodsCRW C313S, 50 мкг/мл	32	5	42%	sm	11	92%	m	N
BL21*/WoodsCRW C313S, 25 мкг/мл	32	7	58%	sm	11	92%	s	N

Таблица 8. Инсектицидная активность мутантных вариантов WoodsCRW против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	4-й день	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/pET29a (пустой)		1	8%	m	1	8%	mb
BL21*/WoodsCRW-wt, 50 мкг/мл	1	9	75%	s/m	11	92%	s
BL21*/WoodsCRW Y194W, 50 мкг/мл	33	2	17%	m	2	17%	mb
BL21*/WoodsCRW Y194F, 50 мкг/мл	34	8	67%	s	12	100%		N
BL21*/WoodsCRW C383S/C485S, 50 мкг/мл	37	6	50%	s	12	100%		N
BL21*/WoodsCRW C435S/C485S, 50 мкг/мл	38	4	33%	s (2m)	11	92%	m	N
BL21*/WoodsCRW C398S/C435S, 50 мкг/мл	39	3	25%	s/m	5	42%	m	N
BL21*/WoodsCRW C398S/C485S, 50 мкг/мл	40	5	42%	s	8	67%	s	N

Таблица 9. Инсектицидная активность мутантного варианта WoodsCRW против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	4-й день	6-й день
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/pET29a (пустой)		0	0%	mb	0	0%	b
BL21*/WoodsCRW-wt, 50 мкг/мл	1	11	92%	1s	12	100%
BL21*/WoodsCRW C313S C383S C398S C435S C485S, 29 мкг/мл	42	1	8%	mb	1	8%	mb
BL21*/WoodsCRW C313S C383S C398S C435S C485S, 58 мкг/мл	42	0	0%	mb	0	0%	mb
BL21*/WoodsCRW C313S C383S C398S C435S C485S, 145 мкг/мл	42	1	8%	mb	1	8%	mb
BL21*/WoodsCRW C313S C383S C398S C435S C485S, 580 мкг/мл	42	4	33%	m	4	33%	mb

Таблица 10. Инсектицидная активность мутантных вариантов WoodsCRW против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	4-й день	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/pet29 (пустой)		0	0%	3	25%	b
BL21*/WoodsCRW-wt,50 мкг/мл	1	8	67%	12	100%	s
BL21*/WoodsCRW K396L, 50 мкг/мл	35	4	33%	10	83%	m	N
BL21*/WoodsCRW K406L, 50 мкг/мл	36	6	50%	9	75%	m	N
BL21*/WoodsCRWC383S C435S C485S, 50 мкг/мл	41	2	17%	5	42%	b
BL21*/WoodsCRW I77L I83L Y98F, 50 мкг/мл	47	5	42%	11	92%	m
BL21*/WoodsCRWY248F I264L Y277F, 50 мкг/мл	48	6	50%	10	83%	m
BL21*/WoodsCRWY326F I340L I351L, 50 мкг/мл	49	5	42%	11	92%	s

Таблица 11. Инсектицидная активность мутантного варианта WoodsCRW против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	4-й день	6-й день
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/pET29 (пустой)		3	25%	m	5	42%	mb
BL21*/WoodsCRW I209L Y223F I228L, 0,19 мг/мл	50	5	42%	s	11	92%	m

Таблица 12. Инсектицидная активность мутантного варианта WoodsCRW против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	4-й день	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/pET29 (пустой)		2	17%	mb	4	33%	mb
BL21*/WoodsCRW I447L Y464F I469L, 181 мкг/мл	51	12	100%		12	100%		N
BL21*/WoodsCRW I447L Y464F I469L, 36 мкг/мл	51	11	92%	s	12	100%		N

Таблица 13. Инсектицидная активность мутантных вариантов WoodsCRW против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	4-й день	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/pet29 (пустой)		1	8%	mb	1	8%	b
BL21*/WoodsCRWC383A C485A, 245 мкг/мл	37	9	75%	s	12	100%		N
BL21*/WoodsCRWC383A C485A, 49 мкг/мл	37	7	58%	sm	11	92%	m	N
BL21*/WoodsCRWC398A C485A, 213 мкг/мл	44	11	92%	sm	12	100%		N
BL21*/WoodsCRWC398A C485A, 43 мкг/мл	44	3	25%	s	9	75%	m	N
BL21*/WoodsCRW C383L, 210 мкг/мл	45	3	25%	sm	9	75%	mb	N
BL21*/WoodsCRW C383L, 42 мкг/мл	45	7	58%	m	11	92%	m	N
BL21*/WoodsCRW C398L, 275 мкг/мл	46	7	58%	s	12	100%		Y
BL21*/WoodsCRW C398L, 55 мкг/мл	46	3	25%	sm	9	75%	2m, 1b	Y

Таблица 14. Инсектицидная активность мутантных вариантов WoodsCRW против WCR
Обработка	SE Q ID NO:	4-й день	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/пустойвектор pET29a		0	0%	b	1	8%	b
BL21*/WoodsCRW Y436F	89	10	83%	s	12	100%		N
BL21*/WoodsCRWD397- Leu-C398	90	10	83%	s	12	100%		Y
BL21*/WoodsCRWC398- Leu-V399	91	7	58%	m	10	83%	m	Y
BL21*/WoodsCRWL382- Leu-C383	92	0	0%	b	0	0%	b
BL21*/WoodsCRWC383- Leu-Y384	93	1	8%	b	1	8%	b
BL21*/WoodsCRWL434- Leu-C435	94	0	0%	b	0	0%	b
BL21*/WoodsCRWC435- Leu-Y436	95	5	42%	mb	11	92%	m

Таблица 15. Инсектицидная активность мутантных вариантов WoodsCRW против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	3-й день	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/пустой вектор pET29a		0	0%	b	1	8%	b
BL21*/WoodsCRW Y436F, 1:20	89	9	75%	2s, 1m	12	100%		N
BL21*/WoodsCRW Y436F, 1:50	89	9	75%	2m, 1b	12	100%		N
BL21*/WoodsCRW Y436F, 1:200	89	3	25%	sm	10	83%	mb	N
BL21*/WoodsCRWD397-Leu-C398, 1:20	90	5	42%	mb	12	100%		N
BL21*/WoodsCRWD397-Leu-C398, 1:50	90	3	25%	mb	11	92%	b	N
BL21*/WoodsCRWD397-Leu-C398, 1:200	90	2	17%	m	11	92%	b	N
BL21*/WoodsCRWC398-Leu-V399, 1:20	91	3	25%	m	11	92%	m	N
BL21*/WoodsCRWC398-Leu-V399, 1:50	91	5	42%	m	12	100%		N
BL21*/WoodsCRWC398-Leu-V399, 1:200	91	2	17%	m	7	58%	mb	N
BL21*/WoodsCRWC435-Leu-Y436, 1:20	95	2	17%	mb	6	50%	b
BL21*/WoodsCRWC435-Leu-Y436, 1:50	95	1	8%	mb	6	50%	b
BL21*/WoodsCRWC435-Leu-Y436, 1:200	95	2	17%	b	4	33%	b

Таблица 16. Инсектицидная активность мутантных вариантов WoodsCRW против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	4-й день	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 1:20	86	12	100%		12	100%		Y
BL21*/WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 1:50	86	11	92%	m	12	100%		Y
BL21*/WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 1:200	86	8	67%	m	11	92%	m	Y
BL21*/WoodsCRWC398-Leu-Leu-V399, 1:20	87	9	75%	m	11	92%	m	Y
BL21*/WoodsCRWC398-Leu-Leu-V399, 1:50	87	7	58%	m	12	100%		Y
BL21*/WoodsCRWC398-Leu-Leu-V399, 1:200	87	3	25%	m	10	83%	m	Y
BL21*/WoodsCRW D397-Leu-C398-Leu-V399, 1:20	88	3	25%	m	6	50%		Y
BL21*/WoodsCRW D397-Leu-C398-Leu-V399, 1:50	88	0	0%	mb	2	17%	mb	Y
BL21*/WoodsCRW D397-Leu-C398-Leu-V399, 1:200	88	1	8%	mb	3	25%	mb	Y
BL21*/WoodsCRW C398L, 1:20	55	10	83%	s	12	100%		Y
BL21*/WoodsCRW C398L, 1:50	55	9	75%	m	12	100%		Y

