Фармацевтическая композиция, упаковка и способ ее получения

Авторы патента:

A61K38/47 - действующие на гликозидные компоненты (3.2), например целлюлазы, лактазы

Владельцы патента RU 2788173:

СЕЙКАГАКУ КОРПОРЕЙШН (JP)

Изобретение относится к области фармацевтики, а именно к способу получения фармацевтической композиции в контейнере для лечения межпозвоночной грыжи. Способ получения фармацевтической композиции в контейнере для лечения межпозвоночной грыжи, включающий этап помещения раствора, содержащего не менее 2,5 мкг и не более 5 мкг хондроитиназы ABC и вспомогательного вещества, в контейнер и этап лиофилизации раствора, так чтобы можно было обеспечить стандартную дозу фармацевтической композиции. Вышеуказанное изобретение позволяет получить фармацевтическую композицию, обладающую стабильностью при хранении. 4 з.п. ф-лы, 1 табл., 4 пр.

Область техники, к которой относится изобретение

[0001] Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, которая в качестве активного ингредиента содержит разрушающий сахарид фермент, к упаковке, содержащей композицию, содержащуюся в контейнере, и к способу ее получения.

Уровень техники изобретения

[0002] Фармацевтические композиции, которые в качестве активных ингредиентов содержат разрушающие сахариды ферменты, используют для разных заболеваний. Например, фармацевтические композиции для лечения лизосомной болезни, такие как альдуразим^®, элапраза^®, наглазим^®, реплагал^® и вимизим^®, в которых активными ингредиентами являются разрушающие сахариды ферменты от приблизительно 3 мг/флакон до приблизительно 10 мг/флакон, продаются как жидкие препараты для инъекций. Также, в международной публикации № WO 2012/081227, например, описано терапевтическое средство для межпозвонковой грыжи, содержащее в качестве активного ингредиента разрушающий сахарид фермент (конкретно хондроитиназу ABC).

Сущность настоящего изобретения

[0003] Лиофилизированные препараты превосходят жидкие препараты с точки зрения сокращения стоимости реализации. С другой стороны, из-за лиофилизации титры фермента часто значительно снижаются и даже более того, когда фермент присутствует в следовых количествах, и по этой причине в производство лиофилизированных препаратов были внедрены некоторые идеи, чтобы обеспечить получение продуктов с нужной ферментативной активностью. Например, в примерах международной публикации № WO 2012/081227 описан пример, в котором учитывая резкое снижение титра, обусловленное лиофилизацией, лиофилизированный препарат получают путем лиофилизации после помещения в контейнер фермента с большим превышением количества единиц, необходимых для разовой дозы. Как описано в этой публикации, после растворения и разведения полученного лиофилизированного препарата его отделяют в количестве, необходимом для введения, с целью получения вводимого раствора, содержащего активный компонент в количестве, необходимом для разовой дозы.

[0004] В способе, в котором сперва получают лиофилизированный препарат в количестве, значительно превышающем стандартную дозу, а затем часть отделяют в качестве разовой дозы, большое остающееся количество фермента, который не используют для введения, выбрасывают. Даже были случаи, когда впустую расходовали большие остающиеся количества дорогого фермента.

[0005] Вследствие этого, одной целью одного аспекта настоящего изобретения является предоставление фармацевтической композиции, содержащей в качестве активного ингредиента разрушающий сахарид фермент, причем предотвращается снижение титра, обусловленное получением посредством лиофилизации.

[0006] В результате интенсивных исследований автора настоящего изобретения в свете упомянутой выше проблемы было найдено средство для предоставления фармацевтической композиции, содержащей разрушающий сахарид фермент с предотвращением снижения титра перед и после лиофилизации, и, таким образом, было совершено настоящее изобретение.

[0007] Один аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, которая представляет собой готовую форму со стандартной дозой, содержащей в качестве активного ингредиента лиофилизированный разрушающий сахарид фермент с титром не менее 0,3 единицы/мкг, и содержащей фермент в количестве не менее 2 мкг и не более 8 мкг.

