Способ биологического контроля качества диагностических питательных сред

 

ОП И

6АНИЕ

Союз Советских

Социалистических

Республик »724574

ИЗОБРЕТЕН Ия

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6I ) Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Заявлено 12.01.,78(2I )2572504/28-13 с присоединением заявки Ю (51) M. Кл.

-" С )2 К 1/00

Государственный комитет

СССР (23) Приоритетпв делам изобретений и открытий

Опубликовано 30.03.80. Бюллетень ¹ 12

Дата опубликования описания 02.04,80. (53) УДК 576.8. .09 3. 1 (088-8) (72) Авторы изобретения

Р. О. Алиева и Н. И. Гриднева

Дагестанский научно-исследовательский .институт по производству питательных сред (7I) Заявитель (54) СПОСОБ БИОЛОГИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ

КАЧЕСТВА ДИАГНОСТИЧЕСКИХ

ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД

Изобретение относится к микробиологии и касается биологического контроля, качества диагностических питательных сред, Известен способ биологического конт5 роля качества диагностических питатель-" ных сред путем посева тест-культуры на испытуемую среду с последующим подсчет= том выросших колоний (1).

Однако известный способ обладает не- „ достаточно высокой чувствительностью, Бель изобретения - повышение чувст/ вительности способа.

Цель достигается тем, что в качестве тесткультуры используют штамм СО» ъреЬс стет i m сбр6114ел. ае 6 1 1 АГgr,ad@ ион штамм t Со .ччеЬасМю iud сх1рЬОФ

i кое 203 АГ n,I.i, Штамм > ïeьасыл.iuн д. iphthewiae

611 АГ qr a< is хранится во 13сесоюзной:зо

,коллекиии патогенньж и непатогенных MHrc«, рооргани.1мов ГИСК им. Л. А, Тарасевича и характери-. ует .я сги дующими. приэнеками.

Культурально-морфологические признаки. Среда Леффлера. Через 20-24 ч роста (окраска по Нейссеру) имеет вид короткой, толстой, длиной 1 6 мкм полярно-зернистой палочки, Спор и капсул не образует. Неподвижен.

5%-ный кровяной агар. Через 20-24 ч роста образует светлс>-серые с радиаль ной исчерченностью и зазубренным краем колонии диаметром 1,5-? мм. Гемолиэа не образует.

Среда Бучина. Через 20-24 ч образует темно-синие, плоские, шероховатые колонии диаметром 1,5-1,8 мм.

Мясо-пептонный бульон. Образует ломкую пленку на поверхности, Сыворотка Леффлера. Через 24 ч рхта образует светло-кремового цвета колонии, слегка шероховатые с зазубренным краем, диаметром 1-1,5 мм.

Среда Клауберг П . Через 24 ч роста образует колонии темно-с.ерого пвета, плоские с радиальной исчерчеш1м; гью, край зазубрен, диаметр ) — !.,, 1 мм.

724574

Теллурит-сывороточная среда, Обра- Расщепляет до кислоты глюкозу, дек зует черные колонии диаметром 1 мм, стрин, маннит и мальтозу, Крахмал не вокруг колоний ореол дымчато-коричне- ферментирует„.Проба на уреазу отрица- вого пвета диаметром 3-4 мм. " — " " тельная. Проба Пизу положительная. АнтиТеллурит-кровяная среда Пюшель. Че- 5 генные свойства. рез 24 ч роста колонии серо,-черного цве Среда .ОГД№ Через 24-36 ч роста та, плоские, диаметром 1,8-2 мм. дает четкие линии преципитации; Дает

Биохимические свойства., агглютинацию с поливалентной дифтерийРасщепляет до кислоты глюкозу, дек- ной сывороткой. Реакция агглютинации "" стрип, манит и мальтозу. Крахмал фер- !0 с 3%-ным раствором NaCf отрицатель» ментирует. Проба на уреазу отрицатель- ная. ная, Проба Пизу положительная. Анти- Пример 1, 18-20-часовые агагенные свойства. !. . ровые культуры" тест-штнммов, например

Среда ОТДМ. Через 24-36 ч роста штамма 203 АГ, смывают физиологичес дает четкие линии преципитации.Дает аг- !5 ким раствором (0,9% растмр хлорида глютинацию с поливалентной. дифтерийной натрия), доводят взвесь до 10 единиц по сывороткой, Реакция" агглк тинапии с 3 4- оптическому стандарту ГИСК им, Л. А,Таным растворам tdaCf отрицатбльйа ." ",: р асевича; "а затем десятикратным разведением (4,5 мл фйзраствора и 0,5 мл

-6

Штамм Cgvvnebneteeiilw сьрЬФЬич - . 2О культуры штамма) разВодят po 1 0

-7

aq. 203 Al missis храйится во Всесоюзной 10, при этом после добавления взвеси коллекции патогенньи- и нейатогеннь!х мик- штамма к физраствору пипетку сбрасыва роорганизмов ГЫСК им. Л. А. ТарЪ"евйча ют, а перемешивайие и перенос взвеси и"характеризуется следующимй свойства- в следующую пробирку производят сте-ми." -. :." "::..: - :::,:-, : .. > ральной пипеткой .

