Способ получения пептидамидов или их солей
Союз Советских
Социалистических
Республик ( ИЗОБРЕтеНия К flAlEHTV (61) Дополнительный к патенту (51) м. Кл.2 (22) Заявлено 261175 (21) 2008489/2191855/ /23-04 (23) Приоритет 27.0374 (32) 280373 С 07 С 103/52 // А 61 К 37/02 Гааударстаэннь4Ф каммтат Саавта Манаатраа СССР аа дваам аэабратанаа н аткрытай (31) 4454/73 (33) Швейцария (43) Опубликовано 301177. Бюллетень № 44 (4Ь) Дата опубликования описания 04D178 (53) УДК 547.964.4. .07(088.8) (72) Авторы изобретения Иностранцы Бернхард Риникер и Вернер Риттель (Швейцария) Иностранная фирма Циба-Гейги АГ (Швейцария) Pl) заявитель (54 ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕПТИДАМИДОВ ИЛИ ИХ СОЛЕЙ СК23 ! 1 2 3 4 5  — СК-CO — Гац-AcH tl,eu-сер Тре-Ц,и6— 8 9 1о И 1а 13 и -т 1 елт — heu-Гло -Tps — Tup - Tpe — Глн— 16 17 18 19 20 21 -4cn — Фен — Аен-ЯОЭ-Фен -Гас - Tpe— 22 23 29 25 26 27 — феи -flpe-Глн -тре-4ла — Иле-Гл(129 30 31 2 — (1Л вЂ” ГЛΠ— 4ла- йрО-МИ Ь/ Изобретение относится к способу получения новых пептидамндов, которне могут найти применение в медицине. Известны способы замьткания дЖульфндного мостика между цистеинами в молекуле пептида путем окисления йодом пептида, у которого меркаптогрупцы цистеинов свободны или блокировагде Ф водород, первичная аминогруппат - .— алании заменен ?-аспарагином и/или ? -иэолейцин заменен ? -треот нином и, в соответствующем случае, 2 ны трнтильной или ацилам дометильной защитами (1J, $2) . С целью получения новых пептидамидов, содержащих 32 аминокислотных 5 остатка, производных кальцитонина, которые обладают фармакологическими свойствами и расширяют средства воздействия на живой организм, предлагается способ получения пептидамидов 10 общей формулы одна аминокислота или несколько аминокислот .заменены в положениях 8,11, З4,16,19,22 и 24 другой аминокисло той, а нменноа Й- метионин8 вали 30 RoMр Й -Tp&QHiiH ?-лизнному ?-тиро 582756 В тонокослойной хроматографии (TCX) применяют следующие системыг 45 43С: трег -амиловыг» спирт-.ггзопропанол-вода (51 г 21 г 28) 45 s 8rep -бутаиол-3%-ный водный аммиак (70!30) 52 г и«бутанол-ледяная уксусная 50 кислота-вода (75г7,5г21) 52А .s и-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода (67г10:23) 70 г этилацетат-пиридин-вода (40г 20г40) верхняя. фаза,66 89 г этилацетат-ацетон-вода (72г24г4) 96 s 8rqp-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода (67г10г23} 100 s этилацетат -пиридин-ледяная уксусная кпслота-вода (62г21гбгlj) 101А ггг -бутанол-пиридин-ледяная ) ксуаная кггелота-вода (42 г 24 г 4 г 30) 1О2А г ледяная уксусная кислота-метилэтилкетоп-муравьиная кислота-вода (50г30г10г16) 65 гз н X. лейцином, г.-фенилаланин @ Г -леггцином, Z.