Способ прижизненной диагностики пневмоцистоза

 

;1 1) 480 7 63

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Ссциаянстнческкх

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 18.02.74 (21) 2002819/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 15.08.75. Бюллетень № 30

Дата опубликования описания 26.01.76 (51) М. Кл. С 12k 1/00

А 61b 10/00

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 576.8.077 (088.8) (72) Автор изобретения

В. А. Рябцева (71) Заявитель (54) СПОСОб ПРИЖИЗНЕННОЙ ДИАГНОСТИКИ

П Н ЕВМОЦИ СТОЗА

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторной диагностике паразитарных заболеваний, Известен способ прижизненной диагностики пневмоцистоза путем иммунофлюоресцентного исследования мокроты или слюны больных с последующей индикацией цист-антигенов в исследуемом материале, Для повышения достоверности диагностики предлагается исследовать мазки из глубоких отделов дыхательных путей.

При осуществлении способа исследуют мазки слизи из глубоких отделов дыхательных путей детей и взрослых. У здоровых детей исследуемый материал забирают в амбулаторных условиях тампоном во время прямой лярингоскопии, у больных детей — в условиях стационара с применением фторотанового наркоза, у взрослых — после ингаляции водяного пара в течение 3 — 5 мин. Мазки подсушивают на воздухе и фиксируют смесью Никифорова в течение 20 мин. Реакцию флуоресцирующих антител ставят в непрямом варианте.

Схема постановки реакции: исследуемый препарат, содержащий антиген+диагностическая немеченая сыворотка (кроличья) +люминесцирующая сыворотка против глобулинов кролика.

Диагностическую сыворотку получают путем иммунизации кроликов антигеном из легкого ребенка, погибшего от пневмоцистозной пневмонии. Диагноз пневмоцистоза подтверждаегся клиническими, рентгенологическими данными, а также результатами патологоанатомического, гистологического и паразитологического исследования. Рабочее разведение сыворотки 1: 500.

В качестве специфической оценки расценивают свечение оболочки цист Pneumocystis саг1п11. Свечение трофозоитов в данных препаратах трудно отдифферепцировать от неспецифического свечения элементов ткани, артефактов, поэтому его во внимание не при15 нимают. Интенсивность свечения оценивают по 4-крестовой системе. Реакцию считают положительной при интенсивном (++ + или

++++) свечении оболочки цисты. Равномерное бледно-зеленое или серо-зеленое све20 чение всей цисты считают неспецифическим и оценивают на + + или +.

Одновременно с опытом ставят ряд контролей.

Реакцию счита от положительной прп нали25 чии яркого свечения в первом контроле и при его отсутствии во всех остальных контролях.

Помимо специфической люминесценции отмечают также неспецифпческую люминесценцию тканевых элементов препарата антпгена, ЗО за счет наличия нормальных гетерологичных, 480763

Предмет изобретения

Составитель T. Головина

Техред Т. Миронова

Корректор О. Тюрина

Редактор Л. Тюрина

Заказ 3378/12 Изд. Ко 1669 Тираж 529 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретсний и открытий

113035, Москва, К-35, Гаушскан наб., д. 4j5

Типографии, пр, Сапунова, 2 тканевых и противобелковых антител в сыворотке кроликов, иммунизированных тканевым препаратом. Для контрастирования неспецифического свечения применяют бычий альбумин, меченный родамином.

Контрастное окрашивание производят на втором этапе обработки препаратов. При этом применяют смесь люминесцирующей антиглобулиновой сыворотки с альбумином, меченным родамином.

Для титрования компонентов смеси к специфической флуоресцирующей сыворотке, взятой с таким расчетом, чтобы ее концентрация в смеси была равна рабочему разведению, добавляют различные разведения люминесцирующего альбумина, а затем смеси наносят на мазки. Рабочим разведением альбумина считают такую его концентрацию, которая обеспечивает оранжево-красное или бурое неспецифическое свечение препарата и зеленое свечение цист Pneumocystis cariIIii.

Способ прижизненной диагностики пневмоцистоза путем иммунофлюоресцентного исследования мазков слизи, отличающийся тем, что, с целью повышения достоверности диагностики, исследуют мазки из глубоких

15 отделов дыхательных путей.