Способ получения антибиотика эндруцидина

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

Государственный-квинтет

СССР но делам нзоБретеннй н открытей

Иностранцы

Мотоо Шибата, Эйджи Хигашиде, Казунори Хатано, Комеи Мизуно, Мицуко Асан и Мазаяки Мирон (Япония) (72) Авторы изобретения

Иностранная фирма

"Такеда Кемикал Индастриз, Лтд" (Япония) (7l) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИБИОТИКА

ЭНДУРАЦИДИНА

Изобретение относится к области медицины, в частности, к фармацевтической промышленности.

Антибиотик эндурацидин новый и способ его получения не описан. б

Целью изобретения является получение анти биотика эндурацидина, обладающего сильным антимикробным действием в отношении грамположительных и кислотоустойчивых бактерий.

Эта цель достигается тем, что штамм Strep- 10

tomyces fungicidicus  — 5477 (ATCC — 21013) или штамм Streptomyces fungicidicus  — 5477 (АТСС вЂ” 21014) выращивают в аэробных условиях на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, с по- 1а следующим выделением целевого продукта и при необходимости переводят антибиотик в соль.

Штамм Streptomyces 1ипуicidicus  — 5477 вы- 20 делен из почвы в Нисиномиа, Ялония. Хранится в коллекции культур Мэриленд США под номером АТСС вЂ” 21013.

Культурально-морфологические признаки. лактозу, сахароэу, декстрин, глицерин или просеянное желе. В качестве источника азота можно использовать пентозу, соевую муку, кукурузную патоку, мясной экстракт, аммониевую соль, органические или неорганические соединения азота. В cpeav можно добавлять небольшие

Форма спорофор спиральная; споры имеют овал 0,9 х 1,6-1,1 мкм. Поверхность спор ше. роховатая.

Агар Чапека. Вегетативный мицелий обильный, распространенный, проникает в среду, бесцветный. Воздушный мицелий обильный, порошкообразный.

Растворимый пигмент отсутствует.

Глюкозный агар Чапека. Вегетативный мицелий обильный, распространенный, бесцветный.

Воздушный мицелий обильный, порошкообразный, бледный (Рдж Х1, 1н — d), обратный— теплый, темно-желтый. Растворимый пигмент— нет или слабо-желтый.

Глюкозо-аспарагиновый агар. Вегетативный мицелий обильный, ровный, бесцветный. Воздушный мицелий обильный, светлый, оливково-се-.рый (Рдж LJ, 23 — d) до бледного или иногда грязно-белый, обратный — кремневогь цвета (Рдж ХЧ1, 19 — f) или бесцветный. Растворимый пигмент отсутствует.

Бульон. Вегетативный мицелий обильный, пла ваюший на поверхности среды, небольшое количество бесцветного мицелия падает на дно. тивный ингредиент.

Водный раствор экстрагируют н-бутанолом.

Экстракцию водным раствором соляной кислоты и н-бутанолом повторяют несколько раз до получения бутанольного экстракта, содержащего большое количество активного ингредиента.

3 633488 4

33488

11 633488 рают и в нем доводят рН до 8,0 4 н, раствором едкого натрия, затем сразу же добавляют

100 л н-Бутанола. Смесь перемешивают и дают отстояться до образования двух слоев. и-Бутанольный слой промывают 50 л дистиллирован- 3 ной воды, затем дважды экстрагируют по 15 л

1/200 н. раствором соляной кислоты. Солянокислые вытяжки соединяют и доводят их рН до 8,0 4 н. раствором едкого натрия, затем сразу же добавляют 10 л н-бутанола. Смесь пе- 1й ремешивают и дают отстояться до образования двух слоев. Бутанольный слой отбирают и дважды промывают дистиллированной водой по 1/3 объема бутанольного слоя.

К промытому таким способом бутанольному I$ слою добавляют дистиллированную воду в количестве 1/4 объема. Смесь упаривают под пониженным давлением при наружной температуре не выше 70 C. Концентрат подвергают такой же обработке как влажный мицелий по И данному примеру, получают около 0,5 r сырца порошка с активностью 5000 — 7000 ед/мг против Staphylococcus aureus.