Обработка	SEQ ID NO:	4-й день	6-й день	SGF
Мертвых	%смертности	Примечания	Мертвых	%смертности	Примечания
BL21*/WoodsCRW C398L, 1:200	55	7	58%	m	9	75%	mb	Y
BL21*/пустой вектор pET29a, 1:20		1	8%	mb	1	8%	b

Таблица 17. Инсектицидная активность очищенного варианта WoodsCRW C398L против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	3-й день	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
WoodsCRW C398L, 200 мкг/мл	55	6	50%	m	11	92%	m	Y
WoodsCRW C398L, 100 мкг/мл	55	0	0%	mb	10	83%	m	Y
WoodsCRW C398L, 50 мкг/мл	55	0	0%	mb	6	50%	mb	Y
WoodsCRW C398L, 25 мкг/мл	55	0	0%	mb	4	33%	b	Y
WoodsCRW C398L, 12,5 мкг/мл	55	1	8%	mb	2	17%	b	Y
WoodsCRW C398L, 200 мкг/мл	55	3	25%	mb	11	92%	m	Y
WoodsCRW C398L, 100 мкг/мл	55	0	0%	mb	5	42%	m	Y
WoodsCRW C398L, 50 мкг/мл	55	0	0%	mb	4	33%	mb	Y
WoodsCRW C398L, 25 мкг/мл	55	1	8%	mb	4	33%	3m, 5b	Y
WoodsCRW C398L, 12,5 мкг/мл	55	0	0%	mb	1	8%	b	Y
1X PBS		0	0%	mb	0	0%	b
1X PBS		0	0%	mb	1	8%	b

Таблица 18. Инсектицидная активность очищенного варианта WoodsCRW C398Y против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	3-й день	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
WoodsCRW C398Y, 200 мкг/мл	67	5	42%	sm	8	67%	m	Y
WoodsCRW C398Y, 100 мкг/мл	67	4	33%	m	10	83%	mb	Y
WoodsCRW C398Y, 50 мкг/мл	67	1	8%	mb	7	58%	mb	Y
WoodsCRW C398Y, 25 мкг/мл	67	1	8%	mb	3	25%	b	Y
WoodsCRW C398Y, 12,5 мкг/мл	67	1	8%	mb	1	8%	b	Y
WoodsCRW C398Y, 200 мкг/мл	67	4	33%	m	10	83%	m	Y
WoodsCRW C398Y, 100 мкг/мл	67	4	33%	mb	6	50%	mb	Y
WoodsCRW C398Y, 50 мкг/мл	67	6	50%	mb	7	58%	mb	Y
WoodsCRW C398Y, 25 мкг/мл	67	3	25%	mb	11	92%	s	Y
WoodsCRW C398Y, 12,5 мкг/мл	67	0	0%	mb	2	17%	mb	Y
1X PBS		0	0%	mb	1	8%	b
1X PBS		0	0%	mb	0	0%	b

Таблица 19. Инсектицидная активность очищенного варианта WoodsCRW D397- Leu-Leu-C398 против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	3-й день	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 200 мкг/мл	86	11	92%	s	12	100%		Y
WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 200 мкг/мл	86	9	75%	sm	12	100%		Y
WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 100 мкг/мл	86	9	75%	sm	12	100%		Y

Обработка	SEQ ID NO:	3-й день	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 100 мкг/мл	86	8	67%	sm	12	100%		Y
WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 50 мкг/мл	86	7	58%	m	12	100%		Y
WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 50 мкг/мл	86	7	58%	m	12	100%		Y
WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 25 мкг/мл	86	8	67%	m	12	100%		Y
WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 25 мкг/мл	86	6	50%	m	11	92%	m	Y
WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 12,5 мкг/мл	86	4	33%	m	6	50%	m	Y
WoodsCRWD397-Leu-Leu-C398, 12,5 мкг/мл	86	4	33%	m	9	75%	m	Y
1X PBS		0	0%	mb	0	0%	b
1X PBS		1	8%	mb	1	8%	b

Таблица 20. Переваривание мутантных вариантов WoodsCRW в анализе с использованием SGF
Мутантный вариант WoodsCRW	SEQ ID NO:	SGF
C435L	61	N
C485L	62	N
I403L/I404L	63	N
V399L	64	N
V399F	65	N
C398F	66	Y
C398I	68	N
C398M	69	N

[00142] Как показано в таблице 9, мутантный вариант WoodsCRW C313S/C383S/C398S/C435S/C485S (SEQ ID NO: 42) характеризуется очень низкой инсектицидной активностью, при этом уровень смертности в случае применения 580 мкг/мл белка составляет 33% к 6-му дню. В таблице 10 показано, что вариант WoodsCRW C383S/C435S/C485S (SEQ ID NO: 41) также характеризуется низкой инсектицидной активностью, при этом уровень смертности в случае применения 50 мкг/мл белка составляет 42% к 6-му дню. Дополнительно, в таблице 8 показано, что варианты WoodsCRW C398S/C435S (SEQ ID NO: 39) и C398S-C485S (SEQ ID NO: 40) характеризуются сниженной инсектицидной активностью. В таблице 7 также показано, что варианты WoodsCRW C435S (SEQ ID NO: 29) и C383S (SEQ ID NO: 31) характеризуются некоторым уровнем сниженной инсектицидной активности. Эти результаты указывают на то, что по меньшей мере один из модифицированных цистеиновых остатков и/или комбинация из по меньшей мере двух модифицированных цистеиновых остатков играют важную роль в инсектицидной активности WoodsCRW. Эти результаты также указывают на то, что белковый домен от приблизительно аминокислоты 313 до приблизительно аминокислоты 485 является существенно важным для инсектицидной активности WoodsCRW.

[00143] Как показано в таблицах 14-16 и 19, вставки лейциновых остатков вблизи положения C398 обеспечивают сохранение относительно высокой инсектицидной активности и перевариваемость под действием SGF. Дополнительно, мутация по типу замены C398 на L или Y также приводит к образованию мутантного варианта WoodsCRW с относительно высокой инсектицидной активностью против WCR и перевариваемостью под действием SGF (таблицы 17 и 18).

Пример 8. Варианты WoodsCRW C398L и C398Y обладают инсектицидной активностью по отношению к WCR, устойчивым к Cry3

[00144] Дляопределениятого,сохраняютлимутантныеварианты WoodsCRW C398L и C398Y инсектицидную активность по отношению к WCR, устойчивым к белкам, родственным Cry3, эти два варианта анализировали на активность по отношению к WCR, устойчивым к eCry3.1Ab. Анализы с включением в рацион с использованием очищенных белков WoodsCRW C398L или C398Y осуществляли аналогично способам, описанным в примере 4. Результаты показаны в таблице 21. Концентрации очищенного белка включены в описание обработки. Результаты указывают на то, что мутантные варианты WoodsCRW C398L и C398Y обладают инсектицидной активностью против линии WCR, устойчивой к Cry3.

Таблица 21. Инсектицидная активность очищенных мутантных вариантов WoodsCRW против WCR, устойчивых к eCry3.1Ab
Обработка	SEQ ID NO:	6-й день	SGF
Мертвых	% смертности	Примечания
WoodsCRW C398L, 200 мкг/мл	55	11	92%	m	Y
WoodsCRW C398L, 100 мкг/мл	55	9	75%	b	Y
WoodsCRW C398L, 50 мкг/мл	55	4	33%	b	Y
WoodsCRW C398L, 25 мкг/мл	55	4	33%	b	Y
WoodsCRW C398Y, 200 мкг/мл	67	10	83%	m	Y
WoodsCRW C398Y, 100 мкг/мл	67	6	50%	b	Y
WoodsCRW C398Y, 50 мкг/мл	67	3	25%	b	Y
WoodsCRW C398Y, 25 мкг/мл	67	2	17%	b	Y
1X PBS		4	33%	b
1X PBS		3	25%	b

Пример 9. WoodsCRW имеет домен, существенно важный для инсектицидной активности

[00145] Была расшифрована кристаллическая структура WoodsCRW, и было обнаружено, что он характеризуется значительным структурным сходством с Plu1415, белком бактерии Photorhabdus luminescens, кристаллическая структура которого описана у Rosado et al., 2007 (Science 317: 1548-1551). Подобно Plu1415, WoodsCRW состоит из N-концевого домена MACPF и C-концевого домена β-призмы. Бактериальные лизаты, содержащие Plu1415, анализировали на инсектицидную активность после применения способа биологического анализа с включением в рацион, описанного в примере 1, с использованием 12 личинок WCR. Результаты показаны в таблице 22. Интересно, что Plu1415 не характеризуется инсектицидной активностью против WCR.