[0008] Другой аспект настоящего изобретения относится к способу получения упаковки, содержащей фармацевтическую композицию и контейнер, содержащий фармацевтическую композицию, причем способ включает в себя этап помещения в контейнер раствора, содержащего не менее 2 мкг и не более 8 мкг разрушающего сахарид фермента, и этап лиофилизации раствора, так чтобы можно было обеспечить стандартную дозу фармацевтической композиции.

Описание вариантов осуществления

[0009] Согласно одному аспекту настоящего изобретения можно обеспечить фармацевтическую композицию, содержащую лиофилизированный разрушающий сахарид фермент, в которой существенно подавлено снижение титра при лиофилизации.

[0010] Далее настоящее изобретение будет подробно описано с пониманием, что настоящее изобретение не ограничено описанными вариантами осуществления. В рамках настоящего изобретения термин «этап» относится не только к независимому этапу, но также включает в себя любой этап, который нельзя четко отличить от других этапов при достижении первоначальной цели этапа. Если не указано иное, когда в композиции имеется множество веществ, соответствующих каждому компоненту, содержание каждого компонента в композиции означает общее содержание множества веществ в композиции.

[0011] (1) Фармацевтическая композиция и упаковка

Фармацевтическая композиция представляет собой лиофилизированный препарат, содержащий в качестве активного ингредиента разрушающий сахарид фермент. Фармацевтическая композиция представляет собой готовую форму со стандартной дозой, содержащей в качестве активного ингредиента лиофилизированный разрушающий сахарид фермент с титром не менее 0,3 единицы/мкг и содержащей разрушающий сахарид фермент в количестве не менее 2 мкг и не более 8 мкг. В рамках настоящего изобретения «стандартная доза» означает необходимое количество, полученное для разового введения, причем готовую форму со стандартной дозой составляют с фармацевтической композицией в виде стандартной дозы. Стандартная доза может содержать в дополнение к эффективной дозе добавленное количество, необходимое для получения раствора с разовой дозой.

[0012] В этой фармацевтической композиции значительно уменьшено снижение титра разрушающего сахарид фермента из-за лиофилизации. Снижение титра вследствие хранения также значительно уменьшено. Кроме того, поскольку фармацевтическая композиция представляет собой лиофилизированный препарат, который заранее получают для каждой стандартной дозы, она также является превосходной с точки зрения удобства, гигиены, безопасности и т.д. В медицинском заведении.

[0013] Упаковка содержит по меньшей мере контейнер и фармацевтическую композицию, содержащуюся в контейнере, и, вследствие этого, имеет фармацевтическую композицию, содержащуюся в контейнере.

[0014] «Разрушающий сахарид фермент» специально не ограничен, при условии, что его можно применять в качестве лекарственного средства. Примеры разрушающих сахариды ферментов могут включать в себя, например, разрушающие гликозаминогликан ферменты; гликозидазу; пептиды: N-гликаназу (PNGaseF, эндогликозидазу H и т.д.), α-L-идуронидазу, α-галактозидазу, β-галактозидазу, β-глюкуронидазу, β-глюкоцереброзидазу, идурсульфазу, идуронат-2-сульфатазу, N-ацетилгалактозамин-6-сульфатазу, N-ацетилгалактозамин-4-сульфатазу и т.д. Примеры разрушающие гликозаминогликан ферментов включают в себя, например, кератаназы, такие как кератаназа I и кератаназа II; гепариназы, такие как гепариназа I, гепариназа II и гепариназа III; гепаритиназы, такие как гепаритиназа IV, гепаритиназа В, гепаритиназа T-I, гепаритиназа T-II, гепаритиназа T-III и гепаритиназа T-IV; хондроитиназы, такие как хондроитиназа ABC, хондроитиназа ACI, хондроитиназа ACII, хондроитиназа ACIII, хондроитиназа B и хондроитиназа C; гиалуронидазы, такие как гиалуронидаза, полученная из Actinomycetes, и гиалуронидаза, полученная из Streptococcus, и т.д. Примеры гликозидаз включают в себя, например, микробную β-галактозидазу, α-галактозидазу и т.д.

[0015] В одном варианте осуществления разрушающий гликозаминогликан фермент используют в качестве разрушающего сахарид фермента. Разрушающие гликозаминогликан ферменты включают в себя гиалуронидазы, хондроитиназы, гепариназы, кератаназы, гепараназы, гепаритиназы и т.д. Предпочтительными разрушающими сахариды ферментами являются хондроитиназы, среди которых хондроитиназа ABC, хондроитиназа B, хондроитиназа ACI и хондроитиназа ACII являются более предпочтительными, а хондроитиназа ABC является особенно предпочтительной. Хондроитиназа ABC также может представлять собой кондолиаза.

