Способ приготовления тонких срезов тканей

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

G01N1/28 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (11) 502277

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 13.10.72 (21) 1836210/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 05.02,76. Бюллетень № 5

Дата опубликования описания 14,04.76 (51) М. Кл 2 G 01N 1/28

Государственный комитет

Совета Министров СССР ло делам изобретений и открытий (53) УДК 612.014.1 (088.8) (72) Авторы изобретения

В. А. Серга, Л. А. Быков и Л. А. Крючкова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ТОНКИХ СРЕЗОВ ТКАНЕИ

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в патологогистологической технике и гистохимии.

Известен способ приготовления гистохимических срезов, предусматривающий предва рительное пропитывание ткани раствором, содержащим поливиниловый спирт, глицерин и воду в соотношении 1: 3: 1.

Однако при таком способе возможно возникновение артефактов в замороженных срезах.

С целью получения замороженных срезов без артефактов компоненты пропитывающего раствора берут в соотношении: полимерное вещество: глицерин: вода вЂ” 1: 2: 7.

Способ осуществляют следующим образом.

После формалиновой или спиртовой фиксации материал в течение 4 5 ч отмывают в воде. Отмытые в воде кусочки тканей толщиной 0,2 вЂ” 0,3 см пропитывают раствором, содержащим поливиниловый спирт и глицерин, при температуре 37"С в течение 48 вЂ” 72 ч при периодическом встряхивании. Приготовленные таким способом кусочки тканей вместе с небольшим количеством поливинилового спирта (3 вЂ” 4 капли) замораживают.

Наличие в среде поливинилового спирта предохраняет препарат от вымывания и потери свободных клеток, слизи и других гистологических структур. Чтобы предотвратить сморщивание замороженных срезов п ри обезвоживанин и просветлении, их монтируют и приклеивают без применения белка и фильтров альной бумаги на хорошо обезжиренном предметном стекле.

Срезы можно окрашивать гематоксилином и эозином, по Ыан-i изону, они пригодны для проведения анализов на липиды, на гликоген. резы помещают в бальзам или поливиниловыи спирт.

10 Пр имер. Кусочки тканей толщиной 0,2вЂ”

0,3 см подвергают фо рмалиновои или спиртовой фиксации, в течение 4 вЂ” 5 ч отмывают в проточной воде, затем в закрытых стеклянных бюксиках емкостью 15 вЂ” 20 см пропитывают раствором, содержащим поливиниловый спирт, глицерин, дистиллированную воду в соотношении i: 2: 7, в течение 24 ч при температуре

37 вЂ” 39 С, периодически встряхивая.

Подготовленный таким способом кусочек

20 ткани вместе с небольшим количеством поливинилового спирта (3 вЂ” 4 капли) замораживают на электрическом термоохлаждающем сТолике. Через 2 вЂ” 3 мин, когда поливиниловый спирт, окружающий кусочек ткани, достаточно уплотнится и замороженный кусочек ткани с пропитывающей жидкостью приобретет консистенцию, по плотности и эластичности близкую к консистенции парафина, делают срезы на санном микротоме.

30 Замороженные срезы с таких кусочков ткани при помещении в чашки с водой, легко рас502277

Составитель С. Малютина

Техред 3. Тараненко Корректор 3, Тарасова

Редактор Т. Зенбнцкая

Заказ 745/4 Изд. № 246 Тираж 1029 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 прямляются, отделяются друг от друга„хорошо окрашиваются, в микрост1руктуре тканей нет разрывов.

Свободные клеточные элементы со срезов не утрачиваются.

Формула изобретения

Способ приготовления тонких срезов тканей путем пропитки ткани раствором, содержащим полимерное вещество, глицерин и воду с последующим замораживанием ее, отличаюшийся тем, что, с целью получения лишенных артефактов замороженных срезов компо5 ненты пропитывающего раствора берут в соотношении полимерное вещество: глицерин: вода вЂ” 1:2:7, а замораживание проводят в среде поливинилового спирта.