Способ изготовления инактивированной вакцины против бешенства животных

 

СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ИНЛКТИВИРОВЛННОЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ БЕИЕНСТВА ЖИВОТНЫХ, включающий измельчение мозговой ткани овец, зараженных фиксированным вирусом бешенства, штамм овечьий ГИКИ, инактивировакие вирусной суспензии, ее соединение со средой высушивания, с последующей расфасовкой полуфабриката и его лиофилизацией, отлича-ю щ и и с я тем, что, с целью повышения иммуногенности вакцины и ее .безвредности, инактивирование вирусной суспензии проводят 20-21% ным раствором этанола при 30-3lc в течение 12-14 сут. с S (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

OlllkMO

РЕСПУБЛИК

„„SU„„770196

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ . ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 2768494/30-15 (22) 23.05.79 (46) 07.04.83. Бюл. Р 13 (72) Д.Ф. Осидзе, Э.В. Ивановский, В.Я. Полковникова, 0.В.,ФоМин, С.В. Лохова, P.Ê. Сафаров, И.В. Звягин, И.A. Хорьков, Н.Д. Скичко, B.Â. Желтов, Г.Н. Тищенко и Н.B. Фоменко (71) Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов (53 ) 619:615.371/.372.002.2:616.988. .21(088.8) (56) 1. Вагабов Р.М. Разработка и .экспериментальное изучение сухой антирабической вакцины, инактивированной гидроксиламином. Канд. дис.

М., 1969, с. 44-60.

2. Лихачев Н.B. "Вакцины против бешенства". Кн. Биологические и химиотерапевтические ветеринарные препараты, М., 1963, с. 28-38.

З(51) С 12 М 7/00; А 61 К 39/205 (54 ) (57 ) СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ

HHAKTHBHPOBAHHOA BAKIJHHb) ПРОТИВ

БЕИЕНСТВй ЖИВОТНЫХ, включающий измельчение мозговой ткани овец, зараженных фиксированным вирусом бешенства, штамм "овечьий" ГНКИ, инактивирование вирусной суспензии, ее соединение со средой высушивания, с последующей расфасовкой полуфабриката и его лиофилизацией, о т л и ч а-ю шийся тем, что, с целью повышения иммуногенности вакцины и ее безвредности, инактивирование вирусной суспензии проводят 20-21Ъ-ным раствором этанола при 30-31 С в тео чение 12-14 сут.

770196

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, в частности к способам изготовления инактиви-, рованных вакцин против бешенства животных, используемых в целях лечебно-профилактической вакцинации против 5 данного заболевания.

Известен способ изготовления инактивированной вакцины против бешенства животных с иепользованием инактиватора гидроксиламина (1 . 10

Данный способ уже не используется в практике изготовления данной вакцины, ввиду того, что готовая вакцина содержит токсичный для животных инактыватор или его химическое сое- 15 динение.

Известен также способ изготовления инактивированной вакцины против бешенства животных, включающий измельчение мозговой ткани овец, зараженных фиксированным вирусом бешенства, штамм "овечьий" ГНКИ, инактивирование вирусной суспенэии, ее соединение со средой высушивания с последующей расфасовкой полуфабриката и его лиофилизацией f2 ).

Недостатком данного способа является то, что получаемая вакцина является менее иммуногенной, имеет остаточный вирус до 10 ЛД /0,03мл

2,5 и вызывает поствакцинальные осложнения у крупного рогатого скота и декоративных пород собак. Фенол как инактиватор является токсичным веществом. Допускается выпуск нестерильного препарата. 35

Целью изобретения является повышение иммуногенности вакцины и ее безвредности.

Это достигается тем, что инакти- 40 вирование вирусной суспензии проводят 20-21%-ным раствором этанола при 30-31. С в течение 12-14 сут., Пример. Для изготовления серии инактивированной сухой антнрабической этанол-вакцины заражают овец в мозг вирусом фикс бешенства в дозе g,5 мл рабочим разведением

1:500 согласно инструкции.

Предварительно готовит 20%-ный раствор этанола из расчета: 1 ч.

9%" спирта на 4 ч. стерильного физиологического раствора. В одиолитровую стеклянную банку вносят 300350 мп 20%-ного раствора этанола и взвешивают ее. 55

Овец, у которых проявились типичные клинические признаки лабораторного бешенства в период с 4 по 5 день с момента заражения, обескровливают, после чего отделяют голову 60 и извлекают мозг, который помещают в подготовленную банку с.20%-ным раствором этанола на физиологичес-.; ком растворе, рН 7,2-7,4. Предварительно делают высевы на бактериологические питательные среды (пробирки) и наблюдают за ними при выдерживании в термостате (37ОС ) в истечение 10 сут.

Мозговую ткань извлекают иэ банок и помещают в коллоидную мельницу и измельчают при 3000, об/мин в течени 5 мин при зазоре 0,05 см, 20%-ный раствор этанола добавляют иэ расчета на 30 r мозговой ткани

70 мл 20%-ного раствора зтанола, т.е. получают суспенэию 30% ткани мозга. Бутыль,с полуфабрикатом .ставят в термостат при ЗООC на 12 сут, перемешивая суспенэию 3-4 раза в сут.

По истечении срока инактивации к суспензии добавляют среду высушивания из расчета на 2 ч,суспенэии 1 ч,среды высушивания (состав:

100 мл бидистнллированной воды, 22,5 r сахарозы и 3 r желатины).

Конечная концентрация мозговой ткани в жидком полуфабрикате вакцины составляет 20%. Вакцину расфасовывают в пенициллиновые флаконы по

12 мл и подвергают сублимационному вусушиванию обычным способом. Готовую вакцину контролируют на стериль- ность, безвредность, отсутствие остаточного вируса, иммуногенность, растворимость обычными способами.

Вакцина, полученная предлагаемым способом состоит из следующих компонентов, )Ь: вмруссодержащая ткань мозга овец с титром вируса не ниже

10 5 ЛД /0,03 мл в 15-17%-ном растворе атанола 20-25, стабилизатор

75-80.

Полученные данные по проверке полученных производственных серий вакцины против бешенства предлагаемым способом дают возможность судить о том, что эти изготовленные серии, инактивированные этанолом были стерильны, авирулентными, безвредными для разных видов лабораторных и сельскохозяйственных животных, а также обладали выраженными иммуногенныии свойствами, сообщающие, привитым животным напряженныйиммунитет к 14-ому дню, который сохраняется до 98-ого дня (срок наблюдения).

Вакцина пригодна для массовой иммунизации животных всех видов как с профилактической, так ь с лечебной целями.

Вакцину применяют методом подкожного и внутримышечного введения и с кормом для диких животных. Дозы для внутримьиаечного.введения, мл: собакам 2-3, круйному рогатому скоту 5-6, лошадям 9-10, кошкам 1-1,5, овцам

3-3,5„ свиньям 9-10, пушным животным

1 5"2,,ослам 4,5-5..

Экономический эффект при вакци.нации животных складывается из пред

770196

Составитель В. Радьков

Редактор Л. Письман Техред M, Коштура Корректор,B. Гирняк

Заказ 6595/3 Тираж 521 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитега СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, -35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г . Ужгород, ул. Проектная- 4 отвращения распространения болезни, оздоровления неблагополучных пунктов, создания иммунного поголовья среди животных и снижения случаев возможного контакта человека с животными - носителями возбудителями уличного бешенства.