[0016] Нет отдельных ограничений источника разрушающего сахарид фермента. В одном предпочтительном варианте осуществления используют микробный разрушающий сахарид фермент. Например, неограничивающие примеры микроорганизмов включают в себя тех, что относятся к Bacillus, Escherichia, Pseudomonas, Flavobacterium, Proteus, Arthrobacter, Streptococcus, Bacteroides, Aspergillus, Elizabethkingia, Streptomyces и т.д. Когда разрушающим сахарид ферментом является, например, хондроитиназа ABC, примером может быть хондроитиназа, полученная из Proteus vulgaris (например, хондроитиназа ABC из Proteus vulgaris).

[0017] Способ получения разрушающего сахарид фермента и т.д. отдельно не ограничен. Иллюстративный способ получения разрушающего сахарид фермента включает в себя этап получения культуры микроорганизмов или клеток животных, которые продуцируют разрушающий сахарид фермент, и этап получения разрушающего сахарид фермента из культивируемого продукта.

[0018] Разрушающий сахарид фермент, продуцируемый микроорганизмами, может представлять собой исходный продукт микроорганизмов, или он может быть получен после модификации микроорганизмов методом генной инженерии и т.д., который описан ниже, для получения целевого фермента. Например, когда разрушающим сахарид ферментом является хондроитиназа ABC, ее можно получить путем культивирования таких микроорганизмов, как Proteus vulgaris, или ее можно получить методом генной инженерии с использованием ДНК, кодирующей хондроитиназу ABC, и т.д. Разрушающий сахарид фермент может иметь такую же аминокислотную последовательность, как исходное продукт микроорганизма, но альтернативно он может иметь делецию, замену и/или добавление и т.д. Некоторых аминокислот при условии, что все-таки достигнута намеченная цель лекарственного средства.

[0019] Примеры микроорганизмов могут включать в себя, например, микроорганизмы, относящиеся к Bacillus, Escherichia, Pseudomonas, Flavobacterium, Proteus, Arthrobacter, Streptococcus, Bacteroides, Aspergillus, Elizabethkingia и Streptomyces. Условия выращивания (например, культуральная среда, условия культивирования и т.д.) микроорганизмов специалист в данной области может устанавливать по необходимости, выбирая соответствующим образом согласно используемому микроорганизму. Используя микроорганизмы для получения разрушающего сахарид фермента, можно получать большие количества с более низкой стоимостью, чем при получении разрушающего сахарид фермента с использованием клеток животных.

[0020] Способ получения разрушающего сахарид фермента может включать в себя этап встраивания в хозяина рекомбинантного вектора, который экспрессирует ген, кодирующий целевой разрушающий сахарид фермент. Используемым вектором может быть, например, подходящий вектор экспрессии (фаговый вектор, плазмидный вектор и тому подобное) (предпочтительно содержащий регуляторную последовательность, такую как промотер), который способен экспрессировать встроенный ген. Вектор выбирают соответствующим образом для клеток-хозяев. Более конкретно, примеры этих векторных систем хозяев включают в себя комбинации Escherichia coli (E. coli) с векторами экспрессии прокариотических клеток, такими как pET Series, pTrcHis, pGEX, pTrc99, pKK233-2, pEZZ18, pBAD, pRSET и pSE420; или комбинации клеток млекопитающих, таких как клетки COS-7 или клетки HEK293 с векторами экспрессии клеток млекопитающих, такими как pCMV Series, pME18S Series или pSVL; а также клетки насекомых, дрожжи и клетки-хозяева Bacillus subtilis и т.д. и их различные соответствующие векторы.

