Способ получения кристаллического флоримицина высокой степени чистоты

Авторы патента:

C12P1 - Получение соединений или композиций, не отнесенных к группам C12P 3/00-C12P 39/00, путем использования микроорганизмов или ферментов; общие способы получения соединений или композиций с использованием микроорганизмов или ферментов

A61P31/04 - антибактериальные средства

A61K31/7034 - присоединенные к карбоциклическому соединению, например флоридзин

ОПИСА Е

Союз Советских

3оииалистических

Республик ii! 465

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 06,04.65 (21) 1001763/31-16 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 30.09.79. Бюллетень № 36 (45) Дата опубликования описания 30.09.79 (51) М. Кл.

А 61 К 31/00

Государственный комитет по делам изобретений н открытий (53) УДК 615 45:615. .779.931 (088.8) (72) Авторы изобретения

С. А. Жуковская и Г. С, Либинсон (71) Заявитель

Всесоюзный научно-исследовательский институт антибиотиков (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЛОРИМИЦИНА

Известны способы получения антибиотика флоримицина путем ионообменной сорбции нативного раствора, элюции раствором серной кислоты с последующей кристаллизацией из метанола. Указанные способы, предусматривающие предварительную обработку культуральной жидкости щавелевой кислотой и оксалатами, не обеспечивают удовлетворительного выхода антибиотика.

Сущность предлагаемого способа заключается в том, что культуральную жидкость обрабатывают поочередно растворами ортофосфорной кислоты и едкого натра (рН около 7 вЂ” 8), добавляют хлористый кальций в количестве около 0,5% к объему культуральной жидкости, нативный раствор пропускают через катионит, например КБ-2к,3, элюат профильтровывают через сульфокатионит, например КУ-2+20, и аниот, например ЭДЭ-10; далее целевой продукт выделяют известными приемами, Такая методика получения флоримицина позволяет улучшить его качество и значительно повысить выход.

Пример, К 110 л культуральной жидкости с активностью 2280 ед/мл добавляют

4 л 10%-ного едкого натра и 2,2 л 40%-ной ортофосфорной кислоты. Обработку ведут поочередно кислотой и щелочью, так чтобы рН было на уровне 7 вЂ” 8. Затем при перемешивании к раствору добавляют 0,5% (по объему) насыщенного раствора хлористого кальция, выдерживают 40 мин и отфильтровывают на фильтр-прессе через шинельное сукно со скоростью 40 л/м- ч

Получают 89 л нативного раствора с активностью 200 ед/мл; 48 л нативного раствора с активностью 1680 ед/мл пропускают

1О через колонку с 35 г катионита КБ-2к,З в натриевой форме снизу вверх со скоростью

100 мл/г ч катионит отмывают и элюируют антибиотик 1 н. серной кислотой, собирают две фракции, первая из которых нейтраль15 ная (380 мл с активностью 92500 ед/мл), а вторая кислая (125 мл с активностью

55000 ед/мл). Вторую фракцию нейтрализуют 10 r анионита ЭДЭ-10 в смешанной гидроксильно-сульфатной форме, смешива20 ют с первой и последовательно пропускают через две колонки, в первой из которых

48 r катионита КУ-2к20 в н. форме, а во второй 16 г анионита ЭДЭ-10 в смешанной гидроксильно-сульфатной форме. Элюат об25 рабатывают 20 г угля и добавляют метиловый спирт до появления устойчивой мутности (340 мл). Через 30 мин при перемешивании добавляют еще 350 мл метанола, оставляют на 20 ч и отфильтровывают выпавший флоримицин, промывая его сначала

465814

Формула изобретения

Составитель В. Таратута

Техред Н. Строганова

Корректоры: А. Галахова и Л. Орлова

Редактор Е. Месропова

Заказ 2362/8 Изд. № 564 Тирагк 681 Подписное

НПО «Поиск» Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 бО /о-ным (60 мл), а затем чистым метанолом (30 мл). После высушивания при комнатной температуре под вакуумом в течение 20 ч и при 50 С в течение 3 ч получают 39 г антибиотика, что составляет 55% от содержания его в культуральной жидкости.

Способ получения флоримицина путем ионообменной сорбции нативного раствора, элюции антибиотика раствором серной кислоты с последующей его кристаллизацией из метанола, отличающийся тем, что, с целью повышения качества и выхода целевого продукта, культуральную жидкость обрабатывают поочередно растворами ортофосфорной кислоты и едкого патра (рН около 7 вЂ” 8), добавляют хлористый кальций в количестве 0,5 /о к объему культуральной жидкости, нативный раствор пропускают через катионит, например КБ-2)(3, 10 элюат профильтровывают через сульфокатионит, например КУ-2х,20, и анионит, например ЭДЭ-10, далее целевой продукт выделяют известными приемами.