Пример 4. 100 л кислого раствора, содержащего активный ингредиент, полученный экстрагированием и-бутанолом аналогично примеру 3, пропускают через колонку, заполненную

1 кг активированного угля, причем колонка предварительно промывается соляной кислотой, и получают 70 л почти бесцветной фракции, со- Е держащей активный ингредиент. Эту фракцию пропускают через колонку, заполненную 42,5 л

Амберлита JR с получением слабощелочного водного раствора. Этот раствор упаривают при сравнительно низкой температуре при пониженном давлении, К концентрату добавляют и-бутанол, емесь перемешивают для переноса активного ингредиента в бутанольный слой. К бутанольному слою добавляют эфир, не содержащий перекисей, при этом выпадает активный ингре,диент; либо к бутанольному слою добавляют .1 н. раствор соляной кислоты до рН 4,5, затем его упаривают или вымораживают. Соответственно получают 1,8 r порошкообразного вещества с активностью 7500 —.10000 ед/мг против Staph.

aureus или 1,9 г порошкообразного вещества с активностью 7500-10000 ед/мг.

Пример 5. 1 r сырого порошкообразного вещества, полученного по примерам 3 или 4, растворяют в смеси 500 мл метанола и 1 мл 1 н. раствора соляной кислоты. После пропускания раствора через колонку, заполненную 10 r активированного угля, обработанного гмеглш 4 мп 0.1 и плпяипй тсигпг т л и 1АА кап

Пример 7. Вдвеколбына 2л вливают 500 мл среды, содержащей,%: 2 глюкозы, 3,5 кукурузной патоки, 1,5 углекислого кальция и воду. В среду вносят мутант Str. funrsir irlic Вес rr Ч77 Г ЛтГГ ) 1h1 A\ .;....r .

Воздушный мицелий обильный, белый, прозрачная среда, растворимый пигмент отсутствует.

Глицериново-бульонный arap, Вегетативный мицелий обильный, распространенный, бесцветный. Воздушный мнцелий обильный, порошкообразный; обратный — серовато-желтый(РджХХХ.

19 — i). Раство имыи пигмент отс тств ет

П. сорбозу, суорозу, раффинозу,, Зскулив. cукпилат натрия, цитрат натрия.

Проявляет антибнотическую активность в отношении грамм-положительных бактерий.

Штамм Streptomyces fungicidicus  — 5477 (АТСС-21014) получек из штамма  — 5477

AT CC †2101 с нри охлаждении. Осадок отфильтровывают и. промывают эфиром. Получают 500 мг гидрохлорида с активностью 15000 ел/мг против Staph.

aureus.

Порцию осадка (гидрохлорида) 100 мг растворяют в 100 мл 20%-ного водного метанола, затем этот раствор пропускают через колонку, содержа|цую 5 мл Амберлита М-4. Колонку элюируют метанолом, элюат упаривают, получают концентрат, который вымораживают, промывают ацетоном и эфиром.

Получают 50 r белого порошка (свободная форма антибиотика) с активностью 10000—

15000 ед/мг против Staph. aureus.

Пример 6. 16 л бульона, полученного по примеру 1, фильтруют для отделения

4 кг влажного мицелия. Этот мицелий экстрагируют трехкратным объемом 70%-ного раствора водного ацетона при перемешивании в течение 3 — 4 ч. К ацетоновой вытяжке добавляют

280 г активированного угля (Сирахаси-А, Япония) и 280 r Гифло Супер Цел (Лжонс Мэн,вилл Сейсл Корп., США), смесь перемешивают в течение 1 ч. После фильтрования уголь промывают десятикратным объемом ацетона, затем десятикратным объемом метанола по объему фипьтрата. Обработанный таким образом уголь дважды экстрагируют двадцатикратным объемом (по объему угля) подкисленного водного ацетона при перемешивании в течение 3 ч.

Экстракты соединяют и доводят рН до 5, затем растворитель выпаривают и оставляют

1,5 л водного раствора. Этот раствор пропускают через колонку с 200 мл Амберлита 3R-45 (Н), затем перегоняют под пониженным давлением для удаления растворителя. После добавления 5 л воды рН доводят до 8,5 и трижды экстрагируют и-6yraHorroM в количестве 1/3 объема раствор». Вуганольиый экстракт промывают водой и упаривают под пониженным давлением до остатка в 500 мп водного бутанола.

