Питательная среда для глубинного культирования продуцентов целлюлазы

 

О Й-C-А"--Н И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

< п49733ф

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6l) Дополнительное к авт. саид-ву(22) Заявлено 180573(2l) 1921979/18-13: с присоединением заявки,В— (23) Йриоритет— (4о) Опубликовано 25.1278. Бюллетень % 47 (45) Дата опубликования описания 281278 (Я) м. Кл.

С 12 В 13/10

С 12 В 3/00

Государствеиный комитет ссср оо делам изобретеиий и открытий (БЗ) УДК 577 15 08 (088.8) (72) Автори изобретения

К.A. Калун яиц, И.С. Ваганова, Г. В. Бурова, Т.B.×óãóíîâà и P.В.Фениксова

P3) Заявитель

Всесоюзный научно- исследовательский институт биосинтеза белковых веществ (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ГЛУБИННОГО

КУЛЬТИВИРОВАНИ Я ПРОДУЦЕНТОВ

ЦЕЛХ60ЛА3Ы

3 2

Изобретение относится к ферментной отрасли микробиологии и может использоваться при получении целлюлазы,например QeotriCtum сапйЖП), путем глубинного культивирования грибов на жидких питательных средах.

Известна питательная среда для глубинного культивирования продуцентов целлюлазы, содержащая свекловичный жом, сернокислый аммоний, азотнокислый натрий, одноэамещенный фосфорнокислый калий и сернокислый магний.

Для повышения выхода ферментного

lS препарата целлюлаэы и снижения его себестоимости питательная среда дополнительно содержит зернокартофельную барду, а указанные компоненты содержатся в следующих количествах,4,;

Свекловичный жом 2,5 - 7

Зернокартофельная барда 5 -50

Азотнокислый натрий 0,2 - 0,4

Сернокислый аммоний 0,4 — 4

Однозамещенный фосфориокислый калий 0,1 - 0,3

Сернокислый маг ний 0,1 - 0,3

Вода Остальное

Сущность изобретения заключается в следующем.

Для выращивания культуры грибов готовят питательную среду следующего состава, Ъ:

Свекловичный жом 2,5-7

Зернокартофельная барда5,0 -50

Сернокислый аммоний 0,4 — 4,0

Азотнокислый натрий 0,2 - 0,4

Одноэамещенный фосфорнокислйй калий 0 1 - 0,3

° Сернокислый магний 0,1 - 0 3

Среду стерилиэуют, засевают чистой культурой гриба и выращивают его в течение 3-6 сут при 28-30 С и постоянном азрировании 1 об/об мин.

Из полученной культуральной жидкости выделяют ферментный препарат, например высаливанием.

Пример 1 (контроль). Для культивирования гриба GeOtricturp randidura в ферментере емкостью 15 изготовят 10 м питательной среды. Для этого берут 200 кг свекловичного жома, измельченного до величины частиц

0,5-0,3, смешивают с 2 м воды и отваривают в течение 1 ч при 100оС.

Отвар сливают, а жом отжимают н пОдают в смеситель.

Туда же загружают филътровальную бумагу н экстракт пшеничных отрубей, который готовят следутощим образом:

497836

Формула изобретения

Составитель Е,Страшненко

Редактор Л.Письман Техред Л.Алферова Корректор И.Гоксич

Заказ 7307/48 Тираж 526, Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Филиал ППП Патент, г.ужгород, ул.Проектная,4

300 кг отрубей заливают Э м воды, отваривают в течение 1 ч при 100 С и центрифугируют.Насадочную жидкость подают в смеситель, В смеситель задают также 20 кг сернокислого аммония, 20 кг азотнокислого натрия, 15 кг однозамещенного фосфорнокислого калия я 5 кг сернокислого магния.

Все компоненты тщательно перемешивают, заливают водой до 10 м, стери-, Я лиэуют при 135 С и передают в ферментер. Стерильную среду засевают чистой l0 культурой гриба. Ферментацию ведут при

28-30 ОС, непрерывном аэрировании

1 об/об мин в течение 4 сут. Активность культуральной жидкости в конце ферментации 1 ед/мл по С -ферменту. 15

После отделения биомассы фермент осаждают высаливанием и затем высушивают его на сублимационной сушилке °

Весовой выход препарата целлюлозы иэ 1 м культуральной жидкости составляет 3,5 кг при активности 120 ед/г °

Пример 2. Получение препарата целлюлазы по предлагаемому способу.

Я

Для приготовления 10 м питательной среды в смеситель загружают 500 кг

9 измельченного свекловичного жома, 1 м эернокартофельной барды, 100 кг сернокислого аммония, 20 кг однозамещенного фосфорнокислого калия, 20 кг азотиокислого натрия, 10 кг сернокислого магния. Среду тщательно перемешивают и доводят объем до 10 м, стерилизуют при 135 С и загружают в ферментер.

Стерильную среду засевают чистой культурой гриба. Ферментацию ведут при

28-30 С, непрерывном аэрировании

1 об/об мин в течение 4 сут.Активность культуральной жидкости в конце ферментации 1,4 ед/мл по С„-ферменту.

После отделения биомассы фермент 4О осаждают высаливанием и затем высушивают на сублимационной сушилке.

3

Весовой выход препарата из 1 м культуральной жидкости составляет

7,0 кг при активности 120 ед/г.

Таким образом, при выращивании культуры гриба на предлагаемой среде повышается продуктивность культуры на 40% и выход препарата на 100%.

Кроме того, использование для приготовления питательной среды свекловичного жома и отрубей без предварительной их обработки снижает продолжительность процесса ее приготовления, сокращает количество единиц используемого оборудования, а также исключает ручные операции на обработке жома.

Это позволяет упростить технологию получения препарата и снизить его себестоимость.

Питательная среда для глубинного культивирования продуцентов целлюлаэы, например Qeat ictvm сапЖдот содержащая свекловичный жом, сернокислый аммоний, азотнокислый натрий, одноэамещениый фосфорнокислый калий и сернокисюый магний, о т л и ч а ющ а я с я тем, что, с целью повышения выхода ферментного препарата и снижения его себестоимости, питательная среда дополнительно содержит зернокартофельную барду, а указанные компоненты содержатся в следующих количествах, %:

Свекловичный жом 2,5 - 7

Зернокартофельная барДа 5 -50

Азотнокислый натрий 0;2 - 0,4

Сернокислый аммоний 0,4 - 4

Однозамещенный фосфорнокислый калий 0,1 - 0,3

Сернокислый магний 0,1 - 0,3

Вода Остальное.