Способ консервирования эритроцитов

Авторы патента:

ПУШКАРЬ НИКОЛАЙ СИДОРОВИЧ

ШРАГО МАРИЯ ИОСИФОВНА

БРЕДИХИНА ЛЮДМИЛА ПАВЛОВНА

ЛУБЯНЫЙ ВЛАДИСЛАВ ГЕОРГИЕВИЧ

ИТКИН ЮРИЙ АБРАМОВИЧ

КАЛУГИН ЮРИЙ ВЛАДИМИРОВИЧ

ГУЧОК МИХАИЛ МИТРОФАНОВИЧ

ЛОБЫНЦЕВА ГАЛИНА СТЕПАНОВНА

ПАНКОВ ЕВГЕНИЙ ЯКОВЛЕВИЧ

КАПРЕЛЬЯНЦ АЛЕКСАНДР СУМБАТОВИЧ

Союз Соввтскии

Социалистических

Республик () 569613 (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявленй30.10.75 (21) 2185538/13 с присоединением заявки ¹ (23) Приоритет (43) Опубликованс 05.06. 77.Бюллетень № 21 (45) Дата опубликования описания20,07.77 (51) М. Кл.

А 61 К 35/18//

//А 01 М 1/02

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 615.42 (088. 8) H. С. Пушкарь, М. И. И1раго, . 1, П. Бредттхина, B. Г. Лубяны й, 10. A. Иткин, 10. В, Калугин, М. М, Гучок, Г. С . Лобынцева, E. Я. 11анков и А. С. Каире;п,янп (72) Авторы изобретения

Институт проб ем криобиолог«и и криомедицины

А11 Украинской ГС Р (71) Заявитель (54) СПОСОБ КО11СЕРВИРОВАН11Я ЭРИТРОПИТОВ

Изобретение относится к области криобиологии и медицины и может быть использовано для долгосрочного низкотемпературного консервирования эритроцитов, Известны способы низкотемпературного консервирования форменных элементов крови-эритроцитов с помощью жидкоГо азота и использования криозашитных средств (полиэтиленоксида) с различными скоростями замораживания от 1-300-400 С/мин i 1).1р

Однако известный способ не обеспечивает высокой жизнеспособности клеток.

11ель изобретения вЂ” повышение жизнеспособности клеток.

Эта цель достигается тем, что эритроциты смешивают с 20-30%ным водным раствором полиэтиленоксида молекулярного веса около 1500, содержащим 0,01 К фосфатный буфер, и при рН 7,0-7,3 выдержи- 20 вают 30 60 мин при температуре 15-22 С, а замораживание в жидком азоте ведут со скоростью 300-400 С /мин ° о

Способ осуществляют следующим образом. 25

К эритроцитной массе донорской крови, консервированной на растворе ЦОЛИПК No7, хранившейся не более 3-х суток при температуре 4 вЂ” 8оС, после удаления плазмы по каплям прибавляют криозашптный раствор при осторожном взбалтывании.

Гостав криозашитного раствора следующий: 20-30Ъ-ный водный раствор полиэтиленоксида молекулярного веса 1 500, содержащий 0,01 М фосфатный буфер. PII устанавливают в пределах 7,0-7,3. Эритроцитную л1ассу и криозашптный раствор смешивают в соотношении 1; 1 (по объему), Полученную кле т очную взвесь вы пер жиг вают 30-60 мин при температуре 1. -22 С, а затем переводят в контейнер и замораживают быстрым погружением в жидкий азот со скоростью 300-400оС/мин. Оттаивание производят на водяной бане при темо пературе 40-42 С. Эритроциты выделяют из оттаяной клеточной взвеси и ис. о и зуют по специальным показаниям, Пример. К криозашитной л;ассе крови донора, заготовле п ой на глюко;юцитратя

НоМ консерванте 11ОЛИПК, . 7" по каплям

Сос(эв((тель С, Малютина

Ред(ы;.: Ор О, 1 -вапова Тех(эед H. !).ндреl (ук 1(,орректор А, Гриценко

Заказ ) 32 вЂ” f 1 22 Тираж (5 (7 Подписное (!H1(11РГ1 Р1 РОСударо )ВЕИНОГО КО((1ГГЕта СОВЕта МИНиетрОВ СССР по делам изобретений и открытий

1130351 Москва,:! =-.35, Раушская наб., д. 4/5

Фт((11(а)1 Г(Г(11 "Г! а -ент":, 1". У>(ты"ород, ул. Проектная, 4

Прн ((г(ар,.:11(о(1(l- !1Е;", „::ii =C!11 -. -;,: «(гб(111!!,(1(р(20ОР.=!1Ы(э! В(р)1и -! 1:, 6,::;-!его!) ((енн:.. ::.у вЂ”.:=О(те(!(г(>1

C 1

11I0IIcIIó1,i!1! .cã е:-,.: ", .(500 с 1)11 (,(.1, соде(> (((1(й ((,.-:,вЂ”.()),-., !TI - и б (1(тто - о СО - 1 вЂ”,О-(!Е(ти!! ( (=O -" .-"; !

