Штамм paenibacillus polymyxa всгуту-2 - продуцент экзополисахаридов

Авторы патента:

C12N1/20 - бактерии; питательные среды для них

Владельцы патента RU 2782953:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Восточно-Сибирский государственный университет технологий и управления" (RU)

Изобретение относится к области биотехнологии и касается нового штамма для получения экзополисахаридов биосинтезом. Штамм Paenibacillus polymyxa ВСГУТУ-2, используемый в качестве продуцента экзополисахаридов депонирован под регистрационным номером ВКПМ В-14268. Изобретение позволяет расширить арсенал технических средств для получения экзополисахаридов бактериальным синтезом.

Предлагаемое изобретение относится к области биотехнологии и касается нового штамма для получения экзополисахаридов биосинтезом.

Уровень техники

Известен способ получения экзополисахарида путем культивирования штамма Bacillus polymyxa ВКПМ-3015 (RU 1698293, опубл. 15.12.1991). Экзополисахарид, полученный с помощью известного способа, имеет низкие гелеобразующие свойства.

Известен штамм Paenibacillus polymyxa 92, изолированный с корней пшеницы, который образует 38,4 г/л левана на среде, содержащей 10% сахарозы (Grinev et al., 2020). Известен штамм Paenibacillus polymyxa, обладающий способностью синтезировать экзополисахарид леван, депонирован под регистрационным номером ВКМ В-3504Д (RU 2740710, опубл. 20.01.2021). Известное изобретение обеспечивает повышение выхода целевого продукта. Выход левана при содержании сахарозы 14% - 48 г/л; при содержании мелассы 40% - 68 г/л, что составляет примерно 34% от содержания углеводов в питательной среде.

Технический результат заявляемого изобретения - расширение арсенала технических средств для получения экзополисахаридов бактериальным синтезом.

Указанный технический результат достигается применением в качестве продуцента экзополисахаридов нового штамма бактерий Paenibacillus polymyxa ВСГУТУ-2. Штамм бактерий Paenibacillus polymyxa ВСГУТУ-2 депонирован в Биоресурсном Центре Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (БРЦ ВКПМ) НИЦ «Курчатовский институт» под регистрационным номером ВКПМ: В-14268, дата депонирования 14.07.2022 г.

Штамм выделен из лесной почвы лесополосы г. Гусиноозерск, Селенгинский район, республика Бурятия, Российская Федерация.

Штамм идентифицирован до вида с помощью анализа генов, кодирующих 16S рРНК, и по культурально-морфологическим признакам. По результатам анализа тестируемый штамм наиболее близок к виду Paenibacillus polymyxa (98,63%)

Культурально-морфологические и физиологические характеристики штамма:

На безазотистых средах (Эшби) образует на 2 сутки круглые бесцветные прозрачные с ровными краями колонии, размером 3-5 мм, консистенция -слизистая.

На средах, содержащих азот (МПА), образуют на 2-3 сутки круглые плоские грязно-белого цвета с фестончатыми краями колонии 2-3 мм, при долгом хранении не увеличиваются в размерах.

При микроскопировании тонкие палочки, расположение одиночное либо парное, образуют капсулы и овальные субтерминальные споры.

Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма

Культуру хранят в холодильнике при 4°С на плотной питательной среде Эшби (г/л): маннит/глюкоза/сахароза - 20,0, K₂HPO₄ - 0,2, MgSO₄ - 0,2, NaCl - 0,2, K₂SO₄ - 0,2, СаСО₃ - 5,0, вода; агар 2-3%.

Способ, условия и состав сред для размножения штамма:

Штамм выращивают на жидкой питательной среде Зака, следующего состава (г/л): MgSO₄⋅7H₂O - 0,15; NaCl - 0,15; MnSO₄ - 0,05; FeSO₄ - 0,05; бентонит - 2,0; СаСО₃ - 2,0; Са₃(PO₄)₂ - 1,5; сахароза - 20,0; вода. Культивирование проводят при температуре 28-30°С в течение суток, при постоянном помешивании, N=30 об/мин.

Осуществление изобретения

Культивирование проводят при температуре 28-30°С, в течение 3-х суток, при постоянном помешивании, N=30 об/мин, на питательной среде Зака, состав указан выше. Посевной материал вносят смывом со скошенного агара в количестве 5% от объема питательной среды.

Экзополисахариды осаждают двойным объемом изопропилового спирта, охлажденного до 4°С, выдерживают сутки при той же температуре. Далее центрифугируют, осадок растворяют в дистиллированной воде, заново осаждают. Эту процедуру проводят еще один раз. Затем осажденный экзополисахарид высушивают, количество определяют гравиметрическим методом

Выход экзополисахаридов составляет до 10 г/л, что составляет 50% от количества углеводов в питательной среде.

Штамм Paenibacillus polymyxa ВСГУТУ-2 ВКПМ В-14268 в качестве продуцента экзополисахаридов.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложена композиция среды для получения ботулинического токсина путем культивирования Clostridium botulinum, содержащая картофельный пептон, дрожжевой экстракт, глюкозу и очищенную воду в заданном соотношении.

Композиция для облегчения, предупреждения или лечения заболеваний костей или метаболических заболеваний, содержащая новый штамм lactobacillus sakei cvl-001 и ее культуральную среду // 2782361

Изобретение относится к штамму Lactobacillus sakei CVL-001 и его применению. Предложен штамм Lactobacillus sakei CVL-001, депонированный под номером доступа KCTC13816BP, предназначенный для восстановления минеральной плотности костей у млекопитающего или ингибирования дифференцировки остеокластов.

