Способ получения водорастворимых физиологически активных полимеров

 

л... с

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик (») 522198

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 17.03.75 (21) 2114393/05 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 25.07.765юллетень № 27 (45) Дата опубликования описания 14.10.76 (51) М. Кл.е

С 08 Р 27 1/02

Государстеенный комнтет

Совета Инннстроа СССР оо делам нзабретеннй и открытий (53) УДК

541.64 (088.8) Т, Б. Аникина,,О. А. Миргородская, Б. В. Москвичев, А. А. Селезнева, Е. Ф,. Панарин, И. И. Гаврилова и Г. В. Самсонов (72) Авторы изобретения

Институт высокомолекулярных соединений АН СССР и

Ленинградский научно-исследовательский институт антибиотиков (71) Заявители (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ

АКТИВНЫХ ПОЛИМЕРОВ

Изобретение относится к химии высокомолекулярных соединений, к синтезу полимерных физиологически активных веществ, обладающих ферментативной активностью, которые могут быть использованы в медицине и технике.

Известен способ получения водорастворимых полимеров путем реакции полимеров, содержащих альдегидные группы, с и-аминобензолсульфоавннилндами 1 . . то

Однако полимеры, полученные по указанному способу, обладают лишь антимикРобной антикварностью.

Цепь изобретения состоит в разработке способа получения физиологически актив- 15 ных водорастворимых полимеров на основе сополимеров N-виниппирропидона с акролеином, обладающих ферментативной актив« нос тью.

Поставленная цель достигается путем 20 присоединения физиологически активного агента - протеопитического фермента террилитина - к сопопимерам g -винилгирролидона с акролеином азометиновой связью с последующим ее восстановлением до С-Я-25 связи, а непрореагировавших апьдегидных групп сополимера до спиртовых Ыа ЬН4.

Процесс проводят в водном буферном растворе при рН 8-10,5 в течение 30-60 мин о при 15-25 С. Модифицированный полимер после очистки диализом против воды очищают с помощью гепевой хроматографии и выделяют лиофильной сушкой.

Пример 1. 0,05 r сополимера винилпирролидона с акролеином с 0,15 дп(г, содержащего 25 мол.% альдегидных групп, растворяют в 1 мп дистилированной воды, затем добавляют при перемешивании в 1 мл 0,1 м фосфатного буфера (рН

8,0), содержащего 0,01 г ферментного препарата терропитина с удельной протеопитической активностью 2,5 ПА/мг.

Реакционную смесь выдерживают при, комнатной -температуре в течение 1 час, добавляют 0,2 r NaB> в 1 мл 0,1 м фосфатного буфера. Через 30 мин реакционную смесь наносят на колонку дпя фракционирования размером 160 см, заполненную гелем сафадакса Г-100. Собирают фракцию с объемом удерживания 16 мл, 522198

Составитель А. Переверзева

Редактор О. Кузнецова Техред 0. Луговая Корректор С, Болдижар

Заказ 3727/321 Тираж 630 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по депаи Изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 полимер выделяют лиофильной сушкой. Выход 0,012 г с общей активностью 5 ПА, что составляет 20% от теоретического.

Пример 2. По методу, описанному в примере 1, из 202,6 г недиапизо ванного террипитина, содержащего 14% белка, с удельной активностью 29,5 ПА/мг, растворенного в 2,85 мп фосфатного буфера с рН и ионной силой 1,5 М, и

0,143г сополимера виниппирропидонас акролеином получают О, 17 0 г модифицированного

10 полимера с общей активностью 835 ПА, составляющей 99% от исходной.

Пример 3. По методу, описанному в примере 1, из 0,67 r сополимера винилпирропидона с акропеином с ("1 0,12 дп/г и 0,135 r (337, 5 ПА) диапизованного и высушенного террипитина с удельной активностью 2,5 ПА/мг в боратном буфере (рН

1 0.2) с последующим восстановлением

0,313 г КОЪН и очисткойдиализом получают

0.085 г (94%) попимерного производного рипитина с общей активностью 330,8 ПА, что сосгавпяет 98% от исходной.

Применение предлагаемого способа позволяет получать водорастворимые полимеры, оби,вдаюшие протеопитической активностью, которые могут быть использованы в медицине при лечении ожогов, воспалительных очагов, а также в качестве тромбопитических средств и в технике дпя гидропиза белков. Использование высокомолекулярного террипитина в специальных мембранных реакциях позволит более эффективно проводить гидропитические процессы. Полимеры, полу36 ченные по предлагаемому способу, характеризуются высокими ферментативными свойствами, активность составляет 98-99% от активности исходного фермента, и имеют спедующие преимущества перед нативным ферментом: более низкий коэффициент диффузии

5, 9 10 см/сек по сравнению с 14, 6 10 см/сек для нативного террилитина, что замедляет его диффузию через мембраны тканей и аппаратов; большую термическую стабильность, чем нативный террипитин.

Формула изобретения

Способ получения водорастворимых физиологически активных полимеров путем взаимодействия сопопимеров Я вЂ” винилпирропидона и акропеина с физиологически активным агентом в растворе, о т п ич а ю шийся тем, что, с целью получения полимеров, обладающих ферментативной активностью, в качестве физиологически активного агента используют протеолитический фермент террипитин и взаимодействие проводят в водном растворе при рН 8-10,5 с последующей обработкой полимера Яа ВН в тех же условиях.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Авторское свидетельство СССР № 332103, кп. С 08 f 27/06, 1972г.