-фенилаланин 9 й-лехаци ном, й-фенилаланинз "1г-тирозином и Ъ -глютамин " Х-аспарагином или их солей, заключакядийся в том, 4то сое (инения общей формулы CH ASH 4 f 6 7 Я-СН-СО-ГЛц- Асн-Лей-Сер-УрЕ-ЦИе - !О Э 9 го гf И Q 1+ ФЕ -Иаггг - ЛЫ-Гли -Tpe -тир-тра — (лн-АепФ г7 $9 М Й© 21 И 2 —,eW -дм — М - yu= Гц - т рв- г)гэй-(1po— И М 26 27 М 29 30 г -1ЛН вЂ” ТРЕ- Ала — НЛЕ- ГЛО-ваЛ-Гла Ana— g2 -губ — Йн, (gl) где Кимеет)указанные значенияг 20 г - аланйнзя заменен Х -аспарагином й/или 2 -изолейцин г заменен Х-трео.4 янном и где, в соответствующем)случай, одна аминокислота или несколько аминокислот aiMe.aiHM a nonomeHHax 8 11 14 16,19,22 и 24 указанными аминокислота- ми, причем меркаптогруппы остатков 1 и 7 свободны или защищены тритильной или ациламидометильной группами, окисляют йодом в растворителе при комнатной темйературе с образованием дисульфидиой связи. Целевой йродукт выделяют известными приемами, В качестве растворителя предпочтительны метанол или уксусная кислота. 35 Б Качестве кислотно-аддитивных солей. используют соли терапевтически применяемых кислот, например соляной, уксусной, серной, фосфорной и сульфоиовой кислот, или низших алкансульфоновых, бднзолсульфоновой,или толуолсульфоновой кислоты. 107 : этилацетат-пиридин-вода (49:24г 7) 112Е ги -бутанол-пиридин-муравьиная Кислота-вода (44г24г2г20) 121 : изопропанол-25%-ный водный ЬммиаМ-вода (70г 10:20) 121A : изопропанол-253-ный водный аммиак-вода (85г5.:10) 1tp — значения для ТСХгТС -иа готоых пластичных из силикагеля SL 254 и рмы A t e e, Ь1 г г ф а Г е тг; Ц вЂ” на готовых пластинах из ЦеллюлоЬы фирмы Мат ск 0ад гггзт,асс(Ь; ТА — на алокс-пластинах (45 г АЦ.О фирмы Ca ag, Mvtteut + 3,5 r гипса, толщина в 0,3 мм). В примерах применяют следующие сокращения Еок — per-бутилоксикарбонил X — карбобензокси ОтЕу — сло",<ный тре -бутиловый эфир Онп — сложный и -нитрофениловый эфир Оме — слоягный метиловый эфир Ocy — слоя<ный оксисукцинимидовый эФир тЕу — простой грот -бутиловый эфир Емн — P -меркаптопропионил. Пример. Получение Н-Цис-Гли-Асн-Легг-Сер-Тре-Цис-Иет-Лей-Гли-Тре-Тнр-Тре-Глн-Асп-Фен-Асн-Лиз-Фен-Гис-Тре-Фен-Про-Глн-Тре-Ала-Тре-Гли-Вал-Гли-Ала-Про-И0 (Тре -кальцитонин М). 27 80 мг P-Цис-(три)-Гли-Асн-Лей-Сер-Тре-Цис-(три)-Мет-Лей-Гли-Тре-Тир-Тре-Глн-Асп-Фен-Асн-Лиз-Фен-Гис-Тре-Фен-Про-Глн-Тре-Ала-Тре-Гли-Вал-Гли-Ала-Про- И Н -трифторацетата растворяют в 40 мл 95%-ной уксусной кислоты и по каплям при сильном перемешивании за 1 ч прибавляют к смеси 100 мг йода в 120 мл 95%-ной уксусной кислоты. Затем перемешивают еще 2 ч при комнатной температуре, добавляют 200 мл воды, экстрагируют избыточный йод взбалтыванием небольших порций смеси со 100 мл тетрахлорметана до обесцвечивания экстрагируемой смеси. Водный раствор высушивают лиофилизацией, остаток растворяют в 5%-ной уксусной кислоте и фильтруют через колонку с ионообменника Р 11 фирмы г4агг:К(слабо-, основной, ацетатная форма). Элюат высушивают лиофилиэацией и получают Тре г-кальцитонин- М-ацетат, 80 мг которого растворяют в 5 мл воды и при перемешивании прибавляют к раствору l,2 мл слабоосновного ионообменника в виде свободного основания, рН раствора 6,5, ацетат выпадает в виде мел- . кого осадка. Смесь перемешивают 2 ч, при этом рН раствора повышается до 7,1 ° Осадок и ионообменник отфильтровывают, промывают водой и осажденный пептид растворяют в теплой 90%-ной уксусной кислоте. Смолу отфильтровывают, промывают 90%-ной уксусной 582756 кислотой, уксуснокислый раствор высушивают лиофилизацией и получают 74 мг ТрЕ -кальцитонина M в виде уксуснокислой соли высокой степени чистоты по показаниям ТСХ и электрофореэа. 5 ТА sky(52) 0,49 1кальцитонин М г Йф (52) 0,55) . ТЦ .М (101А) 0,52 1 кальцитонин М) R.g (101А) О, 57). )1рм тонкослойном электрофорезе (пл4с-(О тины иэ целлюлозы, рН 1,9, 2 ч, 280 9) пройденное расстояние 4,5 см от катода (кальцитонин M : пройденное расстояние 4,5 см). При анализе аминокислоты после 4 олного гидролиза (6 í. ПС(110 С, 24 ч) продукт содержит вычисленное количество аминокислоты. Исходный материал получают следую- Шим образом. A. 3.-Ала-Тре(тБу)-Гли-Оме. Смесь 18,9 r З-Ала-Онп, 13,4 r Н-Тре-(тБу)-Гли-Оме-хлоргидрата, 100 мл диметилформамида и 6,2мл ф,-метилморфолина перемешивают 17. ч при комнатной температуре, растворитель отгоняs0T при пониженном давлении, остаток растворяют в сложном уксусном эфире, промывают и сушат. Раствор упаривают досуха, остаток кристаллизуют иэ сме си эфир — петролейный эфир и получают 16 г продукта, т-пл. 104-106 С. 30 Б. Н-Ала-Тре-(тБу)-Гли-Оме. 13,3 полученного в и. A продукта гидрируют в метаноле в присутствии 1,5 г палладиевого угля (10% палладия) и получают 9,4 г бесцветной 35 смолы. В. <-Тре- (тБу) -Ала-Тре- (тБу) -Гли-Оме. 9,4 г полученного в и. Б продукта и 13, 2 г Ь -Тре- (тБу) -Осу растворяют в 100 мл,диметилформамида и выдер- 40 живают 17 ч при комнатной температуре. Реакционную массу вливают в 500 мл ледяной воды. Выпавший осадок отфильтровывают, высушивают и кристаллизуют иэ смеси ацетон — петролейный эфир, 45 в которую добавляют в, небольшом количестве воду и получают 13,6 г продукта, т.пл. 193-195 С. Г. Н-ТреjтБу)-Ала-Тре(тГу)-Гли-Оме. 13, 1 r полученного в и. В продукта гидрируют в 750 мл метанола в присут- ствии 2,6 r палладиевого угля. Получают 9,95 г бесцветного масла. Д. Х-Глн-Тре-(тБу)-Ала-Тре-(тБу)-ГлиОме получают как производные тетрапеп- ® тида аналогично и. В. Продукт кристаллизуют иэ метанола, выход 10,7 r, т.пл. 198-202 С. Е. К-Глн-Тре-(тБу)-Ала-Тре(тБу)— -Гли-Оме. 10 г полученного в п. Д продукта гидрируют в 1 л метанола в присутствии 2 г палладневого угля. Получают 8,2 г продукта. Ж. Ь -Тре- (тБу) -Фен-Про-Глн-Тре (тБу)-Ала-Тре.(тБу)-Гли-Оме. 65 К. 8,2 г полученного в п. Е продук та прибавляют 8,3 r K-Тре(тБу) -Фен-Про-Он, затем 100 мл днметилформами да, 4,0 r М-оксисукцинимида и 4,2 r дициклогексилкарбодиимида, смесь перемешивают 17 ч при комнатной температуре, выпавшиую в осадок дицикло" гексилмочевину отфильтровывают, фильМрат вливают в 1,3 л ледяной воды, че реэ 2 ч осадок отфильтровывают, сушаМ и смешивают с 120 мл сложного уксусного эфира. Иерастворимвшийсн порошок отфильтровывают, промывают сложным уксусным эфиром, сушат и получают 8,5 r продукта ТС :Ry(121A) 0,78g В (102A) 0,85; Ry (43С) О, 71. 3. 2-Тре(тБу) -Фен-Про-Глн-Тре (тБу) j -Ала-Тре-(тБу)-Гли-ОИ. 5,15 г полученного в и. Т продукта растворяют при нагревании в 110 мл 90%-ного метанола, охлаждают до 23 С и прибавляют 13,5 мл 1,0 н. водного раствора едкого натра. Через 10 мин. к смеси добавляют 45 мл воды, а через 5 мин еще 25 мл воды. Через 20 мин раствор выливают в 270 мл ледяной 0,05 н. водной соляной кисло ты, осадок отфильтровывают, промывают ледяной водой и смесью вода - ацетонитрил (4:1)> высушивают н получают 4,1 г продукта. ТС: R)(45) 0,27; Р.у (100) О, 33; Rg (43C) О, 28. И. Н-Тре- (тБу) -Фен-Про-Гли-Тре (тйу)-Ала-Тре (тБу) -Гли-ОН. 3, 65 r полученного в п. 3 продукта суспендируют в 125 мл диметилформамида и гидрируют в присутствии 0,5 г палладиевого угля (10% палладия). 11родук (2,62 г) растирают с водой, филь-, труют и высушивают. и ТС:Rf (100)- 0,12; R)(52) -= 0,23, К. K -Асн-Лиз (тБу) -Фен-Гис-Тре- (тБу)-Фен-Про-Глн-Тре (тБу) -Ала-Тре- (тБу)-Гли-ОН. 7,2 г -Анс-Лиз-(Бок)-Фен-Гис-МИАН растворяют при нагревании до 80 С в 30 мл диметилформамида, раствор охлаждают до -39 C и прибавляют к нему 7,74 мп 3,7 н. хлористого водорода в диоксане, затем 1,42 мл тренг-бутилнитрата. Смесь вИдержиэайэ 10 мин при -10 С, .вйовь сжимают температуру до -30 C и прибавляют по каплям раствор 6,45 г Н-Тре-,(тБу)-Фен-Про-Гли-Тре-(TBy)-Ала-Тре(тБу)-Гли-ОВ и 7,8 мл И-этилдииэопропиламина в 70 мл диметилформамида. Раствор выдерживают 18 ч при О С и затем вливают!в 400 мл ледяной 1%-ной уксусной кислоты. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой и высушивают в вакуу-. <е над хлоридом кальция. Продукт де гидрируют с ацетонитрилом, фильтруют на нутче и высушивают. ТС Ry (70) 0,331 К У (100) 0,21. 18? 