Способ консервации микроорганизмов

 

(; 1 53907 О

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскик

Социалистически, Республик. (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 17.01.75 (21) 2098242 13 с присоединением заявки М (23) Приоритет

Опубликовано 15.12.76. Бюллете)и ¹ 46 (51) М. Кл.- зС 12С 11/32

С 12К 1/08

Гасударственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 577.15.07 (088.8) ДBTB QIIK ол икова пи я описаиия 28. 12.76 (72) Авторы изобретения

В. В. Патрикеев, О. В. Парина и С. И. Аксенов

Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени государственный университет им. M. В. Ломоносова (71) Заявитель (54) СПОСОБ КОНСЕРВАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ

Изобретение относится к микробиолоп!ческой и мсдиц>шской промыи!ле1)иости.

Известен способ консервации микрооргаиизмов, прсдусматр BBIOùèé высушиваиие питательной среды с п!дрогелем силикагеля (11.

Недостатком извсстпого способа является сравпитслык) небольшой срок хранения микроo1)l аппзз>ов (О! .о.!О 2-х ле ) .

С целью уд liiiipliiIB сроков храиеи>>я микроорганизмов используют п!дрогель силикагеля, содержаи;пй, по кр>>!!пей мере, один микроэ7cмсит, выбранный из ряда CO, Zi), Мп, >!1, Мо, Гс, V, при это i ко>!>!>)еств!) м>>кроэлемситов с!., 1»ьляет (мг>, cпл>!кагеля):

Со 15 — 20

Zil 10 — 20

Мп 15 — 25

)Ц о 30 — 40

Мо 15 — 30

1 с 20 — 400

Ъ> 15 — 30

HI)c,7;in)lie!I!I!,iI спo ои поясняется следуюI I I I I!> i I I И Р И .; С );1 ;;И C 17 > В Ь! И О Л И С П И Я .

Пример 1. Берут выращенную иа стандартном сусло-2»рс двухсуточпую культуру дрожжей (Сапс)>!1» < uilliermondii), окисляющую углеводород>: иефти. Делают посев

0,1 мл суспе "-.Iili !)!))к)кевь)х клеток иа синтетическую минера..ьи1ю среду с 1%-иьв! пара-! ринn.l,, к»чсств, -.I,: Iñ-,!! Iliiolo исто.;шка уг.>срода. Состав мицеральиой среды (г/л водо роводнои воды): . хН >НзРО4 3; (NH4) НРО;

0.5; КзЯО! 0>2; )>!1< О., 0,2. Дрожжи проращиII»þò в колбах на II I>IBëê2 в течение 2-х су5 ток при 32 С. Затем в колбы добавляют 150—

200 мл стерильиых шариков п!дрогеля сили! .2ГЕ I!i> КОтОРЫй I OTOBII>CR Из жИД! .0Г0 СтЕКЛ2 с содержанием 0,4% соли железа, считая иа

l=eSO4 7Н О. Колбы выдержiln»IO) в термо10 стате в течение 24 ч, затем рН доводят до 7—

8. Ку7»туpB 7»II > )O жид! .ост» C 7III3210T, III BI)III4II с>!лпкагc)ÿ с клетками дро)кжей выс>>>цп!Ва!От в эксикаторе при поиижсииом даглсиии в течение 5 — 6 суток. Хрансипе дрожжевь!х орга15 I,i:змов осуществляют в запаяииы. ампулах при пош>жепиом давлс!>ип (100 мм рт. ст.).

После храпения 200,II шариков силикагеля измельчают >! помещ»ют в 5 мl стерильиой водопроводной воды па 12 ч. Зятем делают

20 посев в исходную ж>щкую миисральиую среду, содержащую 1О!)-íûé п»р»фин. Сухие дро)кжи остаются жизиеспособиыми в течение 3-х лет, причем сохраняется оптимум влажности в силикагеле (примерио 10 — 12оi> ) . Клетки ие ут25 р»чивают способности к окислеипю парафина после хрансиия.

Процент выжив»смости культуры CBI)did»

<ш!1)егп)опт>! I> зависимости от добавления р»27è iíû микроэлементов в исходную мине30 р»л»иую среду или использование п!дрогеля

539070

<1) 0,) м Л 1 1! .1 О б !) С " е 11;i Я !

Г естав! -.слв П. Ьонар!!ев

Техр л M. Семенов

Рс-,актор Е, Мох!<енкова

Корректор О. Т оран !