Таблица 22. Инсектицидная активность бактериальных лизатов, содержащих Plu1415, против WCR
Обработка	SE Q ID NO:	3-й день	6-й день
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/pET29a (пустой)		1	8%	b	2	17%	b
BL21*/Plu1415	98	0	0%	b	10	0%	b

[00146] Две кристаллические структуры использовали для получения химерного белка для определения того, какой(какие) домен(домены) отвечал(отвечали) за инсектицидную активность WoodsCRW по отношению к WCR. На основании сравнения структур двух белков получали два взаимодополняющих слитых белка. Химерная молекула Plu1415-WoodsCRW содержит N-концевой домен MACPF Plu1415 (аминокислоты 1-362) и C-концевой домен β-призму WoodsCRW (аминокислоты 363-506). Аналогично, химерная молекула WoodsCRW-Plu1415 содержит N-концевой домен MACPF WoodsCRW (аминокислоты 1-346) и C-концевой домен β-призму Plu1415 (аминокислоты 347-494). Химерные молекулы анализировали на инсектицидную активность по отношению к WCR с использованием 12 личинок после применения способа биологического анализа с включением в рацион, описанного в примере 1. Результаты представлены в таблицах 23 и 24. Интересно, что химерная молекула Plu1415-Woods обладает инсектицидной активностью против WCR, однако химерная молекула Woods-Plu1415 ей не обладает. Эти данные указывают на то, что C-концевой домен β-призма WoodsCRW является необходимым и требуется для инсектицидной активности и может придавать инсектицидную активность против WCR, будучи слитым с доменом MACPF в химерной конструкции.

Таблица 23. Инсектицидная активность химерной молекулы Plu1415-Woods против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	4-й день	6-й день
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/pET29a (пустой)		1	8%	mb	1	8%	b
BL21*/химерная молекула Plu1415-Woods	96	4	33%	m	10	83%	m

Таблица 24. Инсектицидная активность химерной молекулы Woods-Plu1415 против WCR
Обработка	SEQ ID NO:	4-й день	6-й день
Мертвых	% смертности	Примечания	Мертвых	% смертности	Примечания
BL21*/pET29a (пустой)		0	0%	b	0	0%	b
BL21*/химерная молекула Woods-Plu1415	97	0	0%	b	0	0%	b

Пример 10. Трансформация маиса с помощью вариантов WoodsCRW C398L и C398Y

[00147] Получали бинарные векторные конструкции, подходящие для опосредованной Agrobacterium трансформации вариантами WoodsCRW C398L и C398Y. Каждый из бинарных векторов содержит последовательность, кодирующую оптимизированный для маиса вариант WoodsCRW C398L или оптимизированный для маиса вариант WoodsCRW C398Y, функционально связанную на 5'-конце с промотором, подходящим для управления экспрессией в растениях, и функционально связанную на 3'-конце с последовательностью терминатора. Оптимизацию кодонов для маиса осуществляли, например, с применением способов, описанных в патенте США №6320100 (включенном в данный документ посредством ссылки). Конструкции вводили путем трансформации в Agrobacterium tumefaciens с применением стандартных методик молекулярной биологии, известных специалистам в данной области. Для получения агробактерий для трансформации, клетки культивировали в жидкой среде YPC при 28°C и 220 об/мин. в течение ночи. Опосредованную Agrobacterium трансформацию незрелых зародышей маиса осуществляли фактически как описано в Negrotto et al., 2000, (Plant Cell Reports 19: 798-803). В случае данного примера все компоненты среды представляли собой компоненты, описываемые главным образом в Negrotto et al. выше. Однако они могут быть заменены различными компонентами среды, известными из уровня техники.

[00148] После трансформации, отбора и регенерации растения анализировали на присутствие гена PMI и последовательности, кодирующей варианты WoodsCRW C398L или C398Y, кодон-оптимизированной для маиса, с помощью анализа TaqMan®. Растения также тестировали на присутствие остова вектора. Растения, отрицательные в отношении остова вектора и содержащие одну копию трансгена, переносили в теплицу и анализировали на устойчивость к повреждениям, наносимым WCR.

Пример 11. Растения маиса, экспрессирующие варианты WoodsCRW, характеризуются инсектицидной активностью против WCR

[00149] Присутствие варианта WoodsCRW выявляли посредством ELISA в нг/мг общего растворимого белка (TSP) в ткани листа или корня от каждого трансформанта. Инсектицидную активность определяли с помощью биологического анализа сегментов корней. Вкратце, образцы ткани корня маиса отбирали у каждого трансформанта, когда трансформанты маиса, экспрессирующие WoodsCRW, достигали стадии V3-V4. Ткань корня маиса помещали в чашку Петри, а затем инфицировали с помощью 12 личинок WCR в биологическом анализе сегментов корней. Два образца ткани корня (повторность 1 и повторность 2) оценивали в отношении отверстий, образующихся при поедании (FH), и повреждений в виде рубцов на 3-й день. Ткань корня из нетрансформированного (нулевого) маиса служила в качестве отрицательного контроля. Данные из таблиц 25 и 26 показывают, что трансгенная экспрессия варианта WoodsCRW, о котором известно, что он характеризуется инсектицидной активностью по отношению к CRW, обеспечивала защиту от CRW в ткани корня с трансгенным WoodsCRW по сравнению с нулевым образцом ткани корня (таблицы 25 и 26).

Таблица 25. Инсектицидная активность маиса с трансгенным вариантом WoodsCRW C398L против WCR
ID растения	ELISA корней (нг/мг TSP)	Биологический анализ Биопроба
Woods	PMI	FH	Рубцевание	Оценка
3486	9,45	458,88	11	m	-
3487	ND	133,00	15	m	-
3492	4,07	205,34	8	lt/m	+/-
3493	6,96	288,82	7	lt/m	+/-
3496	7,72	230,38	19	m/h	-

ID растения	ELISA корней (нг/мг TSP)	Биологический анализ Биопроба
Woods	PMI	FH	Рубцевание	Оценка
3498	3,30	185,43	2	lt	+
3500	ND	97,30	13	lt/m	-
3505	1,93	225,34	8	lt/m	+/-
3506	ND	188,34	23	m	-
3509	ND	282,19	6	lt/m	+/-
3510	ND	185,11	15	m	-
Нулевой			16	m	-
Нулевой			19	m/h	-
Нулевой			12	m	-
Нулевой			22	h	-

ND = не выявлено; FH = отверстия, образующиеся при поедании; L = слабое рубцевание; M = среднее рубцевание; H = сильное рубцевание; + = объект с превосходной эффективностью; +/- = объект с хорошей эффективностью; - = объект с низкой эффективностью

Таблица 26. Инсектицидная активность маиса с трансгенным вариантом WoodsCRW C398Y против WCR
ID растения	ELISA листьев (нг/мг TSP)	Биологический анализ Биопроба
WoodsCRW	PMI	FH	Рубцевание	Оценка
1571	30	14	3	LT	++
1572	ND	27	8	LT/M	+
1574	ND	441	10	LT/M	+
1576	3	527	8	M	-
1579	ND	584	18	M	-
1580	27	16	7	LT/M	+
1583	27	20	7	LT/M	+
1587	2	13	24	M	-
1589	5	665	6	LT	+
1592	2	14	11	LT/M
1593	19	266	8	LT/M	+
1595	32	625	6	LT/M	+
1596	3	528	6	LT	+
1598	29	81	8	LT/M	+
1604	ND	517	21	M	-
1606	12	11	15	M	-
1607	ND	21	19	M	-
1609	ND	30	8	LT/M	+
1610	2	24	10	LT/M	+
1613	ND	298	6	LT/M	+

ID растения	ELISA листьев (нг/мг TSP)	Биологический анализ Биопроба
WoodsCRW	PMI	FH	Рубцевание	Оценка
1615	3	263	5	LT/M	+
1616	21	156	11	LT/M	-
1619	ND	330	5	LT/M	+
1621	ND	17	6	LT/M	+
1622	ND	41	17	M	-
1623	ND	25	8	LT/M	+
Нулевой			33	H	-
Нулевой			30	H	-
Нулевой			25	H	-
Нулевой			24	H	-

ND = не выявлено; FH = отверстия, образующиеся при поедании; L = слабое рубцевание; M = среднее рубцевание; H = сильное рубцевание; + = объект с превосходной эффективностью; +/- = объект с хорошей эффективностью; - = объект с низкой эффективностью

Пример 12. WoodsCRW в комбинации с интерферирующей РНК характеризуется инсектицидной активностью против WCR

[00150] WoodsCRW и/или вариант WoodsCRW очищали, как в примере 2. Получали dsRNA, нацеливающуюся на существенно важную мишень и, как известно, обладающую инсектицидной активностью. В неограничивающих примерах dsRNA может нацеливаться на ген, кодирующий вакуолярную ATP-синтазу, бета-тубулин, белковую субъединицу p28 протеасомы 26S, EF1α 48D, тропонин I, тетраспанин, гамма-коатомер, бета-коатомер и/или эпоксидгидролазу ювенильного гормона (предварительные заявки на патент США №№ 62/371259, 62/371261 и 62/371262; патент США № 7812219; каждый из этих источников включен в данный документ посредством ссылки). DsRNA и очищенный белок тестировали на эффективность против WCR в анализе с включением в рацион, осуществляемом фактически как описано в примере 1.