J при re!,(!(e"):=iт f;;f-= 2(: С )т(= 1(: л!1; 3-.-! во=>(я

ЭКВ1(пи(орр -lir! ВЫЛОда СЬобэдНОГО ГЕМОГХ Обн=

На 1Е ОТМЕ (аЕ iCB, СрЕ(.Птtt g((et; f(1 i ð Эрнт=

-тав(тяе т 0";о О,тiij!! Оо...его(э)р(I 1 !)cf(TI(òÎC сни

;;(а(.-:е =! -(-;::. t )пгт:;р(твттен(1 гч т, кгрн i (-,-; вЂ” .

11ЕМ„- !а 1 11. ° .)i ГО i)i т:1.((! Г?(КОС !)О PIT РОЦ!! (го(! экспоз и:,.-:. 20 -11ы,:.,(О. (иэ 1 нленоксидом гЛОЛ»1;-(-!яр(1от(> В&С-) 1 500 ПЕ ВЛИИЕт., И ЕЕ

И".- ., ° ())((*Е(1 -l; -;, Иi;i Зт(1К(О!т! .(?Кт(fi )НИ=,(К!

r-,â€”:. i: ":. t! l li;l!и (г., жа!(-т вр,i<1(дк 1! и газо 1 со

„1 „, .вЂ”.: о; 3!.((! - ", (!0 С/;ri(II::. \ )о Ор(! Па((1 Е

Яа вод)-,(Q!! i)!! i,-- ((!I -»,1)1! c!1111 (! 1)е - 0--4 2 !,)О) . .j i)f i, )ра: ) ii -:;!»ii ?(Е!(ткОСТ!(Сос (рарf) (ß= оrT» <- -.; О.- . (О.! . т(ОС-,; ап =-(>11iT

Х тс тв " .. --" :, ", ;. Э :-". т(() !Оититн-".o,В: - :.- -ПП!В ,(!у? вЂ”,,:-.-! га (г! () ; ттт! г.?В1(- т 1,11 е (тг

1; ! )Л)Г(--; вЂ”.;-- О:г Г =l ".: <:, ) i П(! -:,-,(()С i ЭР.! р!;l".*i; i i! ттг!с т Il)l к ll, (,(." ll I i! . .; и )к (" l"= .""! i1(»Рт? < тг !1!01 О т,);г . г).:,i)11;г);- :)Пт;: T," J () )f .1! : о(р, 1,;;.р i т !(:j (!i(гс(,, пОдВижнОсть э ри т р(1 пи то в в пл аз ма 1, 3 7 -1 0,00,"? мк/секф)см, после замораживания, и ресуспендиГ>звания в плазме 1,30 i т 0,004 MI /cd!I (>Ч/ см. По данным просвечи ваю(ней и растровой электронной микроско11(III во всех случаях опытов (инкубирование с к чопротектором и низкотемпературное консервирование) ультраструктура эритроцитов сохранена.

Предлат аемый способ низкотемпературного консервирования эритроцитов обеспечивает долговечное их хранение в жизнеспособном cor. тоянии.

Формула изобретения (. I(îño6 консервирования эритроцитов в ирису пствии полиэтиленоксида с последуОн(И((ЗЕМОРажи(аНИЕМ иХ В жИдКоМ азоте, о т л и I а ю (1(и и с я тем, что, с цепью повьппения жизнеспособности клеток, э1)ит()»питы смен(ива!От с 20-30/о-ным Вод ным Гаствор() м полиэтиленоксида молекуляр)5 нг)го асса около 1500, содержа(цим 0,01 ((-, (1)ос(1)а(н(,гй буфер,и при PH 7,0-7,3 выдер) тк (и(!к)т их 30:-:60 мин при температуре (,) вЂ” 22 <:, а за((ераживаиие в жидком и з:те (ведут =o скорростъю 300=400 С/мин.

1(сто ((и((ки и vlzpvaL(ии, принятые во вниго: Н(.:-» ПРИ ЭКCIT(>t?тИЗЕ:

1. Метод низкотемпературной консерва.чи((фон:итон, "Трансплантация органов и )каией" т Рща), 1972, с. 495.

Похожие патенты: