Способ определения эфира пиридоксина

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕИ ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

01) 602858 (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено26.04.74 (21) 2019935/23-04 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликованоl 5.04.78.Бюллетень ¹14 (51) И. Кл, Cq 01 И 31/22

Государстеенный комитет

Соавтв Министров СССР, оо делам иэооретеннй н открытий (53) УДК 543.42. .06 2 (088.8) (45) Дата опубликования описания 31.03.78, (72) Авторы изобретения

А. М. Алиев, Э. А. Гасанова

Азербайджанский государственный медицинский институт им. Н. Нариманова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТИЛОВОРЭ ЭФИРА

ПИРИДОК СИ НА

Сн, он

QIzoeH3

ОН

6н

ОН HQH Q

Ен5 и

Метиловый эфир пиридоксина, или 4-метиловый эфир пиридоксина) Я ридоксин

Изобретение относится к области аналитической химии, а именно к определению метилового эфира пиридоксина, являющегося промежуточным продуктом синтеза при производстве медицинского препарата пиридоксина гидрохлорида (витамина В6) °

Метиловый эфир пиридоксина не обладает витаминной активностью и является антагонистом витакяна В, поэтому необходимо проводить испытание на отсутствие его припримесей в поепарате пиридоксина гидрохлорида.

Известен способ определения эфиросциртов методом ацетилировання Ц, Ацетилирующая смесь, состоящая из 1 об.ч. уксусного ангидрида и 3 об.ч. лирична, является на- 2о

2 илучшей для анализа. Не вошедший в реакцию ангидрид, взаимодействуя с водой, образует уксусную кислоту, которую определяют титрованнем. Параллельно титруют контрольную пробу. Количество уксусной кислоты, пошедшей на ацетилирование, находят по разности.

По этому способу невозможно определить содержание метилового эфира пиридоксина в присутствии пирпдоксина, Известен способ определения метилового эфира пяридоксина в присутствии пиридоксина, который основан на его свойстве в присутствии борной кислоты с 2,6-дихлорхинонхлоримидом в аммиачно-буферной среде давать индофеноловь и краситель голубого цвета растворимый в.бутиловом спирте, с последующим колориметрированнем окрашенного соединения (2).

Однако получаемый окрашешый продукт реакции быстро разлагаэтся, что цривоцит к снижению точности анализа.

Для повьпцения точности анализа по предлагаемому способу анализируемую смесь обрабатывают борной кислотой, раствором соли

602858 диязотированного стрептоцида с послецую цим добавлением к псщученной смеси ртути и колориметрированием окрииенного ссединения.

Hs фиг. 1 приведены спектры поглощения растворов ртутных комплексов азокрясителей пиридоксина и смеси пиридоксина с его л1етиловым эфиром в присутствии борной кислоты, а также спектры поглощения яэокряситепей пиридоксина и метилового эфира пиридоксина, где l — аэокряситепь пиридоксиня; 2 — ртуть- о комплекс яэокрясителя пирлдоксиня; 3 — яэокраситель пиридоксина в присутствии борной кислоты и ионов ртути; 4 — яэокраситепь л1етилового эфира пиридоксина; 5 — ртутькомплекс аэокрасителя метилового эфира пиридоксина 6 — смесь азокрасителя пиридоксина и метилового эфира лиридоксина в присутствии борной кислоты и ионов ртути.

СФ-4 А, (-1 см, 4-5мл, рН657,0.

О

Азокрасители пиридсксиня и его метилового эфира имеют максимальное светопогпощение при 460 нм, их ртуть-комплексы при

520 нм, 25

И присутствии борной кислоты и ионов ртути азокраситель пиридоксина не имеет явно выряженного максимума сютопоглощетмя.