К последнему добавляют 5 л эфира и получают осадок, который отфильтровывают и сушат с получением 4 г порошкообразного сырца эндурацидина с активностью 10000 ед/мг против

S tap h. aureus, 14

Составитель Г. Смирнова

Техред О. Андрейко Корректор С. Шекмар

Редактор Н. Потапова

Тираж ЯУ Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 6417/50

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

13 мала, 1 кукурузной патоки, 1 соевой муки, 0,3 хлористого натрия, 0,5 пептона, 0,5 утлекислого кальция и воду (pH 7,0), в которую вносят посевной материал.

Инкубирование ведут при 28 С при перемешиванни и скорости аэрации 30 л/мин. Максимальная активность культуральной жидкости наблюдается после 78 — 90 ч инкубации при рН среды 7,84 и равна 1500 ед/мл.

Формула изобретения

Способ получения антибиотика эндурацидииа, отличающийся тем, что штамм

Streptomyces fungicidicus  — 5477 (АТСС вЂ” 21013) или штамм Streptomyces fungicidicus  — 5477 (АТСС вЂ” 21014) выращивают в аэробных условиях на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, с последующим вьщелением целевого продукта в.

10 при необходимости переводят антибиотик в соль.

Союз Советских

Социал истимеских

Республик (61) Дополнительный к патенту— (22) Заявлено 23. 04.75(21) 2127438/28-12 (23) Приоритет — (32) 30.04.74 (31) B 51867 (331 ПНР (43) Опубликовано 15.11 78 Бюллетень №42 (45) Дата опубликования описания1ь.>t.;а

Гооударстаеннв и комитет

Совета 1еинистроа СССР по делам изобретений

II OTKPblTNH

Иностранцы

Ян Пахольски, Тадэуш Филипчак, Рышард Зыгмунд Янчик и Марян Бартчак (72) Авторы изобретения (ПНР) Иностранное предприятие

"центральны Остуодэк Бадавчо-Розвоевы Машын Влукенничых

"1 1ЭНТМАТЭКС (ПНР) (71) Заявитель (54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ БЕСКОЛЬ11ЕВОГО ПРЯДЕНИЯ

Изобретение относится к текстильной промышленности и касается оборудования для получения пряжи бескольцевым способом.

Известно устройство для бескольцевого прядения, содержащее неподвижно смонтирова нную и подсоединенную к источнику разряжения цилиндрическую прядильную ка меру с тангенциальными каналами длч ввода воздуха и патрубком для подачи волокон и головку с пряжевыводным каналом, установленную на противоположном источнику разряжения конце камеры(1), Недостаток известного устройства состоит в сложности обслуживания его, поскольку патрубок для подачи волокон выполнен закрытым и в нем не предусмотрены средства для обеспечения доступа во внутрь него для удаления скапливающихся волокон и сорных примесей.

Целью изобретения является упрощение обслуживания.

Цель достигается тем, что предлагаемое устройство имеет пластину, свободно установленную на верхней части камеры, при этом в патрубке вдоль него выполнен срез, а пластина размещена в плоскости среза и прижата к патрубку посредством пружины.

На чертеже изображено устройство, разрез.

Устройство содержит цилиндрическую прядильную камеру 1, смонтированную неIIo;1BIIii ito и подсоединенную одним концом к патрубку 2 источника разряжения (не показан). На противоположном конце камеры посредством втулки 3, прикрепленной винтами 4 к камере 1, установлена толовка 5 с осевым пряжевыводным каналом 6, В средней части камеры 1 выполнены тангенциальные каналы 7 для ввода воздуха.

Над каналами 7 камера 1 имеет патрубок 8 для подачи волокон. На втулке ° 3 свободно установлена пластина 9, прижатая пружиной 10 к патрубку 8. В патрубке вдоль него выполнен срез 11, в плоскости которого размещена пластина 9.

2О При создании в камере 1 разряжения в нее по патрубку 8 поступают разделенные волокна, которые воздушным вихрем, создаваемым входящими в камеру по каналам 7 воздушными потоками, формируют