Способ определения демиелинизирующих свойств биологического материала

 

ОП ИС вЂ” А — "НИ -Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

11 13 5425IO

Союэ Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 05.04.74 (21) 20151971 13 (51) М. Кл. - А 61В 10,100

G 01N 33, 16 с присоед1шеиием заявки ¹

Государственный комитет

Совета Министров СССР

ll0 делам изобретений и открытий (23) Приоритет

Опубликовано 15.01.77. Бюллетень ¹ 2 (53) УДК 591.481,1 (088.8),1BTB Ои1 Оликования Описс!ния 01.03.77 (72) Авторы изобретения (71) Заявитель

Л. И. Равкина и А. Г. Горюнова

Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов

АМН СССР (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДЕМИЕЛИНИЗИРУ1ОЩИХ

СВОЙСТВ БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА

Изобретение относится к области медицины и может найти применение для диагностических целей при различных заболеваниях центральной нервной системы.

Известен способ определения демиелинизирующих свойств биологического материала на культуре нервной ткани, выращиваемой из кусочков мозга (мозжечка) эмбрионов хкивотных (1).

Однако известный способ пе обеспечивает быстрого п более надежного ответа.

Целью изобретения является ускорение способа определения демиелинизирующих свойств биологического материала. Эта цель достигается тем, что исследуемьш материал инкубируют с однодневной органной культурой головного мозга взрослого животного.

Способ осуществля1от следующим образом.

Извлекают стерильно головной пли спинной мозг взрослого животного, вырезают участок белого вещества (из мозжечка, из больших полушарий спинного мозга) и помещают в чашку Петри. Затем этот участок разрезают на мелкие кусочки размером 0,5 2 мм и отмывают раствором Хенкса. Культивирование органных культур проводят по методу множественных органных культур на специальных дисках из оргстекла и миллипоровых фильтрах типа Aufs. Оптимальной для нервной ткаии является среда, состоящая из среды

МЭМ-40о/о, лактат (рН вЂ” 7 О) — 40%, куриного эмбрионального экстракта — 10%, глюкозы (400 мг на 100 мл среды) и антибиотиков пеиициллш1а и стрептомицина по 100 ед. иа 1 мл среды. Газообразная среда состоит из 5% СОа, растворенного в воздухе.

Одновременно с посадкой 1:,3 00 II

Через 24 — 28 ч (в зависимости от концентрации сыворотки пли IIIKI30!33) кусочки извлекают и фиксируют несколько часов в 10%-ном растворе формалина, заливают в парафин, а срезы окрашивают по методу Шпальмайера.

Ь,3 сочки 3(ожпо также за 111B ITI 13 целлоидин или делать замороженные срезы и окрашивать любым методом иа миелшовыс волокна.

20 Положительная проба считается в случае растворения (уменьшения) миел!!новых оболочек в исследуемых кусочка. ;.

Постановку контроля делают с сывороткой здоровых людей или животных.

2о Предлагаемый! способ обеспечивает возможность быстрого и надежного определения демиел!шпзирующих свойств сыворотки крови и ликвора, что повысит эффективность лечения и изучения демиелинизирующих боЗо лезией. 542510

Формула изобретения

Составитель С. Малютина

Техред И. Карандашова

Корректор А. Галахова

Редактор Т. Девятко

Заказ 21621 Изд. № 168 Тираж 654 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

Способ определения демиелинизирующих свойств биологического материала, заключающийся в инкубации его с тканью головного мозга, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, исследуемый материал инкубируют с однодневной органной культурой головного мозга взрослого животного.

Источники информации, принятые во внима5 ние при экспертизе

1. Апц, N. Y. Acad of sci, 19б5, 122, 1280.