Однако, наблюдается сл ябое плечо при 460 нм, щ

Раствор смеси аэокрасителей пиридоксина и его метилового эфира в присутствии ионов ртути и борной кислоты имеет максимальное сютсп огпощеиие при 520 нм. Следовательно, в присутствии борной кислоты только азокря ç5 ситель лютилового эфира пиридоксина образует окрашенное в красно-фиолетовый цвет внутрикомплексное соединение, что позволяет обнаружить возможные примеси метипового эфира пиридоксина в препарате пиридокси 40 нягя дрохл орид а, B мерную колбу емкостью 25 мл помещают 1 мл испытуемого раствора.метипового эфира пиридокжна (окало 0,01 г в 100 мп воды) ° содержащего пиридоксин гидрохлорида около 0,2 мг добавляют 5 мл 4%-ного раствора борной кислотьц 2 мл раствора со— ли циязотировянлого стрептоцида; через 23 мин приливают 2 мл 10",-ного раствори ацетатя натрия и взбалтывают. Содержимое колбы нагревают на водяной бане при 6070 С в течение 5 мин при частол1 встряхио ванин. Затем охлаждают и добавляют 1 мл

0,1%-ного раствора соли ртути. (дихлорида или дибромида, или яцетатя ил i нитрата окисной ртути). Через 3 мин объем колбы доводят до метки.

Фотоколориметрируют с сине-зеленыл светофильтром, B кювете с толщиной слоя 5 мм.

Контрольным раствором служит вода.

Параллельно, тякчм же образом проводят

) опыт с 1 мл раствора стандартного образца метилового эфира пиридоксина, содержащего

0,2 мг пнридоксина.

Количество метилового эфира пиридоксина в 1 мп испытуемого раствора в граммах (X) вычисляют по формуле

3< о,оо .

2о где 3„- оптическая плотность испытуемого раствора;

2„- оптическая плотность стандартного раствора;

0,0001 — содержание метилового эфира wридоксина в 1 мл раствора стандартного образца, в граммах.

Приготовление раствора стандартного образца, содержащего 0,2 мг пиридоксина.

0,01 r (точная канска) метилового эфира пиридоксина и 0,02 г (точная навеска) пиридоксина гидрохлорида растворяют в воде в мерной колбе емкостью 100 мл, доводят объем водой до метки и перемешивают. Раствор хранят в прохладном месте, в темноте, Годен в течение одного месяца;

В таблице приведены результаты опытов по определению содержяюя метилового эфира пиридоксина в присутствии пиридоксина с помощью различных солей ртути, Чувствительность предлагаемого способа определежя метилового эфира пиридоксина

1 мк /мл (известным способом — 5 мкг/мп), 1

t- o o г ч о ! + + о î о о о

+ +

Я

m o о

I о о

t г- о о

Я" -1 о о о о з

+ + С)

co o л о

I о о

1 I о о о о о

Щ с4 о о о с о o o 1

Т- о о о о о Я

Ф о

r, o o o (5

С ) о л о г- 0 ж о Ф о о о о о о о о о о

Ю с9 о

Ю

С9

О"

Ю Я

o o

t г t

Р р) CQ о

t г с с9 о о г

С о

С о о о а

Ж

С9 р

0 о о 1 С ) с о" о" о гР о о о о о

0 0 О 0 о о" о о о о о о о

О„o 0 о

О 0 о

î î o o ч о о о о" о о о„ о о о„о о" о о о о о о

И Е

Ь а Й о

Cg о о (6

hJ г.1

+ +

tQ

03 о о

tQ б) о о о о о

o„o о о

Г

Ю о (1 о о с о

Г1 ч

О" С г

Ф-(о

1 о г03 о о

° C и сЛ а

lQ

С )

СЯ

tQ

Г) сд I

С) Ж

Ж

Щ С9 ар гф 0) Я (0 Ю с9 с0 с о"

7 формул а иэобре т ння

Способ олредепежя метилового эфира пиридоксщна путем добавлежя к пробе вещества борной кйслоты с испспьэоважем последуюшего копориметрироважя окрашенного соединения, отличающийся тем, что, с целью повьшвжя точности определежя, пробу вещества после добавления борной кислоты обрабатывают раствором сспи

2858 диаэотированного стрептоцида, с поспедуюшим добавлежем к полученной смеси сопи р у н.

Источники информации, принятые во вжмаже ири экспертизе:

1, Губен-Вайль Методы оргажческой химии, том 3 М., Химия, 1967, с, 974.

2, Государственная Фармакопея СССР, Х иэд. М )1968, с, 573.

С оставитель В. Гладков

Редактор Е. Кучуева Техред 3. Фанта Корректор C. Гарасиняк

Заказ 1840/40 Тираж 1112 Подписное

Ш!ИИНИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППГ! "!патент, t, Ужгород, ул, Проектная, 4