Способ выращивания микроорганизмов

 

Союз Советских

Социалистических

Реслублнк о и Й с дн и 4

ИЗОБРЕТЕНИЯ (i 661002

К АВТОРСКОМУ СВИДВТИЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 03.01.77 (21) 2440408/28-!3 с присоединением заявки (23) Приоритет— (51) М. Кл.

С 12 В 1/04

С 12 D 13/1О

Государственный комитет

СССР ло делам изобретений н открытнй (53) УДК663. .18 (088.8) Опубликовано 05.05.79. Бюллетень № 17

Дата опубликования описания 25.05.79 (72) Авторы изобретения

К. А. Калунянц, Л. Ф. Иванов, Л. И. Голгер, В. Г. Кожемякин, Л. С. Лосякова, Н. Г. Бочкарева и P. Г. Козлова (71) Заявитель

Всесоюзный научно-исследовательский биотехнический институт (54) СПОСОБ ВЫРАЩИВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способу выращивания микроорганизмов, и может быть использовано для производства фермеятных препаратов из культур микроорганизмов, выращиваемых на твердых питательных средах.

Известен способ выращивания микроорганизмов на твердофазной питательной среде, включающий стерилизацию среды, увлажнение ее, засев посевным материалом, выращивание микроорганизмов и вымывание продуцируемых ферментов из микроорганизмов растворителем (1) .

Недостатком известного способа является то, что при производстве ферментных препаратов он не предусматривает многократного использования накопившейся биомас- )s сы, что приводит к незначительному выходу ферментного препарата.

Цель изобретения — интенсификация процесса и увеличение выхода ферментного препарата.

Поставленная цель достигается тем, что после вымывания ферментов из культуры микроорганизмов удаляют избыток влаги и возвращают ее на стадию выращивания, при этом в качестве растворителя используют смесь воды с твердыми частицами питательной среды размером от 0,1 мк до 5 мм.

Целесообразно также выращивание микроорганизмов, вымывание ферментов из культуры микроорганизмов и удаление избытка влаги осуществлять многократно через каждые 1 — 12 час (число циклов от 6 до 8) .

Способ выращивания микроорганизмов на твердофазной питательной среде осуществляют по следующей технологической схеме.

Простерилизованную, увлажненную, засеянную посевным материалом питательную среду, раскладывают в растительной установке и инкубируют при оптимальных технологических параметрах в течение времени, равного 0,2 — 0,6 от общего времени культивирования микроорганизмов, обеспечивающего максимальный выход продукта. Коэффициент 0,2 — 0,6 зависит от условий культивирования, выбора продуцента и получаемого продукта. По истечении первой стадии выращивания проводят стадию вымывания ферментного препарата и удаления избыточного количества влаги, после чего процесс выращивания, вымывания и удаления избыточного количества влаги из культуры повторяют в циклично-временном режиме с ин661002 тервалом от 1 до 12 час до полного истощения субстрата или автолиза клеток культи вируемого микроорганизма.

В качестве вымывающего агента применяется растворитель, содержащий смесь твердых частиц питательной среды размером от

0,1 мк до 5 мм.

Пример 1. Выращивание продуцента пектиназы.

Питательную среду, состоящую из 50е/р свекловичного жома и 50О/о пшеничных отрубей, стерилизуют, увлажняют до конечной влажности 60О/р, засевают посевным материалом, размещают в растительной установке и выращивают микроорганизм при оптимальных технологических параметрах. По истечении 24 — 30 час выращивания (зависит от структуры среды) культура проходит первую стадию вымывания растворителем, в качестве которого используют воду, содержащую молодые частицы свекловичного жома размером от 0,1 мк до 8 мм, в количестве 2 объема на 1 объем культуры. После прохождения стадии вымывания культура проходит стадию удаления избыточного количества влаги, для чего применяют воздушный поток, а также частичное отжатие воды путем прессования. Пройдя стадию удаления избыточного количества влаги, культура возвращается на стадию выращивания нри оптимальных технологических параметрах, и цикл повторяется.

При культивировании данного продуцента через 2 — 8 час цикл повторяется, число циклов — — от 6 до 8.

Пример 2. Выращивание нродунента пектолитического комплекса.

Питательную среду, состоящую на ЗОО/0 из пшеничных отрубей и на 70О/р из свекловичного жома, стерилизуют, увлажняют до конечной влажности 60О/р, засевают споровым посевным материалом в количестве

0 15"/, к весу исходной питательной среды, размещают в растительной установке и культивируют н оптимальном технологическом режиме. I lo истечении 20 — 26 час выращивания, культура проходит первую стадию вымывания растворителем, в качестве которого применяют солевой раствор, содержащий сернокислый аммоний и смесь частиц молотого свекловичного жома, размером от 0,1 мк до 8 мм, в количестве 1,5 — 2,5 объема на

1 объем культуры. После прохождения стадии вымывания, культура проходит стадию удаления избыточного количества влаги, для чего применяют воздушный поток, а также частичное отжатие воды путем прессования, и возвращается на стадию выращивания; цикл повторяется.

При культивировании данного продуцента, цикл повторяли через 4- -10 час, а число циклов равнялось 7.

Пример 3. Выращивание продуцента глюкоамилазы.

Ц Н И И П И Заказ 2389/24

Филиал ПllП ««П а т еeнHтT»», г. Ужго

Питательную среду, состоящую на 70О/р из пшеничных отрубей и на ЗОО/О из свекловичного жома, стерилизуют, улажняют до конечной влажности 60 — 61О/о, засевают посевным материалом в количестве 0,5О/р к исходному весу питательной среды, размещают в растительной установке и инкубируют в оптимальном технологическом режиме. По истечении 24 — 28 час выращивания культура проходит первую стадию вымывания раство10 рителем, в качестве которого используют воду, содержащую смесь частиц пшеничных отрубей размером от 0,1 мк до 3 мм, в количестве 2 объема на 1 объем культуры. После прохождения стадии вымывания, культура проходит стадию удаления избыточного количества влаги, для чего применяют воздушный поток, а также частичное отжатие путем прессования до конечной влажности

63 — 70 /о. Пройдя стадию удаления избыточного количества влаги, культура возвращается на стадию выращивания, и цикл пов20 торяют. Расход растворителя в последующих циклах составляет 2 — 2,5 объема на ! объем культуры.

При культивировании данного продуцента число циклов равнялось 8, и повторялись они через 8 часов.

Таким образом, предложенный способ выращивания микроорганизмов на твердофазной питательной среде в производстве ферментных препаратов позволяет снизить расход посевного материала, многократно ис80 пользовать накопившуюся биомассу, увеличить удельный выход фермента, снизить его себестоимость. ираж 525 Подписное род, ул. Проектная, 4

Формула изобретения ! . Способ выращивания микроорганизиов на твердофазной питательной среде, включающий стерилизацию среды, улажнение ее, засев посевным материалом, выращивание микроорганизмов и вымывание продуцируемых ферментов из микроорганизмов растворителем, отличающийся тем, что, с целью интенсификации процесса и увеличения выхода ферментного препарата, после вымывания ферментов из культуры микроорганизмов удаляют избыток влаги и возвращают ее на стадию выращивания, при этом в качестве растворителя используют смесь воды с твердыми частицами питательной среды размером от 0,1 мк до 5 мм.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что выращивание микроорганизмов, вымывание ферментов из культуры микроорганизмов и удаление избытка влаги осуществляют многократно через каждые 1 — 12 час, число циклов — от 6 до 8.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

l. Яровенко В. Л. и др. Производство ферментных препаратов из гибов и бактерий. М., 1970, с. 206 — 209.