Способ получения холестерина

 

Т„

ОП ИСАНИ,Е

ИЗОБРЕТЕН ИЯ iii 718108

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ! (6! ) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 3 1.07.78 (2! ) 2653080/28-13

I с присоединением заявки РЙ(51)М. Кд.

А 61 К 31/575

Государственный комитет

СССР (23) Приоритет

Опубликовано28.02.80. Бюллетень М 8

Дата опубликования описания 28.02.80 ао делом изобретений и открытий (53) УДК 615. .45;615.34 (088. 3) P. П. Морозова, 3, М. баденко, В. П. Вендт и И. А. Николенко (72) Авторы изобретения институт биохимии им. А, В. Палладина АН Украинской ССР

1 (7!) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХОЛЕСТЕРИНА

Изобретение относится к медицинской промышленности.

Известен способ получения холестерина из измельченного сырья животного происхождения путем сушки, многократнойэкстракции ацетоном, упаривания,обработки эти5 ловым спиртом и концентрирования. Выход холестерина при таком способе полученич составляет 10-13 А . (1).

Однако по данному способу получают

10 целевой продукт с низким содержанием активных веществ.

Целью изобретения является повышение выхода холестерина из сырья животного пр оисхож де ни я, Поставленная пель достигается тем, что измельченное сырье перед высушиванием обрабатывают фосфатным буферным раствором при рН 6,8-7,8 и температуре

36-38 С в присутствии уксуснокислого натрия и активатора, такого как кислород

I или лимонная кислота, или лицетин.

Пример 1. К 100 г очншенно! о от цл и кровеносных сосудов спинного

I мозга быка прибавляют 200 мл калийфосфатного буферного раствора с рН 7,4, и полученную смесь гомогенизируют в течение одной минуты на микроизмельч ител е тканей типа РТ=2 при 5000 об/мин. Затем. к !омогенату прибавляют 0,7 г уксуснокислого натрия и пропускают через смесь газообразный кислород со скоростью

20 средних пузырьков в минуту. При таки; условиях смесь инкубируют 3 ч при

-38оС. После этого гомогенат высушивают с помощью распылительной сушилки типа Нема". Полученный сухой порошок подвергают экстракции ацетоном три раза по 300 мл при 25 С в гечение часа. о

Твердый остаток отделяют и направляют на получение лецитин-церебро, а ацетоновые экстракты соединяют вместе и выпаривают досуха. Сухой остаток представляет собой холестерин-сырец. Его растворяют в 60 мл атилового спирта, прибавляют 5 мл концентрированной сер ной кислоты и кипятят 1 ч с обратным холодильником. При атом происходит кис3 7181 лотный гидролиз побочных продуктов. Затем раствор охлаждают до 0 С и отфильтро..вывают выкристаллизовавшийся холестерин.

Его промывают 60 мл охлажденного спирта, отделяют и растворяют в 100 мл спирта,, прибавляют 0,5 г активированно1 го угля и кипятят с обратным холодильником в течение часа, при этом на угле адсорбируются остаточные количества по-. бочных продуктов. После этого раствор фильтруют, и фильтрат охлаждают до 0 С

Выпавший холестерин отфильтровывают, сушат 3 ч в вакуумном сушильном шкаф при 60 С.

Повышение выхода холестерина по срав-f5 нению с выходом по прототипу составля ет 30%.

Пример 2. К 100 кг очищенного спинного мозга прибавляют 200 мл калий» фосфатного буферного раствора с рН 7,4, 2о

Полученную смесь гомогенизируют 1 мин на микроизмельчителе типа РТ-2. Затем к гомогенату прибавляют 1,0 г уксуснокислого натрия и 150 мл экстракта пе чени в буферном растворе, содержащем 25

2,0 r стеринпереносящего белка(являющегося активатором. Полученную смесь, имеющую рН 7,8, инкубируют 2 ч при 37 С.

Дальнейшее выделение холестерина и его очистка осуществляются так же, как 30 в примере 1.

Пример 3. К 100 r слизистой оболочки ткани кишечника крупного рогатого скота прибавляют 200 мл калийфосфатного буферного раствора, Смесь 35 гемонизируют 1 мин, прибавляют 1,2 г уксуснокислого натрия и 100 мл экстрак та печени в буферном растворе, содержаHAM 1,0 r стеринпереносяшего белка; рН смеси равно 7,2. Полученную смесь @» инкубируют 1 ч при 36,5 С, Дальнейшее выделение холестерина и его- очистку осуществляют так же, как в примере 1, Повышение выхода составляет 60 4. 4

IT р и м е р 4. К 100 r слизистой оболочки ткани кишечника свиньи при08 4 бавляют 200 мл калийфосфатного буферного раствора. Смесь гомогенизируют, прибавляют 0,8 г уксуснокислого натрия и 0,8 г лимонной кислоты. Зачем смесь: ( рН которой равно 7,6, инкубируют 1,5 ч при 36 С. Очистка холестерина осуществляется как в примере 1.

Повышение выхода составляет, 40%.

Пример 5. К 100 r слизистой оболочки ткани кишечника прибавляют

200 мл калийфосфатного буферного раствора. Смесь гомогенизируют, прибавляют

1,5 r уксуснокислого натрия и 1,5 г лецитина, рН смеси при этом равно 6,8, Полученную смесь инкубируют 1,5 ч при

37 С, Дальнейшее выделение холестерина и ег6 очистку осуществляют так же, как в примере 1.

Повышение выхода холестерина составляет 30 4.

Предложенный способ обеспечивает повышение выхода холестерина на 30-604.

Формула изобретения

Способ получения холестерина путем, высушивания измельченного животного сырья, экстракции ацетоном, очистки и концентрирования, о т л и ч а ю m и й,с я тем, что, с целью увеличения выхода целевого продукта, сырье перед высушиванием обрабатывают фосфатным буферным раствором при рН 6,8-7,8 и температуре Ú6-38 С в присутствии уксуснокислог о натрия и активатора, такого как кислород или лимонная кислота, или лепитин;

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Технологический регламент Ленин\ градского завода медицинских препаратов, утвержденный 15.04,52 Министерством мясомолочной промышленности СССР. с

Составитель Т. Павлович

Редактор Н. Хубларова Техред С, Мигай Корректор И Муски

Заказ 9964/1 Тираж 673 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППН «Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, !