[0021] Также, в качестве описанных выше векторов можно использовать векторы, которые сконструированы таким образом, чтобы экспрессировать белки слияния белков, закодированных перенесенными генами, с маркерными пептидами или сигнальными пептидами. Примеры таких пептидов включают в себя, например, белок A, инсулиновую сигнальную последовательность, His, FLAG, CBP (связывающий калмодулин белок), GST (глутатион-S-трансферазу) и т.д. Независимо от используемого вектора можно использовать обычный способ лечения рестрикционными ферментами и т.д., которые обеспечивают последующее связывание вставки последовательности нуклеиновых кислот и вектора, причем связывание происходит после затупления или липкими концами, по необходимости.

[0022] Трансформацию хоязина вектором можно осуществлять обычным способом. Например, вектор может быть внедрен в хозяина для трансформации с помощью способа с использованием коммерчески доступного реагента для трансфекции или с помощью способа с использованием диэтиламиноэтилдекстрана, методом электропорации или методом с использованием генной пушки и т.д.

[0023] Условия выращивания (культуральная среда, условия культивирования и т.д.) для клеток микроорганизмов или животных, которые продуцируют разрушающий сахарид фермент, соответствующим образом выбирают для используемых микроорганизмов или клеток. В случае использования E. coli в качестве главного компонента можно использовать, например, культуральную среду, подготовленную надлежащим образом со средой Лурия-Бертани, и т.д. Также, например, при использовании в качестве клеток-хозяев клеток COS-7 для культивирования в условиях 37°C можно использовать среду DMEM, содержащую приблизительно 2% (о/о) фетальной бычьей сыворотки.

[0024] Разрушающий сахарид фермент можно получать из выращенного продукта с помощью известных способов экстракции и очистки белков, в зависимости от формы получаемого разрушающего сахарид фермента. Например, когда разрушающий сахарид фермент получают в растворимой форме, секретируемой в среду (культуральный супернатант), среду можно собирать и использовать прямо в качестве разрушающего сахарид фермента. Когда разрушающий сахарид фермент получают в растворимой форме, секретируемой в цитоплазму, или в нерастворимой (связанной с мембраной) форме, его можно экстрактировать с помощью такого метода обработки, как экстракция путем разрушения клеток, такого как метод с использованием устройства кавитации в азоте, гомогенизация, метод размалывания стеклянными шариками, обработка ультразвуком, метод осмотического шока или метод замораживания-оттаивания или экстракция поверхностно-активными веществами, или комбинация этих способов. Разрушающий сахарид фермент также можно очищать с помощью обычных и широко известных методов предшествующего уровня техники, таких как высаливание, фракционирование сульфатом аммония, центробежное разделение, диализ, ультрафильтрация, адсорбционная хроматография, ионообменная хроматография, гидрофобная хроматография, обращенно-фазовая хроматография, гельпроникающая хроматография, аффинная хроматография или электрофорез или комбинация этих методов, и т.д.

[0025] Разрушающий сахарид фермент можно использовать отдельно или в виде комбинации двух или более разных типов. Разрушающий сахарид фермент также может иметь добавку в виде химически модифицированных групп, которые являются широко известными в предшествующем уровне техники, например, путем ацетилирования, полиалкиленового гликирования (например, полиэтиленового гликирования), алкилирования, ацилирования, биотинилирования, мечения (например, мечения флуоресцентым веществом, люминисцентным веществом и т.д.), фосфорилирования или сульфатации.

[0026] Фармацевтическая композиция может содержать фармацевтически приемлемый носитель. В рамках настоящего изобретения «фармацевтически приемлемый носитель», как правило, представляет собой компонент, обычно используемый в лекарствах, например, обычно используемое вспомогательное вещество, связующее вещество, буферное средство, вода для инъекций, регулирующее тоничность средство, консервант или успокаивающее средство.

[0027] Примеры буферных средств включают в себя, например, буферные средства, содержащие одно или несколько из соляной кислоты, гидроксида натрия, карбоната натрия, бикарбоната натрия, фосфорной кислоты, дигидрофосфата калия, гидроортофосфата калия, дигидрофосфата натрия, гидроортофосфата натрия, аминоуксусной кислоты, бензоата натрия, лимонной кислоты, цитрата натрия, уксусной кислоты, ацетата натрия, винной кислоты, тартрата натрия, молочной кислоты, лактата натрия, этаноламина, аргинина, этилендиамина и т.д., причем предпочтительными являются дигидрофосфат натрия и гидроортофосфат натрия.