[00151] Следует понимать, что примеры и варианты осуществления, описанные в данном документе, предназначены только для иллюстративных целей, и что различные модификации или изменения с учетом данного описания будут предполагаться специалистами в данной области техники и подлежат включению в сущность и содержание данной заявки, а также объем прилагаемой формулы изобретения.

[00152] Все публикации и патентные заявки, упомянутые в данном описании, показывают уровень компетентности специалистов в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Все публикации и патентные заявки включены в данный документ посредством ссылки в той же степени, как если бы каждая отдельная публикация или патентная заявка была конкретно и отдельно включена посредством ссылки

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> ЗИНГЕНТА ПАРТИСИПЕЙШНС АГ

<120> ИНСЕКТИЦИДНЫЕ БЕЛКИ

<130> 81158-WO-REG-ORG-P-1

<150> 62/445429

<151> 2017-01-12

<160> 100

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Woodsholea maritima

<400> 1

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 2

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 2

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 3

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Woodsholea maritima

<400> 3

atgaaaagct tagatcacgt agctcatcaa aaccttttaa atgagcccac ccaccataaa 60

tccaatacca aagccgcttt gatgcgccac caagagaatt tggtggagcg ctatttgcca 120

ggtgttgaag ttatcggtgc gggctataat ccttttggcg tttatgcctc aaccgatagt 180

gtaacggttc aattgtttga ctggcagtca gcaccgagtg aacctgtcat ctttaaccct 240

gattatattg cgccaaaagc tgttagcgtt cagcagaatg acgaagcgcg ctataccaat 300

gtttctggga aaacaatcaa cacctttcaa aagaatttca gcctaaaggt caccgttgcg 360

ggctcgtaca atttattttc gggctctgta tcaaatgaat tttcatcttc tgaaacgcgc 420

aatgcggaaa acgagttttc tcgtattcag caatctattc gcgtatggtc tttgcgcttg 480

gcctatacgg actcgttgcg ggagtatttg aaggcagatg tgcgtgacta tattgattcc 540

attcaatcgg acgcgcagat tgaaattctg ttcgaccgtt atggtagtca cttcttaacc 600

ggtgttgtca tgggtggggc cgcgatcatg gcctcatcga ccaacaaggt ccaagtcgac 660

catacctatg agaatgagac gattgccaag gccagttatg aagccttaac cgggcagatc 720

agcgcggaaa ccgccgcgaa atatcgccaa tccatgtcca gcttctcaca aaactctgac 780

attcataaga tcgtcgtggg cggcgatggt gtcgctgggg ccaaggtcta tagcggtgac 840

aaggctgatt ttgacgcctg ggctgatacc gtgggcacat caccggattt tgtagacttc 900

gtttcttctg ttccgatgtt gggcatttgg gaattgtgca aagacgatgc ccaagccaaa 960

aaaatggagg attactataa taacacttgg gcgccgcgta agtcaaaaga agctcaaata 1020

tatgctgatt atattgacgc ggttgaggtt attcaaagta acagctctgg tgtccgtcca 1080

ccgtcagggt ataccaaaat tgattatgat ctcaacaaag gcgccggcgg ggattatatc 1140

tatctatgct atcataaagc ccgctatagc gcctatagtg aaaacaaaga ctgcgtatct 1200

gacttgatca taatcaaggg caatggtgca cgcgcgcctt caggctatac caaaatcgat 1260

gttgatttaa atgaagatgc gggtgggaaa tatctctatc tttgttataa aaaacaaagc 1320

tatgataatg ttgaagcaat caaaggcttg gcggttgtcg gtggcgataa ttcacataca 1380

ccggcaccat acggttatag gcgtattgat acagacgtca atgaaggtgc tggtggtgaa 1440

tatatctata tttgctactc aaaaggcgct tga 1473

<210> 4

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 4

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctcttactc caaaggggct taa 1473

<210> 5

<211> 1472

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 5

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatcttacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct ta 1472

<210> 6

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 6

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttctgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 7

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 7

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtctt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 8

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 8

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtcta aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 9

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 9

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt gggggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 10

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 10

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt ttgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 11

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 11

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtctt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctcttactc caaaggggct taa 1473

<210> 12

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 12

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatcttacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctcttactc caaaggggct taa 1473

<210> 13

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 13

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttctgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatcttacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 14

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 14

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttctgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctcttactc caaaggggct taa 1473

<210> 15

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 15

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtctt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatcctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctcttactc caaaggggct taa 1473

<210> 16

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 16

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtcta aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtctt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttctgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatcttacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctcttactc caaaggggct taa 1473

<210> 17

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 17

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacctcga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 18

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 18

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattctcgg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 19

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 19

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctggcat atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tcgcatactc caaaggggct taa 1473

<210> 20

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 20

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga tgcagtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tcgcatactc caaaggggct taa 1473

<210> 21

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 21

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgttat atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 22

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 22

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga tttagtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 23

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 23

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcct ctttaacccc 240

gattacctcg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtttacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 24

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 24

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atttcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaac tcgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgtt tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 25

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 25

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactttaa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaactc 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg ctccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 26

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 26

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcactcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatttg agaatgaaac cctcgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 27

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 27

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcact caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt ttggttaccg tcggctcgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 28

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 28

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tactgtacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 29

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 29

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tcttatactc caaaggggct taa 1473

<210> 30

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 30

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttactgt taattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 31

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 31

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcttatct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 32

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 32

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcttttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 33

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 33

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttttgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 34

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 34

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttacgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 35

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 35

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga tattgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 36

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 36

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga tatggtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctacaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 37

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 37

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Ser Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 38

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 38

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Ser Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 39

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 39

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Ser Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 40

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 40

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Ser Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 41

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 41

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Ser Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 42

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 42

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Trp Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 43

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 43

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Phe Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 44

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 44

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Leu Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 45

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 45

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Leu Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 46

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 46

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Ser Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Ser Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 47

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 47

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Ser Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Ser Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 48

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 48

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Ser Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Ser Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 49

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 49

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Ser Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Ser Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 50

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 50

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Ser Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Ser Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Ser Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 51

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 51

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Ser Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Ser Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Ser Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Ser Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Ser Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 52

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 52

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Ala Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Ala Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 53

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 53

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Ala Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Ala Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 54

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 54

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Leu Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 55

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 55

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Leu Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 56

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 56

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Leu Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Leu Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Phe Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 57

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 57

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Phe Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Leu Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Phe Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 58

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 58

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Phe Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Leu Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Leu Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 59

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 59

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Leu Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Phe Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Leu Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 60

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 60

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Leu Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Phe

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Leu Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 61

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 61

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Leu Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 62

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 62

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Leu Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 63

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 63

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Leu Leu Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 64

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 64

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Leu Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 65

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 65

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Phe Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 66

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 66

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Phe Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 67

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 67

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Tyr Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 68

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 68

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Ile Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 69

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 69

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Met Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 70

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Woodsholea maritima

<400> 70

Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly

1 5 10

<210> 71

<211> 178

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 71

Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn

1 5 10 15

Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr

20 25 30

Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro

35 40 45

Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly

50 55 60

Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr

65 70 75 80

Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn

85 90 95

Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn

100 105 110

Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser

115 120 125

Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp

130 135 140

Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp

145 150 155 160

Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys

165 170 175

Gly Ala

<210> 72

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<220>

<221> другой_признак

<222> (77)..(77)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (83)..(83)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (98)..(98)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (194)..(194)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<221> другой_признак

