Способ определения токсичности сыворотки крови
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИ ТЕЛЬСТВУ
Союз Советскик
Социалистическик
Республик (о 740233 (61) Дополнительное к авт. свид-ву
I (22) Заявлено 280478 (21) 2607580/28-13 (51)hA. Кл. с присоединением заявки М
A 61 В 10/00
G 01 H 33/16
Государственный комитет
СССР по делам, изобретений и открытий (23) Приоритет
-(53) УДК 616-074 (088. 8) Опубликовано 1506.8Ц Бюллетень М 22
Дата опубликования описания 1706.80 (72) Авторы изобретения
В.Ф. Учайкин, О.A. Машков и A.Â. Троицкий
Второй Московский ордена Ленина государственный медицинский институт им. Н.И. Пирогова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ СЫВОРОТКИ
КРОВИ
Изобретение относится к области медицины,а именно определению токсичности сыворотки крови,и может быть использовано для обнаружения и количественного определения токсичных веществ, образующих при поражении печени,а также оценки эффективности удаления из организма токсических веществ в условиях клиники. .Известен способ определения токсичности сыворотки крови путем культивирования ее на биологическом тест-материале с последующим измерением степени soaдействия исследуемой сыворотки на тест-культуру (1) .
Однако и з вест ный способ не позволяет определить токсичность сыворотки крови при поражении печени, Белью изобретения является определение токсичности сыворотки крови при поражении печени, Эта цель достигается тем что сыворотку культивируют с лейкоцвтарной пленкой в питательной среде, содержащей плазму крови человека 0 кролика, взятых в соотношении 2,5:1 и по величине зоны миграции зрелых лейкоцитов определяют токсичность сыворотки.
Способ осуществляют следующим
5 образом, Культивируют кусочки лейкоциуарной пленки на питательной среде, состоящей иэ смеси плавуны крови человека и кролика с добавлением гепарина. В опытных культурах к питательной среде добавляют равнОе количество исследуемой сыворотки, в контрольных - раствор Рингера. Культивирование производят по методу висячей капли s камерах Максимова при
37 С в течение 18 ч. Показателем биологической активности исследуе« мого материала служит. величина эоны
20 миграции лейкоцитов вокруг культивируемой пленки ° При помощи рисовального аппарата контуры кусочков и эон миграции переносят на бумагу и планиметрируют, Миграцию опытных куль25 тур вычисляют по отноыению к контрольной, принятой за 100. Если исследуемая сыворотка обладает. угнетающим действием на миграцию, получают величину с отрицательным знаком, если стимулирует - с положительным.
740233
Формула изобретения
1. Патент США Р 3944381, кл. 23-230 В 1976.
Составитель C. Малютина
Редактор Н. Потапова Техред И.Петко Корректор Н. Григорук
Заказ 3071/3 Тираж 673 Подписное
БНИИПИ Государственного комитета СССР по дулам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д. 4/5
Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4
Пример 1.-У собаки с экспе« риментальной печеночной недостаточностью, которую получили введением в общий желчный проток четыреххлористого углерода из расчета 0,1 мп на
1 кг веса с последующей его перевязкой, определяют токсичность сыворотки крови путем добавления ее. в количестве 0,1 мл к гемокультуре, представляющей собой кусочки лейкоцетарной пленки здорового человека, культивируемые по методу висячей капли на гепаринизированной плазме человека и кролика, После подращивания гемокультуры в течение 18 ч в термостате при 37 С образуются зоны миг- . рации лейкоцитов, которые проектируют на бумагу при помощи рисовального аппарата и планиметрируют. Конт-. ролем служат культуры той же пленки, к питательной среде которых прибавля-, ют вместо испытуемой сыворотки раствор Рингера, Рост опытных культур вычисляют р процентах по отношению к контролю, который принимают за 100 и обозначают как плюс или минус от 100 (контроля). На высоте функциональной недостаточности печени в сыворотке крови обнаруживают вещества, резко снижающие миграцию лейкоцитов в гемокультуре. На высоте поражения печени токсические свойства сыворотки равняются в среднем
43., Очистку крови у собаки производят путем пропускания,ее через колонки, заполненные активированным углем марки CKT-ба. В процессе очистки крови токсичность сыворотки резко уменьшилась, а через 60 мин сорбции сыворотка была нетоксична (+ 6), Уменьше-. ние токсичности сыворотки крови коррелировало с динамикой клинической картины. Собаки после гемосорбций были активными, хорошо ели, адекватно реагировали на внешние раздражи тели.
Пример 2. Алеша С, 2,5мес., клинический диагноэт вИрусный гапатит. В, тяжелая форма, гепатодистрофия, печеночная кома, В период глубокой печеночной коьи (9 день болезни), 7-й день желтухи токсичность сыворотки крови, которую определяют аналогично приме
1ру 1 из 0,1 мл сыворотки, равнялась -42, после геомосорбции, которую проводят с помощью активированного угля марки СКГ-6а, токсичность сыворотки полностью исчезла + 13, в то время как уровень билирубина.понизился только в 1,5 раза с 16,64 до
10,6 мг.Ъ, а другие функциональные пробы существенно не изменились, уменьшение токсичности сыворотки сопровождалось просветлением сознания, нормализ ацией сердечно-сосудистой и дыхательной деятельности.
Однако в дальнейшем состояние вновь ухудшилось и на 11 день болезни, 9 день желтушного периода наступил летальный исход, Токсичность сыво/ рот ки крови не посредст вен но перед смертью вновь увеличилось до - 72, Предложенный способ поз вол яет обнаружить и количественно измерить
20 в дыворотке крови токсичные вещества, образующиеся при поражении печени, Способ с большой степенью точности, по сравнению с известным,позволяет оценить результат удаления из крови токсичных веществ, например, методом гомосорбции, Способ оПределения токсичности сыворотки крови путем культивирования ее на биологическом тест-материале с последующим измерением степени воздействия исследуемой сыворотки на тест-культуру, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью определения токсичности сыроротки крови при поражении печени, сыворотку культивируют с лейкоцитарной пленкой в питательной среде, содержащей плазму крови человека и кролика, взятых в соотношении
2,5:1 и по величине зоны миграции зрелых лейкоцитов определяют токсичность сыворотки, Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