[0028] Примеры регулирующих тоничность средств включают в себя хлорид натрия, хлорид калия, глицерин, маннитол, сорбитол, борную ксилоту, боракс, глюкозу, пропиленгликоль и т.д.

[0029] Например, конкретные примеры других фармацевтически приемлемых носителей включают в себя декстраны, сахарозу, лактозу, мальтозу, ксилозу, трегалозу, маннит, ксилит, сорбит, инозит, сывороточный альбумин, желатин, креатинин, полиалкиленгликоль, неионные поверхностно-активные вещества (например, полиоксиэтиленовый эфир сорбитола и жирной кислоты, полиоксиэтиленовое гидрогенизированное касторовое масло, эфир сахарозы и жирной кислоты и полиоксиэтилен-полиоксипропиленгликоль), и т.д. Среди которых предпочтительной является сахароза и/или полиалкиленгликоль, а более предпочтительными являются сахароза и/или полиэтиленгликоль. Полиэтиленгликоль предпочтительно имеет среднюю молекулярную массу не менее 200 и не более 25000, а более предпочтительно он является твердым при обычной температуре, например, со средней молекулярной массой не менее 2000 и не более 9000, и еще более предпочтительно не менее 3000 и не более 4000. Примеры полиэтиленгликоля могут включать в себя, например, полиэтиленгликоль со средней молекулярной массой 3250, 3350 и 4000. Когда в качестве фармацевтически приемлемого носителя используют смесь полиэтиленгликоля и сахарозы, их предпочтительно смешивают таким образом, чтобы массовое соотношение полиэтиленгликоля/сахарозы обычно находилось в диапазоне от 1/10 до 10/1, а более предпочтительно таким образом, чтобы массовое соотношение полиэтиленгликоля/сахарозы приблизительно было 2/1.

[0030] В рамках настоящего изобретения «контейнер» отдельно не ограничен при условии, что он способен содержать фармацевтическую композицию. Примеры контейнеров включают в себя шприцы, флаконы, ампулы, инъекторы и т.д., причем предпочтительными являются флаконы. Материалом контейнера может быть, например, стекло, пластмасса и т.д., причем предпочтительным является стекло. Стекло представляет собой, например, боросиликатное стекло, известково-натриевое стекло и т.д. Контейнер предпочтительно также имеет закупоривающий элемент или крышку, а более предпочтительно он имеет резиновую пробку. Нет особых ограничений размера контейнера, который может быть не менее 0,5 мл и не более 100 мл, например, предпочтительно не менее 1 мл и не более 10 мл, более предпочтительно не менее 2 мл и не более 4 мл, и еще более предпочтительно 3 мл. Упаковка, содержащая фармацевтическую композицию, содержащуюся в контейнере, может заключать в себе инертный газ, например, газообразный азот или газообразный аргон, или она может быть деаэрирована.

[0031] Содержание воды лиофилизированного препарата может составлять не более 5% (м/м), например, предпочтительно не более 3% (м/м), и более предпочтительно не более 2% (м/м). «Содержание воды» в рамках настоящего изобретения представляет собой значение, измеряемое методом кулонометрического титрования.

[0032] Настоящее изобретение отличается тем, что количество разрушающего сахарид фермента на стандартную дозу фармацевтической композиции составляет не менее 2 мкг и не более 8 мкг. Хотя меньшее количество фермента обычно соответствует более заметному снижению титра перед и после лиофилизации, авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что ограничение количества разрушающего сахарид фермента на стандартную дозу фармацевтической композиции до диапазона не менее 2 мкг и не более 8 мкг может значительно подавлять снижение титра перед и после лиофилизации. В предпочтительном варианте осуществления с точки зрения эффекта подавления снижения титра перед и после лиофилизации, количество разрушающего сахарид фермента на стандартную дозу фармацевтической композиции составляет не менее 2 мкг и не более 7 мкг, не менее 2 мкг и не более 6 мкг или не менее 2,5 мкг и не более 6 мкг. В более предпочтительном варианте осуществления количество разрушающего сахарид фермента на стандартную дозу фармацевтической композиции составляет не менее 2 мкг и не более 5 мкг или не менее 2,5 мкг и не более 5 мкг. В конкретном предпочтительном варианте осуществления количество разрушающего сахарид фермента на стандартную дозу фармацевтической композиции составляет не менее 3 мкг и не более 5 мкг.

