Способ окраски форменных элементов гемолимфы гусениц чешуекрылых хвоелистогрызущих насекомых

 

О П И С А Н И Е (ii)482157

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 08.06.73 (21) 1930117/30-15 » с. ° (51) М. Кл. А 01k 67/00

С 12k 1:00 с присоединением заявки ¹

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (23) Приоритет

Опубликовано 30.08.75. Бюллетень № 32

Дата опубликования описания 18.12.75 (53) УДК 578.65(088.8) (72) Автор изобретения

Д. А. Орехов

Белорусский научно-исследовательский институт|,.- .. лесного хозяйства (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОКРАСКИ ФОРМЕННЫХ ЭЛЕМЕНТОВ

ГЕМОЛ ИМФЫ ГУСЕНИЦ Ч ЕШУЕКРЫЛ ЫХ

ХВОЕЛИСТОГРЫЗУЩИХ НАСЕКОМЫХ

Изобретение относится к энтомологии, а именно к диагностике физиологического состояния форменных элементов — гемоцитов гемолимфы насекомых, в частности к способам окраски форменных элементов гемолимфы гусениц чешуекрылых хвоелистогрызущих насекомых.

Известен способ окраски фиксированных мазков гемолимфы, заключающийся в том, что осуществляют окраску форменных элементов гусениц раствором нейтрального красного на основе жидкости Рингера и последующую сушку и фиксацию мазков, Однако известный способ окраски фиксированных мазков гемолимфы насекомых не дает возможности выявить интимные стороны биологического состояния гемоцитов, а в этой связи и наличие раздражителей в исследуемом организме, так как процесс сушки и фиксации мазков вызывает комплекс необрати мых изменений в клетках. Окраска фиксированных препаратов гемолимфы дает возможность исследовать только строение гемоцитов, но не дает возможности исследовать их функциональное состояние. Кроме того, для известного способа характерны сложность проведения диагностирования и невозможность точного определения физиологического состояния гемоцитов насекомых при диагностическом исследс1зании состояния популяции вредителя для правильного выбора средств борьбы с ним.

Цель изобретения — упростить диагностирование и повысить точность определения

5 физиологического состояния гемоцитов насекомых при диагностическом исследовании состояния популяции вредителя для правильного выбора средств борьбы с ним.

Для этого берут гемолимфу лейкоцитарным

10 мелан>кером, дополняют раствором красителя в соотношении гемолимфы к красителю

1: 20, затем смешивают и выдерживают смесь в течение 10 — 35 м и н.

Способ осуществляют следующим образом.

15 Для того чтобы произвести прижизненную окраску гемоцитов гемолимфы насекомых, готовят раствор нейтрального красного на основе жидкости Рингера, предпочтительно

0,1 о/о -ной концентрации. Затем при помощи

20 лейкоцитарного меланжера после прокола гусеницы между первой — второй парой ложноножек берут гемолимфу. Заполняют ею меланжер предпочтительно до метки 0,5.

Дополняют меланжер с гемолимфой ра25 створом красителя, предпочтительно до метки 11, в результате чего получают разведение гемолимфы в растворе красителя с соотношением 1: 20. После этого смешивают в самом меланжере гемолимфу с раствором краски

ЗО путем встряхивания, и выдерживают полу482157

Составитель Л. Плащина

Техред Т. Курилко

Корректоры В. Дод и Е Давыдкина

Редактор М. Дмитриева

Заказ 3061/15 Изд. М 1764 Тираж 619 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб, д, 4, 5

Типография, пр. Сапунова, 2 ченную смесь в течение времени, достаточного для завершения окрашивания гемоцитов, но недостаточного для соединения краски с белковым комплексом жидкой части гемолимфы (экспозиция должна составлять 20—

35 мин, предпочтительно 15 — 20 мин). Объемные соотношения гемолимфы к раствору красителя и экспозиция взаимосвязаны и поэтому должны выбираться из условия обеспечения устойчивости картины окрашивания, необходимой на период последующего исследования гемолимфы.

Предлагаемый способ опробован в лаборатории микробиологии отдела биологических методов борьбы с вредителями леса Белорусского НИИ лесного хозяйства и показал положительные результаты. Благодаря простоте диагностирования и средств осуществления при благоприятных условиях способ можно использовать непосредственно в очагах массового размножения вредителей-насекомых, что служит исходной основой для диагностических исследований состояния популяции вредителя, предшествующих выбору мер борьбы с ним.

5 Предмет изобретения

Способ окраски форменных элементов гемолимфы гусениц чешуекрылых хвоелистогрызущих насекомых, например соснового

10 шелкопряда, раствором нейтрального красного на основе жидкости Рингера, отл и ч аю шийся тем, что, с целью упрощения диагностирования и повышения точности определения физиологического состояния гемоци15 тов насекомых при диагностическом исследовании состояния популяции вредителя для правильного выбора средств борьбы с ним, берут гемолимфу лейкоцитарным меланжером, дополняют раствором красителя в

20 соотношении гемолимфы к красителю 1: 20, затем смешивают и выдерживают смесь в течение 10 — 35 мин.