Штамм бактерий salmonella infantis, используемый в качестве положительного контроля для молекулярно-генетических, а также микробиологических исследований, связанных с определением чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам // 2782213

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой штамм бактерий Salmonella infantis, депонированный во «Всероссийской коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве» под номером ВКШМ-Б-896М, обладающий множественной резистентностью к антимикробным препаратам, а также выявленными генетическими детерминантами устойчивости для микробиологических исследований в качестве контрольного штамма для контроля устойчивости микроорганизмов к ампициллину, амоксициллину, цефотаксиму, ципрофлоксацину, левофлоксацину, стрептомицину, доксициклину, хлорамфениколу, флорфениколу, сульфаметоксазолу, триметоприму и молекулярно-генетических исследований, в качестве контрольного для обнаружения генов резистентности bla CTX-M-14, gyrA (p.S83Y), qnrE, tetA/R, tetB, aadA2, strA/strB, aac(6')-Ib3, floR, sull, sul2, dfrA, кодирующих устойчивость к данным противомикробным препаратам.

Синбиотическое средство для повышения колонизационного потенциала нормофлоры желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота // 2782031

Группа изобретений относится к области ветеринарной медицины, в частности к синбиотическому средству для повышения колонизационного потенциала нормофлоры желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота и способу его получения. Синбиотическое средство состоит из консорциума микроорганизмов и дополнительно содержит в качестве штаммов-продуцентов депонированные паспортизированные культуры микроорганизмов Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и Enterococcus faecium УДС 86, ресуспендированные фосфатным буфером, раствор деминерализованной молочной сыворотки, лактулозу и цеолит.

Способ определения чувствительности бактерий к антисептическим средствам в растворе // 2781985

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ определения чувствительности бактерий к антисептическим средствам в растворе, включающий подготовку взвеси культуры микроорганизма, выделенного и идентифицированного из клинического материала пациента или из окружающей среды, с разведением 1,5×105; пробирку с 0,1 мл микробной взвеси ставят в водяную баню-термостат при 32°С, вносят в нее 0,9 мл антисептического средства, перемешивают и оставляют в этих условиях на время, указанное производителем препарата антисептика в инструкции, с последующим добавлением 0,5 мл нейтрализатора; затем 0,1 мл полученной смеси высевают на твердую питательную среду и проводят подсчет числа колоний.

Препарат бактериальный для деградации диоксинов, очистки почвы и воды от стойких химических фенольных и хлорароматических соединений // 2781560

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен препарат бактериальный для деградации диоксинов, очистки почвы и воды от стойких химических фенольных и хлорароматических соединений, представляющий собой ассоциацию штаммов бактерий Bacillus subtilis VKM B-3613D, Rhodococcus erythtropolis VКМ Ac-2920D, Pseudomonas putida VКМ В-3612D.

Средство для блокирования эффектов липотейхоевых кислот - агонистов толл-подобного рецептора 2 // 2781012

Изобретение относится к биотехнологии, фармакологии и медицине. Применение липополисахарида, продуцируемого штаммом фототрофной бактерии Rhodobacter capsulatus PG ВКМ ИБФМ РАН В-2381Д, в качестве нетоксичного блокирующего фактора, защищающего от эффектов липотейхоевых кислот - агонистов Толл-подобного рецептора 2.

Способы и соответствующие композиции для изготовления продуктов питания и кормов // 2780586

Настоящее изобретение относится к способу улучшения питательного профиля насекомого путем доставки эффективного количества бактерий, продуцирующих метионин, насекомому, причем насекомое пребывает на стадии развития личинки. 5 з.п.

Способ защиты сельскохозяйственных растений // 2780226

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ защиты и удобрения сельскохозяйственных растений, заключающийся в их последовательной обработке в период вегетации составами со следующим набором микроорганизмов: Azotobacter chroococcum, Bacillus mucilaginosus или Bacillus megaterium, Trichoderma viride, Pseudomonas fluorescens, Beauveria bassiana, Metarhizium anisoplias, Streptomyces sp., Bacillus thuringiensis, Bacillus subtilis.

Способ отбора потенциальных пробиотиков, эффективных против staphylococcus aureus // 2780208

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ отбора потенциальных пробиотиков, эффективных против Staphylococcus aureus, включает в себя использование модицифированных метода реплик и метода отсроченного антагонизма, а именно высев материала, полученного стерильными зонд-тампонами из носовых ходов здоровых доноров на несколько различных питательных сред, например на кровяной агар, BHI агар, TS агар, коринебактагар, MRS агар, LM17 агар с культивированием при различных условиях (температура, аэробные, микроаэрофильные и анаэробные условия), с последующим переносом выросших колоний с помощью стерильной фильтровальной бумаги на свежие чашки Петри с теми же средами, залитыми слоем полужидкого (0,7%) агара, содержащим культуру индикаторного Staphylococcus aureus и поддерживающим рост штаммов - потенциальных пробиотиков, или же, при использовании метода отсроченного антагонизма, чашки Петри с указанными средами засеваются материалом от доноров, покрываются полужидким агаром, инкубируются в соответствующих условиях, после чего перегружаются слоем полужидкого агара, содержащим индикаторную культуру Staphylococcus aureus с последующей повторной инкубацией и отбором штаммов - потенциальных пробиотиков по их способности подавлять рост Staphylococcus aureus вокруг их колоний.