<222> (264)..(264)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (277)..(277)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (313)..(313)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (326)..(326)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (340)..(340)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (351)..(351)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (383)..(383)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (396)..(396)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<221> другой_признак

<222> (447)..(447)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (464)..(464)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (469)..(469)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<220>

<221> другой_признак

<222> (485)..(485)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<400> 72

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Xaa Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Xaa Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Xaa Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Xaa Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Xaa Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Xaa Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Xaa Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Xaa Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Xaa Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Xaa Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Xaa Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Xaa Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Xaa Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Xaa Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Xaa Asp Xaa Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Xaa Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Xaa Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Xaa Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Xaa

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Xaa Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Xaa Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 73

<211> 1479

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 73

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcctgtta 1200

gtttctgatt taattattat taagggaaac ggagcacgcg ccccgagcgg ttatacgaaa 1260

attgatgtgg atttgaatga ggatgcaggt ggaaaatacc tgtatttatg ctacaagaag 1320

caaagttacg acaatgtgga agcaatcaag gggctggcgg tagttggtgg tgacaattcg 1380

catacccctg ctccgtacgg ttaccgtcgg attgacaccg atgttaacga gggggccgga 1440

ggtgagtaca tttatatctg ttactccaaa ggggcttaa 1479

<210> 74

<211> 1479

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 74

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcctgtta 1200

gtttctgatt taattattat taagggaaac ggagcacgcg ccccgagcgg ttatacgaaa 1260

attgatgtgg atttgaatga ggatgcaggt ggaaaatacc tgtatttatg ctacaagaag 1320

caaagttacg acaatgtgga agcaatcaag gggctggcgg tagttggtgg tgacaattcg 1380

catacccctg ctccgtacgg ttaccgtcgg attgacaccg atgttaacga gggggccgga 1440

ggtgagtaca tttatatctg ttactccaaa ggggcttaa 1479

<210> 75

<211> 1479

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 75

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga tctgtgcctg 1200

gtttctgatt taattattat taagggaaac ggagcacgcg ccccgagcgg ttatacgaaa 1260

attgatgtgg atttgaatga ggatgcaggt ggaaaatacc tgtatttatg ctacaagaag 1320

caaagttacg acaatgtgga agcaatcaag gggctggcgg tagttggtgg tgacaattcg 1380

catacccctg ctccgtacgg ttaccgtcgg attgacaccg atgttaacga gggggccgga 1440

ggtgagtaca tttatatctg ttactccaaa ggggcttaa 1479

<210> 76

<211> 1473

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 76

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgctttaa gaagcaaagt 1320

tacgacaatg tggaagcaat caaggggctg gcggtagttg gtggtgacaa ttcgcatacc 1380

cctgctccgt acggttaccg tcggattgac accgatgtta acgagggggc cggaggtgag 1440

tacatttata tctgttactc caaaggggct taa 1473

<210> 77

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 77

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga tctgtgcgtt 1200

tctgatttaa ttattattaa gggaaacgga gcacgcgccc cgagcggtta tacgaaaatt 1260

gatgtggatt tgaatgagga tgcaggtgga aaatacctgt atttatgcta caagaagcaa 1320

agttacgaca atgtggaagc aatcaagggg ctggcggtag ttggtggtga caattcgcat 1380

acccctgctc cgtacggtta ccgtcggatt gacaccgatg ttaacgaggg ggccggaggt 1440

gagtacattt atatctgtta ctccaaaggg gcttaa 1476

<210> 78

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 78

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcctggtt 1200

tctgatttaa ttattattaa gggaaacgga gcacgcgccc cgagcggtta tacgaaaatt 1260

gatgtggatt tgaatgagga tgcaggtgga aaatacctgt atttatgcta caagaagcaa 1320

agttacgaca atgtggaagc aatcaagggg ctggcggtag ttggtggtga caattcgcat 1380

acccctgctc cgtacggtta ccgtcggatt gacaccgatg ttaacgaggg ggccggaggt 1440

gagtacattt atatctgtta ctccaaaggg gcttaa 1476

<210> 79

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 79

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgctgt gttatcataa agcccgttat agcgcttact cagaaaacaa agattgcgtt 1200

tctgatttaa ttattattaa gggaaacgga gcacgcgccc cgagcggtta tacgaaaatt 1260

gatgtggatt tgaatgagga tgcaggtgga aaatacctgt atttatgcta caagaagcaa 1320

agttacgaca atgtggaagc aatcaagggg ctggcggtag ttggtggtga caattcgcat 1380

acccctgctc cgtacggtta ccgtcggatt gacaccgatg ttaacgaggg ggccggaggt 1440

gagtacattt atatctgtta ctccaaaggg gcttaa 1476

<210> 80

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 80

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtc tgtatcataa agcccgttat agcgcttact cagaaaacaa agattgcgtt 1200

tctgatttaa ttattattaa gggaaacgga gcacgcgccc cgagcggtta tacgaaaatt 1260

gatgtggatt tgaatgagga tgcaggtgga aaatacctgt atttatgcta caagaagcaa 1320

agttacgaca atgtggaagc aatcaagggg ctggcggtag ttggtggtga caattcgcat 1380

acccctgctc cgtacggtta ccgtcggatt gacaccgatg ttaacgaggg ggccggaggt 1440

gagtacattt atatctgtta ctccaaaggg gcttaa 1476

<210> 81

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 81

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tactgtgcta caagaagcaa 1320

agttacgaca atgtggaagc aatcaagggg ctggcggtag ttggtggtga caattcgcat 1380

acccctgctc cgtacggtta ccgtcggatt gacaccgatg ttaacgaggg ggccggaggt 1440

gagtacattt atatctgtta ctccaaaggg gcttaa 1476

<210> 82

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 82

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacgc agtcgaagtg atccagagta attcttcggg ggttcgccct 1080

cccagtggat atacgaaaat tgattacgac ctcaataaag gcgccggtgg ggattatatc 1140

tacctgtgtt atcataaagc ccgttatagc gcttactcag aaaacaaaga ttgcgtttct 1200

gatttaatta ttattaaggg aaacggagca cgcgccccga gcggttatac gaaaattgat 1260

gtggatttga atgaggatgc aggtggaaaa tacctgtatt tatgcctgta caagaagcaa 1320

agttacgaca atgtggaagc aatcaagggg ctggcggtag ttggtggtga caattcgcat 1380

acccctgctc cgtacggtta ccgtcggatt gacaccgatg ttaacgaggg ggccggaggt 1440

gagtacattt atatctgtta ctccaaaggg gcttaa 1476

<210> 83

<211> 1521

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima, Photorhabdus luminescens

<400> 83

atgtcaaacg ataaaacggg aaaaagtctg gaacaggaaa atagcgagcg cgacgttgaa 60

attcgcgatc gcaactactt tcgcaaattg agcttgtttg acgatactgt tatcgccggt 120

gcggagatga tcggtactag ctacgatgtg tttggcaagt actgcaatgt aggaagctgc 180

atgaacagcc tcttcgatga acgtaaaatc aacgcgagtg aagacaactt taaaaaagtt 240

accattttag gcaaaacgct caaggtaccg tattatatcg attgttattc tgtcggtgat 300

cttaaataca cgaacgcatc aggcgaatct atcgagagtt atcagtctaa catttcttct 360

aaaagtcgta tcaaaggtaa ctatctgttt ttttctgcct cactcaaggt cgatttcgat 420

acggatagcc tgacggattt cgagaatgcc ttctctcgta tccagtacac gtatgatttg 480

tatattttaa aatcatccgc ggaagccctc aaggaatttc tgaaagagtc agtcaaaacg 540

gcgttggaca aggcggatac cgaagaagac atgaacgacc tgtttaatac ttggggcagt 600

catttcctgt caggcgtagt gatgggtggt tgcgcgcaat acagttcgag tacgaataag 660

tatacctcaa atctgaccaa tagctttgac gttgttgcag cggcatcttt cgctggtttt 720

attggtctgt ccgcccgtac aggcaactca tttatggaag atattaaaaa atttcgctcc 780

gcatctaata ttaagaccca cgcgatcggt ggggatctca gccgcttcga tccgttcggc 840

ggcgccacct ccgccgatca accgtctgcc gaagagatcg cggcggccaa gaaggccttt 900

gaagattgga aagccagcgt accaaacgca ccggaattag tgaacttcgc ggattctaat 960

ccgctgaccg gcatttggga gctgtgctcg gatcgtacgc agaaagcgaa actgaaaaaa 1020

cacttcgaga cggtgtgggc cccggcagaa agcgcgaagc gtcgggtaca tgcggattat 1080

atcgacgcag tcgaagtgat ccagagtaat tcttcggggg ttcgccctcc cagtggatat 1140

acgaaaattg attacgacct caataaaggc gccggtgggg attatatcta cctgtgttat 1200

cataaagccc gttatagcgc ttactcagaa aacaaagatt gcgtttctga tttaattatt 1260

attaagggaa acggagcacg cgccccgagc ggttatacga aaattgatgt ggatttgaat 1320

gaggatgcag gtggaaaata cctgtattta tgctacaaga agcaaagtta cgacaatgtg 1380

gaagcaatca aggggctggc ggtagttggt ggtgacaatt cgcatacccc tgctccgtac 1440

ggttaccgtc ggattgacac cgatgttaac gagggggccg gaggtgagta catttatatc 1500

tgttactcca aaggggctta a 1521

<210> 84

<211> 1485

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima, Photorhabdus luminescens

