Способ определения фибринолитической активности плазмы крови

 

Со(аз Советских

Социалистических

Республик

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К kBTQPCKQM3 СВИДЕГЬЛЬС.ИУ 4 .;» (61) Дополнительное к авт. свпд-гу (22) Заявлено 09.08.74 (21) 205232! 28-13

С Iipl(COCÄII;!C .ilIC»l 12 ЯВкl!

1 (>1 j . !1. г»„1.А 61К, 35, 14

1 G 01 33 16

I ((23) 1IpI(OpEITCT

I (43) Ог(; ол(и(»0(!апо 30.12./8. Бю...!c(i. l(!> М --(8

i (!О) (,ат»(0111 il:i;OB» 1 пя 0 !" м ((1 3

Гасударственный комитет

153) УДЫ, 616.153.962. .4 (088.8) по делам изобретений и открытий (72) Авторы изобретения Б. А. Кудряп(ов, Ji. А. Ляпина и И. 1П. Баскова (71) Заявитель Московский ордена Ленина и орден:; Трудового Красного Знамени государственный университе-. и;-;. Г".. В. Ломоносова (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФИБ(РИНОЛИ 114»lf-ÑКОЙ

AKTN8HOCTH ПЛАЗМЫ КРОВИ

Изобретение отпосизся к области гематологии.

Извсстеп с!(особ определения фибриполитической актив!(ости плазмы крови путем (апссспи (1 испытус.,10!I плазмы;-12 фиор!11(0ву!о пластин!у с последующей инкубацисй и измерения зоп лизпса 11).

Однако известный способ пс по: воляст дифференцировать фсрментативпый !1 нефермента пп;пьш фпбрпнолпз.

Целью изобретения является дифференцирование фермснтативного и неферментативного фибринолиза.

Эта цель достигается тем, что в фибр гповую пластину дополнительно вводят 0,03—

1% -ный монойодацетамид, 0,6 — 2% -пую

B-аминокапроноиую кислоту и 3--5%-пый цитрат 1(aTpf(s(, испытуемуlо плазму делят па две порции, одну из них предварительно ипкубиру(от с B-амипокапроповой кислотой, а другую — с физиологическим раствором, затем обе порции наносят па полученную фибриновую пластину и по величине зоны лизиса, произведенной первой порцией плазмы, определяют нефсрмснтатпв Ый фибринолиз, а по разнице величии зон лизиса, произведенных второй и г!Срвой порцией плазмы, определяют ферме(ггатив ый фибриполиз.

Способ осуществляют слсду(ощи:,; образом.

1-1сфср: с (тат,Bin 0 фпбрпнолитичсскую ак(ивнос-. ь опрсдс (>l;oT путем напсссппя пл;!змы крови па ..ластппу пссгабплпзиро-! а 1 i!! (!i О воi! Ор ll и 11 1! 1! 3. Ср с ((1lя 301.,л пз licа В

5,! "1 с i:!(Iсci. (п(я !., 12 i i(Bi i»pOBEI 110clc I(l((vi, бацп(i Bpli 37 С.

Для этого н ci20!!лпзпроваш-:ые пластины (рибр(„((2 готовят следующим образом, Ip

5 м.(0,35%-ного раствор;1 фпбрпногсна В

10 cз!Ссп, состОЯщсп пз p2BI(a(x ОоъемОВ 0,2 М трис-б фера (рН 7,35)» 3,8%-ного цитрата натрия, добавляют 2 мл 0,1М трпс-буфера (p1i 7,35), содсрж,iE;cio 1,33 мг монойодацстах;пда плп мо(ойодуксуспой кислоты и

15 43,.2 мг F-2 ми(;OIIHilp0110Boll кислоты (Э.(,КК), а т((кжс 0,1 х:л тромбппа (100 мг па мл физиологи (еского раствора). После пр. готовленпя ф бргпювыс пластины Bblдери пи;;io Г при oi(i(2г(ПОЙ температ ре пс

20 менее часа. 112 таки.; фибриновы.; пластппак искл(0 !ается п(ооцссс актпB2(E!(1(плазМiiпо! PII 1.