[0033] В предпочтительном варианте осуществления количество разрушающего сахарид фермента, содержащегося в контейнере, составляет не менее 2 мкг и не более 8 мкг. В более предпочтительном варианте осуществления количество разрушающего сахарид фермента, содержащегося в контейнере, составляет не менее 2 мкг и не более 7 мкг, не менее 2 мкг и не более 6 мкг или не менее 2,5 мкг и не более 6 мкг. В еще более предпочтительном варианте осуществления количество разрушающего сахарид фермента, содержащегося в контейнере, составляет не менее 2 мкг и не более 5 мкг или не менее 2,5 мкг и не более 5 мкг. В конкретном предпочтительном варианте осуществления количество разрушающего сахарид фермента, содержащегося в контейнере, составляет не менее 3 мкг и не более 5 мкг.

[0034] Термин «титр» означает ферментативную активность (единицы) на 1 мкг разрушающего сахарид фермента, и выражен в единицах в виде единицы/мкг. В настоящем изобретении титр лиофилизированного разрушающего сахарид фермента составляет не менее 0,3 (единицы/мкг). В одном варианте осуществления титр лиофилизированного разрушающего сахарид фермента составляет не менее 0,3 (единицы/мкг) и не более 1 (единицы/мкг). В другом варианте осуществления титр лиофилизированного разрушающего сахарид фермента составляет не менее 0,32 (единицы/мкг) и не более 1 (единицы/мкг). В более предпочтительном другом варианте осуществления титр лиофилизированного разрушающего сахарид фермента составляет не менее 0,34 (единицы/мкг) и не более 1 (единицы/мкг). В еще более предпочтительном другом варианте осуществления титр лиофилизированного разрушающего сахарид фермента составляет не менее 0,36 (единицы/мкг) и не более 1 (единицы/мкг). В конкретном предпочтительном другом варианте осуществления титр лиофилизированного разрушающего сахарид фермента составляет не менее 0,38 (единицы/мкг) и не более 1 (единицы/мкг).

[0035] В одном варианте осуществления титр лиофилизированного разрушающего сахарид фермента составляет не менее 0,3 (единицы/мкг) и не более 0,5 (единицы/мкг). В другом варианте осуществления титр лиофилизированного разрушающего сахарид фермента составляет не менее 0,36 (единицы/мкг) и не более 0,5 (единицы/мкг).

[0036] «Единица (U)» показывает активность разрушающего сахарид фермента, причем 1 ед представляет количество, которое освобождает эквивалент 1 микромоля продукта распада от субстрата за единицу времени, в условиях оптимальной температуры и оптимального pH. Например, когда разрушающим сахарид ферментом является хондроитиназа ABC, 1 единица представляет количество, которое освобождает 1 микромоль ненасыщенного дисахарида в минуту от хондроитинсульфата натрия (хондроитинсульфат натрия, соответствующего Japanese Pharmaceutical Codex 2002), в условиях pH 8,0, 37°C.

[0037] В одном варианте осуществления ферментативная активность (активность разрушающих сахарид ферментов) на стандартную дозу составляет, например, не менее 4 единиц. В другом варианте осуществления ферментативная активность на стандартную дозу составляет, например, не менее 0,1 единицы и не более 4 единиц. В предпочтительном варианте осуществления ферментативная активность на стандартную дозу составляет не менее 0,5 единицы и не более 3 единиц. В более предпочтительном варианте осуществления ферментативная активность на стандартную дозу составляет не менее 0,9 единицы и не более 3 единиц, или не менее 0,9 единицы и не более 2,5 единиц. В еще одном предпочтительном варианте осуществления ферментативная активность на стандартную дозу составляет не менее 0,9 единицы и не более 2 единиц, не менее 1,25 единицы и не более 2 единиц, или 1,5 единицы.