<400> 84

atgaaaagct tggatcacgt tgctcatcag aacttactga atgaaccgac tcaccataaa 60

agcaatacca aggcggcgct gatgcgtcat caggaaaacc tggttgaacg ctatctgccg 120

ggtgtggagg tgattggggc aggttacaac cctttcggcg tatacgcgtc cactgactca 180

gttactgtgc aactttttga ttggcaaagc gcgccatcag aaccggtcat ttttaacccc 240

gattacattg ctccgaaagc tgtgtcagta caacaaaatg atgaagcccg gtatacgaac 300

gttagcggca aaacaatcaa cacgtttcaa aaaaacttct ccctgaaagt tactgtcgcg 360

ggatcctata acttatttag cggtagcgtc agcaatgaat tcagcagcag cgaaactcgc 420

aatgcagaaa acgaatttag ccgcatccaa cagagcatcc gcgtctggtc tctgcgcctc 480

gcgtacacgg attccctgcg tgaatattta aaagcggacg ttcgcgatta tatcgatagc 540

attcaatcag atgcgcagat tgaaattctg tttgatcgtt acgggtcaca tttccttacc 600

ggcgtggtga tgggtggcgc agcaatcatg gcgtcttcga ccaataaagt acaggtggac 660

cacacatacg agaatgaaac cattgccaag gccagctacg aagccttaac tgggcagatc 720

tctgctgaga ctgcggctaa atatcgccaa agcatgtcgt cgttctccca gaactccgat 780

attcacaaaa ttgtggtcgg cggagacgga gtcgcgggcg cgaaagtgta tagcggtgac 840

aaggcggatt tcgatgcttg ggctgacacc gtggggacgt ctccagattt tgtggacttt 900

gttagcagcg ttcctatgtt gggaatttgg gaactgtgca aagatgacgc gcaggcgaaa 960

aagatggaag attactataa taatacgtgg gccccgcgga aaagcaaaga ggctcaaatt 1020

tatgctgatt atatcgacga aattattatt ggcattaata acaccaatac acctccggaa 1080

ggttatattg gcctgaaaag caccaaagat gaaaatctga atagcaaagg caatatttgc 1140

ctgtttatgc ataaagccaa atatgatccg aatattgata ataaagattg cattaccgaa 1200

ctgaaattta ttaccgtgcg tgataaatct ccggaaggtg attgggttaa aattccgcag 1260

gatatttata ttagcccgaa tcagtatctg tatctgtgtt atctgcctgc aaaatatagc 1320

gcagaaaaag ccattaaaga tattcagctg ctgtgtagca gctgtggtag cagcatgatt 1380

ctgccgtatg gctataatga tgtgctggat gaacgtggtg aacgtgcaaa tgcaaccgaa 1440

gatgataatg tgcattatct gatttatagc gcaggctgga aataa 1485

<210> 85

<211> 1533

<212> ДНК

<213> Photorhabdus luminescens

<400> 85

atgtcaaacg ataaaacggg aaaaagtctg gaacaggaaa atagcgagcg cgacgttgaa 60

attcgcgatc gcaactactt tcgcaaattg agcttgtttg acgatactgt tatcgccggt 120

gcggagatga tcggtactag ctacgatgtg tttggcaagt actgcaatgt aggaagctgc 180

atgaacagcc tcttcgatga acgtaaaatc aacgcgagtg aagacaactt taaaaaagtt 240

accattttag gcaaaacgct caaggtaccg tattatatcg attgttattc tgtcggtgat 300

cttaaataca cgaacgcatc aggcgaatct atcgagagtt atcagtctaa catttcttct 360

aaaagtcgta tcaaaggtaa ctatctgttt ttttctgcct cactcaaggt cgatttcgat 420

acggatagcc tgacggattt cgagaatgcc ttctctcgta tccagtacac gtatgatttg 480

tatattttaa aatcatccgc ggaagccctc aaggaatttc tgaaagagtc agtcaaaacg 540

gcgttggaca aggcggatac cgaagaagac atgaacgacc tgtttaatac ttggggcagt 600

catttcctgt caggcgtagt gatgggtggt tgcgcgcaat acagttcgag tacgaataag 660

tatacctcaa atctgaccaa tagctttgac gttgttgcag cggcatcttt cgctggtttt 720

attggtctgt ccgcccgtac aggcaactca tttatggaag atattaaaaa atttcgctcc 780

gcatctaata ttaagaccca cgcgatcggt ggggatctca gccgcttcga tccgttcggc 840

ggcgccacct ccgccgatca accgtctgcc gaagagatcg cggcggccaa gaaggccttt 900

gaagattgga aagccagcgt accaaacgca ccggaattag tgaacttcgc ggattctaat 960

ccgctgaccg gcatttggga gctgtgctcg gatcgtacgc agaaagcgaa actgaaaaaa 1020

cacttcgaga cggtgtgggc cccggcagaa agcgcgaagc gtcgggtaca tgcggattac 1080

atcgatgaga ttatcattgg tattaacaat accaataccc caccagaagg ctacattgga 1140

ttaaaaagta ccaaggatga aaatctcaac agtaaaggaa atatctgctt attcatgcac 1200

aaagctaaat atgacccgaa tatcgacaac aaagattgca ttactgaact gaaatttatc 1260

actgtgcgtg acaagagtcc agaaggtgat tgggttaaaa tcccgcaaga tatctatatt 1320

agtccgaatc agtatctgta cctgtgctat ttgcccgcaa aatattcggc cgagaaagcg 1380

atcaaagaca ttcagctgct gtgctcgagc tgtggctcga gcatgattct gccttacggg 1440

tataatgatg tcttagatga gcgcggtgaa cgtgcaaatg ctacggaaga tgataacgtg 1500

cactatctga tttactccgc aggatggaag taa 1533

<210> 86

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 86

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Leu Leu Cys

385 390 395 400

Val Ser Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser

405 410 415

Gly Tyr Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys

420 425 430

Tyr Leu Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala

435 440 445

Ile Lys Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala

450 455 460

Pro Tyr Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly

465 470 475 480

Gly Glu Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 87

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 87

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Leu Leu

385 390 395 400

Val Ser Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser

405 410 415

Gly Tyr Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys

420 425 430

Tyr Leu Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala

435 440 445

Ile Lys Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala

450 455 460

Pro Tyr Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly

465 470 475 480

Gly Glu Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 88

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 88

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Leu Cys Leu

385 390 395 400

Val Ser Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser

405 410 415

Gly Tyr Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys

420 425 430

Tyr Leu Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala

435 440 445

Ile Lys Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala

450 455 460

Pro Tyr Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly

465 470 475 480

Gly Glu Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 89

<211> 490

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 89

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Phe Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

435 440 445

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

450 455 460

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

465 470 475 480

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 90

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 90

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Leu Cys Val

385 390 395 400

Ser Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly

405 410 415

Tyr Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr

420 425 430

Leu Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile

435 440 445

Lys Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro

450 455 460

Tyr Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly

465 470 475 480

Glu Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 91

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 91

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Leu Val

385 390 395 400

Ser Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly

405 410 415

Tyr Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr

420 425 430

Leu Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile

435 440 445

Lys Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro

450 455 460

Tyr Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly

465 470 475 480

Glu Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 92

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 92

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Leu Cys

370 375 380

Tyr His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val

385 390 395 400

Ser Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly

405 410 415

Tyr Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr

420 425 430

Leu Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile

435 440 445

Lys Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro

450 455 460

Tyr Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly

465 470 475 480

Glu Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 93

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 93

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Leu

370 375 380

Tyr His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val

385 390 395 400

Ser Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly

405 410 415

Tyr Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr

420 425 430

Leu Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile

435 440 445

Lys Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro

450 455 460

Tyr Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly

465 470 475 480

Glu Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 94

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 94

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile

435 440 445

Lys Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro

450 455 460

Tyr Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly

465 470 475 480

Glu Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 95

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 95

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

340 345 350

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

355 360 365

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

370 375 380

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

385 390 395 400

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

405 410 415

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

420 425 430

Tyr Leu Cys Leu Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile

435 440 445

Lys Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro

450 455 460

Tyr Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly

465 470 475 480

Glu Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

485 490

<210> 96

<211> 506

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima, Photorhabdus luminescens