Культурально-морфологические йризна- -- Разными из указанных двух разведе ки, ... ".:..:. . ний пипетками вносят по 0,1 взвеси

Среда Леффлера. Через 20-24 ч - роста к7льтур штамма на 3 чашкй с испытуе(окраска по Нейссеру) имеет вид тонкой,! мой H контрольной средами. Каплю жиддлиной.1-6 мкм полярно-зернистой палач-, кости тщательно втирают до полного подЗО .} ки. Спор и кайсул не образует. Неподви- сушивайия. жен.:,,;-:.,: .-:,:: —: .: . -,::-::: ",. Посевы помещают в термостат при.

5%-ный кровяной агар, Через 20-24ч 37 С. роста образует светлр-серые, гладкие, вы- Через ФО- 48. ч инкубации при 37 С пуклые KolroHm, круглые, диаметром 1- з5 поп"читыв4ют количество колоний каждо1,5 MM C узкой зоной гемолиза. .. " го "тест-штамма, выросших из разведеСреда Бучина, Через 2 0-24 ч роста .: ния 10 ., образует темя синйе, с ровньй краем . В среднем на чашке из разведенйя кругль е колонии диаметром 1-1,5 мм, . 10 должно вырасти не менее 10 колоМясо-пептойный бульон дает равномер- ний.диаметром 1-1,5 мм. Из разведения 40 ную муть;!, .— . : " 10 должны вырасти единичные колонии

Сыворотка Леклера, Через 24 ч рос- на каждой чашке. та образует колонии диаметром 1-1.,2 мм, . Выросшие колонии тестштаммов не светло-кремовые, выпуклые, гладкие с должны давать спонтанной агглютинации ровным краем.. в 3 /-нбм растворе хлористого натрия, 45

Среда Клауберг О, Через 24 ч рос- На чашках со средой, засеянной мик та Ыет ко тбнии теь нб-серого цвета, вы- робной смесью, колонии дифтерии темнопуклые, глапкйе, с ровнйм краем," дйа-" синего цвета, метром 1-1 2 мм. - . При параллельном контроле на 42 ис»

$0

Теллурит - сывороточная среда. Рас- пытуемых сериях сред Бучина штамм Сотбт В виде точечных," диаметром 0,5 мм ФюаЬскЛет !от ЖрМйе ое 203 АГиг6ь черных колоний. Вокруг колонии ореол ко- оказался более чувствительным к качестричневс-черного цвета . ",", "- " "" венному составу среды по сравнению с

Теллурит-кровяная среда Пюшель, Че- контрольными штаммами. рез 24 ч роста дает колонии серо-черно- -. Пример 2. Способ биологичес-

55 го цвета, выпуклые, гладкие, край ров- кого контроли качества диагностических ный, диаметром 1-1,2 мм. питательнйх сред осуществляется так же, -Биохимические свойства. как в примере 1, но с использованием

7245, цтамма Со чаебосЛе мп 61рЮИейаеб.с1

АГ ghanian .

Через 40-48 ч инкубации при 37 С о подсчитывают количество колоний каждого тесчштамма, выросших из разведи= ния 10, В среднем на чашке из разведе/ ния 10 должно вырасти не менее 10 колоний диаметром 1-1,5 мм, Из рйзве- г дения 10 должны вырасти единичные колонии на каждой чашке.

Выросшие колонии тест-штаммов не должны давать спонтанной агглютинации в Зоном растворе хлористого натрия.

На чашках со средой, засеянной микробной смесью, колонии дифтерии темно» синего цвета.

Предложенный способ позволяет улучшить контроль качества среды Бучина, )

74

Формула изобретения

Способ биологического контроля ка: чества диагностических питательных сред путем посева тесткультуры на испытуе. мую среду с последующим подсчетом вьь.-. росших колоний, о т л и ч а ю щ и йс ятем,,что,,. с целью повышения чувсъ1 вительности способа, в качестве тест-культуры используют штамм Covyne&acte- ium diphtherirre. 611 АГфсо4или штамм

Cov глеЬас.й,л" 1мю д1рЮЬМае203 АГ miflg °

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Дагестанский НИИ по произвс1дст- ву питательных сред. Материалы 1-го Всесоюзного рабочего совещания, Махачкала,,1975, Составитель C. Дубовицкая

Редактор С. Тараненко Техред М. Петко Корректор,Г. Назаром

Заказ 796/7 Тираж 522 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета;,СССР по делам изобретений и открытий.

1.13035, Москва, Ж-35, Рауыикая наб., д, 4/5 1илиал 11НП "Патент", r.Óæãoðîrr, ул.Проектная, 4