Способ определения активности моноаминоксидазы
0 П И С А Н И Е 4О5О72
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЙЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
М. Кл. 6 OIn 33/16
Заявлено 15.11.1972 (№ 1744101/31-16) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 22.Х.1973. Бюллетень № 44
Дата опубликования описания 23.VII.1974
Государственный комитет
Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
УДК 612.015.1(088.8) Автор изобретения
А. И. Балаклеевский
Белорусский научно-исследовательский санитарно-гигиенический институт
Заявитель
I
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ
МОНОАМИНОКСИДАЗЫ
zH
0.
0 + ынь+ Н202 сов М4 мАо н,о;- о, который в кислой среде подвергают взаимо- 10 соответствующий гидрофобпый гидразоп (будействию с избытком 2,4-динитрофенилгидра- рого цвета) зина, при этом образуется и кристаллизуется
Н
С
0 + Н К вЂ” N
H Ко
ХЬ
0=и†N
+Н 0
Nl02 тель (ацетон, этанол, н.-бу анод и другие) .
При этом образуется хромофор малиново-розового цвета. Интенсивность окраски хромофора измеряют на фотоэлектроколориметре
После центрифугирования гидразоп выпадает в осадок.
Осадок гидразона в щелочной среде экстрагируют в полярный органический раствориИзобретение о",носится к области биохимии.
Известен способ определения активности моноаминоксидазы (с использованием в качестве субстрата бензиламина), основанный на спектрофотометрическом определении при Х
250 нм количества циклического хромофора, образующегося при взаимодействии продукта реакции бензальдегида с циклогексаном.
Недостатком такого способа является нестабильность получаемых результатов, а также относительно цевысокая чувствительность.
С целью повышенп; чувствительности и специфичности способа химическую обработку бензальдегида проводят 2,4-динитрофенилгндразином в кислой среде.
Пример. Из бензиламина в забуференной среде инкубации в присутствии мопоаминоксидазы (МАО) получают бензальдегид
405072
Предмет изобретения
Составитель С. Щенева
Редактор Н. Спиридонова Техред Л. Богданова Корректор Л. Орлова
Заказ 175!/12 Изд, Хо 1307 Тираж 743 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2 (ФЭК) или спектрофотометре при 3,=460 ммк; она и служит мерой активности ионоаминоксидазы в биологическом материале.
Предлагаемый способ обладает высокой чувствительность1о: молярный коэффициент экстинции хромофора — 2,4-динитрофенилгидразона бензальдегида равен 23700 М )(см (при 1=460 ммк), что намного превышает коэффициент экстинции как самого бензальдегида (13000 М вЂ” см — при Х=-242 ммк), так и других хромофоров, используемых в известных спектрофотометрических методах определения МАО.
Способ определения активности моноаминоксидазы, заключающийся в том, что в пробу добавляют бензиламин, с последующим превращением бензальдегида в хромофор и спектрофотометрированием, отл и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения чувствительности и специфичности способа, обработку бензальдегида проводят 2,4-динитрофенилгидразином в кислой среде.