<400> 96

Met Ser Asn Asp Lys Thr Gly Lys Ser Leu Glu Gln Glu Asn Ser Glu

1 5 10 15

Arg Asp Val Glu Ile Arg Asp Arg Asn Tyr Phe Arg Lys Leu Ser Leu

20 25 30

Phe Asp Asp Thr Val Ile Ala Gly Ala Glu Met Ile Gly Thr Ser Tyr

35 40 45

Asp Val Phe Gly Lys Tyr Cys Asn Val Gly Ser Cys Met Asn Ser Leu

50 55 60

Phe Asp Glu Arg Lys Ile Asn Ala Ser Glu Asp Asn Phe Lys Lys Val

65 70 75 80

Thr Ile Leu Gly Lys Thr Leu Lys Val Pro Tyr Tyr Ile Asp Cys Tyr

85 90 95

Ser Val Gly Asp Leu Lys Tyr Thr Asn Ala Ser Gly Glu Ser Ile Glu

100 105 110

Ser Tyr Gln Ser Asn Ile Ser Ser Lys Ser Arg Ile Lys Gly Asn Tyr

115 120 125

Leu Phe Phe Ser Ala Ser Leu Lys Val Asp Phe Asp Thr Asp Ser Leu

130 135 140

Thr Asp Phe Glu Asn Ala Phe Ser Arg Ile Gln Tyr Thr Tyr Asp Leu

145 150 155 160

Tyr Ile Leu Lys Ser Ser Ala Glu Ala Leu Lys Glu Phe Leu Lys Glu

165 170 175

Ser Val Lys Thr Ala Leu Asp Lys Ala Asp Thr Glu Glu Asp Met Asn

180 185 190

Asp Leu Phe Asn Thr Trp Gly Ser His Phe Leu Ser Gly Val Val Met

195 200 205

Gly Gly Cys Ala Gln Tyr Ser Ser Ser Thr Asn Lys Tyr Thr Ser Asn

210 215 220

Leu Thr Asn Ser Phe Asp Val Val Ala Ala Ala Ser Phe Ala Gly Phe

225 230 235 240

Ile Gly Leu Ser Ala Arg Thr Gly Asn Ser Phe Met Glu Asp Ile Lys

245 250 255

Lys Phe Arg Ser Ala Ser Asn Ile Lys Thr His Ala Ile Gly Gly Asp

260 265 270

Leu Ser Arg Phe Asp Pro Phe Gly Gly Ala Thr Ser Ala Asp Gln Pro

275 280 285

Ser Ala Glu Glu Ile Ala Ala Ala Lys Lys Ala Phe Glu Asp Trp Lys

290 295 300

Ala Ser Val Pro Asn Ala Pro Glu Leu Val Asn Phe Ala Asp Ser Asn

305 310 315 320

Pro Leu Thr Gly Ile Trp Glu Leu Cys Ser Asp Arg Thr Gln Lys Ala

325 330 335

Lys Leu Lys Lys His Phe Glu Thr Val Trp Ala Pro Ala Glu Ser Ala

340 345 350

Lys Arg Arg Val His Ala Asp Tyr Ile Asp Ala Val Glu Val Ile Gln

355 360 365

Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp

370 375 380

Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr

385 390 395 400

His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu Asn Lys Asp Cys Val Ser

405 410 415

Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala Arg Ala Pro Ser Gly Tyr

420 425 430

Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp Ala Gly Gly Lys Tyr Leu

435 440 445

Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp Asn Val Glu Ala Ile Lys

450 455 460

Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser His Thr Pro Ala Pro Tyr

465 470 475 480

Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn Glu Gly Ala Gly Gly Glu

485 490 495

Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

500 505

<210> 97

<211> 494

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima, Photorhabdus luminescens

