Питательная среда для выращивания продуцентов литических ферментов
ОП ИКАНИЕ
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
1iiI 4395l2
Союз Советских
Социалистических
Республик (61) Зависимое от авт. свидетельства— (22) Заявлено 01.11.72 (21) 1842571/28-13 с присоединением заявки №вЂ” (32) Приоритет—
Опубликовано 74. Бюллетень № 30
Дата опубликования описания 17.06.75. (51) М,кл. С 12d 13, 10
Государственный комитет
Совета Министров СССР па делам изобретений и открытии (53) УДК 577.15.08 (088.8) (72) Авторы изобретения
С. А. Самцевич, Б. Х. Шкляр и Л. А. Шукан
Отдел микробиологии АН Белорусской ССР (71) Заявитель
I 1,1 (54) ПИТАТЕЛЪНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЪ|РАЩИВАНИЯ
ПРОДУЦЕНТОВ ЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ
Изобретение относится к микробиологической промышленности, точнее к питательным средам для выращивания продуцентов литических ферментов, Известна питательная среда для выращивания продуцентов лнтических ферментов, например Actinomyces cinel osus, содержащая, %:
Автолизат дрожжей 10
Сернокнслый магний 1
Двузамещенный фосфорнокислый калий 5
Азотнокислый натрий 1
Набор аминокислот 5.
С целью повыше пня активности продуцируемых ферментов в предлагаемую пптательную среду дополнительно введены соевая мука, пекарские дрожжи и хлористый аммоний, при этом компоненты среды содержатся в следующем соотношении, вес. %:
Соевая мука 1
Пекарские дрожжи 0,25
Двузамещенный фосфор нокисльш калий 0,25
Хлористый аммоний 0,06
Сернокислый магний 0,01
Дрожжевой автолизат 0,01
Вода Остальное
Готовят питательную среду следующим образомм.
В водопроводную воду вносят следующие компоненты, %:
Соевую муку 1
Пекарские дрожжи 0.25
Двузамещенный фосфорнокпслый калий 0,25
Хлористый аммонпй 0,06
Сернокислый магний 0,01
Дрожжевой автолпзат 0,01
После чего полученную питательную среду стерилизуют, засевают актиномицетом Actin myces cinегоsus и выращив ают глубинных способом при 28 — 30 С в течение 30 — 42 час на круговой качалке со скоростью 200 об/мин.
15 Если культивирование проводят в 1 л-ферментерах, то питательную среду аэрпруют шестью-семью объемами воздуха на 1 объем питательной среды. После культивирования мицелий отделяют центрифугпрованпем пр:I
20 3000 об/мин.
Литические ферменты культура IbHoll жидкости вызывают при принятых по методике специфических условиях 60 — 65% ;1113пс кормовых дрожжей Candida прп использован1н:
25 разведенной в 3 раза культуральной жидкости.
Для определения литпческой активности используют следующую методику, К 1 мл суспе нзии дрожжей прибавляют
Зо 1 мл трис-буфера (0,067 М, рН 7.01 и 2 мл
439512 культуральной жидкости или ферментного раствора. Исходную оптическую плотность реакционной смеси доводят до экстинкции
0,7 — 0,8 и определяют ее изменение на ФЭК-56 при 536 мм в кювете с расстоянием между стенками 1 мм после ннкубации при 40 С в течепис 1 час. Лктпвность лптических ферментов
1 !
Лизируемые дрожжи
Особенности методики определения лптической активности
%,;»ra»ca
Пролуцент
10 мл культуральной жидкости + 1 мл суспензий дрожжей, t — 2 час КЖ без разведения
5 мл КЖ + 0,2 мл суспензии дрожжей; t — 3 час, КЖ без разведения
Candida
uti 1 i s
Candida abhicans
StreptoInyces
20
Я1гер1о»1уеея
1 мл фермента+ 2 мл субстрата, t — 1 час. КЖ без разведения
NicroInonospora
ЛЯ
50 — 60
Разведение КгК в 3 раза
Actinomyccs
cinегоsus Зи
Разведение hHi в 3 раза
60 — 65
Предмет изобретения
Питательная среда для выращивания продуцентов литических ферментов, например
ActinoInyces ciner0sus, содержащая автолизат 35 дрожжей, сернокислый магний, двузамеще нный фосфорнокислый калий, отличающаяся тем, что, с целью повышения активности продуцируемых ферментов, в нее дополнительно введены соевая мука, пекарские дрожжи и хло- 40
Составитель M. Ларина
Редактор В. Блохина Техред Е. Борисова
Коррегктор И. Позняковская
Заказ 1553 Изд. № 1039 Тираж 456 ПОд писнпе
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открьний
Москва. гК-35, Раушская наб., д. 4/5
Обл. тип. Костромского управления издательств, полиграфии и книжной торговли ннтактные ацетон или терморазрушенные клетки
Candida
utilis СЕСТ 1061
Candida
scotti
Candida
utilis выражают в процентах онижения оптической плотности (ОД) по формуле:
Од ОДнлч — ОДнои y 100
ОДнач
Ниже приведена таблица активности литических ферментов по "íèæåíèþ оптической плотности суспенэии дрожжей турбидиметрическим методом. ристый аммоний, при этом компоненты среды содержатся в следующем соотношении, вес. О я:
Соевая мука 1
Пекарские дрожжи 0,25
Двузамещенный фосфорнокислый калий 0,25
Хлористый аммоний 0,06
Сернокислый магний 0,01
Дрожжевой автолизат 0,01
Вода Остальное