7 6 Л. 2. -Асн-Ли з (Пок ) -Фен — Гис-Тре(тБу) -Фен-Про-Глк-Тре- (тГу) -Ала-Тре (тБу) -Гли-Вал-Гли-Ала-Про- И Н . К смеси 7,5 г -Асн-Лиз (Бок) -Фен-Гис-Тре- (тБУ) -Фен-Про-Глн-Тре- (тБУ)— -Ала-Тре (тБУ) -Гли-ОН, 0,99 г Л -окси5 сукци нимида, 1, 84 r Н-Вал-Гли-Ала-Про-Л Н в 70 мл диметилформамида прибавляют 1, 11 г дициклогексилкарбодиимида и перемешинают 5 ч при 45 С. Реакционную массу вливают и 1,2 л о охлажденного до 0 С эфира, выпавший осадок отфильтровывают и сушат. Продукт-сырец смешивают дважды (каждый раэ) с 200 мл смеси ацетонитрил-метанол (9:1), фильтруют, высушинают и получают 8,5 г продукта. TC: R.y (45) .= 0,50; )1 (96} —.— 0,46; Я. (100) = 0,29; R. .(121) = 0,80. М. Н-Асн-Лиз(Бок)-Фен-Гис-Тре(тБу}— -Фен-Про-Глн-Тре(тБу)-Ала-Тре(тБу) — 20 -Гли-Вал-Гли-Ала-Про- N Н -ацетат. 7,05 r полученного н и. А продукта гидрируют н 400 мл 80t-ной уксусной кислоты н присутствии 1 r палладиеного угля (10Ъ палладия) и получают 25 6,6 r продукта. TC : к у (96) 0,35; y (121) 0,72; (45) = 0,27. 7, -Тре-(тБу) -Тир-(тБу) -Тре (тБУ)— Глн-Асп(ОтБу)-Фен-Асн-Лиз(Бок)-Фен- ЗО -Гис-Toe(тБУ)-Фен-Про- Глн-Тре-(тБУ)— -Ала-Тре(тБу)-Гли-Вал-Гли-Ала-Про-ЯН4 565 мг k-Тре(тБУ)-Тир(тБу)-Тре-(тБу)— -Глн-Асп(СтГу)-Фен- Ы Н й(Н растворяют при нагревании до 80 С н 4 мл дйметил-З6 формамида, затем раствор охлаждают до -20 С, прибавляют к нему 0,35 мл 3,7 н. хлористого водорода в диоксане и О 067 мл Тренг -бутилнитрита. Смесь I перемешивают 10 мин при -1э С и к 40 полученной массе прибавляют по каплям охлажденный до О С раствор 600 мл Н-Асн-Лиз (Бок) -Фен-Гис-Тре (тГУ) -Фен-Про-Глн-Тре (тГУ) -Ала-Тре (тБу) -Гли-Вал-Гли-Ала-Про-ЫН -ацетата в 5 мл 45 диметилформамида и 0,33 мл Я-этилдиизопропиламина, перемешивают 5 мин при -15 С, нагревают до 23 С и продолжают перемешивать еще 6 ч. Затем реакционную смесь вливают в 100 мл ледяной воды, выпавший осадок отфильтровывают,промы" вают водой и высушивают при пониженном. давлении над хлоридом кальция. Смесь переосаждают из смеси метанол-вода, осадок отделяют, сушат растирают с ацетоном и получают 650i мг продукта. 55 Я.у (43С) = О, 33, 11. - (70) = 0,60. О. I-Tpe (тГУ) -Тир (тБУ) —,Тре (тБУ) -Глн-Асп (ОтБУ) -Фен-Асн-Лиз {Бок) -Фен-Гис-Тре (тБУ) -Фен-Про-Глн-Тре (тБу) -Ала-Тре (тБУ) -Гли-Вал-Гли-Ала-Про- К Н . g) 610 мг полученного в п. Н продукта гидрируют в 25 мл 80В-ной уксусной кислоты в присутствии палладиевого угла. Продукт растворяют в 50 мл водонасыщенного й-бутанола. Для удаления 65 уксусной кислоты раствор нромынают днажлы разбавленным соловым раствором, дважды полунасьпценным раствором хлорида натрия и нодоР. Бутанольной слой отделяют, упаривают при пониженном давлении и получают 605 мг продукта н виде бесцветной пены. ТС: R y (100) 0,20; Ry (96). - 0,40 П. Бок- Цис- (три) -Гли-Асн-Лей-Сер(тГу) -Тре- (тБу) -Цис (три) -Мет-Лей-ГлиТре (тБу) -Тре (тБу) -Глн-Асп (ОтБу) -ФенАсН-Ëèý (BoK ) -Фен-Гис-Тре (тБУ) -ФенПро-Глн-Тре (тБ у) -Ала-Тре (тГу) -ГлиВал-Гли-Ала-Про- NH . К смеси 605 мг ".l-Тре (тБУ) -Тир (тБу) -Тре(тБу)-Глн-Асп(ОтБу)-Фен-Асн-Лиз(Бок) -Фен-Гис-Тре-(тБу)-Фен-Про-Глн:-Тре(тБу)-Ала -Tpe(тБу)-Гли-Вал-ГлиАла-Про NП, 330 мг декапептида Бок-Цис- (три) -Гли-Асн-Лей-Сер (тБу)— -Тре (тБу) -Цис (три) -Мет-Лей-Гли-ОН, 46 мг 1-оксибензтриазола и 10 мл диметилформамида прибавляют 75 мг дициклогексилкарбодиимида перемешивают 90 мин при 40 С и затем 18 ч при 23 С, выпавшую в осадок дициклогексилмоченину отфильтровывают, маточник вливают в 100 мл ледяного эфира, свободного от перекисей. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают эфиром и нысушинают. Полученный продукт-сырец растворяют н смеси диметилформамидметанол (1:1), раствор фильтруют через колонку (высота 100 см, диаметр 4 см) на Сефадекс (алкилиронанный сшитый полидекстран), которая приготовлена в той же смеси. Собирают фракции по 5 мл, высушивают досуха, вначале при 11 мм рт.ст., а затем при 0,01 мм рт.ст. и 45 С температуры ванны. Чистоту полученный фракций контролиру ют ТСХ на силикагеле. Получают Бок-Цис-(три)Гли-Асн-Лей-Сер(тБУ)— Тре (тБУ) -Цис (три) -Мет-Лей-Гли-Тре (тБУ)— -Тир (тБУ} -Тре (тБУ) -Глн-Асп (ОтБу) -Фен-Асн-Лиз (Бок) -Фен-Гис-Тре (тБУ) -Фен-Про-Глн-Тре(тБУ)-Ала-Тре(тБУ)-Гли-Вал-Гли-Ала-Про- Н с Р (100) 0,54; Р (70) 0 65. 135 мг полученного продукта растворяют в 5 мл трифторуксусной кислоты, раствор оставляют на 1,5 .1,5 ч при комнатной температуре,добавляют к нему 30 мг трифенилкарбино ла и оставляют еще на 10 MHH ° Затем упаривают досуха на роторном испарителе при температуре бани 30 С,остаток растворяют в свободном от перекисей эфира. Полученный порошок отфильтровывают, промьпзают эфиром и сушат при пониженном давлении над едким натрием. Получают 87 мг Н-Цис-(три)— -Гли-Асн-Лей-Сер-Тре-Цис(три)-Мет-Лей-Гли-Тре-Тир-Тре-Глн-Асп-Фен-Асн-Лиэ-Феи-Гис-Тре-Фен-Про-ГлнТре-Ала-Тре-Гли-Вал-Гли-Ала-Про- Н— трифторацетат, который может быть 582756 20 СН25Н 9 — си — сО-Гл((-Аеи-heu — сер-Tpe— 7 8 Э >0 11 12 13 25 -)),ие- Ne(ii- Лей- Гл1(-Тре- Тир-1рв— 1Е 15 iS (7 19 (9 СΠ— Глн - Лей — (ран — hex — Ацз- (р ен-Г((а— И 22 23 24 25 24 27 ЗО -Ype-(реи- иро- Q((- Tpe-hno- йлеМ О Зе З З2 -ГЛМ вЂ” 56p- ГЛМ вЂ” (!(Л0 — flpo — МЙ2 Яу где R имеет 1(казанные,значения! 2 -ала((ин заменен Й -аспарагинЬи и/или Z -изолейции2 заменен Т -треонином и где, в соответствующем случае, одна аминокислота или несколько аминокислот заменень! в положениях 8,11,14,16 Д9,22 и 24 указанными Ими» нокислотами, причем меркаптогруппы остатков 1 и 7 свободны или защищены тритильной или ациламидометильной группами, окисляют йодом в растворителе при комнатной температуре. 