<400> 97

Met Lys Ser Leu Asp His Val Ala His Gln Asn Leu Leu Asn Glu Pro

1 5 10 15

Thr His His Lys Ser Asn Thr Lys Ala Ala Leu Met Arg His Gln Glu

20 25 30

Asn Leu Val Glu Arg Tyr Leu Pro Gly Val Glu Val Ile Gly Ala Gly

35 40 45

Tyr Asn Pro Phe Gly Val Tyr Ala Ser Thr Asp Ser Val Thr Val Gln

50 55 60

Leu Phe Asp Trp Gln Ser Ala Pro Ser Glu Pro Val Ile Phe Asn Pro

65 70 75 80

Asp Tyr Ile Ala Pro Lys Ala Val Ser Val Gln Gln Asn Asp Glu Ala

85 90 95

Arg Tyr Thr Asn Val Ser Gly Lys Thr Ile Asn Thr Phe Gln Lys Asn

100 105 110

Phe Ser Leu Lys Val Thr Val Ala Gly Ser Tyr Asn Leu Phe Ser Gly

115 120 125

Ser Val Ser Asn Glu Phe Ser Ser Ser Glu Thr Arg Asn Ala Glu Asn

130 135 140

Glu Phe Ser Arg Ile Gln Gln Ser Ile Arg Val Trp Ser Leu Arg Leu

145 150 155 160

Ala Tyr Thr Asp Ser Leu Arg Glu Tyr Leu Lys Ala Asp Val Arg Asp

165 170 175

Tyr Ile Asp Ser Ile Gln Ser Asp Ala Gln Ile Glu Ile Leu Phe Asp

180 185 190

Arg Tyr Gly Ser His Phe Leu Thr Gly Val Val Met Gly Gly Ala Ala

195 200 205

Ile Met Ala Ser Ser Thr Asn Lys Val Gln Val Asp His Thr Tyr Glu

210 215 220

Asn Glu Thr Ile Ala Lys Ala Ser Tyr Glu Ala Leu Thr Gly Gln Ile

225 230 235 240

Ser Ala Glu Thr Ala Ala Lys Tyr Arg Gln Ser Met Ser Ser Phe Ser

245 250 255

Gln Asn Ser Asp Ile His Lys Ile Val Val Gly Gly Asp Gly Val Ala

260 265 270

Gly Ala Lys Val Tyr Ser Gly Asp Lys Ala Asp Phe Asp Ala Trp Ala

275 280 285

Asp Thr Val Gly Thr Ser Pro Asp Phe Val Asp Phe Val Ser Ser Val

290 295 300

Pro Met Leu Gly Ile Trp Glu Leu Cys Lys Asp Asp Ala Gln Ala Lys

305 310 315 320

Lys Met Glu Asp Tyr Tyr Asn Asn Thr Trp Ala Pro Arg Lys Ser Lys

325 330 335

Glu Ala Gln Ile Tyr Ala Asp Tyr Ile Asp Glu Ile Ile Ile Gly Ile

340 345 350

Asn Asn Thr Asn Thr Pro Pro Glu Gly Tyr Ile Gly Leu Lys Ser Thr

355 360 365

Lys Asp Glu Asn Leu Asn Ser Lys Gly Asn Ile Cys Leu Phe Met His

370 375 380

Lys Ala Lys Tyr Asp Pro Asn Ile Asp Asn Lys Asp Cys Ile Thr Glu

385 390 395 400

Leu Lys Phe Ile Thr Val Arg Asp Lys Ser Pro Glu Gly Asp Trp Val

405 410 415

Lys Ile Pro Gln Asp Ile Tyr Ile Ser Pro Asn Gln Tyr Leu Tyr Leu

420 425 430

Cys Tyr Leu Pro Ala Lys Tyr Ser Ala Glu Lys Ala Ile Lys Asp Ile

435 440 445

Gln Leu Leu Cys Ser Ser Cys Gly Ser Ser Met Ile Leu Pro Tyr Gly

450 455 460

Tyr Asn Asp Val Leu Asp Glu Arg Gly Glu Arg Ala Asn Ala Thr Glu

465 470 475 480

Asp Asp Asn Val His Tyr Leu Ile Tyr Ser Ala Gly Trp Lys

485 490

<210> 98

<211> 510

<212> БЕЛОК

<213> Photorhabdus luminescens

<400> 98

Met Ser Asn Asp Lys Thr Gly Lys Ser Leu Glu Gln Glu Asn Ser Glu

1 5 10 15

Arg Asp Val Glu Ile Arg Asp Arg Asn Tyr Phe Arg Lys Leu Ser Leu

20 25 30

Phe Asp Asp Thr Val Ile Ala Gly Ala Glu Met Ile Gly Thr Ser Tyr

35 40 45

Asp Val Phe Gly Lys Tyr Cys Asn Val Gly Ser Cys Met Asn Ser Leu

50 55 60

Phe Asp Glu Arg Lys Ile Asn Ala Ser Glu Asp Asn Phe Lys Lys Val

65 70 75 80

Thr Ile Leu Gly Lys Thr Leu Lys Val Pro Tyr Tyr Ile Asp Cys Tyr

85 90 95

Ser Val Gly Asp Leu Lys Tyr Thr Asn Ala Ser Gly Glu Ser Ile Glu

100 105 110

Ser Tyr Gln Ser Asn Ile Ser Ser Lys Ser Arg Ile Lys Gly Asn Tyr

115 120 125

Leu Phe Phe Ser Ala Ser Leu Lys Val Asp Phe Asp Thr Asp Ser Leu

130 135 140

Thr Asp Phe Glu Asn Ala Phe Ser Arg Ile Gln Tyr Thr Tyr Asp Leu

145 150 155 160

Tyr Ile Leu Lys Ser Ser Ala Glu Ala Leu Lys Glu Phe Leu Lys Glu

165 170 175

Ser Val Lys Thr Ala Leu Asp Lys Ala Asp Thr Glu Glu Asp Met Asn

180 185 190

Asp Leu Phe Asn Thr Trp Gly Ser His Phe Leu Ser Gly Val Val Met

195 200 205

Gly Gly Cys Ala Gln Tyr Ser Ser Ser Thr Asn Lys Tyr Thr Ser Asn

210 215 220

Leu Thr Asn Ser Phe Asp Val Val Ala Ala Ala Ser Phe Ala Gly Phe

225 230 235 240

Ile Gly Leu Ser Ala Arg Thr Gly Asn Ser Phe Met Glu Asp Ile Lys

245 250 255

Lys Phe Arg Ser Ala Ser Asn Ile Lys Thr His Ala Ile Gly Gly Asp

260 265 270

Leu Ser Arg Phe Asp Pro Phe Gly Gly Ala Thr Ser Ala Asp Gln Pro

275 280 285

Ser Ala Glu Glu Ile Ala Ala Ala Lys Lys Ala Phe Glu Asp Trp Lys

290 295 300

Ala Ser Val Pro Asn Ala Pro Glu Leu Val Asn Phe Ala Asp Ser Asn

305 310 315 320

Pro Leu Thr Gly Ile Trp Glu Leu Cys Ser Asp Arg Thr Gln Lys Ala

325 330 335

Lys Leu Lys Lys His Phe Glu Thr Val Trp Ala Pro Ala Glu Ser Ala

340 345 350

Lys Arg Arg Val His Ala Asp Tyr Ile Asp Glu Ile Ile Ile Gly Ile

355 360 365

Asn Asn Thr Asn Thr Pro Pro Glu Gly Tyr Ile Gly Leu Lys Ser Thr

370 375 380

Lys Asp Glu Asn Leu Asn Ser Lys Gly Asn Ile Cys Leu Phe Met His

385 390 395 400

Lys Ala Lys Tyr Asp Pro Asn Ile Asp Asn Lys Asp Cys Ile Thr Glu

405 410 415

Leu Lys Phe Ile Thr Val Arg Asp Lys Ser Pro Glu Gly Asp Trp Val

420 425 430

Lys Ile Pro Gln Asp Ile Tyr Ile Ser Pro Asn Gln Tyr Leu Tyr Leu

435 440 445

Cys Tyr Leu Pro Ala Lys Tyr Ser Ala Glu Lys Ala Ile Lys Asp Ile

450 455 460

Gln Leu Leu Cys Ser Ser Cys Gly Ser Ser Met Ile Leu Pro Tyr Gly

465 470 475 480

Tyr Asn Asp Val Leu Asp Glu Arg Gly Glu Arg Ala Asn Ala Thr Glu

485 490 495

Asp Asp Asn Val His Tyr Leu Ile Tyr Ser Ala Gly Trp Lys

500 505 510

<210> 99

<211> 433

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 99

cgcagtcgaa gtgatccaga gtaattcttc gggggttcgc cctcccagtg gatatacgaa 60

aattgattac gacctcaata aaggcgccgg tggggattat atctacctgt gttatcataa 120

agcccgttat agcgcttact cagaaaacaa agattgcgtt tctgatttaa ttattattaa 180

gggaaacgga gcacgcgccc cgagcggtta tacgaaaatt gatgtggatt tgaatgagga 240

tgcaggtgga aaatacctgt atttatgcta caagaagcaa agttacgaca atgtggaagc 300

aatcaagggg ctggcggtag ttggtggtga caattcgcat acccctgctc cgtacggtta 360

ccgtcggatt gacaccgatg ttaacgaggg ggccggaggt gagtacattt atatctgtta 420

ctccaaaggg gct 433

<210> 100

<211> 144

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Woodsholea maritima

<400> 100

Ala Val Glu Val Ile Gln Ser Asn Ser Ser Gly Val Arg Pro Pro Ser

1 5 10 15

Gly Tyr Thr Lys Ile Asp Tyr Asp Leu Asn Lys Gly Ala Gly Gly Asp

20 25 30

Tyr Ile Tyr Leu Cys Tyr His Lys Ala Arg Tyr Ser Ala Tyr Ser Glu

35 40 45

Asn Lys Asp Cys Val Ser Asp Leu Ile Ile Ile Lys Gly Asn Gly Ala

50 55 60

Arg Ala Pro Ser Gly Tyr Thr Lys Ile Asp Val Asp Leu Asn Glu Asp

65 70 75 80

Ala Gly Gly Lys Tyr Leu Tyr Leu Cys Tyr Lys Lys Gln Ser Tyr Asp

85 90 95

Asn Val Glu Ala Ile Lys Gly Leu Ala Val Val Gly Gly Asp Asn Ser

100 105 110

His Thr Pro Ala Pro Tyr Gly Tyr Arg Arg Ile Asp Thr Asp Val Asn

115 120 125

Glu Gly Ala Gly Gly Glu Tyr Ile Tyr Ile Cys Tyr Ser Lys Gly Ala

130 135 140

<---

1. Кассета экспрессии для экспрессии полипептида, токсичного для насекомых вида Diabrotica, содержащая промотор, функционально связанный с гетерологичной молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей:

(a) любую из нуклеотидных последовательностей SEQ ID NO: 22, 34, 73, 74 или 75; или

(b) нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид, при этом

аминокислотная последовательность полипептида содержит любую из SEQ ID NO: 55, 67, 86, 87 или 88.

2. Вектор, содержащий кассету экспрессии по п. 1, для экспрессии полипептида, токсичного для насекомых вида Diabrotica.

3. Клетка-хозяин для экспрессии полипептида, токсичного для насекомых вида Diabrotica, которая содержит кассету экспрессии по п. 1.

4. Клетка-хозяин по п. 3, которая представляет собой бактериальную клетку-хозяина или клетку растения.

5. Трансгенное растение маиса, устойчивое к насекомым вида Diabrotica, содержащее молекулу нуклеиновой кислоты, которая придает повышенную устойчивость к насекомым вида Diabrotica, где указанная молекула нуклеиновой кислоты содержит кассету экспрессии по п.1.

6. Трансгенное растение маиса по п. 5, где трансгенное растение маиса содержит второй признак и где второй признак представляет собой устойчивость к насекомым, обеспечиваемую интерферирующей молекулой РНК.

7. Способ борьбы с популяцией вредителя вида Diabrotica, включающий приведение указанной популяции в контакт с эффективным для борьбы с насекомым количеством полипептида с инсектицидной активностью, где полипептид содержит любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 55, 67, 86, 87 или 88.

8. Полипептид, токсичный для насекомых вида Diabrotica, содержащий любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 55, 67, 86, 87 или 88.