Т,раж 5-5 Полпнсное

1 И!1ИПИ Го ударствепного ков!5!тета Совета М.пп!стров СССР по лслам язобретеннй н сткрв!тнй

113035, 1))осква, )I(-35, Ргу!нская паб., л. 4 5

Тппографня, пр. Сапунова, 2

<.иликагеля, содержащего эти соли:

N»SO. (Н О (15 мгл) 67; СоСlв 6H O (15 мг/л) 47; Л!!80.!. Н О (15 мг/л) 45;

К IqVO-. (15 )1Г/л) 54; FeSU; 711 О (100 !

73. 5

П р и м с р 2. Берут культу1!ч дрожжей

C. 1г01)lcrllis) окисляющую углеводороды Ilcfpти. i3 процессе !ри!отовлс»1!я в 1идрогсль силикагеля добавляют . 0 мг1;I соли ванадия H виде .Н!ЪГО3. 3ыращ !в!!!»»с культуры в ирису:ст- 10

Вии си;Iикаге.lя с м lhj)oý.acìe»T2)ft! и 1!OñeÂû наl Выж»ВГ!смость нос fc

Процент выживаемости ку.!ыуры С. tropicalls в зависимости от добавi1eli1151 различны.: 20 микроэлементоь в исходную минеральную среду или использовании гидрогеля снликагеля, содер)кащего эти соли: М»804 7НвО (15 мг/л)

74; СОС1г 6Н О (15 мг/л) 73; Z»SO .Н.О (15 мг,л) 69;:1Н.ДОз (15 мг, л) 73; 25

1ге304 7Н„-О (100 мг/л) 82.

Пример 3. Берут культуру 021<1epllll

I32cijjus 1пусо асз. 13!1ращиванис культуры

Г!роиЗВОдяТ ио CTa It+a pòèîé а! СТОдиl<С В м 51СОпонтонном оульонс (МПБ). Затем в культу- 30 ральную жнд:<ость вносят 150 — 200».л стерильных )париков гидрогеля снликагеля, и в процессе приготовления добавляют 20 мг/г соли кобальта в вндс COCj2 6Н О. Колбы Выдерживают r, тер,ocTaTc в течение 48 ч. Куль- 35

T3 j) 2льну10 жи,

5 — 6 суток. Хранение осуществля1ст в запаянных ампулах !.ри I!Oí!I)t

После хранения 200 мг !париков ctI.)lttt

11одооиыс результаты полу IeHhl npu ьи!Ссснии В питательную среду солей следую»Itive микроэлементов: М»80; 7Н20 25 1!г/л;

7»БО.; 7Н.О;0 мг, л; . (Н,;VO: 30 мг/л;

ГеSО::. .7Н О 400 мг, л.

Пример - .. Аналоги н!Ые результаты получснь: с культурой дрожжей С. Iipojytica.

Проне» t)htжиВас.. .Ioc! и ку IhT1 ры С. 1!роlу1!са в зависимости OT добавления различных солей ми!<роэлемеитов в исходную минеральную среду илн использовании гидрогсля сил»кагеля, соде)р)кащего этн соли: 1!1SO.! 7Н20 (15 мг/л)

40; СОС1 6Н20 (15 мг/л) 60; . НЛ О (15 мг!.;!) 100; Ге804 7Н О (100 мг/1) 78.

Предлагаемый ciiocoo позволяет уьслнч)!ть срок хранения сухих м1!кроорганизмов, например родов Са»01!<1,"., Муcococcus, 132cillus до

3 — 5 ier.

Способ консервации микроорганизмов, прсДУс1)12 ;)»в;!10ВГ»Г! ah!et Iul!82111!e II!!TaTcahtloA среды с гндрогелем силикагеля, о т л !1 ч а 10 и и и с 51 тем, что, с целью удлинения сроков хранен 151, используют и!дрогсль силикaãåëÿ, содержа!из!й Iio край»с и мсрс один ми!<роэлсмеl!ò, Выбранный из ряда Со, Z») Мп, Мд, Мо, Fc, V. при этом количество микроэле,tet! To!i состаВляст (мГ, л cttptttl

Со 15 — 20

7.» 10 — 20

Мп 15-- 25

Мо. 30 — 40

МО 15 — 30

1тс 20 — 400

V 15 — 30

ICTO IIIHI< Itttri)Opt):Г!цин, IlpliliaThlli BO Вннма1»с при экспертизе:

1. <Вторс <пе св»дстельство ¹ 227279, М. Кл. - С 12С 11/32, 1968.