"(ас гь 1(,12c Т!!!1 1 О ГОВЯ (такпм хкс Образов(, по 003 добавления 0,0 -";,1-I(0(е-амппокапро25 IIO l0!I КПС. 0" 11. Н 1 таКП (ПЛ2СТПна:; МОХКПО опрс. „лять наряду с пеферментатпвпым (1 г - " » 1 ° 1

IB0pп1(0лПз0к(!! II.TIIBIIOCÒÜ ак! ПВ2ТОров и-1 1; (!Пот 1 ° 1

П Р О 0 ь: B,l (i 3. и 1:1 (P o B I I с л 0 В с и а (,l (i ж: IÇ0 потно-0 освоботкдают от тромбоцптов цснтрифугпроваппсм ц(ггратной крови при

639551

Формула изобретения ос-.пвитсл! С. Малютина 1 e>:pe,÷ С. Лнтипенко

1(оррск)ор Т. Досровольская

Редактор H. Хуоларова

Заказ 2208/9 Изд. i 71 Тираж 666 Подписное

11110 Государственного комитета СССР по дела> пвоорстсиий и о!крытии

113035, Москва, )1(-3о, Раушская паб., д. 415

Типография, пр. Сапунова, 2

3000 об/мин в тс:!Свис 15 — -20 > !It!; и делят на две tioputttt. С цел)но блокады плазмина исслc7мсм > 10 ItopL 1110 Itлаз.">1Ы илl . 3> г 70бм:!it T0t> и!1к> Оир)>101 с равным 007 Itoxt 6 >о ной SAKI((конечная концентрация 3% ), Вторую порцию плазмы инкуб)!руюг с равным обч>смом 0,85о)п-ного раствора 11)С1.

1-ià приготовлснныс фибриновыс пластины наносят пробы плазмы крови или зуглобулиновой фракции локально в количестве

0,05 мл и пнкубируют при 37 С в течение

2 — 4 ч, после !его производя г !гзмсрснпс зон лизиса ь местах нанесения плазмы илн

3 > глоб> лl(новой фр(1кции.

Зоны лизиса измеряют произведением двук перпендикулярны.; диаметров и выра)кают в мм- .

IIo вели !1(нс зоны лнзиса, произведенной первой порцией плазмы, определяют нсфср)>1С1!ТаТИВНЫй фИОРИНОЛИЗ> а НО РазпиЦС ВС.".I 1!!Н 3 ОHI:Л11311С(1, IIРО)IЗБСДЕН11Ы; ВТОРОII 11 первой порцией плазмы, определяют фср>r,I0IIT;tTII 3нЫ11 фиб1)1:110;Iиз.

I Ipc1ëÿгасмыЙ сносоо нОЗвол51ст использовать фиорнноген и тpot tolitl любой партии, дифференцировать нсфермснT;IT!!I!itt н и фсрментативный фибринолиз и блокировать 1)к !ивпость плазмина.

Способ оирсделс ия фибринолитической (IК! ИВНОС Г1: I!,71!,IМ1>1 ЕРОВИ It>, TÑ>t Н(1НЕССН(!Я испытуемой нлазмь. на фибриновую пластину с п(голоду!Ощей игн(убацией и измерения

;3011 лизиса, отл и i а ющий с я тем, что, с цел)ио диффсрснцирован 15I ферментативног î и нсфсрмсн -aòèâtto. 0 фибринолиза, в

1r) фибриновую пластину дополнител)»10 вводя-. 0,03 1% -ныи .;!онойодапета аид, 0,6

2%-ну!о е-а;!иноканроновую кислоту и 3—

5", 1)-!I! Ill цитрат натрия> испытуемую плазму дс I5!T!Ia две порции, 07rty из ни:(прсдвари15 тельно инкубируют с в-аминокаироновой к1 слотой, а другую — с физиологическим раствором, затем обе порции наносят на »олучсн ую фибриномlo пластину и по всли-! инс зоны лизиса, произведенной первой

lioP !Ill(ill Il.7113!511>1, ОиРсделнlот нефс1) мснт(1 ти1)ный ф (бриги)л)!3, à Ilo разнице вслн it!!I

:>ои 7 r!3 !!0;I. rrpo!r It)(T(crt rt t>ra в Орой rt:!Ср вон

I!op II исй 11 1 а3 мы. Î.! рс,! с.151107 ()срмс111 атиив

Нl,!й фно!)ИНОЛИ3.

)5 I I(To н!1 !"! 1! Itформации, l l P 11 Н 51 1 >1 Е В 0 13 Н И К! Il r I, (I l P l i Э К С Н Е Р т И 3 С

1. «Ла)бора 1орнос:(ело», 1971, М 6, о.

32!) 320.