[0038] В одном варианте осуществления ферментативная активность на контейнер составляет, например, не более 4 единиц. В другом варианте осуществления ферментативная активность на контейнер составляет, например, не менее 0,1 единицы и не более 4 единиц. В предпочтительном варианте осуществления ферментативная активность на контейнер составляет не менее 0,5 единицы и не более 3 единиц. В более предпочтительном варианте осуществления ферментативная активность на контейнер составляет не менее 0,9 единицы и не более 3 единиц, или не менее 0,9 единицы и не более 2,5 единиц. В еще одном предпочтительном варианте осуществления ферментативная активность на контейнер составляет не менее 0,9 единицы и не более 2 единиц, или не менее 1,25 единицы и не более 2 единиц (например, 1,5 единицы).

[0039] Согласно настоящему изобретению предоставлена фармацевтическая композиция в виде готовой формы с лиофилизированной стандартной дозой, содержащей небольшое количество разрушающего сахарид фермента (не менее 2 мкг и не более 8 мкг) с высоким титром (не менее 0,3 единицы/мкг).

[0040] Ферментативная активность разрушающего сахарид фермента, содержащегося в фармацевтической композиции в виде лиофилизированного препарата, может составлять, например, не менее 75%, предпочтительно не менее 80%, более предпочтительно не менее 85%, и еще более предпочтительно не менее 90%, причем ферментативная активность перед лиофилизацией определяется, как 100%. Значение 100% означает, что ферментативная активность является одинаковой перед и после лиофилизации.

[0041] Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения можно обеспечить фармацевтическую композицию, обладающую стабильностью при хранении, например, в течение 12 месяцев или более. В предпочтительном варианте осуществления фармацевтическая композиция обладает стабильностью при хранении в течение 24 месяцев или более, и в более предпочтительном варианте осуществления фармацевтическая композиция обладает стабильностью при хранении в течение 36 месяцев или более. Хотя верхний предел стабильности при хранении отдельно не ограничен, он может составлять, например, 48 месяцев или менее (например, 36 месяцев или менее).

[0042] В данном случае фраза «обладает стабильностью при хранении» означает, что титр (%) после защищенного от света хранения в предписанных условиях (например, 12 месяцев или более при 5°C±3°C, 6 месяцев или более при 25°C±2°C, или 3 месяца или более или 6 месяцев или более при 40°C±2°C) сохраняется на фармацевтически приемлемом уровне. «Стабильность при хранении» в данном документе оценивают, например, по норме сохранения титра (%). Например, норма сохранения титра после защищенного от света хранения образца в течение 12 месяцев или более при 5°C±3°C составляет, например, не менее 90%, и предпочтительно не менее 95%. Норма сохранения титра после защищенного от света хранения образца в течение 24 месяцев или более при 5°C±3°C составляет, например, не менее 90%, и предпочтительно не менее 95%. Норма сохранения титра после защищенного от света хранения образца в течение 36 месяцев или более при 5°C±3°C составляет, например, не менее 90%, и предпочтительно не менее 95%. Норма сохранения титра после защищенного от света хранения образца в течение 6 месяцев или более при 25°C±2°C составляет, например, не менее 90%, и предпочтительно не менее 95%. Норма сохранения титра после защищенного от света хранения образца в течение 3 месяцев или более при 40°C±2°C составляет, например, не менее 90%, и предпочтительно не менее 95%. Норма сохранения титра после хранения образца в течение 6 месяцев или более при 40°C±2°C составляет, например, не менее 65%, предпочтительно не менее 70%, и более предпочтительно не менее 75%. Термин «норма сохранения титра (%)» означает значение титра (%) после защищенного от света хранения фармацевтической композиции или упаковки согласно настоящему изобретению в условиях предписанной температуры (5°C±3°C, 25°C±2°C или 40°C±2°C), рассчитанное относительно 100% титра в начале хранения. Значение 100% означает, что ферментативная активность является одинаковой при и после начала хранения.

[0043] Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения можно обеспечить фармацевтическую композицию, обладающую сроком годности 12 месяцев или более. В предпочтительном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет срок годности 24 месяца или более, и в более предпочтительном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет срок годности 36 месяца или более. Хотя верхний предел срока годности отдельно не ограничен, он может составлять, например, 48 месяцев или менее (например, 36 месяцев или менее).

[0044] В рамках настоящего изобретения «срок годности» означает период, в течение которого можно ожидать, что лекарственное средство будет иметь такую же эффективность с того момента, когда было подтверждено, что лекарственное средство обладает этой эффективностью, после последующего хранения с помощью определенного метода хранения (например, с защитой от света при 5°C±3°C, защитой от света при 25°C±2°C или защитой от света при 40°C±2°C).

