Способ измерения резистентности эритроцитов

 

tidal 75I396

Со1оз Советских

Социалистических

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗО ВРЕТЕ Н И Я

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заяв»сно 01.12,77 (21) 2568510j28-13 (51) М.Кл.з А 6! В 5/14

С1 01 М 33/48 с присоединением заявки— (23) Приор11тет— (43) Опубликовано 30.07.80. Бю7,7стень 1Ъ 28 (45) Дата опубликован;1я описания 07.09.80

Государственный комитет по делам изобретений н открытий (53) УДК 6 5.45:611-018.51 (088.8) (72) Авторы изобретения

А. Е. Громов и В. И. Розенгарт

Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И. М. Сеченова AH СССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ИЗ1т1ЕРЕНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ

ЭРИТРОЦИТОВ

Изобретение относится к област11 медицины, а именно к исследованию б 1олог 1чески« объектов.

Известен способ измерения резистентности эритроцитOB путем суспендирования в солевом растворе и регистрац11и результатов измерений (1).

Однако .извсстныЙ способ может онiTh .использован лишь при полном разрушении значительной доли эритроцитов, это пон11жает его чувствительность и лишает возможности otUBHHTh с его .помощью To:1к :I изменения структуры эритроцитов.

Целью изобретения является повы1псние чувствительности способа.

Эта цель достигается тем, что эритроциты суспендируют в гипотоническом соленом растворе, пс1двергают воздействию температуры 40 — 60 С, измеряют скорость:13менения рН суспензии по времени сн,ин etHия рН,на 0,1 понижение резистентности

apHTp0uIIT0B от 6,2 до 10,6,11ин свидетельствует о «ронической почечной не70статочности.

Для регистрации рН суспензии эри гроцитов использу10т рН-:метр 262 с элект;7одом для температур до 100 С. Графическую регистрацию, ведут на азтоматическом потенциометре КСП-4. Кюветы тер л10статируют с помощью ультр атер мостата

У-10. Непрерывное перемешива11пе сусченMBTHHTHOII «IC1II3.7IiOÉ.

Запись . a»Bhi«начинают через 5 11ин после помещения кюветы в термостатируемуio камеру — за это время темпеРатура в кювете стабилизируется.

Проводи loch сравнительное изучение свойств эритроцитов кроликов при фечилг и д р а з и и 0 в 0 Й и н то к си 1 . а цп и (+ 03 3 2 0 1 t, h P веса, в:1утримышечно) через 1, 3, 7 и 25 суток после отравления предлагаемым споcoбом и раi1ее известнь|м способом определения резистентности эритроцитоз (ОРЭ .

Ко 711 1PcTBCII н0Й мерой, «ара«териз c!ощеи резистентность эритроцптов предлагаес п о с О б о и, H B.7 5i c T c 5I B p B 7 I 5! (h та«), пеоб«одпмое для сдвига рН На определенную величину, например, на 0,1. ,Пользуясь эт:1м критерием, можно в.!äåòü (фиг 2), что через одни сутки после отравления кролика фенилгидразином прочность эритроцитов снизилась с 13,2 (кривая 1) до

7,4 (кризач 2), т. е. на 44",,. П1ри измерс»ии

:1звестныгм способом в те«же услоь.1ях

25 (фиг. 1) изменение составляло лишь 9О/о, что говорит о з:1ач.1те 71.по большей .увстзитсльности. Из фиг. 2 в11дно, что с удлинением срока после отравления. например, чезсз 3-е суток, (кривая 2) устойчи30 вость эрптроцитов наоборот резко возрас751396

Резистептность эритроцитов (время снижения рН на 0,1 в яин) Число лиц, у которых выявлены две популяции эритроцитов, отличающихся по резистентности

Исс.чедованная Ч..ело группа л!щ пределы величин среднее

1 !

Здоровые люди

Больные х ПН, находящиеся на консервативной терапии

Больные ХПН. лечившисся гемоднализом (искусственная почка) 1 I,2

li2,4 — 16.5

6,2 1 0,6

8,8

6 !

15,6 l 4,0 — 18,8 тает до 22,1 (на 70 j>)» остается повышен;ной во все последующие сроки (7 и 16 су ток) .

На фиг. 3 приведены, кривые изменения рН суспензии эритроцитов пнтактного кролика (кривая 1) и того же кролика на 7-е сутки после кровопускания (30% от объема циркулирующей крови) — кривая 2. Из фиг.

3 ясно видны отчетли|вые различия между кривыми 1 и 2. В частности, на кривой 2 появляется второй перегиб, что является следствием накопления в крови молодых эритроцитов,на 7-е сутки после .кровопускания. Графическое дифференцирование кривых 1 и 2 (фиг. 3; нахождение, произApH ) водной ) позволяет построить график распределения популяций эритроцитов IIo

Из таблицы видно, что эритроциты здоровых людей по свойствам отличаются оТ эритроцитов больных ХПН, причем характер этих отличий существенно зависит от вида терапии. У больных лечившихся обычными способами, консервативно, эритроциты оказались менее устойчивыми, чем у здоровых людей, а у больных, находившихся на длительном гемодиализе, эритроциты были более резистентными. У большинства больных ХПН обнаружены две популяции эритроцитов, отличающихся по резистентности.

Предлагаемый способ обеспечивает значительное повышение чувствительности по сравнению с известным. Более высокая чувствительность предлагаемого способа к из менениям структуры эритроцитов позволяет получить новую информацию, .в частности обнаружить появление в крови молодых форм эритроцитов, т. е. различить популяции эритроцитов.

Оценка свойств эритроцитов предлагасмььм способом позволяет получить принципрочности (фиг. 4) и такнм образом количественно определить соотношение .популяций по величине площади, ограниченной кривыми и осью абсцисс.

На фиг. 4 представлены результаты анализа эритроц)итов:кролика до кровопускания (,кривая I) и через 7 дней после крово,пускан ия (кривая 2). Видно, что после,кро вопускания вазникает новая популяция бо10 лее прочных молодых эр итроц итов,,размеры которой (по величине, площади) составляют

420 единиц, тогда как размеры популяции старых эритроцитов составляют 546 единиц.

В та блице представлены количественные результаты исследования эритроцитов здоровых людей и больных хронической почечной недостаточностью (Х|ПН) . пиальпо новую информацию, необходимую для изучения патагенеза и диагностики некоторых заболеваний.

20 Ф ор мула изобретения

Способ измерения,резистентности эритроцитов путем суспендирования в солевом растворе, регистрации .результатов измерений, о тл,ич ающий с я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, эритроциты су"спендируют!В гипотоническом солевом растворе, подвергают .воздействию температуры 40 — 60 С измеряют скорость изменения рН суспензии по времени снижения,рН на 0,1, понижение резистентности эритроцитов от 6,2 до 1 0,6 мин свидетельствует о хронической почечной недостаточности.

Источник информации, принятый во внимание при экспертизе:

1. Патент США № 3606539, кл. 356/39, опублик. li976.

751396 а,о ! ! с,п п,г цЧ OÓ аS и7 Ог а, а,з

iC моиг. 2 гОцг. i арф < 1а-! арИ ! с,о

3

I !

s-!

)! $i г го кцн

f eulr гауг, Ф

Составитель С. Малютина

Техред В. Серикова

Корректо! С, Файн

Редактор Н. Спиридонова

Заказ 840/1011 Изд. № 365 Тираж 673 Подписное

НПО «Поиск» Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Тип. Харьк. фил. пред. <Патент»