Способ получения цитохрома с
ОЛИСАНИ Е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик ф в
Зависимое от авт. свидетельства М
М. Кл. А 61k 17/00
Заявлено 29Х.1970 (№ 1443056/31-16) с присоединением заявки №
Приоритет
Опуоликовано 21.1Х.1972. Бюллетень ¹ 28
Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров
СССР
УДК 615.45:615.779.94 (088.8) Дата опубликования описания 11.Х.1972
Авторы изобретения H. Д. Сидорова, В. К. Хотянович, В, Л. Константинов, С. С. Тугунов, Л. И. Дубровская, Э. Ф. Деркачев, С. E. Манойлов, Л. Г. Богомолова и И. Г. Андрианова
Заявитель
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЦИТОХРОМА С
Предмет изобретения
Изобретение относится к производству медицинских препаратов и касается способа получения цитохрома С.
Известен способ получения цитохрома С путем экстракции измельченной сердечной мышцы крупного рогатого скота органической кислотой, обработки сульфатом аммон,1я, центрифугирования, диализа и отделения осадка.
Однако такой способ не обеспечивает получения препарата достаточчо высокого качества.
С целью улучшения качества целевого продукта сырье обрабатывают водой, замораживают, размораживают с последующей обработкой осадка после центрифугирования насыщенным раствором .сульфата аммония. После диализа раствор обрабатывают понообменными смолами и нагревают при температуре 80 — 90 С.
П р и м с р. 150 кг бычьсго сердца освобождают от жира и связок, измельчают, промывают холодной водой, отжимают и замораживают при температуре (— 15) — (— 25) С не менее, чем на сутки. После размораживания к 100 кг фарша добавляют 100 л 25%НоН трихлоруксусной кислоты и перемешивают при комнатной температуре в течение
2 час. Экстракт отделяют от фарша, доводят рН добавлением едкого патра до 7,0 — 7,2 и осаждают балластные белки сульфатом аммония (из расчета 550 г л). Осадок отфильтровывают, а из фпльтрата добавлением
25,5 ял л 20 /о-ной TpHxJIopóêñóñíîé кислоты при 0 — 5 С осаждают цитохром С. Осадок отделяют цснтрифугированием при 300 об/лшн, обрабатывают насыщенным раствором сульфата аммония (500 лтл кг исходного сырья) и снова отделяют центрифугированием. Остаток растворяют в 0,8 л дистиллированной воды и диализируют против физиологического раствора в течение 24 час. К диализату добавляют катионит СДВ-ЗТ в Н-форме до рН
2,5 — 3,0, быстро отфильтровывают, промывая смолу водой, н постепенно добавляют аниоппт ЭДЭ-10п в ОН-формедо рН 6,5 — 7,0. Смолу отфильтровывают, промывая ее водой, и полученный раствор (1,5 л) нагревают в течение 1 — 2 мин при 85 С. Выпавший осадок
2О отделяют, а фильтрат разводят физиологическим раствором до концентрации цитохрома 2,5 г л, Полученный раствор стерильно фильтруют и разливают во флаконы по 10 лта препарата. Выход 0,01% от исходного сырья.
Способ получения цитохрома С путем экстрагирования измельчснной сердечной мышцы
30 «рупного рогатого скота органической кисло351546
Составитель В. Таратута
Редактор Н. Спиридонова Техред А. Камышникова Корректоры: В. Петрова и Е. Давыдкина
Заказ 3455/б Изд. № l395 Тираж 406 Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2 той, обработки сульфатом аммония, центрифугирования, диализа и отделения осадка, отличающийся тем, что, с целью повышения качества целевого продукта, сырье обрабатывают водой, замораживают, размораживают с последующей обработкой осадка после центрифугирования насыщенным раствором сульфата аммония, далее раствор после диализа обрабатывают ионообменпыми смолами и на5 гревают при температуре 80 — 90 С.
