Способ получения микроагрегатов белков, меченых йодом 125 или йодом 131

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ пп634746

Оаюз Советских

Социалистических. Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 02.08.76 (21) 2391?26/28-13 с присоединением заявки № (51) М,К .

А 61К 9/38 (23) П

23 Приоритет (43) Опубликовано 30.11.78. Бюллетень № 44 (45) Дата опубликования описания 30,11.78 по делам изобретений и открытий (53) УДК 576.8.095. .17:664.38 (088.8) (72) Авторы изобретения В. И. Станко, В. Н. Кулаков, А. М. Можайский, М. Н. Славин и T. Л. Баженова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МИКРОАГРЕГАТОВ БЕЛКОВ, МЕЧЕНЫХ ЙОДОМ 125 ИЛИ ЙОДОМ 131

Изобретение относится к области медицины и касается получения радиофармацевтических препаратов.

Известен способ получения микроагрегатов белков, меченых йодом 125 или йодом

131, путем агрегирования молекул белков и йодирования.

Однако известный способ является трудоемким и не позволяет получить микроагрегаты с молекулярным весом около 300 10з, 10 обеспечивающие ускорение радиодиагностики.

Целью изобретения является упрощение технологии производства и получение микроагрегатов с молекулярным весом около 15

300 10, обсспечивающих ускорение радиодиагностики.

Эта цель достигается тем, что агрегирование проводят в растворе формальдегида в присутствии аланина и полученные микро- 20 агрегаты белка фракционируют.

Пример 1. Микроагрегаты йод 125 на основе альбумина сывороточной крови человека. 25

К 5 мл 20%-ного альбумина добавляют

5 мл 0,4 М фосфатного буфера с рН 8,1 +0,05, затем вводят 0,1 мл формалина и

2,4 мг Р-аланина и интенсивно перемешивают при комнатной температуре. Через 24 ч ЗО смесь подвергают гельфильтрации на колонке (25Р,100) с сефадексом G-200 в фосфатном буферном растворе с рН 7,5 со скоростью 35 мл/ч.

15 мл фракции, входящей со свободным объемом и содержащей 10 — 15 мг/мл белка, подвергают электрохимическому йодированию. Радиохимический выход 75 5%.

Пример 2. Микроагрегаты йод 131 на основе альбумина получают при использовании на последней стадии (электрохимическом йоднровании) радиоизотопа йод 131.

4,5 мл 20%-ного раствора альбумина в

5 мл фосфатного буфера с рН 8,0 -0,1 смешивают с 0,1 мл формалина и 2,3 -0,1 мг аланина и перемешивают в течение 20 ч при 30 С. Затем 5 мл этой смеси наносят на колонку (25> 100) с сефадексом G-200 в фосфатном буфере с рН 7,5 и при скорости протока 35 мл/ч собирают головную фракцию, 17 мл которой подвергают электролизу в присутствии радиоизотопа йод 131 по известному способу. Радиохимический выход 80+-6%. Очистку от неорганических форм йода осуществляют гельфильтрацией на колонке (5 ;20).

Пример 3. Микроагрегаты, меченые йодом 125 или йодом 131, на основе у-глобулина сыворотки крови человека.

634746

Составитель С. Малютина

Техред 3. Тараненко

Корректоры: В. Дод и Т. Добровольская

Редактор М. Дмитриева

Заказ 1915/5 Изд. № 718 Тираж 666 Подписное

НПО Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, К-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

R 5 мл 16о/о-ного раствора у-глобулина добавляют 5 мл 0,2 М фосфатного буфера с рН 8,3+0;1 и 0,05 мл формалина.

Смесь выдерживают при 53 С в течение

4 ч без перемешивания, 5 — 6 мл полученной 5 смеси наносят на колонку с 6-200, собирая фракцию, выходящую со свободным объемом, 17 мл этого раствора с содержанием 10—

12 мг/мл подвергают электрохимическому 10 йодированию в присутствии радиоизотопов йода 125 или йода 131.

Радиохимический выход 75+50/o.

Пример 4. Агрегирование Т-глобулина осуществляют при 50 С в течение 4,5 ч спе- 15 ремешиванием буферного раствора, содержащего 800 мл у-глобулина и 0,05 мл формалина.

Фракционирование и йодирование проводят как в примере 3. Накопление микроаг- 20 регатов у-глобулина, меченых йодом 131, в печени превышает 90 /о.

Предлагаемый способ позволяет приготавливать микроагрегаты нужного размера практически из любого сывороточного бел- 25 ка. Агрегирование проводят в обычной химической посуде при комнатной или немно. го повышенной температуре без защитных устройств, таким образом способ технологически прост и надежен, что позволяет организовать серийный выпуск радиоактивных препаратов на основе белков.

Микроагрегаты белков, меченые радиоизотопами йода, получаемые предлагаемым способом, практически полностью (более

90 ) накапливаются в печени и быстро выводятся из организма и поэтому оказывают незначительную лучевую нагрузку на исследуемый орган и организм в целом.

Формула изобретения

Способ получения микроагрегатов белков, меченых йодом 125 или йодом 131, путем агрегирования молекул белков и йодирования, отличающийся тем, что, с целью упрощения технологии производства и получения микроагрегатов с молекулярным весом около 300 10, обеспечивающих ускорение радиодиагностики, агрегирование проводят в растворе формальдегида в присутствии аланина и полученные микроагрегаты белка фракционируют.