Способ получения культуральной вакцины против контагиозной эктимы овец и коз

 

ОП ИСАНИЕ,751103

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союэ Советскмх

Социалистических

Республик (6! ) Дополнительное к авт. спид-ву (22) Заявлено 12.07.79 (21) 2507109/30 15 с прнсоелинением заявки № (23) Приоритет (51) M. Кл.

С 12 М 7/00

A 61 К 39/02 (оеударствеикый камктет во делам изобретение н атхрытнй

Опубликовано 23.11.82. Бюллетень _#_tt 43 (53) ЩКт.,1

Дата опубликования описания 28.12.82

576 8094 .29 088,8

Ц. U. Хандуев, Э, Д. Иманов, Б, Н. Гусев, Е. В. Макарова, Б. С. Салидинов и Н, Б. Чормонова (72) Авторы изобретения

Ордена Трудового Красного Знамени институт биохимии и физиологии АН Киргизской ССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ BAKllHHbl

ПРОТИВ КОНТАГИОЗНОЙ ЭКТИМЫ OBEll И KQ3

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к получению вакцинных препаратов.

Известен способ размножения и накопления вакцинного штамма против крнтагиозной эктимы овец и кол, осушествляюшийся на первично трипсилизированной культуре почки плода овцы, причем вируссодержашая культуральная жидкость применяется в качестве вакцины 1 1) .

Прививаемость и реактогенность вакцин, приготовленных на культуре клеток почки овцы, слабая и не обеспечивает иммунитета достаточной напряженности.

1Лелью изобретения является повышение иммуногенной активности вакцкны.

Для этого в качестве клеточного субстрата для размножения вируса используют культуру клеток кожи эмбриона овцы.

Сбор вирусного материала проводят поэтапно: вначале через 72-80 ч, а за тем через 30-36 ч последуюшего размножения вируса в исходном клеточном субстрате.

Пример . Юля изготовления культуральной вирус-вакцины из аттенуированного штамма используют первичную однослойную культуру ткани, вырашенную в

1,5 л матрасах. Перед заражением выросшую культуру клеток просматривают под малым увеличением микроскопа и отбирают матрасы с полным монослоем без признаков спонтанной дегенерации. Из матрасов с доброкачественной культурой сливают ростовую питательную среду и вносят в каждый матрас по 5 л вируссодержащего материала. Затем матрасы оставлятот для контакта клеток с вирусом на 2 ч при комнатной температуре.

После контакта в каждый матрас с зара20 женкой культурой вносят 200 мл поддерживаюшей среды и зараженную культуру инкубируют при 36,5 5 С. Через 5 суток после заражения матрасы просматривают под малым увеличением микроскопа и при

3 7511 наличии характерных цитопатических изме„ений у 85-00% клеток, вируссодержашая жидкость сливается в стерильные бутылки и подвергается контролю на отсутствие контаминации посторинней микрофлорой, безвредность, иммуногенность и другие контроли, преъявляемые к вакцинным препаратам.

С целью повышения выхода вакционного вируса и снижения себестоимости препарата предложен метод поэтапного сбора урожая вируса контагиозной эктимы овец

s клеточных культурах. В экспериментах бвло выявлено, что вирус контагиозной

BKT%4M овец находясь H культурально и жидкости при 37, инактивируется через о

48 ч на 90%. При заражении клетки культуры ткани инфицируются неодновременно и вирус накапливается в культуральной жидкости по мере поражения клеток. С щ целью сохранения вируса от инактивации и увеличения выхода продукции с матрасной культуры, при поражении 75-80% клеток, что наблюдается через 72-80 ч инкубации, сливали культуральную жид 25 кость из выраженной культуры (I ypo жай) и вновь заливали такое же количество поддерживающей среды и продолжали инкубировать при таких же условиях.

Через 36 ч с этих культур при 100%- 30 ном поражении клеток сливали второй урожай вакцины. Титр вакцины t и (! урожая при этом был равным и составлял от 6,5 до 7,0 ТПД /мл. Иммуногенность и прививаемость обоих урожаев одинакова.

03 4

Таким образом„поэтапный сбор вакционного штамма вируса в зараженнпй культуре клеток кожи плода овцы повышает общий выход вакцины в два раза при сохранении иммунобиологических свойств вакцинного штамма.

Формула изобретения

1. Способ получения культуральной вакцины против контагиозной эктимы овец и коз, включающий выращивание

I клеточного субстрата, последующее размножение вируса и сбор вирусного материала, отличающийся тем, что, с целью повышения иммуногенной активности вакцины в качестве клеточного субстрата для размножения вируса используют культуру клеток кожи эмбриона овцы.

2. Способ по п. 1, о т. л и ч а ю— шийся тем, что сбор вирусного материала проводят поэтапно: вначале через 72-80 ч, а затем через 30-36 ч последующего размножения вируса в исходном клеточном субстрате.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Бекембаев Т. Б., Алиев Э. А., Омуралиев А. О., Иманов Э. II., Бердибаев Г. ll. Салидинов Б. С. Сравнительная иМчунологическая эффективность пяти вакцинцротив контагиозной эктимы овец . Новое в ветеринарной науке, фрунзе, 1974, с. 88-94.

Составитель О, Петрачева

Редактор Н. Аристова Техред M. Гергель Корректор А. Ференц

Заказ 10529/7 Тираж 505 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4