2. Способ по и. l о т л и ч а ю щ и f с я тем, что в качестве раство-" рителя используют метанол или уксусную кислоту. Источники информации, принятые во Ю внимание при экспертизе! 2. )1атент СССР В 453828, кл. С 07 С 103/52, .1975. 29 Þ 3i 32 -gNN Ãóà - A 30- QPO-NH g ЦИИИПИ" . Заказ 3650/713 Подписное Тираж 553 Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 использован в дальнейшем без дополнительной очистки. Аналогично получают следующие сов» динения Асн -Tpeu-кальцитоиин M, .ТЦ Rf (101A) 0,53; g (112E) Тонкослойный электрофорез (на пластинках из целлюлозы) : цН 1,9 и 16 В/см, 1,5 ч; пройденное расстояние 3,7 см. по направлению к катоду. Дезамино-Аснтз-Тре
ТЦ: Ri (45) 0,50; ky (101A) 0,59; (112Е) 0,43. Тонкослойный электрофорез рН 1,9, 16 В/см, 1,5 ч; пройдейное расстояние i2,4 см IIo направлению к катоду. Дезамино-Вал -Лиз » -Лей -Tep -Асне (23 Тре -кальцитонин М; ТЦ ) (101А) 0,51! Я4 (112Е) 0,45. Тонкослойный электрофорез :IpFI; 1,9, 16 B/ñì, 1,5 ч; пройденное расстояние 3,7 см по направлению к катоду дизамйно-Лиз-Лей (4 (В .-THP!IeАсн е -Тер т -кальцитонин А; ТЦ; (, (45) Ъ; 47; ky (101A) О, 50 IL) (112Е) 0,42. Тонкослойны! электрофорез рН 1,9, 16 Влксм, 1,5 ч; пройденное расстояние 3;7 см по направлению к катоду. Лиэ. -Лей -Тир -Асн -Tepe7 н 12 И, 1((-кальцитонин М; Тц : R g (45) 0,43! Ry (101A) 0,43; R g (112K) 0,38. Тонкослойный электрофорез: рН 1,9! 16 В/см, 1,5 ч; пройденное расстояние 4,9 см по на!1равлению к катоду. Лей(-Тирт"-кальцйтония И! ТЦ t % (101A) 0,50! TA Йу (52) 0,45. Тонкослойный электрофорез на пластин,ках из целлюлозы : рН 1,9, 280 В/см, 2 ч; пройденное расстояние 4,5 см по на фавлению к катоду. (В Лей -Acaee -Тир -кальцитонин М! ТЦ: kg (101A) 0,33; TA: kg (52) 0,47. Асн -кальцитонин М, %у (101А) 0,5Ь! (ll2A) О 58. 45 Формула изобретения.1. Способ получения пептидамидов общей формулы CHg S (з + з Ю Х я-СИ-СО-Гли -Аен-hei-сер-Тре-цис8 9 1в t1 12 Я 14 -иве-Лей-Гю-тре-ъ(!р-Тре-Глн— 1з Я 17 8 19 2в 21 -ken -ФЮн — АОИ вЂ” лмэ- (рен- fee Tpe— ЙЭ 2+ 25 йе 27 26 (РЕН. — ((Р©- ГЛН-Трв-Афа-ПЛВ- pg— где R. — водород или первичная амино группа; — аламин заменен X -аспараги). йВ ном и/или — изолейцин заменен 7-треони ном и, в соответствующем случае, Ьдна аминокислота или несколько аминокислот заменены в положениях 8 11, 14, 16, 19, 22,и.24 другой аминокислотой, а именно : Х-метионин валином (( треОнин X -лизиномр Е «тирозин -лейцином, Х фенилаланнн ° 2..-лейцином, -фенилаланин I -лейцино!1, 2 -фенилаланин 8 -тирозиt3 ном и 7 -глютамииЕ((2 -аспарагино(я, или их солей, о т л и ч а ю щ и йся тем, что соединение общей форму-! лы 1. (;!редер Э., Любке К. Пептиды. И.,, Мир, 1967, с. 350