[0045] Ссылки на фармацевтическую композицию в данном документе могут включать в себя «фармацевтические композиции, содержащиеся в контейнере». Фармацевтическая композиция, содержащаяся в контейнере, содержит стандартную дозу разрушающего сахарид фермента.

[0046] Использование фармацевтической композиции, которая описана в данном документе, можно выбрать из разных известных вариантов использования разрушающих сахариды ферментов. Например, примеры вариантов использования фармацевтических композиций, содержащих в качестве активных ингредиентов разрушающие сахариды ферменты, могут включать в себя, но без конкретного ограничения, лечение грыжи, лизосомной болезни, келоидных рубцов, гипертрофических рубцов, мышечной дистрофии и повреждений спинного мозга. В предпочтительном варианте осуществления фармацевтическую композицию используют для лечения грыжи. В более предпочтительном варианте осуществления ее используют для лечения межпозвонковой грыжи (например, поясничной межпозвонковой грыжи).

[0047] В рамках настоящего изобретения «лечение» включает в себя не только полное исцеление, но также уменьшение проявления всех или некоторых симптомов заболевания, и подавление (включая сохранение и замедленное прогрессирование) прогрессирования или предотвращение заболевания. В данном случае предотвращение включает в себя предотвращение возникновения симптомов, связанных с заболеванием, когда симптомы не проявляются. Предотвращение также включает в себя, например, предотвращение возникновения органических нарушений или подавление развития еще не проявившихся симптомов, когда симптомы, связанные с заболеванием, присутствуют, даже если не наблюдается явных органических поражений.

[0048] Термины «в качестве активного ингредиента» и «эффективная доза» в рамках настоящего изобретения означают количество ингредиента, подходящее для разумного соотношения риск/польза и достаточное для получения нужного ответа без чрезмерных вредных побочных эффектов (токсичность, раздражение и т.д.). Термины «в качестве активного ингредиента» и «эффективная доза» могут меняться в зависимости от различных факторов, таких как симптомы, физическая конституция, возраст и пол пациента, подлежащего лечению. Однако специалист в данной области может определить эффективную дозу на основе результатов одного или более конкретных примеров испытаний в сочетании с общедоступной общей технической информацией, без необходимости проведения отдельного теста для каждой комбинации разных факторов.

[0049] В рамках настоящего изобретения «пациент» означает животное, и предпочтительно млекопитающее (например, человека, мышь, крысу, хомяка, морскую свинку, кролика, собаку, кошку, лошадь и т.д.), а более предпочтительно человека.

[0050] В предпочтительном варианте осуществления фармацевтическая композиция, содержащаяся в контейнере, предоставлена в стерильном состоянии. Нет особых ограничений способа стерилизации фармацевтической композиции, и стерилизацию можно осуществлять любым способом, известным в предшествующем уровне техники, таким как стерилизация фильтрацией или стерилизация сухим жаром.

[0051] Форма введения фармацевтической композиции также отдельно не ограничена, и ее можно выбрать соответствующим образом по подлежащему лечению заболеванию, симптомам, тяжести, характеристикам пациента (например, возрасту и т.д.) и т.д. лиофилизированный препарат можно использовать в качестве раствора в любом нужном растворителе (например, в воде для инъекций, физиологическом солевом растворе и т.д.). Формой введения может быть любой путь введения, например, такой как внутридисковая инъекция, внутривенная инъекция, внутримышечная инъекция, подкожная инъекция или капельное введение. Доза фармацевтической композиции также может быть надлежащим образом установлена специалистом в данной области в зависимости от заболевания, подлежащего лечению, симптомов, тяжести, характеристик пациента (например, возраста и т.д.) и т.д.

[0052] Далее предпочтительные конкретные режимы настоящего изобретения будут описаны в качестве примера, с пониманием, что они не предназначены для ограничения технического объема настоящего изобретения. Фармацевтическая композиция для лечения межпозвонковой грыжи может быть объяснена в качестве примера следующим образом. Но естественно, что использование фармацевтических композиций не может быть ограничено.

[0053] (Фармацевтическая композиция 1)